一種促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種云南金葉子芽尖組織培養(yǎng)快速繁殖的方法，其步驟包括：1)誘導(dǎo)培養(yǎng)；2)繼代培養(yǎng)；3)生根培養(yǎng)和4)煉苗和移栽。本發(fā)明的組織培養(yǎng)方法簡便，步驟簡單，操作方便，所得云南金葉子種苗植株健壯，生長能力強(qiáng)，適于規(guī)?；a(chǎn)，同時(shí)還有效縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了生產(chǎn)成本。
【專利說明】一種促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥用植物種植領(lǐng)域，尤其涉及一種促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 云南金葉子（CraibiodendronyunnanenseW.W.Smith)，石南科植物云南金葉 子，常綠小喬木，高3-8米，小枝無毛。葉互生，厚革質(zhì)，橢圓形，長6-10(-13)厘米，寬 3. 5-4. 5 (-6)厘米，先端鈍圓或凹缺，基部鈍或近圓形，全緣，稍反卷，兩面無毛，背面疏被 黑色小腺點(diǎn)，中脈在表面下陷，在背面隆起，側(cè)脈14-18對，平行，在表面明顯，在背面隆起； 葉柄粗短，長約5毫米。圓錐花序頂生，花序軸長15(-20)厘米，被灰色微毛；花白色，有 香氣；花萼裂片基部合生，裂片寬卵形，有柔毛；花冠鐘形，長3-4毫米，具毛，5淺裂，裂片直 立；雄蕊10枚，長幾等于花冠，花絲具疏毛，中部彎曲；子房被毛。蒴果扁球形，直徑達(dá)12毫 米?；ㄆ?-10月，果期10月至翌年4月。云南云南金葉子性澀、辛，溫。有劇毒，發(fā)表溫經(jīng)， 活絡(luò)止痛。用于跌打損傷，風(fēng)濕麻木，肌肉痛，關(guān)節(jié)痛，神經(jīng)性皮炎，外感風(fēng)寒。
[0003] 云南金葉子藥用部位為成熟葉子，據(jù)野外調(diào)查得知，云南金葉子為灌木至小喬木， 一般分布于陽坡，因?yàn)槌墒旆N子數(shù)量比例低，結(jié)構(gòu)較為特殊，自然繁殖困難，更新周期較長， 加之由于人口和經(jīng)濟(jì)壓力增加，產(chǎn)地普遍開荒墾坡，以及經(jīng)濟(jì)林建設(shè)和林分改造等，云南金 葉子原生生境遭到極大破壞，野生種群恢復(fù)破碎化和邊緣化非常嚴(yán)重，在野外很難看到成 片分布，很難形成大的生物群落，該狀況尚未引起地方政府足夠重視，因此對其進(jìn)行生物學(xué) 特征研宄以及引種栽培及育種研宄很有必要。
[0004] 本發(fā)明利用組織培養(yǎng)技術(shù)，不受外界自然條件影響，利用莖節(jié)擴(kuò)繁，產(chǎn)生大量的種 苗，大規(guī)模的擴(kuò)大種苗生產(chǎn)，滿足種植的需求。解決資源緊缺問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決【背景技術(shù)】中存在的云南金葉子生長慢，繼代多次會(huì)變異、玻璃化、種質(zhì)衰 退等問題，本發(fā)明提供了一種促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其技術(shù)方案如下：
[0006] 1)誘導(dǎo)發(fā)芽：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，置于濃度為 75-80%的乙醇溶液浸泡30-40秒，然后置于濃度為1-1. 2%的升汞溶液中消毒15-20分鐘， 無菌水清洗5-6遍，利用手術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基是按 照以下的原料比例制備而成N68為基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip)0. 1-2.Omg/L， 萘乙酸（NAA) 0? 1-1.Omg/L，赤霉素（GA) 0? 5-3.Omg/L，糖 25-30g/L，香蕉 20-30 %，椰子汁 20-30 %，土豆泥 20-30 %，茶多酚 15-20 %，瓊脂 3-6g/L，PH值為 5. 8，培養(yǎng)溫度為 29-32°C， 光照強(qiáng)度為2100-25001ux，光照時(shí)間為14-16小時(shí)/天，培養(yǎng)16-20天后得到云南金葉子小 芽；
[0007] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置繼代培養(yǎng)基中，其中繼 代培養(yǎng)基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS基本培養(yǎng)基附加附加異戊烯基腺嘌呤 (2_ip) 3. 0-5.Omg/L，2,4 二氯苯氧乙酸I.Omg/L，萘乙酸（NAA) 0? 2-1.Omg/L，糖 30g/L，瓊 脂3-6g/L，香蕉20-30 %，椰子汁20-30 %，土豆泥20-30 %，茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %，PH值為5. 8,培養(yǎng)溫度為29-32°C，培養(yǎng)時(shí)間為14-16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2100-25001ux， 62-70天左右可獲得2cm左右高度的云南金葉子組培分化苗；
[0008] 3)云南金葉子組培分化的生根培養(yǎng)：將步驟2)中獲得的大量的云南金葉子 分化苗移栽到生根培養(yǎng)基，其中生根培養(yǎng)基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS為 基本培養(yǎng)基2-4 %，生長素IBA0. 1-2. 0 %，糖2-4 %，香蕉20-30 %，椰子汁20-30 %，土 豆泥20-30 %，茶多酚15-20 %，活性炭0. 2-0. 4 %，PH5. 8培養(yǎng)溫度為28 °C，光照強(qiáng)度 2100-25001ux，光照時(shí)間為14-16小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)62-70天后，把組培苗移到自然光 下培養(yǎng)，25-28天后可得到具有3-4條根的云南金葉子生根組培苗；
