專利名稱：：一種專用于木麻黃的微生物肥料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種微生物肥料，具體來說是涉及一種專用于木麻黃的微生物肥料。技術(shù)背景我國南方沿海各省、區(qū)海岸線長7230km，約占全國海岸線總長的2/5，其沿海防護(hù)林素有"綠色長城"之稱，為我國重要生態(tài)林業(yè)工程之一，是抵御臺風(fēng)等自然災(zāi)害的第一屏障，其中木麻黃(Ck^ar眾a)是防護(hù)林的主要構(gòu)成樹種，自20世紀(jì)50年代末以來這些地區(qū)營造的300，000公頃木麻黃防護(hù)林，從根本上改善了沿海地區(qū)的生態(tài)環(huán)境，在防風(fēng)固沙，防海潮和抵御臺風(fēng)、風(fēng)暴潮等嚴(yán)重自然災(zāi)害方面具有獨(dú)特的功能，發(fā)揮了巨大的生態(tài)、社會和經(jīng)濟(jì)效益。即使在海岸風(fēng)口生境條件十分困難的地段，木麻黃依然以其優(yōu)良的適應(yīng)性和抗逆能力，使這片林帶具有良好的防護(hù)功能。但是目前，木麻黃基干林帶己進(jìn)入自然衰老階段,生長速度減慢，林木出現(xiàn)枯梢、斷干、枯干和風(fēng)倒，甚至全株枯死，老林帶自然死亡率平均達(dá)14%，局部達(dá)30%40%,風(fēng)口地帶林木死亡尤其嚴(yán)重。隨著林帶立木的逐漸衰老或死亡，林帶缺株嚴(yán)重,立木結(jié)構(gòu)和林冠結(jié)構(gòu)也逐漸變得稀疏，以至于出現(xiàn)林中空地，林帶殘缺不全，防護(hù)功能衰退，防護(hù)效益不斷降低。為保持林帶防護(hù)功能和防護(hù)效益的永續(xù)性，必須分期對已呈衰老的林帶進(jìn)行更新改造，現(xiàn)大多數(shù)地方己進(jìn)入第二、三代甚至第四代的更新造林。但木麻黃防護(hù)林的更新非常困難，造林成活率低，生長衰退和生產(chǎn)力下降，更新成活率僅40%，嚴(yán)重制約著木麻黃防護(hù)林生態(tài)效能的持續(xù)發(fā)揮。造成木麻黃防護(hù)林更新困難的主要原因之一是林地土壤養(yǎng)分水平和土壤肥力下降，沿海沙地日趨貧瘠，地力衰退。為了解決上述問題，國內(nèi)外在木麻黃栽培、土壤養(yǎng)分、經(jīng)營措施和雜交育種等方面進(jìn)行了很多研究，試圖通過施用化學(xué)肥料等方法增加林地土壤養(yǎng)分，提高木麻黃生長量，但由于沿海沙地土壤保肥能力差，化學(xué)肥料的淋溶損失大，肥料的利用率較低(大約30%)，所以沿海木麻黃防護(hù)林更新困難的問題仍然未能得到有效解決。木麻黃是一種有結(jié)瘤共生固氮作用的樹種，其根系與土壤中的放線菌-弗蘭克氏菌(^^)共生能形成根瘤，固定大氣中的分子態(tài)氮，補(bǔ)償了土壤中消耗的氮源。據(jù)測定木麻黃共生固氮體系每年每公頃林地可固氮33.34122.83Kg，按尿素含氮量46%計算，折成尿素為72.48267.02Kg，不僅滿足植物對氮的需求，而且能使土壤維持一定的氮素水平。但是由于土壤中存在的弗蘭克氏菌大多固氮效能差，共生能力弱，而自然條件下的木麻黃結(jié)瘤率低而且大多是無效根瘤，從而嚴(yán)重影響木麻黃的共生固氮自肥能力。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于開發(fā)出一種能有效地促進(jìn)木麻黃生長的微生物肥料。我們通過將解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液，弗蘭克氏菌發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑混合，得到的微生物肥料直接噴灑在木麻黃苗木上，能使木麻黃的各項(xiàng)生理指標(biāo)均有所提高，促進(jìn)木麻黃生長，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。本發(fā)明的一種專用于木麻黃的微生物肥料，其特征是包括由體積比11.5:1.52.0:0.10.5的解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液，弗蘭克氏菌發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑混合得到的液體菌肥，所述的穩(wěn)效助劑按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為類黃酮0.010.05%，香豆素0.0010.01%，鉬酸鈉0.0010.01%，硫酸鈷0.0010.01%和余量為水。