專利名稱：白子菜的人工培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物人工培育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種白子菜的人工培育方法。
背景技術(shù)：
白子菜Gynura divaricata (Linn. ) DC.，又名白背三七，菊科菊三七屬，多年生草本植物，主要分布于臺(tái)灣至華南、西南一帶，具有食用和藥用的雙重價(jià)值。白子菜的嫩梢和嫩葉可作為蔬菜或加工成食品，口感好，營(yíng)養(yǎng)豐富。白子菜中含有含量較高的鈣、鉀、鈉、 鎂、鐵等礦物質(zhì)，其中鈣、鐵的含量是普通綠葉蔬菜的幾倍甚至幾十倍。白子菜中還富含多種有益于人體健康的活性成分，如可溶性膳食纖維、植物多糖、黃酮類物質(zhì)，對(duì)人體有一定的營(yíng)養(yǎng)保健作用。白子菜已被批準(zhǔn)為新資源食品，對(duì)于增加我國(guó)蔬菜花色品種，提高蔬菜渡淡(渡過(guò)淡季)能力，豐富“菜籃子”均有重要意義。白子菜的全草均可入藥，味辛、淡、性平，具有清熱涼血、活血止痛、止血之效的藥用價(jià)值，根入藥有瀉火、涼血、生津之效，對(duì)于跌打損傷、血瘀腫痛、風(fēng)濕骨痛、癰瘡腫毒、乳癰等均有顯著的療效。白子菜由于其食用和藥用的雙重性以及其內(nèi)含降壓、降糖、降脂即“降三高“成分的獨(dú)特性符合社會(huì)發(fā)展、消費(fèi)市場(chǎng)以及人類健康的需求，因此迫切需要建立白子菜的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)模式。然而，目前白子菜只在我國(guó)南方少數(shù)地區(qū)有人工栽培，但缺乏科學(xué)繁殖和大面積人工栽培技術(shù)，不能保障種苗的數(shù)量、品質(zhì)和優(yōu)勢(shì)特性，北方地區(qū)由于自然條件的限制而不能實(shí)現(xiàn)白子菜的推廣種植。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為解決目前北方地區(qū)由于自然條件限制而不能推廣種植白子菜，提供一種白子菜的人工培育方法，保證其在北方地區(qū)也能正常生長(zhǎng)，并保持其品質(zhì)和優(yōu)勢(shì)特性。本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種白子菜的人工培育方法，包括以下步驟
(1)選取白子菜優(yōu)株(指遺傳性狀穩(wěn)定、長(zhǎng)勢(shì)良好、株高0.7-1.Om的健康植株)，剪取頂芽，滅菌后剝離出幼小頂芽作為外植體；
(2)選取無(wú)剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加2.0-4.0mg/L&6-BA(6-芐氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L的ΝΑΑ( α -萘乙酸)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行芽誘導(dǎo)；
(3)將誘導(dǎo)出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4.Omg/L 6-BA (6-芐氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L ΝΑΑ(α-萘乙酸)的繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)；
(4)切取繼代增殖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)正常、長(zhǎng)度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA (吲哚-6- 丁酸)和0. 1-0. 6mg/L的NAA ( α -萘乙酸)的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的組培苗；
上述誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代增殖培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)基以1/2 MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，三種培養(yǎng)基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調(diào)至5-7 ；三種培養(yǎng)條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強(qiáng)度為800-30001x，光照時(shí)間為 14h/d ；
(5)將生根的組培苗置于與培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)相同溫濕度的環(huán)境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質(zhì)，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達(dá)種植標(biāo)準(zhǔn)(根長(zhǎng)為 1. 0-1. 5cm)；
(6)4至9月進(jìn)行大田種植，選擇地勢(shì)向陽(yáng)、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機(jī)肥(即慪制農(nóng)家肥)2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照
1.0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側(cè)種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當(dāng)天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長(zhǎng)期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機(jī)肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于 15°C，以防蟲網(wǎng)和粘板防蟲為主，當(dāng)蟲害嚴(yán)重時(shí)，噴施2500倍(倍數(shù)濃度，指1份農(nóng)藥的加水倍數(shù)，常用重量來(lái)表示)10% (百分比濃度，指100份藥液中含農(nóng)藥有效成分的份數(shù))二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過(guò)三次，正常生長(zhǎng)45天即可舒枝采收莖葉。組織培養(yǎng)作為一種快繁技術(shù)，選取合適的外植體，通過(guò)無(wú)菌操作，在人工條件下培育再生植株。