紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法及應(yīng)用。該保持系是能使相應(yīng)的紫海雜交扇貝的雄性不育系后代仍具有雄性不育且卵子可育特性的海灣扇貝品系，其中紫海雜交扇貝是紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代。其構(gòu)建方法是首先構(gòu)建大量的紫海雜交扇貝子一代家系，從中找到雄性不育的個體用于雄性不育系的選育；然后用父本海灣扇貝的精子連續(xù)回交，分別選育后代全部為雄性不育個體的雄性不育系-保持系組合；最后用雄性不育系與保持系雜交生產(chǎn)雄性不育系親貝，后者用于生產(chǎn)紫海雜交扇貝商品苗種。本發(fā)明首次在動物中建1了扇貝的保持系，有效克服了雌雄同體扇貝雜交中自體受精的障礙。
【專利說明】紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于貝類育種技術(shù)一雜交扇貝商品苗種培育方法，尤其是涉及紫海雜交 扇貝（紫扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代）保持系的構(gòu)建及應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 海灣扇貝（Argopecten irradians irradians)原產(chǎn)于美國大西洋沿岸，于1982 年引入我國。海灣扇貝生長速度快，溫度適應(yīng)范圍廣，抗逆性強(qiáng)，非常適合我國北方海域的 養(yǎng)殖，目前產(chǎn)量和養(yǎng)殖面積占我國扇貝養(yǎng)殖的50%以上。但是由于引進(jìn)后長期近交，海灣扇 貝在養(yǎng)殖過程中種質(zhì)退化嚴(yán)重，表現(xiàn)為商品貝規(guī)格越來越小，育苗養(yǎng)殖過程中死亡率較高， 因此扇貝養(yǎng)殖業(yè)迫切需要對海灣扇貝進(jìn)行遺傳改良，其中雜交育種是最有效的種質(zhì)改良方 法之一。
[0003] 為此，發(fā)明人自2007年首次從秘魯引進(jìn)了紫扇貝（Argopecten purpuratus)。紫 扇貝是原產(chǎn)于南太平洋的一種速生型中型扇貝，與海灣扇貝都屬于Argopecten屬，染色體 數(shù)相同，且都是雌雄同體，但二者在個體大小、生長和溫度適應(yīng)性等方面性狀互補(bǔ)。因此發(fā) 明人又通過將紫扇貝與海灣扇貝進(jìn)行種間雜交，培養(yǎng)出正交（紫扇貝卵子和海灣扇貝精子 受精）和反交（海灣扇貝卵子和紫扇貝精子受精）兩種雜交子一代。雜交子一代的個體重 比同期培育的海灣扇貝提高約100%，當(dāng)年可長到7-8公分，而且第二年可繼續(xù)養(yǎng)殖達(dá)到更 大規(guī)格，個體重達(dá)到200克以上，其抗逆性增強(qiáng)，特別是在山東地區(qū)能夠順利度夏和越冬， 顯示出巨大的產(chǎn)業(yè)潛力（王春德等，2009.紫扇貝與海灣扇貝種間雜交的研究。海洋科學(xué)， 33(10) :84-87 ；Chunde Wang 等，2011. Introduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China, Aquaculture, 2011, 310:380-387)〇
[0004] 上述雜交子一代雖然可以產(chǎn)生較大的雜種優(yōu)勢，但是要大面積推廣仍存在著較大 的困難，這是因為海灣扇貝和紫扇貝都是雌雄同體的扇貝，繁殖時同時排放精子和卵子，排 放的卵子容易受到同種精子的污染，難以大量獲得未受精卵用于種間雜交，從而導(dǎo)致所獲 得的商品苗種中真正的雜交后代比例大大降低，因而使其產(chǎn)量的提高幅度大大受限。
