專利名稱：：用于進(jìn)行組織保存的組合物以及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及組織保存。發(fā)明的
背景技術(shù)：
：心臟移植的主要障礙在于供體心臟的可利用性有限以及供體心臟的質(zhì)量不好，這種質(zhì)量不好歸因于在存儲(chǔ)過(guò)程中的退化。利用當(dāng)前的實(shí)踐以及保存溶液，所述的保存時(shí)間的極限是4-6個(gè)小時(shí)，并且在美國(guó)，所有的心臟異體移植物都是從剛剛發(fā)生腦死亡的、參與到生命支撐體系中的心臟搏動(dòng)的供體處獲得的。而且，當(dāng)前的實(shí)踐導(dǎo)致了被移植心臟的加速的血管病變的顯著發(fā)病率的產(chǎn)生。照此，目前緊迫的需要一類長(zhǎng)期存儲(chǔ)的溶液，能夠保存供體心臟的結(jié)構(gòu)完整性以及生理學(xué)完整性。發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種溶液，所述的溶液在進(jìn)行植入之前對(duì)一種從人類處收集的器官或者從與人類相容處收集的器官進(jìn)行保存，所述的收集到的器官需要在一段保存過(guò)程中或者鑒定過(guò)程中被保存或者復(fù)蘇，其中所述的植入包括移植或者復(fù)植。本發(fā)明所述的溶液還能夠允許所述的器官在所述的保存過(guò)程中被進(jìn)行運(yùn)輸，從而改變其地理位置。本發(fā)明提供了用于進(jìn)行器官存儲(chǔ)的經(jīng)過(guò)改進(jìn)的組合物、方法、以及裝置，所述的組合物、方法、以及裝置保存了所述器官的功能完整性，并且重建了無(wú)功能性器官或者退化器官的功能。增加心臟停搏(NBH)供體的使用以及更長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存供體心臟能夠在本質(zhì)上增加所述的供體庫(kù)的大小，并且允許供體心臟在更長(zhǎng)的距離內(nèi)進(jìn)行運(yùn)輸，從而增強(qiáng)接受者的可利用性。作為所述的經(jīng)過(guò)改進(jìn)的存儲(chǔ)方法的結(jié)果，完整無(wú)缺的、具有功能性冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮的心臟的移植能夠使血管病變最小化，所述的血管病變是在使用當(dāng)前的技術(shù)進(jìn)行心臟移植之后發(fā)生的。本發(fā)明提供了用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物。所述的組合物中含有一種生理鹽溶液以及下述組分中的至少一種，至少兩種，至少三種，至少四種，或者至少五種用于生成三磷酸腺苷(ATP)的底物，用于消耗氨的底物，用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑，用于淬火(quench)活性氧組分的試劑，和/或用于平衡組織水腫/脫水的試劑。在一個(gè)方面，所述的組合物中含有一種生理鹽溶液以及一種用于生成三磷酸腺苷的底物。任選的，所述的用于生成三磷酸腺苷的底物是磷酸肌酸，肌酸乙酯，二肌酸蘋(píng)果酸，肌酸葡糖酸，果糖，蔗糖，核糖，己糖或者戊糖?？梢赃x擇的，所述的用于生成三磷酸腺苷的底物是肌酸乳清酸，一水合肌酸，腺苷，或者葡萄糖。所述的用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物中含有一種生理鹽溶液以及一種用于消耗氨的化合物。任選的，所述的用于消耗氨的化合物是鳥(niǎo)氨酸或者羧基磷酸?？梢赃x擇的，所述的用于消耗氨的化合物是L-瓜氨酸蘋(píng)果酸。在另外一個(gè)方面，所述的用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物中含有一種生理鹽5溶液以及一種用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑。在一個(gè)方面，所述的用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑是組氨酸，谷氨酰胺，色氨酸，賴氨酸，或者?；撬??？梢赃x擇的，所述的用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑是碳酸氫鈉，Tris-羥甲基氨基甲烷(THAM)，或者L-肌肽。任選的，所述的用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物中含有一種生理鹽溶液以及一種用于淬火活性氧組分的試劑。在一個(gè)方面，所述的用于淬火活性氧組分的試劑是二硫蘇糖醇(DTT)，13-巰基乙醇，乙酰半胱氨酸，a-硫辛酸，?；撬?，白藜蘆醇(Resveratrol)，葉黃素，硒，甲硫氨酸，或者生育酚/維生素E。在另外一個(gè)方面，所述的用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物中含有一種生理鹽溶液以及一種用于平衡組織的水分含量(水腫/脫水)的試劑。所述的用于平衡組織的水分含量的試劑包括甘露醇，尿素，丙三醇，異山梨醇，或者五水合蜜三糖。任選的，所述的用于平衡組織的水分含量的試劑是五水合蜜三糖的penta片段。所述的溶液被用來(lái)對(duì)存活的供體心臟、用于移植而臨時(shí)存儲(chǔ)的存活的供體心臟、以及尸體供體的心臟進(jìn)行復(fù)蘇，并且允許對(duì)存活的、存儲(chǔ)的、或者尸體的器官例如心臟進(jìn)行延長(zhǎng)的臨時(shí)存儲(chǔ)。存活的供體心臟以及尸體心臟的心肌細(xì)胞的功能得以保存，并且所述的存活的供體心臟以及尸體心臟的冠狀動(dòng)脈以及腔室的內(nèi)皮功能也得以保存。當(dāng)在死亡之后的短時(shí)間內(nèi)將所述的器官與本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行接觸并且將器官存儲(chǔ)于所述的溶液中時(shí)，所述的溶液還能夠介導(dǎo)代謝性變化以及退化性變化的逆轉(zhuǎn)，并且能夠?qū)λ鲂呐K(以及其他器官)中的細(xì)胞死亡以及細(xì)胞存活能力的惡化進(jìn)行抑制。通過(guò)維持三磷酸腺苷的水平，線粒體的功能，心肌細(xì)胞的收縮性，預(yù)防酸中毒，抑制細(xì)胞凋亡的誘發(fā)，從而維持代謝功能。通過(guò)調(diào)節(jié)鈣離子、鈉離子、鉀離子以及氯離子來(lái)維持變力性(inotrophy)以及變松性(lusitropy)。所述溶液的緩沖能力能夠預(yù)防酸中毒。所述的溶液保存了所述器官中的鈣動(dòng)員，一氧化氮的生成，并且維持了所述冠狀動(dòng)脈的內(nèi)皮依賴性血管收縮功能以及內(nèi)皮不依賴性血管收縮功能。通過(guò)調(diào)節(jié)離子濃度以及水通道蛋白(叫u即orin)通道，在再灌注時(shí)預(yù)防了脫水以及隨后的過(guò)度水合(水腫)，并且預(yù)防了缺血性再灌注損傷。所述的溶液以及存儲(chǔ)系統(tǒng)是一種自我持續(xù)性的再生系統(tǒng)，用于生成三磷酸腺苷以及一氧化氮的底物。所述的組合物能夠預(yù)防缺血性再灌注損傷。這項(xiàng)功能是由抗壞血酸以及谷胱甘肽，肉堿(通過(guò)預(yù)防乙酰輔酶A的積累，所述的積累能夠?qū)е伦杂苫鵢缺血性再灌注損傷的發(fā)生)，肌肽以及a-硫辛酸來(lái)介導(dǎo)的，上述物質(zhì)均是自由基(羥基自由基，純態(tài)氧，過(guò)氧化氫自由基以及超氧化物)清除劑。所述的組合物中含有氯化鈣，氯化鉀，磷酸鉀，硫酸鎂，碳酸氫鈉，D-葡萄糖，腺苷，谷胱甘肽，胰島素，以及用于預(yù)防器官和/或組織的脫水和/或水腫的試劑。所述的溶液中還含有其他的鹽類包括氯化鎂，氯化鈉，和/或磷酸氫二鈉。通過(guò)對(duì)鈉離子(較少)以及鉀離子(較多)(即，同滲容摩)進(jìn)行調(diào)節(jié)，可以對(duì)所述心臟的脫水(在存儲(chǔ)過(guò)程中)以及經(jīng)過(guò)再灌注之后的過(guò)度水合或者水腫進(jìn)行控制。所述的溶液是輕微低滲的以及輕微低同滲容摩(hyposmolar)的，因此能夠在存儲(chǔ)過(guò)程中驅(qū)使水進(jìn)入所述的心臟內(nèi)并且在再灌注過(guò)程中進(jìn)行平衡。外部氯化鉀濃度的增加彌補(bǔ)了所述的鉀電流(接近于能斯特電勢(shì))并且防止鉀隨水向外運(yùn)動(dòng)(鉀離子的水合殼層)。還可以通過(guò)對(duì)所述的水通道蛋白通道進(jìn)行的調(diào)節(jié)來(lái)對(duì)脫水/水腫進(jìn)行控制，其中所述的對(duì)于水通道蛋白通道進(jìn)行的調(diào)節(jié)是經(jīng)由所述的離子電流完成的。同樣的，外部的鉀可能延遲/降低了鈣離子向所述細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)動(dòng)，因而經(jīng)由鈣激活的鉀通道來(lái)預(yù)防脫水。例如，所述的溶液中含有125毫摩鈉以及7毫摩鉀。在一個(gè)方面，所述的組合物中含有氯化f丐，氯化鉀，磷酸鉀，硫酸鎂，碳酸氫鈉，D-葡萄糖，腺苷，谷胱甘肽，胰島素，以及一種用于生成三磷酸腺苷的底物。例如，所述的用于生成三磷酸腺苷的底物是肌酸乳清酸，一水合肌酸，腺苷，或者葡萄糖。二氯乙酸通過(guò)對(duì)能夠使丙酮酸脫氫酶(PDH)發(fā)生磷酸化的激酶進(jìn)行抑制致使其失活來(lái)增加三磷酸腺苷的生成。二氯乙酸通過(guò)促進(jìn)所述的三羧酸(TCA)循環(huán)來(lái)誘導(dǎo)三磷酸腺苷的合成。在所述的瓜氨酸蘋(píng)果酸-精氨酸循環(huán)中，蘋(píng)果酸鹽(從瓜氨酸中分裂出來(lái))進(jìn)入所述的三羧酸循環(huán)從而生成更多的三磷酸腺苷。同樣的，瓜氨酸蘋(píng)果酸轉(zhuǎn)化成精氨酸以及延胡索酸鹽；延胡索酸鹽進(jìn)入所述的三羧酸循環(huán)從而促進(jìn)更多的三磷酸腺苷的生成。在三羧酸循環(huán)中，蘋(píng)果酸鹽以及延胡索酸鹽都能夠引發(fā)更多三磷酸腺苷的生成。所述的組合物中含有氯化鈣，氯化鉀，磷酸鉀，硫酸鎂，碳酸氫鈉，D-葡萄糖，腺苷，谷胱甘肽，胰島素，以及一種用于緩沖酸度的試劑。用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑是肌酸乳清酸，其通過(guò)促進(jìn)肌肽的合成來(lái)緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度。一水合肌酸通過(guò)增加能量的產(chǎn)生并且減少乳酸鹽的積累來(lái)緩沖酸度。酸度還可以通過(guò)碳酸氫鈉、Tris-三羥甲基氨基甲烷(THAM)、以及L-肌肽來(lái)進(jìn)行緩沖(細(xì)胞內(nèi)酸度)。二氯乙酸通過(guò)降低被保存的器官中的乳酸鹽的水平來(lái)控制酸度，因此所述的溶液也如此丄-肉堿能夠促進(jìn)心肌乳酸鹽的產(chǎn)量的降低，因此能夠降低酸度。所述的組合物中含有氯化鈣，氯化鉀，磷酸鉀，硫酸鎂，碳酸氫鈉，D-葡萄糖，腺苷，谷胱甘肽，胰島素，以及一種用于消耗氨的底物。例如，所述的用于消耗氨的底物是L-瓜氨酸蘋(píng)果酸。氨與羧基磷酸混合后形成瓜氨酸蘋(píng)果酸，這形成了一氧化氮以及三磷酸腺苷的底物。所述的組合物中含有氯化鈣，氯化鉀，磷酸鉀，硫酸鎂，碳酸氫鈉，D-葡萄糖，腺苷，谷胱甘肽，胰島素，以及一種用于預(yù)防器官和/或組織的脫水和/或水腫的試劑，一種用于生成三磷酸腺苷的底物，一種用于緩沖酸度的試劑，以及一種用于消耗氨的底物。優(yōu)選的，所述的組合物中包括下述化合物以及濃度大約0.147克/升氯化鈣(1毫摩)升氯化鉀(7毫摩)升磷酸鉀(一鉀鹽)(0.44毫摩)升氯化鎂(六水合物)(0.50毫摩)大約O.大約o.大約o.大約o.大約7.大約O.大約O.大約l.大約O.大約O.大約O.大約O.大約O.