1%異噻唑啉酮·2%二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供1%異噻唑啉酮·2%二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用，屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】。該應(yīng)用既能防治三倍體西瓜果斑病又能提高三倍體西瓜種子的發(fā)芽勢(shì)的化學(xué)藥劑，為三倍體西瓜的生產(chǎn)及病害防治提供科學(xué)依據(jù)。
【專利說(shuō)明】1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及1%異噻唑啉酮.2%二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]瓜類細(xì)菌性果斑病(bacterial fruit blotch, BFB)是葫蘆科作物上的一種毀滅性細(xì)菌病害，在世界多國(guó)及我國(guó)多個(gè)省份均有發(fā)生，屬世界性檢疫病害。其病原為西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli Schaad et al.，2008)。1998年,我國(guó)學(xué)者張榮意等在海南省發(fā)現(xiàn)并首次報(bào)道了該病害，對(duì)其發(fā)病癥狀進(jìn)行了詳細(xì)的描述。近年來(lái)我國(guó)新疆、海南、河南、福建、內(nèi)蒙古、山東、吉林、黑龍江等省份相繼發(fā)生該病害。
[0003]該病是典型的種傳病害，病原菌可在種子上存活19年之久，通過(guò)種子進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播。該病菌除了侵染西瓜和甜瓜外，還能侵染南瓜、黃瓜等葫蘆科作物，一旦發(fā)生，就會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。且被污染的種子導(dǎo)致植株在幼苗期、成株期和果實(shí)發(fā)病。田間發(fā)病果實(shí)中的種子有較高的帶菌率。因此獲得安全有效的種子殺菌劑來(lái)防治該病害顯得尤為重要。
[0004]三倍體西瓜由于其不能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂和受精作用，導(dǎo)致種子敗育，故又稱無(wú)籽西瓜。但因其無(wú)籽、含糖量高和抗病性強(qiáng)等因素倍受消費(fèi)者和生產(chǎn)者的青睞。由于其種皮厚、種胚發(fā)育不完全等因素導(dǎo) 致的發(fā)芽率低、成苗率低等嚴(yán)重制約了無(wú)籽西瓜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。自1998年我國(guó)報(bào)道有果斑病發(fā)生以來(lái)，對(duì)于無(wú)籽西瓜的生產(chǎn)無(wú)疑是雪上加霜?，F(xiàn)有技術(shù)中通過(guò)種子破殼、化學(xué)藥劑引發(fā)、激素處理(赤霉素)及化學(xué)藥劑處理等方法來(lái)幫助三倍體西瓜種子發(fā)芽提高其發(fā)芽率。但目前，在防治三倍體西瓜果斑病中，還沒(méi)有對(duì)瓜類種子破殼處理后進(jìn)行藥劑處理的報(bào)道。因此這就為三倍體西瓜果斑病防治的藥劑選擇以及處理方法帶來(lái)了困難，并且現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)三倍體西瓜種子進(jìn)行破殼處理的藥劑和方法都不能達(dá)到理想的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]根據(jù)上述領(lǐng)域的需求和不足，本發(fā)明提供1%異噻唑啉酮.2%二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用，并對(duì)三倍體西瓜種子進(jìn)行處理證明，本發(fā)明應(yīng)用既能防治三倍體西瓜果斑病又能提高三倍體西瓜種子的發(fā)芽勢(shì)的化學(xué)藥劑，為三倍體西瓜的生產(chǎn)及病害防治提供科學(xué)依據(jù)。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007]1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用，其特征在于，所述乳油在處理三倍體西瓜種子時(shí)，對(duì)種子進(jìn)行破殼處理。
[0008]所述1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油稀釋倍數(shù)為180-220倍液。
[0009]所述稀釋倍數(shù)為200倍液。
[0010]上述的應(yīng)用，使用時(shí)將破殼后的種子浸泡在所述乳油中，再在30_32°C條件下催芽。
[0011]所述催芽的溫度為32°C。
[0012]所述浸泡時(shí)間為a小時(shí)。
[0013]所述1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油處理種子的方式為2小時(shí)/次。
[0014]目前，果斑病的防治主要有種子處理、田間藥劑噴霧防治等方式。馮建軍等在用0.1%CuS04、0.2%ZnS04和鹽溶液處理三倍體西瓜種子時(shí)，提高種子發(fā)芽率并對(duì)果斑病有很好的消毒效果，但其并沒(méi)有通過(guò)室內(nèi)種植試驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步確定引發(fā)溶液對(duì)果斑病菌的具體消毒效果。本發(fā)明中使用1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油200、100、50倍液處理帶菌種子2h, 200倍液處理種子后與對(duì)照相比發(fā)芽率提高4.9%，且促進(jìn)根的生長(zhǎng)，對(duì)果斑病的防治效果達(dá)74.7.%。而100倍液和50倍液處理種子2h，發(fā)芽勢(shì)與對(duì)照CKl相比分別低2.8%和