[0005] 研究發(fā)現(xiàn)，上述兩種Argopecten扇貝的雌雄同體特性與許多農(nóng)作物的雌雄同株 特性相似。在雌雄同株的農(nóng)作物如水稻育種中也存在著同花授粉的問題，需要人工去雄，這 一點(diǎn)與紫扇貝與海灣扇貝雜交過程中遇到的自體受精問題相似。農(nóng)業(yè)上解決這個問題的關(guān) 鍵依賴于雄性不育植株的發(fā)現(xiàn)，利用雄性不育株與其父本連續(xù)回交，就可以選育出雄性不 育系、保持系和恢復(fù)系，以此來構(gòu)建農(nóng)作物育種中的三系配套育種體系，實(shí)現(xiàn)雜交種的大規(guī) 模生產(chǎn)，從而解決雜交制種難題。迄今為止，國內(nèi)外已經(jīng)在眾多的農(nóng)作物中建立了三系配套 育種體系，并廣泛應(yīng)用于雜交種的生產(chǎn)中，成為大幅度提高農(nóng)作物產(chǎn)量的主要途徑。
[0006] 但是在動物育種中，國內(nèi)外迄今為止尚無發(fā)現(xiàn)雄性不育且雌性可育個體的報道， 因而也無法建立類似于農(nóng)作物的雄性不育系及其保持系和恢復(fù)系，用于雜交育種。顯然， 如果在動物育種中能夠構(gòu)建起類似的包括雄性不育系、保持系和恢復(fù)系的三系配套育種體 系，也就可以實(shí)現(xiàn)雌雄同體型動物的低成本、規(guī)?；N間雜交，提高雜交效率，提高育種動 物的抗逆性和產(chǎn)量，從而實(shí)現(xiàn)動物育種技術(shù)的重大突破。雄性不育系及其保持系是三系配 套育種體系的重要組成部分，是大規(guī)模生產(chǎn)雄性不育系親本的關(guān)鍵。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是實(shí)現(xiàn)在動物育種中，具體地說是在雌雄同體型扇貝中首次構(gòu)建紫 海雜交扇貝保持系，以克服現(xiàn)有雜交扇貝育種技術(shù)的不足。
[0008] 本發(fā)明的另一目的是利用上述保持系與雄性不育系雜交，建立規(guī)?；a(chǎn)紫海雜 交扇貝雄性不育系種貝的應(yīng)用方法。
[0009] 上述的雄性不育系是雄性性腺發(fā)育不正常，不能產(chǎn)生有功能的精子，但其卵子發(fā) 育正常，能接受正常精子而受精，并能將其雄性不育特性遺傳給后代的品系。顯然雄性不育 系是三系配套體系中的核心品系，其主要作用是在雜交苗種商業(yè)化生產(chǎn)中提供大量的未受 精卵子，同時其繁育依賴于與其配套的保持系。雄性不育系是利用偶然發(fā)現(xiàn)的雄性不育且 卵子可育的個體與其父本連續(xù)回交建立回交家系，當(dāng)回交家系的所有個體均為雄性不育且 卵子可育時所獲得的雜交扇貝品系。
[0010] 保持系又稱雄性不育系保持系，當(dāng)作為父本與雄性不育系雜交時，能使子一代保 持雄性不育特性，保持系的主要作用是提供雄性不育系繁育所必須的精子。保持系是能夠 正常繁育的雌雄同體品系，可以通過自交繁育下一代保持系。
[0011] 本發(fā)明基于以下構(gòu)思和實(shí)踐：1)發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)了紫海雜交扇貝（紫扇貝卵子與 海灣扇貝精子的雜交后代）子一代中存在5-10%的雄性不育個體，這些個體不產(chǎn)生有活性 的精子，但其卵子可以被海灣扇貝的精子受精，且所獲得的受精卵能夠正常發(fā)育，即獲得了 回交扇貝；2)研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，由此獲得的回交扇貝性腺成熟后約有5-8%的個體仍為雄 性不育且其卵子可被海灣扇貝精子受精，因此只要將上述雄性不育個體的卵子與父本海灣 扇貝自交后代的精子連續(xù)多代回交，就能選育出后代全部為雄性不育且卵子可育的雄性不 育系（母本）-海灣扇貝（父本）組合，該組合中的海灣扇貝品系具有使相應(yīng)的雄性不育系 的后代仍保持雄性不育特性的能力，即獲得紫海雜交扇貝的雄性不育系和該雄性不育系的 保持系；3)應(yīng)用紫海雜交扇貝保持系與其相應(yīng)的雄性不育系種貝雜交可以大規(guī)模生產(chǎn)雄 性不育且卵子可育的紫海雜交扇貝雄性不育系種貝。