大約o.52克/06克/11克/125克30克/35克/05克/98克/27克/46克/18克/21克/27克/30克//升硫酸鎂(五水合物)(0.50毫摩)升氯化鈉(125毫摩)升碳酸氫鈉(4.2毫摩)升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)(0.19升葡萄糖/D-葡萄糖(ll毫摩)升腺苷(1毫摩)升谷胱甘肽(還原態(tài)；1.5毫摩)升抗壞血酸(1毫摩)升L-精氨酸(l毫摩)升肌酸乳清酸(0.5毫摩)升一水合肌酸(2毫摩)應(yīng))7;摩儲(chǔ)備液，12.1克/升)大約O.15克/升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸(l毫摩)大約O.08克/升二氯乙酸(0.5毫摩)大約2.3克/升L-肌肽(10毫摩)大約2.0克/升L-肉堿(10毫摩)大約0.021克/升a-硫辛酸(0.1毫摩)大約0.50毫升/升胰島素(10毫克/毫升)用于調(diào)整pH的THAM(Tris-羥甲基氨基甲烷；100(大約1升蒸餾水)。將上述的成分混合在一起，從而形成一種溶液。在混合了其余的成分之后，任選的加入胰島素。例如，在將一種器官浸沒(méi)于所述的溶液之前的幾分鐘的時(shí)間里或者幾小時(shí)的時(shí)間里加入胰島素，所述的幾分鐘時(shí)間例如是0.5分鐘，1分鐘，2分鐘，5分鐘，所述的幾小時(shí)時(shí)間例如是0.5小時(shí)，1小時(shí)，2小時(shí)，3小時(shí)，4小時(shí)，或者5小時(shí)。—種優(yōu)選的組合物中包括存在于下述劑量范圍內(nèi)的化合物，從而形成一種具有期望比例的組合物0.1-0.5克/升氯化鈣25-0.75克/升氯化鉀(7毫摩)升磷酸鉀(一鉀鹽)升氯化鎂(六水合物)01-0.5克/01-0.5克/01-0.5克/0-10.0克/01-0.5克/01-0.5克/0-5.0克/01-0.5克/01-0.75克01-0.5克/01-0.5克/01-0.5克/01-0.5克/01-0.5克/01-0.5克/23-2.3克/20-2.0克/0021-0.21克25-0.75毫升z升硫酸鎂(五水合物)z升氯化鈉(125毫摩)z升碳酸氫鈉z升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)升D-葡萄糖/葡萄糖(ll毫摩)z升腺苷(1毫摩)/升谷胱甘肽(還原態(tài)；1.5毫摩)z升抗壞血酸(1毫摩)z升L-精氨酸(l毫摩)z升肌酸乳清酸(0.5毫摩)z升一水合肌酸(2毫摩)z升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸(l毫摩)z升二氯乙酸(0.5毫摩)z升L-肌肽(1-10毫摩)z升L-肉堿(1-10毫摩)升a-硫辛酸(O.Ol-l.O毫摩)升胰島素ao毫克/毫升)用于調(diào)整pH的Tris-羥甲基氨基甲烷(0.01-3.0升蒸餾水)。例如，所述的溶液中含有大約0.14克/升氯化鈣大約O.大約o.大約o.大約o.大約7.大約O.大約O.大約l.大約O.大約O.大約O.大約O.大約O.大約o.大約o.大約o.大約2.大約2.52克06克10克10克31克35克05克98克27克46克18克21克27克30克15克08克3克/0克/021克升氯化鉀(7毫摩)升磷酸鉀(一鉀鹽)升氯化鎂(六水合物)升硫酸鎂(五水合物)z升氯化鈉(125毫摩)z升碳酸氫鈉z升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)z升葡萄糖/D-葡萄糖(ll毫摩)z升腺苷(1毫摩)z升谷胱甘肽(還原態(tài)；1.5毫摩)z升抗壞血酸(1毫摩)z升L-精氨酸(l毫摩)z升肌酸乳清酸(0.5毫摩)z升一水合肌酸(2毫摩)z升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸(l毫摩)z升二氯乙酸(0.5毫摩)升L-肌肽(IO毫摩)升L-肉堿(10毫摩)升a-硫辛酸(0.l毫摩)折)大約O.大約0.50毫升/升胰島素(10毫克用于調(diào)整pH的Tris-羥甲基氨基甲烷(大約1升蒸餾水)。上文中所描述的溶液被用來(lái)維持器官的生理學(xué)完整性。所述的器官或者組織與其接觸了至少1個(gè)小時(shí)的時(shí)間，其中所述的器官或者組織優(yōu)選是從人類機(jī)體或者動(dòng)物機(jī)體中分離出來(lái)的。或者，所述的器官或者組織是在原位進(jìn)行灌注的，即，在被從所述的機(jī)體中分離出來(lái)之前進(jìn)行灌注。例如，在尸體或者存活的患者體內(nèi)使所述的器官或者組織在原位發(fā)生接觸。所述的器官或者組織與所述的溶液接觸的時(shí)間從大約l-5個(gè)小時(shí)，例如4個(gè)小時(shí)，直至幾天的時(shí)間，例如l天，2天，5天，8天，10天或者更長(zhǎng)的時(shí)間。使用所述的溶液能夠順利的對(duì)各種不同的器官以及組織類型進(jìn)行存儲(chǔ)以及復(fù)蘇。例如，所述的器官或者組織是心臟。其他適合的組織/器官包括腎臟，肝臟，胃，脾臟，胰腺，肺臟，大腦，眼睛，腸，膀胱，皮膚或者真皮組織，血管例如靜脈或者動(dòng)脈，心臟瓣膜，精子，以及卵母細(xì)胞。所述的維持或者恢復(fù)器官或者組織的生理學(xué)完整性的方法是通過(guò)下述手段來(lái)實(shí)現(xiàn)的將所述的器官或者組織與上文中所描述的溶液進(jìn)行一段時(shí)間的接觸，這樣一來(lái)酯酶活性在>150任意熒光光子單位的范圍內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)一氧化氮(NO)濃度在大于l納摩的范圍內(nèi)，并且所述器官中的所述細(xì)胞的線粒體膜的膜電位比>1.00。所述的溶液能夠保存完整的心肌細(xì)胞收縮蛋白(肌漿球蛋白重鏈(HC)，肌漿球蛋白輕鏈(LC)，acitinin，肌動(dòng)蛋白，肌鈣蛋白C);內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)，窖蛋白(caveolin)，以及瑞斯托霉素輔因子(vWF)，例如，正如利用Western以及免疫印跡法所評(píng)價(jià)的，然而使用先前的溶液對(duì)例如9心臟這樣的組織/器官進(jìn)行存儲(chǔ)能夠?qū)е吕缂{球蛋白重鏈這樣的蛋白發(fā)生降解，從而危及到所述被移植器官的完整性以及功能。這些組分的缺失或者破碎標(biāo)志著所述器官的退化。臨床參數(shù)包括左心室舒張末壓(LVEDP)0-30毫米汞柱，血壓(BP)100-140/60-100，pH>6.8。所述的溶液還能夠抑制器官狹窄，斑塊，凝結(jié)的形成，以及粥瘤(動(dòng)脈硬化癥)的形成，這在移植案例中是一種嚴(yán)重的問(wèn)題，其中所述的器官狹窄、斑塊、凝結(jié)的形成歸因于內(nèi)皮的損傷。同樣存在于本發(fā)明中的是一種用于鑒定器官或者組織的生理學(xué)完整性的方法。將所述的器官或者組織與上文中所描述的溶液(或者另外一種溶液)進(jìn)行接觸，并且對(duì)濃度水平或者下述參數(shù)中的一種或者多種的活性進(jìn)行檢測(cè)或者鑒定。需要進(jìn)行鑒定的生物學(xué)指數(shù)包括酯酶，一氧化氮，或者細(xì)胞膜電位。酯酶活性在>150任意(熒光光子)單位的范圍內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)一氧化氮(NO)濃度在大于1納摩的范圍內(nèi)，并且所述器官中的所述細(xì)胞的線粒體膜的膜電位比>1.00(極化的與去極化的比例，其中，大于1標(biāo)志著所述的線粒體膜是極化的并且所述的組織是健康的)。上述的數(shù)值標(biāo)志著所述的器官或者組織適合被移植到作為接受者的存活的哺乳動(dòng)物體內(nèi)，其中所述的器官或者組織例如是心臟。所述的用于制備存儲(chǔ)/復(fù)蘇溶液的組合物任選的以下面所列出的成分/劑量或者其成倍增加的劑量被包裝在試劑盒內(nèi)，即，擴(kuò)大規(guī)模，從而制備出2倍，3倍，5倍，10倍，20倍劑量的所述溶液。一種范例性的試劑盒中含有0099]0100]0101]0102]0103]0104]0105]0106]0107]0108]0109]0110]0112]0113]0114]0115]0116]0117]0118]0119]0120]1-0.5克/升氯化鈣25-0.75克/升氯化鉀(7毫摩)01-0.5克/升磷酸鉀(一鉀鹽)01-0.5克/升氯化鎂(六水合物)01-0.5克/升硫酸鎂(五水合物)0-10.0克/升氯化鈉(125毫摩)01-0.5克/升碳酸氫鈉01-0.5克/升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)0-5.0克/升D-葡萄糖(11毫摩)01-0.5克/升腺苷(l毫摩)01-0.75克/升谷胱甘肽(還原態(tài)；1.501-0.5克/升抗壞血酸(1毫摩)01-0.5克/升L-精氨酸(l毫摩)01-0.5克/升肌酸乳清酸(0.5毫摩)01-0.5克/升一水合肌酸(2毫摩)01-0.5克/升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸(101-0.5克/升二氯乙酸(0.5毫摩)23-2.3克/升L-肌肽(1-10毫摩)20-2.0克/升L-肉堿(1-10毫摩)0021-0.21克/升a-硫辛酸(0.01-1.0毫摩)25-0.75毫升/升胰島素(10毫克/毫升)應(yīng))用于調(diào)整pH的Tris-羥甲基氨基甲烷10這些成分與使用說(shuō)明書(shū)一同進(jìn)行包裝，并且將它們與0.01-2.0升蒸餾水進(jìn)行混合。如上文中所述，在使用之前的短時(shí)間里任選的加入胰島素，即，在向所述的溶液中加入器官之前的短時(shí)間里。將所述的試劑盒包裝，并且在不含有無(wú)菌水成分的條件下進(jìn)行出售。例如，所述的試劑盒中含有0122]大約0.14克/升氯化牽丐升氯化鉀(7毫摩)升磷酸鉀(一鉀鹽)0123]0124]0125]0126]0127]0128]0129]0130]0131]0132]0133]0134]0135]0136]0137]0138]0139]0140]0141]0142]0143]0144]大約0.52克/大約0.06克/大約0.10克/升氯化鎂(六水合物)大約0.10克/升硫酸鎂(五水合物)大約7.31克/升氯化鈉(125毫摩)大約0.35克/升碳酸氫鈉大約0.05克/升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)大約1.98克/升葡萄糖/D-葡萄糖(11毫摩)大約0.27克/升腺苷(1毫摩)大約0.46克/升谷胱甘肽(還原態(tài)；1.5毫摩)大約0.18克/升抗壞血酸(1毫摩)大約0.21克/升L-精氨酸(1毫摩)大約0.27克/升肌酸乳清酸(0.5毫摩)大約0.30克/升一水合肌酸(2毫摩)大約0.15克/升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸(1毫摩)大約0.08克/升二氯乙酸(0.5毫摩)大約2.3克/升L-肌肽(IO毫摩)大約2.0克/升L-肉堿(10毫摩)021克/升a-硫辛酸(0.1毫摩)折)大約O.大約0.50毫升/升胰島素(10毫克用于調(diào)整pH的Tris-羥甲基氨基甲烷任選的，所述的溶液是納米尺寸的，從而增加了穿透所述的細(xì)胞膜的效率。納米尺寸指的是所述的顆粒尺寸被降低到亞微型的范圍，所述的最終的顆粒尺寸通常為i-io納米(nm)。所述的顆粒尺寸的降低引發(fā)了所述溶液穿透所述的細(xì)胞膜的效率發(fā)生了顯著的提高。在一個(gè)方面，所述的效率被提高，使得所述溶液的至少20%，至少25%，至少50%，至少75%，或者至少100%能夠穿透所述的細(xì)胞膜。本發(fā)明提供了對(duì)本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在將所述的溶液用于本發(fā)明所描述的方法之前進(jìn)行的?；蛘?，本發(fā)明提供了對(duì)水進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在加入所述溶液的其他化合物/試劑之前進(jìn)行的。在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了對(duì)水進(jìn)行納米尺寸處理以及對(duì)所述溶液中的每種化合物/試劑進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在混合到溶液之前分別進(jìn)行的。