一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，包括如下步驟：(1)光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理，對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；(2)鹵蟲培養(yǎng)容器消毒處理，對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；(3)鹵蟲養(yǎng)殖液的配制；(4)光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)；(5)鹵蟲的接種與培養(yǎng)。本發(fā)明的優(yōu)點是采用光合細(xì)菌作為鹵蟲的單一餌料，采用一步食物鏈養(yǎng)殖方式，營養(yǎng)全面、培養(yǎng)方便、無毒無害、成本較低。
【專利說明】一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于鹵蟲養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其是涉及一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]光合細(xì)菌(PSB, photosynthetic bacteria)是一類厭氧或者兼性厭氧自養(yǎng)細(xì)菌，廣泛分布于土壤、鹽湖、淡水、海水、溫泉甚至兩極地區(qū)，在污染嚴(yán)重的排污口也大量存在。光合細(xì)菌能夠在厭氧條件下進(jìn)行光合作用，但是不釋放氧氣，胞內(nèi)含有多種菌綠素和類胡蘿卜素，光照條件下能夠利用硫化氫、硫代硫酸鹽、分子氫等將二氧化碳還原成有機物，同時固定大氣中的氮。光合細(xì)菌含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì):蛋白質(zhì)，維生素B12、葉酸、核黃素、類胡羅卜素、輔酶QlO等促長因子和生理活性物質(zhì)。
[0003]目前，光合細(xì)菌僅作為一種營養(yǎng)添加劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，如魚類、蝦蟹等，但是單純將光合細(xì)菌作為單一的餌料進(jìn)行養(yǎng)殖的技術(shù)還沒有相關(guān)案例。
[0004]鹵蟲(Artemia sp.)又稱豐年蟲,是一種廣溫耐鹽性的一種小型甲殼動物,能夠在淡水和咸水中生活。齒蟲含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，干品含有蛋白質(zhì)60%、脂肪20%以及豐富的高級不飽和脂肪酸、微量元素和種類豐富的生長因子。鹵蟲作為一種優(yōu)質(zhì)的活體餌料，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用非常廣泛。但是目前國際上鹵蟲資源有限，成體鹵蟲資源主要依靠野生繁殖，國際上人工養(yǎng)殖鹵蟲的技術(shù)含量也比較低，主要是越南等國家的粗放養(yǎng)殖為主。目前常用的養(yǎng)殖方法是在養(yǎng)殖的初期以肥水和補充生物餌料豐富的鹵水為主，使透明度保持在30cm左右，隨著鹵蟲的生長發(fā)育，需要逐步投喂有機碎屑，如糠麩、油餅類、玉米、雞糞、牛羊糞等。顆粒要小于50μπι，投喂量30— 50kg/天?公頃，要分次飼喂。有條件可使用無機肥，每周每公頃水面施加尿素20kg、磷酸氫二銨25kg。因此，高技術(shù)含量的鹵蟲高密度養(yǎng)殖技術(shù)亟待解決。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種利用光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，尤其適合高密度養(yǎng)殖鹵蟲。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案是一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，包括以下步驟:
[0007]一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，包括如下步驟:
[0008](I)光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理
[0009]對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；
[0010](2)鹵蟲培養(yǎng)容器消毒處理
[0011]對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈；
[0012](3)光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制；
[0013](4)鹵蟲養(yǎng)殖液的配制；
[0014](5)光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)；
[0015](6)鹵蟲的接種與培養(yǎng)。
[0016]進(jìn)一步，所述步驟(I)和步驟(2)均采用6%的次氯酸鈉溶液對培養(yǎng)容器進(jìn)行12h的消毒處理。
[0017]進(jìn)一步，所述步驟(3)光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制方法是:將過濾后的飽和鹵水與淡水混合，配制成鹽度為30?150%。的人工海水；或者用海水晶或海水素調(diào)和淡水配制。
