專利名稱：：一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)伺料添加劑及其制備，屬于一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：在全世界范圍內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展的同時，由于養(yǎng)殖密度的不斷加大、人工餌料的投喂量不斷增多等原因，造成了水環(huán)境的不斷惡化，導(dǎo)致了各類細菌病、病毒病的頻繁發(fā)生，嚴重阻礙了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。目前己從生理、病理、種質(zhì)、營養(yǎng)、生態(tài)、流行特點等方p進行了大量研究。以使用抗生素為代表的傳統(tǒng)治療方法，因其易導(dǎo)致養(yǎng)殖動物產(chǎn)生抗藥性且易存殘留等缺點，在各國逐漸被禁用和取代。疫苗雖然可以成為控制魚類疾病最直接有效的方法，但是，由于免疫反應(yīng)具有特異性，一種疫苗只能特異性地預(yù)防相應(yīng)的某種疾病，所以實際作用也非常有限，免疫機制的研究是合理有效防治各類病害的根本和依據(jù)，近來免疫學(xué)研究已成為水產(chǎn)動物病害研究的執(zhí)占之一。"、、'、、、0免疫增強劑可以通過提高動物機體自身的免疫力從而增強抗病能力，雖然免疫增強劑在魚、蝦、蟹上的應(yīng)用已經(jīng)有較多的報道，但是在鮑魚飼料中添加免疫增強劑來提高機體的免疫力國內(nèi)外還很少報道。申請?zhí)枮?00410035416.3的中國專利指出一種復(fù)方免疫中草藥作為鮑魚的免疫增強劑，但是由于中草藥作為免疫增強劑發(fā)揮作用時間周期長，而且對詞料的適口性^產(chǎn)生'定的影響。在實際生產(chǎn)中，鮑魚特別是鮑苗的免疫力很低、成活率不高，嚴重制約著鮑魚的規(guī)?；B(yǎng)殖。而用復(fù)合免疫增強劑作為飼料添加劑來提高鮑魚的免疫力到目前為止還未曾出現(xiàn)過。因此，研制復(fù)合免疫增強劑來提高鮑魚的免疫力，對提高鮑魚成活率及其鮑魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展具有十分重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，針對性腺快速發(fā)育期(II-III期)的鮑魚，從提高鮑魚自身非特異性免疫功能入手，利用酚氧化酶法(PO)和吖啶橙檢測法(AO)對維生素、寡糖、褐藻膠、魚油等配置的多種免疫增強劑進行篩選，提供一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。本發(fā)明另一個目的是提供一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑的制備方法。為達到上述目的，本發(fā)明的主要技術(shù)方案如下一種詞養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑，其特征在于該免疫增強劑由褐藻膠寡糖、瓊膠寡糖、維生素C，E、褐藻酸鈉、磷酸二氫鉀、米糠和魚油組成，每100重量份的復(fù)合免疫增強劑中分別含有褐藻膠寡糖38重量份、瓊膠寡糖212重量份、維生素C15重量份，維生素E16重量份、褐藻酸鈉35重量份、磷酸二氫鉀14重量份、米糠2040重量份、魚油2069重量份。上述的一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑的制備方法，其特征在于其具體歩驟及其工藝條件如下步驟一固體原料粉碎、過篩分別將固體原料維生素C、米糠分別粉碎，至原料細度達過60目篩后備用；步驟二原料的初步充分混勻?qū)?8重量份的褐藻膠寡糖，212重量份的瓊膠寡糖，15重量份維生素C，2040重量份的米糠加入攪拌設(shè)備，攪拌至混合物的均勻度變異系數(shù)CV小于4.8。/。，得到固體原料初混物；步驟三固體原料的再次充分混勻按照配方將16重量份維生素E、14重量份的磷酸二氫鉀加至步驟二得到的固體原料混合物中，再次混勻，混合物的均勻度變異系數(shù)CV小于6%，得到固體原料混合物；步驟四原料的調(diào)制將2069重量份的魚油加入至步驟三得到的固體原料混合物中，充分混勻，再加入35重量份的褐藻酸鈉作為粘合劑。步驟五制粒將步驟四處理的原料混合物壓制成粒，得到100重量份的成品，飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。所述褐藻膠寡糖是指將褐藻膠進行常規(guī)生物技術(shù)處理，制備出平均分子量在4002000Da的低聚糖。