[0009] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待1-2個(gè)月后 云南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮 陰，光照強(qiáng)度為3200-350011?，濕度控制在50-60%，溫度控制在20-25°〇。
[0010] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟1)中， 其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip)0.l-2.0mg/L，萘乙酸 (NAA) 0? 1-1.Omg/L，赤霉素（GA) 0? 5-3.Omg/L，糖 30g/L，瓊脂 4.Og/L，香蕉 20-25g，椰子汁 20-25g，土豆泥 20-25g，茶多酚 18-20g。
[0011] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟2)中， 其中培養(yǎng)基為：1/2MS基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip)3.0-5.0mg/L，萘乙酸 (NAA) 0? 2-1.Omg/L，糖 30g/L，瓊脂 4.Og/L，香蕉 25-30 %，椰子汁 25-30 %，土豆泥 25-30 %， 茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %。
[0012] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟3)中，其中 生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基，附加活性炭0.4%，IBA0.8,糖2%，香蕉25-30%，椰 子汁25-30 %，土豆泥25-30 %，茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %。
[0013] 本發(fā)明的有益效果：
[0014] 1、本方法能快發(fā)繁殖出大量優(yōu)質(zhì)的組培苗，避免因?yàn)椴粩嗟闹貜?fù)繼代造成組培苗 變異，后期通過自然光培養(yǎng)后，組培苗生長健壯，玻璃化變異降低。同時(shí)，提供在瓶內(nèi)有大田 環(huán)境相似的環(huán)境，提高了組培苗在后期的煉苗過程中成活率。生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的苗滿足生產(chǎn)需 要
[0015] 2、生長周期短，一次繼代的培養(yǎng)時(shí)間在40-60天時(shí)間，減少了繼代次數(shù)，大大得節(jié) 約了種苗的培育時(shí)間，達(dá)到促進(jìn)種苗生長的效果。
[0016] 3、繁殖速度快，培育條件，如光照、溫度和培育時(shí)間的嚴(yán)格控制有效得促進(jìn)種苗的 快速生長，優(yōu)良培養(yǎng)基的配置給種苗提供了生長所需的碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長素，促進(jìn)了 種苗快速的生長的同時(shí)，發(fā)芽率、生根率以及煉苗成活率大大的提高。
[0017] 4、培養(yǎng)基的優(yōu)選，由基本培養(yǎng)基配合不同濃度激素再添加不同的有機(jī)物和茶多酚 組成在現(xiàn)所使用的培養(yǎng)基，其中添加的茶多酚作用于菌體細(xì)胞，能逐步破壞其細(xì)胞壁的完 整性，使得堿性磷酸酶滲出，繼而使細(xì)胞膜的通透性增強(qiáng)，導(dǎo)致金屬離子，蛋白質(zhì)的滲漏使 細(xì)胞代發(fā)生紊亂，逐漸破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而起到抑菌的作用，椰子汁、土豆泥、香蕉的加入引 用天然符合物，促愈傷組織，促進(jìn)種苗茁壯成長。經(jīng)過多次嘗試的基礎(chǔ)上，按照一定的原則 篩選出來的對云南金葉子具有很好誘導(dǎo)，能在保持原植物的優(yōu)良特性情況下，不變異情況 下，增值率高，生長快的優(yōu)良培養(yǎng)基。

【具體實(shí)施方式】
[0018] 1)誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，在流水下清洗 干凈，利用75%乙醇浸泡30秒，濃度為1 %的升汞消毒15分鐘，無菌水清洗5遍，利用手術(shù) 刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為29°C，光照強(qiáng)度為21001UX，光照時(shí)間 為14小時(shí)/天，培養(yǎng)16天后可見云南金葉子小芽發(fā)出，其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip) 0? 3mg/L，萘乙酸（NAA) 0? 02mg/L，赤霉素（GA) 2.Omg/L，糖30g/ L，瓊脂4.Og/L，香蕉25g，土豆泥25g，椰子汁25g，茶多酚15g，PH值為5. 8 ;
[0019] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置于1/2MS為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2_ip)0. 5mg/L，萘乙酸（NAA)2.Omg/L，糖30g/L，瓊脂4.Og/L，香蕉 25g，土豆泥25g，椰子汁25g，茶多酚15g，PH值為5. 8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為29°C， 培養(yǎng)時(shí)間為14小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為21001UX，44天左右可獲得2cm左右高度的整齊的云 南金葉子組培分化苗；
