一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 回交導(dǎo)入系因其遺傳背景單一，是基因定位的優(yōu)良材料，已在大白菜、水稻、小麥、 玉米等作物或蔬菜上得到了應(yīng)用。
[0003] 在大豆的基因定位上，回交導(dǎo)入系也起到了很大的作用。然而，大豆是一種嚴格的 自花授粉作物，天然異交率在1 %以內(nèi)。由于大豆花器小，人工去雄授粉操作困難，所以大豆 回交導(dǎo)入系的建立非常困難，這影響了導(dǎo)入系在大豆基因定位上的應(yīng)用。
[0004] 五星1號是河北省農(nóng)林科學院糧油作物研宄所通過有性雜交培育而成，親本為冀 豆9和Century-2. 3。2000年育成，2001年通過河北省農(nóng)作物品種審定委員會審定，2003 年通過農(nóng)作物品種審定委員會審定。該品種脂肪氧化酶雙缺失（Iox- 2, 3)無豆腥味；蛋 白質(zhì)含量43. 01%、脂肪含量19. 91%，五星1比高產(chǎn)對照品種冀豆7增產(chǎn)6. 8%。2001年 河北省農(nóng)林科學院組織同行專家組對定興縣姚村40畝五星1繁種示范田實收實打驗收畝 產(chǎn)達到250. 7公斤。2002年河北省科技廳組織同行專家組對辛集市馬蘭農(nóng)場50畝示范田 現(xiàn)場測產(chǎn)驗收畝產(chǎn)264. 15公斤。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法。
[0006] 本發(fā)明提供了一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法，包括如下步驟：
[0007] (1)將五星1號的種子與大豆msl雄性不育種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成 熟時收獲不育株上的種子；
[0008] (2)種植步驟（1)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子；
[0009] (3)將五星1號的種子與步驟（2)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟 時收獲不育株上的種子；
[0010] (4)種植步驟（3)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子；
[0011] (5)將五星1號的種子與步驟（4)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟 時收獲不育株上的種子；
[0012] (6)種植步驟（5)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子；
[0013] (7)將五星1號的種子與步驟（6)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟 時收獲不育株上的種子；
[0014] (8)種植步驟（7)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，即為五星1號回交導(dǎo)入 群體。
[0015] msl是雄性核不育基因，含有msl基因的大豆在減數(shù)分裂末期II后敗育不能形成 花粉，因而雌性正常雄性不育。以大豆msl雄性不育種子做回交導(dǎo)入的供體親本，用于建立 回交導(dǎo)入系。利用五星1建立回交導(dǎo)入系是創(chuàng)造優(yōu)良脂氧酶缺失材料的一種快捷便利的方 法，同時五星1回交導(dǎo)入系的構(gòu)建還可以在小范圍內(nèi)改良現(xiàn)有五星1品種的不足，培育更加 優(yōu)良的大豆品種。本發(fā)明中為分子輔助育種奠定良好的基礎(chǔ)。
【具體實施方式】
[0016] 以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗 方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自 常規(guī)生化試劑商店購買得到的。大豆msl雄性不育種子：河北省農(nóng)林科學院糧油作物研宄 所。以下實施例中的定量試驗，均設(shè)置三次重復(fù)實驗，結(jié)果取平均值。
[0017] 提及五星1號的文獻：王月明，侯春燕，張孟臣，楊春燕，王冬梅.河北省推廣 大豆品種對六個SMV株系的抗性鑒定.華北農(nóng)學報，2006, 21 :183-186。
[0018] 實施例1、構(gòu)建五星1號回交導(dǎo)入群體
[0019] -、五星1號花粉導(dǎo)入率確定
[0020] 2011年6月，按種子個數(shù)比例3 :1充分混合五星1號種子和大顯msl雄性不育種 子，然后種植于30X30平方米試驗田內(nèi)（行距為50cm，株距IOcm)，成熟時隨機從不同不育 株上收獲種子150粒。
[0021] 提取種子的基因組DNA，用SSR分子標記檢測五星1號的花粉導(dǎo)入率。在大豆不同 連鎖群上隨機選擇1對引物，共選擇10對引物。辨別標準：如果不育粒DNA在所檢測的10 個位點中均含有五星1號特征帶譜則說明該種子在形成接受的花粉是來于五星1號，如果 帶譜中含有非五星1號特征帶譜則說明該種子在形成時接受的花粉是來于不育群體中可 育株花粉。
[0022] 在150粒種子中有72粒存在五星1號花粉飄入Msl群體事件，另外78個非五星 1號飄入，五星1號花粉導(dǎo)入率為48%，置換群體中24%遺傳物質(zhì)為五星1號。
