專(zhuān)利名稱(chēng)：治療癌癥的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)涉及腫瘤學(xué)及化療領(lǐng)域，尤其為癌癥治療提供了新方法。
背景技術(shù)：
腫瘤可以特異性的使非典型、具有潛在免疫反應(yīng)性的抗原進(jìn)行表達(dá)，這類(lèi)抗原被總稱(chēng)為腫瘤抗原。大量證據(jù)表明，免疫系統(tǒng)未能有效抑制腫瘤進(jìn)行性生長(zhǎng)的原因并非為可識(shí)別腫瘤抗原的缺乏。人們對(duì)腫瘤免疫抑制反應(yīng)以及腫瘤免疫逃逸機(jī)制的尚未完全了解。近來(lái)研究表明，通過(guò)降低色氨酸的局部濃度，使細(xì)胞毒性T細(xì)胞產(chǎn)生耐受性；該細(xì)胞可被吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)激活。
IDO屬氧化還原酶，可催化色氨酸分解代謝中的限速步驟。其結(jié)構(gòu)與色氨酸雙氧酶(TDO)不同，后者在食物色氨酸的肝內(nèi)分解代謝中起作用。IDO為干擾素-γ(IFN-γ)的靶向基因，可能在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用。(Mellor和Munn(1999)Immunol.Today.20469-473)。IDO活性的增加使得局部細(xì)胞環(huán)境中色氨酸的水平減少。激活抗原呈遞細(xì)胞上的IDO(受IFN-γ調(diào)控)可阻斷T細(xì)胞活性；該細(xì)胞對(duì)色氨酸的減少特別敏感。T細(xì)胞在活化前，須經(jīng)過(guò)1～2個(gè)分裂周期；當(dāng)色氨酸被消耗后，T細(xì)胞始終處于G1期。上述情形表明，IDO具有抑制輔助T細(xì)胞1(TH1)反應(yīng)的作用；該反應(yīng)可促進(jìn)T細(xì)胞發(fā)育。
IDO在免疫抑制反應(yīng)中的主要作用可由1-甲基-色氨酸(1MT)的功能得以證實(shí)；1MT是一種特異性、具生物活性的IDO抑制劑(Cady和Sono(1991)Arch.Biochem.Biophys.291326-333)，可誘發(fā)MHC(主要組織相容復(fù)合體)限制性且經(jīng)T細(xì)胞調(diào)節(jié)的異源小鼠的基因表達(dá)。(Mellor等.(2001)Nat.Immunol.264-68；Munn等(1998)Science.2811191-1193)。IDO的上述作用與其在胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞中高水平表達(dá)相一致。(Sedlmayr等.(2002)Mol.Hum.Reprod.8385-391)。
特別是，已經(jīng)證實(shí)在人類(lèi)腫瘤和/或癌癥患者中IDO活性常增加。(Yasui等.(1986)Proc.Natl.Acad.Sci.美國(guó).836622-6626；Taylor and Feng(1991)FASEB J.52516-22)。IDO具有調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用；因而推斷，癌癥患者體內(nèi)IDO水平上升，可誘發(fā)腫瘤免疫抑制反應(yīng)。(Mellro和Munn(1999)Immunol.Today.20469-473；Munn等.(1999)J.Exp.Med.1891363-1372；Munn等.(1998)Science.2811191-1193)。下列發(fā)現(xiàn)可證實(shí)上述推斷在多種癌癥(包括乳腺癌)中，有益的免疫功能喪失；該功能有助于限制惡性腫瘤的發(fā)展。例如，在癌癥進(jìn)展過(guò)程中，TH1反應(yīng)(以IFN-γ生成為標(biāo)志)受到抑制；該反應(yīng)可誘發(fā)細(xì)胞毒性T細(xì)胞的產(chǎn)生。因而可以假設(shè)，若IDO可通過(guò)抑制T細(xì)胞活性促進(jìn)癌癥發(fā)展，則抑制動(dòng)物體內(nèi)IDO水平能阻礙腫瘤生長(zhǎng)，其機(jī)制在于逆轉(zhuǎn)IDO調(diào)節(jié)性免設(shè)抑制反應(yīng)。但在小鼠模型中，給予IDO抑制1-甲基-色氨酸(1MT)后，只能延緩而非阻止腫瘤生長(zhǎng)(Friberg等.(2002)Int.J.Cancer 101151-155；美國(guó)專(zhuān)利6,482,416)。
