專利名稱：一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗疲勞作用的一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料及其制備方法， 屬于微生物工程技術(shù)領(lǐng)域和保健品技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
食用功能真菌是指對人體有保健作用的一類真菌，其藥用部位有子實(shí)體、菌核菌絲體和發(fā)酵液等。HiGanodenm A/ci^/ )是傳統(tǒng)中藥食用功能真菌，能夠增強(qiáng)體質(zhì)， 抵御疾病。靈芝中含有的靈芝多糖和靈芝酸類物質(zhì)能夠抑制腫瘤、抗病毒、保肝和抗衰老等。冬蟲夏草(Cordyc印s sinesis)，別名蟲草，為麥角菌科蟲草屬的食用功能真菌。主產(chǎn)于青海、西藏、四川、云南、貴州等海拔4000m — 5000m的山中、草甸土中。它是由冬蟲
(Cordyceps sinensis sail)(Hepfalus atmorlcanus
oberthur)幼蟲上的子座及幼蟲尸體產(chǎn)生的復(fù)合體。為較常用的名貴中藥材之一。豬苓 [Polyporus umbellatus (Pets. )Fr.]屬真菌門、擔(dān)子菌綱、多孔菌目、多孔菌科。豬苓作為我國傳統(tǒng)的真菌類藥材，具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力等多種醫(yī)療功效，在醫(yī)藥行業(yè)易用前景很廣闊。由于目前中藥無序開發(fā)，資源枯竭，生物多樣性銳減，多數(shù)食用功能真菌的天然資源稀缺；人工栽培由于生長期長，受外界環(huán)境因素影響大，難以滿足社會需求。而液體發(fā)酵技術(shù)簡易可行，在發(fā)酵過程中除菌絲或孢子大量增殖外，還會產(chǎn)生多糖、多肽、萜類化合物、 酶、核酸、氨基酸、維生素、植物激素等多種具有生理活性的物質(zhì)，具有抗癌、抗衰老、等功效。運(yùn)動性疲勞是運(yùn)動本身引起的機(jī)體工作能力暫時降低，經(jīng)過適當(dāng)時間休息和調(diào)整可以恢復(fù)的生理現(xiàn)象，是一個極其復(fù)雜的身體變化綜合反應(yīng)過程。它是是一種生理現(xiàn)象，也是一種人體保護(hù)性機(jī)制。但是，如果人經(jīng)常處于疲勞狀態(tài)，前一次運(yùn)動產(chǎn)生的疲勞還沒來得及消除，而新的疲勞又產(chǎn)生了，疲勞就可能積累，久之就會產(chǎn)生過度疲勞，影響人類的身體健康和運(yùn)動能力。大豆肽是一種生物活性肽，它是大豆蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白酶水解而成的一種深加工產(chǎn)品。其具有易消化吸收、能迅速供給機(jī)體能量、低豆腥味等特性，特別是具有降低血清膽固醇、降血壓和促進(jìn)脂肪代謝、抗疲勞、抗氧化等獨(dú)特的生理功能。體育運(yùn)動中消耗熱量的 4%-10%是由蛋白質(zhì)來提供的，由于體內(nèi)不能合成必需氨基酸，當(dāng)外界補(bǔ)充蛋白及氨基酸不足時，會造成肌肉蛋白的負(fù)平衡使肌肉疲勞。大豆肽不但具有人體所需的氨基酸，而且相對其它蛋白更易吸收，能迅速提供能量，加速肌肉疲勞恢復(fù)。雖然已經(jīng)有很多關(guān)于大豆肽生產(chǎn)和食用真菌產(chǎn)品及生產(chǎn)工藝的專利，但同時含有食用真菌多糖和大豆肽的功能產(chǎn)品或飲料的專利未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是通本發(fā)明方法提供一種具有抗疲勞作用的同時含大豆肽和食用真菌多糖飲料。
本發(fā)明的另一個目的是提供具有抗疲勞作用的一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，實(shí)現(xiàn)簡易、穩(wěn)定、高效地獲得高質(zhì)量的同時含大豆肽和食用真菌多糖飲料。本發(fā)明所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的技術(shù)方案是
一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料，原料包括大豆粉，和/或大豆粕粉，和/或大豆分離蛋白，還有食用真菌；是通過在液體發(fā)酵過程中用食用真菌在生長過程中產(chǎn)生的蛋白酶水解大豆蛋白后，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液，最后用發(fā)酵液直接獲得、 或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料；所述食用真菌選自于靈 \Ganoderma /wcii/腫],禾口 / 或冬蟲夏草[Cordyceps sinensis sail]，禾口 / 或豬等 [Polyporus umbellatus(Pets. )Fr·]。在上述含大豆肽和食用真菌多糖飲料的技術(shù)方案基礎(chǔ)上具有附加特征的進(jìn)一步技術(shù)方案是
所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，該飲料中按重量份計真菌多糖含量為0. 2%-2%, 大豆肽含量為0. 1%-4. 6%。所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，該飲料中按重量份計真菌多糖含量為 0. 2%，大豆肽含量為0. 1%。所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，該飲料中按重量份計真菌多糖含量為1%， 大豆肽含量為2. 4%。所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，該飲料中按重量份計真菌多糖含量為2%， 大豆肽含量為4. 6%。本發(fā)明含大豆肽和食用真菌多糖飲料優(yōu)點(diǎn)是1、材料來源不受外界環(huán)境影響，產(chǎn)品能很好地滿足社會需求；2、用液體發(fā)酵技術(shù)，在發(fā)酵過程中除菌絲或孢子大量增殖外， 產(chǎn)生多糖、多肽、萜類化合物、酶、核酸、氨基酸、維生素、植物激素等多種具有生理活性的物質(zhì)，具有抗癌、抗衰老、等功效；3、用本發(fā)明制備方法得到同時含有食用真菌多糖和大豆肽， 該大豆肽不但具有人體所需的氨基酸，而且相對其它蛋白更易吸收，能迅速提供能量，加速肌肉疲勞恢復(fù)。本發(fā)明所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，包括下述步驟先將食用真菌菌種接種到斜面培養(yǎng)基上活化，然后對活化得到的菌種其中一部分在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得真菌種子培養(yǎng)物，再對真菌種子培養(yǎng)物經(jīng)過發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行深層液體發(fā)酵， 然后對發(fā)酵后得到的發(fā)酵培養(yǎng)物進(jìn)行包括分離過濾處理，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液；最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。本發(fā)明所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法之二，包括下述步驟