[0012] 本發(fā)明的紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法如下：
[0013] 1)紫海雜交扇貝雄性不育個體的篩選及其父本的繁育：選擇優(yōu)良的紫扇貝與海 灣扇貝個體同步促熟后，用常規(guī)的海灣扇貝陰干和溫度刺激方法誘導(dǎo)紫扇貝和海灣扇貝產(chǎn) 卵，并分別收集紫扇貝和海灣扇貝的卵子，同時誘導(dǎo)海灣扇貝排精，并用500目篩絹過濾獲 得海灣扇貝精子，然后向紫扇貝的卵子中加入適量的海灣扇貝精子，受精卵正常發(fā)育后即 獲得紫海雜交扇貝（紫扇貝卵子與海灣扇貝精子受精）子一代家系，待用于選擇雄性不育 個體，同時將海灣扇貝的卵子用自體的精子受精，建立該海灣扇貝的自交家系。由于雜交子 一代中雄性不育個體存在的比例很低，因此需要構(gòu)建大量的雜交子一代家系，從而找到雄 性不育的個體用于保持系的選育。
[0014] 2)紫海雜交扇貝保持系的選育：選擇上述紫海雜交扇貝子一代家系中的雄性不 育個體，與父本海灣扇貝自交家系中的優(yōu)良個體同步促熟，性腺成熟后用常規(guī)的海灣扇貝 陰干和溫度刺激的方法誘導(dǎo)上述雜交子一代扇貝排卵并收集卵子，同時誘導(dǎo)海灣扇貝排 精，并用500目篩絹過濾獲得海灣扇貝精子，將上述獲得的雜交子一代的卵子與海灣扇貝 精子受精，收集受精且發(fā)育正常的受精卵建立回交家系，同時將供精的海灣扇貝自體受精 建立自交家系；翌年將回交家系及其父本海灣扇貝自交家系促熟，選擇回交家系中仍為雄 性不育的個體用常規(guī)的海灣扇貝產(chǎn)卵誘導(dǎo)方法刺激產(chǎn)卵后，用其父本海灣扇貝自交后代的 精子繼續(xù)回交，同時仍將供精的海灣扇貝繼續(xù)自交建立自交家系；以后每年按照同樣的方 法連續(xù)回交選育，直到回交后代全部為雄性不育且卵子可育的個體，該回交家系即成為紫 海雜交扇貝雄性不育系，將上述能使雄性不育系后代繼續(xù)保持雄性不育特性的海灣扇貝自 交家系用常規(guī)的海灣扇貝育苗方法自交擴(kuò)繁，即獲得該雄性不育系的保持系。保持系的主 要作用是提供雄性不育系繁育所必須的精子，它是雄性不育系傳代所必需的父本品系。
[0015] 3)紫海雜交扇貝保持系的應(yīng)用：將紫海雜交扇貝保持系與相應(yīng)的雄性不育系種 貝雜交，即可規(guī)?；庇坌圆挥衣炎涌捎淖虾ｋs交扇貝雄性不育扇貝，并用于紫海 雜交扇貝商品苗種生產(chǎn)。
[0016] 本發(fā)明的保持系構(gòu)建方法也應(yīng)用于海紫雜交扇貝（海灣扇貝卵子與紫扇貝精子 的雜交后代）、紫墨雜交扇貝（紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子的雜交后代）和墨紫雜交扇 貝（墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子的雜交后代）等Argopecten屬雜交扇貝的育種實(shí)踐， 并且應(yīng)用于建立這些雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)方法。
[0017] 本發(fā)明的方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型扇貝的種間雜交育種，例如Pecten屬扇 貝的種間雜交，本發(fā)明的基本方法也適用于其他雌雄同體型無脊椎動物的種間雜交育種。
