專利名稱：細胞因子合成抑制劑用于治療干眼病的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及干眼病的治療。特別地，本發(fā)明涉及某些細胞因子合成抑制劑在治療哺乳動物的干眼病和其它需要濕潤眼睛的病癥中的用途。
背景技術：
干眼病，通用名為干燥性角結(jié)膜炎，是一種每年侵襲數(shù)百萬美國人的常見眼科疾病。由于生育能力停止后出現(xiàn)激素改變，該病癥在絕經(jīng)后女性中特別普遍。干眼病以不同的嚴重程度困擾患者。在輕癥病例中，患者會經(jīng)歷燒灼感、干燥感和例如通常由眼瞼和眼表面之間的小物體引起的持續(xù)刺激。在重癥病例中，可嚴重損害視力。其它疾病如干燥綜合征和瘢痕性類天皰瘡出現(xiàn)干眼病并發(fā)癥。
盡管似乎干眼病可由多種不相關的致病因素引起，然而所有并發(fā)癥均表現(xiàn)出一個共同的結(jié)果，即眼前部淚膜的破壞，其導致暴露的外表面失水以及以上所述的多種癥狀(Lemp，國家眼科研究所/工業(yè)研討會關于干眼病臨床試驗的報告，The CLAO Journal，21卷，第4期，221-231頁(1995))。
醫(yī)師已經(jīng)采取多種方法來治療干眼病。一種常規(guī)的方法是全天滴加所謂的人工淚液來補充和穩(wěn)定眼的淚膜。其它方法包括使用可提供淚液替代物或刺激內(nèi)源性淚液產(chǎn)生的眼植入劑。
淚液替代方法的實例包括使用緩沖的等張鹽水溶液、含有水溶性聚合物的水溶液，所述的聚合物使溶液變得更粘稠，從而更不易從眼中流出。還嘗試了通過提供一種或多種淚膜組分如磷脂和油來進行淚膜重構。已經(jīng)證明磷脂組合物可用于治療干眼?。粎⒁娎鏜cCulley和Shine，淚膜結(jié)構和干眼病，Contactologia，20卷(4)，145-49頁(1998)；以及Shine和McCulley，與瞼板腺分泌極性脂質(zhì)異常有關的干燥性角結(jié)膜炎，Archivesof Ophthalmology，116卷(7)，849-52頁(1998)。用于治療干眼病的磷脂組合物的實例公開于美國專利US 4,131,651(Shah等)、4,370,325(Packman)、4,409,205(Shively)、4,744,980和4,883,658(Holly)、4,914,088(Glonek)、5,075,104(Gressel等)、5,278,151(Korb等)、5,294,607(Glonek等)、5,371,108(Korb等)和5,578,586(Glonek等)中。美國專利US 5,174,988(Mautone等)公開了含有磷脂、拋射劑和活性物質(zhì)的磷脂藥物遞送系統(tǒng)。
另一種方法包括提供潤滑物質(zhì)來替代人工淚液。例如，美國專利US4,818,537(Guo)公開了一種基于脂質(zhì)體的潤滑組合物的用途，美國專利US5,800,807(Hu等)公開了用于治療干眼病的含甘油和丙二醇的組合物。
盡管這些方法已經(jīng)取得了一些成功，然而在干眼病治療中仍然存在問題。使用淚液替代物雖然暫時有效，但通常需要在患者清醒時反復應用。要求患者在一天中使用人工淚液10至20次是很常見的。這種方式不僅麻煩費時，而且可能非常昂貴。已經(jīng)報道，在一些病例中，與屈光手術有關的暫時性干眼病癥狀在術后持續(xù)6周至6個月或更長時間。
除了主要致力于緩解與干眼病相關的癥狀外，還一直在尋找用于治療干眼病的方法和組合物。例如，美國專利US 5,041,434(Lubkin)公開了性類固醇如軛合雌激素用于治療絕經(jīng)后女性的干眼病的用途；美國專利US5,290,572(MacKeen)公開了細粒鈣離子組合物用于刺激眼前部淚膜產(chǎn)生的用途；以及美國專利US 4,966,773(Gressel等)公開了一種或多種類視色素的微細顆粒用于使眼組織正常化的用途。
