一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物的體外培養(yǎng)方法，尤其是一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽 的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 香果樹材質(zhì)堅(jiān)韌，不翹不裂，彈性好，木材紋理通直、潔白細(xì)密、色紋美麗、加工 容易，是建筑、家具、雕刻、模型、裝飾的優(yōu)良用材。其枝皮纖維細(xì)柔，是供制蠟紙和人造棉 的好原料。香果樹樹姿優(yōu)美，花大艷麗，每當(dāng)繁花怒放之時(shí)，樹冠呈金花玉葉奇觀，像無 數(shù)彩蝶聚于枝頭翩翩起舞，而且紡錘形的蒴果深秋成熟時(shí)呈紅色，還有香氣，不失為優(yōu)良 的園林觀賞植物。香果樹不但根和樹皮入藥，具有和胃止吐功效，而且在研宄茜草科系統(tǒng) 發(fā)育和我國南部、西南部的植物區(qū)系特點(diǎn)等方面都具有重要價(jià)值。由于結(jié)果稀少，常規(guī)繁 殖較困難，因而僅在我國西南地區(qū)有零星分布，是我國特有樹種之一，被國家列為稀有種 二級保護(hù)植物。
[0003] 《北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2007年05期的《珍稀植物香果樹植株再生體系的建立》和 《植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào)》2008年01期的《香果樹莖段和葉片的組織培養(yǎng)》中，公開了一種采 用香果樹葉片直接誘導(dǎo)不定芽再生的快繁方法。兩篇文獻(xiàn)均以葉片為材料，MS基本培養(yǎng)基 中添加6-BA、ZT、KT、NAA組合，雖都能直接誘導(dǎo)出一定數(shù)量的不定芽，但是存在不定芽的誘 導(dǎo)時(shí)間較長、增殖系數(shù)較低、生長較弱、方法步驟較繁瑣、藥品種類較多且含量較高的不足 之處。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，可 以解決不定芽的誘導(dǎo)時(shí)間較長、增殖率較低的問題，直接誘導(dǎo)叢生芽，操作簡便、節(jié)約成本。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo) 叢生芽的方法，該方法包括以下步驟：
[0006] 1)預(yù)處理：在香果樹春芽萌發(fā)前，選取香果樹一年生枝條，對芽點(diǎn)部位噴施由 6-BA1.0~3.Omg/L和多菌靈800倍液配制而成的預(yù)處理液進(jìn)行預(yù)處理；
[0007] 2)選取外植體：待香果樹春芽萌發(fā)后，選取展葉2~3天紫紅色新葉作為外植體， 消毒后備用；
[0008] 3)直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢生芽：將步驟2)選取的外植體切成Icm2帶主脈的塊，接種 于叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)，培養(yǎng)溫度25±1°C、濕度75±2%、光照14h/d、光照強(qiáng)度 1800-20001x，培養(yǎng)10天后葉片邊緣及葉脈出形成翠綠色塊狀物，20天后，直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢 生芽；
[0009] 4)叢生芽增殖：將步驟3)誘導(dǎo)生成的叢生芽分切為3~5株為一叢，接種到叢 生芽增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25±l°c、濕度75±2%、光照14h/d、光照強(qiáng)度 1800-20001x，最高叢生芽增殖率為8. 6% ;
[0010] 步驟3)中的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基和步驟4)中的叢生芽增殖培養(yǎng)基為：MS基本培養(yǎng) 基 +6-BA1. 5mg/L+NAA0. lmg/L+ 鹿糖 30g/L+ 瓊脂粉 5g/L。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟1)中進(jìn)行預(yù)處理的步驟為：每5天對芽點(diǎn)部位噴施一次預(yù)處理液， 共噴施三次。
[0012] 步驟1)中所采用的預(yù)處理液優(yōu)選為由6-BA1. Omg/L和多菌靈800倍液配制而成。
[0013] 步驟1)中所采用的預(yù)處理液優(yōu)選為由6-BA3. Omg/L和多菌靈800倍液配制而成。
[0014] 本發(fā)明方法的設(shè)計(jì)過程如下：
[0015] 設(shè)計(jì)表1所示的5種不同的預(yù)處理液進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)：
[0016] 表1預(yù)處理液
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，其特征在于該方法包括以下步驟：1)預(yù) 處理：在香果樹春芽萌發(fā)前，選取香果樹一年生枝條，對芽點(diǎn)部位噴施 由6-BA1.O~3.Omg/L和多菌靈800倍液配制而成的預(yù)處理液進(jìn)行預(yù)處理； 2) 選取外植體：待香果樹春芽萌發(fā)后，選取展葉2~3天紫紅色新葉作為外植體，消毒 后備用； 3)直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢生芽：將步驟2)選取的外植體切成Icm2帶主脈的塊，接種于叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)，培養(yǎng)溫度25±I °C、濕度75 ± 2%、光照14h/d、光照強(qiáng)度1800-20001X， 培養(yǎng)10天后葉片邊緣及葉脈出形成翠綠色塊狀物，20天后，直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢生芽； 4)叢生芽增殖：將步驟3)誘導(dǎo)生成的叢生芽分切為3~5株為一叢，接種到叢生 芽增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25±1°C、濕度75±2%、光照14h/d、光照強(qiáng)度 1800-20001x，最高叢生芽增殖率為8.6% ; 步驟3)中的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基和步驟4)中的叢生芽增殖培養(yǎng)基為：MS基本培養(yǎng)基 +6-BA1.5mg/L+NAAO.Img/L+鹿糖 30g/L+ 瓊脂粉 5g/L。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，其特征在于步驟 1)中進(jìn)行預(yù)處理的步驟為：每5天對芽點(diǎn)部位噴施一次預(yù)處理液，共噴施三次。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，其特征在于：步 驟1)中所采用的預(yù)處理液由6-BA1. 0mg/L和多菌靈800倍液配制而成。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，其特征在于：步 驟1)中所采用的預(yù)處理液由6-BA3. 0mg/L和多菌靈800倍液配制而成。
【專利摘要】一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，該方法包括以下步驟： 1）預(yù)處理：對芽點(diǎn)部位噴施由6-BA1.0～3.0 mg/ L和多菌靈800倍液配制而成的預(yù)處理液進(jìn)行預(yù)處理； 2）選取外植體； 3）直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢生芽；4）叢生芽增殖：最高叢生芽增殖率為8.6%。本發(fā)明提供的一種香果樹葉培養(yǎng)直接誘導(dǎo)叢生芽的方法，可以解決不定芽的誘導(dǎo)時(shí)間較長、增殖率較低的問題，直接誘導(dǎo)叢生芽，操作簡便、節(jié)約成本。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104719133
【申請?zhí)枴緾N201410224959
【發(fā)明人】胡梅香, 張國禹, 黃桂云, 馬曉波, 邱利文, 張海波, 吳笛, 汪磊, 楊蘭芳, 徐芳, 李翩翩, 趙華萍
【申請人】中國長江三峽集團(tuán)公司, 長江三峽生態(tài)園林有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2014年5月26日