[0018] 本發(fā)明構(gòu)建的紫海雜交扇貝保持系是首次在動物界中建立的保持系，應(yīng)屬于動物 育種技術(shù)的重大突破。本發(fā)明有效克服了雌雄同體扇貝雜交過程中自體受精的障礙，使低 成本、規(guī)?；a(chǎn)完全的雜交后代成為可能。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 本發(fā)明構(gòu)建了紫海雜交扇貝的保持系，并建立了用保持系規(guī)模化生產(chǎn)紫海雜交扇 貝雄性不育系種貝的方法，具體步驟如下：
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 1)紫海雜交扇貝雄性不育個體的篩選及其父本的繁育：第一年選擇50個性腺發(fā) 育成熟的紫扇貝和50個海灣扇貝，陰干刺激30分鐘后將每個扇貝放在預(yù)先加入23°C海水 的單獨(dú)的容器中使其產(chǎn)卵、排精，單獨(dú)收集每個紫扇貝的卵子和每個海灣扇貝的精子和卵 子，向每個紫扇貝的卵子懸浮液中加入少量來自單個海灣扇貝的精液，攪拌使精卵混合均 勻，顯微鏡下觀察使每個卵子周圍有5-6個精子，并將受精卵置于黑暗環(huán)境下孵化，即獲得 紫海雜交子一代家系。用上述方法建立至少20個這樣的雜交家系，同時將供精的海灣扇貝 精卵混合受精，建立相應(yīng)數(shù)量的海灣扇貝自交家系，按照常規(guī)的扇貝育苗方法進(jìn)行幼蟲培 育、保苗和養(yǎng)成后，用于雄性不育個體的篩選。
[0022] 2)紫海雜交扇貝保持系的選育：第二年春季將紫海雜交子一代家系促熟后，選擇 50個性狀優(yōu)良的雄性不育個體，用常規(guī)的海灣扇貝產(chǎn)卵誘導(dǎo)方法刺激產(chǎn)卵，分別用其父本 海灣扇貝的精子受精，收集正常受精、發(fā)育的受精卵建立回交家系，收集正常受精、發(fā)育的 受精卵建立回交家系，同時將提供精子的海灣扇貝自繁建立自交家系，建立至少20個回交 家系和相應(yīng)的海灣扇貝自交家系并按照常規(guī)的海灣扇貝育苗方法進(jìn)行幼蟲培育、保苗、養(yǎng) 成；第三年春季，將回交家系和海灣扇貝自交家系促熟后，選擇50個性狀優(yōu)良的回交家系 中的雄性不育個體，用其父本海灣扇貝的自交后代精子回交，收集正常受精、發(fā)育的受精卵 繼續(xù)建立回交家系，同時繼續(xù)繁育海灣扇貝的自交家系，選擇建立20個以上性狀優(yōu)良的回 交家系及其相應(yīng)的海灣扇貝自交家系；以后每年按照同樣的方法選擇性狀優(yōu)良的雄性不育 扇貝與其父本海灣扇貝的自交家系回交，直到回交后代的所有個體均表現(xiàn)為性狀優(yōu)良、雄 性不育且卵子可育，即獲得紫海雜交扇貝雄性不育系；再將上述能使雄性不育系個體的回 交后代所有個體均表現(xiàn)為性狀優(yōu)良、雄性不育且卵子可育的父本海灣扇貝按照常規(guī)的海灣 扇貝育苗方法大量自交繁育，即獲得該紫海雜交扇貝雄性不育系的保持系。
[0023] 3)用保持系生產(chǎn)紫海雜交扇貝雄性不育系種貝的方法：每年用上述保持系種貝 與相應(yīng)的雄性不育系雜交，即獲得雄性不育且卵子可育的紫海雜交扇貝雄性不育系種貝， 以用于紫海雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)。
[0024] 實(shí)施例2
[0025] 2008年3月底，取性腺發(fā)育成熟的紫扇貝，經(jīng)溫度刺激后獲得紫扇貝卵子，用海灣 扇貝的精子授精后獲得紫扇貝與海灣扇貝雜交子一代苗種并養(yǎng)成。2009年春天，將上述雜 交子一代扇貝促熟后從中選擇個體大且僅雌區(qū)發(fā)育的扇貝，陰干30分鐘后將扇貝置于盛 有23°C海水的容器中刺激產(chǎn)卵，以來自多個海灣扇貝的精子混合授精，培育出子一代紫海 雜交扇貝與海灣扇貝的回交群體。該回交群體在2010年春季促熟后大部分表現(xiàn)為雌雄同 體，但還有〈10%的個體仍表現(xiàn)為雄性不育。