A、培養(yǎng)基的制備制備PDA斜面培養(yǎng)基，液體種子培養(yǎng)基，及發(fā)酵培養(yǎng)基；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種，或兩種，或三種分別接種到PDA斜面培養(yǎng)基上活化，然后取一小塊活化菌種在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)， 獲得真菌種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將上述獲得的真菌種子培養(yǎng)物中的一種，或兩種，或三種分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行深層液體發(fā)酵；獲得發(fā)酵培養(yǎng)物；
D、分離過濾將發(fā)酵好的發(fā)酵培養(yǎng)物分別進(jìn)行固液分離，分別得到真菌的菌絲體和發(fā)酵液；
Ε、干燥、粉碎、滅菌將過濾得到的真菌的菌絲體干燥、粉碎、滅菌，最后裝瓶； F、消毒，配制成產(chǎn)品對過濾后的三種真菌發(fā)酵液分別進(jìn)行消毒；最后用發(fā)酵液直接獲得、 或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。在上述含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法技術(shù)方案基礎(chǔ)上具有附加特征的進(jìn)一步技術(shù)方案是
所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，所述步驟中 Α、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備，成分包括PDA固體馬鈴薯提取液，蔗糖， KH2PO4, MgSO4 · 7H20，蛋白胨，瓊脂；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10-20g，KH2PO4 1-3 g， MgSO4 ·7Η21-3β，蛋白胨 l-5g ；pH6 — 8 ；滅菌條件為溫度 118 — 125°C，時間 26 — 32min ； 發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20-100g，大豆粉、或大豆粕粉、或大豆分離蛋白 20-100g, KaH2PO4 1-1. 5g，MgSO4 ·7Η20 1-1. Sg5VB1 微量，其余為蒸餾水；ρΗ 6 - 8 ；滅菌條件為溫度110 - 120°C，時間18 - 22min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種、或兩種、或三種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化；活化好的菌種取1_2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30°C,150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將真菌種子培養(yǎng)物分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 300C 條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Ph值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)；
D、分離過濾分別通過纖維素濾膜分離過濾；
E、干燥、粉碎、滅菌粉碎后過75— 85目；
F、消毒，配制成產(chǎn)品按巴氏消毒法對過濾后的真菌發(fā)酵液進(jìn)行消毒。所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，所述步驟中
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖 20g，KH2PO4 3g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，蛋白胨 lg，瓊脂 15g ；pH7 ；滅菌條件均為:121°C，30min ； 液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖15g，KH2P042g, MgSO4 · 7H202g，蛋白胨 3g ；ρΗ 7. 0 ；滅菌條件均為:121°C，30min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖100g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 100g, KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，VB^Omg，其余為蒸餾水；ρΗ 6 — 8 ；滅菌條件均為 115°C,20min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天活化；活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中， 在25 — 30°C，150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物。10、根據(jù)權(quán)利要求8所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，其特征在于，所述步驟中
A、培養(yǎng)基的制備PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10g，KH2PO4Ig, MgSO4 · 7H201g，蛋白胨 Ig ；pH 6.0 ；滅菌條件均為118°C，26min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 20g，KaH2PO4 lg，MgSO4 · 7H20 lg，VB^Smg，其余為蒸餾水；pH 6 ；滅菌條件均為110°C， 18min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化。活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30°C,150r/min條件下培養(yǎng) 3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Ph值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，所述步驟中