所述的專用于木麻黃的微生物肥料還可以包括沸石粉或有機(jī)肥，沸石粉與液體菌肥的體積比可以是l:O.5,有機(jī)肥與液體菌肥的體積比可以是1:1。所述的解磷巨大芽胞桿菌(5acL^"s歷e卵terj'"/ndeBary)可以從中國微生物菌種保藏管理委員會農(nóng)業(yè)微生物中心獲得(該中心地址是中國北京中關(guān)村南大街12號，保藏編號為ACCC11107)，可以通過現(xiàn)有的方法得到解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液，可以將解磷芽胞桿菌在常用的菌種培養(yǎng)基上2830X培養(yǎng)2472小時，然后在常用的種子培養(yǎng)基上30°C培養(yǎng)48小時后，再在發(fā)酵罐283(TC培養(yǎng)2436小時得到解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液。所述的弗蘭克氏菌(/^朋Wa.印)可以采用已知的菌株，可以通過現(xiàn)有的方法得到弗蘭克氏菌發(fā)酵液，可以將已知的弗蘭克氏菌菌株在常用的菌種培養(yǎng)基上培養(yǎng)15天，然后在常用的種子培養(yǎng)基上2830°C培養(yǎng)15天后，再在發(fā)酵罐283(TC培養(yǎng)7296小時得到弗蘭克氏菌發(fā)酵液，最好釆用弗蘭克氏菌(^ra/7h'a.sp)fgc6菌株，該菌株分離自廣東省陽西縣溪頭鎮(zhèn)沿海沙灘普通木麻黃樹木根系根瘤，已于2007年12月12日保存在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(地址中國，武漢，武漢大學(xué))，其簡稱為CCTCC,保藏編號為CCTCCM207197，該菌株在液體培養(yǎng)時在試管底部呈園形顆粒狀生長或菌落沿著試管壁生長，菌落邊緣不整齊，直徑0.050.3厘米，菌落顏色白色，培養(yǎng)液不混濁，慢生型，經(jīng)光學(xué)顯微鏡觀察，確認(rèn)是屬多態(tài)型孢囊放線菌，其形態(tài)特征是菌絲長、彎曲、分枝有隔、粗細(xì)不勻，直徑為0.52.lum，菌絲任何部位均能膨大形成特征性孢囊，孢囊形狀各異，多呈以圓形、橢圓形、草莓形、棒狀形和穗形等，或呈不規(guī)則形狀，大小不一，通常約435umX344ym，最大可達(dá)5060ym，表面不光滑，有的可見到粗大孢囊柄，柄上有橫隔，成熟孢子囊壁膜破裂后釋放出孢子，孢子圓形或不規(guī)則，直徑約2ym，固氮泡囊體(Visicles)呈球形、卵圓形，表面光滑，多著生在菌絲體一側(cè)的細(xì)小分枝上，其直徑約23.7um。通過將弗蘭克氏菌fgc6菌株在常用的菌種培養(yǎng)基(如Bap培養(yǎng)基)上培養(yǎng)1015天，然后在常用的種子培養(yǎng)基(如Bap培養(yǎng)基)上2830°C培養(yǎng)1015天后，再在弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵283(TC培養(yǎng)7296小時得到弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液，所述的弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基可以采用常用的弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基，如Bap培養(yǎng)基，最好采用本發(fā)明優(yōu)選的弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為葡萄糖0.03%0.08%，吐溫800.003%0.008%,丙酮酸鈉0.03%0.08%，N^S040.05%0.1%，KH2P040.095%，K2HP040.0435%，MgS047H200.0096%，CaCl0.001%，F(xiàn)eS040.00056%,NaEDTA0.00075%，微量元素水溶液0.1%,維生素水溶液0.1%和余量為水，其中的微量元素水溶液組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為H3B030.286%，MnCl20.181%，ZnS040.022%，CuS040.008%，NaMo040.0025%,CoCl0.0025%和余量為水，維生素水溶液組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為維生素VBt0.001%，煙酸0.005%，生物素0.0015%，葉酸0.001%，泛酸鈣0.001%，核黃素0.001%和余量為水。