在一個(gè)方面，所述的組合物中包括以納米范圍的尺寸存在的水包(waterpacket)或者水團(tuán)(watercluster)。任選的，所述的水包或者水團(tuán)為1_10納米(nm)，l-25納米，25-50納米，50-75納米，75—100納米，100—200納米，200—500納米，或者500-999納米。11本發(fā)明還提供了測(cè)量離體心臟的pH的方法，所述的方法包括將所述的心臟與本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行接觸，并且測(cè)定所述的離體心臟的PH，其中pH在6.8至7.0的范圍內(nèi)標(biāo)志著所述的心臟適合進(jìn)行移植。本發(fā)明還提供了測(cè)量本發(fā)明所述溶液的pH的方法，所述的方法包括將一個(gè)離體的心臟與本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行接觸，并且測(cè)定本發(fā)明所述溶液的pH，其中pH在6.8至7.0的范圍內(nèi)標(biāo)志著所述的心臟適合進(jìn)行移植。除了用于存儲(chǔ)/保存器官以及組織的溶液以及方法之外，本發(fā)明還包括一種灌注裝置。所述裝置的元件包括一個(gè)腔室組件，一個(gè)灌注回路，以及一個(gè)溫度控制單元，其中所述的灌注回路包括一個(gè)第一導(dǎo)管，用于向所述的器官提供所述的溶液。所述的裝置包括一個(gè)固定化的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧酸激酶以及乳酸脫氫酶(LDH)柱，使其成為一個(gè)自我持續(xù)性的系統(tǒng)。例如，從心室中流出的所述溶液可能含有一些乳酸，所述的乳酸隨后被所述的乳酸脫氫酶不斷的轉(zhuǎn)化成丙酮酸鹽，隨著所述的溶液一起回流至所述的腔室。之后，丙酮酸鹽進(jìn)行所述的三羧酸循環(huán)，用于連續(xù)的生成三磷酸腺苷。相類似的，在所述的三羧酸循環(huán)中生成的草酰乙酸鹽被磷酸烯醇式丙酮酸羧酸激酶轉(zhuǎn)化成磷酸烯醇式丙酮酸鹽。磷酸烯醇式丙酮酸鹽轉(zhuǎn)化成丙酮酸鹽生成性三磷酸腺苷。同樣的，丙酮酸鹽進(jìn)行所述的三羧酸循環(huán)中，從而生成更多的三磷酸腺苷。因此，所述的裝置允許所述的循環(huán)對(duì)底物進(jìn)行連續(xù)的再生。能量代謝在所述的系統(tǒng)中得以維持，直至全部的葡萄糖和/或脂肪酸被消耗掉，這僅能在長(zhǎng)時(shí)間的存儲(chǔ)情況中發(fā)生，例如，超過(guò)大約2周或者IO天的時(shí)間。例如，所述的裝置適用于脈管組織中，例如心臟以及血管，以及腎臟，肝臟，胃，脾臟，胰腺，肺臟，大腦，眼睛，腸，以及膀胱。—種用于維護(hù)或者復(fù)蘇哺乳動(dòng)物器官的系統(tǒng)包括一個(gè)容器，用于保持所述的器官與上文中所描述的組合物或者溶液進(jìn)行接觸，一種遞送工具，用于將所述的組合物遞送至所述器官的至少一個(gè)脈管中，一種分離工具，用于將所述的組合物轉(zhuǎn)移出所述的器官，溫度控制工具，氧化工具，過(guò)濾工具，以及流動(dòng)控制工具。所述的遞送工具，分離工具，溫度工具，氧化工具，過(guò)濾工具，以及流動(dòng)控制工具提供或者重建了一種生理學(xué)可接受性的哺乳動(dòng)物環(huán)境。一種自我持續(xù)性的系統(tǒng)包括下述元件一氧化氮的持續(xù)生產(chǎn)，三磷酸腺苷的持續(xù)生成，酸中毒以及氫離子的緩沖，以及氨的淬火。所述的元件之間優(yōu)選是相互連接的。本發(fā)明的其他特征以及優(yōu)點(diǎn)將通過(guò)下述對(duì)于優(yōu)選實(shí)施方式的描述以及權(quán)利要求而變得顯而易見(jiàn)。本發(fā)明中所引用的全部參考文獻(xiàn)均在此引入作為參考。附圖的簡(jiǎn)要描述附圖1是一系列的顯微鏡照片，描述的是在收集之后的0分鐘，15分鐘以及120分鐘時(shí)，左心室(LV)的前室壁以及后室壁中的心室心肌細(xì)胞的酯酶活性(綠色)以及細(xì)胞壞死(紅色)。附圖2是一個(gè)柱狀圖表，其表明了在收集之后的0分鐘，15分鐘以及120分鐘時(shí)，左心室(LV)的前室壁以及后室壁中的心室心肌細(xì)胞的酯酶活性。附圖3是一系列的顯微鏡照片，表示的是在收集之后的0分鐘，15分鐘以及120分鐘時(shí)，左心室(LV)的前室壁以及后室壁中的心室心肌細(xì)胞線粒體的極化作用(紅色)與去極化作用(綠色)的比例。附圖4是一個(gè)柱狀圖表，表示的是在收集之后的0分鐘，15分鐘，3Q分鐘以及120分鐘時(shí)，左心室(LV)的前室壁以及后室壁中的心室心肌細(xì)胞線粒體的極化作用與去極化作用的比例。附圖5是一系列的顯微鏡照片，表示的是豬心臟的左心室后室壁的壞死(紅色)以及酯酶活性(綠色)，其中所述的豬心臟在本發(fā)明所述的溶液中培養(yǎng)了4個(gè)小時(shí)，或者在施爾生液(Celsior)中培養(yǎng)了4個(gè)小時(shí)，前者被標(biāo)注為"Lazarus"。附圖6是一個(gè)繪圖，表示的是在每個(gè)試驗(yàn)組中的左心室前心肌層以及后心肌層中的酯酶活性，所述的每個(gè)試驗(yàn)組即，在施爾生液中進(jìn)行了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)；在Lazarus中進(jìn)行了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)；在Lazarus中進(jìn)行了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)的心臟停搏供體(NBHD);以及在Lazarus中進(jìn)行了10天的存儲(chǔ)的心臟停搏供體。附圖7是一個(gè)柱狀圖表，識(shí)別出的是在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)1小時(shí)，2小時(shí)，3小時(shí)，4小時(shí)，以及5小時(shí)的存儲(chǔ)之后所述的心臟停搏供體模型的左心室的前室壁以及后室壁中的酯酶活性。附圖8是一系列的圖像，表明的是在施爾生液或者Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)0分鐘，60分鐘，120分鐘，180分鐘，以及240分鐘的存儲(chǔ)之后，所述的左心室前室壁中的心肌細(xì)胞線粒體的紅色(極化作用)與綠色(去極化作用)的比例。附圖9是一系列的顯微鏡照片，表示的是豬心臟的動(dòng)脈左前降支中的壞死(紅色)以及酯酶活性(綠色)，其中所述的豬心臟在Lazarus或者施爾生液中進(jìn)行了4個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)。附圖10是一系列的圖像，描述的是在利用緩激肽進(jìn)行剌激之前以及之后，使用施爾生液或者Lazarus處理過(guò)的豬心臟動(dòng)脈左前降支中的鈣的動(dòng)員(紅色)以及一氧化氮的生成(綠色)。附圖11是一個(gè)繪圖，表示的是在利用緩激肽進(jìn)行剌激之后，使用施爾生液處理過(guò)的豬心臟動(dòng)脈左前降支中的鈣的動(dòng)員以及一氧化氮的生成。附圖12是一個(gè)柱狀圖表，表明的是在利用緩激肽進(jìn)行剌激之后，使用Lazarus處理4個(gè)小時(shí)的豬心臟(死后1小時(shí))動(dòng)脈左前降支中的鈣的動(dòng)員以及一氧化氮的生成。附圖13是一系列的圖像，描述的是在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)4個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)之后，心肌層中的肌漿球蛋白以及肌動(dòng)蛋白的免疫熒光標(biāo)記。附圖14是一系列的顯微鏡照片，表明的是在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)4個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)之后，心肌層中的肌鈣蛋白C以及Actinin的免疫熒光標(biāo)記。附圖15是一幅Western印跡的照片，表示的是死后的豬的心臟的前側(cè)活體組織切片(A)以及后側(cè)活體組織切片(P)中肌漿球蛋白輕鏈蛋白的存在，其中所述的豬心臟在Lazarus或者施爾生液中存儲(chǔ)了240分鐘。附圖16是一幅Western印跡的照片，表示的是死后的豬的心臟的前側(cè)活體組織切片(A)以及后側(cè)活體組織切片(P)中Actinin的存在，其中所述的豬心臟在Lazarus或者施爾生液中存儲(chǔ)了240分鐘。附圖17是一系列的顯微鏡照片，表示的是在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)4個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)之后，內(nèi)皮中的內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eN0S)的免疫熒光標(biāo)記。附圖18是一系列的圖像，描述的是心肌層以及左主干冠狀動(dòng)脈(死后1小時(shí))的壞死(紅色)以及酯酶活性(綠色)，其中所述的心肌層以及左主干冠狀動(dòng)脈在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)了io天的存儲(chǔ)。附圖19是柱狀圖表，表明的是前側(cè)心肌層以及后側(cè)心肌層(死后1小時(shí))的酯酶活性，其中所述的心肌層在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)了10天的存儲(chǔ)。附圖20是一系列的顯微鏡照片，表示的是在利用緩激肽進(jìn)行剌激之后，使用Lazarus處理了10天的豬心臟動(dòng)脈左前降支中的鈣的動(dòng)員(紅色)以及一氧化氮的生成(綠色)。附圖21是繪圖，表示的是在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)10天的存儲(chǔ)之后，肝臟的酯酶活性。附圖22是柱狀圖表，表示的是在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)10天的存儲(chǔ)之后，肝臟壞死的百分率。附圖23是圖表，表示的是在存儲(chǔ)過(guò)程中心臟中的能量代謝。附圖24是圖表，描述的是在存儲(chǔ)過(guò)程中心臟中氨的生成。附圖25是圖表，表明的是在存儲(chǔ)過(guò)程中，肌酸對(duì)于心臟中的三磷酸腺苷的生成以及代謝機(jī)制的維持所起到的作用。附圖26是用于心臟的體外復(fù)蘇以及保存裝置的線條圖。附圖27是用于心臟的體外保存裝置的線條圖，所述的裝置正處于非工作狀態(tài)。附圖28是圖表，描述的是一種試驗(yàn)設(shè)計(jì)。附圖29是一幅圖畫(huà)，描述的是一種Gardos通道。附圖30是一幅水通道蛋白的圖畫(huà)(水通道)。發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明提供了一種新的用于供體心臟的存儲(chǔ)溶液，所述的存儲(chǔ)溶液考慮到了在被用于移植的器官的存儲(chǔ)過(guò)程中能夠發(fā)生的各種生物化學(xué)過(guò)程。所述的溶液允許進(jìn)行足夠長(zhǎng)的保存時(shí)間，使用心臟停搏(NBH)供體，并且能夠?yàn)槟切┙邮苄呐K移植的患者提供改進(jìn)的臨床成果。所述的溶液中包括作用于那些在器官的存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生的各種損傷過(guò)程(在下文中列出)的組分。盡管在所述的領(lǐng)域中進(jìn)行了30年的廣泛研究，但用于對(duì)進(jìn)行移植的供體心臟進(jìn)行保存的技術(shù)發(fā)生了非常小的變化。