用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置制造方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，屬于生物組織切片孵育【技術(shù)領(lǐng)域】。該灌流裝置包括孵育盤和孵育槽；還包括輸入管、輸出管和孵育架；所述輸入管和輸出管分別連通孵育盤的內(nèi)部空間，所述孵育架置于孵育盤內(nèi)，且該孵育架的底部和/或側(cè)壁設(shè)有連通孵育盤內(nèi)部空間的鏤空部，所述孵育槽置于孵育架上。采用該灌流裝置，能夠使活體腦片或脊髓片與不斷通入的混合氣或ACSF液進(jìn)行物質(zhì)交換，隨著ACSF液不斷的更換，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷更新，代謝廢物不斷排出，有效保證了腦片或脊髓片在長(zhǎng)期孵育過程中一直處于最佳的環(huán)境中，保持其活性。
【專利說明】用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種生物組織切片孵育設(shè)備，特別是涉及一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]1966年，Yamamoto和McIlwain首次在腦片上記錄了電生理活動(dòng)(YamamotoC, McIlwain H.Potentials evoked in vitro in preparations from the mammalianbrain.Nature, 1966，210(5040): 1055-1056)，證實(shí)了腦組織在體外也能存活，并保持很好的活性狀態(tài)。此方法的建立，極大推動(dòng)了神經(jīng)電生理研究的進(jìn)程。1989年，Blanton將腦片電生理記錄與細(xì)胞的膜片鉗記錄結(jié)合起來(Yamamoto C，McIlwain H.Electrical activitiesin thin sections from the mammalian brain maintained in chemically-definedmedia in vitr0.J Neurochem.1966，13 (12): 1333-43),建立了腦片膜片鉗記錄技術(shù),這成為神經(jīng)生物學(xué)發(fā)展的里程碑。為了研究神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中神經(jīng)元之間的相互聯(lián)系，Yuste R和KatzLC首次在大鼠和貓的腦片中記錄到了I丐離子的動(dòng)態(tài)信息(Yuste R, Katz LC.Control ofpostsynaptic Ca2+influx in developing neocortex by excitatory and inhibitoryneurotransmitters.Neuron.199IMar; 6 (3): 333-44),從而創(chuàng)造了 一種能實(shí)時(shí)記錄神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)內(nèi)大量神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏姆椒ㄒ还δ苄投嗌窠?jīng)元I丐成像技術(shù)。
[0003]其中，用于電生理記錄或功能鈣成像的腦片或脊髓片都需要保持很高的活性，這是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要條件?；铙w腦片、脊髓片需要在活體上低溫取材，隨后置于充有混合氣(95%02，5%C02)的人工腦脊液(ACSF)中孵育，30-35°C保溫，期間要不斷的充入混合氣，這有效的保持了腦片的活性。當(dāng)前用于制作活體腦片的工具多為自制，或用燒杯代替。
[0004]目前常規(guī)的技術(shù)中，一般是將配好的ACSF液倒入大燒杯內(nèi)，同時(shí)不斷的通入混合氣，盛有腦片或脊髓片的孵育槽漂浮于ACSF液面上方。有人通過在孵育槽中心設(shè)多個(gè)孵育孔對(duì)混合氣流量的控制進(jìn)行了改進(jìn)，雖然通過改進(jìn)保證了氣流的均勻，但仍不能使孵育槽充分進(jìn)入ACSF液保持充分的物質(zhì)交換；還有人通過設(shè)置濾網(wǎng)結(jié)構(gòu)使腦片能充分的與液體接觸，以便于更好的保持腦片活性，但其裝置各個(gè)小室互不連通，通氣和灌流都很難進(jìn)行。
