一種人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種人工誘導(dǎo)硨磲配子排放的方法。它包括以下步驟：a、選取成熟親貝：在硨磲繁殖期內(nèi)，篩選個(gè)頭大、健康無損個(gè)體作為親貝；b、配制催產(chǎn)試劑：將5?羥色胺按照0.6?0.8mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑；c、注射親本催產(chǎn)：根據(jù)硨磲重量，按照0.6?1.25ml/kg親本將催產(chǎn)劑注射到硨磲體內(nèi)，硨磲排精排卵，得到配子。利用本發(fā)明方法可以高效率獲得硨磲精卵，配子排放率近乎100％，這為硨磲人工繁育、遺傳育種、增殖放流等奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
【專利說明】
一種人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法
技術(shù)領(lǐng)域
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[0001]本發(fā)明屬于海洋農(nóng)業(yè)中貝類繁育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法。
【背景技術(shù)】
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[0002]硨磲從西太平洋到印度洋非洲東海岸均有分布，棲息于低潮區(qū)附近的珊瑚礁間。它們是珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)中造礁主要生物物種，對(duì)珊瑚骨架具有支撐作用。它們不但具有美麗的外套膜，具有較高的觀賞價(jià)值;而且肉可食用，具有很好的滋陰壯陽功效，深受國際市場青睞。
[0003]在我國的臺(tái)灣、海南、西沙群島及其它南海島嶼也有分布，分別為庫氏硨磲、無鱗硨磲、鱗硨磲、長硨磲、番紅硨磲、硨蠔等。長期以來，由于漁民過渡采捕，導(dǎo)致硨磲資源銳減。為此，如何快速恢復(fù)我國南海硨磲資源，維護(hù)珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)高多態(tài)性，成為關(guān)系到國計(jì)民生的焦點(diǎn)問題。其中，采用人工繁育增加硨磲數(shù)量是最有效的解決辦法之一。那么，采用何種催產(chǎn)方式，如何獲得硨磲配子成為本發(fā)明的主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0004]本發(fā)明的目的是提供一種人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法。本發(fā)明可以高效獲得成熟的硨磲精卵，為硨磲人工繁育、遺傳育種、增殖放流奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
[0005]本發(fā)明的人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0006]a、選取成熟親貝:根據(jù)硨磲繁育規(guī)律，在硨磲繁殖期內(nèi)，篩選個(gè)頭大、健康無損個(gè)體作為親貝；
[0007]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-輕色胺按照0.6-0.8mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑；
[0008]c、注射親本催產(chǎn):根據(jù)硨磲重量，按照0.6-1.25ml/kg硨磲將催產(chǎn)劑注射到硨磲體內(nèi)，大約10分鐘之內(nèi)開始排精，之后排卵，催產(chǎn)效率100 %。
[0009]優(yōu)選，所述的選取成熟親貝中的硨磲繁殖期，由于不同硨磲物種繁殖期存在差異，通常是通過注射器抽取性腺中少量精卵顯微鏡檢查作為標(biāo)準(zhǔn)，成熟的精子在顯微鏡下不停跳到，成熟的卵子直徑在ΙΟΟμπι左右，卵黃積累顏色為深黃色或者黑色。
[0010]優(yōu)選，所述的配制催產(chǎn)試劑中的催產(chǎn)劑，配制出來為無色透明液體，一般有效試用期在2個(gè)月以內(nèi)，如果發(fā)現(xiàn)液體顏色變黃，說明已經(jīng)變質(zhì)，不能使用。