在心臟移植中，主要的障礙在于經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的存儲(chǔ)之后，供體心臟的可利用性有限以及供體心臟的質(zhì)量不好。利用當(dāng)前的實(shí)踐以及保存溶液，所述的保存時(shí)間的極限是4-6個(gè)小時(shí)(參見(jiàn)FerreraR等人于1994年在AnnThoracSurg《胸外科手術(shù)年報(bào)》57:1233-1239中發(fā)表的文章；OshimaK等人于1999年在JofHeartandLungTrans《心臟以及肺臟移植雜志》18(9):852-861中發(fā)表的文章)，并且在美國(guó)，所有的心臟異體移植物都是從剛剛發(fā)生腦死亡的、參與到生命支撐體系中的心臟搏動(dòng)的供體處獲得的。作為這種器官庫(kù)的嚴(yán)重局限性的結(jié)果以及在保存上的時(shí)間限制的結(jié)果，全部的心臟移植候選者中有10-40%在等待新器官的過(guò)程中死亡。除此之外，當(dāng)前，被移植的心臟中的加速的血管病變具有顯著的發(fā)病率，這在一定程度上歸因于經(jīng)過(guò)存儲(chǔ)之后的供體心臟的質(zhì)量不好。在一段較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)存儲(chǔ)供體心臟的能力能夠增加所述的供體庫(kù)的大小，并且允許供體心臟經(jīng)過(guò)更長(zhǎng)的距離運(yùn)輸給適合的接受者。而且，較好的保存可能允許使用心臟停搏供體(NBHD)，并且進(jìn)一步的增加所述的供體庫(kù)。最后，對(duì)經(jīng)過(guò)存儲(chǔ)之后的供體心臟的情況14進(jìn)行改善，能夠改善接受者的臨床結(jié)果。在移植之前對(duì)于收集到的供體人類心臟進(jìn)行的保存承擔(dān)著保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、保護(hù)心肌細(xì)胞功能、以及機(jī)械收縮性偶聯(lián)的任務(wù)，并且關(guān)系到被移植心臟的長(zhǎng)期存活。盡管在延長(zhǎng)器官的存活能力以及存儲(chǔ)能力方面的科學(xué)以及技術(shù)存在發(fā)展，但在過(guò)去的20年里在供體心臟保存方面的臨床實(shí)踐上并沒(méi)有做出多少改變。當(dāng)前可利用的保存方案使用低體溫停循環(huán)以及簡(jiǎn)單的存儲(chǔ)方法，使用各種基于晶體的心臟停搏溶液以及保存溶液，并且受到4-6個(gè)小時(shí)的保存時(shí)間長(zhǎng)度的限制。除此之外，這些技術(shù)不可改變的受到供體心臟的全腦缺血周期的影響，這可能導(dǎo)致功能頓抑或者代謝頓抑，從而引發(fā)缺血性再灌注損傷。除此之外，如今一項(xiàng)成功的長(zhǎng)時(shí)期心臟移植事業(yè)的兩個(gè)主要的局限性在于缺乏足夠的心臟供體，以滿足大量患者的要求，所述的患者可能會(huì)從移植中受到益處，以及相對(duì)高比率的長(zhǎng)期移植心臟的失效，這種失效主要?dú)w因于加速的動(dòng)脈粥樣硬化疾病。用于收集并且移植人類心臟的外科手術(shù)技術(shù)已經(jīng)建立的非常完善。所述的被植出的心臟在存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生的事情通常標(biāo)志著所述移植的成功結(jié)果。因此，目前緊迫的需要一種用于存儲(chǔ)的溶液以及環(huán)境。本發(fā)明提供了存儲(chǔ)溶液，存儲(chǔ)方法以及存儲(chǔ)裝置，它們能夠維持被植出的供體心臟的結(jié)構(gòu)完整性以及功能完整性，并且因此能夠延長(zhǎng)在進(jìn)行外科手術(shù)再植入之前的體外存儲(chǔ)時(shí)間。這項(xiàng)新近發(fā)展的技術(shù)的應(yīng)用能夠?qū)νＶ寡h(huán)的心臟進(jìn)行復(fù)蘇，所述的停止循環(huán)發(fā)生在30分鐘的時(shí)間內(nèi)。這樣一來(lái)，由于非心臟外傷原因在搶救室中死亡的患者能夠成為用于移植的潛在的心臟供體。本發(fā)明提供了一種對(duì)收集到的人類心臟(或者其他器官)進(jìn)行保存的系統(tǒng)，所述的人類心臟(或者其他器官)在進(jìn)行植入和/或移植之前的保存以及鑒定階段中需要被保存或者復(fù)蘇。這個(gè)系統(tǒng)允許器官以存活態(tài)被保存于復(fù)溫溫度下(并且如果需要的話，可以被運(yùn)送到變化的地理位置中，用于進(jìn)行移植)，因此潛在的增加了這些具有此類需求的器官所具有的極端受限的可利用性。為了以存活態(tài)保存所述的心臟，本發(fā)明考慮到了代謝的厭氧模式以及好氧模式，以及對(duì)于內(nèi)生性舒血管神經(jīng)(vasodialator)和能量來(lái)源的需求。本發(fā)明所描述的保存溶液在一段延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)維持了所述器官的存活能力，所述的延長(zhǎng)的時(shí)間是例如，大約1小時(shí)，大約2小時(shí)，大約3小時(shí)，大約4小時(shí)，大約8小時(shí)，大約10小時(shí)，大約15小時(shí)，大約20小時(shí)，或者大約1天。本發(fā)明所述的溶液提供了適合于心肌細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞的能量代謝的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在另外一個(gè)方面，所述的溶液提供了保護(hù)性成分，能夠幫助所述的組織/細(xì)胞抵抗由長(zhǎng)期保存帶來(lái)的損傷效應(yīng)。而且，所述的溶液提供了用于抵抗經(jīng)由移植產(chǎn)生的干燥以及再水合水腫的保護(hù)。本發(fā)明還提供了一種灌注系統(tǒng)，所述的灌注系統(tǒng)不僅允許所述的溶液經(jīng)由所述的冠狀脈管系統(tǒng)進(jìn)行循環(huán)，還允許所述的溶液經(jīng)由所述的靜態(tài)心臟的所有間隔進(jìn)行循環(huán)。這確保了所述的富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的溶液從內(nèi)部以及外部浸沒(méi)了整個(gè)器官。本發(fā)明還提供了一種方法，所述的方法能夠在進(jìn)行移植之前將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及中間代謝產(chǎn)物逐漸的灌注到所述的心臟中。心臟的這種灌注方式將所述的靜態(tài)心臟在生理學(xué)上轉(zhuǎn)化為恢復(fù)的竇性心律，而不會(huì)產(chǎn)生有害的攣縮以及缺血性再灌注損傷。因此，本發(fā)明所述的組合物、方法、系統(tǒng)/裝置以及媒介能夠在保存的過(guò)程中對(duì)所述的供體心臟進(jìn)行保存、復(fù)蘇以及維持，其中所述的供體心臟是處于靜態(tài)或者搏動(dòng)狀態(tài)的，從而確保所述保存介質(zhì)的均勻分布。對(duì)于搏動(dòng)狀態(tài)的心臟的維持能夠進(jìn)一步的維持供體心臟正常的代謝，收縮，以及內(nèi)皮功能，其中所述的供體心臟經(jīng)過(guò)了當(dāng)前4-6個(gè)小時(shí)的低體溫停循環(huán)以及存儲(chǔ)的窗口期(window)。本發(fā)明提供了一種新的用于供體心臟的存儲(chǔ)溶液，所述的存儲(chǔ)溶液考慮到了在被用于移植的器官的存儲(chǔ)過(guò)程中能夠發(fā)生的各種生物化學(xué)過(guò)程。本發(fā)明所述的溶液將能夠允許進(jìn)行足夠長(zhǎng)的保存時(shí)間，使用心臟停搏(NBH)供體，并且能夠?yàn)槟切┙邮苄呐K移植的患者提供改進(jìn)的臨床成果。下面描述的是在器官的存儲(chǔ)過(guò)程中能夠發(fā)生的某些可能的損傷過(guò)程，以及本發(fā)明所述的溶液是怎樣作用于這些損傷過(guò)程的。在存儲(chǔ)過(guò)程中生成活性氧組分；然而，存在于所述溶液中的抗壞血酸以及還原態(tài)的谷胱甘肽(即，還原劑)在存儲(chǔ)過(guò)程中消耗氧自由基。在存儲(chǔ)過(guò)程中氫離子的生成能夠?qū)е滤嶂卸?；然而，所述溶液中含有具有緩沖活性的試劑。三磷酸腺苷在存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生了減少；然而，所述溶液中含有用于生成三磷酸腺苷的底物并且能夠維持所述心臟的代謝機(jī)制。作為存儲(chǔ)過(guò)程中氨基酸分解的結(jié)果，能夠生成氨；然而，所述溶液中含有用于消耗氨的底物并且能夠生成用于進(jìn)行厭氧代謝/好氧代謝的底物。存儲(chǔ)同樣能夠?qū)е滤銎鞴俚拿撍?水腫；然而，所述溶液中的離子組分被進(jìn)行了處理，其目的在于維持所述細(xì)胞內(nèi)的正常的水含量，從而預(yù)防所述的再灌注肌細(xì)胞發(fā)生水腫。這同樣為肌細(xì)胞的收縮提供了一種理想的環(huán)境。附圖23-25描述的是所述的心臟在存儲(chǔ)過(guò)程中的某些代謝途徑，以及本發(fā)明所述的溶液是怎樣作用于這些過(guò)程的。附圖23描述的是所述的心臟在存儲(chǔ)過(guò)程中的能量代謝途徑，而附圖24描述的是關(guān)于所述心臟中的氨的生成的途徑。附圖25描述的是所述心臟的能量代謝，其中涉及到三磷酸腺苷的存儲(chǔ)以及氫離子的生成。存儲(chǔ)過(guò)程中的心肌脫水在器官存儲(chǔ)中一個(gè)顯著的問(wèn)題是脫水。例如，在心臟組織中，心肌脫水經(jīng)由下述代謝過(guò)程發(fā)生。細(xì)胞中三磷酸腺苷的減少導(dǎo)致鈉離子的增加，進(jìn)而導(dǎo)致鈉離子的滲漏以及鈉-鉀三磷酸腺苷酶活性的降低。鈉-鈣交換劑反向的引起細(xì)胞中鈣離子的堵塞。隨后，鈣離子的進(jìn)一步增加導(dǎo)致鈣離子誘導(dǎo)的鈣的釋放，所述的釋放是從肌質(zhì)網(wǎng)(SR)中釋放出來(lái)的。鈣離子還誘導(dǎo)了所述的GARDOS通道，所述的通道導(dǎo)致鉀離子以及水的缺失(附圖29)。水通道蛋白是水從所述的細(xì)胞中流出的途徑，并且經(jīng)由再灌注流回到所述的細(xì)胞中(附圖30)。為了抵消上述提及的事件的進(jìn)展，所述的溶液中含有相對(duì)低的鈉離子濃度(大約125毫摩)以及些許較高的鉀離子濃度(7毫摩)。通過(guò)預(yù)防心肌層的脫水，一旦重新建立了灌注，本發(fā)明所述的溶液能夠防止所述細(xì)胞對(duì)于水的快速吸收。在本文中所描述的發(fā)明之前，當(dāng)前可以利用的器官存儲(chǔ)溶液無(wú)一能夠充分的對(duì)活化的半通道和/或水通道蛋白的潛在任務(wù)產(chǎn)生作用，其中所述的潛在任務(wù)是在所述被存儲(chǔ)的器官中誘發(fā)水腫以及離子失衡，其中所述的被存儲(chǔ)的器官特別是指心臟。間隙連接蛋白基因Co皿exin43含有半通道，所述的半通道同樣也是間隙連接的組分，并且已經(jīng)證明在心臟的心肌細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞中存在水通道蛋白(AQP1)。這些通道的活化可能對(duì)處于存儲(chǔ)過(guò)程中的器官的離子失衡、水腫、以及硬度的形成產(chǎn)生重要的作用。細(xì)胞體積的增加(水腫)以及硬度的增加能夠引發(fā)所述的器官在移植時(shí)發(fā)生失效，或者可能需要顯著的藥理學(xué)干涉，用以逆轉(zhuǎn)這種趨勢(shì)直至所述的器官能夠發(fā)揮功能。本發(fā)明能夠作用于與這些通道的活化相關(guān)的問(wèn)題，從而對(duì)被存儲(chǔ)的器官的可存活性保存進(jìn)行改進(jìn)。對(duì)本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行優(yōu)化能夠預(yù)防半通道的活化，從而避免在器官的存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生水腫，離子失衡以及能量損耗。