[0005]并且，常規(guī)技術(shù)都為傳統(tǒng)意義上的孵育，不涉及灌流。在活體腦片或脊髓片的孵育過程中，會(huì)不斷的與外界進(jìn)行物質(zhì)交換，吸收外界營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，排除代謝產(chǎn)物。普通的通氣孵育會(huì)隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng)，導(dǎo)致外界營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，代謝廢物逐漸增多，不利于保持腦片的活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于此，本實(shí)用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，能夠?qū)崿F(xiàn)灌流孵育，隨著液體的不斷更換，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)不斷更新，代謝廢物不斷排出，利于保持腦片或脊髓片的活性。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采取以下技術(shù)方案:[0008]一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，包括孵育盤和孵育槽；還包括輸入管、輸出管和孵育架；所述輸入管和輸出管分別連通孵育盤的內(nèi)部空間，所述孵育架置于孵育盤內(nèi)，且該孵育架的底部和/或側(cè)壁設(shè)有連通孵育盤內(nèi)部空間的鏤空部，所述孵育槽置于孵育架上。
[0009]采用上述灌流裝置，在孵育活體腦片或脊髓片的過程中，將活體腦片或脊髓片放入孵育槽中，又將孵育槽放入孵育架上，由于孵育架的底部和/或側(cè)壁設(shè)有連通孵育盤內(nèi)部空間的鏤空部，因此，當(dāng)通過輸入管不斷輸入混合氣或ACSF液時(shí)，混合氣或ACSF液能透過該鏤空部與孵育槽內(nèi)的活體腦片或脊髓片進(jìn)行物質(zhì)交換，并將產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物隨著ACSF液由輸出管排出，有利于保持腦片或脊髓片的活性。
[0010]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述孵育架包括連接部和至少兩條側(cè)向支架；所述側(cè)向支架為條狀，所述連接部位于側(cè)向支架頂部，側(cè)向支架通過連接部連接為一體，所述側(cè)向支架中部還設(shè)有橫向延伸的支撐托，該側(cè)向支架、連接部和支撐托共同形成具有容納腔的桶狀結(jié)構(gòu)，所述孵育槽置于該容納腔內(nèi)。采用上述結(jié)構(gòu)，可以使孵育盤中的ACSF液由孵育槽的底部及四周與其進(jìn)行充分的物質(zhì)交換。
[0011 ] 在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述側(cè)向支架至少為兩條，所述連接部為圓環(huán)狀；所述孵育槽為圓桶狀，該孵育槽的頂部設(shè)有沿孵育槽徑向延伸的固定部，且該固定部上設(shè)有與連接部卡接的卡接槽。通過將卡接槽卡接于固定部，可以將孵育槽固定，避免產(chǎn)生移動(dòng)。
[0012]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述孵育槽的外徑與所述容納腔的內(nèi)徑相匹配。避免孵育槽在容納腔內(nèi)隨ACSF液的流動(dòng)而在水平方向產(chǎn)生移動(dòng)。
[0013]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述孵育架至少為兩個(gè)，各孵育架的連接部連為一體?？筛鶕?jù)需要，插入一個(gè)或多個(gè)孵育槽進(jìn)行孵育。
[0014]在其中一個(gè)實(shí)施例中，該灌流裝置還包括透氣管，該透氣管上均布有透氣孔，所述透氣管設(shè)于孵育盤內(nèi)，所述輸入管設(shè)于孵育盤內(nèi)的開口連通該透氣管。以便使由輸入管進(jìn)入孵育盤的混合氣或ACSF液能在孵育盤內(nèi)均由的排出，不致產(chǎn)生太大沖擊力。
[0015]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述透氣管沿孵育盤底部邊緣設(shè)置。使混合氣或ACSF液由孵育盤的四周均勻排出，能夠更好的進(jìn)行物質(zhì)交換。
[0016]在其中一個(gè)實(shí)施例中，該灌流裝置還包括孵育蓋和氣體輸出管，所述氣體輸出管連接孵育蓋，所述孵育蓋的大小和孵育盤大小相匹配。通過孵育蓋的使用，可以減少整個(gè)孵育過程中受到外界物質(zhì)的污染。
