專利名稱：可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚類用飼料添加劑，尤其是一種可避免激素等化學(xué)類藥所產(chǎn)生的副作用、保證苗種質(zhì)量、防止環(huán)境污染、可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑。
背景技術(shù)：
黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco Richardson)肉質(zhì)細(xì)嫩，無肌間刺，市場需求日益增加，養(yǎng)殖規(guī)模也逐漸擴(kuò)大。但是，由于黃顙魚繁殖效率低且不穩(wěn)定，故苗種數(shù)量嚴(yán)重不足。目前，為了緩解苗種數(shù)量不足的問題，有的采用在飼料中添加化學(xué)激素等藥物的方式，以促進(jìn)黃顙魚的成熟和繁殖。但是，長期使用不但會降低苗種質(zhì)量，而且還存在污染環(huán)境的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的降低苗種質(zhì)量，污染環(huán)境等技術(shù)問題，提供一種可避免化學(xué)激素類藥所產(chǎn)生的副作用、保證苗種質(zhì)量、防止環(huán)境污染、可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑，其特征在于各組分重量百分比如下枸杞15～25％女貞子 15～25％益母草 15～25％厚樸5～15％茯苓10～20％香附2～8％。
各組分重量百分比最好如下枸杞20％女貞子 20％益母草 20％厚樸12％
茯苓20％香附8％。
本發(fā)明是用中草藥配伍，添加到飼料中喂食黃顙魚，可明顯提高黃顙魚腸道脂肪酶和蛋白酶活性，促進(jìn)了對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，使肌肉中粗脂肪和血液中血脂含量升高，提高了脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)能力(增加了卵巢中∑n-3脂肪酸含量)，增強(qiáng)了性激素與靶器官的結(jié)合(血液性激素含量降低)，卵徑增大、性腺指數(shù)升高；提高黃顙魚的繁殖能力，使親魚的受精卵及出苗率大幅提升。克服了現(xiàn)有技術(shù)的激素等化學(xué)品所帶來的降低苗種質(zhì)量以及污染環(huán)境的問題，具有原料來源廣泛、價格低廉、使用方便的優(yōu)點，具有較高的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。


圖1是對比組雌魚性腺切片放大圖。
圖2是本發(fā)明實施例1、2雌魚性腺切片放大圖。
圖3是對比組雄魚性腺切片放大圖。
圖4是本發(fā)明實施例1、2雄魚性腺切片放大圖。
具體實施例方式實施例1取總重量15～25％的枸杞、總重量15～25％的女貞子、總重量15～25％的益母草、總重量5～15％的厚樸、總重量10～20％的茯苓、總重量2～8％的香附2～8％。中草藥總重量可根據(jù)飼料的多少而定，每味藥可在上述范圍內(nèi)選取?？砂闯Ｒ?guī)方法煎成藥液，即加水浸泡1小時，按每100克原料加水1升后，大火煮30分鐘、再小火煮30分鐘，倒出藥液；再向藥中加水，大火煮30分鐘、再小火煮30分鐘，倒出藥液；將兩次藥液混合。將混合后的藥液按飼料重量2％的用量，均勻噴灑在現(xiàn)有飼料(以魚粉、豆餅為蛋白源，加入等量的各種添加劑，配成粗蛋白含量為42.0％的飼料)的表面，自然風(fēng)干后即制成混有中草藥的飼料。其喂養(yǎng)方法同現(xiàn)有飼料喂養(yǎng)方法，蛋白質(zhì)、脂類和糖類等營養(yǎng)必需充足。
實施例2取22克枸杞、20克女貞子、20克益母草、12克厚樸、20克茯苓、8克香附?？砂闯Ｒ?guī)方法煎成藥液。即加水浸泡1小時，按每100克原料加水1升后，大火煮30分鐘、再小火煮30分鐘，倒出藥液；再向藥中加水，大火煮30分鐘、再小火煮30分鐘，倒出藥液；將兩次藥液混合。將混合后的藥液按飼料重量2％的用量，均勻噴灑在現(xiàn)有飼料(以魚粉、豆餅為蛋白源，加入等量的各種添加劑，配成粗蛋白含量為37.5％的飼料)的表面，自然風(fēng)干后即制成混有中草藥的飼料。其喂養(yǎng)方法同現(xiàn)有飼料喂養(yǎng)方法，蛋白質(zhì)、脂類和糖類等營養(yǎng)必需充足。
實驗條件、測試方法及結(jié)果如下一.性腺發(fā)育階段1.實驗條件1.1實驗魚 實驗魚來自遼寧省遼陽市忠信養(yǎng)殖公司，挑選規(guī)格整齊、體質(zhì)健壯的2冬齡魚540尾，雄魚平均體重為78.0g、雌魚平均體重為58.0g，用高錳酸鉀溶液消毒后，隨機(jī)分成2組，放入6個120cm×120cm×150cm的網(wǎng)箱中，投喂2種飼料，每組3個重復(fù)。網(wǎng)箱放在室外2個6.0m×2.0m×1.2m的微流水池中。
1.2實驗用飼料 現(xiàn)有飼料(F0組)，本實施例1或2(F4組)1.3飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)管理同現(xiàn)有技術(shù)，即水溫變化在19.0～25.0之間，日投飼率(F0及F4)，每天在日出前和日落后分別投喂日投飼量的30％和70％，保持微流水，每3天換水一次，溶解氧保持在5.0mg/L以上。
2.測試方法2.1血清生化分析 性激素用日本產(chǎn)的OlympusACS180化學(xué)發(fā)光免疫儀測定；雌二醇和睪酮試劑盒分別來自沈陽鑫華醫(yī)療設(shè)備有限公司和美國Bayer公司；血脂用日本產(chǎn)OlympusAU 400血脂分析儀測定。
2.2魚體生化組成析 實驗開始和結(jié)束時從各網(wǎng)箱中隨機(jī)取雌雄魚各5尾。將樣品在75℃下烘至恒重，測定水分含量；用凱式定氮法(總氮×6.25)、索氏抽提法(以乙醚為抽提液)和馬福爐中灼燒(550℃)5h分別測定粗蛋白、粗脂肪和灰分含量；用改進(jìn)的Folich法和液相色譜提取和測定魚體肌肉中的脂質(zhì)和脂肪酸(中國國標(biāo)GB/TS.124-2003，HPLC，日本產(chǎn)Thermo Quest GC/MS型)。
2.3消化酶活性測定 蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性分別采用福林—酚試劑法、碘顯色法和馮俊榮等(2004)[1]的方法測定。
2.4性腺的組織學(xué)觀察 結(jié)束時從各網(wǎng)箱中隨機(jī)取雌、雄魚各5尾，摘取性腺置Bouin氏液中固定24h后，移入70％乙醇中保存。各級乙醇沖洗、脫水，經(jīng)二甲苯透明，石蠟包埋，制成厚5-8μm切片，H.E.染色，中性膠封片后置顯微鏡下觀察、拍照。
2.5數(shù)據(jù)處理 所有實驗數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件進(jìn)行相關(guān)性檢驗、方差分析和LSD多重比較。以p＜0.01為差異極其顯著，p＜0.05為差異顯著。
3.結(jié)果3.1本發(fā)明實施例1、2增強(qiáng)了黃顙魚腸道脂肪、蛋白酶活性。
方差分析表明，雄黃顙魚腸道脂肪酶、腸蛋白酶、粉酶活性差異不顯著。F4組雌魚腸道脂肪酶活性高，與F0組差異性極顯著(p＜0.01)；F4雌魚腸蛋白酶活性與F0組差異顯著(p＜0.05)；F4、F0組雌魚淀粉酶活性差異不顯著。具體數(shù)據(jù)見表1。
表1