試管繁殖屬于組織培養(yǎng)，是一種微型的無(wú)性繁殖，取材于同一個(gè)體的體細(xì)胞而非性細(xì)胞，因此其后代遺傳性非常一致，能保持原有品種的優(yōu)良性狀，對(duì)保質(zhì)、保純有著特殊作用。試管繁殖是在人工控制的條件下進(jìn)行的集約化生產(chǎn)，不受自然條件中季節(jié)和天氣的限制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)，從取材-接種-培養(yǎng)-生根-移栽，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)以及反季節(jié)生產(chǎn)。在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)試管苗玻璃化現(xiàn)象，這是植物組織培養(yǎng)過(guò)程中特有的一種生理失調(diào)或生理病變。瓊脂或蔗糖濃度與玻璃化成負(fù)相關(guān)，瓊脂或蔗糖濃度越高，玻璃化的比率越低。培養(yǎng)基中BA濃度或培養(yǎng)溫度與玻璃化成正相關(guān)，BA濃度或培養(yǎng)基溫度越高，玻璃化比率越大。通過(guò)增加瓊脂和蔗糖的濃度，適當(dāng)提高培養(yǎng)基中瓊脂和蔗糖的含量，有效降低了試管苗的玻璃化比率。關(guān)于三種培養(yǎng)基附加激素的配比問(wèn)題，誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代增殖培養(yǎng)基使用
2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以獲得較高的繁殖系數(shù)，又可以獲得理想的幼芽萌發(fā)率；生根培養(yǎng)基使用0. 6-1. Omg/L的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以獲得較高的生根系數(shù)，同時(shí)又能把小植株玻璃化和愈傷組織的發(fā)生控制到最低比率，而且小植株生長(zhǎng)健壯，葉片正常，生產(chǎn)效率高。本發(fā)明通過(guò)實(shí)踐證明，有效的白子菜的組培快速繁殖技術(shù)路線為無(wú)菌材料獲取-不定芽誘導(dǎo)-壯芽繼代增殖培養(yǎng)-生根培養(yǎng)-煉苗-試管苗移植栽培，一方面通過(guò)調(diào)控培養(yǎng)基及其附加激素的濃度和比例進(jìn)行芽誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng)，保持原植物特性，增強(qiáng)其環(huán)境適應(yīng)性，另一方面以獨(dú)特的種植布局和合理的溫濕度控制，加之規(guī)范的田間作業(yè)保證其品質(zhì)和產(chǎn)量，取得培養(yǎng)時(shí)間短、出苗快、變異少、植株質(zhì)量好、生產(chǎn)效率高的效果。通過(guò)創(chuàng)設(shè)與北方種植白子菜相適應(yīng)的環(huán)境條件，以利于白子菜在原本不適合栽培的北方環(huán)境條件下可以大范圍種植。本發(fā)明所述的白子菜的人工培育方法，對(duì)原種苗進(jìn)行了脫毒、優(yōu)化，保持了種苗的優(yōu)勢(shì)特性，改善了植株的適應(yīng)性，獲得種苗整齊、健壯。該方法具有組培周期短、繁殖速度快的特點(diǎn)，一般一個(gè)頂芽可繁殖30株，45天即可完成一個(gè)組培周期，并且移栽成活率在 85%_95%之間，適于北方種植。按照本發(fā)明所述的白子菜的人工培育方法，即可快速高效獲得優(yōu)質(zhì)的白子菜種苗，又能保證其在北方地區(qū)的自然條件下推廣種植，形成規(guī)模化產(chǎn)業(yè)，從而滿足市場(chǎng)需求。
具體實(shí)施例方式
一種白子菜的人工培育方法，包括以下步驟
(1)選取引種馴化經(jīng)塑料大棚栽培后遺傳性狀穩(wěn)定、長(zhǎng)勢(shì)良好、株高0.7-1. Om的白子菜優(yōu)株，剪取頂芽，去除外圍較大葉片，用自來(lái)水沖洗約30min，在超凈工作臺(tái)上先用75%酒精溶液浸泡30s，再用0. 1%氯化汞溶液浸泡IOmin左右，無(wú)菌水沖洗5_6次，無(wú)菌吸水紙吸干后剝離出幼小頂芽作為外植體；
(2)在通過(guò)污染關(guān)的無(wú)菌外植體材料中選取無(wú)剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加 2. 0-4. Omg/L (2. O mg/L 或 3· O mg/L 或 4· O mg/L)的 6-BA 和 0· 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L或0. 6 mg/L)的NAA的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行芽誘導(dǎo)；
(3)將誘導(dǎo)出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4. Omg/L (2.0 mg/L或3. O mg/L 或 4· O mg/L) 6-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或 0. 6 mg/L) NAA 的繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)；
(4)切取繼代增殖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)正常、長(zhǎng)度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L (0. 6 mg/L 或 0. 8 mg/L 或 1· O mg/L)的 I-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0. 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或
0.6 mg/L)的NAA的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的組培苗；
上述誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代增殖培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)基以1/2 MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，三種培養(yǎng)基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調(diào)至5-7 ；三種培養(yǎng)條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強(qiáng)度為 800-3000 lx，光照時(shí)間為 14 h/d ；
(5)將生根的組培苗置于與培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)相同溫濕度的環(huán)境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質(zhì)，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達(dá)到根長(zhǎng)為