[0017]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述孵育盤和孵育蓋為避光的孵育盤和孵育蓋(如由棕色玻璃或棕色聚苯乙烯材質(zhì)制造)，便于活體腦片或脊髓片在免疫染色中的避光操作。
[0018]在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述孵育槽由框架和覆蓋于框架上的尼龍膜或半透膜構(gòu)成。允許孵育槽內(nèi)的活體腦片或脊髓片與混合氣體和ACSF液進(jìn)行物質(zhì)交換，常規(guī)可使用100目的尼龍膜，當(dāng)有染色需求時(shí)，可使用0.4μπι半透膜。
[0019]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型具有以下有益效果:
[0020]本實(shí)用新型的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，設(shè)有灌流系統(tǒng)，能夠使活體腦片或脊髓片與不斷通入的混合氣或ACSF液進(jìn)行物質(zhì)交換，隨著ACSF液不斷的更換，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷更新，代謝廢物不斷排出，有效保證了腦片或脊髓片在長(zhǎng)期孵育過程中一直處于最佳的環(huán)境中，保持其活性。并且本裝置集合了通氣孵育和灌流孵育兩項(xiàng)功能，滿足了實(shí)驗(yàn)人員不同的需求。
[0021]該灌流裝置還通過采用結(jié)構(gòu)獨(dú)特的孵育架，可以保證腦片或脊髓片與孵育液充分接觸，最大限度的保持腦片或脊髓片的活性；并可同時(shí)進(jìn)行多份樣本的孵育。
[0022]該灌流裝置還通過透氣管的使用，使孵育盤內(nèi)的氣流、水流流動(dòng)均勻，為孵育創(chuàng)造平穩(wěn)的環(huán)境條件。
[0023]該灌流裝置還可采用不透光材質(zhì)制成，從而可進(jìn)行免疫染色等需要避光的實(shí)驗(yàn)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]圖1為實(shí)施例所述灌流裝置整體外觀示意圖；
[0025]圖2為實(shí)施例所述灌流裝置內(nèi)部結(jié)構(gòu)示意圖；
[0026]圖3為孵育盤和孵育架俯視圖；
[0027]圖4為圖3中放入了孵育槽的俯視圖；
[0028]圖5為單個(gè)孵育槽和孵育架結(jié)構(gòu)示意圖；
[0029]圖6為孵育蓋示意圖。
[0030]其中:1.孵育盤；2.孵育槽；21.固定部；3.輸入管；4.輸出管；5.孵育架；51.側(cè)向支架；52.連接部；53.支撐托；6.孵育蓋；7.氣體輸出管；8.透氣管。
【具體實(shí)施方式】
[0031]以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明。
[0032]一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，包括孵育盤1、孵育槽2、輸入管3、輸出管4、孵育架5、孵育蓋6、氣體輸出管7和透氣管8 ;所述輸入管3和輸出管4分別連通孵育盤I的內(nèi)部空間，所述孵育架5置于孵育盤I內(nèi)，所述孵育架5包括連接部52和四條側(cè)向支架51，所述側(cè)向支架51為條狀，所述連接部52位于側(cè)向支架頂部，側(cè)向支架通過連接部52連接為一體，所述側(cè)向支架51中部還設(shè)有橫向延伸的支撐托53，該側(cè)向支架51、連接部52和支撐托53共同形成具有容納腔的桶狀結(jié)構(gòu)，所述孵育槽置于該容納腔內(nèi)，該孵育槽2的外徑與所述容納腔的內(nèi)徑相匹配。
[0033]所述連接部52為圓環(huán)狀；所述孵育槽2為圓桶狀，該孵育槽2的頂部設(shè)有沿孵育槽徑向延伸的固定部21，且該固定部21上設(shè)有與連接部52卡接的卡接槽。
[0034]所述孵育架5為五個(gè)，平均分布于孵育盤I內(nèi)，且各孵育架5的連接部52連為一個(gè)體，使多個(gè)孵育架5形成一個(gè)整體。
[0035]所述透氣管8上均布有透氣孔，該透氣管8設(shè)于孵育盤I內(nèi)，沿孵育盤I底部邊緣設(shè)置，且所述輸入管3設(shè)于孵育盤內(nèi)的開口連通該透氣管8。
[0036]所述氣體輸出管7連接孵育蓋6，所述孵育蓋6的大小和孵育盤I大小相匹配。可固定于孵育盤I上，將孵育盤I蓋住。
[0037]所述孵育盤I和孵育蓋6為避光的孵育盤和孵育蓋(如由棕色玻璃或棕色聚苯乙烯材質(zhì)制造)，便于活體腦片或脊髓片在免疫染色中的避光操作。
