專利名稱：綜合調(diào)控波紋唇魚性腺成熟排卵方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于波紋唇魚生殖調(diào)控產(chǎn)卵技術(shù)，是一種在室內(nèi)水泥池中，人工控制光照、 水溫和水流，并綜合利用營養(yǎng)強化措施，促進(jìn)波紋唇魚親魚性腺成熟排卵的方法。
背景技術(shù)：
波紋唇魚(俗稱蘇眉)(Cheilinus undulates)為大型隆頭魚科魚類，體重可 達(dá)209kg，主要分布于印度洋和太平洋，世界上最名貴的兩種海水魚之一(Cheilinus undulatus. In JUCN 2008. 2008 IUCN Red List of Threatened Species)。2004 年世界 自然與自然資源保護(hù)基金會(IUCN)在日內(nèi)瓦將其列為包括老虎、亞洲象在內(nèi)的10種瀕臨 滅絕的生物之一，同年《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》(CITES)將波紋唇魚列為禁止貿(mào) 易和限制貿(mào)易的水生物種(Sadovy，Y.，M, 2003. Rev. Fish Biol. Fish.)。波紋唇魚其口味 與品質(zhì)已成為社會地位的象征標(biāo)志，近年盛行用此魚烹制成佳肴以取代鮑魚、燕窩和魚翅 招待頂級賓客。其市場價值極高，養(yǎng)殖前景非常廣闊。鑒于波紋唇魚的養(yǎng)殖潛力和潛在的經(jīng)濟(jì)、社會和生態(tài)效益，多年來，科技工作者對 波紋唇魚在基礎(chǔ)生理學(xué)和生態(tài)學(xué)方面進(jìn)行了大量研究工作，主要有波紋唇魚攝食習(xí)性的 研究(Randall JE, Environ Biol Fish，1978)，波紋唇魚自然群體年齡組成及生長特性研 究(J. H. Choat，2006，Mar Ecol Prog Ser)，波紋唇魚染色體制備及核型的初步研究(中國 水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所，周麗青，漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，2010年)，波紋唇魚不同組織5種 同工酶表達(dá)的差異(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所，區(qū)又君，南方水產(chǎn)，2009年)， 波紋唇魚消化系統(tǒng)的形態(tài)解剖與腸道上皮的掃描電鏡觀察(海南大學(xué)，王永波，海洋通報， 2010年)。至今國際上沒有進(jìn)行波紋唇魚人工養(yǎng)殖(例如人工孵化生產(chǎn))以減少漁業(yè)捕撈 的壓力的報道(IUCN 2008 Red List)。因此進(jìn)行波紋唇魚人工繁殖與種質(zhì)資源保護(hù)的研究 工作，既是滿足市場的需求也是減緩或避免此物種消亡的手段。2009年，波紋唇魚親魚人工 調(diào)控催熟技術(shù)獲得突破，為波紋唇魚養(yǎng)殖的開發(fā)和物種保護(hù)工作開展奠定了良好的基礎(chǔ)。波紋唇魚的繁殖主要有海上網(wǎng)箱自然產(chǎn)卵技術(shù)和室內(nèi)水泥池人工誘導(dǎo)產(chǎn)卵技術(shù)。 采用海上網(wǎng)箱自然產(chǎn)卵技術(shù)可獲得波紋唇魚的受精卵，但是存在自然產(chǎn)卵的親魚數(shù)量少、 產(chǎn)卵期短、誘導(dǎo)產(chǎn)卵條件復(fù)雜獲得受精卵的數(shù)量少、收集受精卵困難等問題，同時受臺風(fēng)、 赤潮、潮汐、海流、海水溫度的影響，在規(guī)?；绶N生產(chǎn)過程中尚不能普及推廣應(yīng)用；采用激 素誘導(dǎo)方法同樣可以獲得受精卵，但是單純使用激素誘導(dǎo)獲得優(yōu)質(zhì)受精卵的技術(shù)不穩(wěn)定， 同樣存在親魚性腺對激素效應(yīng)時間各異，各批次卵子受精率和孵化率差異較大的問題，不 能滿足批量化苗種的生產(chǎn)需要。