[0018]進(jìn)一步，所述步驟(4)鹵蟲養(yǎng)殖液的配制包括如下步驟:
[0019](I)將過濾后的飽和鹵水與淡水混合,或者用海水晶或海水素調(diào)和淡水配制，配制成鹽度為30?150%。鹵蟲養(yǎng)殖液；
[0020](2)次氯酸鈉消毒，調(diào)節(jié)pH為6.5?7.5 ;
[0021](3)充分曝氣，紫外線照射后得到鹵蟲養(yǎng)殖液。
[0022]進(jìn)一步，所述步驟(5)的光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)方法為:將光合細(xì)菌菌種以10%體積比以上的接種量接種到光合細(xì)菌培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)，維持溫度為25?35°C，pH
6.5?8.5，光照強度2000LUX以上，鹽度為30?150%。，光合細(xì)菌密度達(dá)到109ind/ml以上時培養(yǎng)完成，得到成品光合細(xì)菌。
[0023]進(jìn)一步，所述步驟出)的鹵蟲的接種與培養(yǎng)方法為:將孵化后的鹵蟲無節(jié)幼體接種到鹵蟲養(yǎng)殖液中，接種密度為1500?10，000ind/L，維持培養(yǎng)溫度為25?35°C，pH為
6.5?7.5，溶解氧D03.0?8.0ppm,自然光照，鹽度為30?150%。，鹵蟲養(yǎng)殖液在培養(yǎng)容器中的深度為10?60cm，培養(yǎng)過程中持續(xù)在鹵蟲養(yǎng)殖液中加入光合細(xì)菌成品，當(dāng)鹵蟲體長大于Icm時,養(yǎng)殖結(jié)束。
[0024]進(jìn)一步，所述的培養(yǎng)過程中持續(xù)向鹵蟲養(yǎng)殖液中加入光合細(xì)菌成品，培養(yǎng)結(jié)束時鹵蟲養(yǎng)殖液透明度為1cm左右。
[0025]本發(fā)明采用的鹵蟲無節(jié)幼體密度的測量方法為從混勻的孵化液中取100 μ I鹵蟲5次，在解剖鏡下分別計數(shù)，計算五次平均值作為鹵蟲無節(jié)幼體的密度；采用的鹵蟲體長的測量方法為隨機選擇鹵蟲10只，在顯微鏡鏡下分別測量體長，計算10個數(shù)據(jù)的平均值作為鹵蟲的平均體長；根據(jù)鹵蟲無節(jié)幼體的成活率、生長及攝食情況，實時調(diào)節(jié)成品光合細(xì)菌的投喂量。
[0026]本發(fā)明的優(yōu)點及效果:本發(fā)明采用光合細(xì)菌作為鹵蟲的單一餌料，采用一步食物鏈養(yǎng)殖方式，營養(yǎng)豐富、培養(yǎng)方便、無毒無害、成本較低。而且光合細(xì)菌含有種類豐富的促生長因子，能夠提高鹵蟲抵抗力，生長迅速，能夠在20d左右長為成蟲，體長>lcm，而且養(yǎng)殖密度可以達(dá)到1000?10，000ind/L。本方法培養(yǎng)出的鹵蟲營養(yǎng)均衡豐富，含有豐富的蛋白質(zhì)和脂肪酸，抵抗力高。

【具體實施方式】
[0027]為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面針對本發(fā)明做進(jìn)一步闡述，但不限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0028]實施例一
[0029](I)、光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理
[0030]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養(yǎng)袋進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0031](2)、鹵蟲培養(yǎng)容器消毒處理
[0032]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養(yǎng)池進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0033](3)、光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制
[0034]用50 μ m濾布將飽和鹵水過濾,然后與曝氣12h后的自來水混合,配制成人工海水鹽度為80%0。
[0035]配制IL 微量元素母液包括 H3BO3 2.86g、MnCl2.4Η201.81g、ZnSO4.7Η200.22g、Na2MoO4.2Η200.39g、CuSO4.5Η200.08g、CoCl2.6Η200.05g、FeCl3.6Η200.005g。121。。20min滅菌后備用。
[0036]使用時在IL光合細(xì)菌培養(yǎng)基中加入Iml微量兀素母液。
[0037]配制200L 光合細(xì)菌培養(yǎng)基包括 NH4Cll.0g、NaHCO3 1.0g、KH2PO4 0.2g、CH3C00Na5.0g、MgSO4.7H200.2g、酵母膏 0.2g、蛋白胨 0.lg、CaCl2.2H20 0.lg, IL 光合細(xì)菌培養(yǎng)基利用IL沸騰人工海水溶解，使用NaHCO3調(diào)節(jié)pH為7。
[0038]向200L光合細(xì)菌培養(yǎng)基中加入200ml微量元素母液，充分混勻，光合細(xì)菌培養(yǎng)基配制完成。
[0039](4)、鹵蟲養(yǎng)殖液的配制