用水溶解葡萄糖，吐溫，丙酮酸鈉，N跳，KH2P04，K2HP04，MgS047H20，CaCl，F(xiàn)eS04和NaEDTA后在加入微量元素水溶液與維生素水溶液,混合后調(diào)節(jié)p服.06.5，裝入發(fā)酵罐滅菌得到上述的優(yōu)選的弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明的專用于木麻黃的微生物肥料的制備方法，是將解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液單獨(dú)培養(yǎng)2天，弗蘭克氏菌發(fā)酵液單獨(dú)培養(yǎng)一周，然后按解磷巨大芽胞桿菌發(fā)酵液，弗蘭克氏菌發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑的體積比為11.5:1.52.0:0.10.5混合得到。本發(fā)明所選用的磷細(xì)菌巨大芽孢桿菌抗逆性強(qiáng)，解磷能力強(qiáng)，胞外分泌物豐富，芽孢存活時間長，解磷芽孢桿菌發(fā)酵液中每毫升含活菌數(shù)約10910"個菌(用公知的平板稀釋計數(shù)方法)，比公知的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基增加13.04%;經(jīng)過篩選的優(yōu)良高效弗蘭克氏菌可強(qiáng)化弗蘭克氏菌的感染，特別是采用弗蘭克氏菌fgc6菌株和優(yōu)選的發(fā)酵培養(yǎng)基得到的弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液每毫升菌體干重為386.7微克(用公知的干重稱量法)，比公知的Bap培養(yǎng)基增加329.67%。經(jīng)檢測，本發(fā)明的微生物肥料中的鉛、汞、砷和鎘等重金屬含量低于農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《微生物肥料》(NT227-94)中所規(guī)定的指標(biāo)(該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的公知方法測定)，在田間的應(yīng)用不會對土壤造成重金屬污染。木麻黃苗木接種本發(fā)明的微生物肥料比接種單一的解磷芽孢桿菌發(fā)酵液、弗蘭克氏菌發(fā)酵液或穩(wěn)效助劑時苗高提高8.2354.29%，根瘤數(shù)量提高42.02334.8%，根瘤干重提高37.96317.07%，地下部分干重提高9.4063.20%;地上部分干重提高27.08193.33%，總干重提高28.35162.22%。因此本發(fā)明能促進(jìn)木麻黃生長，提高木麻黃的成活率和保存率，并提高了帶根瘤的木麻黃苗木的數(shù)量，從而增強(qiáng)了木麻黃的抗逆性能和抗旱能力，加快人工林的郁閉速度，增強(qiáng)沿海木麻黃防護(hù)林的防風(fēng)固沙效能。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明，不是對本發(fā)明的限制。實(shí)施例1:將蛋白胨5g，牛肉膏3g，NaCl5g，瓊脂15g混合，用蒸餾水定容到1000mL,使pH7.07.2，在壓力103kPa，121"C滅菌30分鐘，2830'C培養(yǎng)24小時，得到常用的解磷巨大芽孢桿菌的菌種培養(yǎng)基。將KH2P040.95g，K2HP040,435g，MgS040.096g，CaCl0.Olg，NH4C10.0535g，丙酸鈉0.48g，F(xiàn)eS040.0056g，NaEDTA0.0075g用900tnL蒸餾水溶解，得到A溶液。將H3B032.86g，MnCl21.81g，ZnS040.22g,CuS040.08g,NaMo040.025g，CoCl0.025g用蒸餾水溶解并定容到lOOOmL,得到B溶液。將VBAOlOg，煙酸0.050g，生物素0.015g，葉酸0.OlOg，泛酸鈣0.OlOg,核黃素0.010g，VB60.050g用蒸餾水溶解并定容到lOOmL得到C溶液。