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖20g，KH2P043g, MgSO4 · 7H203g，蛋白胨 5g ；pH 8. 0 ；滅菌條件均為125°C，32min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖50g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 50g，KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7Η201· 5g，VB1SSmg,其余為蒸餾水；pH 8 ；滅菌條件均為120°C， 22min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種和冬蟲夏草菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天活化?；罨玫木N取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30 150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子和冬蟲夏草菌種培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20 — 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制pH值在 6.0 - 8.0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。本發(fā)明含大豆肽和食用真菌多糖飲料制備方法的優(yōu)點(diǎn)是方法簡易、穩(wěn)定、高效， 所制得的是高質(zhì)量的、且是同時含大豆肽和食用真菌多糖飲料。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的含大豆肽和食用真菌多糖飲料產(chǎn)品實(shí)施例如下
實(shí)施例1 是基本實(shí)施例，一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其原料包括大豆粉，和/ 或大豆粕粉，和/或大豆分離蛋白，還有食用真菌；是通過在液體發(fā)酵過程中用食用真菌在生長過程中產(chǎn)生的蛋白酶水解大豆蛋白后，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液，最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料；所述食用真菌選自于靈芝hcit/腫],禾口/或冬蟲夏草 [Cordyceps sinensis sail] ，和/或豬苓[Polyporus umbellatus (Pets. )Fr.]；所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料中按重量份計，真菌多糖含量為0. 2%-2%，大豆肽含量為0. 1%-4. 6%。實(shí)施例2 與上述實(shí)施例1不同的是所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料中按重量份計，真菌多糖含量為0. 2%，大豆肽含量為0. 1%。實(shí)施例3 與上述實(shí)施例1不同的是所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料中按重量份計，真菌多糖含量為1%，大豆肽含量為2. 4%。

實(shí)施例4 與上述實(shí)施例1不同的是所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料中按重量份計，真菌多糖含量為2%，大豆肽含量為4. 6%。本發(fā)明的含大豆肽和食用真菌多糖飲料制備方法實(shí)施例如下
實(shí)施例5 本發(fā)明的一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，其基本方法步驟為先將食用真菌菌種接種到斜面培養(yǎng)基上活化，然后對活化得到的菌種其中一部分在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得真菌種子培養(yǎng)物，再對真菌種子培養(yǎng)物經(jīng)過發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行深層液體發(fā)酵，然后對發(fā)酵后得到的發(fā)酵培養(yǎng)物進(jìn)行包括分離過濾處理，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液；最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。實(shí)施例6 本發(fā)明的一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，其進(jìn)一步的方法步驟為
A、培養(yǎng)基的制備制備PDA斜面培養(yǎng)基，液體種子培養(yǎng)基，及發(fā)酵培養(yǎng)基；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種，或兩種，或三種分別接種到PDA斜面培養(yǎng)基上活化，然后取一小塊活化菌種在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)， 獲得真菌種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將上述獲得的真菌種子培養(yǎng)物中的一種，或兩種，或三種分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行深層液體發(fā)酵；獲得發(fā)酵培養(yǎng)物；
D、分離過濾將發(fā)酵好的發(fā)酵培養(yǎng)物分別進(jìn)行固液分離，分別得到真菌的菌絲體和發(fā)酵液；
E、干燥、粉碎、滅菌將過濾得到的真菌的菌絲體干燥、粉碎、滅菌，最后裝瓶；
F、消毒，配制成產(chǎn)品對過濾后的三種真菌發(fā)酵液分別進(jìn)行消毒；最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。實(shí)施例7 與上述實(shí)施例6不同的是，本實(shí)施例具體步驟和參數(shù)為