通常在人工溫度、光照和水流調(diào)控條件下，親魚性腺成熟排 卵，但是卵母細(xì)胞常常因營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏不能達(dá)到最終成熟，或者質(zhì)量低下，影響優(yōu)質(zhì)受精 卵的獲得。營養(yǎng)強化是針對親魚卵母細(xì)胞發(fā)育所需營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行專門的營養(yǎng)物質(zhì)調(diào)控，可 促進(jìn)親魚卵母細(xì)胞發(fā)育成熟，大大提高卵子質(zhì)量。因此，利用溫度、光照、水流和營養(yǎng)綜合調(diào) 控波紋唇魚性腺最終發(fā)育成熟順利排卵，從而獲取優(yōu)質(zhì)受精卵。目前尚未見有相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的提供一種溫度、光照、水流和營養(yǎng)強化綜合調(diào)控波紋唇魚性腺成熟 排卵技術(shù)方法。本發(fā)明技術(shù)方案主要內(nèi)容包括親魚優(yōu)選、培育及飼料飼喂，水溫、光照和水流調(diào)控 親魚發(fā)育，營養(yǎng)強化促進(jìn)性腺成熟排卵三方面一、親魚的優(yōu)選和培育1、親魚優(yōu)選選擇形態(tài)、體色正常、個體大、健康無傷的5齡以上雌性親魚，全長達(dá)45-85厘米， 體重2800-10000克；雄魚達(dá)10齡以上，全長75-100厘米，體重達(dá)8000-18000克。2、親魚培育及飼料飼喂親魚置于專用溫光調(diào)控培育池(80m3)內(nèi)進(jìn)行強化培育，親魚入池的性比為早古 =3 1，飼養(yǎng)密度1.2-1. 8kg/m2。培育水溫20 30°C，連續(xù)充氣、流水培育，換水率300%， 定時清池?fù)Q水。水質(zhì)條件溶解氧> 6. 0mg/L,PH 7. 6-8. 2，鹽度29-33。親魚的餌料以小黃 花魚、魷魚、雜蝦蟹為主。日投喂2次，日投喂量為魚體體重的2% _3%，及時清除殘餌、排 污。二、水溫、光照、水流調(diào)控1、水溫調(diào)控在溫度、光照調(diào)控前，將波紋唇魚的培育水溫控制在23-25°C，光照強度為300LUX 左右；繁殖期到來前4個月，開始調(diào)控水溫?？販胤绞矫?天水溫緩慢降低1°C，直至降至 20°C后維持不變并停留10天。然后水溫從20°C開始回升，每5天水溫緩慢升高1°C，直至升 值至28°C，開始產(chǎn)卵時降低1°C后維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況，日換水率300%。 每天12次監(jiān)測水溫的變化，精確調(diào)控每天溫度變化在士0. 3°C范圍內(nèi)。2、光照的調(diào)控在光照調(diào)控過程中，當(dāng)水溫降至到20°C時開始進(jìn)行光照調(diào)控。將親魚培育池完全 遮住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調(diào)節(jié)光照強度為300LUX。當(dāng)水溫為20°C 時控制光照時間為10小時，以后每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達(dá)到15小時并 維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間。3、水流的調(diào)控模擬大潮汛海流調(diào)節(jié)法(升降水位加大流速)。檢查雌魚的卵徑大于0. 4mm、雄魚 成熟精子的數(shù)量足夠時，種魚準(zhǔn)備交配。準(zhǔn)備工作主要是對種魚養(yǎng)殖池的水文條件加以控 制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時后將水溫升高1 ;TC，中午12 時開始注入新鮮海水至水深2米，保持池水整晚不斷循環(huán)流動，直至種魚成熟排卵。