[0011]優(yōu)選，所述的注射親本催產(chǎn)中，注射部位可以是硨磲足基部、外套膜內(nèi)層肌肉或性腺。
[0012]利用本發(fā)明方法可以100%獲得硨磲精卵，配子排放率近乎100 %，這為硨磲人工繁育、遺傳育種、增殖放流方奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
[0013]李育培、盧傳安公開了對(duì)比文件，一種硨磲貝的人工誘導(dǎo)產(chǎn)卵方法，專利號(hào)為ZL201310184339.7。本發(fā)明與對(duì)比文件相比，具有以下主要不同點(diǎn):①方法不同:對(duì)比文件是物理誘導(dǎo)方法，而本發(fā)明是一種化學(xué)誘導(dǎo)方法;②繁瑣程度不同:對(duì)比文件相對(duì)比較麻煩，需要暴曬、性產(chǎn)物誘導(dǎo)等技術(shù)手段，反復(fù)蒸騰硨磲親貝，而本發(fā)明步驟極其簡單，僅需要打入催產(chǎn)劑即可;③效率不同:對(duì)比文件誘導(dǎo)催產(chǎn)比率僅為80%相對(duì)較低，而本發(fā)明產(chǎn)卵排精比率可以達(dá)到100%;④排放率不同:對(duì)比文件排放配子不完全，而本發(fā)明配子排放率近乎100%;⑤時(shí)間間隔不同:對(duì)比文件誘導(dǎo)時(shí)間較長，累計(jì)誘導(dǎo)時(shí)間4.5-5.0小時(shí)，才可以排放配子，而本發(fā)明從催產(chǎn)到排放配子時(shí)間非常短，在10分鐘之內(nèi)；⑥時(shí)效性不同:對(duì)比文件時(shí)效性較差，僅在大潮期間誘導(dǎo)，親本產(chǎn)卵排精時(shí)間受到嚴(yán)重限制，而本發(fā)明全天候可催產(chǎn)親貝，不受日月大潮限制。由此可見，本發(fā)明是一種簡單、快速獲取硨磲配子的有效方法，為硨磲苗種產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供了良好的基礎(chǔ)，具有很好的應(yīng)用推廣前景。
【具體實(shí)施方式】
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[0014]以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。
[0015]實(shí)施例1:
[0016]a、選取成熟親貝:2016年4月初，從海南島瓊海購買鱗硨磲25只，平均體重每個(gè)個(gè)體5kg，利用水車運(yùn)送至中科院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站，將其放置于水池中，流水暫養(yǎng)3d。在此期間，發(fā)現(xiàn)硨磲對(duì)光線反應(yīng)靈敏，非常健康。經(jīng)注射器經(jīng)出水孔從性腺中取出少許性腺，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)精子跳動(dòng)頻繁，卵子直徑在ΙΟΟμπι，卵黃深黃色，說明性腺已經(jīng)成熟，處于繁殖期內(nèi)；
[0017]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-羥色胺按照0.8mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑，該試劑無色透明；
[0018]C、注射親本催產(chǎn):隨機(jī)抽取6只硨磲，每只注射3ml催產(chǎn)劑，注射部位為足基部，之后單獨(dú)放置于盛滿30L新鮮海水的紅桶中，大約經(jīng)過5-6分鐘，硨磲開始排放精子，排放精子持續(xù)了 10分鐘左右，之后我們將其放置另外盛滿50L新鮮海水的白桶中，大約經(jīng)過10-12分鐘之后開始排放卵子，卵子排放時(shí)間大約持續(xù)了 1.0-1.5小時(shí)。這樣，我們成功的獲得了硨磲成熟配子。經(jīng)過檢測(cè)，6只硨磲全部排放配子，其中4只雌雄同體，排放了精卵，2只均為雌性，僅僅排放了卵子。對(duì)其排放后硨磲性腺進(jìn)行了檢測(cè)，顯微鏡下已經(jīng)沒有任何配子，說明排放率接近100 %。
[0019]由此可見，通過本發(fā)明，可以100%成功催產(chǎn)硨磲，配子排放率近乎100%。
[0020]實(shí)施例2:
