專利名稱：評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，涉及一種采用基因表達點陣膜(基因芯片)技術(shù)分析中藥復(fù)方對人體多靶點基因表達方式，用以分析、檢測評價中藥復(fù)方的方法，是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段。
評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，是一種首創(chuàng)性的發(fā)明，是現(xiàn)代生物工程的邊緣科學(xué)，是人類基因組技術(shù)、現(xiàn)代信息電子網(wǎng)絡(luò)技術(shù)、基因芯片技術(shù)、藥物生化拆分技術(shù)、傳統(tǒng)中醫(yī)藥技術(shù)的有機結(jié)合，及具有實用性的應(yīng)用技術(shù)。中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺是通過患者用藥前后或用藥者與非用藥者的細胞，提取RNA標記后雜交到點陣膜上，數(shù)碼成像后電腦分析結(jié)果，比較兩者基因表達圖譜的異同，確定藥物作用的機理、療效安全性、準確尋找出功能基因等方面的結(jié)果。
本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的目的是提供一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段，全面評價傳統(tǒng)中藥復(fù)方體系、創(chuàng)新中醫(yī)藥現(xiàn)代理論、重組中藥復(fù)方，產(chǎn)生中醫(yī)藥現(xiàn)代化、國際化的新標準，搶灘國際市場，還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺內(nèi)容簡述本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，能直觀準確的分析檢測和評價中藥復(fù)方對人體多靶點基因的表達，是人體基因組工程的基因組研究，其特征是應(yīng)用基因組技術(shù)平臺分離出代表人體內(nèi)約10萬個基因的DNA片斷，在制做人體基因組圖譜以前，基因組技術(shù)平臺首先對每個克隆逐個復(fù)制，擴增，提純；然后再用平臺高精密度機器手噴涂到尼龍膜上或雜交到芯片上形成點陣膜，點陣膜上的每個點就代表一個基因；利用點陣膜，基因組技術(shù)平臺用采桿檢測基因在被研究細胞中的表達情況，從被測細胞(組織)和對照(陽性或陰性對照)細胞中提取RNA(基因表達中介產(chǎn)物)，然后再通過反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA標記(可以是熒光標記或放射性同位素標記)，這些標記好的RNA就是分子探針；其具體步驟是(1)、RNA提取，中醫(yī)臨床治療時抽取患者血樣，或其它組織標本；(2)、RNA標記，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用熒光或放射性同位素標記制作成為分子探針；(3)、將分子探針雜交到點陣膜上，或基因芯片上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；(4)、與對照組細胞比較，通過被測細胞與對照組細胞比較的信號判定兩者基因圖譜表達的差別。
本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺經(jīng)對國內(nèi)外文獻檢索均未查到有關(guān)本發(fā)明文獻報道，屬國內(nèi)外首創(chuàng)。評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，是將傳統(tǒng)中醫(yī)藥辯證施治的經(jīng)驗理論轉(zhuǎn)化為現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)理論，對實現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化具有推進作用，用基因表達點陣膜研究中藥或復(fù)方，是對中醫(yī)藥方法學(xué)的創(chuàng)新，是在堅持中醫(yī)理論的前提下對中藥進行現(xiàn)代化分析探討，通過基因組技術(shù)平臺可對中藥復(fù)方劑的重組獲得最佳的劑量配比和標準劑量，是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段。采用基因組技術(shù)平臺可以全面評價傳統(tǒng)中藥復(fù)方體系、創(chuàng)新中醫(yī)藥現(xiàn)代理論、重組中藥復(fù)方，產(chǎn)生中醫(yī)藥現(xiàn)代化、國際化的新標準，搶灘國際市場，還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
實施例評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的工作路線為1、選擇公認有效的中藥復(fù)方，為患者的臨床用藥；2、采集患者用藥后的血樣，從血樣中提取RNA；3、標記RNA，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用放射性同位素標記制作成為分子探針；4、與點陣膜雜交，將分子探針雜交到點陣膜上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；5、結(jié)果分析，采用電腦軟件進行分析；6、尋找出功能基因，得出療效機理、作用靶點、及服藥后的安全性；7、將評價出的結(jié)果存入電腦信息庫；8、服務(wù)平臺，開展技術(shù)信息服務(wù)及成果應(yīng)用，用以研究中醫(yī)中藥的策略和方法。
權(quán)利要求
1.一種評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，能直觀準確的分析檢測和評價中藥復(fù)方對人體多靶點基因的表達，是人體基因組工程的基因組研究，其特征是應(yīng)用基因組技術(shù)平臺分離出代表人體內(nèi)約10萬個基因的DNA片斷，在制做人體基因組圖譜以前，基因組技術(shù)平臺首先對每個克隆逐個復(fù)制，擴增，提純；然后再用平臺高精密度機器手噴涂到尼龍膜上或雜交到芯片上形成點陣膜，點陣膜上的每個點就代表一個基因；利用點陣膜，基因組技術(shù)平臺用采桿檢測基因在被研究細胞中的表達情況，從被測細胞組織和對照細胞中提取RNA，然后再通過反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA標記，可以是熒光標記或放射性同位素標記，這些標記好的RNA就是分子探針；其具體步驟是(1)、RNA提取，中醫(yī)臨床治療時抽取患者血樣，或細胞組織標本；(2)、RNA標記，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用熒光或放射性同位素標記制作成為分子探針；(3)、將分子探針雜交到點陣膜上，或基因芯片上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；(4)、與對照組細胞比較，通過被測細胞與對照組細胞比較的信號判定兩者基因圖譜表達的差別。
全文摘要
本發(fā)明評價中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺,涉及一種采用基因表達點陣膜技術(shù)分析中藥復(fù)方對人體多靶點基因表達方式,是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段,其特征是:RNA提取;RNA標記;將分子探針雜交到點陣膜上,產(chǎn)生相應(yīng)信號;與對照組細胞比較,判定兩者基因圖譜表達的差別?？蓪χ兴帍?fù)方劑的重組獲得最佳的劑量配比和標準劑量,是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段,還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
文檔編號C12Q1/68GK1297057SQ0012326
公開日2001年5月30日 申請日期2000年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月17日
發(fā)明者張士振, 陳大宇, 常明, 韓健, 韓喜志, 劉桐華, 劉保延, 周杰 申請人:張士振