6.1%，且根的生長(zhǎng)菌受到抑制。其次是72%農(nóng)用硫酸鏈霉素1000倍液處理種子2h，與對(duì)照CKl相比不僅發(fā)芽勢(shì)提高10.5%，促進(jìn)根的生長(zhǎng)且對(duì)果斑病的防治效果達(dá)49.3%。其防治效果與王爽等研究結(jié)果相比略低，考慮種子破殼的原因?qū)е陆臃N后帶菌率過(guò)高。40%甲醛100倍液處理種子Ih和1%HCL處理種子30min，均不同程度提高了種子的發(fā)芽勢(shì)，與對(duì)照相比發(fā)芽勢(shì)分別提高了 6.7%和1.2%，對(duì)果斑病的防治效果分別達(dá)58.5%和73.7%?？紤]鹽酸在進(jìn)行種子處理時(shí)對(duì)根的生長(zhǎng)有一定的抑制作用以及成苗率與對(duì)照相近，建議生產(chǎn)中酌情慎重使用。而本發(fā)明中使用1%異噻唑啉銅2% 二硫氰甲烷乳油100倍液、50倍液處理種子后發(fā)芽勢(shì)及根的生長(zhǎng)均受到影響，因而不建議使用。
[0015]72%農(nóng)用硫酸鏈霉素和40%甲醛溶液為生產(chǎn)防治瓜類細(xì)菌性果斑病常用防治藥劑，他們?cè)诜乐喂卟〉那疤嵯乱蔡岣呷扼w西瓜發(fā)芽勢(shì)和成苗率，但1%異噻唑啉銅.2%二硫氰甲烷乳油200倍液提高發(fā)芽勢(shì)的前提對(duì)果斑病的防治效果明顯高于該兩種常用藥劑，分別高出:25.4%和16.2`%。本發(fā)明數(shù)據(jù)表明，1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油對(duì)果斑病的防治及提高種子的發(fā)芽勢(shì)有重要作用。
[0016]本發(fā)明用1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油和3種常用藥劑，對(duì)三倍體西瓜種子進(jìn)行藥劑處理。比較了不同藥劑及不同濃度下處理人工接菌種子對(duì)種子發(fā)芽、幼苗生長(zhǎng)的促進(jìn)作用及對(duì)果斑病的防治效果。結(jié)果顯示:4種藥劑處理種子對(duì)果斑病有很好的防治效果，1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油(稀釋200倍)、1%HCL、40%甲醛(稀釋100倍液)和72%農(nóng)用硫酸鏈霉素(稀釋1000倍液)的防治效果分別為74.7%,73.7%,58.5%和49.3%。同時(shí)與對(duì)照CKl (種子破殼，清水處理)相比較，72%農(nóng)用硫酸鏈霉素1000倍液處理2h、40%甲醛100倍液處理Ih和1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油200倍液處理2h，發(fā)芽勢(shì)分別高出10.5%、6.7%和4.9%，并且提高了出芽整齊度和成苗率。
[0017]本發(fā)明中催芽溫度在30_32°C均可滿足實(shí)驗(yàn)要求，在實(shí)施例中不在累述。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1為藥劑處理對(duì)破殼種子活力的影響；
[0019]圖2為藥劑處理后種子表面帶菌情況；
[0020]圖3為藥劑處理后種子整體包括種子內(nèi)部帶菌情況；
[0021]圖4為帶菌種子藥劑處理防治效果及成苗情況；
[0022]其中，I號(hào)殺菌劑是指1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油?！揪唧w實(shí)施方式】
[0023]提供下述實(shí)施例是為了更好地進(jìn)一步理解本發(fā)明，并不局限于所述實(shí)施方式，不對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容和保護(hù)范圍構(gòu)成限制，任何人在本發(fā)明的啟示下或是將本發(fā)明與其他現(xiàn)有技術(shù)的特征進(jìn)行組合而得出的任何與本發(fā)明相同或相近似的產(chǎn)品，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0024]實(shí)施例中未注明具體實(shí)驗(yàn)步驟或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟的操作或條件即可進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市購(gòu)獲得的常規(guī)試劑產(chǎn)品。
[0025]本發(fā)明中，對(duì)于1%異噻唑啉酮.2%二硫氰甲烷乳油應(yīng)用于防治三倍體西瓜種子的果斑病處理三倍體西瓜種子時(shí)，其稀釋倍數(shù)100倍和50倍不可用，其稀釋倍數(shù)為180倍和220均可用，本發(fā)明人在本發(fā)明申請(qǐng)日前也同樣用180倍液和220倍液做過(guò)實(shí)驗(yàn)，其中180倍液和220倍液的效果與 200倍液效果相似，在【具體實(shí)施方式】中不在累述。
[0026]材料試劑:
[0027]供試種子:三倍體西瓜種子(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所劉文革提供)。供試菌株:本實(shí)驗(yàn)室保存的果斑病菌菌株Aac-5。供試藥劑:40%福爾馬林(西隴化工股份有限公司)、鹽酸(北京化工廠)、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素SPX (華北制藥股份有限公司)、1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油為購(gòu)自北京化學(xué)試劑公司的異噻唑啉酮和二硫氰甲烷乳油按照1%異噻唑啉酮與2% 二硫氰甲烷乳油以及97%的二甲苯的比例混合配制。培養(yǎng)基:King’ s B(KB)培養(yǎng)基。