[0026] 繼續(xù)將上述雄性不育的個體用其父本海灣扇貝自交后代的精子回交，經(jīng)過一代至 多代選育就可獲得后代全部為雄性不育且卵子可育的雄性不育系（母本）_保持系（父本） 組合，從而分別獲得雄性不育系和保持系。性腺促熟后用常規(guī)海灣扇貝產(chǎn)卵誘導(dǎo)方法催產(chǎn) 雄性不育系扇貝可獲得大量未受精的卵子，將其用保持系的精子受精，就可大規(guī)模獲得用 于紫海雜交扇貝商品苗種生產(chǎn)的雄性不育系種貝。
[0027] 實(shí)施例3
[0028] 2010年春天，選擇2009年建立的紫扇貝卵子與海灣扇貝精子雜交子一代中雄性 不育的個體，經(jīng)促熟后刺激產(chǎn)卵，用海灣扇貝的精子受精，建立了 12個回交家系并養(yǎng)成。 2011年春天促熟后發(fā)現(xiàn)，其中的11個家系大部分個體表現(xiàn)為雌雄同體，而其中的1個家系 的大部分個體僅雌區(qū)發(fā)育，少量個體性腺不發(fā)育。
[0029] 依此方法，將其中的單個雄性不育個體的卵子與單個海灣扇貝的精子回交建立若 干回交家系，并將供精海灣扇貝自交建立相應(yīng)的自交家系。第二年檢查回交家系的性腺發(fā) 育情況，若回交家系存在有雄性不育的個體，則進(jìn)一步用其父本自交家系的精子檢測其卵 子的受精能力，并繼續(xù)建立回交家系和父本海灣扇貝自交家系，進(jìn)行下一代選育；經(jīng)一代或 多代選育后，當(dāng)回交后代全部為雄性不育且卵子可育時，就獲得了雄性不育系及其相應(yīng)的 保持系。用此雄性不育系與保持系雜交，即可大規(guī)模生產(chǎn)雄性不育且卵子可育的紫海雜交 扇貝雄性不育系種貝。
[0030] 實(shí)施例4
[0031] 2013年和2014年，利用引進(jìn)的紫扇貝與海灣扇貝共建立了紫扇貝卵子與海灣扇 貝精子的雜交子一代家系18個，并建立了供精海灣扇貝的自交家系，按照實(shí)施例1的方法， 可在1-3年內(nèi)選育出紫海雜交扇貝的雄性不育家系及其相應(yīng)的保持系，實(shí)現(xiàn)紫海雜交扇貝 雄性不育系種貝的商業(yè)化生產(chǎn)。
[0032] 實(shí)施例5
[0033] 本發(fā)明用于海紫雜交扇貝保持系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0034] 本發(fā)明建立的保持系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于海紫雜交扇貝（海灣扇貝卵子與紫扇 貝精子的雜交后代）的育種，并且應(yīng)用于建立海紫雜交扇貝商品苗種的規(guī)模化生產(chǎn)方法。
[0035] 首先選擇海灣扇貝和紫扇貝同步促熟并刺激同時產(chǎn)卵、排精，分別收集海灣扇貝 的卵子以及紫扇貝的精子和卵子，將海灣扇貝的卵子與紫扇貝的精子受精建立海紫雜交子 一代家系，用于選擇雄性不育個體，同時將紫扇貝的精子和卵子混合受精，建立紫扇貝自交 家系；第二年從海紫雜交子一代家系中選擇雄性不育的個體，用紫扇貝的精子與其受精，若 受精卵正常發(fā)育則建立回交家系，用于繼續(xù)選育雄性不育系，同時將父本紫扇貝自體受精 建立自交家系；這樣經(jīng)過一代至多代選擇，當(dāng)回交后代全部表現(xiàn)為雄性不育時，就獲得了海 紫雜交扇貝的雄性不育系及相應(yīng)的保持系。
[0036] 用上述海紫雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方 便、規(guī)?；a(chǎn)海紫雜交扇貝雄性不育種貝。