這些要素在體外存儲(chǔ)過(guò)程中提供了一種有利的環(huán)境以及對(duì)細(xì)胞的支撐。正如下文所述的實(shí)施例中所表示的，對(duì)于長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)于本發(fā)明所述的溶液中的心臟搏動(dòng)供體(BHD)心臟以及心臟停搏供體(NBHD)心臟的心肌細(xì)胞以及內(nèi)皮的結(jié)構(gòu)以及功能上所產(chǎn)生的保護(hù)，證明了這種設(shè)想。外部的鈣的生理學(xué)濃度的降低(<1-1.3毫摩)，谷胱甘肽的還原(改變的氧化還原電位)，能量狀態(tài)(<三磷酸腺苷)，磷酸化作用，或者有絲分裂原活化蛋白(MAP)激酶的活化，或者活性氧組分以及同滲容摩的任意增加均導(dǎo)致半通道的開(kāi)放。當(dāng)心臟或者器官在存儲(chǔ)過(guò)程中所遭遇到的全部這些參數(shù)，都可以進(jìn)行彼此間相互獨(dú)立的操作，用于活化所述的半通道。由于非選擇性而導(dǎo)致的半通道的開(kāi)放，允許外部的鈉離子、氯離子、以及鈣離子自由的流至所述的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，并且允許鉀離子自由的從所述的細(xì)胞質(zhì)中流出。由于建立了過(guò)量的細(xì)胞內(nèi)負(fù)電荷(陰性帶電的大分子)，內(nèi)部氯離子濃度的增加可能需要經(jīng)由水通道蛋白和/或半通道進(jìn)行水的吸收，從而維持等滲條件。隨后所述通道的關(guān)閉可能建立一種具有較高穩(wěn)態(tài)的細(xì)胞體積。然而，為了對(duì)所述增加的體積進(jìn)行平衡并且避免破裂，所述的細(xì)胞通過(guò)重新排列所述的細(xì)胞骨架來(lái)進(jìn)行補(bǔ)償，所述的重新排列產(chǎn)生了細(xì)胞的硬度。細(xì)胞體積的增加(水腫)以及硬度的增加能夠引發(fā)所述的器官在移植時(shí)發(fā)生失效，或者可能需要顯著的藥理學(xué)干涉，用以逆轉(zhuǎn)這種趨勢(shì)直至所述的器官能夠發(fā)揮功能。半通道的活化導(dǎo)致所述的心臟在存儲(chǔ)過(guò)程中發(fā)生水和離子的積累以及水腫。本發(fā)明所述溶液中的組分，包括生理學(xué)濃度的鈣，將能夠預(yù)防在所述被存儲(chǔ)的器官中發(fā)生上述提及的有害變化中的任意一項(xiàng)。任選的，所述的溶液是納米尺寸的，從而增加了所述溶液穿透所述細(xì)胞膜的效率，可以使用本領(lǐng)域中任何已知的方法制成納米尺寸，包括那些在美國(guó)專利No.6，521，248以及No.7，198，254中所描述的方法，上述文獻(xiàn)被完整的引入作為參考。納米尺寸指的是所述的顆粒尺寸被降低到亞微型的范圍，所述的最終的顆粒尺寸通常為1-10納米(nm)。所述的顆粒尺寸的降低引發(fā)了所述溶液穿透所述的細(xì)胞膜的效率發(fā)生了顯著的提高。在一個(gè)方面，所述的效率被提高，使得所述溶液的至少20%，至少25%，至少50%，至少75%，或者至少100%能夠穿透所述的細(xì)胞膜。本發(fā)明提供了對(duì)本發(fā)明所述的溶液進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在將所述的溶液用于本發(fā)明所描述的方法之前進(jìn)行的?；蛘?，本發(fā)明提供了對(duì)水進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在加入所述溶液的其他化合物/試劑之前進(jìn)行的。在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了對(duì)水進(jìn)行納米尺寸處理以及對(duì)所述溶液中的每種化合物/試劑進(jìn)行納米尺寸處理的方法，所述的處理是在混合到溶液之前分別進(jìn)行的。在一個(gè)方面，所述的組合物中包括以納米范圍的尺寸存在的水包或者水團(tuán)。任選的，所述的水包或者水團(tuán)為1-10納米，1-25納米，25-50納米，50-75納米，75-100納米，100-200納米，200-500納米，或者500-999納米。存儲(chǔ)時(shí)間的增加顯著的改善了經(jīng)過(guò)存儲(chǔ)之后的供體心臟/器官的狀況，并且允許使用心臟停搏供體，這將對(duì)移植外科手術(shù)的當(dāng)前景象產(chǎn)生意義深遠(yuǎn)的影響。如果使用所述的溶液代替當(dāng)前的保存溶液，將可以產(chǎn)生即刻的影響。對(duì)于心肌以及內(nèi)皮的結(jié)構(gòu)以及功能進(jìn)行細(xì)胞水平的評(píng)價(jià)表明，溶液能夠?qū)崿F(xiàn)這些目標(biāo)中的每一個(gè)。如果在條件完全相同的情況下與施爾生液(一種普遍使用的對(duì)心臟移植物進(jìn)行存儲(chǔ)的溶液)進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)存儲(chǔ)于本發(fā)明所述的溶液中時(shí)，所述的心肌層的結(jié)構(gòu)以及功能發(fā)生了顯著的改善，其中本發(fā)明所述的溶液被稱為"Lazarus"。此外，在死后1小時(shí)(心臟停搏供體)以及經(jīng)過(guò)10天或者兩周的存儲(chǔ)之后，這些參數(shù)仍然被保存完好。實(shí)施例1.一般的方法進(jìn)行試驗(yàn)來(lái)對(duì)比Lazarus以及施爾生液(一種在心臟移植中當(dāng)前被使用的保存溶液)，所述的對(duì)比涉及它們對(duì)于所述的心肌層以及冠狀內(nèi)皮層所產(chǎn)生的作用，使用各種顯微鏡分析以及生物化學(xué)分析進(jìn)行評(píng)價(jià)。使用搏動(dòng)的心臟模型以及心臟停搏供體模型進(jìn)行對(duì)比。所述的Lazarus溶液中含有下述物質(zhì)對(duì)于每個(gè)動(dòng)物而言，在所述試驗(yàn)的清晨記錄體重。向每個(gè)動(dòng)物進(jìn)行4-6毫克/千克泰拉瑞(Telazol)以及2毫克/千克塞拉嗪(Xylazine)的肌肉內(nèi)注射(IM)，之后進(jìn)行插管并且與一個(gè)提供100%氧氣的呼吸器進(jìn)行連接。利用18標(biāo)準(zhǔn)刻度(gauge)的針頭穿透耳靜脈從而獲得一個(gè)靜脈內(nèi)通路。在所述試驗(yàn)的過(guò)程中利用1_2%的異氟烷維持麻醉狀態(tài)并且放置心電圖(EKG)導(dǎo)線用于進(jìn)行連續(xù)的監(jiān)測(cè)。暴露出右側(cè)股動(dòng)脈并且使用一個(gè)18標(biāo)準(zhǔn)刻度(gauge)的導(dǎo)管進(jìn)行插管，通過(guò)PowerLab對(duì)血壓進(jìn)行連續(xù)的監(jiān)測(cè)。進(jìn)行胸骨切口并且打開(kāi)所述的心包膜，并且使用2-0蠶絲縫合線將其提升至皮膚。接下來(lái)，插入Kuri心肌pH探針，并且利用一個(gè)存在于右心房?jī)?nèi)的探針作為參考探針。首先放置一個(gè)左心室(LV)后室壁電極并且利用3-0鉻縫合線進(jìn)行固定。隨后以同樣的方式對(duì)所述的左心室前室壁電極進(jìn)行固定。允許探針進(jìn)行5分鐘的平衡，并且在貫穿所述試驗(yàn)的余下部分中使用所述的pH監(jiān)測(cè)器對(duì)心肌的pH以及溫度進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在試驗(yàn)組1以及2中，經(jīng)由所述的動(dòng)脈通道使用300毫克/千克的肝磷脂。等待5-10分鐘使所述的肝磷脂發(fā)揮作用后，在所述的升主動(dòng)脈內(nèi)放置一個(gè)12標(biāo)準(zhǔn)刻度(gauge)的導(dǎo)管，用于進(jìn)行心肌麻醉液的灌注。進(jìn)行主動(dòng)脈阻斷，并且經(jīng)由所述的主動(dòng)脈心肌麻醉液導(dǎo)管在4t:下施用心肌麻醉液1升(三只豬接受施爾生液，三只豬接受500cc15毫摩的氯化鉀Lazarus/500cc7毫摩的氯化鉀Lazarus)。所述的心肌麻醉液經(jīng)由所述的下腔靜脈(IVC)以及左上肺靜脈流出。當(dāng)以150毫摩汞柱的水平施用完1升的溶液之后，快速收集所述的心臟并且提取所述的左心室前室壁以及后室壁的活組織切片，送至所述的顯微鏡實(shí)驗(yàn)室用以進(jìn)行鑒定。在試驗(yàn)組3中(心臟停搏供體_死后1小時(shí)，Lazarus)，在放置所述的主動(dòng)脈導(dǎo)管之前不施用肝磷脂，并且經(jīng)由所述的導(dǎo)管對(duì)豬進(jìn)行抽血，用來(lái)模擬外傷性死亡。之后允許所述的心臟停止循環(huán)并在l個(gè)小時(shí)之后進(jìn)行收集。隨后，在4t:下將每個(gè)心臟浸泡于施爾生液(三只豬)或者Lazarus(六只豬——三只來(lái)自于心臟搏動(dòng)模型而三只來(lái)自于心臟停搏供體模型)四小時(shí)。在存儲(chǔ)過(guò)程中對(duì)心肌的pH以及溫度進(jìn)行連續(xù)的監(jiān)測(cè)，并且在l小時(shí)的時(shí)間間隔處提取所述的前室壁以及后室壁的活組織切片，直至到達(dá)收集過(guò)后的四個(gè)小時(shí)。同樣的，在收集過(guò)后的四小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)處，從所述的動(dòng)脈左前降支中切割一個(gè)兩厘米的片段，并且送至顯微鏡實(shí)驗(yàn)室，用于進(jìn)行生物化學(xué)鑒定。在所述的心臟停搏供體模型中，將所述的心臟在Lazarus溶液中額外存儲(chǔ)10天，隨后再次進(jìn)行活組織切片檢查。同樣從所述的心臟停搏供體組中收集肝臟，存儲(chǔ)io天后進(jìn)行活組織切片檢查。表1:活組織切片檢查以及pH測(cè)量的時(shí)間表<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>存活/死亡檢測(cè)按照下述方法完成顯微鏡分析以及生物化學(xué)分析。使用存活/死亡檢測(cè)(MolecularProbes(分子探針)，Eugene，0R)對(duì)來(lái)自于每個(gè)活組織切片的心肌層以及內(nèi)皮層的結(jié)構(gòu)的存活能力進(jìn)行檢測(cè)。使用鈣黃綠素-AM(綠色)以及溴乙非啶同型二聚體(紅色)對(duì)心臟活組織切片進(jìn)行標(biāo)記，并且利用多光子顯微鏡方法進(jìn)行圖像的觀察。為所述的心肌層樣本以及冠狀樣本裝載具有膜透過(guò)性的鈣黃綠素-AM酯以及具有膜不透過(guò)性的溴乙非啶同型二聚體。所述的鈣黃綠素在細(xì)胞中進(jìn)行累積并且通過(guò)所述細(xì)胞的酯酶進(jìn)行了轉(zhuǎn)化，從而生成一種存在于存活的細(xì)胞中的綠色熒光素(所述檢測(cè)中的"存活(Live)"部分)。采用Metamorph軟件對(duì)其進(jìn)行量化，從而計(jì)算出熒光信號(hào)的平均強(qiáng)度。所述的具有膜不透過(guò)性的溴乙非啶同型二聚體染料進(jìn)入妥協(xié)細(xì)胞中并且插入到核酸之中，從而生成一種紅色的熒光素(所述檢測(cè)中的"死亡(Dead)"部分)。對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且將它們占細(xì)胞總數(shù)的比例記錄下來(lái)。細(xì)胞內(nèi)一氧化氮濃度的測(cè)定按照先前的研究中所描述的方法，使用二氨基熒光素(DAF)對(duì)血管內(nèi)皮一氧化氮的生成進(jìn)行測(cè)定(參見(jiàn)ThatteH等人于1999年在Proc.Natl.Acad.Sci《美國(guó)科學(xué)院院刊》96(22):12583中發(fā)表的文章；NakatsuboN等人于1998年在FEBSLett《歐洲生物化學(xué)學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)》427(2):263中發(fā)表的文章)。