1.0-1. 5cm的種植標(biāo)準(zhǔn)；
(6)4至9月進(jìn)行大田種植，選擇地勢(shì)向陽(yáng)、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機(jī)肥2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照1. 0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側(cè)種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當(dāng)天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長(zhǎng)期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機(jī)肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于15°C，以防蟲網(wǎng)和粘板防蟲為主，當(dāng)蟲害嚴(yán)重時(shí)，噴施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過(guò)三次，正常生長(zhǎng)45天即可舒枝采收莖葉。
權(quán)利要求
1.一種白子菜的人工培育方法，其特征在于包括以下步驟(1)選取白子菜優(yōu)株，剪取頂芽，滅菌后剝離出幼小頂芽作為外植體；(2)選取無(wú)剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的 NAA的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行芽誘導(dǎo)；(3)將誘導(dǎo)出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4. Omg/L 6-BA和0. 1-0. 6mg/L NAA的繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)；(4)切取繼代增殖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)正常、長(zhǎng)度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根的組培苗；上述誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代增殖培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)基以1/2 MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，三種培養(yǎng)基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調(diào)至5-7 ；三種培養(yǎng)條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強(qiáng)度為 800-30001x，光照時(shí)間為 14h/d ；(5)將生根的組培苗置于與培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)相同溫濕度的環(huán)境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質(zhì)，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達(dá)種植標(biāo)準(zhǔn)；(6)4至9月進(jìn)行大田種植，選擇地勢(shì)向陽(yáng)、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機(jī)肥2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照1. 0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側(cè)種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當(dāng)天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長(zhǎng)期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機(jī)肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于15°C，以防蟲網(wǎng)和粘板防蟲為主，當(dāng)蟲害嚴(yán)重時(shí)，噴施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過(guò)三次，正常生長(zhǎng)45天即可舒枝采收莖葉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白子菜的人工培育方法，其特征在于所述的白子菜優(yōu)株為遺傳性狀穩(wěn)定、長(zhǎng)勢(shì)良好、株高0. 7-1. Om的健康植株。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物人工培育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種白子菜的人工培育方法。為解決目前北方地區(qū)由于自然條件限制而不能推廣種植白子菜，提供一種白子菜的人工培育方法，保證其在北方地區(qū)也能正常生長(zhǎng)，并保持其品質(zhì)和優(yōu)勢(shì)特性。本發(fā)明通過(guò)實(shí)踐證明，有效的白子菜的組培快速繁殖技術(shù)路線為無(wú)菌材料獲取-不定芽誘導(dǎo)-壯芽繼代增殖培養(yǎng)-生根培養(yǎng)-煉苗-試管苗移植栽培，一方面通過(guò)調(diào)控培養(yǎng)基及其附加激素的濃度和比例進(jìn)行芽誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng)，保持原植物特性，增強(qiáng)其環(huán)境適應(yīng)性，另一方面以獨(dú)特的種植布局和合理的溫濕度控制，加之規(guī)范的田間作業(yè)保證其品質(zhì)和產(chǎn)量，取得培養(yǎng)時(shí)間短、出苗快、變異少、植株質(zhì)量好、生產(chǎn)效率高的效果。
文檔編號(hào)A01G1/00GK102224803SQ201110114588
公開日2011年10月26日 申請(qǐng)日期2011年5月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月5日
發(fā)明者衛(wèi)小平, 張文華, 張永紅, 高俊憲 申請(qǐng)人:山西菩凈生物科技有限公司