[0040]用50 μ m濾布將飽和鹵水過濾,然后與曝氣12h后的自來水混合,配制成鹵蟲養(yǎng)殖液鹽度為80%。。使用6%次氯酸鈉消毒12h，硫代硫酸鈉調(diào)節(jié)pH為7。純氧充分曝氣，溶氧為8ppm，紫外線照射2h后得到鹵蟲養(yǎng)殖液。
[0041](5)、光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)
[0042]將培養(yǎng)液分裝到4個培養(yǎng)袋后，將光合細(xì)菌菌種以20%體積比的接種量接種。扎緊培養(yǎng)袋口，隔絕空氣培養(yǎng)，控制溫度為30°C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。每天搖晃培養(yǎng)袋，培養(yǎng)液顏色逐漸變深。7d后，光合細(xì)菌密度達(dá)到8X108ind/ml，；10d后，光合細(xì)菌密度達(dá)到5X109ind/ml，培養(yǎng)完成。
[0043](6)、鹵蟲的接種與培養(yǎng)
[0044]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進(jìn)行孵化，以5000ind/L的密度接種到鹵蟲養(yǎng)殖液中?？刂茰囟葹?8?32°C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在80%。左右。
[0045]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細(xì)菌維持鹵蟲養(yǎng)殖液透明度為1cm左右，投放的光合細(xì)菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0046]最終，鹵蟲的成活率為74.3%，平均養(yǎng)殖密度為3715ind/L。
[0047]實施例二
[0048](I)、光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理
[0049]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養(yǎng)袋進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0050](2)、鹵蟲培養(yǎng)容器消毒處理
[0051]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養(yǎng)池進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0052](3)、光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制
[0053]同實施例一的步驟(3)，鹽度為100%。。
[0054](4)、鹵蟲培養(yǎng)基的配制
[0055]同實施例一的步驟(4)，鹽度為100%。。
[0056](5)、光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)
[0057]將培養(yǎng)液分裝到4個培養(yǎng)袋后，將光合細(xì)菌菌種以20%體積比的接種量接種。
[0058]扎緊培養(yǎng)袋口，隔絕空氣培養(yǎng)，控制溫度為30 °C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。
[0059]每天搖晃培養(yǎng)袋，培養(yǎng)液顏色逐漸變深。7d后，光合細(xì)菌密度達(dá)到6.3X108ind/ml, ； 1d后，光合細(xì)菌密度達(dá)到3.4X109ind/ml，lld后，光合細(xì)菌密度達(dá)到5.7X109ind/ml，培養(yǎng)完成。
[0060](6)、鹵蟲的接種與培養(yǎng)
[0061]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進(jìn)行孵化，以3000ind/L的密度進(jìn)行接種?？刂茰囟葹?8?32°C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在100%?左右。
[0062]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細(xì)菌維持鹵蟲養(yǎng)殖液透明度為1cm左右，投放的光合細(xì)菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0063]最終，鹵蟲的成活率為72.1 %，平均養(yǎng)殖密度為2163ind/L。
[0064]實施例三
[0065](I)、光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理
[0066]采用6%的次氯酸鈉溶液對4個50L透明培養(yǎng)袋進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈。
[0067](2)、鹵蟲培養(yǎng)容器消毒處理
[0068]采用6%的次氯酸鈉溶液對200L培養(yǎng)池進(jìn)行消毒，處理12h。然后用煮沸海水沖洗干凈；
[0069](3)、光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制
[0070]同實施例一的步驟(3)，鹽度為60%0。
[0071](4)、鹵蟲培養(yǎng)基的配制
[0072]同實施例一的步驟(4)，鹽度為60%。。