[0020] 3)云南金葉子分化苗生根培養(yǎng)，將步驟2)獲得的大量的云南金葉子分化苗移栽 到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為29°C，，光照強(qiáng)度25001UX，光照時(shí)間為14小時(shí)/天的條件下培 養(yǎng)40天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，50天后可得到具有4條根的云南金葉子生根組培 苗，其中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基4%，香蕉20%，土豆20%，椰子汁20%，茶多 酚5%，生長素IBA0. 1%，糖2%，活性炭0.2%，PH值為5.8 ;
[0021] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待2個(gè)月后云 南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰， 光照強(qiáng)度為32001uX，濕度控制在60%，溫度控制在20°C。
[0022] 實(shí)施例2
[0023] 1)誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，在流水下清洗 干凈，利用80%乙醇浸泡40秒，濃度為1. 2%的升汞消毒15分鐘，無菌水清洗6遍，利用手 術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度為22001UX，光照時(shí) 間為16小時(shí)/天，培養(yǎng)20天后可見云南金葉子小芽發(fā)出，其中培養(yǎng)基為N68為基本培養(yǎng) 基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip) 0.35mg/L，萘乙酸（NAA) 0.03mg/L，赤霉素（GA)L5mg/L，糖 28g/L，土豆泥25g，椰子汁25g，茶多酚15g，瓊脂3. 8g/L，PH值為5. 8 ;
[0024] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置于1/2MS為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip) 4.Omg/L，萘乙酸（NAA) 2.Omg/L，糖30g/L，瓊脂4.Og/L，土豆泥 25g，椰子汁25g，茶多酚15g，PH值為5. 8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時(shí)間為16 小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為22001ux，70天左右可獲得2cm左右高度的整齊的云南金葉子組培分 化苗；
[0025] 3)云南金葉子分化苗生根培養(yǎng)，將步驟2)獲得的大量的云南金葉子分化苗移栽 到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為30°C，，光照強(qiáng)度25001UX，光照時(shí)間為16小時(shí)/天的條件下培 養(yǎng)35天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，65天后可得到具有4條根的云南金葉子生根組培 苗，其中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基4%，土豆20%g，椰子汁20%，茶多酚5%g， 生長素IBA2. 0%，糖2%，活性炭0. 2%，PH值為5. 8;
[0026] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待2個(gè)月后云 南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰， 光照強(qiáng)度為32001uX，濕度控制在60%，溫度控制在20°C。
[0027] 實(shí)施例3
[0028] 1)誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，在流水下清洗 干凈，利用75%乙醇浸泡35秒，濃度為1. 2%的升汞消毒15分鐘，無菌水清洗6遍，利用手 術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為32°C，光照強(qiáng)度為23001UX，光照時(shí) 間為16小時(shí)/天，培養(yǎng)20天后可見云南金葉子小芽發(fā)出，其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng) 基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip) 0.012 :，萘乙酸（NAA) 0.015,赤霉素（GA)LOmg/L，糖28g/ L，瓊脂3. 8g/L，香蕉20 %，椰子汁20 %，茶多酚5 %，PH值為5. 8 ;
[0029] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置于1/2MS為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2_ip)4.Omg/L，萘乙酸（NAA)2.Omg/L，糖30g/L，瓊脂4.Og/L，香蕉 20%，椰子汁20%，茶多酚5 %，PH值為5. 8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時(shí)間為 16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為22001ux，55天左右可獲得2cm左右高度的整齊的云南金葉子組培 分化苗；
[0030] 3)云南金葉子分化苗生根培養(yǎng)，將步驟2)獲得的大量的云南金葉子分化苗移栽 到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為30°C，，光照強(qiáng)度25001UX，光照時(shí)間為16小時(shí)/天的條件下培 養(yǎng)35天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，60天后可得到具有4條根的云南金葉子生根組培 苗，其中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基4 %，香蕉20 %，椰子汁20 %，茶多酚5 %，生長 素IBA2. 0%，糖 2%，活性炭 0? 2%，，PH值為 5. 8;
