專利名稱：一種青蝦的麻醉方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蝦類的麻醉方法，特別涉及一種青蝦的麻醉方法。
背景技術(shù)：
使用麻醉劑的麻醉方法廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)的研究和生產(chǎn)上，它可以大大減少 水生動(dòng)物體因應(yīng)激反應(yīng)而帶來的身體損傷，方便研究人員進(jìn)行動(dòng)物體的測量、 標(biāo)記、抽血等試驗(yàn)操作，也能減少水產(chǎn)運(yùn)輸過程中的損傷。
目前，對魚類和水生軟體動(dòng)物的麻醉方法已經(jīng)得到了廣泛研究。趙振山等 (趙振山，陳勝國.碳酸和鹽酸普魯卡因在魚苗運(yùn)輸中麻醉效果觀察.淡水漁
業(yè),1994，24(l):3-5.)曾用碳酸和鹽酸普魯卡因麻醉草魚魚苗，發(fā)現(xiàn)草魚魚苗在運(yùn) 輸介質(zhì)中，碳酸的最適濃度為500ppm，其安全存活(10%的死亡率)達(dá)201h; 鹽酸普魯卡因的最適濃度為90ppm，安全存活達(dá)152h，而未用任何麻醉劑的 對照組的存活率僅為91h。杜浩等(杜浩，危起偉，楊德國等.MS-222， 丁香油， 苯唑卡因?qū)︷B(yǎng)殖美國鰣幼魚的麻醉效果.大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007, 22(1): 20-26.) 用MS-222、 丁香油、苯唑卡因?qū)︷B(yǎng)殖美洲鰣幼魚進(jìn)行麻醉試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在適宜 的麻醉濃度(MS-222為20-30 mg丄'1， 丁香油為8~10 mg七—1，苯唑卡因?yàn)?20 30mg七")下，魚能夠進(jìn)入麻醉狀態(tài)，且能保持很長時(shí)間(12h)，并且麻醉效 果隨著水溫的升高而增強(qiáng)。趙艷麗、楊先樂等(趙艷麗，楊先樂.丁香酚對大黃 魚麻醉效果的研究.水產(chǎn)科技情報(bào)，2002, 29(4):163-165.)用丁香酚麻醉大黃魚發(fā) 現(xiàn)，水溫25 27'C時(shí)，5 mg，L"的丁香酚可在1 min內(nèi)使大黃魚魚種進(jìn)入麻醉狀 態(tài)，入水后3 min左右蘇醒。Dong-Won Seoll等(Dong-Won Seol, Jinhwan Lee， Soo-Yeon Im & In-Seok Park. 2006. Clove oil as an anaesthetic for common octopus (Octopus minor, Sasaki). Aquaculture Research, Volume 38， Issue 1: 45-49.) 用丁香油(麻醉成分為丁香酚)麻醉章魚，認(rèn)為200mg1/1的丁香油能快速的 麻醉章魚并能在較短的時(shí)間內(nèi)從麻醉狀態(tài)中恢復(fù)。
相比之下，對水生甲殼類動(dòng)物麻醉方法的研究還不多見。Waterstrat等 (Waterstrat P.R. (2005) Evaluation of eugenol as an anesthetic for the American lobster, Homarus americanus. Journal of World Aquaculture Society 36， 420-424.) 用丁香酚麻醉美國龍蝦，認(rèn)為75 100mg丄"濃度的丁香酚能有效的麻醉龍蟲下， 并且發(fā)現(xiàn)龍蝦可在14min內(nèi)從麻醉狀態(tài)中恢復(fù)。Shawn D.Coyle等(Joumal of the WorldAquaculture Society 36， 282-290.)用MS-222、乙二醇苯醚、丁香油、苯
唑卡因等麻醉羅氏沼蝦發(fā)現(xiàn)，100mg丄"濃度的MS-222、乙二醇苯醚對羅氏沼 蝦無麻醉作用，而只有100mg，L"丁香油在較長的時(shí)間內(nèi)才使羅氏沼蝦處于麻 醉狀態(tài)，這說明甲殼類的羅氏沼蝦對麻醉劑選擇的狹窄性。
