專利名稱：一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法
技術領域：
本發(fā)明屬于植物無性快繁技術領域，涉及繼代芽育苗方法，尤其是涉及一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法。
背景技術：
任豆(Zeniainsignis)又名翅莢木，是蘇木科落葉喬木，為我國特有樹種，而且是稀有樹種。任豆具有生長迅速、萌芽力強、根系穿透力強、適應性強等特點，分布于中亞熱帶與南亞熱帶之間的廣西、廣東、云南、湖南和貴州等省(區(qū))，是西南和華南地區(qū)生態(tài)公益林建設中的一個重要樹種，且成為石質山地造林、植被恢復重建的首選鄉(xiāng)土樹種之一。目前，任豆的繁殖方式主要有種子繁殖、扦插繁殖和組培繁殖三種。種子繁殖屬于有性繁殖，遺傳不穩(wěn)定，培育苗木的質量差異較大，不利于良種的推廣。扦插繁殖和組培繁 殖同屬于無性繁殖，可以保持良種的優(yōu)良性狀，是目前應用范圍較廣的繁殖方式。扦插繁殖受季節(jié)影響大，要選擇在冬末春初，穗條尚未萌芽前進行扦插較好，此時扦插有利于獲得較高的生根成活率，扦插后40 50天開始生根[I]，生根時間較長，同時要求采用I 2年生的老枝條為插條較好，如果采用當年生嫩枝(頂芽)作插條，很難生根成活[I]。因此，為獲得適宜扦插的老枝條，采穗圃至少要經過3年時間才能滿足采穗要求，繁殖周期過長，繁殖系數(shù)不高，并且扦插又受到季節(jié)的限制，延遲良種的推廣時機。組培繁殖受季節(jié)和地域的影響小，瓶內繼代培養(yǎng)增殖速度快，繼代芽生長快、宜生根、宜萌發(fā)，在合適的條件下，繼代芽在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)10天左右即可生根[2] [3]，是較好的無性繁殖方法。但是，傳統(tǒng)的組培繁殖在繼代培養(yǎng)后，要經過生根培養(yǎng)的步驟，讓組培繼代芽在瓶內的培養(yǎng)基中生根，然后再移栽至基質中，工序復雜，瓶內生根培養(yǎng)要求嚴格的無菌操作才能保證育苗質量，而且成本相對較高，加之移栽培養(yǎng)，更需消耗較多的人力物力。對于任豆這種生長迅速、易生根的樹種，其組培無性繁殖方法仍有改進的空間。參考文獻[I],潘月芳，郝海坤，曹艷云，周全連，黃志玲，陸國導，任豆扦插育苗試驗，林業(yè)科技開發(fā) 2006，20 (6):65 66[2],袁德義，鄒鋒，何小勇，帥波，龍洪旭，翅莢木組培快繁技術的研究，中南林業(yè)科技大學學報，2010. 30 (6) :60 63[3],邱運亮，翅莢木試管苗快速繁殖技術的研究，林業(yè)科技開發(fā)，2002，16 (6)14 1
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的為了克服現(xiàn)有任豆無性繁殖方法的不足，提高繁殖速度，縮短育苗周期，提高育苗成活率并降低成本，而提供一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法。本發(fā)明的技術方案是利用任豆組培繼代芽生長快、宜生根、宜萌發(fā)的特點，以組培方式繁殖繼代芽，選用繼代芽作為穗條經促根劑處理后，直接扦插至基質中，在經過育苗培養(yǎng)形成完整植株的任豆快速育苗方法。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法，包括任豆組培繼代芽培養(yǎng)、基質準備、扦插、育苗和出圃5個步驟，其特征在于采用組培繼代芽瓶外生根與扦插育苗兩個步驟合二為一的方法，先以常規(guī)方法組培繁殖任豆組培繼代芽，再選取任豆組培繼代芽作為插穗，經促根劑處理并扦插至紅心土基質中，育苗培養(yǎng)得到造林木苗，其操作步驟如下(I)組培繼代芽培養(yǎng)選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)；(2)基質準備選擇紅心土做為基質，用碎土機粉碎后過80 100目篩，裝入
7X 9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L 5g/L的高錳酸鉀溶液消毒 24 36h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物備用；(3)扦插剪取生長健壯的繼代芽作為穗條，將穗條剪切端用促根劑處理后，垂直插入塑料杯的基質中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插后用清水淋透基質，扦插季節(jié)為當年9月至次年5月；(4)育苗育苗床上方用白色塑料薄膜搭建50 70cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，培育扦插苗期間按常規(guī)方法淋水、除草、施肥和病蟲害防治；(5)出圃苗高50cm以上，無病蟲害出圃造林。以上步驟(3)所述的穗條是選擇高> 5cm的繼代芽，洗去培養(yǎng)基，并在末端節(jié)下3mm處剪切。以上步驟(3)所述的促根劑處理是將穗條剪切端浸泡在含有O. 3mg/L O. 5mg/LABT6的MS液體培養(yǎng)基中，浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理40 60min后清水沖洗處理用于扦插。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比的有益效果和顯著進步(I)本發(fā)明的方法利用任豆組培繼代芽宜生根、宜萌發(fā)，且生長快的特點，以任豆組培繼代芽為插穗，經促根劑處理后的插穗扦插至紅心土基質中，在搭建的小棚內培養(yǎng)下形成完整植株，扦插培養(yǎng)15 20天后開始生根，生根成活率高，達到85 95%。