[0021]a、選取成熟親貝:2016年3月末，從海南島瓊海購買長硨磲12只，平均體重每個(gè)個(gè)體3kg，利用水車運(yùn)送至中科院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站，將其放置于水池中，流水暫養(yǎng)5d。在此期間，發(fā)現(xiàn)硨磲對(duì)光線反應(yīng)靈敏，非常健康。經(jīng)注射器經(jīng)出水孔從性腺中取出少許性腺，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)精子跳動(dòng)頻繁，卵子直徑在ΙΟΟμπι，卵黃深黃色，說明性腺已經(jīng)成熟，處于繁殖期內(nèi)；
[0022]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-羥色胺按照0.6mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑，該試劑無色透明；
[0023]c、注射親本催產(chǎn):隨機(jī)抽取7只硨磲，每只注射2ml催產(chǎn)劑，注射部位為外套膜內(nèi)層肌肉，之后單獨(dú)放置于盛滿30L新鮮海水的紅桶中，大約經(jīng)過7-8分鐘，長硨磲開始排放精子，排放精子持續(xù)了 10分鐘左右，之后我們將其放置另外盛滿50L新鮮海水的白桶中，大約經(jīng)過8-10分鐘之后開始排放卵子，卵子排放時(shí)間大約持續(xù)了 45-60分鐘。這樣，我們成功的獲得了硨磲成熟配子。經(jīng)過檢測(cè)，7只硨磲全部排放配子，其中6只雌雄同體，排放了精卵，I只均為雌性，僅僅排放了卵子。對(duì)其排放后硨磲性腺進(jìn)行了檢測(cè)，顯微鏡下已經(jīng)沒有任何配子，說明排放率接近100%。
[0024]由此可見，通過本發(fā)明，可以100%成功催產(chǎn)硨磲，配子排放率近乎100%。
[0025]實(shí)施例3:
[0026]a、選取成熟親貝:2016年4月初，從海南島瓊海購買番紅硨磲109只，平均體重每個(gè)個(gè)體0.4kg，利用水車運(yùn)送至中科院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站，將其放置于水池中，流水暫養(yǎng)3d。在此期間，發(fā)現(xiàn)硨磲對(duì)光線反應(yīng)靈敏，非常健康。經(jīng)注射器經(jīng)出水孔從性腺中取出少許性腺，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)精子跳動(dòng)頻繁，卵子直徑在ΙΟΟμπι，卵黃深黃色，說明性腺已經(jīng)成熟，處于繁殖期內(nèi)；
[0027]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-輕色胺按照0.6mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑，該試劑無色透明；
[0028]C、注射親本催產(chǎn):隨機(jī)抽取15只番紅硨磲，每只注射0.5ml催產(chǎn)劑，注射部位為性腺部位，之后單獨(dú)放置于盛滿2L新鮮海水的紅桶中，大約經(jīng)過2-3分鐘，番紅硨磲開始排放精子，排放精子持續(xù)了3分鐘左右，之后我們將其放置另外盛滿5L新鮮海水的藍(lán)桶中，大約經(jīng)過3-4分鐘之后開始排放卵子，卵子排放時(shí)間大約持續(xù)了 5-6分鐘。這樣，我們成功的獲得了番紅硨磲成熟配子。經(jīng)過檢測(cè)，15只硨磲全部排放配子，其中9只雌雄同體，排放了精卵，6只均為雄性，僅僅排放了精子。對(duì)其排放后硨磲性腺進(jìn)行了檢測(cè)，顯微鏡下已經(jīng)沒有任何配子，說明排放率接近100%。
[0029 ]由此可見，通過本發(fā)明，可以100 %成功催產(chǎn)硨磲，配子排放率近乎100%。
[0030]實(shí)施例4:
[0031]a、選取成熟親貝:2016年4月初，從海南島瓊海購買硨蠔25只，平均體重每個(gè)個(gè)體5kg，利用水車運(yùn)送至中科院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站，將其放置于水池中，流水暫養(yǎng)3d。在此期間，發(fā)現(xiàn)硨蠔對(duì)光線反應(yīng)靈敏，非常健康。經(jīng)注射器經(jīng)出水孔從性腺中取出少許性腺，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)精子跳動(dòng)頻繁，卵子直徑在120μπι，卵黃深黃色，說明性腺已經(jīng)成熟，處于繁殖期內(nèi)；
