專利名稱：提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種水質(zhì)監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域的方法，具體是一種提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法。
背景技術(shù)：
隱孢子蟲(Cryptosporidium)和賈第鞭毛蟲(Giardia)是2種嚴(yán)重危害水質(zhì)安全的致病性原生動(dòng)物。2007年7月1日實(shí)施的《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB5749-2006)與之前的標(biāo)準(zhǔn)相比在微生物指標(biāo)部分增加了對賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲的檢測，其中明確規(guī)定隱孢子蟲、賈第鞭毛蟲的標(biāo)準(zhǔn)限值，即〈1個(gè)/10 L。
經(jīng)過對現(xiàn)有技術(shù)的檢索發(fā)現(xiàn)，目前國際上最為常用的水中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲標(biāo)準(zhǔn)檢測方法是EPA1623方法，用EPA1623方法來檢測兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)主要有三個(gè)步驟，分別為過濾濃縮、免疫磁性分離(頂S)和免疫熒光(IFA)鏡檢。該方法存在的主要問題是測試成本高、回收率低。通常測試一個(gè)水樣的成本為2025元左右，其中采樣過濾階段使用的一次性進(jìn)口濾囊的成本就高達(dá)1300元，占檢測成本的三分之二。而使用該方法所能達(dá)到的兩蟲回收率通常只有20%左右，為EPA1623中規(guī)定的最低限值。通過對EPA1623方法的3個(gè)主要步驟的分步研究發(fā)現(xiàn)，兩蟲測試過程中，回收率主要損失在過濾濃縮階段，而免疫磁分離和免疫熒光檢測這兩個(gè)步驟相對損失則非常小。按EPA1623方法，水樣經(jīng)濾囊過濾后加入洗脫液，采用震蕩洗脫的辦法將濾膜上的兩蟲洗脫下來。進(jìn)一步的試驗(yàn)證實(shí)，這種機(jī)械性的震蕩洗脫難以徹底將兩蟲從濾膜表面洗脫下來，從而導(dǎo)致兩蟲回收率損失較大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，提供一種提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，通過對過濾濃縮階段某些操作步驟進(jìn)行改進(jìn)，以達(dá)到降低隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲測試成本和提高回收率的目的。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，本發(fā)明包括以下步驟
第一步、將濾囊的兩端分別密封連接橡皮管，并將一根橡皮管放入待測水樣中，另一根橡皮管與真空泵密封連接，啟動(dòng)真空泵開始采樣過濾。
所述的采樣過濾是指用計(jì)量泵將真空泵的流速調(diào)整至2L/min，采樣時(shí)間為20min;第二步、用密封蓋密封濾囊的出水口，在濾囊的進(jìn)水口中倒入150mL洗脫液，然后再次 密封濾囊的進(jìn)水口。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1.5%消泡劑，余量為純水。
所述的消泡劑為有機(jī)硅氧烷類消泡劑、聚醚類消泡劑或酰胺類消泡劑中的一種。
第三步、將兩端密封的濾囊放入盛有4(TC溫水的超聲裝置中，設(shè)置超聲頻率為 40kHz-60kHz，超聲震蕩時(shí)間為15分鐘。
第四步、將濾囊取出并打開濾囊的進(jìn)水口并倒入離心管中開始離心處理，待離心處理結(jié) 束后依次采用免疫磁性分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
本發(fā)明適用于所有的水源水和出廠水的水樣檢測，采用國產(chǎn)率囊+超聲洗脫的方式替代 EPA推薦使用的Envirochek囊式濾器和濾囊振蕩器，可使測試一個(gè)水樣的成本降低為865元， 較EPA1623方法下降1160元左右。
EPA1623規(guī)定使用的濾囊振蕩器只能達(dá)到上下振動(dòng)的效果，因此需要每5分鐘調(diào)節(jié)一次濾 囊在振蕩器上的方向，操作復(fù)雜且洗脫效果不佳。采用超聲洗脫可通過空化效應(yīng)產(chǎn)生的氣泡 不斷作用在濾膜表面，使截留在濾膜表面的兩蟲得到徹底的洗脫。兩種洗脫方法對比發(fā)現(xiàn)超 聲洗脫效果更佳，具體表現(xiàn)為可使兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)的回收率可提高10%以上 。通過對超聲頻率、時(shí)間和水溫的控制，可以得到兩蟲洗脫效果的最佳條件。


圖1為實(shí)施例測試環(huán)境示意圖。
圖2為實(shí)施例收率示意圖。
圖3為實(shí)施例6效果示意圖。
圖4為實(shí)施例7效果示意圖。
圖5為實(shí)施例8效果示意圖。
具體實(shí)施例方式
下面對本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施， 給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。 實(shí)施例l
取1份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，水樣中隱孢子蟲和 賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的濾囊的一端放入水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至 2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不 外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋 蓋好出水口。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平 放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為20KHZ，時(shí)間為15分鐘， 溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液 至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng) 計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1. 5%有機(jī)硅氧烷類消泡劑，余量為純水。
如圖2所示，本實(shí)施例中使用20KHZ的超聲頻率，在水溫為4(TC的條件下超聲15分鐘，兩 蟲的回收率分別為隱孢子蟲的回收率為21%，賈第鞭毛蟲的回收率為20%。
實(shí)施例2
