提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其是在小花堿茅種子進行萌發(fā)前先將其置于枯草芽孢桿菌GB03菌液中進行浸泡處理。采用上述方案對小花堿茅種子進行處理，其可有效顯著提高小花堿茅種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率，緩解小花堿茅播種后不出苗或晚出苗，出苗不整齊，缺苗斷壟的現(xiàn)象，保證小花堿茅在鹽堿地改良和植被恢復(fù)中所起的先鋒物種的作用。同時，枯草芽孢桿菌具有對人畜無毒無害、不污染環(huán)境、非致病性和抗逆性強等特點。本發(fā)明提供的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法操作簡單，可廣泛應(yīng)用于牧場牧草的播種，具有重要的經(jīng)濟價值。
【專利說明】提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及林草種植領(lǐng)域，具體涉及一種提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]小花堿茅，又名星星草，是禾本科植物中典型的拒鹽型鹽生植物，在我國東北、西北地區(qū)的鹽堿地上有大范圍的分布，是鹽生草甸優(yōu)勢種和建群種。小花堿茅不但可以作為鹽堿地植被恢復(fù)的先鋒物種，而且也具有很強的耐旱和耐寒性，并且與禾本科作物小麥親緣關(guān)系較近，因此小花堿茅可以作為研究農(nóng)作物耐鹽性的模式植物。近年來，隨著草地農(nóng)業(yè)在國內(nèi)的迅速發(fā)展，小花堿茅作為優(yōu)質(zhì)耐鹽牧草在鹽堿地改良和植被恢復(fù)實踐中已初現(xiàn)成效。然而，小花堿茅種子相對其他禾本科作物種子而言，其種子瘦小，發(fā)芽勢和發(fā)芽率低，播種后會出現(xiàn)不出苗或出苗晚的現(xiàn)象，嚴重制約了小花堿茅在鹽堿地改良和植被恢復(fù)中的作用。因此，如何設(shè)法提高小花堿茅種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率是當前小花堿茅栽培中亟待解決的問題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的就是提供一種提聞小花喊矛種子明發(fā)率的方法，其可有效提聞小花堿茅種子的發(fā)芽勢及發(fā)芽率，保證小花堿茅種子的可靠萌發(fā)。
[0004]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案:
[0005]一種提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其是在小花堿茅種子進行萌發(fā)前先將其置于枯草芽孢桿菌部03菌液中進行浸泡處理。
[0006]具體的方案為:
[0007]枯草芽孢桿菌部03菌液中006。。為0.8?1.0，浸泡處理的時間為5?60-11,優(yōu)選浸泡處理的時間為50111。
[0008]進一步的方案為:
[0009]浸泡處理前對小花堿茅種子進行消毒處理，消毒處理為將小花堿茅種子依次置于73?77%的乙醇和4.8?5.2%的恥?:10中分別浸泡9?118和9.5?10.5111111，然后用無菌水進行漂洗。
[0010]枯草芽孢桿菌部03菌液采用如下方法配置得到:
[0011]配制18液體培養(yǎng)基，滅菌冷卻后在每100此的18液體培養(yǎng)基中加入50?100仏的枯草芽孢桿菌6803菌液，然后進行菌株培養(yǎng)，當菌液濃度006。。為0.8?1.0時，取出備用。
[0012]小花堿茅種子萌發(fā)處理的溫度為251，并進行遮光處理，萌發(fā)處理可與傳統(tǒng)小花堿茅種子的萌發(fā)操作一致。
[0013]采用上述方案對小花堿茅種子進行處理，其可有效顯著提高小花堿茅種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率，緩解小花堿茅播種后不出苗或晚出苗，出苗不整齊，缺苗斷壟的現(xiàn)象，保證小花堿茅在鹽堿地改良和植被恢復(fù)中所起的先鋒物種的作用。同時，枯草芽孢桿菌具有對人畜無毒無害、不污染環(huán)境、非致病性和抗逆性強等特點。本發(fā)明提供的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法操作簡單，可廣泛應(yīng)用于牧場牧草的播種，具有重要的經(jīng)濟價值。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1、2為實施例1?6中不同處理方式對種子發(fā)芽勢的影響；
[0015]圖3為實施例1?6中不同處理方式對種子發(fā)芽率的影響；
[0016]圖1中每一行從左至右依次表不實施例1?6中種子發(fā)芽勢的結(jié)果，每一豎行表示該實施例的相同處理方式的4個重復(fù)實驗組；
[0017]其中:圖2、3中"女”表示該實施例與實施例1、2比較達顯著水平? 0.05)。
【具體實施方式】
[0018]為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明進行具體說明。應(yīng)當理解，以下文字僅僅用以描述本發(fā)明的一種或幾種具體的實施方式，并不對本發(fā)明具體請求的保護范圍進行嚴格限定。
[0019]實施例1