一些最近的文獻報道稱患有干眼綜合征的患者在相關眼組織如淚腺和瞼板腺中不相稱地出現(xiàn)過度炎癥的特征。已經(jīng)公開了多種化合物用于治療干眼病患者的用途，如類固醇[例如美國專利US 5,958,912；Marsh等，在干燥綜合征中用于干燥性角結(jié)膜炎的不含防腐劑的甲基氫化潑尼松局部治療，Ophthalmology，106(4)811-816(1999)；Pflugfelder等，美國專利US6,153,607]、細胞因子釋放抑制劑(Yanni，J.M等，WO 0003705 A1)、環(huán)孢素A[Tauber，J.Adv.Exp.Med.Biol.1998，438(淚腺、淚膜和干眼綜合征2)，969]和15-HETE(Yanni等，美國專利US 5,696,166)。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及治療干眼病和包括與屈光手術如LASIK手術有關的干眼病癥狀在內(nèi)的其它需要濕潤眼睛的病癥的方法。根據(jù)本發(fā)明的方法，對患有干眼病或其它需要濕潤眼睛的病癥的患者施用某些細胞因子合成抑制劑。優(yōu)選將細胞因子合成抑制劑局部施用于眼。
附圖簡述

圖1顯示了SP-600125和地塞米松對容積滲摩爾濃度過高引起的人角膜上皮細胞中細胞因子的產(chǎn)生的體外抑制作用。
發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，對患有干眼病的患者施用包括角膜和結(jié)膜上皮細胞和基質(zhì)細胞在內(nèi)的非免疫駐留眼表細胞(nonimmune resident ocular surfacecells)細胞因子合成的抑制劑。適用于本發(fā)明的化合物通過干擾非免疫駐留眼表細胞中信號級聯(lián)放大的特定效應子而抑制這些細胞中促炎細胞因子的合成。在干眼病治療中被靶向抑制的細胞因子合成的效應子包括促分裂原活化激酶(MAP激酶、p38激酶)、c-jun N-末端激酶(JNK)和I-κ激酶(IKK)。同樣，將促炎細胞因子IL-1β和TNFα的前體轉(zhuǎn)化為活性形式的酶(分別為ICE，IL-1轉(zhuǎn)化酶和TACE，TNF-α轉(zhuǎn)化酶)的抑制劑或抑制細胞因子mRNA翻譯的抑制劑也可用于治療干眼病。細胞因子通過激活Janus家族酪氨酸激酶(JAK)以及信號轉(zhuǎn)導子和轉(zhuǎn)錄激活子(STAT)而進一步促進促炎細胞因子的合成，因此JAK和STAT的抑制劑可用于治療干眼病。激活蛋白-1(AP-1)抑制劑可抑制眼表細胞中細胞因子的合成，故可用于治療干眼病。此外，已知類視色素X受體(RXR)的配體可抑制上皮細胞中細胞因子的合成，故適用于本發(fā)明。
上述種類的細胞因子合成抑制劑是已知的。MAP激酶(p38)抑制劑包括(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)[“SB-220025”]。JNK抑制劑包括蒽并[1，9-cd]吡唑-6(2H)-酮[“SP-600125”]。ICE抑制劑包括pralnacasan(HMR3480/VX-740)。TNF mRNA翻譯抑制劑包括(D)精氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-(D)精氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-甘氨酸-(D)酪氨酸-酰胺乙酸鹽[“RDP58”]。NFkB抑制劑包括2-氯-N-[3，5-二(三氟甲基)苯基]-4-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酰胺[“SP-100030”]和三氟醋柳酸。AP-1抑制劑包括SP-100030。RXR激動劑包括貝沙羅汀。
優(yōu)選用于本發(fā)明的細胞因子合成抑制劑是JNK抑制劑和AP-1抑制劑。
根據(jù)本發(fā)明的方法，對需要其的哺乳動物施用包含一種或多種所述的細胞因子合成抑制劑和可藥用載體的組合物，所述的組合物用于眼睛局部施用或植入眼睛的結(jié)膜囊或前房。按照本領域已知的方法配制用于所需的特定施用途徑的組合物。
本發(fā)明所施用的組合物包含藥學有效量的一種或多種所述的細胞因子合成抑制劑。此處所用的“藥學有效量”是足以減少或消除干眼病或其它需要濕潤眼睛的病癥的跡象或癥狀的量。通常，對于以滴眼劑或眼用軟膏劑形式局部施用于眼的組合物，細胞因子合成抑制劑的總量為約0.001％至1.0％(w/w)。
優(yōu)選將本發(fā)明所施用的組合物配制成溶液、混懸液和其它用于局部施用的劑型。通常優(yōu)選水性溶液，因為其易于配制，并且患者能通過在被侵襲的眼內(nèi)滴加一至兩滴該溶液而容易地施用所述組合物。然而，所述組合物也可以是混懸液、粘稠或半粘稠的凝膠劑或者其它類型的固體或半固體組合物。對于略溶于水的細胞因子合成抑制劑而言，優(yōu)選混懸液。