為所述的組織裝載具有膜透過(guò)性的4，5-二氨基熒光素，其可以被內(nèi)皮酯酶進(jìn)行粘著，從而形成一種膜不透過(guò)性的形式。隨后這種染料能夠與細(xì)胞內(nèi)生成的一氧化氮發(fā)生反應(yīng)，從而生成明亮的熒光性的三唑基熒光素衍生物。使用Hank平衡鹽溶液(HBSS)對(duì)所述的樣本進(jìn)行洗滌并且將其安裝在顯微鏡下。對(duì)一氧化氮的基線生成進(jìn)行鑒定，之后使用IO微摩的緩激肽對(duì)所述的冠狀內(nèi)皮層進(jìn)行剌激。使用細(xì)胞內(nèi)一氧化氮的濃度作為內(nèi)皮健康的指數(shù)。線粒體膜電位試劑盒檢測(cè)(JC-1Assay):對(duì)線粒體膜電位的鑒定使用線粒體膜電位試劑盒(JC-1)膜電位染料對(duì)心肌細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。在488納米處對(duì)熒光素進(jìn)行激發(fā)，并且使用窄帶濾光片測(cè)定520納米以及585納米處的發(fā)射量。當(dāng)線粒體維持膜的極化作用時(shí)，JC-1形成j-集合體(紅色)，而當(dāng)膜發(fā)生去極化作用時(shí)，其解離成單體(綠色)，其中所述的去極化作用能夠?qū)е录?xì)胞色素C以及預(yù)凋亡信號(hào)因子的滲漏。利用多光子顯微鏡方法對(duì)來(lái)自于上述檢測(cè)中的圖像進(jìn)行實(shí)時(shí)的鑒定。使用標(biāo)準(zhǔn)的Western印跡以及免疫熒光檢驗(yàn)法對(duì)所述心臟的收縮機(jī)制的結(jié)構(gòu)完整性進(jìn)行測(cè)定，并且使用多光子顯微鏡方法完成確認(rèn)檢測(cè)。多光子顯微鏡方法以及共聚焦顯微鏡方法按照下述方法進(jìn)行多光子顯微鏡方法以及共聚焦顯微鏡方法。使用BioRadMRC1024ES多光子成像系統(tǒng)以及Zeiss(蔡司)AxiovertS100倒置式顯微鏡對(duì)熒光素模式以及透射光模式進(jìn)行量化以及圖像研究，其中所述的多光子成像系統(tǒng)偶聯(lián)了一個(gè)鎖定模式的Spectra-Physics可調(diào)節(jié)性MaiTai鈦-藍(lán)寶石激光系統(tǒng)(脈沖持續(xù)時(shí)間<80飛秒，重復(fù)率82百萬(wàn)赫茲(MHz))，而所述的倒置式顯微鏡裝配有一個(gè)高質(zhì)量的25X/1.2NA空氣，水浸40X/1.2NA63X/1.2NA以及100X/1.4NA油浸物鏡。多光子成像的主要優(yōu)點(diǎn)包括減少熒光團(tuán)的光漂白，減少本底熒光，減少對(duì)存活細(xì)胞的光損傷，并且與傳統(tǒng)的共聚焦顯微鏡方法所具有的可能的成像深度相比(深度50iO，它增加了在樣本的更深處(深度大約1000iO進(jìn)行成像的能力。所述的技術(shù)允許獲得同時(shí)的明視場(chǎng)圖像，以及對(duì)形態(tài)變化的顯像和量化。多光子技術(shù)具有的這些獨(dú)特的特點(diǎn)為所述的系統(tǒng)提供了多功能性，允許通過(guò)各種廣泛存在的不同的熒光素探針對(duì)存活的或者經(jīng)過(guò)固定化培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞(EC)以及完整組織進(jìn)行成像，用于調(diào)查各種生理學(xué)過(guò)程，其中所述的完整組織例如是人類的心臟組織以及血管。所述的BioRadMRC1024ES系統(tǒng)裝配有一個(gè)傳統(tǒng)的氪_氬激光以及一個(gè)飛秒鈦_藍(lán)寶石激光，其中所述的氪_氬激光具有488納米、56S納米以及647納米的發(fā)射光線，而所述的鈦_藍(lán)寶石激光被調(diào)節(jié)在735-990納米之間。通過(guò)同時(shí)使用所述的傳統(tǒng)激光以及鈦_藍(lán)寶石激光，可以按照比例量度對(duì)線粒體膜電位以及細(xì)胞溶液游離性鈣離子進(jìn)行成像(通過(guò)使用例如，鈣橙染料)，并且同時(shí)對(duì)生成的一氧化氮(使用二氨基熒光素-2DA)以及整個(gè)靜脈的直徑以及體積發(fā)生的變化進(jìn)行觀察。在波長(zhǎng)488/568下對(duì)所述的酯酶活性進(jìn)行測(cè)量以及標(biāo)準(zhǔn)化處理，光電倍增管(PMT)1使用激光功率被削弱90%的2/864，而光電倍增管2使用激光功率被削弱90%的2/1297，以及卡爾曼3濾波器(規(guī)則系統(tǒng))。使用MetaMorph成像處理軟件(UniversalImaging,PA)對(duì)所述的熒光素進(jìn)行量化。實(shí)施例2:Lazarus溶液對(duì)于組織以及器官對(duì)照組所產(chǎn)生的作用的鑒定對(duì)所述的對(duì)照組(心臟衰變)進(jìn)行的存活/死亡檢測(cè)的結(jié)果在附圖1以及附圖2中被表示出來(lái)。在所述的對(duì)照組中，在經(jīng)過(guò)120分鐘的時(shí)間后，左心室(LV)的前室壁以及后室壁的心室心肌細(xì)胞的酯酶活性(綠色熒光素)發(fā)生了時(shí)間依賴性的降低，而所述心室心肌細(xì)胞的細(xì)胞死亡/壞死(紅色熒光素)發(fā)生了時(shí)間依賴性的增加(附圖1以及附圖2)。附圖2描述的是一個(gè)繪圖，代表著所述的對(duì)照組(心臟衰變)在時(shí)間結(jié)束后發(fā)生的酯酶活性的降低。而且，用于對(duì)所述的對(duì)照組的線粒體膜電位進(jìn)行鑒定的線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒檢測(cè)(JC-1)的結(jié)果表明，所述的心室心肌細(xì)胞線粒體膜存在時(shí)間依賴性的去極化作用(附圖3:在每組中，左欄代表的是極化作用(紅色)；在每組中，右欄代表的是去極化作用(綠色))。正如附圖4中的代表性繪圖所示，在所述對(duì)照組中的線粒體發(fā)生了增加的去極化作用。試驗(yàn)組下述試驗(yàn)的目的在于將本發(fā)明所述的Lazarus溶液與施爾生液進(jìn)行比較，所述的施爾生液是一種在心臟移植中普遍使用的存儲(chǔ)溶液。正如上文以及附圖28中所描述的，將每個(gè)豬心臟在上述指明的存儲(chǔ)溶液(施爾生或者Lazarus)中保存4小時(shí)。與所述的Lazarus心臟搏動(dòng)模型以及Lazarus死亡1小時(shí)(心臟停搏)組相比，所述的施爾生組表現(xiàn)出更少的酯酶活性(附圖5，6，以及7)，更多的壞死(附圖5)，以及更強(qiáng)的線粒體膜的去極化作用(附圖8)(分別通過(guò)存活/死亡檢測(cè)以及線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒檢測(cè))。正如附圖5中所示，在所述的施爾生組表現(xiàn)出增加的壞死(紅色；每組中的左欄)以及降低的酯酶活性(綠色；每組中的右欄)的同時(shí)，兩個(gè)Lazarus組表現(xiàn)出最小程度的壞死(紅色)以及升高的酯酶活性(綠色)。同時(shí)對(duì)于在不改變?nèi)芤旱那闆r下Lazarus對(duì)豬的停搏心臟保存10天的能力進(jìn)行了鑒定(附圖6)。附圖6中的結(jié)果以繪圖的形式描述了在每個(gè)試驗(yàn)組中的所述的酯酶活性，這表明，與所述的施爾生組相比，在每個(gè)Lazarus組中存在更多的存活細(xì)胞，這意味著Lazarus在保存所述的豬心臟方面更加有效。接下來(lái)，對(duì)于在l(TC下在Lazarus溶液中存儲(chǔ)了4個(gè)小時(shí)的死后1小時(shí)的尸體心臟中的酯酶活性進(jìn)行了測(cè)定。正如附圖7中所示，在將所述的心臟停搏供體模型在Lazarus中存儲(chǔ)4個(gè)小時(shí)之后，與基線相比的酯酶活性以及穩(wěn)定性有所增加。線粒體膜電位能夠提供能量，依靠這種能量，在所述的克雷布斯循環(huán)中能夠生成三磷酸腺苷。這樣一來(lái)，經(jīng)由上文中所描述的線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)檢測(cè)，可以對(duì)豬心臟的線粒體膜電位進(jìn)行測(cè)定，其中所述的豬心臟在存儲(chǔ)溶液中進(jìn)行了4個(gè)小時(shí)的保存。紅色(極化作用；每組中的左欄)與綠色(去極化作用；每組中的右欄)的比例大于1，這表示著在心肌細(xì)胞中具有健康的線粒體，即，具備生成三磷酸腺苷的條件。正如附圖8中所示，與所述的施爾生組相比，在每個(gè)Lazarus組中的豬心臟的線粒體膜電位維持的更好。而且，正如附圖8中所示，在所述的Lazarus組中經(jīng)過(guò)240分鐘的時(shí)間后，線粒體膜電位的極化作用被恢復(fù)了。同樣對(duì)于豬心臟的動(dòng)脈左前降支(LAD)進(jìn)行所述的存活/死亡檢測(cè)，其中所述的豬心臟在溶液中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的保存。正如附圖9中所示，在所述的施爾生組中，所述的冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)顯著的壞死(紅色；每組中的左欄)，而在兩個(gè)Lazarus組中均出現(xiàn)最小程度的壞死。與所述的施爾生組相比，每個(gè)Lazarus組中的酯酶活性(綠色；每組中的右欄)同樣也更加強(qiáng)健。在使用緩激肽對(duì)豬心臟的動(dòng)脈左前降支(LAD)進(jìn)行剌激之前以及之后，對(duì)內(nèi)皮功能(鈣的動(dòng)員以及一氧化氮(NO)的生成)進(jìn)行鑒定，其中所述的豬心臟在溶液中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的保存。為應(yīng)答于緩激肽而出現(xiàn)的鈣動(dòng)員的增加以及一氧化氮生成的增加表明，在兩個(gè)Lazarus組中，內(nèi)皮功能被得以更好的保存(附圖10，11，12)。正如附圖10中所示，兩個(gè)Lazarus組在基線處以及在經(jīng)過(guò)緩激肽的剌激之后(分別為之前以及之后)具有更強(qiáng)的鈣動(dòng)員(紅色；每組中的頂端行)以及更多的一氧化氮的生成(綠色；每組中的底端行)。附圖11是一個(gè)代表性的繪圖，表示的是豬心臟的動(dòng)脈左前降支對(duì)于緩激肽的內(nèi)皮應(yīng)答(鈣的動(dòng)員以及一氧化氮的生成)，其中所述的豬心臟被保存在施爾生液中?；€處的兩個(gè)參數(shù)都小于1.2。附圖12是一個(gè)代表性的繪圖，表示的是心臟停搏供體豬心臟(死后l小時(shí))的動(dòng)脈左前降支對(duì)于緩激肽的內(nèi)皮應(yīng)答(鈣的動(dòng)員以及一氧化氮的生成)，其中所述的豬心臟在Lazarus中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的保存。與附圖11中所示的施爾生心臟搏動(dòng)模型組相比，對(duì)于所述剌激的應(yīng)答更加強(qiáng)健(>2)。這些結(jié)果表明，在Lazarus溶液中保存后的內(nèi)皮功能由于在施爾生液中保存后的內(nèi)皮功能。使用Western印跡檢測(cè)法以及免疫印跡檢測(cè)法進(jìn)行的結(jié)構(gòu)檢測(cè)通過(guò)對(duì)所述心肌層的結(jié)構(gòu)成分進(jìn)行標(biāo)記，來(lái)鑒定在所述心臟中的收縮性部件的結(jié)構(gòu)完整性。將所述的心肌層結(jié)構(gòu)成分進(jìn)行保存(附圖13，14，15，以及16)，其中所述的心肌層結(jié)構(gòu)成分已經(jīng)在Lazarus中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)。附圖13表示的是在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)之后，肌漿球蛋白以及肌動(dòng)蛋白的免疫熒光素標(biāo)記結(jié)果。