[0023] 二、構(gòu)建五星1號回交導(dǎo)入群體
[0024] 1、將五星1號的種子與大顯msl雄性不育種子（又稱CO群體）按數(shù)量比3 :1充 分混合，然后種植，成熟時收獲不育株上的種子。
[0025] 2、種植步驟1獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，即為Cl群體。
[0026] 3、將五星1號的種子與Cl群體按數(shù)量比3 :1充分混合，然后種植，成熟時收獲不 育株上的種子。
[0027] 4、種植步驟3獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，即為C2群體。
[0028] 5、將五星1號的種子與C2群體按數(shù)量比3 :1充分混合，然后種植，成熟時收獲不 育株上的種子。
[0029] 6、種植步驟5獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，S卩為C3群體。
[0030] 7、將五星1號的種子與C3群體按數(shù)量比3 :1充分混合，然后種植，成熟時收獲不 育株上的種子。
[0031] 8、種植步驟7獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，即為C4群體（五星1號回 交導(dǎo)入群體）。
[0032] 三、各個群體中脂氧酶材料比例分析
[0033] 2014年五星1號、CO群體、C4群體隔行種植，6米行長，共種植120行，植株成熟時 隨機選擇各個群體的200可育株，測量脂氧酶缺失情況（馬志民、秦君、楊春燕、邸銳、閆龍、 張梅申、李子千、李亞璞、史曉蕾、鮑聰、許寧、封樹平、張孟臣.大豆脂肪氧化酶同功酶聯(lián)合 鑒定技術(shù)的建立?河北農(nóng)業(yè)科學.2014, 18 (2) : 52-59)。
[0034]結(jié)果表明，五星1全部為脂氧酶缺失類型，C4群體中有165株為脂氧酶缺失個體， 占測試株的82. 5%。
[0035] 四、回交群體中遺傳物質(zhì)來源分析
[0036] 利用R語言模擬五星1專用群體回交過程，設(shè)花粉導(dǎo)入率為48 %，模擬C4代群體 中隨機選擇200株。設(shè)五星1位點用-1表示，msl群體位點用1表示，位點間距離為5cM， 每條連鎖群上有30個位點，設(shè)msl基因位于第13號染色體與控制花色相近的位點，染色體 三分之一處。共計600個位點。每條染色體遺傳距離為150cM。模擬結(jié)果表明（見表1)， C4群體中五星1遺傳物質(zhì)約占85. 50%，不育群體中遺傳物質(zhì)約占8. 87%，雜合遺傳物質(zhì)約 占5. 63%，第13號染色體有msl不育位點，最近選擇的為可育株，所以雜合型比例較高為 23. 08% 〇
[0037] 表1五星1遺傳物質(zhì)在群體中所占的比例
【主權(quán)項】
1. 一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法，包括如下步驟： (1) 將五星1號的種子與大豆msl雄性不育種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟時 收獲不育株上的種子； (2) 種植步驟（1)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子； (3) 將五星1號的種子與步驟（2)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟時收 獲不育株上的種子； (4) 種植步驟（3)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子； (5) 將五星1號的種子與步驟（4)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟時收 獲不育株上的種子； (6) 種植步驟（5)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子； (7) 將五星1號的種子與步驟（6)獲得的種子按數(shù)量比3 :1混合，然后種植，成熟時收 獲不育株上的種子； (8) 種植步驟（7)獲得的種子，成熟時收獲可育株的種子，即為五星1號回交導(dǎo)入群體。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種獲得五星1號回交導(dǎo)入群體的方法。本發(fā)明提供的方法包括如下步驟：(1)五星1號種子與大豆ms1雄性不育種子3：1混合后種植，收獲不育株種子；(2)種植步驟(1)獲得的種子，收獲可育株種子；(3)五星1號種子與步驟(2)獲得的種子3：1混合后種植，收獲不育株種子；(4)種植步驟(3)獲得的種子，收獲可育株種子；(5)五星1號種子與步驟(4)獲得的種子3：1混合后種植，收獲不育株種子；(6)種植步驟(5)獲得的種子，收獲可育株種子；(7)五星1號種子與步驟(6)獲得的種子3：1混合后種植，收獲不育株種子；(8)種植步驟(7)獲得的種子，收獲可育株的子。本發(fā)明為分子輔助育種奠定良好的基礎(chǔ)。
【IPC分類】A01H1-02, A01G1-00
【公開號】CN104823660
【申請?zhí)枴緾N201510220497
【發(fā)明人】趙青松, 張梅申, 閆龍, 楊春燕, 張孟臣, 史曉蕾, 陳強
【申請人】河北省農(nóng)林科學院糧油作物研究所
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年5月4日