[0028]實(shí)施例1.三倍體西瓜種子處理
[0029]( I)破殼及種子接種
[0030]催芽前西瓜種子破殼，力度適中，注意不能損傷種胚。破殼后浸入55°C溫水中，室溫下4h，清水搓洗一次。稍晾干種子表面水分后種子放入果斑病菌菌液(0D_~ 0.3)中浸泡30min,按照Ig種子2mL菌液的比例。
[0031](2)種子藥劑處理
[0032]將破殼浸種后的種子分別浸入40%福爾馬林100倍液lh、l%鹽酸30min、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素1000倍液2h、I號(hào)殺菌劑(1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油)200倍液2h，藥劑浸種后用清水沖洗3次，三次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100粒種子。32°C條件下催芽。CKl (破殼種子，清水處理)作對(duì)照。3天后調(diào)查發(fā)芽情況，計(jì)算發(fā)芽勢(shì)，并對(duì)出芽種子進(jìn)行根長(zhǎng)測(cè)量，將試驗(yàn)獲得數(shù)據(jù)用DPS軟件進(jìn)行差異顯著性分析。
[0033]發(fā)芽勢(shì)(％) =3天后發(fā)芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)X 100%。
[0034](3)供試藥劑對(duì)果斑病菌的消毒效果
[0035]將人工接菌種子按照1.2.2方法處理后，每個(gè)重復(fù)取5粒種子，單粒種子于滅過(guò)菌的離心管內(nèi)，加入ImL無(wú)菌水，置于4°C振蕩24h后，吸取100 μ L浸提液涂布于加有氨芐青霉素(Amp)的KB平板，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，明確各藥劑的殺菌效果，試驗(yàn)重復(fù)3次。破殼種子，接菌后清水處理作為陽(yáng)性對(duì)照CK2 ;破殼種子，清水處理作為空白對(duì)照CK3。相同處理方法，將帶菌種子藥劑處理后單粒種子進(jìn)行研磨，加入無(wú)菌水lmL，混勻后取100 μ L涂布，檢測(cè)種子整體包括種子內(nèi)部帶菌情況。種子帶菌量的統(tǒng)計(jì):C表示不同藥劑處理后平板上病菌的平均菌落數(shù)(個(gè)/平皿)。計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，一:C=O; +:0<C^ 10； ++:10< C ^ 100 ； + + +:100 < CS 500，能看清單菌落；+ + + +:C > 500，菌落長(zhǎng)滿整個(gè)平板。將該處理剩余的種子播種于滅過(guò)菌的土壤中，3次重復(fù)。出苗后I周調(diào)查子葉發(fā)病率，計(jì)算防治效果。
[0036]實(shí)施例2.實(shí)施例1種子處理的效果驗(yàn)證
[0037](I)藥劑處理對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)的影響
[0038]三倍體西瓜種子藥劑處理后，對(duì)發(fā)芽勢(shì)的影響見(jiàn)表1和圖1。破殼后進(jìn)行藥劑處理，發(fā)芽勢(shì)各處理間差異顯著。72%農(nóng)用硫酸鏈霉素1000倍液處理2h出芽效果最好，發(fā)芽勢(shì)較CKl高10.5%。其次是40%甲醛100倍液、I號(hào)殺菌劑(1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油)200倍液和1%HCL，藥劑處理破殼種子后發(fā)芽勢(shì)與CKl相比分別高出:6.7%、4.9%和1.2%。
[0039]表1.藥劑處理對(duì)三倍體西瓜種子活力的影響
【權(quán)利要求】
1.1%異噻唑啉酮.2% 二硫氰甲烷乳油在防治三倍體西瓜果斑病中的應(yīng)用，其特征在于，所述乳油在處理三倍體西瓜種子時(shí)，對(duì)種子進(jìn)行破殼處理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述1%異噻唑啉酮.2%二硫氰甲烷乳油稀釋倍數(shù)為180-220倍液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述稀釋倍數(shù)為200倍液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的應(yīng)用，其特征在于，使用時(shí)將破殼后的種子浸泡在所述乳油中，再在30-32 °C條件下催芽。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述催芽的溫度為32°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述浸泡時(shí)間為2h小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述1%異噻唑啉酮.2%二硫氰甲烷乳油處理種子的方式為2 小時(shí)/次。
【文檔編號(hào)】A01P1/00GK103749514SQ201410032244
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2014年1月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月23日
【發(fā)明者】趙廷昌, 折冬梅, 董春玲, 孫柏欣, 楊玉文, 王鐵霖 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所