青蟲下，學(xué)名"日本沼蟲下，，(il/acra6rac/H'ww m》/ o"erae)，在我國水域廣泛分 布，是我國淡水漁業(yè)資源重要組成部分。對青蝦麻醉方法的研究，迄今還未見 相關(guān)報(bào)道。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用目前水產(chǎn)上的高效麻醉劑MS-222、乙二醇苯醚 和苯唑卡因做麻醉劑的麻醉方法，即使麻醉劑濃度很高(100 800mg丄'1)時(shí)， 對青蝦也均無麻醉作用。
基于上述背景，有必要提供一種青蝦的麻醉方法，為青蝦的研究和養(yǎng)殖提 供便利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種青蝦的麻醉方法，以便能夠?qū)η辔r實(shí)施安全 而有效的麻醉，為青蝦的研究和養(yǎng)殖提供便利。 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 提供一種青蝦的麻醉方法，包含以下步驟
1) 麻醉前暫養(yǎng)在實(shí)施麻醉前，青蝦在曝氣自來水中暫養(yǎng)，使之適應(yīng)水 體環(huán)境；
2) 制備麻醉水體先將丁香酚與95%乙醇以1:10體積比充分混合，然后 稀釋成丁香酚濃度在100mg七" 500mg丄'1之間的麻醉水體；
3) 實(shí)施麻醉把步驟l)暫養(yǎng)的青蝦投放到步驟2)制備的麻醉水體中，
用玻棒碰觸蟲下體，觀察青蝦在玻棒刺激下的行為表現(xiàn)直至容器中的所有蝦不能 保持平衡且對玻棒碰觸無反應(yīng)時(shí)，即進(jìn)入麻醉狀態(tài)。
步驟l)所述的青蝦為野生或人工養(yǎng)殖青蝦，體長規(guī)格l 10cm。 步驟1)所述的暫養(yǎng)時(shí)間為2小時(shí) 5天。
步驟2)所述的丁香酚含丁香酚重量百分比在99.9%以上，比重為 1.038-1.060，從江西省吉安市恒誠天然香料提煉廠購得。 步驟2)所述的稀釋是用曝氣自來水稀釋。
步驟2)所述稀釋后的麻醉水體中丁香酚濃度優(yōu)選200 mg丄—i 400 mg七—、 步驟3)所述的實(shí)施麻醉的麻醉水體溫度為4 38"，優(yōu)選為15 3(TC。 步驟3)所述的向麻醉水體中投放青蝦的比例為1~20只/升麻醉水體。 所述青蝦的麻醉方法還包含以下麻醉后步驟
4) 麻醉后蘇醒將所述步驟3)麻醉的青蝦轉(zhuǎn)移到pH為7.9±0.6，溶氧 5mg'U1以上的蘇醒水體，如曝氣自來水中，用玻棒碰觸蝦體，觀察青蝦在玻 棒刺激下的行為表現(xiàn)，當(dāng)青蝦恢復(fù)平衡且能主動(dòng)逃避刺激時(shí)，即進(jìn)入蘇醒狀態(tài);
5) 蘇醒后恢復(fù)將蘇醒后的青蝦繼續(xù)在水泥池中養(yǎng)殖14天。丁香酚的麻醉功效已在魚類(如大黃魚、美洲鮒幼魚等)得到證實(shí)，其麻 醉效果也在一些水生甲殼動(dòng)物上被確認(rèn)(如美國龍蝦和羅氏沼蟲下)，但尚未有 研究青蝦麻醉劑的報(bào)道，也未見將丁香酚應(yīng)用于青蟲下的報(bào)道。本發(fā)明經(jīng)過對麻 醉劑濃度和麻醉溫度等參數(shù)的大量試驗(yàn)研究，獲得了上述技術(shù)方案。其中，通 過對麻醉劑濃度和麻醉水體溫度的研究可知，麻醉劑濃度越大，麻醉時(shí)間就越 短，蘇醒時(shí)間也就越長；麻醉水體溫度越高，麻醉時(shí)間越短，蘇醒時(shí)間也越短。
通過在麻醉后蘇醒步驟中對青蝦行為表現(xiàn)的觀察，和蘇醒后恢復(fù)步驟中對 青蝦攝食、活動(dòng)和死亡情況的統(tǒng)計(jì)，能夠評估本發(fā)明的麻醉方法對青蟲下是否安 全。
具體實(shí)施例方式
下面通過具體實(shí)施例進(jìn)一步對本發(fā)明作詳細(xì)說明。 實(shí)施例1
1麻醉前青蝦的暫養(yǎng)
1.1青蝦為野生太湖青蝦，體長規(guī)格為5士0.5cm，暫養(yǎng)3天。
2麻醉水體的準(zhǔn)備
2.1麻醉水體的制備:丁香酚與95%酒精以1:10體積比混合配制成麻醉劑， 然后用曝氣自來水稀釋成為丁香酚濃度為100 mg，L—1的麻醉水體溶液。
2.2麻醉水體規(guī)格麻醉水體體積為3升，水體溫度控制在27'C。