三、營養(yǎng)強化調(diào)控親魚性腺成熟排卵在親魚性腺發(fā)育開始啟動后，在餌料中添加卵磷脂(每公斤魚餌料按照3g卵磷脂 添加)，促進(jìn)親魚性腺進(jìn)一步成熟。在親魚性腺發(fā)育至III期后，增加投喂沙蠶、活海蟹，沙 蠶和活海蟹交替隔天投喂一次，每次按照體重的2%投喂，強化親魚磷脂、卵黃蛋白、DHA及 EPA營養(yǎng)物質(zhì)的攝入。待親魚性腺完全成熟后，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子，人工采 卵受精獲得受精卵。本發(fā)明與已有技術(shù)對比其特點
本發(fā)明綜合利用水溫、光照、水流、營養(yǎng)強化措施調(diào)控誘導(dǎo)波紋唇魚親魚性腺發(fā)育 成熟排卵，是一種連續(xù)完整的成套技術(shù)。親魚經(jīng)營養(yǎng)強化后，卵子可達(dá)到最后成熟并排卵， 人工采卵獲得的卵子質(zhì)量高，以人工采卵受精技術(shù)獲得批量優(yōu)質(zhì)受精卵，可保證苗種生產(chǎn) 的順利進(jìn)行。本發(fā)明根據(jù)波紋唇魚性腺發(fā)育的生理生態(tài)規(guī)律，采用溫度(降溫_再升溫)、光照 調(diào)控法(逐漸延長光照時間)、模擬大潮汛海流調(diào)節(jié)法(升降水位加大流速)，調(diào)控親魚性 腺同步發(fā)育至四期，性腺發(fā)育成熟的親魚比率高達(dá)68%。本發(fā)明采用的專門的營養(yǎng)強化措施，包括沙蠶、海蟹和添加劑的使用。添加劑主要 成分為卵磷脂、復(fù)合維生素，沙蠶、活海蟹為高蛋白和高不飽和脂肪酸(DHA和EPA)的來源， 這些營養(yǎng)物質(zhì)可充分促進(jìn)卵母細(xì)胞發(fā)育所需卵黃蛋白和其它營養(yǎng)物質(zhì)的獲取，有效促進(jìn)親 魚卵母細(xì)胞的最終成熟和提升卵子質(zhì)量。


圖1 溫光、營養(yǎng)綜合誘導(dǎo)波紋唇魚產(chǎn)卵期內(nèi)產(chǎn)卵量；圖2 溫光、營養(yǎng)綜合誘導(dǎo)波紋唇魚產(chǎn)卵期內(nèi)上浮卵率；圖3 溫光、營養(yǎng)綜合誘導(dǎo)波紋唇魚產(chǎn)卵期內(nèi)受精率；圖4 溫光、營養(yǎng)綜合誘導(dǎo)波紋唇魚產(chǎn)卵期內(nèi)孵化率。
具體實施例方式下面通過具體實施例結(jié)合附圖詳細(xì)敘述本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容為了獲得波紋唇魚優(yōu)質(zhì)受精卵，于2008-2009年在煙臺基地，采取溫度、光照和營 養(yǎng)綜合調(diào)控措施，誘導(dǎo)波紋唇魚親魚性腺發(fā)育成熟，人工采卵受精獲得批量優(yōu)質(zhì)受精卵，具 體實施過程如下實驗方法包括親魚優(yōu)選和培育；水溫、水流、光照調(diào)控親魚發(fā)育；營養(yǎng)強化促進(jìn) 親魚成熟排卵；人工采卵受精獲取受精卵；實驗結(jié)果。1、親魚優(yōu)選及培育實驗選擇波紋唇魚5-14齡親魚16尾(12早4 $ )，雌魚平均體重5260克，雄 魚平均體重11050克。親魚體形、體色正常，健康無損傷。親魚放入培育池(40m2，水深2 米)進(jìn)行培育。培育用水為砂濾自然海水，水質(zhì)條件為00>6.0!^/1，？!1 = 7.6-8.2，鹽度 29-33。親魚的飼料餌料以冰鮮小黃花魚、雜蝦和活海蟹為主。日投喂2次，日投喂量為魚 體體重的2% _3%，在繁殖季節(jié)餌料中添加卵磷脂和復(fù)合維生素(每公斤魚餌料按照3g卵 磷脂添加)，并保持較高換水率300% )，促進(jìn)親魚性腺的發(fā)育，整個繁殖季節(jié)保持相同的投 喂率。投喂過程中及時清除殘餌、排污。2.水溫、光照、水流調(diào)控措施在溫度、光照調(diào)控前，波紋唇魚的培育水溫控制在23-25°C，光照強度為300Lux左 右；繁殖期到來前4個月，開始調(diào)控水溫?？