3.2本實施例1、2提高了黃顙魚(雌魚)肌肉中粗脂肪及血液中血脂含量，降低了血液中激素含量分別見表2、表3。
表2

表3

3.3本實施例1、2提高了黃顙魚脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)能力(增加了卵巢中∑n-3脂肪酸含量)，雄魚、雌魚分別見表4、表5。
表4

表5

3.4本發(fā)明實施例1、2提高黃顙魚性腺指數(shù)和性細(xì)胞發(fā)育能力90天的飼養(yǎng)表明，攝食含本發(fā)明實施例1、2飼料的F4組雌魚的性腺指數(shù)(2.085％)極顯著地(P＜0.01)高于F0(1.206％)組魚72.89％。
如圖1、2、3、4所示組織學(xué)觀察表明，雌魚卵徑分別極顯著(P＜0.01)和顯著(P＜0.05)高于F0組；F4組魚卵巢卵母細(xì)胞的核徑與F0組差異極顯著(P＜0.01)，F(xiàn)4組魚卵巢每個視野的平均卵粒數(shù)與F0組差異極顯著(P＜0.01)。
F0組和F4組在顯微鏡下每個視野中的壺腹數(shù)和卵粒數(shù)如表6。
表6

注**表示差異極顯著(P＜0.01)，*表示差異顯著(P＜0.05)(附表1)。
二.親魚培育階段1.實驗條件1.1實驗池 實驗在遼寧省燈塔市忠信淡水漁業(yè)有限公司進(jìn)行，實驗池4個，2個為雌親魚池，2個為雄親魚池，每個親魚池為長方形。
1.2實驗魚 挑選規(guī)格整齊、體質(zhì)健壯的3冬齡魚，雄魚平均體重為160g、雌魚120g，用高錳酸鉀溶液消毒后，按性別隨機(jī)放養(yǎng)到2個雌親魚池(34#-35#)和2個雄親魚池(36#、37#)中，每個池塘放5000尾。
1.3實驗飼料 以現(xiàn)有飼料作為對照組(34#、37#)、35#和36#親魚池投喂本發(fā)明實施例1或2。具體親魚入池和實驗分組見表7。
表7