所述的瓊膠寡糖是指將瓊膠進行常規(guī)生物技術(shù)處理，制備出平均分子量在3001800Da，以卩-D-半乳糖為還原性末端和以3，6-內(nèi)醚a-L半乳糖為非還原性末端的瓊低聚糖系列的活性瓊膠寡糖。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點1、本發(fā)明作為飼料添加劑性能好在現(xiàn)有的商業(yè)詞料中按0.11%的比例添加本發(fā)明的復(fù)合免疫增強劑，明顯提高鮑魚的非特異性免疫力，增強鮑魚血細胞吞噬功能，有效去除鮑魚體內(nèi)的自由基，通過激活鮑魚自身Pro酶原系統(tǒng)，顯著提高Pro酶活力；進而提高鮑魚對外界環(huán)境的抗病、抗逆能力，從而有效的預(yù)防養(yǎng)殖病害的發(fā)生，投喂含該復(fù)合免疫增強劑飼料組的鮑魚，非特異性免疫力顯著提高，其中，血細胞吞噬活性提高1525%，Pro酶活力提高1830%，SOD酶活提高2538%，ACP酶活提高1930%。2、本發(fā)明有效提高鮑魚養(yǎng)殖成活率在現(xiàn)有的商業(yè)飼料中按比例添加本發(fā)明的復(fù)合免疫增強劑，鮑魚養(yǎng)殖成活率提高了1525%(詳見表1)，有效提高鮑魚的產(chǎn)量、降低鮑魚養(yǎng)殖的成本，十分有利于發(fā)展鮑魚的規(guī)?；B(yǎng)殖，從而進一步推動鮑魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，滿足市場的需求。3、本發(fā)明的制備方法簡單易行，設(shè)備要求低，工藝合理，加工成本低廉，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。具體實施方式下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明作進一步地詳細說明，但實施方式并不僅限于此。步驟一將固體原料1重量份維生素C、20重量份的米糠分別粉碎，至原料細度達過60目篩后備用；步驟二將3重量份的平均分子量為400Da的褐藻膠寡糖，2重量份的以(3-D-半乳糖為還原性末端和以3，6-內(nèi)醚a-L半乳糖為非還原性末端，平均分子量為300Da的瓊膠寡糖，混合步驟一的1重量份的維生素C、20重量份的米糠，加入攪拌設(shè)備，攪拌至混合物的均勻度變異系數(shù)CV為4.8%，得到固體原料初混物；步驟三將1重量份維生素E、1重量份的磷酸二氫鉀加至步驟二得到的固體原料混合物中，再次混勻，混合物的均勻度變異系數(shù)CV為6。/。，得到固體原料混合物；步驟四將69重量份的魚油加入至步驟三得到的固體原料混合物中，充分混勻，再加入3重量份的褐藻酸鈉作為粘合劑；步驟五將步驟四處理的原料混合物壓制成粒，得到100重量份的成品，即飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。實施例2步驟一將固體原料3重量份維生素C、30重量份的米糠分別粉碎，至原料細度達過60目篩后備用；步驟二將6重量份的平均分子量為1200Da的褐藻膠寡糖，8重量份的以(3-D-半乳糖為還原性末端和以3，6-內(nèi)醚a-L半乳糖為非還原性末端，平均分子量為1000Da的瓊膠寡糖，混合步驟一的3重量份的維生素C、30重量份的米糠,加入攪拌設(shè)備，攪拌至混合物的均勻度變異系數(shù)CV為4%，得到固體原料初混物；步驟三將3重量份維生素E、2重量份的磷酸二氫鉀加至步驟二得到的固體原料混合物中，再次混勻，混合物的均勻度變異系數(shù)CV為4。/。，得到固體原料混合物；步驟四將44重量份的魚油加入至步驟三得到的固體原料混合物中，充分混勻，再加入4重量份的褐藻酸鈉作為粘合劑；步驟五將步驟四處理的原料混合物壓制成粒，得到100重量份的成品，即飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。實施例3步驟一將固體原料5重量份維生素C、40重量份的米糠分別粉碎，至原料細度達過60目篩后備用；步驟二將8重量份的平均分子量為2000Da的褐藻膠寡糖，12重量份的以P-D-半乳糖為還原性末端和以3，6-內(nèi)醚a-L半乳糖為非還原性末端，平均分子量為1800Da的瓊膠寡糖，混合步驟一的5重量份的維生素C、40重量份的米糠，加入攪拌設(shè)備，攪拌至混合物的均勻度變異系數(shù)CV為2%，得到固體原料初混物；步驟三將6重量份維生素E、4重量份的磷酸二氫鉀加至步驟二得到的固體原料混合物，再次混勻，混合物的均勻度變異系數(shù)cv為3y。，得到固體原料混合物；步驟四將20重量份的魚油加入至步驟三得到的固體原料混合物中，充分混勻，再加入5重量份的褐藻酸鈉作為粘合劑；步驟五將步驟四處理的原料混合物壓制成粒，得到100重量份的成品，即飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。