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備，成分包括PDA固體馬鈴薯提取液，蔗糖， KH2PO4，MgSO4 · 7H20，蛋白胨，瓊脂；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10-20g，KH2PO4 1-3 g， MgSO4 ·7Η21-3β，蛋白胨 l-5g ；pH6 — 8 ；滅菌條件為溫度 118 — 125°C，時間 26 — 32min ； 發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20-100g，大豆粉、或大豆粕粉、或大豆分離蛋白 20-100g, KaH2PO4 1-1. 5g，MgSO4 ·7Η20 1-1. Sg5VB1 微量，其余為蒸餾水；ρΗ 6 - 8 ；滅菌條件為溫度110 - 120°C，時間18 - 22min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種、或兩種、或三種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化；活化好的菌種取1_2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30°C,150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將真菌種子培養(yǎng)物分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 300C 條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Ph值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)；
D、分離過濾分別通過纖維素濾膜分離過濾；
E、干燥、粉碎、滅菌粉碎后過75— 85目；
F、消毒，配制成產(chǎn)品按巴氏消毒法對過濾后的真菌發(fā)酵液進(jìn)行消毒。
實(shí)施例8 與上述實(shí)施例7不同的是所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其中含有三種食用真菌多糖，制備方法步驟不同點(diǎn)在于
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖 20g，KH2PO4 3g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，蛋白胨 lg，瓊脂 15g ；pH7 ；滅菌條件均為:121°C，30min ； 液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖15g，KH2P042g, MgSO4 · 7H202g，蛋白胨 3g ；pH 7. 0 ；滅菌條件均為:121°C，30min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖100g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 100g, KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，VB^Omg，其余為蒸餾水；pH 6 — 8 ；滅菌條件均為 115°C,20min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天活化；活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中， 在25 — 300C，150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物。實(shí)施例9 與上述實(shí)施例7不同的是所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其中含有一種食用真菌多糖，制備方法步驟不同點(diǎn)在于
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10g，KH2PO4Ig, MgSO4 · 7H201g，蛋白胨 Ig ；pH 6.0 ；滅菌條件均為118°C，26min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 20g, KaH2PO4 lg，MgSO4 · 7H20 lg，VB^Smg，其余為蒸餾水；pH 6 ；滅菌條件均為110°C， 18min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化。活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30°C,150r/min條件下培養(yǎng) 3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Wi值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。實(shí)施例10 與上述實(shí)施例7不同的是所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其中含有兩種食用真菌多糖，制備方法步驟不同點(diǎn)在于
A、培養(yǎng)基的制備
PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；
液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖20g，KH2P043g, MgSO4 · 7H203g，蛋白胨 5g ；pH 8. 0 ；滅菌條件均為:125°C,32min ；
發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖50g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白50g，KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7Η201· 5g，VB1SSmg,其余為蒸餾水；pH 8 ；滅菌條件均為120°C， 22min ；
B、菌種的活化將靈芝菌種和冬蟲夏草菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天活化?；罨玫木N取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30 150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；
C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子和冬蟲夏草菌種培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20 — 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制pH值在 6.0 - 8.0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。對本發(fā)明顯著技術(shù)效果進(jìn)一步說明如下