附圖14表示的是在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)之后，肌鈣蛋白C以及Actinin的免疫熒光素標(biāo)記結(jié)果。正如附圖14中所示，將肌鈣蛋白C以及Actinin(所述收縮機(jī)制中的結(jié)構(gòu)成分)保存在Lazarus中。而且，所述的結(jié)果表明，在所述的Lazarus組中，所述的熒光素呈現(xiàn)出有線條的外觀(在所述的施爾生組中并未出現(xiàn))，這意味著這些結(jié)構(gòu)蛋白在完整的收縮性部件中形成了組織。正如附圖15中所示，針對(duì)1號(hào)、2號(hào)以及3號(hào)豬的死后解剖心臟的前側(cè)活組織切片(A)以及后側(cè)活組織切片(B)進(jìn)行Western印跡分析，其中所述的豬心臟被存儲(chǔ)在Lazarus或者施爾生液中。使用小鼠抗肌槳球蛋白(輕鏈；catftM4401，來(lái)自于Sigma;10%聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE);7.5微克/裝載良好)對(duì)肌漿球蛋白輕鏈蛋白(20kd)進(jìn)行識(shí)別。正如附圖16中所示，針對(duì)2號(hào)豬的死后解剖心臟的前側(cè)活組織切片(A)以及后側(cè)活組織切片(B)進(jìn)行Western印跡分析，其中所述的豬心臟被存儲(chǔ)在Lazarus或者施爾生液中。使用小鼠抗actinin(catft7811，來(lái)自于Sigma;10%聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE);15微克/裝載良好)對(duì)actinin蛋白(100kd)進(jìn)行識(shí)別。與施爾生組相比，在Lazarus中經(jīng)過(guò)存儲(chǔ)后的這些Western印跡呈現(xiàn)出更寬的帶，這說(shuō)明所述的心肌收縮機(jī)制中的兩種結(jié)構(gòu)成分(肌漿球蛋白輕鏈以及Actinin)得到了很好的保存。為了證實(shí)在Lazarus中進(jìn)行保存的內(nèi)皮功能優(yōu)于在施爾生液中進(jìn)行保存的內(nèi)皮功能，對(duì)動(dòng)脈左前降支(LAD)中的內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，其中所述的動(dòng)脈左前降支在施爾生液或者Lazarus中經(jīng)過(guò)了4個(gè)小時(shí)的存儲(chǔ)。內(nèi)皮型一氧化氮合成酶是存在于內(nèi)皮層中負(fù)責(zé)一氧化氮的生成的酶。正如附圖17中所示，與存儲(chǔ)于施爾生液中的心臟相比，被存儲(chǔ)于Lazarus中的心臟的內(nèi)皮層中的內(nèi)皮型一氧化氮合成酶染色更加強(qiáng)健。這些結(jié)果表明，Lazarus在保存內(nèi)皮細(xì)胞方面比施爾生液更加有效。來(lái)自于心臟以及肝臟的10天的數(shù)據(jù)在另外的研究中，對(duì)作為存儲(chǔ)溶液對(duì)心臟以及肝臟進(jìn)行10天存儲(chǔ)的Lazarus進(jìn)行了鑒定。經(jīng)過(guò)10天之后，被存儲(chǔ)于Lazarus中的所述心臟具有最小程度的壞死，強(qiáng)健的酯酶活性(存活/死亡檢測(cè)——附圖18以及19)，以及保存完好的內(nèi)皮功能(附圖20)。而且，被存儲(chǔ)于Lazarus中的所述肝臟同樣具有最小程度的壞死以及強(qiáng)健的酯酶活性(附圖20以及21)。針對(duì)死后1小時(shí)的尸體組的心肌層以及冠狀動(dòng)脈左主干進(jìn)行所述的存活/死亡檢測(cè)，其中所述的心肌層以及冠狀動(dòng)脈左主干在Lazarus中經(jīng)過(guò)了IO天的存儲(chǔ)。正如附圖18中所示，被存儲(chǔ)于Lazarus溶液中10天之后的心肌層以及冠狀動(dòng)脈左主干(死后1小時(shí)尸體解剖)具有最小程度的壞死(紅色；兩組中的左欄)以及顯著的酯酶活性(綠色；兩組中的右欄)，這意味著在Lazarus溶液中進(jìn)行10天的存儲(chǔ)能夠?qū)λ龅男呐K進(jìn)行保存。附圖19是一個(gè)代表性的繪圖，表示的是在Lazarus中經(jīng)過(guò)10天的存儲(chǔ)之后所述的心肌層的酯酶活性的保存。在Lazarus溶液中存儲(chǔ)10天之后，Lazarus對(duì)于酯酶活性的保存能力優(yōu)于在施爾生液中存儲(chǔ)4小時(shí)之后所述施爾生液對(duì)于酯酶活性的保存能力。(直接的比較參見(jiàn)附圖6)。對(duì)使用緩激肽剌激的動(dòng)脈左前降支的內(nèi)皮功能(鈣的動(dòng)員以及一氧化氮的生成)進(jìn)行鑒定，其中所述的動(dòng)脈左前降支在Lazarus中經(jīng)過(guò)了10天的存儲(chǔ)。正如附圖20中所示，Lazarus溶液保存了動(dòng)脈左前降支中的鈣的動(dòng)員(紅色；左欄)以及一氧化氮的生成(綠色；中間欄)，這意味著在Lazarus中經(jīng)過(guò)10天的存儲(chǔ)之后，所述的內(nèi)皮功能被得以保存。附圖21是一個(gè)代表性的繪圖，表示的是在肝臟中被得以保存的酯酶活性，其中所述的肝臟于fC下在Lazarus中經(jīng)過(guò)了10天的存儲(chǔ)。附圖22表示的是肝臟樣本中壞死的平均百分率少于15%，其中所述的肝臟樣本于41:下在Lazarus中經(jīng)過(guò)了IO天的存儲(chǔ)，這意味著在Lazarus溶液中經(jīng)過(guò)10天的存儲(chǔ)之后，所述的肝臟被得以保存。實(shí)施例3:灌泮裝置附圖26以及27描述的是灌注裝置以及系統(tǒng)。附圖26表示的是對(duì)人類心臟進(jìn)行體外復(fù)蘇以及保存的系統(tǒng)。所述的后負(fù)荷球囊泵控制主動(dòng)脈的后負(fù)荷血壓。所述的后負(fù)荷球囊泵任選的被壓力調(diào)節(jié)器或者調(diào)節(jié)閥所替代。將心臟參數(shù)維持在下述范圍內(nèi)后負(fù)荷和/或球囊泵壓力為60-80毫米汞柱；主動(dòng)脈根壓力為40-80毫米汞柱(用于在存儲(chǔ)過(guò)程中進(jìn)行灌注)；流速為100-300cc/分鐘；心臟輸出量(CO)>2升/分鐘；以及血壓(BP)為120-140/60-80毫米汞柱。所述的腔室以及水池(reservoir)中含有所述的溶液，例如，Lazarus溶液。所述系統(tǒng)中有兩個(gè)元件是自我持續(xù)性的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧酸激酶板以及乳酸脫氫酶(LDH)板。按照下述內(nèi)容實(shí)施一種復(fù)蘇(喚醒)心臟的方法1.快速收集心臟并且在非常冰冷的Lazarus(4°C)中利用高濃度的鉀(15毫摩)使所述的心臟停止循環(huán)。2.利用儀器對(duì)所述的心臟進(jìn)行快速處理，維持低溫——即，在室溫下停留最短的時(shí)間。3.轉(zhuǎn)移到過(guò)量的冰冷的Lazarus中并且在4"C下存儲(chǔ)24小時(shí)。次日1.按照需要，確立好血液化學(xué)機(jī)制。2.準(zhǔn)備好冰冷的Lazarus心肌麻醉液，其中含有碳酸氫鈉19毫當(dāng)量(mEq)，氯化鉀18.5毫當(dāng)量，硫酸鎂37毫當(dāng)量/升。3.準(zhǔn)備好未被氧化的血液。4.以4:1的比例混合血液以及Lazarus(確保適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)劑量；即，確認(rèn)最終的鈣濃度，鎂濃度，鉀濃度以及鈉濃度)5.利用#4對(duì)所述的灌注系統(tǒng)進(jìn)行灌注——維持溫度在15-2(TC或者更低6.快速將所述的心臟鉤在所述的設(shè)備內(nèi)；在經(jīng)過(guò)身體檢查之后(顏色，質(zhì)地，可觸知性，水腫/縮水等等)。7.溫度維持在15t:時(shí)，經(jīng)由所述的主動(dòng)脈根對(duì)所述的心臟進(jìn)行灌注，灌注使用的是以4:1的比例存在的未被氧化的血液(紅細(xì)胞壓積10-15%)以及心肌麻醉液(Lazarus，含有碳酸氫鈉19毫當(dāng)量，氯化鉀18.5毫當(dāng)量，硫酸鎂37毫當(dāng)量/升)，在40毫米汞柱的條件下灌注20-30分鐘。8.在2(TC下利用被氧化的血液(紅細(xì)胞壓積>15%)進(jìn)行再灌注，灌注壓力40毫米汞柱，灌注20分鐘。提升所述的灌注壓力至60毫米汞柱并且在30分鐘的時(shí)間內(nèi)將所述的溫度逐步升高至37°C。所述的器官緩慢的升溫至，例如，10°C，18°C，20°C，22。C等等，直至所述的器官達(dá)到37t:。9.在所述試驗(yàn)的過(guò)程中檢查過(guò)度攣縮。10.所述的心臟運(yùn)行至竇性心律，具有正常的心臟輸出量(CO)以及左心室舒張末壓(LVEDP)，收縮/舒張壓。11.進(jìn)行轉(zhuǎn)變，經(jīng)由正常的生理學(xué)途徑對(duì)所述的心臟進(jìn)行灌注，通過(guò)所述的肺靜脈或者左心房(心臟處于工作狀態(tài))。12.將所述的心臟維持在工作狀態(tài)，直至達(dá)到期望的穩(wěn)定態(tài)。13.測(cè)量心臟功能參數(shù)。使用本發(fā)明所述的、在下文中被稱為13-Lazarus溶液的溶液對(duì)所述的心臟進(jìn)行重新啟動(dòng)，其中所述的心臟在a-Lazarus中進(jìn)行了存儲(chǔ)。表2表示的是在P-Lazarus中每種試劑的濃度。使用碳酸氫鈉(8.4%)或者Tris-羥甲基氨基甲烷(THAM)將其pH調(diào)整至7.4，并且維持在21-37°CT。替代性方案1.將所述的心臟鉤在所述的灌注系統(tǒng)中。2.在40-120毫米汞柱下將P-lazarus在所述的心臟中循環(huán)，其中所述的心臟具有非工作狀態(tài)的構(gòu)造(即，經(jīng)由所述的主動(dòng)脈根)，直至所述的灌注液和/或心臟的pH穩(wěn)定在>7.2;這一過(guò)程可能需要花費(fèi)30分鐘或者更久的灌注時(shí)間，來(lái)達(dá)到這種狀態(tài)。3.為了使之能夠發(fā)生，通常按照需要，需要對(duì)所述的循環(huán)P-Lazarus的pH進(jìn)行調(diào)整，所述的調(diào)整使用碳酸氫鈉或者Tris-羥甲基氨基甲烷，依照在線彩色多普勒顯像(CDI)以及血液氣體監(jiān)測(cè)進(jìn)行調(diào)整。一旦達(dá)到所述的穩(wěn)定態(tài)，將所述的循環(huán)13-Lazarus的pH維持在7.4。4.按照需要，依照在線監(jiān)測(cè)結(jié)果，將所述的13-Lazarus濃度，鈣濃度，鉀濃度以及鈉濃度調(diào)整至生理水平。5.—旦所述溶液的pH在7.4下穩(wěn)定了5_10分鐘，緩慢的排放出所述的P-Lazarus，同時(shí)使用血小板以及不含白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)的全血對(duì)其進(jìn)行替代，直至所述的水池中達(dá)到4:1(血液13-lazarus)的配給量。或者，按照需要，這一配給量可以變化為5:o，3:2，2:3，等等。6.—旦所述的系統(tǒng)重新獲得穩(wěn)定態(tài)即電解液以及pH的生理學(xué)水平(在線測(cè)量值)，將灌注血液lazarus的溫度緩慢的升高，每2_5分鐘升高1°C，直至達(dá)到37°C。按照需要，在這段時(shí)間內(nèi)對(duì)所述的電解液以及pH進(jìn)行持續(xù)的調(diào)整。7.—旦所述的溫度達(dá)到28-3(TC，所述的心臟應(yīng)當(dāng)開(kāi)始搏動(dòng)并且當(dāng)所述的溫度被升高至37t:時(shí)，持續(xù)進(jìn)行搏動(dòng)。在這一階段，所述的血液Lazarus混合液可以完全被全血所替代。8.之后可以按照描述的方法將所述的系統(tǒng)轉(zhuǎn)換至工作狀態(tài)，并且按照需要進(jìn)行監(jiān)表2.