在A溶液中加入lmLB溶液和C溶液，最后用蒸餾水定容到1000mL，并使pH6.06.5，在壓力103kPa，121t滅菌30分鐘，2830'C培養(yǎng)1015天得到常用的弗蘭克氏菌的菌種培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基(Bap培養(yǎng)基)。將蛋白胨5g,牛肉膏3g，NaCl5g用蒸餾水溶解并定容到1000mL，使pH7.07.2，在壓力103kPa，121。C滅菌30分鐘，置于180200r/min恒溫旋轉(zhuǎn)搖床，30。C培養(yǎng)48小時，得到常用的解磷巨大芽孢桿菌種子培養(yǎng)基。將解磷芽孢桿菌ACCC11107在上述的菌種培養(yǎng)基固體平板上283(TC培養(yǎng)2472小時，挑單菌落分別接種于盛有90150mL上述的種子培養(yǎng)基的500mL搖瓶中，置于180200r/min恒溫旋轉(zhuǎn)搖床，30。C培養(yǎng)48小時。將葡萄糖300g,酵母膏60g，MgS047H206g,NaCl150g在30kg自來水中混合，pH7.07.2，裝入50L發(fā)酵罐，在壓力103kPa，121"C滅菌30分鐘，冷卻至283(TC時按6%接種量接入經(jīng)菌種培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的解磷巨大芽孢桿菌ACCC11107種子菌液，發(fā)酵罐發(fā)酵條件為攪拌速度200r/min，溫度2830。C,通氣量50M7h，培養(yǎng)2436小時，得到解磷芽孢桿菌發(fā)酵液。取發(fā)酵液用公知的平板稀釋計數(shù)方法測定活菌數(shù)量，得到的菌體數(shù)量是5.2X109cfu/mL。將弗蘭克氏菌fgc6在上述的菌種培養(yǎng)基中培養(yǎng)15天，用勻漿器制成菌懸液接種于盛有200300mL上述的種子培養(yǎng)基的500raL搖瓶中，置于2830'C恒溫培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)15天。將H3B032.86g，MnCl21.81g，ZnS040.22g，CuS040.08g，NaMo040.025g，CoCl0.025g用蒸餾水溶解并定容到1000mL得到A溶液，將VB10.010g，煙酸0.050g，生物素0.015g，葉酸O.OlOg，泛酸鈣O.OlOg，核黃素0.010g和VB60.050g用蒸餾水溶解并定容到lOOmL得到B溶液，在A溶液和B溶液中各取30mL,混合并溶解葡萄糖15g(0.05%)，吐溫801.5g(0.005%)，丙酮酸鈉15.Og(0.05%)，NH4S0430g(0.1%),KH2P0428.5g(0.095%),K異13.05g(0.0435%)，MgS047H202.88g(0.0096%)，CaClO.3g(0.001%)，F(xiàn)eS040.168g(0.00056%)，NaEDTA0.225g(0.00075%)，加自來水至30kg，pH6.06.5，裝入50L發(fā)酵罐，在壓力103kPa，121'C滅菌30分鐘,冷卻至283(TC時按6%接種量接入經(jīng)菌種培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的弗蘭克氏菌fgc6菌株種子菌液，發(fā)酵罐發(fā)酵條件為攪拌速度200r/min,溫度2S3(TC,通氣量50MVh，培養(yǎng)7296小時，得到弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液。取發(fā)酵液用用公知的干重稱量法測定菌體干重，得到的菌體干重為386.7ug/mL，比采用常用的發(fā)酵培養(yǎng)基(B即培養(yǎng)基)的菌體干重90.0ug/mL提高329.67%。實(shí)施例2:將類黃酮0.lg(0.01%)，香豆素O.Olg(0.001%),鉬酸鈉0.01g(0.001%)，硫酸鈷0.lg(O.01%)溶解于lOOOmL自來水中得到穩(wěn)效助劑。將實(shí)施例1得到的解磷芽孢桿菌發(fā)酵液，弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑按體積比1:2:0.5混合得到微生物肥料，用淋苗法直接噴灑到苗木上，每公斤肥料可澆500800株苗，澆完菌肥半小時后用干凈的清水噴灑苗木，生長6個月時測定苗高，根瘤數(shù)量，地上部分干重，地下部分干重和總干重(實(shí)驗(yàn)組)，并與不噴灑任何肥料(對照組1)，僅噴灑弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液(對照組2)，僅噴灑解磷芽孢桿菌發(fā)酵液(對照組3)，噴灑解磷芽孢桿菌發(fā)酵液和弗蘭克氏菌fgc6菌株發(fā)酵液的混合發(fā)酵液(對照組4)，僅噴灑穩(wěn)效助劑(對照組5)進(jìn)行對照。