采用運(yùn)動耐力實(shí)驗(負(fù)重游泳和爬桿)和血乳酸(Blood Lactic Acid)、血清尿素氮 (Blood Urea Nitrogen, BUN)及肌 / 肝糖原(Muscle/Liver Glycogen)等三項生化檢測項目來作為評判某種物質(zhì)抗疲勞效果的指標(biāo)。以上指標(biāo)若有兩項符合試驗預(yù)期即可認(rèn)為該物質(zhì)具有抗疲勞功能?？蛊谠囼瀸?0只小白鼠進(jìn)行隨機(jī)分組，每組10只，每組平均體重控制在34g 左右，四組分別為對照組，靈芝組，豬苓組，蟲草組。對照組每天飼喂一定量的生理鹽水，靈芝組每天飼喂相同量的靈芝發(fā)酵飲料，豬苓組每天飼喂相同量的豬苓發(fā)酵飲料，蟲草組每天飼喂相同量的冬蟲夏草發(fā)酵飲料。每隔一天對每組小鼠進(jìn)行體重稱量，統(tǒng)一飼喂通用飼料，每隔一天更換墊料保持小鼠生長環(huán)境的一致，以消除偶然誤差。連續(xù)飼喂一個月，對試驗小鼠尿素氮含量、肝糖原含量、兩項指標(biāo)和運(yùn)動耐力實(shí)驗進(jìn)行考查。試驗結(jié)果靈芝、蟲草、豬苓發(fā)酵組負(fù)重游泳時間(越長越好)分別比對照組提高 294%, 45. 7%，62. 5% ；肝糖元含量分別比對照組高42%，35. 2%，31. 9% ；尿素氮(越低越好)含量分別比對照組低15%，33. 7%, 7. 9%。說明靈芝、蟲草、豬苓發(fā)酵的飲料具有明顯的抗疲勞效
本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍不限于上述實(shí)施例。
權(quán)利要求
1.一種含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其特征在于，原料包括大豆粉，和/或大豆粕粉，和/或大豆分離蛋白，還有食用真菌；是通過在液體發(fā)酵過程中用食用真菌在生長過程中產(chǎn)生的蛋白酶水解大豆蛋白后，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液，最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料；所述食用真菌選自于靈芝 \Ganoderma lucidum],禾口 / 或冬蟲夏草[Cordyceps sinensis sail],禾口 / 或豬等[Polyporus umbel latus (Pets. )Fr·]。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其特征在于，飲料中按重量份計真菌多糖含量為0. 2%- ，大豆肽含量為0. 1%-4. 6%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其特征在于，飲料中按重量份計真菌多糖含量為0. 2%，大豆肽含量為0. 1%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其特征在于，飲料中按重量份計真菌多糖含量為1%，大豆肽含量為2. 4%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料，其特征在于，飲料中按重量份計真菌多糖含量為2%，大豆肽含量為4. 6%。
6.一種如權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備方法，其特征在于，包括下述步驟先將食用真菌菌種接種到斜面培養(yǎng)基上活化，然后對活化得到的菌種其中一部分在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得真菌種子培養(yǎng)物，再對真菌種子培養(yǎng)物經(jīng)過發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行深層液體發(fā)酵，然后對發(fā)酵后得到的發(fā)酵培養(yǎng)物進(jìn)行包括分離過濾處理，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液；最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。
7.—種如權(quán)利要求1所述含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備制備方法，其特征在于，包括下述步驟A、培養(yǎng)基的制備制備PDA斜面培養(yǎng)基，液體種子培養(yǎng)基，及發(fā)酵培養(yǎng)基；B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種，或兩種，或三種分別接種到PDA斜面培養(yǎng)基上活化，然后取一小塊活化菌種在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)， 獲得真菌種子培養(yǎng)物；C、發(fā)酵培養(yǎng)將上述獲得的真菌種子培養(yǎng)物中的一種，或兩種，或三種分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行深層液體發(fā)酵；獲得發(fā)酵培養(yǎng)物；D、分離過濾將發(fā)酵好的發(fā)酵培養(yǎng)物分別進(jìn)行固液分離，分別得到真菌的菌絲體和發(fā)酵液；E、干燥、粉碎、滅菌將過濾得到的真菌的菌絲體干燥、粉碎、滅菌，最后裝瓶；F、消毒，配制成產(chǎn)品對過濾后的三種真菌發(fā)酵液分別進(jìn)行消毒；最后用發(fā)酵液直接獲得、或以能飲用的液體稀釋、配制成含大豆肽和食用真菌多糖飲料。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備制備方法，其特征在于，所述步驟中A、培養(yǎng)基的制備PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備，成分包括PDA固體馬鈴薯提取液，蔗糖， KH2PO4，MgSO4 · 7H20，蛋白胨，瓊脂；液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10-20g，KH2PO4 1-3 g，MgSO4 ·7Η21-3β，蛋白胨 l-5g ；pH6 — 8 ；滅菌條件為溫度 118 — 125°C，時間 26 — 32min ；發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20-100g，大豆粉、或大豆粕粉、或大豆分離蛋白 20-100g, KaH2PO4 1-1. 