3麻醉實(shí)施把30只步驟1所述的青蝦同時(shí)投放到上述步驟2制備的麻 醉劑水體里，觀察蝦子活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足喪失活動(dòng)能力，身體不能保持平 衡，對玻棒的刺激無反應(yīng)止。此次麻醉的誘導(dǎo)麻醉時(shí)間為44.8分鐘。
麻醉后蘇醒把上述步驟3麻醉的青蝦投放與麻醉水體具相同溫度的蘇醒 水體中，觀察其活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足恢復(fù)活動(dòng)能力，身體恢復(fù)平衡，能避讓 碰觸物的接觸。結(jié)果顯示在上述麻醉?xiàng)l件下被麻醉的青蝦蘇醒所需的時(shí)間為平 均3.7分鐘。
蘇醒后的恢復(fù)暫養(yǎng)上述蘇醒后的青蝦直到14天，觀察其攝食和活動(dòng)情 況。結(jié)果顯示14天后青蝦攝食正常，活動(dòng)狀態(tài)無異常，死亡率為O。 實(shí)施例2
1麻醉前青蝦的暫養(yǎng)
1.1青蝦為池塘養(yǎng)殖青蝦，體長規(guī)格為3士0.5cm，暫養(yǎng)5天。
2麻醉水體的準(zhǔn)備
2.1麻醉水體的制備:丁香酚與95%酒精以1:10體積比混合配制成麻醉劑， 然后用曝氣自來水稀釋成為丁香酚濃度為300 mg七"的麻醉水體溶液。 2.2麻醉水體規(guī)格麻醉水體體積為2升，水體溫度控制在22'C。 3麻醉實(shí)施把40只步驟1所述的青蝦同時(shí)投放到上述步驟2制備的麻
醉劑水體里，觀察蝦子活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足喪失活動(dòng)能力，身體不能保持平
衡，對玻棒的剌激無反應(yīng)止。此次麻醉的誘導(dǎo)麻醉時(shí)間為15.7分鐘。
麻醉后蘇醒把上述步驟3麻醉的青奸投放與麻醉水體具相同溫度的蘇醒
水體中，觀察其活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足恢復(fù)活動(dòng)能力，身體恢復(fù)平衡，能避讓 碰觸物的接觸。結(jié)果顯示在上述麻醉?xiàng)l件下被麻醉的青蝦蘇醒所需的時(shí)間為平
均12.2分鐘。
蘇醒后的恢復(fù)暫養(yǎng)上述蘇醒后的青蝦直到14天，觀察其攝食和活動(dòng)情
況。結(jié)果顯示14天后青蝦攝食正常，活動(dòng)狀態(tài)無異常，死亡率為0。 實(shí)施例3
1麻醉前青蝦的暫養(yǎng)
1.1青蝦為野生太湖青蝦，體長規(guī)格為7士0.5cm，暫養(yǎng)2小時(shí)。
2麻醉水體的準(zhǔn)備
2.1麻醉水體的制備:丁香酚與95%酒精以I:IO體積比混合配制成麻醉齊O， 然后用曝氣自來水稀釋成為丁香酚濃度為500 mg，L'1的麻醉水體溶液。
2.2麻醉水體規(guī)格麻醉水體體積為5升，水體溫度控制在17"C。
3麻醉實(shí)施把25只步驟1所述的青蝦同時(shí)投放到上述步驟2制備的麻 醉劑水體里，觀察蝦子活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足喪失活動(dòng)能力，身體不能保持平 衡，對玻棒的刺激無反應(yīng)止。此次麻醉的誘導(dǎo)麻醉時(shí)間為10.5分鐘。
麻醉后蘇醒把上述步驟3麻醉的青蝦投放與麻醉水體具相同溫度的蘇醒 水體中，觀察其活動(dòng)狀態(tài)直到所有步足恢復(fù)活動(dòng)能力，身體恢復(fù)平衡，能避讓 碰觸物的接觸。結(jié)果顯示在上述麻醉?xiàng)l件下被麻醉的青蝦蘇醒所需的時(shí)間為平 均17.9分鐘。
蘇醒后的恢復(fù)暫養(yǎng)上述蘇醒后的青蝦直到14天，觀察其攝食和活動(dòng)情
況。結(jié)果顯示14天后青蝦攝食正常，活動(dòng)狀態(tài)無異常，死亡率為O。
從上述實(shí)施例中可知，本發(fā)明麻醉方法的麻醉時(shí)間為10.5~44.8分鐘，經(jīng) 過本發(fā)明的麻醉后蘇醒時(shí)間為3.7~17.9分鐘，各實(shí)施例的奸在蘇醒后再養(yǎng)殖兩 周，死亡率均為O，表明本發(fā)明所建立的青蝦麻醉方法是高效安全的。
