一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蚌種群的建立方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蚌種群的建立方法，特征是：采用以下建立步驟：篩選出背角無齒蚌作為用于人工繁育用母蚌，放入培育池中讓寄生的鉤介幼蟲培養(yǎng)成稚蚌；在稚蚌脫苗高峰時(shí)，將黃顙魚轉(zhuǎn)移到培育池，使稚蚌在池底均勻分布培養(yǎng)成幼蚌；幼蚌從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于網(wǎng)箱；將裝有幼蚌的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘中吊養(yǎng)，直至發(fā)育背角無齒蚌子代成蚌；再將子代成蚌移植到太湖自然水域作為實(shí)驗(yàn)組，定期回捕并與仍在人工養(yǎng)殖基地養(yǎng)殖的同一批次的蚌，作為對照組，比較和測定其中污染物的殘留濃度。本發(fā)明能使水環(huán)境污染監(jiān)測結(jié)果更加可靠，可比性進(jìn)一步增強(qiáng)，有利于更為方便、快速地監(jiān)測水環(huán)境中污染物污染程度。
【專利說明】一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蚌種群的建立方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群的建立方法，具體地說就是在借鑒淡水雙殼育珠貝類繁育經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用自主篩選出的淡水生物指示貝種-背角無齒蛘(JflOOrOflia fraot/iafla),通過一系列的人工繁育和養(yǎng)殖條件優(yōu)化方法,屬于生物監(jiān)測環(huán)境【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]淡水漁業(yè)是我國漁業(yè)產(chǎn)業(yè)中非常重要的部分。迄今，淡水漁業(yè)水產(chǎn)品產(chǎn)量已占我國總量的45%。然而，目前淡水生態(tài)環(huán)境已成為水體污染最嚴(yán)重的受害者。因此，加強(qiáng)該生態(tài)環(huán)境的有效監(jiān)測體系的建設(shè)，深入了解污染物分布和污染狀況、生物累積效應(yīng)和毒性影響，為防治漁業(yè)水域的荒漠化，保護(hù)漁業(yè)資源的可持續(xù)利用、漁業(yè)的生存空間和水產(chǎn)品安全等方面均具有特別重要的意義，也非常符合“國家“十一五”科學(xué)技術(shù)發(fā)展規(guī)劃”提出的“建立適合國情的水體污染監(jiān)測、控制與水環(huán)境質(zhì)量改善技術(shù)體系”的目標(biāo)要求和《國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要》(2006-2020)中提出的“建立適合國情的水體污染監(jiān)測、控制與水環(huán)境質(zhì)量改善技術(shù)體系”等的精神；并可以為貫徹和執(zhí)行《中華人民共和國水污染防治法(修訂草案)》中所強(qiáng)調(diào)的完善水環(huán)境調(diào)查和研究等方針和政策，以及我國8部委出臺(tái)的國家《重金屬污染綜合治理實(shí)施方案》等提供重要的理論和技術(shù)支撐。
[0003]水體污染可常以突發(fā)事件的形式出現(xiàn)，但由于其在水生態(tài)系統(tǒng)中有殘留及積累特性，在重大污染事件發(fā)生之前，一般都能監(jiān)測到污染源及其動(dòng)態(tài)的征兆。近年來，國際上利用污染物在生物體內(nèi)的濃縮特性，通過測定指示生物中持久性污染物的含量來監(jiān)測污染，預(yù)測污染的動(dòng)態(tài)并指導(dǎo)風(fēng)險(xiǎn)防范等已備受重視。針對國內(nèi)外尚缺乏系統(tǒng)淡水“貝類觀察”的局面和我國國情，2003年起 申請人:篩選出背角無齒蛘iAnodonta woodiana)通過原地米集該蛘野生個(gè)體，率先進(jìn)行了我國重要漁業(yè)水域太湖重金屬等持久性污染物監(jiān)測的可行性探索。但是，我們逐漸注意到，目前僅依賴于調(diào)查水域野生蛘采樣的研究和應(yīng)用會(huì)受到很大的限制(如樣本規(guī)格不均，一些待調(diào)查水域無法采到樣本等。