本發(fā)明所施用的組合物還可包含各種其它成分，所述其它成分包括但不局限于表面活性劑、張力調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、防腐劑、助溶劑和粘度構建劑(viscosity building agent)。
對于眼用組合物，可使用各種張力調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)組合物的張力，優(yōu)選調(diào)節(jié)至天然淚液的張力。例如，可向組合物中加入氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、右旋糖和/或甘露醇至近似于生理張力。張力調(diào)節(jié)劑的量根據(jù)所加入的具體張力調(diào)節(jié)劑變化。然而，通常組合物中張力調(diào)節(jié)劑的量應足以使最終組合物具有眼可接受的重量滲克分子濃度(通常為約150-450mOsm，優(yōu)選250-350mOsm)。
可向組合物中加入適宜的緩沖體系(例如磷酸鈉、乙酸鈉、檸檬酸鈉、硼酸鈉或硼酸)以防止pH在儲藏條件下漂移。具體濃度根據(jù)所用的緩沖劑而變化。然而，優(yōu)選選擇可將目標pH維持在pH6-7.5范圍內(nèi)的緩沖劑。
配制用于治療干眼病類疾病和病癥的組合物還可包含水性載體，其被設計用于即時、短期緩解干眼病類病癥。所述載體可配制成磷脂載體或人工淚液載體，或兩者的混合物。此處所用的“磷脂載體”和“人工淚液載體”是指水性組合物，其(i)包含一種或多種磷脂(當為磷脂載體時)或其它化合物，眼部施用后，其可潤滑、“濕潤”眼睛，使粘度近似于內(nèi)源性淚液，并有助于天然淚液的構建，或暫時緩解干眼病癥狀和病情；(ii)是安全的；和(iii)為局部施用有效量的一種或多種所述的細胞因子抑制劑提供適宜的遞送載體。可用作人工淚液載體的人工淚液組合物的實例包括但不局限于市售產(chǎn)品，如Tears Naturale、Tears Naturale II、Tears NaturaleFree和Bion Tears(Alcon Laboratories，Inc.，F(xiàn)ort Worth，得克薩斯)。磷脂載體制劑的實例包括美國專利US 4,804,539(Guo等)、4,883,658(Holly)、4,914,088(Glonek)、5,075,104(Gressel等)、5,278,151(Korb等)、5,294,607(Glonek等)、5,371,108(Korb等)、5,578,586(Glonek等)中公開的那些；在它們公開可用作本發(fā)明的磷脂載體的磷脂組合物的范圍內(nèi)，將前述專利在此引入作為參考。
設計用于眼部施用后潤滑、“濕潤”眼睛、使粘度近似于內(nèi)源性淚液、有助于天然淚液的構建或暫時緩解干眼病癥狀和病情的其它化合物是本領域公知的。所述化合物可增加組合物的粘度，其包括但不局限于單體多元醇，例如甘油、丙二醇、乙二醇；聚合多元醇，例如聚乙二醇、羥丙基甲基纖維素(“HPMC”)、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素(“HPC”)、右旋糖酐如右旋糖酐70；水溶性蛋白，例如明膠；以及乙烯基聚合物，例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚維酮和卡波姆例如卡波姆934P、卡波姆941、卡波姆940、卡波姆974P。
也可在本發(fā)明的眼用組合物中加入其它化合物以增加載體的粘度。粘度增強劑的實例包括但不局限于多糖，例如透明質(zhì)酸及其鹽、硫酸軟骨素及其鹽、右旋糖酐、纖維素家族的各種聚合物、乙烯基聚合物以及丙烯酸聚合物。通常，磷脂載體或人工淚液載體組合物的粘度為1至400厘泊(“cps”)。
局部眼用制品通常被包裝成多劑量形式。因此需要添加防腐劑以防止使用過程中的微生物污染。適宜的防腐劑包括苯扎氯銨、氯代丁醇、溴化芐基十二烷基二甲銨(benzododecinium bromide)、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、苯乙醇、依地酸二鈉、山梨酸、聚季銨鹽-1或本領域技術人員已知的其它防腐劑。所述防腐劑通常以0.001至1.0％w/v的濃度使用。本發(fā)明的單位劑量組合物是無菌的，但通常無防腐劑。因此，所述組合物通常不含有防腐劑。
本發(fā)明的優(yōu)選組合物旨在施用于患有干眼病或干眼病癥狀的人類患者。優(yōu)選局部施用該組合物。通常，用于上述目的的劑量可以變化，但應當是消除或改善干眼病病癥的有效量。通常，所述組合物每天施用一次至多次，每次1-2滴。