[0073](5)、光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)
[0074]將培養(yǎng)液分裝到4個培養(yǎng)袋后，將光合細(xì)菌菌種以20%體積比的接種量接種。
[0075]扎緊培養(yǎng)袋口，隔絕空氣培養(yǎng)，控制溫度為30°C，pH在6.5?8.5，光照強度5000LUX。
[0076]每天搖晃培養(yǎng)袋，培養(yǎng)液顏色逐漸變深。7d后，光合細(xì)菌密度達(dá)到9.3X108ind/111;10(1后，光合細(xì)菌密度達(dá)到6.4\10吖11(1/1111，培養(yǎng)完成。
[0077](6)、鹵蟲的接種與培養(yǎng)
[0078]選擇渤海灣品系鹵蟲卵進(jìn)行孵化，以1500ind/L的密度進(jìn)行接種?？刂茰囟葹?8?32 °C，pH為6.5?7.5，鹽度浮動在60%?左右。
[0079]在鹵蟲卵孵化24小時之后開始投喂成品光合細(xì)菌維持鹵蟲養(yǎng)殖液透明度為1cm左右，投放的光合細(xì)菌成品需要充分曝氣llh-13h以后才能投飼。
[0080]最終，鹵蟲的成活率為83.4%，平均養(yǎng)殖密度為1260ind/L。
[0081]以上對本發(fā)明的三個實施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實施例，不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實施范圍。凡依本發(fā)明申請范圍所作的均等變化與改進(jìn)等，均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，包括如下步驟: (1)光合細(xì)菌培養(yǎng)容器消毒處理 對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈； (2)齒蟲培養(yǎng)容器消毒處理 對培養(yǎng)容器的器壁進(jìn)行消毒處理，消毒后用煮沸海水沖洗干凈； (3)光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制； (4)鹵蟲養(yǎng)殖液的配制； (5)光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)； (6)鹵蟲的接種與培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(I)和步驟(2)均采用6%的次氯酸鈉溶液對培養(yǎng)容器進(jìn)行12h的消毒處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(3)光合細(xì)菌培養(yǎng)基的配制方法是:將過濾后的飽和鹵水或與淡水混合，配制成鹽度為30?150%。的人工海水；或者用海水晶或海水素調(diào)和淡水配制。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(4)鹵蟲養(yǎng)殖液的配制包括如下步驟: (1)將過濾后的飽和鹵水與淡水混合，或者用海水晶或海水素調(diào)和淡水配制，配制成鹽度為30?150%。鹵蟲養(yǎng)殖液； (2)次氯酸鈉消毒，調(diào)節(jié)pH為6.5?7.5 ; (3)充分曝氣，紫外線照射后得到鹵蟲養(yǎng)殖液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(5)的光合細(xì)菌的接種與培養(yǎng)方法為:將光合細(xì)菌菌種以10%體積比以上的接種量接種到光合細(xì)菌培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)，維持溫度為25?35°C，pH6.5?8.5，光照強度2000LUX以上，鹽度為30?150%。，光合細(xì)菌密度達(dá)到109ind/ml以上時培養(yǎng)完成，得到成品光合細(xì)菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述步驟(6)的鹵蟲的接種與培養(yǎng)方法為:將孵化后的鹵蟲無節(jié)幼體接種到鹵蟲養(yǎng)殖液中，接種密度為1500?10，000ind/L，維持培養(yǎng)溫度為25?35。。，pH為6.5?7.5，溶解氧D03.0?8.0ppm,自然光照，鹽度為30?150%。，鹵蟲養(yǎng)殖液在培養(yǎng)容器中的深度為10?60cm,培養(yǎng)過程中持續(xù)在齒蟲養(yǎng)殖液中加入光合細(xì)菌成品，當(dāng)齒蟲體長大于Icm時,養(yǎng)殖結(jié)束。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的光合細(xì)菌一步食物鏈高密度養(yǎng)殖鹵蟲的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)過程中持續(xù)向齒蟲養(yǎng)殖液中加入光合細(xì)菌成品，培養(yǎng)結(jié)束時齒蟲養(yǎng)殖液透明度為1cm左右。
【文檔編號】A01K67/033GK104222022SQ201410412364
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年8月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月20日
【發(fā)明者】錢浩, 柴慈民 申請人:天津海友佳音生物科技股份有限公司