5g，MgSO4 ·7Η20 1-1. Sg5VB1 微量，其余為蒸餾水；ρΗ 6 - 8 ；滅菌條件為溫度110 - 120°C，時間18 - 22min ；B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種中的一種、或兩種、或三種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化；活化好的菌種取1_2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 - 30°C,150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；C、發(fā)酵培養(yǎng)將真菌種子培養(yǎng)物分別接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 300C 條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Ph值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 4 0%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)；D、分離過濾分別通過纖維素濾膜分離過濾；E、干燥、粉碎、滅菌粉碎后過75— 85目；F、消毒，配制成產(chǎn)品按巴氏消毒法對過濾后的真菌發(fā)酵液進(jìn)行消毒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備制備方法，其特征在于，所述步驟中A、培養(yǎng)基的制備PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖 20g，KH2PO4 3g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，蛋白胨 lg，瓊脂 15g ；pH7 ；滅菌條件均為:121°C，30min ；液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖15g，KH2P042g, MgSO4 · 7H202g，蛋白胨 3g ；ρΗ 7. 0 ；滅菌條件均為:121°C，30min ；發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖100g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 100g, KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7H20 1. 5g，VB^Omg，其余為蒸餾水；ρΗ 6 — 8 ；滅菌條件均為 115°C,20min ；B、菌種的活化將靈芝菌種、冬蟲夏草菌種、豬苓菌種三種菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25 - 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天活化；活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中， 在25 — 300C，150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備制備方法，其特征在于，所述步驟中A、培養(yǎng)基的制備PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖10g，KH2PO4Ig, MgSO4 · 7H201g，蛋白胨 Ig ；ρΗ 6.0 ；滅菌條件均為118°C，26min ；發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖20g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 20g，KaH2PO4 lg，MgSO4 · 7H20 lg，VB^Smg，其余為蒸餾水；ρΗ 6 ；滅菌條件均為110°C， 18min ；B、菌種的活化將靈芝菌種在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化，活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 — 30°C，150r/min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20- 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制Wi值在6. 0 — 8. 0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的含大豆肽和食用真菌多糖飲料的制備制備方法，其特征在于，所述步驟中A、培養(yǎng)基的制備PDA斜面培養(yǎng)基按常規(guī)組分和條件制備；液體種子培養(yǎng)基每1升PDA固體馬鈴薯提取液中加入蔗糖20g，KH2P043g, MgSO4 · 7H203g，蛋白胨 5g ；pH 8. 0 ；滅菌條件均為:125°C,32min ；發(fā)酵培養(yǎng)基每1升培養(yǎng)基中含有葡萄糖50g，大豆粉或大豆粕粉或大豆分離蛋白 50g，KaH2PO4 1. 5g，MgSO4 · 7Η201· 5g，VB1SSmg,其余為蒸餾水；pH 8 ；滅菌條件均為120°C， 22min ；B、菌種的活化將靈芝菌種和冬蟲夏草菌種分別在PDA斜面培養(yǎng)基上在25- 30°C條件下培養(yǎng)3 — 4天活化，活化好的菌種取1-2小塊到液體種子培養(yǎng)基中，在25 — 30°C，150r/ min條件下培養(yǎng)3 — 4天，獲得種子培養(yǎng)物；C、發(fā)酵培養(yǎng)將靈芝菌種子和冬蟲夏草菌種培養(yǎng)物接種于經(jīng)滅菌處理的發(fā)酵培養(yǎng)基上，在20 — 30°C條件下培養(yǎng)3 - 4天進(jìn)行深層液體發(fā)酵在發(fā)酵過程中，控制pH值在 6.0 - 8.0，溶氧控制在20% — 40%，發(fā)酵結(jié)束時菌絲生長達(dá)到飽和狀態(tài)。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抗疲勞作用的含大豆肽和食用真菌多糖飲料及其制備方法。原料包括大豆粉，食用真菌等；通過在液體發(fā)酵過程中用食用真菌在生長過程中產(chǎn)生的蛋白酶水解大豆蛋白后，獲得含有大豆肽和食用真菌多糖的發(fā)酵液，最后配制成飲料；食用真菌選自靈芝，冬蟲夏草，豬苓。方法包括培養(yǎng)基制備、菌種活化、發(fā)酵培養(yǎng)、膜過濾等步驟。優(yōu)點(diǎn)是1、材料來源不受外界環(huán)境影響；2、用本方法得到的真菌多糖、多肽等生理活性物質(zhì)，具有抗癌、抗衰老、等功效；3、大豆肽不但具有人體所需的氨基酸，而且相對其它蛋白更易吸收，能迅速提供能量，加速肌肉疲勞恢復(fù)。方法簡易、穩(wěn)定、高效，所制得的飲料產(chǎn)品質(zhì)量高，且是同時含大豆肽和食用真菌多糖。
文檔編號A23L1/29GK102318864SQ20111021220
公開日2012年1月18日 申請日期2011年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月27日
發(fā)明者李勇, 柯雪佳, 梁運(yùn)祥, 葛向陽, 陳正軍 申請人:武漢百安生物科技有限責(zé)任公司