[0037] 實(shí)施例6
[0038] 本發(fā)明用于紫墨雜交扇貝保持系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0039] 本發(fā)明建立的保持系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于紫墨雜交扇貝（紫扇貝卵子與墨西哥 灣扇貝精子的雜交后代）育種，并且應(yīng)用于建立紫墨雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn)方 法。
[0040] 首先選擇紫扇貝和墨西哥灣扇貝同步促熟并刺激同時產(chǎn)卵、排精，分別收集紫扇 貝的卵子以及墨西哥灣扇貝的精子和卵子，將紫扇貝的卵子與墨西哥灣扇貝的精子受精建 立紫墨雜交子一代家系，用于選擇雄性不育個體，同時將墨西哥灣扇貝的精子和卵子混合 受精，建立墨西哥灣扇貝自交家系；第二年從紫墨雜交子一代家系中選擇雄性不育的個體， 用墨西哥灣扇貝的精子與其受精，若受精卵正常發(fā)育則建立回交家系，用于繼續(xù)選育雄性 不育家系，同時將父本墨西哥灣扇貝自體受精建立自交家系；這樣經(jīng)過一代至多代選擇，當(dāng) 回交后代全部表現(xiàn)為雄性不育時，就獲得了紫墨雜交扇貝的雄性不育系及相應(yīng)的保持系。
[0041] 用上述紫墨雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方 便、規(guī)模化生產(chǎn)紫墨雜交扇貝雄性不育種貝。
[0042] 實(shí)施例8
[0043] 本發(fā)明用于墨紫雜交扇貝保持系的構(gòu)建及應(yīng)用
[0044] 本發(fā)明建立的保持系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于墨紫雜交扇貝（墨西哥灣扇貝卵子與 紫扇貝精子的雜交后代）育種實(shí)踐，并且應(yīng)用于建立墨紫雜交扇貝商品苗種的規(guī)?；a(chǎn) 方法。
[0045] 首先選擇紫扇貝和墨西哥灣扇貝同步促熟并刺激同時產(chǎn)卵、排精，分別收集墨西 哥灣扇貝的卵子以及紫扇貝的精子和卵子，將墨西哥灣扇貝的卵子與紫扇貝的精子受精建 立墨紫雜交子一代家系，用于選擇雄性不育個體，同時將紫扇貝的精子和卵子混合受精，建 立紫扇貝自交家系；第二年從墨紫雜交子一代家系中選擇雄性不育的個體，用紫扇貝的精 子與其受精，若受精卵正常發(fā)育則建立回交家系，用于繼續(xù)選育雄性不育家系，同時將父本 紫扇貝自體受精建立自交家系；這樣經(jīng)過一代至多代選擇，當(dāng)回交后代全部表現(xiàn)為雄性不 育時，就獲得了墨紫雜交扇貝的雄性不育系及其相應(yīng)的保持系。
[0046]用上述墨紫雜交扇貝的雄性不育系卵子與保持系的精子雜交，即可實(shí)現(xiàn)高效、方 便、規(guī)?；a(chǎn)墨紫雜交扇貝雄性不育種貝。
【權(quán)利要求】
1. 一種紫海雜交扇貝的保持系，其特征在于，該保持系是能使相應(yīng)的紫海雜交扇貝的 雄性不育系后代仍具有雄性不育且卵子可育特性的海灣扇貝品系，其中紫海雜交扇貝是紫 扇貝卵子與海灣扇貝精子的雜交后代。