販胤绞矫?天水溫緩慢降低1°C，降至20°C后 維持不變并停留10天。然后水溫從20°C開始回升，每5天水溫緩慢升高1°C，直至升值至 28°C，開始產(chǎn)卵時降低1°C后維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況。水溫靠熱電廠余溫?zé)崴妥匀缓Ｋ旌险{(diào)節(jié)控制，日換水率300%。每天12次監(jiān)測水溫的變化，精確調(diào)控每天溫 度變化在士0.3°C范圍內(nèi)。在光照調(diào)控過程中，水溫降至到20°C時開始進(jìn)行光照調(diào)控。將親魚培育池完全遮 住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調(diào)節(jié)光照強度為300LUX。當(dāng)水溫為20°C 時控制光照時間為10小時，以后每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達(dá)到15小時并 維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間。模擬大潮汛海流調(diào)節(jié)法(升降水位加大流速)。種魚準(zhǔn)備排卵季節(jié)，對種魚養(yǎng)殖池 的水文條件加以控制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時后將水溫升 高1 ;TC，中午12時開始注入新鮮海水至水深2米，并保持池水整晚不斷循環(huán)流動，直至 種魚成熟排卵。3.營養(yǎng)強化促進(jìn)最終成熟和排卵在親魚性腺發(fā)育啟動后，開始在餌料中添加卵磷脂和復(fù)合維生素(每公斤魚餌料 按照3g卵磷脂添加)。在親魚性腺發(fā)育達(dá)到III期后，每天增加投喂沙蠶、活海蟹，沙蠶和 活海蟹交替隔天投喂一次，每次按照體重的2%投喂，強化親魚的蛋白、DHA及EPA等營養(yǎng)物 質(zhì)的攝入。觀察到親魚性腺松生殖孔充血變紫紅色時，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子， 人工采卵受精獲得受精卵。4.人工采卵受精獲取受精卵性腺成熟的親魚排卵后并吸水膨脹，性腺明顯隆起，及時進(jìn)行人工擠卵采集卵子。 將雌魚從生殖腺后端沿生殖腺向前端進(jìn)行擠壓，獲得卵子置于干燥潔凈的器皿內(nèi)，然后擠 取成熟精子，以羽毛或玻璃棒攪拌均勻后加入海水，靜置10-15min，將沉卵和浮卵分離后， 上浮卵移入專用孵化設(shè)施進(jìn)行孵化。5.實驗結(jié)果本實驗中，波紋唇魚親魚性腺成熟后人工采卵，獲得的卵子質(zhì)量好，受精率高。親 魚性腺發(fā)育成熟率68%以上。本實驗共采得卵子2. 72公斤，其中上浮卵1.38公斤(見圖 1)，可采得卵子的期間長達(dá)83天，獲得優(yōu)質(zhì)受精卵數(shù)量多，上浮卵率48. 4% (見圖2)，卵子 受精率達(dá)到43. 5% (見圖3)，孵化率達(dá)到53. 5% (見圖4)。本發(fā)明提供的溫度、光照、水流和營養(yǎng)強化措施綜合調(diào)控產(chǎn)卵技術(shù)對波紋唇魚親 魚的產(chǎn)卵調(diào)控效果優(yōu)良，可用于獲得批量優(yōu)質(zhì)受精卵，保障批量化苗種繁育的順利進(jìn)行。
權(quán)利要求
一種綜合調(diào)控波紋唇魚性腺成熟排卵方法，其特征在于它的方法包括親魚優(yōu)選、培育及飼料飼喂，水溫、光照和水流調(diào)控親魚發(fā)育，營養(yǎng)強化促進(jìn)性腺成熟排卵三方面(1)、親魚的優(yōu)選和培育A、親魚優(yōu)選選擇形態(tài)、體色正常、個體大、健康無傷的5齡以上雌性親魚，全長達(dá)45 85厘米，體重2800 10000克；雄魚達(dá)10齡以上，全長75 100厘米，體重達(dá)8000 18000克；B、親魚培育及飼料飼喂親魚置于80m3溫光調(diào)控培育池內(nèi)進(jìn)行強化培育，親魚入池的性比為♀∶♂＝3∶1，飼養(yǎng)密度1.2 