結(jié)果見表l。表1含有弗蘭克氏菌fgc6菌株的微生物肥料對木麻黃苗木的促生作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例3:將實(shí)施例2得到的微生物肥料與有機(jī)肥按質(zhì)量比1:1混合，使微生物肥料吸附在有機(jī)肥上得到實(shí)驗(yàn)組l。將實(shí)施例2得到的微生物肥料與沸石粉按質(zhì)量比0.5:1混合，使微生物肥料吸附在沸石粉上得到實(shí)驗(yàn)組2，將各實(shí)驗(yàn)組用包裝塑料袋裝好，在室溫中放置10天15天后用于木麻黃苗木，每株苗25g。生長6個月時測定苗高，根瘤數(shù)量，地上部分干重，地下部分千重和總干重，并與不使用任何肥料(對照組l),使用液體的微生物肥料(對照組2)，僅使用有機(jī)肥(對照組3)，僅使用沸石粉(對照組4))進(jìn)行對照。結(jié)果見表2。表2含有弗蘭克氏菌fgc6菌株的微生物肥料用有機(jī)肥和沸石粉吸附后對木麻黃苗木的促生作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例4:將實(shí)施例3中用有機(jī)肥吸附的微生物肥料在福建省漳浦縣沿海木麻黃防護(hù)林應(yīng)用，造林時挖穴，株行距為2X2米，每穴按試驗(yàn)設(shè)計放有機(jī)肥吸附的微生物肥料作為基肥，回土拌均勻后每穴種一株木麻黃，最多每株施750g,造林8個月觀測樹高，結(jié)果見表3。經(jīng)數(shù)理統(tǒng)計分析差異極顯著。表3福建漳浦沿海木麻黃防護(hù)林應(yīng)用有機(jī)肥吸附的微生物肥料的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例5:將實(shí)施例3中用有機(jī)肥吸附的微生物肥料在廣東省陽西縣沿海木麻黃防護(hù)林應(yīng)用，造林時挖穴，株行距為2X2米，每穴按試驗(yàn)設(shè)計放多功能微生物有機(jī)肥肥料作為基肥，回土拌均勻后每穴種一株木麻黃，最多每株施750g，造林8個月觀測樹高，結(jié)果不施有機(jī)肥吸附的微生物肥料時的樹高是1.028米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料250g/株的樹高是1.127米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料500g/株的樹高是1.357米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料750g/株的樹高是1.820米，經(jīng)數(shù)理統(tǒng)計分析差異極顯著。實(shí)施例6:將實(shí)施例3中用有機(jī)肥吸附的微生物肥料在廣東省吳川縣沿海木麻黃防護(hù)林應(yīng)用，造林3個月后施多功能微生物有機(jī)肥肥料，在樹兩邊用鋤頭各挖一個約20厘米穴，按試驗(yàn)設(shè)計放入多功能微生物有機(jī)肥肥料，拌均勻后用沙土蓋住。15個月觀測樹高，最多每株施750g，造林8個月觀測樹高，結(jié)果不施有機(jī)肥吸附的微生物肥料時的樹高是1.352米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料250g/株的樹高是1.856米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料500g/株的樹高是2.119米，施有機(jī)肥吸附的微生物肥料750g/株的樹高是1.897米，經(jīng)數(shù)理統(tǒng)計分析差異極顯著。實(shí)施例7:從中國微生物菌種保藏管理委員會林業(yè)微生物菌種保藏中心獲得弗蘭克氏菌CC010菌株(該中心地址是中國，北京海淀區(qū)萬壽山后，郵編10091,菌種保藏編號為CfCC3035)，該菌株分離自廣東省吳川市沿海木麻黃防護(hù)林普通木麻黃樹木根系根瘤。常用的弗蘭克氏菌菌種培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基的配方和方法同實(shí)施例1。