[0031] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待2個(gè)月后云 南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰， 光照強(qiáng)度為32001uX，濕度控制在60%，溫度控制在20°C。
[0032] 實(shí)施例4
[0033] 1)誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，在流水下清洗 干凈，利用75%乙醇浸泡35秒，濃度為1. 2%的升汞消毒15分鐘，無菌水清洗6遍，利用手 術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為32°C，光照強(qiáng)度為23001UX，光照時(shí) 間為16小時(shí)/天，培養(yǎng)20天后可見云南金葉子小芽發(fā)出，其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng) 基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip):萘乙酸（NAA):赤霉素（GA)I. 5mg/L，，糖28g/L，瓊脂3.Sg/ L，香蕉25g，土豆泥25g，茶多酷15g，PH值為5. 8;
[0034] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置于1/2MS為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2_ip)4.Omg/L，萘乙酸（NAA)2.Omg/L，糖30g/L，瓊脂4.Og/L，香蕉 25g，土豆泥25g，茶多酚15g，PH值為5. 8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時(shí)間為16 小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為22001ux，60天左右可獲得2cm左右高度的整齊的云南金葉子組培分 化苗；
[0035] 3)云南金葉子分化苗生根培養(yǎng)，將步驟2)獲得的大量的云南金葉子分化苗移栽 到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為30°C，，光照強(qiáng)度25001UX，光照時(shí)間為16小時(shí)/天的條件下培 養(yǎng)35天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，45天后可得到具有4條根的云南金葉子生根組培 苗，其中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基4 %，香蕉20 %，土豆20 %，茶多酚5 %，生長素 IBA2.0%，糖 2%，活性炭 0.2%，PH值為 5.8;
[0036] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待2個(gè)月后云 南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰， 光照強(qiáng)度為32001uX，濕度控制在60%，溫度控制在20°C。
[0037] 實(shí)施例5
[0038] 1)誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，在流水下清洗 干凈，利用75%乙醇浸泡35秒，濃度為1. 2%的升汞消毒15分鐘，無菌水清洗6遍，利用手 術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為32°C，光照強(qiáng)度為23001UX，光照時(shí) 間為16小時(shí)/天，培養(yǎng)30天后可見云南金葉子小芽發(fā)出，其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng) 基附加異戊烯基腺嘌呤（2_ip)0. 35,萘乙酸（NAA，0. 3:赤霉素（GA)3mg/L，香蕉25g，土豆泥 25g，椰子汁 25g，糖 28g/L，瓊脂 3. 8g/L，PH值為 5. 8;
[0039] 2)繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置于1/2MS為基本培養(yǎng)基 附加異戊烯基腺嘌呤（2_ip)4.Omg/L，萘乙酸（NAA)2.Omg/L，糖30g/L，瓊脂4.Og/L，香蕉 25g，土豆泥25g，椰子汁25g，PH值為5. 8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時(shí)間為16 小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為22001ux，70天左右可獲得2cm左右高度的整齊的云南金葉子組培分 化苗；
[0040] 3)云南金葉子分化苗生根培養(yǎng)，將步驟2)獲得的大量的云南金葉子分化苗移栽 到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度25001UX，光照時(shí)間為16小時(shí)/天的條件下培養(yǎng) 65天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，75天后可得到具有4條根的云南金葉子生根組培苗， 其中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基4 %，生長素IBA2. 0 %，糖2 %，活性炭0. 2 %，香 蕉20%，土豆20%，椰子汁20%，PH值為5.8;