在正常與疾病狀態(tài)下，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(即一系列從細(xì)胞外至細(xì)胞內(nèi)的事件)是細(xì)胞功能的一個(gè)方面。人們已經(jīng)識(shí)別出多種具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的蛋白質(zhì)分子，包括受體與非受體酪氨酸激酶、磷酸酶、以及其他具有酶活性或調(diào)節(jié)功能的分子。通常，這些分子能與其他蛋白質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合，形成信號(hào)復(fù)合體，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖。
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的異?？蓪?dǎo)致惡性腫瘤的形成、生長(zhǎng)及進(jìn)展。因而，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑可用于治療癌癥。過(guò)去幾年間，已研制出多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)，日前仍需對(duì)其抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用進(jìn)行觀察。
發(fā)明概述按照本申請(qǐng)的一個(gè)方面，提供了一種治療需要其的患者中的癌癥的方法，該方法通過(guò)施用專(zhuān)利有效量的至少一種化合物本發(fā)明所述的的具有IDO抑制活性的化合物。該化合物可經(jīng)藥學(xué)可接受載體介質(zhì)給藥。
本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種治療需要其的患者中的癌癥的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)。在本發(fā)明的特定實(shí)施方式中，至少一種STI選自bcr/abl激酶抑制劑、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體抑制劑、her-2/neu受體抑制劑、以及法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)。這些化合物可經(jīng)藥學(xué)可接受載體介質(zhì)給藥。
按照本發(fā)明的另一實(shí)施方式，提供一種治療需要其患者中的癌癥的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑與至少一種化療藥物。在本發(fā)明的特定實(shí)施方式中，至少一種化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫杉醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。這些化合物可經(jīng)藥學(xué)可接受載體介質(zhì)給藥。
根據(jù)本申請(qǐng)的另一方面，提供一種治療需要其患者中的癌癥的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種免疫調(diào)節(jié)劑(除IDO抑制劑外)，和至少一種細(xì)胞毒性化療藥物、至少一種STI，或至少一種細(xì)胞毒性化療藥物與至少一種STI的聯(lián)合。在一特定實(shí)施方式中，至少一種免疫調(diào)節(jié)劑選自CD40L、B7、B7RP1、抗CD40、抗CD38、抗ICOS、4-IBB配體、樹(shù)突狀細(xì)胞癌疫苗、(白細(xì)胞介素2)IL2、IL 12、ELC/CCL19、SLC/CCL21、單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)、IL-4、IL-18、腫瘤壞死因子、IL-15、巨噬細(xì)胞衍化趨化因子(MDC)、干擾素a/b(IFN a/b)、巨噬細(xì)胞-集落刺激因子(M-CSF)、IL-3，粒細(xì)胞-集落刺激因子(GM-CSF)、IL-13、以及抗IL-10。在另一特定實(shí)施方式中，至少一種細(xì)胞毒性化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氮甲蝶呤、環(huán)磷酸胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。實(shí)施本發(fā)明這個(gè)方面的STI如前所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種在需要其的患者中治療慢性病毒性傳染病的方法，該方法提供同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑與至少一種化療藥物。至少一種化療藥物可以選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酸胺、CPT-11、5-氟尿密啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。泰素和順鉑由Hanna制藥有限公司(德國(guó)威明頓市)提供。