以下實施例1中給出了代表性的滴眼劑制劑。
實施例1
用以下方法制備上述組合物。稱取批次量的硼酸、氯化鈉、依地酸二鈉和聚季銨鹽-1，通過攪拌將其溶解在90％批次量的純化水中。用NaOH和/或HCl調(diào)節(jié)pH至7.4±0.1。量取并加入儲備液形式的批次量的細胞因子合成抑制劑。加適量純化水至100％。將混合物攪拌5分鐘以進行勻化，然后經(jīng)除菌濾膜過濾至無菌容器中。
實施例2對容積滲摩爾濃度過高引起的人角膜上皮細胞中細胞因子的產(chǎn)生的體外抑制作用在干眼病中，眼的淚膜是異常高滲的，其對眼表細胞形成刺激。用高張介質(zhì)處理人結(jié)膜上皮細胞引起促炎細胞因子的產(chǎn)生。評價選擇性JNK抑制劑蒽并[1，9-cd]吡唑-6(2H)-酮對容積滲摩爾濃度過高引起的轉(zhuǎn)化人角膜上皮細胞系CEPI-17中細胞因子分泌的抑制作用。在等張的完全角質(zhì)細胞生長培養(yǎng)基(iso KGM)中生長CEPI-17細胞，并將其置于48孔板上不含氫化可的松的iso KGM(iso KGM-HC)中。當細胞達到融合時，將其在isoKGM-HC中用指定濃度的化合物預處理1小時。然后，在化合物存在下，用高張KGM-HC(在iso KGM-HC中另外加入80mM NaCl)刺激細胞6小時。用ELISA測定上清液等分試樣中的IL-6、IL-8。用由細胞中提取的雙鏈DNA(dsDNA)的量標化細胞因子的釋放。通過與賦形劑處理的細胞中的細胞因子水平相比較計算細胞因子產(chǎn)生的抑制百分數(shù)。結(jié)果如圖1所示。在所述條件下，容積滲摩爾濃度過高顯著引起CEPI-17細胞中IL-6和IL-8的產(chǎn)生。在100nM下地塞米松顯著抑制每種細胞因子的分泌。蒽并[1，9-cd]吡唑-6(2H)-酮(SP-600125)劑量依賴性地抑制IL-6(IC50＝12.6μM)和IL-8(IC50＝3.7μM)的產(chǎn)生。
已經(jīng)根據(jù)某些優(yōu)選實施方案對本發(fā)明進行了描述；然而應當理解的是，可不背離本發(fā)明的特定或基本特征而形成本發(fā)明的其它具體形式或變體。因此，上述實施方案被認為是在各個方面的舉例說明，而非對本發(fā)明范圍的限制，其中本發(fā)明的范圍通過所附的權利要求而非上述說明來確定。
權利要求
1.治療干眼病和其它需要濕潤眼睛的病癥的方法，該方法包括對哺乳動物施用包含可藥用載體和藥學有效量的細胞因子合成抑制劑的組合物，所述的細胞因子合成抑制劑選自促分裂原活化激酶抑制劑、c-jun N-末端激酶抑制劑、I-κ激酶抑制劑、IL-1β合成抑制劑、TNFα合成抑制劑、Janus家族酪氨酸激酶抑制劑、信號轉(zhuǎn)導子和轉(zhuǎn)錄激活子抑制劑和類視色素X受體的配體。
2.權利要求1的方法，其中的細胞因子合成抑制劑選自MAP激酶抑制劑和p38激酶抑制劑。
3.權利要求1的方法，其中的細胞因子合成抑制劑選自(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)、蒽并[1，9-cd]吡唑-6(2H)-酮、pralnacasan、(D)精氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-(D)精氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-(D)正亮氨酰-甘氨酸-(D)酪氨酸-酰胺乙酸鹽、2-氯-N-[3，5-二(三氟甲基)苯基]-4-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酰胺、三氟醋柳酸和貝沙羅汀。
4.權利要求1的方法，其中的細胞因子合成抑制劑選自c-jun N-末端激酶抑制劑和激活蛋白-1抑制劑。
5.權利要求1的方法，其中細胞因子合成抑制劑的藥學有效量是0.001-1.0％(w/w)。
6.權利要求1的方法，其中組合物局部施用于眼。
7.權利要求1的方法，其中干眼病和其它需要濕潤眼睛的病癥是與屈光手術有關的干眼病癥狀。
全文摘要
非免疫駐留眼表細胞中細胞因子合成的抑制劑可用于治療干眼病和其它需要濕潤眼睛的病癥。
文檔編號A61K38/08GK1684738SQ03822514
公開日2005年10月19日 申請日期2003年8月26日 優(yōu)先權日2002年9月20日
發(fā)明者D·A·蓋瑪徹 申請人:愛爾康公司