[0041] 4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾 干水汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待2個(gè)月后云 南金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰， 光照強(qiáng)度為32001uX，濕度控制在60%，溫度控制在20°C。
[0042] 實(shí)施例1-實(shí)施例5的組培方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)對比
[0043]

【權(quán)利要求】
1. 一種促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 誘導(dǎo)培養(yǎng)：在云南金葉子莖上取頂芽或腋芽在流水下清洗干凈，置于濃度為 75-80%的乙醇溶液浸泡30-40秒，然后置于濃度為1-1. 2%的升汞溶液中消毒15-20分鐘， 無菌水清洗5-6遍，利用手術(shù)刀切去邊緣部分，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基是按 照以下的原料比例制備而成N68為基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip)0. 1-2. Omg/L， 萘乙酸（NAA) 0? 1-1. Omg/L，赤霉素（GA) 0? 5-3. Omg/L，糖 25-30g/L，香蕉 20-30 %，椰子汁 20-30 %，土豆泥 20-30 %，茶多酚 15-20 %，瓊脂 3-6g/L，PH 值為 5. 8，培養(yǎng)溫度為 29-32°C， 光照強(qiáng)度為2100-25001ux，光照時(shí)間為14-16小時(shí)/天，培養(yǎng)16-20天后得到云南金葉子小 芽； 2) 繼代培養(yǎng)：將步驟1)獲得的大量的云南金葉子小芽置繼代培養(yǎng)基中，其中繼代 培養(yǎng)基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS基本培養(yǎng)基附加附加異戊烯基腺嘌呤 (2_ip) 3. 0-5. Omg/L，2,4 二氯苯氧乙酸 1. Omg/L，萘乙酸（NAA) 0? 2-1. Omg/L，糖 30g/L，瓊 脂3-6g/L，香蕉20-30 %，椰子汁20-30 %，土豆泥20-30 %，茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %， PH值為5. 8,培養(yǎng)溫度為29-32°C，培養(yǎng)時(shí)間為14-16小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2100-25001ux， 62-70天左右可獲得2cm左右高度的云南金葉子組培分化苗； 3) 云南金葉子組培分化的生根培養(yǎng)：將步驟2)中獲得的大量的云南金葉子分化苗移 栽到生根培養(yǎng)基，其中生根培養(yǎng)基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS為基本培養(yǎng)基 2-4 %，生長素 IBA 0? 1-2. 0 %，糖 2-4 %，香蕉 20-30 %，椰子汁 20-30 %，土豆泥 20-30 %，茶 多酚15-20%，活性炭0. 2-0. 4%，PH5. 8培養(yǎng)溫度為28°C，光照強(qiáng)度2100-25001ux，光照時(shí) 間為14-16小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)62-70天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，25-28天后可 得到具有3-4條根的云南金葉子生根組培苗； 4) 煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的云南金葉子生根組培苗根部的培養(yǎng)基，晾干水 汽，將云南金葉子生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質(zhì)的苗床上，待1-2個(gè)月后云南 金葉子小苗生長穩(wěn)定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時(shí)要適當(dāng)遮陰，光 照強(qiáng)度為3200-350011?，濕度控制在50-60%，溫度控制在20-25°〇。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟1) 中，其中培養(yǎng)基為：N68為基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip)0. l-2.0mg/L，萘乙酸 (NAA) 0? 1-1. 0mg/L，赤霉素（GA) 0? 5-3. 0mg/L，糖 30g/L，瓊脂 4. 0g/L，香蕉 20-25g，椰子汁 20-25g，土豆泥 20-25g，茶多酚 18-20g。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟2) 中，其中培養(yǎng)基為：1/2MS基本培養(yǎng)基附加異戊烯基腺嘌呤（2-ip) 3. 0-5. 0mg/L，萘乙酸 (NAA) 0? 2-1. 0mg/L，糖 30g/L，瓊脂 4. 0g/L，香蕉 25-30 %，椰子汁 25-30 %，土豆泥 25-30 %， 茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)云南金葉子快速繁殖的方法，其特征在于，步驟3)中，其 中生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基，附加活性炭0. 4%，IBA0. 8,糖2%，香蕉25-30%，椰 子汁25-30 %，土豆泥25-30 %，茶多酚15-20 %，活性炭0. 2 %。
【文檔編號】A01H4/00GK104472354SQ201410677735
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】霍麗妮, 蘇鈦, 陳睿, 李培源, 蘇煒, 韋建華 申請人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)