國內(nèi)外的“貽貝觀察”等也受到相同情況的限制)；因此，創(chuàng)新性地開發(fā)出一種規(guī)格、數(shù)量、污染背景值等均可控，且可野外移殖和回捕的標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)測指示生物專用背角無齒蛘(以下簡稱標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘，下同)，從而對今后建立大規(guī)模、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化“淡水貝類觀察”研究體系以及提供一種背景可控的模式指示生物是本發(fā)明的關(guān)鍵所在。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于 克服上述不足之處，提供一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群的建立方法，在借鑒淡水雙殼育珠貝類繁育經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用自主篩選出的淡水生物指示貝種-背角無齒蛘C4/70￡/0/7ia WOOtZiafla ),通過一系列的人工繁育和養(yǎng)殖條件優(yōu)化方法，建立一個(gè)全人工繁育基礎(chǔ)上的使用方便、數(shù)量較大、規(guī)格一致、污染背景低、可專用于野外移殖監(jiān)測，各方面均較為規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的背角無齒蛘養(yǎng)殖種群，以達(dá)到獲得一種不受野外是否能采到蛘樣、野外所采蛘樣大小不一、污染背景復(fù)雜、數(shù)量無法預(yù)測等傳統(tǒng)研究方法的限制，從而使水環(huán)境污染監(jiān)測結(jié)果更加可靠，可比性進(jìn)一步增強(qiáng)，有利于更為方便、快速地監(jiān)測水環(huán)境中污染物污染程度的目的，
按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法，采用以下建立步驟:
1、篩選出健康的背角無齒蛘作為用于人工繁育用母蛘，洗凈母蛘殼表面的附著物，用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有4-6 L池塘水的容器中，用100目紗絹濾除上層粘液,加入準(zhǔn)備好的黃顙魚,每組10尾-20尾，以30-40 r ^mirT1的速率沿盆壁順時(shí)針方向攪動(dòng)，20-30min后將魚撈出，放入培育池中讓寄生的鉤介幼蟲培養(yǎng)成稚蛘；繁育用水溶解氧(DO) >5.0 mg.I/1，pH 值為 7.7-8.6 ；
2、在稚蛘脫苗高峰時(shí)，將黃顙魚轉(zhuǎn)移到培育池，脫落后的稚蛘進(jìn)行流水培養(yǎng)直至殼長大于I cm;培育用水的溫度為23.8-34.7 °C ;pH為6.8-7.6 ;溶解氧DO為7.65-11.0mg.L-1 ;濁度為 3.89-8.39 NTU，電導(dǎo)率為 346-500 μ S.cnT1，水流速度為 5-10 L.mirT1 ；每周向培育池中均勻加入100- 300g泥沙作為底質(zhì)，并定期翻池，使稚蛘在池底均勻分布培養(yǎng)成幼蛘；所用泥沙經(jīng)80目網(wǎng)篩過濾，粒徑〈0.2 mm ;
3、幼蛘從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于網(wǎng)箱；將網(wǎng)箱頂部的網(wǎng)片剪出一條縫隙，以便放置幼蛘和采集樣本；將裝有幼蛘的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘中吊養(yǎng)，吊養(yǎng)的深度為水面下30-60 cm ；吊養(yǎng)期間水溫為:6.0-28.7 °C, pH值為7.0-8.6，溶解氧>5.0 mg.?Λ幼蛘以濾食水體中的餌料生物為食；以便其體內(nèi)污染物的背景控制在低水平，直至發(fā)育至規(guī)格:(殼長>6cm、殼寬>2cm、殼高>3cm)、數(shù)量(>3000個(gè)體)、污染背景值(如重金屬Cu、Cd、Pb含量均小于中華人民共和國無公害食品一水產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)限量農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)/NY5073-2006 ;即Cu、Cd和Pb的含量分別小于50、1.0、1.0 μ g.g_1濕重)均可控的背角無齒蛘子代成蛘(即本專利所稱的標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘)；
4、再將子代成蛘移植到太湖自然水域作為實(shí)驗(yàn)組，定期回捕并與仍在人工養(yǎng)殖基地養(yǎng)殖的同一批次的蛘，作為對照組，比較和測定其中污染物的殘留濃度(對照組Cu未檢出、Cd0.002-0.006 μ g.g-1 濕重、Pb0.2-0.3 μ g.g-1 濕重；實(shí)驗(yàn)組 Cu 未檢出-0.08 μ g.g_1 濕重、Cd未檢出-0.008 μ g.g_1濕重、Pb未檢出-0.2 μ g.g_1濕重)；從而了解污染物在自然水域的污染程度。