在本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方式中，被治療的慢性病毒性感染選自乙性肝炎病毒(HCV)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒、柯薩奇病毒、以及人體免疫缺陷病毒(HIV)。在一特定實(shí)施方式中，所述的化合物可以經(jīng)藥學(xué)可接受載體介質(zhì)給藥。
附圖簡(jiǎn)述

圖1A與1B顯示了對(duì)IDO抑制劑進(jìn)行酶分析的結(jié)果。在人類(lèi)IDO研究中，當(dāng)A)1MT與B)MTH-色氨酸水平升高時(shí)，對(duì)酶動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行總體非線性回歸分析。采用Prism4軟件包(GraphPad)進(jìn)行數(shù)據(jù)的繪圖和分析。1MT的最適Ki值為34.6μM，而MTH-色氨酸的最適Ki值為11.4μM。
圖2顯示細(xì)胞水平IDO抑制劑的分析結(jié)果。在1MT抑制IDO、1MT抑制TDO、以及MTH-Trp抑制IDO試驗(yàn)中，運(yùn)用2log量擴(kuò)增研究。采用Prism4軟件包(GraphPad)進(jìn)行數(shù)據(jù)的繪圖和分析。通過(guò)非線性回歸分析得到Hillslope和EC50的數(shù)值。
圖3是犬尿氨酸代謝途徑的示意圖。IDO為一種存在于肝外的、可誘導(dǎo)IFN-γ的氧化還原酶。N-甲酰基犬尿氨酸為IDO反應(yīng)產(chǎn)物，可被迅速水解成犬尿氨酸。由于組織中進(jìn)一步代謝犬尿氨酸的酶缺乏或無(wú)活性，故犬尿氨酸分布于組織與血液的之間。雖然它是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)生物合成途徑的中間產(chǎn)物，犬尿氨酸的主要清除方式為在肝臟和/或腎臟轉(zhuǎn)化成黃尿酸后經(jīng)尿液排出。(Takikawa等(1986)J.Biol.Chem..2613648-3653；Thomas和Stocker(1999)Redox.Report4199-220)。
圖4A-D顯示，對(duì)小鼠血清進(jìn)行高效液相色譜分析所得的色譜圖。在4℃下對(duì)收集的血液樣本進(jìn)行隔夜培養(yǎng)并去除血凝塊制備得到血清。采用TCA沉降分離蛋白質(zhì)。將試驗(yàn)樣本置于浸泡在平衡緩沖液的250mm×4.5mm Luna 5μC18柱內(nèi)進(jìn)行溶解，該平衡緩沖液含20％MeOH、5％氰化甲烷、10mM KPO4(pH5.3)和0.15mM EDTA。從處理如下的雄性FVB系小鼠制備血清樣本A)未處理的(將血清與30μM的下列每一種對(duì)照化合物混合色氨酸、犬尿氨酸和1MT)；B)未處理的(可測(cè)得55μM的血清色氨酸)；C)LPS刺激24小時(shí)(可測(cè)得5.6μM的犬尿氨酸)；D)皮下植入1MT丸3天(可測(cè)得104μM的1MT)。在6.66和14.5分鐘時(shí)對(duì)輸出敏感度進(jìn)行調(diào)整，以得到最佳化預(yù)期峰高值。Ky＝犬尿氨酸，W＝色氨酸，1MT＝1-甲基-色氨酸。
圖5是表示擬處理(未處理的)或用1MT、L-744，832(FTI)、1MT加L-744，832、或1MT加或未加某些化療藥物處理的MMTVneu小鼠中腫瘤體積發(fā)生變化的示圖。每一數(shù)據(jù)點(diǎn)對(duì)應(yīng)一個(gè)試驗(yàn)小鼠，條狀圖表示數(shù)據(jù)點(diǎn)(列于圖下方)的均值。
圖6顯示，對(duì)多種IDO抑制劑候選物進(jìn)行體外生化分析后的篩選結(jié)果。所得數(shù)據(jù)與犬尿氨酸在無(wú)IDO抑制劑時(shí)條件下的含量相關(guān)。
圖7A與7B顯示，對(duì)多種IDO抑制劑候選物進(jìn)行細(xì)胞水平分析后的篩選結(jié)果。圖7A中的數(shù)據(jù)與犬尿氨酸在無(wú)IDO抑制劑時(shí)條件下的含量相關(guān)。圖7B顯示與熒光度有關(guān)的數(shù)據(jù)，該熒光度標(biāo)志著犬尿氨酸的生成(即IDO活性)。利用空表達(dá)載體(載體)或含有含IDO cDNA的表達(dá)載體進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
圖8表示對(duì)多種IDO抑制劑候選物進(jìn)行細(xì)胞水平分析篩選后得到的有關(guān)吲哚胺的硫代乙內(nèi)酰脲衍生物的資料。利用空表達(dá)載體(載體)或含IDO或TDO的表達(dá)載體進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。作為對(duì)比，在加入1MT下利用IDO表達(dá)載體進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染后進(jìn)行分析。