應(yīng)用實施例為考察本發(fā)明復(fù)合免疫增強劑在飼養(yǎng)鮑魚中應(yīng)用的效果，現(xiàn)制備兩類實驗飼料，飼料1為鮑魚的基礎(chǔ)飼料魚粉、大豆栢、褐藻酸鈉、淀粉、海藻粉、維生素及礦物質(zhì)預(yù)混料等原料配制而成，即不含免疫增強劑的飼料。各詞料成分均經(jīng)超微粉碎后過篩，微量成分采用逐漸擴大混合，所有組分充分攪拌均勻后，加30%左右的水，用雙螺旋擠條機制成鮑魚飼料，風(fēng)干后，置于-2CrC冰箱中保存。飼料2、3、4分別在飼料1配方的基礎(chǔ)上添加0.1%、0.5%、1。/。的本發(fā)明的飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。實驗選擇附肢完整，個體均勻的健康的鮑魚，實驗設(shè)四個飼料組第一飼料組、第二詞料組、第三飼料組和第四飼料組，分別飼喂飼料1、飼料2、飼料3和飼料4，進行養(yǎng)殖試驗，常規(guī)喂養(yǎng)，為期為80天。80天后，取鮑魚血淋巴進行非特異性相關(guān)指標進行分析。結(jié)果表明詞料2、飼料3和詞料4的詞料效果明顯優(yōu)于詞料1。表1為飼料中未添加和添加飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑對鮑魚免疫力的影響對比。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權(quán)利要求1、一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑，其特征在于該免疫增強劑由褐藻膠寡糖、瓊膠寡糖、維生素C，E、褐藻酸鈉、磷酸二氫鉀、米糠和魚油組成，每100重量份的復(fù)合免疫增強劑中分別含有褐藻膠寡糖3～8重量份、瓊膠寡糖2～12重量份、維生素C1～5重量份，維生素E1～6重量份、褐藻酸鈉3～5重量份、磷酸二氫鉀1～4重量份、米糠20～40重量份、魚油20～69重量份。2、權(quán)利要求1所述的一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑的制備方法，其特征在于其具體步驟及其工藝條件如下-步驟一固體原料粉碎、過篩分別將固體原料維生素C、米糠分別粉碎，至原料細度達過60目篩后備用；步驟二原料的初步充分混勻?qū)?8重量份的褐藻膠寡糖，212重量份的瓊膠寡糖，15重量份維生素C，2040重量份的米糠加入攪拌設(shè)備，攪拌至混合物的均勻度變異系數(shù)CV小于4.87。，得到固體原料初混物；步驟三固體原料的再次充分混勻按照配方將16重量份維生素E、14重量份的磷酸二氫鉀加至步驟二得到的固體原料混合物中，再次混勻，混合物的均勻度變異系數(shù)CV小于6%，得到固體原料混合物；步驟四原料的調(diào)制將2069重量份的魚油加入至步驟三得到的固體原料混合物中，充分混勻，再加入35重量份的褐藻酸鈉作為粘合劑；步驟五制粒將步驟四處理的原料混合物壓制成粒，得到100重量份的成品，飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑的制備方法，其特征在于所述褐藻膠寡糖是指將褐藻膠進行常規(guī)生物技術(shù)處理，制備出平均分子量在4002000Da的低聚糖。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑的制備方法，其特征在于所述的瓊膠寡糖是指將瓊膠進行常規(guī)生物技術(shù)處理，制備出平均分子量在3001800Da，以(3-D-半乳糖為還原性末端和以3，6-內(nèi)醚a-L半乳糖為非還原性末端的瓊低聚糖系列的活性瓊膠寡糖。全文摘要一種飼養(yǎng)鮑魚用復(fù)合免疫增強劑及其制備方法，屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)飼料添加劑及其制備技術(shù)。每100重量份的復(fù)合免疫增強劑中分別含有重量份褐藻膠寡糖3～8、瓊膠寡糖2～12、維生素C1～5，維生素E1～6、褐藻酸鈉3～5、磷酸二氫鉀1～4、米糠20～40、魚油20～69。該制備方法包括將褐藻膠寡糖、瓊膠寡糖和粉碎、過篩后的維生素C、米糠一起加入攪拌設(shè)備；再加維生素E、磷酸二氫鉀，加入魚油、褐藻酸鈉混勻后制粒。按0.1～1％比例加入到飼料中，明顯提高了鮑魚非特異性免疫力，其養(yǎng)殖成活率提高了15～25％，有效提高鮑魚產(chǎn)量、降低了養(yǎng)殖的成本，從而進一步推動鮑魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，滿足市場的需求。文檔編號A23K1/18GK101248838SQ20081002702公開日2008年8月27日申請日期2008年3月25日優(yōu)先權(quán)日2008年3月25日發(fā)明者蔡俊鵬,馬小花申請人:華南理工大學(xué)