[0020]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用75%的酒精、5%次氯酸鈉中分別浸泡108和10-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0021]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入無菌水，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在無菌水中，計時501！！后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于251黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0022]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0023]實施例2
[0024]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用75%的酒精、5%次氯酸鈉中分別浸泡108和10-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0025]配制溶菌肉湯18液體培養(yǎng)基:按照氯化鈉、胰蛋白胨和酵母粉的比例為1: 2: 1配制，溶劑為蒸餾水；調(diào)節(jié)邱到7.2，高溫115?1321滅菌，然后冷卻至20?351。
[0026]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入⑶液體培養(yǎng)基，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在⑶液體培養(yǎng)基中，計時501！！后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于251黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0027]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0028]實施例3
[0029]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用75%的酒精、5%次氯酸鈉中分別浸泡108和10-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0030]枯草芽孢桿菌6803菌液制備:先配制溶菌肉湯18液體培養(yǎng)基:按照氯化鈉、胰蛋白胨和酵母粉的比例為1:2:1配制，溶劑為蒸餾水；調(diào)節(jié)邱到7.2，高溫115?1321滅菌，然后冷卻至20?351后，在每100此的18液體培養(yǎng)基加入50?100仏的枯草芽孢桿菌部03菌液，在轉(zhuǎn)速為180?250轉(zhuǎn)/分，溫度為25?301的恒溫培養(yǎng)搖床上培養(yǎng)過夜后，測定菌液濃度為006。。為0.8?1.0時，取出備用.
[0031]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入培養(yǎng)好的部03菌液，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在菌液中，計時501??！后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于251黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0032]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0033]實施例4
[0034]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用73%的酒精、5.2%次氯酸鈉中分別浸泡98和10.5-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0035]枯草芽孢桿菌6803菌液制備:先配制溶菌肉湯18液體培養(yǎng)基:按照氯化鈉、胰蛋白胨和酵母粉的比例為1:2:1配制，溶劑為蒸餾水；調(diào)節(jié)邱到7.2，高溫115?1321滅菌，然后冷卻至20?351后，在每100此的18液體培養(yǎng)基加入50?100仏的枯草芽孢桿菌部03菌液，在轉(zhuǎn)速為180?250轉(zhuǎn)/分，溫度為25?301的恒溫培養(yǎng)搖床上培養(yǎng)過夜后，測定菌液濃度為006。。為0.8?1.0時，取出備用。
[0036]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入培養(yǎng)好的部03菌液，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在菌液中，計時后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于251黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0037]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0038]實施例5
[0039]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用77%的酒精、4.8%次氯酸鈉中分別浸泡118和9.5-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0040]枯草芽孢桿菌部03菌液制備:先配制溶菌肉湯⑶液體培養(yǎng)基:按照氯化鈉、胰蛋白胨和酵母粉的比例為1:2:1配制，溶劑為蒸餾水；調(diào)節(jié)邱到7.2，高溫115?1321滅菌，然后冷卻至20?351后，在每100此的18液體培養(yǎng)基加入50?100仏的枯草芽孢桿菌部03菌液，在轉(zhuǎn)速為180?250轉(zhuǎn)/分，溫度為25?301的恒溫培養(yǎng)搖床上培養(yǎng)過夜后，測定菌液濃度為006。。為0.8?1.0時，取出備用。