將H3B032.86g，MnCl21.81g，ZnS040.22g，CuS040.08g，NaMo040.025g和CoCl0.025g用蒸餾水溶解并定容到1000mL得到A溶液，將VBt0.010g，煙酸0.050g，生物素0.015g，葉酸0.010g，泛酸鈣0.010g，核黃素0.010g和VBs0.050g用蒸餾水溶解并定容到100mL得到B溶液，在A溶液和B溶液中各取30mL，混合并溶解葡萄糖15g(0.05%)，吐溫800.3g(0.001%),丙酮酸鈉75.0g(0.25%)，NH4S0430g(0.1%)，KH2P0428.5g(0.095%)，K2HP0413.05g(0.0435%)，MgS047H202.88g(0.0096%)，CaClO.3g(0.001%)，F(xiàn)eS040.168g(0.00056%)，NaEDTA0.225g(0.00075%)，加自來水至30kg,pH6.06.5，裝入50L發(fā)酵罐，在壓力103kPa，121。C滅菌30分鐘得到發(fā)酵培養(yǎng)基，冷卻至28301:時按6%接種量接入經(jīng)菌種培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基培養(yǎng)的弗蘭克氏菌CCOIO菌株種子菌液，發(fā)酵罐發(fā)酵條件為攪拌速度200r/min、溫度283(TC，通氣量50MVh，培養(yǎng)7296小時，得到的發(fā)酵液直接裝塑料桶備用。用公知的干重稱量法測定發(fā)酵液，得到菌體干重為160.0gPg/mL,比采用常用的B即培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基的菌體干重76.7ixg/mL提高108.60%。。解磷芽孢桿菌ACCC11107發(fā)酵液制備同實(shí)施例1。將類黃酮0.5g(0.05%)，香豆素0.1g(O.01%)，鉬酸鈉0.1g(0.01%)和硫酸鈷0.1g(0.01%)溶解于1000mL自來水，得到穩(wěn)效助劑。將上述弗蘭克氏菌CC010菌株發(fā)酵液、解磷芽孢桿菌發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑按1.5:1.5:0.1的體積比混合得到微生物肥料，用淋苗法直接噴灑到苗木上，每公斤肥料可澆500800株苗，澆完菌肥半小時后用干凈的清水噴灑苗木，生長6個月時測定苗高，根瘤數(shù)量，地上部分干重，地下部分干重和總干重(實(shí)驗(yàn)組)，并與不噴灑任何肥料(對照組1)，僅噴灑弗蘭克氏菌CC010菌株發(fā)酵液(對照組2)，僅噴灑解磷芽孢桿菌ACCC11107發(fā)酵液(對照組3),噴灑解磷芽孢桿菌ACCC11107發(fā)酵液和弗蘭克氏菌CC010菌株發(fā)酵液的混合發(fā)酵液(對照組4)，僅噴灑穩(wěn)效助劑(對照組5)進(jìn)行對照。結(jié)果見表4。表4含有弗蘭克氏菌CC010菌株的微生物肥料對木麻黃苗木的促生作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>將上述微生物肥料與有機(jī)肥按質(zhì)量比1:1混合，使微生物肥料吸附在有機(jī)肥上得到實(shí)驗(yàn)組l，將上述微生物肥料與沸石粉按質(zhì)量比0.5:1混合，使微生物肥料吸附在沸石粉上得到實(shí)驗(yàn)組2，將各實(shí)驗(yàn)組用包裝塑料袋裝好，在室溫中放置10天15天后用于木麻黃苗木，每株苗25g。生長6個月時測定苗高，根瘤數(shù)量，地上部分干重，地下部分干重和總干重，并與不使用任何肥料(對照組l),使用液體的微生物肥料(對照組2)，僅使用有機(jī)肥(對照組3)，僅使用沸石粉(對照組4))進(jìn)行對照。結(jié)果見表5。表5含有弗蘭克氏菌CC010菌株的微生物肥料用有機(jī)肥和沸石粉吸附后對木麻黃苗木的促生作用測定項(xiàng)目對照組1對照組2對照組3對照組4實(shí)驗(yàn)組l實(shí)驗(yàn)組2苗高(cm)49.4454.7856.9149.2164.8958.26根瘤數(shù)量(個/株)/5.12//16.238.76根瘤干重(克/株)/0.0531//0.19850.0648地上部分干重(克/株)0.9861.3451.4461.2592.7431.516地下部分干重(克/株)0.2910.3220.3120.3070.3860.358總干重(克/株)1.2771.72011.7581.5663.32751.9388權(quán)利要求1.