1.4飼養(yǎng)管理 同現(xiàn)有技術(shù)。
1.5催產(chǎn)方式 選取發(fā)育較好的親魚進(jìn)行兩次背鰭肌肉注射催產(chǎn)，催產(chǎn)方法同現(xiàn)有技術(shù)。
1.6指標(biāo)測定 性腺指數(shù)(％)＝性腺重(g)/魚體重(g)×100。每次產(chǎn)卵24h后采集10片產(chǎn)卵片，計數(shù)受精率。
2.測試方法2.1實驗開始、中期和結(jié)束時從各池塘中隨機(jī)取魚4-8尾，斷尾采血，取肌肉。每組取肌肉50g以上，將樣品在75℃下烘至恒重，用凱氏定氮法(總氮×6.25)、索氏抽提法(以乙醚為抽提液)和馬福爐中灼燒(550℃)5h測定粗蛋白、粗脂肪和灰分含量；用改進(jìn)的Folich法和液相色譜提取和測定魚體肌肉中的脂質(zhì)和脂肪酸(中國國標(biāo)GB/TS.124-2003，HPLC，日本產(chǎn)Thermo QuestGC/MS型)。雌二醇和睪酮試劑盒分別購自沈陽鑫華醫(yī)療設(shè)備有限公司和美國Bayer公司，用日本產(chǎn)OlympusACS180化學(xué)發(fā)光免疫儀測定。
2.2數(shù)據(jù)處理 實驗數(shù)據(jù)用平均數(shù)±SE表示，經(jīng)SPSS11.0軟件進(jìn)行相關(guān)性檢驗、方差分析和LSD多重比較。以p＜0.05為差異顯著，p＜0.01為差異極其顯著。
3.結(jié)果3.1本實施例1、2提高了黃顙魚親魚肌肉中粗脂肪含量，具體數(shù)據(jù)見表8。
表8

3.2本發(fā)明實施例1、2提高了黃顙魚親魚(雌魚)脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)能力(增加了卵巢中∑n-3脂肪酸含量)，中期、后期具體數(shù)據(jù)分別見表9、表10。
表9


表10

3.3本發(fā)明實施例1、2降低了黃顙魚親魚血液中激素含量，具體數(shù)據(jù)見表11。
表11

3.4本發(fā)明實施例1、2提高黃顙魚親魚性腺指數(shù)、受精率和出苗量。
2個多月的親魚培育期間，各組雌魚的性腺指數(shù)隨水溫的升高而增加。中期35#池塘雌魚的性腺指數(shù)(14.94％)顯著高于34#池塘雌魚(P＜0.05)，末期35#池塘雌魚的性腺指數(shù)仍最高(26.17％)，顯著高于34#(17.97％)；中期、末期各組雄魚的性腺指數(shù)差異不顯著。
繁殖結(jié)果表明，35#池塘雌魚的卵受精率最高(87.50％)，極顯著地高于34#(63.56％)池塘雌魚P＜0.01)。
35#池塘(4965尾水花/組親魚、)雌魚的平均出苗率(3824尾水花/組親魚)比34#(2413尾水花/組親魚)高58.47％；出苗總量35#(1837萬尾)池塘比34#(1110萬尾)(980萬尾)高出65.50％。
參考文獻(xiàn)[1]馮俊榮，劉紅梅，韓茂森等。寶石斑魚體內(nèi)蛋白酶和脂肪酶活性的研究[J].淡水漁業(yè)，2004，34(5)17-19。
權(quán)利要求
1.一種可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑，其特征在于各組分重量百分比如下枸杞 15～25％女貞子 15～25％益母草 15～25％厚樸 5～15％茯苓 10～20％香附 2～8％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑，其特征在于各組分重量百分比如下枸杞 20％女貞子 20％益母草 20％厚樸 12％茯苓 20％香附 8％。
全文摘要
本發(fā)明公開一種可增強(qiáng)黃顙魚繁殖能力的中草藥飼料添加劑，其特征在于各組分重量百分比如下枸杞15～25％、女貞子15～25％、益母草15～25％、厚樸5～15％、茯苓10～20％、香附2～8％。中草藥配伍可明顯提高黃顙魚腸道脂肪酶和蛋白酶活性，促進(jìn)了對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，使肌肉中粗脂肪和血液中血脂含量升高，提高了脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)能力(降低血液中n－3脂肪酸含量)，增強(qiáng)了性激素與靶器官的結(jié)合(血液性激素含量降低)，卵徑增大、性腺指數(shù)升高；提高黃顙魚的繁殖能力，使親魚的受精卵及出苗率大幅提升?？朔爽F(xiàn)有技術(shù)的激素等化學(xué)品所帶來的降低苗種質(zhì)量以及污染環(huán)境的問題，具有原料來源廣泛、價格低廉、使用方便的優(yōu)點，具有較高的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號A23K1/16GK101057631SQ20071001152
公開日2007年10月24日 申請日期2007年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月4日
發(fā)明者王吉橋, 柳圭澤 申請人:王吉橋, 柳圭澤