[0041]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入培養(yǎng)好的部03菌液，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在菌液中，計時3001=后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于241黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0042]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0043]實施例6
[0044]消毒處理:挑選籽粒飽滿無缺損、均勻一致的小花堿茅種子，于超凈工作臺用75%的酒精、5%次氯酸鈉中分別浸泡108和10-11后，用滅菌的蒸餾水沖洗7?8次，洗滌過程中不斷攪動，將種子表面的酒精和次氯酸鈉沖洗干凈。
[0045]枯草芽孢桿菌部03菌液制備:先配制溶菌肉湯⑶液體培養(yǎng)基:按照氯化鈉、胰蛋白胨和酵母粉的比例為1:2:1配制，溶劑為蒸餾水；調(diào)節(jié)邱到7.2，高溫115?1321滅菌，然后冷卻至20?351后，在每100此的18液體培養(yǎng)基加入50?100仏的枯草芽孢桿菌部03菌液，在轉(zhuǎn)速為180?250轉(zhuǎn)/分，溫度為25?301的恒溫培養(yǎng)搖床上培養(yǎng)過夜后，測定菌液濃度為006。。為0.8?1.0時，取出備用。
[0046]浸泡處理:在滅菌的離心管中加入培養(yǎng)好的部03菌液，然后將消毒好的小花堿茅種子浸泡在菌液中，計時6001??！后，迅速取出種子，平鋪在已滅菌鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中，鋪種之前，在濾紙上滴入等量無菌水，至濾紙表面形成水膜為止，將取出的種子均勻的鋪在濾紙上，每皿100粒，置于251黑暗條件培養(yǎng)，每天統(tǒng)計觀察發(fā)芽情況，培養(yǎng)5(1后統(tǒng)計發(fā)芽率，計算發(fā)芽勢。
[0047]將種子整齊排列在培養(yǎng)皿中，每天統(tǒng)計其發(fā)芽狀況；發(fā)芽勢為發(fā)芽第二天的統(tǒng)計結(jié)果，發(fā)芽率為發(fā)芽第八天的統(tǒng)計結(jié)果。
[0048]對結(jié)果進行統(tǒng)計記錄，如附圖1、2、3所示:
[0049](1)、6803菌液浸泡小花堿茅種子處理5-11發(fā)芽勢達到最大值(40.75% ),較對照實施例1、2可顯著? 0.05)提高了小花堿茅種子的發(fā)芽勢，分別顯著? 0.05)提高發(fā)芽勢48.2%和58.3% ；
[0050](2)、6803菌液浸泡小花堿茅種子處理5-11和10-11發(fā)芽率均達到最大值(90.50% )，較兩個對照實施例1、2分別顯著(戶? 0.05)提高10.4%和16.0%。
[0051]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在獲知本發(fā)明中記載內(nèi)容后，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對其作出若干同等變換和替代，這些同等變換和替代也應(yīng)視為屬于本發(fā)明的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其是在小花堿茅種子進行萌發(fā)前先將其置于枯草芽孢桿菌6803菌液中進行浸泡處理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于:枯草芽孢桿圃6803圃液中00關(guān)為0.8?1.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于:浸泡處理的時間為5?60111111。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于:浸泡處理的時間為5111111。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于:浸泡處理前對小花堿茅種子進行消毒處理。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于，消毒處理為將小花堿茅種子依次置于73?77%的乙醇和4.8?5.2%的版^10中分別浸泡9?118和9.5?10.5111111，然后用無菌水進行漂洗。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于，枯草芽孢桿菌部03菌液采用如下方法配置得到: 配制⑶液體培養(yǎng)基，滅菌冷卻后在每100此的18液體培養(yǎng)基中加入50?100 ^ I的枯草芽孢桿菌6803菌液，然后進行菌株培養(yǎng)，當菌液濃度006。。為0.8?1.0時，取出備用。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的提高小花堿茅種子萌發(fā)率的方法，其特征在于:小花堿茅種子萌發(fā)處理的溫度為251，并進行遮光處理。
【文檔編號】A01H4/00GK104396736SQ201410502207
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月23日
【發(fā)明者】張金林, 李靜, 韓慶慶, 呂昕培, 葛靜, 李惠茹, 王鎖民 申請人:蘭州大學(xué)