取1份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，水樣中隱孢子蟲和 賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的濾囊的一端放入水樣中，另一端連接 真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至 2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不 外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋 蓋好出水口。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平 放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為40KHZ，時(shí)間為15分鐘， 溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液 至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng) 計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1. 5%有機(jī)硅氧烷類消泡劑，余量為純水。
如圖2所示，本實(shí)施例中使用40KHZ的超聲頻率，在水溫為4(TC的條件下超聲15分鐘，兩蟲的回收率分別為隱孢子蟲的回收率為33%，賈第鞭毛蟲的回收率為30%。實(shí)施例3
取1份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，水樣中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的濾囊的一端放入水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋蓋好出水口。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為60KHZ，時(shí)間為15分鐘，溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2%乙二胺四乙酸、1. 5%聚醚類消泡劑或酰，余量為純水。
如圖2所示，本實(shí)施例中使用60KHZ的超聲頻率，在水溫為4(TC的條件下超聲15分鐘，兩蟲的回收率分別為隱孢子蟲的回收率為35%，賈第鞭毛蟲的回收率為33%。
實(shí)施例4
取1份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，水樣中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的濾囊的一端放入水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋蓋好出水口。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為80KHZ，時(shí)間為15分鐘，溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1.5%酰胺類消泡劑，余量為純水。
如圖2所示，本實(shí)施例中使用20KHZ的超聲頻率，在水溫為4(TC的條件下超聲15分鐘，兩 蟲的回收率分別為隱孢子蟲的回收率為28%，賈第鞭毛蟲的回收率為21%。
實(shí)施例5
取1份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，水樣中隱孢子蟲和 賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的濾囊的一端放入水樣中，另一端連接 真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至 2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不 外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋 蓋好出水口。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平 放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為100KHZ，時(shí)間為15分鐘， 溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液 至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng) 計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1.5%酰胺類消泡劑，余量為純水。
如圖2所示，本實(shí)施例中使用100KHZ的超聲頻率，在水溫為4(TC的條件下超聲15分鐘， 兩蟲的回收率分別為隱孢子蟲的回收率為20%，賈第鞭毛蟲的回收率為17%。
實(shí)施例6
取2份40L去離子水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，每份水樣中隱孢子 蟲和賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的進(jìn)口濾囊和濾囊的一端分別放入 水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣 過濾，調(diào)整流速至2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端 的橡皮管，確保不外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自 然流干，用密封蓋蓋好出水口。取下進(jìn)口濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把進(jìn)口濾囊固定在濾囊振蕩器上，使進(jìn)口濾囊保持水平，啟動(dòng)振蕩器，設(shè)定速度在600rpm，時(shí)間為5min。之后旋轉(zhuǎn)濾囊120度，重復(fù)兩次。完畢，將濾囊中的溶液再全部倒進(jìn)離心管內(nèi)，開始離心。離心、免疫磁分離和熒光免疫鏡檢。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為60KHZ，時(shí)間為15分鐘，溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2%乙二胺四乙酸、1. 5%有機(jī)硅氧烷類消泡劑，余量為純水。
對于加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣的去離子水，分別使用EPA1623方法和使用濾囊+超聲波的替代方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；如圖3所示，使用替代方法能夠使隱孢子蟲的回收率提高了12%，賈第鞭毛蟲的回收率了10%。 一次性Envirochek囊式濾器的價(jià)格為1300元，而一次性濾囊的價(jià)格為140元，其它費(fèi)用基本相同，故一次性測試成本降低1160元。
實(shí)施例7