2. 權(quán)利要求1的紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法，其特征在于： 1) 紫海雜交扇貝雄性不育個體的篩選及其父本的繁育：首先構(gòu)建20個以上紫海雜交 扇貝子一代家系用于篩選雄性不育個體，同時建立供精的父本海灣扇貝自交家系，用于下 述保持系的選育； 2) 紫海雜交扇貝保持系的選育：第二年從上述紫海雜交扇貝子一代家系中選擇50個 雄性不育個體，促熟后刺激其排卵，用該雄性不育個體的父本海灣扇貝自交家系中優(yōu)良個 體的精子受精，收集正常發(fā)育的受精卵建立回交家系20個以上，同時將供精的父本海灣扇 貝自體受精建立自交家系；翌年選擇回交家系中仍為雄性不育的個體50個促熟并刺激產(chǎn) 卵后，用該雄性不育個體的父本海灣扇貝自交后代的精子繼續(xù)回交，建立20個以上回交家 系，同時仍將供精的父本海灣扇貝繼續(xù)自交建立自交家系；以后每年按照同樣的方法連續(xù) 回交選育，直到回交后代全部為雄性不育且卵子可育的個體，即獲得紫海雜交扇貝雄性不 育系；再將上述能使雄性不育系后代繼續(xù)保持雄性不育特性的海灣扇貝自交家系用常規(guī)的 扇貝育苗方法自交擴(kuò)繁，即獲得該紫海雜交扇貝雄性不育系的保持系。
3. 上述權(quán)利要求1和權(quán)利要求2的紫海雜交扇貝保持系應(yīng)用于規(guī)?；a(chǎn)紫海雜交扇 貝雄性不育系種貝，即用紫海雜交扇貝保持系與相應(yīng)的雄性不育系雜交，以規(guī)模化繁育雄 性不育且卵子可育的下一代紫海雜交扇貝雄性不育系種貝。
4. 權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于以下的各雜交扇貝的 育種： (1) 用海灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的海紫雜交扇貝； (2) 用紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子受精培育的紫墨雜交扇貝； (3) 用墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的墨紫雜交扇貝。
5. 權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝保持系的應(yīng)用方法也應(yīng)用于以下的各雜交扇貝的 育種： (1) 用海灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的海紫雜交扇貝； (2) 用紫扇貝卵子與墨西哥灣扇貝精子受精培育的紫墨雜交扇貝； (3) 用墨西哥灣扇貝卵子與紫扇貝精子受精培育的墨紫雜交扇貝。
6. 權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝保持系的構(gòu)建方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型扇貝， 例如Argopecten屬和Pecten屬扇貝的種間雜交育種。
7. 權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝保持系應(yīng)用方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型扇貝，例 如Argopecten屬和Pecten屬扇貝的種間雜交育種。
8. 權(quán)利要求2建立的紫海雜交扇貝保持系的基本構(gòu)建方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型 無脊椎動物的種間雜交育種。
9. 權(quán)利要求3建立的紫海雜交扇貝保持系的應(yīng)用方法也應(yīng)用于其他雌雄同體型無脊 椎動物的種間雜交育種。
【文檔編號】A01K61/00GK104206327SQ201410432078
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年8月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月27日
【發(fā)明者】王春德, 孫奎府, 馬斌 申請人:青島海弘達(dá)生物科技有限公司