[0032]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-羥色胺按照0.6mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑，該試劑無色透明；
[0033]c、注射親本催產(chǎn):隨機(jī)抽取9只硨蠔，每只注射3ml催產(chǎn)劑，注射部位為外套膜內(nèi)層肌肉，之后單獨(dú)放置于盛滿20L新鮮海水的紅桶中，大約經(jīng)過5-6分鐘，硨蠔開始排放精子，排放精子持續(xù)了 6-7分鐘左右，之后我們將其放置另外盛滿30L新鮮海水的白桶中，大約經(jīng)過7-8分鐘之后開始排放卵子，卵子排放時(shí)間大約持續(xù)了 30-40分鐘。這樣，我們成功的獲得了硨蠔配子。經(jīng)過檢測(cè)，9只硨磲全部排放配子，其中7只雌雄同體，排放了精卵，2只均為雄性，僅僅排放了精子。對(duì)其排放后硨蠔性腺進(jìn)行了檢測(cè)，顯微鏡下已經(jīng)沒有任何配子，說明排放率接近100 %。
[0034]由此可見，通過本發(fā)明，可以100%成功催產(chǎn)硨蠔，配子排放率近乎100%。
[0035]實(shí)施例5:
[0036]a、選取成熟親貝:2016年4月初，從海南島瓊海購買瓷口硨蠔17只，平均體重每個(gè)個(gè)體4kg，利用水車運(yùn)送至中科院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站，將其放置于水池中，流水暫養(yǎng)3d。在此期間，發(fā)現(xiàn)硨蠔對(duì)光線反應(yīng)靈敏，非常健康。經(jīng)注射器經(jīng)出水孔從性腺中取出少許性腺，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)精子跳動(dòng)頻繁，卵子直徑在120μπι，卵黃深黃色，說明性腺已經(jīng)成熟，處于繁殖期內(nèi)；
[0037]b、配制催產(chǎn)試劑:將5-羥色胺按照0.8mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑，該試劑無色透明；
[0038]c、注射親本催產(chǎn):隨機(jī)抽取12只瓷口硨蠔，每只注射3ml催產(chǎn)劑，注射部位為外套膜內(nèi)層肌肉，之后單獨(dú)放置于盛滿20L新鮮海水的紅桶中，大約經(jīng)過4-6分鐘，硨蠔開始排放精子，排放精子持續(xù)了 5-8分鐘左右，之后我們將其放置另外盛滿30L新鮮海水的白桶中，大約經(jīng)過6-8分鐘之后開始排放卵子，卵子排放時(shí)間大約持續(xù)了 30-40分鐘。這樣，我們成功的獲得了瓷口硨蠔配子。經(jīng)過檢測(cè)，12只硨磲全部排放配子，其中1只雌雄同體，排放了精卵，2只均為雄性，僅僅排放了精子。對(duì)其排放后硨蠔性腺進(jìn)行了檢測(cè)，顯微鏡下已經(jīng)沒有任何配子，說明排放率接近100%。
[0039 ]由此可見，通過本發(fā)明，可以100 %成功催產(chǎn)瓷口硨蠔，配子排放率近乎100%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法，其特征在于，包括以下步驟: a、選取成熟親貝:在硨磲繁殖期內(nèi)，篩選個(gè)頭大、健康無損個(gè)體作為親貝；b、配制催產(chǎn)試劑:將5-輕色胺按照0.6-0.8mg/ml濃度溶于生理鹽水中，作為催產(chǎn)劑； c、注射親本催產(chǎn):根據(jù)硨磲重量，按照0.6-1.25ml/kg親本將催產(chǎn)劑注射到硨磲體內(nèi)，硨磲排精排卵，得到配子。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工誘導(dǎo)硨磲排放配子的方法，其特征在于，所述的將催產(chǎn)劑注射到硨磲體內(nèi)，其注射部位是硨磲足基部、外套膜內(nèi)層肌肉或性腺。
【文檔編號(hào)】A01K61/00GK105961242SQ201610311636
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年5月11日
【發(fā)明人】張躍環(huán), 肖述, 馬海濤, 喻子牛
【申請(qǐng)人】中國科學(xué)院南海海洋研究所