從水廠中采集2份10L黃浦江源水和長江源水并分別加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣，每份水樣中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲各100個(gè)；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的進(jìn)口濾囊和濾囊的一端分別放入水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口；松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋蓋好出水口。
取下進(jìn)口濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊固定在濾囊振蕩器上，使濾囊保持水平，啟動(dòng)振蕩器，設(shè)定速度在600rpm，時(shí)間為5min。之后旋轉(zhuǎn)濾囊120度，重復(fù)兩次。完畢，將濾囊中的溶液再全部倒進(jìn)離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為60KHZ，時(shí)間為15分鐘，溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng) 計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2% 乙二胺四乙酸、1. 5%有機(jī)硅氧烷類消泡劑，余量為純水。
對于加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣的水源水，分別使用EPA1623方法和使用 濾囊+超聲波的替代方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；如圖4所示，使用替代方法能夠使隱孢子蟲的回收率提 高了10%，賈第鞭毛蟲的回收率了10%。 一次性Envirochek囊式濾器的價(jià)格為1300元，而一次 性濾囊的價(jià)格為140元，其它費(fèi)用基本相同，故一次性測試成本降低1160元。
實(shí)施例8
從水廠中采集2份10L黃浦江源水和長江源水；如圖1所示，將兩端連接橡皮管的進(jìn)口濾 囊和濾囊的一端分別放入水樣中，另一端連接真空泵，確保進(jìn)水口與出水口末端連接正確之 后，啟動(dòng)真空泵進(jìn)行采樣過濾，調(diào)整流速至2L/min，使水樣通過濾囊流出，待水樣全部經(jīng)過 濾囊，取下濾囊進(jìn)水口端的橡皮管，確保不外濺出濾囊內(nèi)的水，用密封蓋蓋好濾囊進(jìn)水口； 松開濾囊出口，讓水樣自然流干，用密封蓋蓋好出水口。
取下進(jìn)口濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把進(jìn)口 濾囊固定在濾囊振蕩器上，使濾囊保持水平，啟動(dòng)振蕩器，設(shè)定速度在600rpm，時(shí)間為5min 。之后旋轉(zhuǎn)濾囊120度，重復(fù)兩次。完畢，將濾囊中的溶液再全部倒進(jìn)離心管內(nèi)，開始離心 處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
取下濾囊進(jìn)水口的密封蓋，倒入150ml事先配置好的洗脫液，蓋好密封蓋，把濾囊水平 放入超聲波裝置中，裝置中加水并使其充分淹沒濾囊，設(shè)置頻率為60KHZ，時(shí)間為15分鐘， 溫度為4(TC，開啟超聲波裝置。超聲波停止后取出濾囊，打開進(jìn)水口的密封蓋，倒出洗脫液 至離心管內(nèi)，開始離心處理，最后采用免疫磁分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng) 計(jì)回收率。
所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、 0.2%乙二胺四乙酸、1. 5%有機(jī)硅氧烷類消泡劑，余量為純水。
對于不加入兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)標(biāo)樣的水源水，分別使用EPA1623方法和使 用濾囊+超聲波的替代方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；如圖5所示，兩種方法都能檢測出兩蟲(隱孢子蟲和 賈第鞭毛蟲)的存在，由于水源水中兩蟲(隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲)密度非常低，兩者數(shù)量 差異不大。 一次性Envirochek囊式濾器的價(jià)格為1300元，而一次性濾囊的價(jià)格為140元，其它費(fèi)用基本相同，故一次性測試成本降低1160元。
權(quán)利要求
1.一種提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，其特征在于，包括以下步驟第一步、將濾囊的兩端分別密封連接橡皮管，并將一根橡皮管放入待測水樣中，另一根橡皮管與真空泵密封連接，啟動(dòng)真空泵開始采樣過濾；第二步、用密封蓋密封濾囊的出水口，在濾囊的進(jìn)水口中倒入150mL洗脫液，然后再次密封濾囊的進(jìn)水口；第三步、將兩端密封的濾囊放入盛有40℃溫水的超聲裝置中，設(shè)置超聲頻率為40kHz-60kHz，超聲震蕩時(shí)間為15分鐘；第四步、將濾囊取出并打開濾囊的進(jìn)水口并倒入離心管中開始離心處理，待離心處理結(jié)束后依次采用免疫磁性分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。
2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，其特征是，所述的采樣過濾是指用計(jì)量泵將真空泵的流速調(diào)整至2L/min，采樣時(shí)間為20min。
3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，其特征是，所述的洗脫液的組分及質(zhì)量百分比含量為1%表面活性劑、1%三羥甲基氨基甲烷、0.2%乙二胺四乙酸、1.5%消泡劑，余量為純水。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，其特征是，所述的消泡劑為有機(jī)硅氧烷類消泡劑、聚醚類消泡劑或酰胺類消泡劑中的一種。
全文摘要
一種水環(huán)境水質(zhì)監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域的提高隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲檢測回收率的過濾濃縮方法，包括采樣過濾；加入洗脫液；超聲震蕩和離心處理，待離心處理結(jié)束后依次采用免疫磁性分離法進(jìn)行染色制片后用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)回收率。本發(fā)明通過對過濾濃縮階段某些操作步驟進(jìn)行改進(jìn)，以達(dá)到降低隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲測試成本和提高回收率的目的。
文檔編號(hào)C12Q1/24GK101665820SQ200910306998
公開日2010年3月10日 申請日期2009年9月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月15日
發(fā)明者何義亮, 云 周, 宋宏臣, 穎 戎, 王海亮, 園 袁 申請人:上海交通大學(xué);上海浦東威立雅自來水有限公司;上海城市水資源開發(fā)利用國家工程中心有限公司