圖9表示對(duì)在250μM的濃度下某些IDO抑制劑、其結(jié)構(gòu)及其抑制IDO及TDO活性的能力進(jìn)行細(xì)胞水平分析的圖表。
圖10顯示提供示圖，證實(shí)某些IDO抑制劑對(duì)癌轉(zhuǎn)移性乳腺(顯示于上部)癌或前列腺(顯示于下部)癌細(xì)胞的毒性。細(xì)胞未經(jīng)處理(Untx)或采用100μM的抑制劑進(jìn)行處理。
圖11顯示擬處理的(未處理)或用1MT、紫杉醇(泰素)、1MT加紫杉醇(泰素)、順鉑、或1MT加順鉑處理的MMTVneu小鼠的腫瘤體積總變化。每一數(shù)據(jù)點(diǎn)對(duì)應(yīng)一個(gè)試驗(yàn)小鼠，條狀圖表示數(shù)據(jù)點(diǎn)(列于圖下方)的均值。
發(fā)明詳述在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，提供一組新的IDO抑制劑。另外本發(fā)明涉及含有所述IDO抑制劑的藥物組合物和其抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種聯(lián)合治療方案，其中包括施用IDO抑制劑和化療藥物，從而達(dá)到有效抑制腫瘤生長(zhǎng)的目的。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種聯(lián)合治療方案，其中包括施用IDO抑制劑和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)，從而可有效抑制腫瘤生長(zhǎng)。
本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種聯(lián)合治療方案，其中包括施用免疫調(diào)節(jié)劑和化療藥物，由此有效抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法。
依照本發(fā)明的另一實(shí)施方式，提供一種用于治療慢性病毒感染的聯(lián)合治療方案，其中包括施用IDO抑制劑和化療藥物。
I.定義術(shù)語(yǔ)“IDO抑制劑”是指一類(lèi)能抑制吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)的活性從而逆轉(zhuǎn)IDO介導(dǎo)的免疫抑制作用的藥物。IDO抑制劑可表現(xiàn)為競(jìng)爭(zhēng)性、非競(jìng)爭(zhēng)性、或不可逆性?！案?jìng)爭(zhēng)性IDO抑制劑”是為在催化位點(diǎn)可逆性抑制IDO酶活性的化合物(例如，非限定性的，1-甲基-色氨酸)；“非競(jìng)爭(zhēng)性IDO抑制劑”可在非催化位點(diǎn)可逆性抑制IDO酶活性(例如，非限定性，norharman)；和“不可逆性IDO抑制劑”是可與酶形成共價(jià)鍵從而不可逆的破壞IDO酶活性的化合物，(例如，非限定性，環(huán)丙基/吖啶基色氨酸衍生物)。
本發(fā)明的IDO抑制劑包括，但不限于i)以往被鑒定為具有IDO抑制活性的化合物，例如1MT(Sigma-Aldrich，密蘇里州圣路易斯)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸(Sigma-Aldrich)、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸(Sigma-Aldrich)、6-硝基-L-色氨酸(Sigma-Aldrich)、吲哚3-甲醇(LKT實(shí)驗(yàn)室；明尼蘇達(dá)州圣保羅市)、3，3′-二吲跺甲烷(DIM；LKT實(shí)驗(yàn)室)、沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶酚酯(LKT實(shí)驗(yàn)室)、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯(Sigma-Aldrich)、9-乙烯基咔唑(Sigma-Aldrich)、阿西美辛(Sigma-Aldrich)、5-溴-DL-色氨酸(Sigma-Aldrich)、5-溴吲哚雙乙酸酯(Sigma-Aldrich)、brassilexin(Sigma-Aldrich)、3-氨基-2-萘甲酸(Sigma-Aldrich)、β-咔啉(Sigma-Aldrich)、3-丁基-β-咔啉(Peterson，A.C.等.