[0038]所述孵育槽2由框架和覆蓋于框架上的尼龍膜或半透膜構(gòu)成。允許孵育槽內(nèi)的活體腦片或脊髓片與混合氣體和ACSF液進(jìn)行物質(zhì)交換，常規(guī)可使用100目的尼龍膜，當(dāng)有染色需求時(shí)，可使用0.4μηι半透膜。[0039]采用上述灌流裝置進(jìn)行活體腦片或脊髓片的孵育時(shí)，將活體腦片或脊髓片放入孵育槽2中，又將孵育槽2放入孵育架5中，由于孵育架5的底部和側(cè)壁均直接連通孵育盤的內(nèi)部空間，因此，當(dāng)通過輸入管3不斷輸入混合氣或ACSF液時(shí)，混合氣或ACSF液能與孵育槽2內(nèi)的活體腦片或脊髓片進(jìn)行物質(zhì)交換，并將產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物隨著ACSF液由輸出管4排出，有利于保持腦片或脊髓片的活性。
[0040]以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本實(shí)用新型的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本實(shí)用新型專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本實(shí)用新型構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。因此，本實(shí)用新型專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
【權(quán)利要求】
1.一種用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，包括孵育盤和孵育槽；其特征在于，還包括輸入管、輸出管和孵育架；所述輸入管和輸出管分別連通孵育盤的內(nèi)部空間，所述孵育架置于孵育盤內(nèi)，且該孵育架的底部和/或側(cè)壁設(shè)有連通孵育盤內(nèi)部空間的鏤空部，所述孵育槽置于孵育架上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述孵育架包括連接部和至少兩條側(cè)向支架；所述側(cè)向支架為條狀，所述連接部位于側(cè)向支架頂部，側(cè)向支架通過連接部連接為一體，所述側(cè)向支架中部還設(shè)有橫向延伸的支撐托，該側(cè)向支架、連接部和支撐托共同形成具有容納腔的桶狀結(jié)構(gòu)，所述孵育槽置于該容納腔內(nèi)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述側(cè)向支架至少為兩條，所述連接部為圓環(huán)狀；所述孵育槽為圓桶狀，該孵育槽的頂部設(shè)有沿孵育槽徑向延伸的固定部，且該固定部上設(shè)有與連接部卡接的卡接槽。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述孵育槽的外徑與所述容納腔的內(nèi)徑相匹配。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述孵育架至少為兩個(gè)，各孵育架的連接部連為一體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，還包括透氣管，該透氣管上均布有透氣孔，所述透氣管設(shè)于孵育盤內(nèi)，所述輸入管設(shè)于孵育盤內(nèi)的開口連通該透氣管。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述透氣管沿孵育盤底部邊緣設(shè)置。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，還包括孵育蓋和氣體輸出管，所述氣體輸出管連接孵育蓋，所述孵育蓋的大小和孵育盤大小相匹配。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述孵育盤和孵育蓋為避光的孵育盤和孵育蓋。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于活體腦片或脊髓片孵育的灌流裝置，其特征在于，所述孵育槽由框架和覆蓋于框架上的尼龍膜或半透膜構(gòu)成。
【文檔編號(hào)】C12M1/00GK203546001SQ201320647470
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年10月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月18日
【發(fā)明者】馮曉娜, 謝維嬌, 秋云海 申請(qǐng)人:深圳先進(jìn)技術(shù)研究院