一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的誘變、愈傷組織的分化、生根誘導等步驟，本發(fā)明方法通過對炙甘草愈傷組織的誘変處理，可獲得分化率高、代謝產(chǎn)物含量高的優(yōu)良品株，為炙甘草的研究提供技術基礎。
【專利說明】 一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及炙甘草組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物栽培【技術領域】。

【背景技術】
[0002]炙甘草，Glycyrrhizae.，豆科，多年生草本，根與根狀莖粗狀，直徑1-3厘米，外皮褐色，里面淡黃色，具甜味。莖直立，多分枝，高30-120厘米，密被鱗片狀腺點、刺毛狀腺體及白色或褐色的絨毛，葉長5-20厘米；托葉三角狀披針形，長約5毫米，寬約3毫米，兩面密被白色短柔毛；葉柄密被褐色腺點和短柔毛；小葉5-17枚，卵形、長卵形或近圓形，長1.5-5厘米，寬0.8-3厘米，上面暗綠色，下面綠色，兩面均密被黃褐色腺點及短柔毛，頂端鈍，具短尖，基部圓，邊緣全緣或微呈波狀，多少反卷。甘草常生于干旱沙地、河岸砂質(zhì)地、山坡草地土壤中。產(chǎn)東北、華北、西北各省區(qū)。蒙古及俄羅斯西伯利亞地區(qū)也有。炙甘草含有甘草甜素、甘草次酸、甘草多糖等多種化學成分，具有抗炎及抗變態(tài)反應作用，可調(diào)節(jié)機體免疫功能，抗腫瘤和止痛作用。因此炙甘草的主要功效是和中緩急，潤肺，解毒，調(diào)和諸藥。常用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心動悸，脈結代，可解附子毒。主要是種子繁殖和根狀莖等常規(guī)的繁殖方法，誘變育種結合組培技術可以獲得更高產(chǎn)更優(yōu)良的炙甘草幼苗。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法，本發(fā)明方法通過對炙甘草愈傷組織的誘変處理，可獲得分化率高、代謝產(chǎn)物含量高的優(yōu)良品株，為炙甘草的研究提供技術基礎。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現(xiàn)的:
選取炙甘草新抽的葉片洗去表面污垢，1%的溴水溶液處理6min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的炙甘草葉片切成0.5 X 0.5的小塊，接種到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度22±2°C，培養(yǎng)出來的愈傷組織進行20-80Gy3X 14Li+束照射，培養(yǎng)出來的愈傷組織接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的分化誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度24±2°C，光強60001x，光照時間10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度25±2°C，光強160001x，光照時間14h/d。
[0005]采用本發(fā)明制備的炙甘草誘變率高，周期短，產(chǎn)量大，污染小，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
選取炙甘草新抽的葉片洗去表面污垢，1%的溴水溶液處理6min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的炙甘草葉片切成0.5 X 0.5的小塊，接種到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度22±2°C，培養(yǎng)出來的愈傷組織進行20Gy3X 14Li+束照射，培養(yǎng)出來的愈傷組織接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的分化誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度24±2°C，光強60001x，光照時間10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度25±2°C，光強160001x，光照時間14h/d，誘變生根率89%。
[0008]實施例2
選取炙甘草新抽的葉片洗去表面污垢，1%的溴水溶液處理6min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的炙甘草葉片切成0.5 X 0.5的小塊，接種到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度22±2°C，培養(yǎng)出來的愈傷組織進行40Gy3X 14Li+束照射，培養(yǎng)出來的愈傷組織接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的分化誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度24±2°C，光強60001x，光照時間10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度25±2°C，光強160001x，光照時間14h/d，誘變生根率90%。
[0009]實施例3
選取炙甘草新抽的葉片洗去表面污垢，1%的溴水溶液處理6min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的炙甘草葉片切成0.5 X 0.5的小塊，接種到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度22±2°C，培養(yǎng)出來的愈傷組織進行80Gy3X 14Li+束照射，培養(yǎng)出來的愈傷組織接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的分化誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度24±2°C，光強60001x，光照時間10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度25±2°C，光強160001x，光照時間14h/d，誘變生根率95%。
【權利要求】
1.一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的誘變、愈傷組織的分化、生根誘導，其主要步驟如下: (1)取炙甘草幼嫩的葉片，進行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的炙甘草葉片切成0.5X0.5的小塊，接種到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BAl.0mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂6.5g/L，ρΗ5.86，溫度 22±2°C ; (3)取步驟(2)培養(yǎng)出來的愈傷組織進行20-80Gy3X14Li+束照射； (4)取步驟(3)培養(yǎng)出來的愈傷組織接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的分化誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.86，溫度24±2°C，光強60001x，光照時間10h/d ； (5)取步驟(4)分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖 50g/L，瓊脂 6.5g/L，ρΗ5.86，溫度 25±2。。，光強 160001χ，光照時間 14h/d。
2.按照權利要求1所述的一種炙甘草誘變育種的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(O中炙甘草葉片的消毒方法為選取炙甘草新抽的葉片洗去表面污垢，1%的溴水溶液處理6min,無菌水沖洗干凈。
【文檔編號】A01H4/00GK104255521SQ201410540653
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司