[0005]本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):
本發(fā)明借鑒淡水雙殼育珠貝類繁育經(jīng)驗(yàn)，創(chuàng)新性地通過一系列的人工繁育和養(yǎng)殖條件優(yōu)化方法，確保建立一個(gè)全人工繁育基礎(chǔ)上的使用方便、數(shù)量較大、規(guī)格一致、污染背景低、可專用于野外移殖監(jiān)測，各方面均標(biāo)準(zhǔn)化的背角無齒蛘養(yǎng)殖種群，以達(dá)到獲得一種不受野外是否能采到蛘樣、野外所采蛘樣大小不一、污染背景復(fù)雜、數(shù)量無法預(yù)測等傳統(tǒng)研究方法的限制，從而使水環(huán)境污染監(jiān)測結(jié)果更加可靠，可比性進(jìn)一步增強(qiáng)，有利于更為方便、快速地監(jiān)測水環(huán)境中污染物污染程度的目的。利用該方法建立的標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群開展水環(huán)境污染監(jiān)測研究取樣方便、穩(wěn)定性好、可重復(fù)性高、可比性強(qiáng)、系統(tǒng)誤差小，可以突破傳統(tǒng)野生貝類監(jiān)測的局限，更為準(zhǔn)確評(píng)估及預(yù)測上述各污染物對漁業(yè)水域的危害風(fēng)險(xiǎn)和發(fā)展趨勢。所有這些均顯示出將建立的標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群作為規(guī)范化的淡水污染物生物指示物的獨(dú)特功能。【具體實(shí)施方式】
[0006]下面本發(fā)明將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步描述:
實(shí)施例一:利用“一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法”有效育成“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘
于2009年5月至2011年6月在淡水漁業(yè)研究中心南泉基地進(jìn)行“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群建立工作。洗凈母蛘殼表面的附著物，用塑料吸管吸水輕輕的把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有4 L池塘水的塑料盆中，用100目紗絹濾除上層粘液，加入準(zhǔn)備好的黃顙魚(每組10尾)，以30r ^mirT1的速率沿盆壁順時(shí)針方向攪動(dòng)，20min后將魚撈出，放入培育池中培養(yǎng)。繁育用水要求溶解氧(DO) >5.0
[0007]在稚蛘脫苗高峰時(shí)，將寄生魚轉(zhuǎn)移到培育池。水流為5 I^mirT1，隨著培育時(shí)間的推移，水流逐漸增大，以提供充足的餌料和溶解氧。另外，每周向培育池中均勻加入100g泥沙作為底質(zhì)。所用泥沙經(jīng)80目網(wǎng)篩過濾，粒徑〈0.2 mm。為了使稚蛘在池底均勻分布，每天進(jìn)行一次翻池。
[0008]幼蛘從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于20個(gè)網(wǎng)箱。將網(wǎng)箱頂部的網(wǎng)片剪出一條10 cm長的縫隙，以便 放置幼蛘和采集樣本。將裝有幼蛘的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘(29mX 11.5 mX 1.5 m)中，吊養(yǎng)的深度為水面下50 cm。吊養(yǎng)期間,水環(huán)境條件要求:水溫為6.0 °C，pH值為7.1，幼蛘以濾食水體中的餌料生物為食，不進(jìn)行額外的投餌。保持上述條件使幼蛘繼續(xù)正常生長發(fā)育至子代成蛘。
[0009]經(jīng)過實(shí)施例一整個(gè)過程，成功建立了一個(gè)具有3000只規(guī)格和遺傳質(zhì)量一致，數(shù)量較大，污染背景值等均可控的“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群。
[0010]實(shí)施例二:利用“一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群的建立方法”有效育成“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘
于2010年4月至2013年9月在淡水漁業(yè)研究中心南泉基地進(jìn)行“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群建立工作。洗凈母蛘殼表面的附著物，用塑料吸管吸水輕輕的把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有5 L池塘水的塑料盆中，用100目紗絹濾除上層粘液，加入準(zhǔn)備好的黃顙魚(每組10尾)，以35 PmirT1的速率沿盆壁順時(shí)針方向攪動(dòng)，約25 min后將魚撈出，放入培育池中培養(yǎng)。繁育用水要求溶解氧(DO) >5.0 mg.!/1，pH值為8。
[0011]在稚蛘脫苗高峰時(shí)，將寄生魚轉(zhuǎn)移到培育池。水流速度為SLmirT1，以提供充足的餌料和溶解氧。另外，每周向培育池中均勻加入200 g泥沙作為底質(zhì)。所用泥沙經(jīng)80目網(wǎng)篩過濾，粒徑〈0.2 mm。為了使稚蛘在池底均勻分布，每天進(jìn)行一次翻池。
[0012]幼蛘從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于30個(gè)網(wǎng)箱。將網(wǎng)箱頂部的網(wǎng)片剪出一條10cm長的縫隙，以便放置幼蛘和采集樣本。將裝有幼蛘的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘(29 mX23mX1.5 m)中，吊養(yǎng)的深度為水面下55 cm。吊養(yǎng)期間，水環(huán)境條件要求:pH值為7.4，溶解氧>5.0 mg.!/1，幼蛘以濾食水體中的餌料生物為食，不進(jìn)行額外的投餌。保持上述條件使幼蛘繼續(xù)正常生長發(fā)育至子代成蛘。
[0013]經(jīng)過實(shí)施例二整個(gè)過程，成功建立了一個(gè)具有7000余只規(guī)格和遺傳質(zhì)量一致，數(shù)量較大，污染背景值等均可控的“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群。
[0014]實(shí)施例三:利用“一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群的建立方法”有效育成“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘
于2013年5月至2013年9月，在淡水漁業(yè)研究中心南泉基地以人工繁育的母蛘進(jìn)行“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘“標(biāo)本庫”的資源補(bǔ)充工作。洗凈母蛘殼表面的附著物，用塑料吸管吸水輕輕的把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有6 L池塘水的塑料盆中，用100目紗絹濾除上層粘液，加入準(zhǔn)備好的黃顙魚(每組20尾)，以40 r.mirT1的速率沿盆壁順時(shí)針方向攪動(dòng)，30 min后將魚撈出，放入培育池中暫養(yǎng)。
[0015]在稚蛘脫苗高峰時(shí)，將寄生魚轉(zhuǎn)移到培育池(1.0 mX1.5 mX0.2 m)中，脫落后的稚蛘進(jìn)行流水培養(yǎng)直至殼長大于I cm。繁育用水的溫度為23.8°C；pH為7.6 ;溶解氧DO為
7.65 mg.L—1 ;濁度為3.89 NTU，電導(dǎo)率為346 μ S.cm—1，水流速度為10 L.mirT1,以提供充足的餌料和溶解氧。另外，每周向培育池中均勻加入300 g泥沙作為底質(zhì)。所用泥沙經(jīng)80目網(wǎng)篩過濾，粒徑〈0.2 _。為了使稚蛘獲得充足的溶解氧并能夠在池底均勻分布，每天進(jìn)行一次翻池。
[0016]幼蛘從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于30個(gè)網(wǎng)箱中。將裝有幼蛘的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘(29 mX 11.5 mX 1.5 m)中，吊養(yǎng)的深度為水面下60 cm。吊養(yǎng)期間,水環(huán)境條件要求:pH值為8.6，溶解氧>5.0 mg噸人幼蛘以濾食水體中的餌料生物為食，不進(jìn)行額外的投餌。保持上述條件使幼蛘正常生長發(fā)育。
[0017]經(jīng)過實(shí)施例三整個(gè)過程，再次成功建立了約4000只年齡/規(guī)格、生長速率一致，遺傳質(zhì)量穩(wěn)定，污染背景值較低的“標(biāo)準(zhǔn)化”背角無齒蛘種群。