以上實(shí)施例僅說明本發(fā)明建立的青蝦麻醉技術(shù)以及較常用的麻醉方案，但 本發(fā)明并不僅限于此。值得的注意的是，利用丁香酚為主要成分對青奸進(jìn)行麻 醉都在本發(fā)明所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)，都不會(huì)脫離本發(fā)明的精神和所附的權(quán)利 要求保護(hù)的范圍。這里不再對其它的具體實(shí)施例進(jìn)行一一列舉。
權(quán)利要求
1.一種青蝦的麻醉方法，包含以下步驟1)麻醉前暫養(yǎng)在實(shí)施麻醉前，青蝦在曝氣自來水中暫養(yǎng)，使之適應(yīng)水體環(huán)境；2)制備麻醉水體先將丁香酚與95％乙醇以1:10體積比充分混合，然后稀釋成丁香酚濃度為100mg·L-1～500mg·L-1的麻醉水體；3)實(shí)施麻醉把步驟1)暫養(yǎng)的青蝦投放到步驟2)制備的麻醉水體中，用玻棒碰觸蝦體，觀察青蝦在玻棒刺激下的行為表現(xiàn)直至容器中的所有蝦不能保持平衡且對玻棒碰觸無反應(yīng)時(shí)，即進(jìn)入麻醉狀態(tài)。
2. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟l)所述的青蝦為野 生或人工養(yǎng)殖青蝦，體長規(guī)格1 10cm。
3. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟l)所述的暫養(yǎng)時(shí)間 為2小時(shí) 5天。
4. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟2)所述的丁香酚含 丁香酚重量百分比在99.9%以上，比重為1.038 1.060。
5. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟2)所述的稀釋是用 曝氣自來水稀釋。
6. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟2)所述稀釋后的麻 醉水體中丁香酚濃度為200mg'L—i 400mg'L—1 。
7. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟3)所述的實(shí)施麻醉 的麻醉水體溫度為4 38'C。
8. 權(quán)利要求6所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于:所述麻醉水體溫度為15~30 。C。
9. 權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于步驟3)所述的向麻醉水 體中投放青蝦的比例為1~20只/升麻醉水體。10權(quán)利要求1所述的青蝦的麻醉方法，其特征在于還包含以下麻醉后步驟4) 麻醉后蘇醒將所述步驟3)麻醉的青蝦轉(zhuǎn)移到pH為7.9±0.6，溶氧 5mg丄"以上的蘇醒水體中，用玻棒碰觸蝦體，觀察青蝦在玻棒刺激下的行為 表現(xiàn)，當(dāng)青蝦恢復(fù)平衡且能主動(dòng)逃避刺激時(shí)，即進(jìn)入蘇醒狀態(tài)；5) 蘇醒后恢復(fù)將蘇醒后的青蝦繼續(xù)在水泥池中養(yǎng)殖14天。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種青蝦的麻醉方法，包括麻醉前暫養(yǎng)、制備麻醉水體、實(shí)施麻醉等步驟。本發(fā)明的麻醉方法實(shí)現(xiàn)了對青蝦的安全高效麻醉，為青蝦的遺傳操作奠定了基礎(chǔ)，并有助于青蝦良種的推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)A01K61/00GK101366362SQ200710142979
公開日2009年2月18日 申請日期2007年8月14日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月14日
發(fā)明者何新龍, 傅洪拓, 滟 吳, 熊貽偉, 蔣速飛, 龔永生 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心