用于對(duì)心臟進(jìn)行重新啟動(dòng)的13-Lazarus器官保存溶液中的組分<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>附圖27表示的是對(duì)人類心臟進(jìn)行體外保存的系統(tǒng)，其中所述的人類心臟處于非工作狀態(tài)。使用這一系統(tǒng)，器官例如心臟在進(jìn)行復(fù)蘇之前能夠維持達(dá)到io天或者兩周。灌注是經(jīng)由所述的主動(dòng)脈進(jìn)行的，并且維持一種流動(dòng)，例如，直通流動(dòng)或者脈沖流動(dòng)。所述溶液的流動(dòng)抑制了凋亡基因的活化，而所述的流速為大約40毫升/分鐘。將所述的存儲(chǔ)單元保持在4-21°C的溫度下，例如，在4-15°C的范圍內(nèi)。為了維持這樣的溫度，將所述的單元放置在一個(gè)冷卻的腔室或者冰冷的房間內(nèi)?？梢赃x擇的，所述的系統(tǒng)包括一個(gè)熱交換器，用于調(diào)節(jié)并且維持在所期望的溫度下。在一個(gè)方面，在冰冷的溫度下，在本發(fā)明所述的溶液中使用高濃度的鉀離子使所述的心臟停止循環(huán)。優(yōu)選的，存在于所述溶液中的高濃度的鉀離子不會(huì)對(duì)所述心臟的內(nèi)皮層以及離子通道產(chǎn)生傷害。更加優(yōu)選的，從所述心臟中將所述的高濃度鉀離子驅(qū)除出去，從而避免損傷。任選的，存在于本發(fā)明所述溶液中的鎂的濃度是變化的。在另外一個(gè)方面，對(duì)所述搏動(dòng)的心臟的功能性進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而確定所述的心臟是否適合進(jìn)行移植。任選的，對(duì)所述心臟的收縮性和/或所述心臟的pH進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而確定所述的心臟是否適合進(jìn)行移植?？梢赃x擇的，對(duì)所述心臟腔室內(nèi)的壓力和/或體積進(jìn)行測(cè)定，其目的在于對(duì)所述心臟的功能性進(jìn)行評(píng)價(jià)。在一個(gè)方面，本發(fā)明所述的系統(tǒng)能夠?qū)⑺龅慕M織維持在冰冷的溫度下，例如，在4-15°C的范圍內(nèi)。在有規(guī)律的時(shí)間間隔處對(duì)所述溶液的pH進(jìn)行測(cè)定，例如，每1小時(shí)，每2小時(shí)，每4小時(shí)，每8小時(shí)，或者每10小時(shí)。當(dāng)所述的pH下降至低于6.8時(shí)，向所述的系統(tǒng)中加入本發(fā)明所述的新鮮溶液，其目的在于增加浸泡所述組織的所述溶液的pH。重復(fù)進(jìn)行這一過(guò)程，直至所述的pH穩(wěn)定在6.8至7.0左右，這標(biāo)志著存儲(chǔ)于所述組織中的三磷酸腺苷得到了補(bǔ)充。優(yōu)選的，所述的組織是心臟。在一個(gè)方面，當(dāng)所述系統(tǒng)的pH穩(wěn)定在6.8至7.0之間時(shí)，所述的心臟重新啟動(dòng)?？梢赃x擇的，在有規(guī)律的時(shí)間間隔處對(duì)所述組織的pH進(jìn)行測(cè)定，例如，每1小時(shí)，每2小時(shí)，每4小時(shí)，每8小時(shí)，或者每10小時(shí)。優(yōu)選的，所述的組織是心臟。任選的，使用pH電極對(duì)所述心臟的pH進(jìn)行測(cè)定?；蛘?，使用一種光纖探針系統(tǒng)對(duì)所述心臟的pH進(jìn)行測(cè)定。在一個(gè)方面，對(duì)所述心臟的心肌層、前室壁、和/或后室壁的pH進(jìn)行測(cè)定。對(duì)所述組織或者溶液的pH進(jìn)行測(cè)定，用以評(píng)價(jià)所述的組織是否適合進(jìn)行移植。優(yōu)選的，所述的組織是心臟。所述心臟的pH在6.8至7.0之間標(biāo)志著所述的心臟在存儲(chǔ)過(guò)程中得到的充分的保護(hù)。優(yōu)選的，適合進(jìn)行移植的所述心臟的pH在6.8至7.0之間。本發(fā)明還提供了下述內(nèi)容在所述組織/器官的切離、存儲(chǔ)、或者復(fù)蘇的過(guò)程中對(duì)所述組織或者溶液的PH進(jìn)行測(cè)定。優(yōu)選的，所述的組織/器官是心臟。在另外一個(gè)方面，對(duì)所述心臟腔室內(nèi)的壓力進(jìn)行測(cè)定。任選的，對(duì)所述心臟的心室壓力進(jìn)行測(cè)定。在一個(gè)方面，使用聚酯薄膜(Mylar)導(dǎo)管對(duì)所述的壓力進(jìn)行測(cè)定。在一個(gè)方面，將所述的心臟存儲(chǔ)于本發(fā)明所述的溶液中(靜態(tài)的)。在另外一個(gè)方面，對(duì)所述心臟的冠狀動(dòng)脈進(jìn)行灌注。在另外一個(gè)方面，所述的裝置含有心臟輸入口以及輸出口。任選的，在所述的左肺血管以及右肺血管上進(jìn)行插管。優(yōu)選的，所述的主動(dòng)脈以及左心房導(dǎo)管排放至所述裝置中。28權(quán)利要求一種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液，進(jìn)一步包括至少一種選自下述組中的組分用于生成三磷酸腺苷的底物，用于消耗氨的底物，用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑，用于淬火活性氧組分的試劑，以及用于平衡組織水腫/脫水的試劑。2.—種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液以及一種用于生成三磷酸腺苷的底物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述的用于生成三磷酸腺苷的底物選自下述組中磷酸肌酸，肌酸乙酯，二肌酸蘋(píng)果酸，肌酸葡糖酸，果糖，蔗糖，核糖，己糖以及戊糖。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述的用于生成三磷酸腺苷的底物選自下述組中肌酸乳清酸，一水合肌酸，腺苷，以及葡萄糖。5.—種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液以及一種用于消耗氨的化合物。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中所述的用于消耗氨的化合物選自由鳥(niǎo)氨酸與羧基磷酸所組成的組中。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中所述的用于消耗氨的化合物是L-瓜氨酸蘋(píng)果酸。8.—種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液以及一種用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其中所述的用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑選自下述組中組氨酸，谷氨酰胺，色氨酸，賴氨酸，以及?；撬帷?0.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其中所述的用于緩沖細(xì)胞內(nèi)酸度的試劑選自下述組中碳酸氫鈉，Tris-羥甲基氨基甲烷，以及L-肌肽。11.一種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液以及一種用于淬火活性氧組分的試劑。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物，其中所述的用于淬火活性氧組分的試劑選自下述組中二硫蘇糖醇(DTT)，e-巰基乙醇，乙酰半胱氨酸，a-硫辛酸，?；撬?，白藜蘆醇(Resveratrol)，葉黃素，硒，甲硫氨酸，以及生育酚/維生素E。13.—種用于保存或者復(fù)蘇生物組織的組合物，所述的組合物包括一種生理鹽溶液以及一種用于平衡組織水分含量的試劑。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述的用于平衡組織水分含量的試劑選自下述組中甘露醇，尿素，丙三醇，異山梨醇，以及五水合蜜三糖。15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的組合物中包括0.1-0.5克/升氯化鈣,0.25-0.75克/升氯化鉀,0.01-0.5克/升磷酸鉀(一鉀鹽),0.01-0.5克/升氯化鎂(六水合物),0.01-0.5克/升硫酸鎂(五水合物),5.0-10.0克/升氯化鈉,0.01-0.5克/升碳酸氫鈉0.01-0.5克/升磷酸鈉(二鈉鹽；五水合物)1.0-5.0克/升D-葡萄糖/葡萄糖0.01-0.5克/升腺苷0.01-0.75克/升谷胱甘肽(還原態(tài))0.01-0.5克/升抗壞血酸0.01-0.5克/升L-精氨酸0.01-0.5克/升肌酸乳清酸0.01-0.5克/升一水合肌酸0.01-0.5克/升L-瓜氨酸蘋(píng)果酸0.01-0.5克/升二氯乙酸0.23-2.3克/升L-肌肽0.20-2.0克/升L-肉堿0.0021-0.21克/升a-硫辛酸0.25-0.75毫升/升胰島素用于調(diào)整pH的Tris-羥甲基氨基甲烷0.01-3.0升蒸餾水。16.—種灌注裝置，其包括腔室組件，灌注回路，包括第一導(dǎo)管，用于向所述的器官提供權(quán)利要求1所述的組合物，以及溫度控制單元。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的灌注裝置，其中所述的器官選自下述組中心臟，腎臟，肝臟，胃，脾臟，胰腺，肺臟，大腦，眼睛，腸，以及膀胱。18.—種用于維持或者復(fù)蘇哺乳動(dòng)物器官的系統(tǒng)，其包括a.容器，用于保持所述的器官與權(quán)利要求1所述的組合物進(jìn)行接觸；b.—種遞送工具，用于將所述的組合物遞送至所述器官的至少一個(gè)脈管中；c.一種分離工具，用于將所述的組合物轉(zhuǎn)移出所述的器官；d.溫度控制工具；e.氧化工具；f.過(guò)濾工具；g.流動(dòng)控制工具；其中所述的遞送工具，所述的分離工具，所述的溫度工具，所述的氧化工具，所述的過(guò)濾工具，以及所述的流動(dòng)控制工具提供或者重建了一種生理學(xué)可接受性的哺乳動(dòng)物環(huán)境。19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的組合物中包括以納米范圍的尺寸存在的水團(tuán)。20.根據(jù)權(quán)利要求15所述的組合物，其中所述的組合物中包括以納米范圍的尺寸存在的水團(tuán)。21.—種測(cè)量離體心臟的pH的方法，其包括h.將所述的離體心臟與權(quán)利要求1所述的溶液進(jìn)行接觸；1.測(cè)定所述的離體心臟的pH;其中存在于6.8至7.0之間的pH標(biāo)志著所述的心臟適合進(jìn)行移植。22.—種測(cè)量權(quán)利要求1所述的溶液的pH的方法，其包括j.將離體心臟與權(quán)利要求1所述的溶液進(jìn)行接觸；k.測(cè)定權(quán)利要求1所述的溶液的pH;其中存在于6.8至7.0之間的pH標(biāo)志著所述的心臟適合進(jìn)行移植。全文摘要用于復(fù)蘇、儲(chǔ)備、以及保存器官以及組織的功能完整性的方法以及組合物。通過(guò)維持ATP(三磷酸腺苷)的水平，線粒體的功能，心肌細(xì)胞的收縮性，預(yù)防酸中毒，抑制細(xì)胞凋亡的誘發(fā)，維持變力性(inotrophy)以及變松性(lusitropy)從而維持代謝功能，其中所述的變力性以及變松性的維持是通過(guò)調(diào)節(jié)鈣離子、鈉離子、鉀離子以及氯離子來(lái)完成的。文檔編號(hào)A01N1/02GK101790306SQ200880011995公開(kāi)日2010年7月28日申請(qǐng)日期2008年2月19日優(yōu)先權(quán)日2007年2月17日發(fā)明者H·塔特,L·羅索,P·特里諾爾,S·克胡利申請(qǐng)人:哈佛學(xué)院董事會(huì);美國(guó)政府退伍軍人事務(wù)部