2.0kg/m2；培育水溫20～30℃，連續(xù)充氣、流水培育，換水率300％，定時清池?fù)Q水；水質(zhì)條件溶解氧＞6.0mg/L，PH 7.6 8.2，鹽度29 33；親魚的餌料以小黃花魚、魷魚、雜蝦蟹為主；日投喂2次，日投喂量為魚體體重的2％ 3％，及時清除殘餌、排污；(2)、水溫、光照、水流調(diào)控A、水溫調(diào)控在溫度、光照調(diào)控前，將波紋唇魚的培育水溫控制在23 25℃，光照強度為300Lux；繁殖期到來前4個月，開始調(diào)控水溫；控溫方式每5天水溫緩慢降低1℃，直至降至20℃后維持不變并停留10天；然后水溫從20℃開始回升，每5天水溫緩慢升高1℃，直至升值至28℃，開始產(chǎn)卵時降低1℃后維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況，日換水率300％；每天12次監(jiān)測水溫的變化，精確調(diào)控每天溫度變化在±0.3℃范圍內(nèi)；B、光照的調(diào)控在光照調(diào)控過程中，當(dāng)水溫降至到20℃時開始進(jìn)行光照調(diào)控；將親魚培育池完全遮住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調(diào)節(jié)光照強度為300Lux；當(dāng)水溫為20℃時控制光照時間為10小時，以后每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達(dá)到15小時并維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間；C、水流的調(diào)控模擬大潮汛海流調(diào)節(jié)法；種魚準(zhǔn)備排卵季節(jié)對種魚養(yǎng)殖池的水文條件加以控制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時后將水溫升高1～3℃，中午12時開始注入新鮮海水至水深2米，保持池水整晚不斷循環(huán)流動，直至種魚成熟排卵；(3)、營養(yǎng)強化調(diào)控親魚性腺成熟排卵在親魚性腺發(fā)育開始啟動后，在餌料中添加卵磷脂每公斤魚餌料按照3g卵磷脂添加，促進(jìn)親魚性腺進(jìn)一步成熟；在親魚性腺發(fā)育至III期后，增加投喂沙蠶、活海蟹，沙蠶和活海蟹交替隔天投喂一次，每次按照體重的2％投喂；待親魚性腺完全成熟后，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子，人工采卵受精獲得受精卵。
全文摘要
一種綜合調(diào)控波紋唇魚性腺成熟排卵方法，包括親魚優(yōu)選、培育和飼料投喂；水溫、光照和水流調(diào)控親魚發(fā)育、營養(yǎng)強化促進(jìn)性腺成熟排卵。通過以上技術(shù)方法，篩選到人工催熟有效溫度、光照度以及水流速因子數(shù)據(jù)；篩選到人工催熟有效營養(yǎng)強化劑種類和劑量；篩選到適合波紋唇魚配子受精的時間；建立了波紋唇魚優(yōu)質(zhì)受精卵獲取的方法。本方法獲得波紋唇魚卵的受精率為20-86％，孵化率為30-78％；本發(fā)明具有先進(jìn)、高效、實用、可靠的特點，在波紋唇魚苗種繁育上提供了一種溫度、光照、水流和營養(yǎng)強化綜合調(diào)控波紋唇魚性腺成熟排卵技術(shù)方法；在瀕危物種保護(hù)上具有重大應(yīng)用價值和廣闊的推廣應(yīng)用前景。
文檔編號A01K61/00GK101919359SQ20101026439
公開日2010年12月22日 申請日期2010年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月27日
發(fā)明者于宏, 劉新富, 曲江波, 楊志, 閻國江, 陳超, 雷霽霖, 高淳仁 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所