(2)本發(fā)明的方法直接將任豆組培芽作為插穗進行瓶外扦插，將組培苗的生根與移栽合并在一個步驟中，不需要在瓶內培養(yǎng)至生根再移栽，相比與傳統(tǒng)的組培無性繁殖方法，進一步縮短了育苗時間，同時簡化了工序，降低了成本，有助于在短期內實現(xiàn)規(guī)?；嘤味菇M培苗。(3)本發(fā)明的方法選取任豆組培繼代芽為插穗，采用組培的方法無性繁殖插穗，相比于傳統(tǒng)采穗圃培育插穗的育苗方法，占地少，不受季節(jié)和地域限制，繁殖速度大大提高，且培育縮短周期，實現(xiàn)快速繁殖、規(guī)模培育。(4)扦插中應用含有O. 3mg/L O. 5mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基作為促根劑，穗條浸泡處理40 60min，較長的浸泡時間可以加強促根劑的生根作用。而相比于傳統(tǒng)的用水做為促根劑的溶劑，本方法中選用MS液體培養(yǎng)基作為促根劑的溶劑，可以避免在較長的浸泡處理中穗條受到組織內外離子濃度不平衡造成的影響，有助于穗條在處理后仍保持良好的狀態(tài)利于扦插。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發(fā)明的一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法進一步描述。實施例I :選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行繼代增殖培養(yǎng)。在10月份時進行扦插，選擇紅心土做為基質，碎土機粉碎后過80 90目篩，裝入7 X 9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L的高錳酸鉀溶液消毒24h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物；選擇生長健壯，高> 5cm的繼代芽作為穗條，洗去培養(yǎng)基后，在末端節(jié)下3mm處剪切，將穗條末端浸泡在含有O. 3mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基中，浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理50min后清水沖洗，垂直插入消毒處理后的基質杯中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插當天扦插結束后，清水淋透基質，上方 用白色塑料薄膜搭建60cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，棚內溫度控制在15°C 35°C，濕度控制在80% 90%，及時淋水補充水分，溫度過高要掀開薄膜通風降溫。育苗20天后，可每天掀開薄膜通風60min。育苗20天后，扦插苗生根成活率87%。扦插苗繼續(xù)培養(yǎng)期間及時淋水、除草、施肥并注意病蟲害防治，苗高50cm以上，無病蟲害可出圃造林。實施例2 選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行繼代增殖培養(yǎng)。在3月份時進行扦插，選擇紅心土做為基質，碎土機粉碎后過90 100目篩，裝入7 X 9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高錳酸鉀溶液消毒36h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物；選擇生長健壯，高> 5cm的繼代芽作為穗條，洗去培養(yǎng)基，在末端節(jié)下3mm處剪切后，將穗條末端浸泡在含有O. 4mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基中，浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理50min后清水沖洗，垂直插入消毒處理后的基質杯中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插當天扦插結束后，清水淋透基質，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，棚內溫度控制在15°C 35°C，濕度控制在80% 90%，及時淋水補充水分，溫度過高要掀開薄膜通風降溫。育苗20天后，可每天掀開薄膜通風40min。育苗18天后，扦插苗生根成活率93%。扦插苗繼續(xù)培養(yǎng)期間及時淋水、除草、施肥并注意病蟲害防治，苗高50cm以上，無病蟲害可出圃造林。實施例3:選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行繼代增殖培養(yǎng)。在4月份時進行扦插，選擇紅心土做為基質，碎土機粉碎后過80 100目篩，裝入7 X 9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高錳酸鉀溶液消毒24h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物；選擇生長健壯，高> 5cm的繼代芽作為穗條，洗去培養(yǎng)基，在末端節(jié)下3mm處剪切后，將穗條末端浸泡在含有O. 5mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基中，浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理50min后清水沖洗，垂直插入消毒處理后的基質杯中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插當天扦插結束后，清水淋透基質，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，棚內溫度控制在15°C 35°C，濕度控制在80% 90%，及時淋水補充水分，溫度過高要掀開薄膜通風降溫。育苗20天后，可每天掀開薄膜通風60min。育苗15天后，扦插苗生根成活率91%。扦插苗繼續(xù)培養(yǎng)期間及時淋水、除草、施肥并注意病蟲害防治，苗高50cm以上，無病蟲害可出圃造林。實施例4 選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行繼代增殖培養(yǎng)。在12月份時進行扦插,選擇紅心土做為基質,碎土機粉碎后過80 100目篩，裝入7 X 9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高錳酸鉀溶液消毒36h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物；選擇生長健壯，高> 5cm的繼代芽作為穗條，洗去培養(yǎng)基，在末端節(jié)下3mm處剪切后，將穗條末端浸泡在含有O. 5mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基中， 浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理50min后清水沖洗，垂直插入消毒處理后的基質杯中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插當天扦插結束后，清水淋透基質，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，棚內溫度控制在15°C 35°C，濕度控制在80% 90%，及時淋水補充水分，溫度過高要掀開薄膜通風降溫。育苗25天后，可每天掀開薄膜通風40min，育苗20天后，扦插苗生根成活率85%。扦插苗繼續(xù)培養(yǎng)期間及時淋水、除草、施肥并注意病蟲害防治，苗高50cm以上，無病蟲害可出圃造林。
權利要求
1.一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法，包括任豆組培繼代芽培養(yǎng)、基質準備、扦插、育苗和出圃5個步驟，其特征在于采用組培繼代芽瓶外生根與扦插育苗兩個步驟合二為一的方法，先以常規(guī)方法組培繁殖任豆組培繼代芽，再選取任豆組培繼代芽作為插穗，經促根劑處理并扦插至紅心土基質中，育苗培養(yǎng)得到造林木苗，其操作步驟如下 (1)組培繼代芽培養(yǎng)選擇健壯無病害任豆植株樹冠外圍中上部當年生的帶有腋芽的嫩枝為外植體，消毒接種至無菌培養(yǎng)基進行芽誘導培養(yǎng)，獲得無菌芽后，將無菌芽轉移到繼代培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)； (2)基質準備選擇紅心土做為基質,用碎土機粉碎后過80 100目篩,裝入7X9cm內深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L 5g/L的高錳酸鉀溶液消毒24 36h，消毒后清水淋透基質及清洗藥物備用； (3)扦插剪取生長健壯的繼代芽作為穗條，將穗條剪切端用促根劑處理后，垂直插入塑料杯的基質中，插入深度占整個穗條的1/4 1/3，扦插后用清水淋透基質，扦插季節(jié)為當年9月至次年5月； (4)育苗育苗床上方用白色塑料薄膜搭建50 70cm高的保濕小棚，再蓋上遮蔭度75% 85%的遮蔭網(wǎng)，培育扦插苗期間按常規(guī)方法淋水、除草、施肥和病蟲害防治； (5)出圃苗高50cm以上，無病蟲害出圃造林。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法，其特征在于步驟(3)所述的穗條是選擇高> 5cm的繼代芽，洗去培養(yǎng)基，并在末端節(jié)下3mm處剪切。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法，其特征在于步驟(3)所述的促根劑處理是將穗條剪切端浸泡在含有O. 3mg/L O. 5mg/L ABT6的MS液體培養(yǎng)基中，浸泡部分占整個穗條長度的1/5 1/4，浸泡處理40 60min后清水沖洗處理用于扦插。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種任豆組培繼代芽瓶外扦插育苗方法，是采用組培繼代芽瓶外生根與扦插育苗兩個步驟合二為一的方法，先以常規(guī)方法組培繁殖任豆組培繼代芽，再選取任豆組培繼代芽作為插穗，經促根劑處理并扦插至紅心土基質中，育苗培養(yǎng)得到造林木苗出圃。本方法采用任豆組培繼代芽直接作為穗條進行瓶外扦插，繁殖速度快，且不受季節(jié)和地域限制；同時瓶外生根與扦插育苗兩個步驟合二為一，方法簡單、操作容易，扦插培養(yǎng)15～20天后開始生根，并且成活率高，生根成活率85～95%。本方法克服了現(xiàn)有任豆無性繁殖方法的不足，縮短育苗周期，提高育苗成活率，降低了育苗成本，有利于加快推進任豆無性系育苗的發(fā)展。
文檔編號A01G1/00GK102823414SQ201210345948
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月18日 優(yōu)先權日2012年9月18日
發(fā)明者陳博雯, 蔡玲, 劉海龍, 陳曉明, 覃子海, 王鵬良 申請人:廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院