一種專用于木麻黃(Casuarina)的微生物肥料，其特征是包括由體積比1～1.5∶1.5～2.0∶0.1～0.5的解磷巨大芽胞桿菌(BacillusmegateriumdeBary)發(fā)酵液，弗蘭克氏菌(Frankia.sp)發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑混合得到的液體菌肥，所述的穩(wěn)效助劑組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100％計，為類黃酮0.01～0.05％，香豆素0.001～0.01％，鉬酸鈉0.001～0.01％，硫酸鈷0.001～0.01％和余量為水。2.根據(jù)權(quán)利要求1的一種專用于木麻黃的微生物肥料，其特征是還包括沸石粉或有機(jī)肥，沸石粉與液體菌肥的體積比是1:0.5,有機(jī)肥與液體菌肥的體積比是1:1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種專用于木麻黃的微生物肥料，其特征是所述的弗蘭克氏菌是弗蘭克氏菌(尸r朋h'a.印)fgc6CCTCCM207197。4.根據(jù)權(quán)利要求3的一種專用于木麻黃的微生物肥料，其特征是所述的弗蘭克氏菌(尸r朋h'a.fgc6發(fā)酵液是弗蘭克氏菌(,r朋h'a.印)fgc6在B即培養(yǎng)基上培養(yǎng)1015天，然后在Bap種子培養(yǎng)基上2830°C培養(yǎng)1015天后，再在弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵283(TC培養(yǎng)7296小時得到，所述的弗蘭克氏菌發(fā)酵培養(yǎng)基組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為葡萄糖0.03%0.08%，吐溫800.003%0.008%，丙酮酸鈉0.03%0.08%，NH4S040.05%0.1%，KH2P040.095%，K2HP040.0435%,MgS047H200.0096%，CaCl0.001%，F(xiàn)eS040.00056%,NaEDTA0.00075%，微量元素水溶液O.1%，維生素水溶液O.1%和余量為水，其中的微量元素水溶液組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為H3B030.286%，MnCl20.181%，ZnS040.022%，CuS040.008%，NaMo040.0025%，CoCl0.0025%和余量為水，維生素水溶液組成按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計，為維生素VBi0.001%,煙酸0.005%，生物素0.0015%，葉酸0.001%，泛酸f丐0.001%,核黃素0.001%和余量為水，用水溶解葡萄糖，吐溫，丙酮酸鈉，NH4S04，KH2P04，K2HP04，MgS047H20，CaCl，F(xiàn)eS(X和NaEDTA后加入微量元素水溶液與維生素水溶液，混合后調(diào)節(jié)pH6.06.5，裝入發(fā)酵罐滅菌得到。全文摘要本發(fā)明涉及一種專用于木麻黃的微生物肥料。其特征是包括由體積比1～1.5∶1.5～2.0∶0.1～0.5的解磷巨大芽胞桿菌(BacillusmegateriumdeBary)發(fā)酵液，弗蘭克氏菌(Frankia.sp)發(fā)酵液和穩(wěn)效助劑混合得到的液體菌肥，所述的穩(wěn)效助劑組成按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計，為類黃酮0.01％～0.05％，香豆素0.001％～0.01％，鉬酸鈉0.001％～0.01％，硫酸鈷0.001％～0.01％，余量為水，還可以包括沸石粉或有機(jī)肥。該肥料能促進(jìn)木麻黃生長，提高木麻黃的成活率和保存率，并提高了帶根瘤的木麻黃苗木的數(shù)量，從而增強(qiáng)了木麻黃的抗逆性能和抗旱能力，加快人工林的郁閉速度，增強(qiáng)沿海木麻黃防護(hù)林的防風(fēng)固沙效能。用本發(fā)明提供的弗蘭克氏菌fgc6菌株CCTCCM207197效果更好。文檔編號C05G3/00GK101229986SQ20071003298公開日2008年7月30日申請日期2007年12月29日優(yōu)先權(quán)日2007年12月29日發(fā)明者康麗華,彭耀強(qiáng),江業(yè)根,王勝坤,許松葵,馬海賓申請人:中國林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所