[0018]本發(fā)明克服傳統(tǒng)研究方法能否采到蛘樣得不到保證、野外所采蛘樣大小不一、污染背景復(fù)雜、數(shù)量無法預(yù)測等的不足，提供一種基于人工繁育的技術(shù)，建立規(guī)格、數(shù)量、污染背景值等均可控，且可野外移殖和回捕的標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)測指示生物專用背角無齒蛘種群的方法，即用健康的背角無齒蛘成蛘`作為建立種群的親本及養(yǎng)殖的對象，在人工養(yǎng)殖基地通過人工繁育技術(shù)及養(yǎng)殖環(huán)境條件的調(diào)控獲得受精卵、鉤介幼蟲、稚蛘、幼蛘和子代成蛘，再將子代成蛘移植到太湖自然水域作為實(shí)驗(yàn)組，定期回捕并與仍在人工養(yǎng)殖基地養(yǎng)殖的同一批次的“姊妹蛘”(作為對照組)比較和測定其中污染物(如重金屬)的殘留濃度，了解污染物在自然水域的污染程度，為在漁業(yè)水域開展規(guī)范化的“淡水貝類觀察”監(jiān)測打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
【權(quán)利要求】
1.一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法，其特征是:采用以下建立步驟: (1)、篩選出背角無齒蛘作為用于人工繁育用母蛘，洗凈母蛘殼表面的附著物，用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有4-6 L池塘水的容器中，用100目紗絹濾除上層粘液，加入準(zhǔn)備好的黃顙魚，每組10尾-20尾，以30-40 r ^mirT1的速率沿盆壁順時(shí)針方向攪動(dòng)，20-30min后將魚撈出，放入培育池中讓寄生的鉤介幼蟲培養(yǎng)成稚蛘；繁育用水溶解氧 DO>5.0 mg.I/1，pH 值為 7.7-8.6 ； (2)、在稚蛘脫苗高峰時(shí)，將黃顙魚轉(zhuǎn)移到培育池，脫落后的稚蛘進(jìn)行流水培養(yǎng)直至殼長大于I cm ;培育用水的溫度為23.8-34.7 V ；pH值為6.8-7.6 ;溶解氧DO為7.65-11.0mg.I/1 ;濁度為 3.89-8.39 NTU，電導(dǎo)率為 346-500 μ S.cnT1，水流速度為 5-10 L.mirT1 ；每周向培育池中均勻加入100- 300g泥沙作為底質(zhì)，并定期翻池，使稚蛘在池底均勻分布培養(yǎng)成幼蛘； (3)、幼蛘從培育池中轉(zhuǎn)移出來，均勻置于網(wǎng)箱；將網(wǎng)箱頂部的網(wǎng)片剪出一條縫隙，放置幼蛘和采集樣本；將裝有幼蛘的網(wǎng)箱均勻分布于養(yǎng)殖池塘中吊養(yǎng)，吊養(yǎng)的深度為水面下30-60 cm;吊養(yǎng)期間水溫為:6.0-28.7 °C，pH 值為 7.0-8.6，溶解氧 DO >5.0 mg.U1, if]蛘以濾食水體中的餌料生物為食；直至發(fā)育至規(guī)格:殼長>6cm、殼寬>2cm、殼高>3cm、數(shù)量>3000個(gè)體的背角無齒蛘子代成蛘； (4)、再將子代成蛘移植到太湖自然水域作為實(shí)驗(yàn)組，定期回捕并與仍在人工養(yǎng)殖基地養(yǎng)殖的同一批次，即均來自相同母蛘同一時(shí)間人工繁育所獲得的個(gè)體的蛘，作為對照組，t匕較和測定其中污染物的殘留濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法，其特征是:所述步驟(2)所用泥沙經(jīng)80目網(wǎng)篩過濾，粒徑〈0.2 mm。
3.如權(quán)利要求1所述的一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法，其特征是:所述規(guī)格中的污染背景值如:重金屬Cu、Cd、Pb含量分別小于50、1.0,1.0yg-g—1濕重。
4.如權(quán)利要求1所述的一種淡水環(huán)境監(jiān)測專用標(biāo)準(zhǔn)化背角無齒蛘種群的建立方法，其特征 是:所述步驟(4)中，所述對照組Cu未檢出Cd 0.002-0.006 μ g.g4濕重、Pb0.2-0.3 μ g.g_1 濕重；實(shí)驗(yàn)組 Cu 未檢出-0.08 μ g.g_1 濕重、Cd 未檢出-0.008 μ g.g_1濕重、Pb未檢出-0.2 μ g.g_1濕重。
【文檔編號(hào)】A01K61/00GK103548728SQ201310509941
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年10月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月25日
【發(fā)明者】楊健, 陳修報(bào), 劉洪波 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心