(1993)Med.Chem.3473-482)、6-氟-3-甲酰-β-咔啉(Sigma-Aldrich)、6-異硫氰酸-3-甲酯基(carbomethyoxy)-β-咔啉(Sigma-Aldrich)、3-丙氧基-β-咔啉(Sigma-Aldrich)、3-羧基-β-咔啉(Sigma-Aldrich)、3-丙氧甲酰基(carbopropoxy)-β-咔啉(Sigma-Aldrich)以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉(Sigma-Aldrich)；ii)已發(fā)現(xiàn)具有IDO抑制活性的適合于本發(fā)明的化合物，但其抗腫瘤作用尚未確定，包括，但不限于苯基-TH-DL-trp(3-(N-苯基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)(Sigma-Aldrich)、丙烯基-TH-DL-trp(3-(N-烯丙基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)(Asinex；俄羅斯莫斯科)、以及甲基-TH-DL-trp(3-(N-甲基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)(Sigma-Aldrich)；iii)已發(fā)現(xiàn)具有IDO抑制活性且適用于本發(fā)明的化合物，而且已被用作抗腫瘤劑，包括單不限于brassinin(LKT實(shí)驗(yàn)室)、5-甲基-brassinin(Mehta等(1994)Anticancer.141209-1213)、3，3′-二吲哚甲烷(DIM；LKT實(shí)驗(yàn)室)、以及吲哚-3-甲醇(13C；LKT實(shí)驗(yàn)室)。
“信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑”是在癌細(xì)胞的正常功能中選擇性阻斷信號(hào)通路的關(guān)鍵步驟，從而誘發(fā)細(xì)胞凋亡的藥物。
本發(fā)明的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)包括但不限于(i)bcr/abl激酶抑制劑，如STI 571(格列衛(wèi)，Gleevec)及其衍生物；(ii)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體抑制劑，如激酶抑制劑(lressa，SSI-774)以及抗體(ImcloneC225[Goldstein等.(1995)，Clin Cancer Res.11311-1318]，和AbgenixABX-EGF)；(iii)her-2/neu受體抑制劑如赫賽汀TM(曲妥珠單抗)、以及法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)如L-744，832(Kohl等.(1995)，Nat Med.1(8)792-797)；(iv)Akt族激酶或Akt通路的抑制劑，如雷怕霉素(參見(jiàn)Sekulic等.(2000)Cancer Res.603504-3513)；(v)細(xì)胞周期激酶抑制劑，如由flavopiridol和UCN-01(參見(jiàn)Sausville(2003)Curr.Med.Chem.抗癌藥物347-56)；(vi)磷脂酰肌醇肌酶抑制劑，如LY294002(參見(jiàn)Vlahos等.(1994)J.Biol.Chem.2695241-5248)。
化合物或藥物組合物的“有效治療量”是指在動(dòng)物，尤其人類(lèi)中足以調(diào)節(jié)腫瘤的生長(zhǎng)或轉(zhuǎn)移的量，包括但不限于減小腫瘤生長(zhǎng)速度或體積、或防止無(wú)腫瘤形成的動(dòng)物在給藥之前腫瘤形成，即預(yù)防性給藥。
“藥學(xué)可接受”是指經(jīng)聯(lián)邦政府或州政府的有關(guān)管理機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)、或經(jīng)美國(guó)藥典或其他適用于動(dòng)物，尤其是人類(lèi)的通用藥典中所列有關(guān)管理機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)。
“載體”是指稀釋劑、佐劑、賦形劑、輔助劑、或幫助本發(fā)明的活性劑給藥的媒介。這類(lèi)藥用載體可以是滅菌液體，例如水和油類(lèi)，包括石油，動(dòng)物、植物類(lèi)或合成油，如花生油、豆油、礦物油、芝麻油等。水或鹽水溶液和右旋糖和甘油的水溶液優(yōu)選用作載體，特別是作為注射用溶液。有關(guān)藥用載體的描述，可參見(jiàn)E.W.Martin所著“Remington’s Pharmaceutical Sciences”。
“同時(shí)”表示(1)時(shí)間上同步，或(2)同一治療期間的不同時(shí)段。
“順序”表示所述方法中使用的一種活性劑的給藥是在另一活性劑的給藥之后進(jìn)行。當(dāng)給予某種活性劑之后，下一種活性劑可以基本上在第一種活性劑給藥之后立刻給藥；或下一活性劑可以在第一活性劑之后的有效時(shí)段中給藥；有效時(shí)段是指從給予第一種藥劑至其產(chǎn)生最大效用的時(shí)間。
II.癌癥治療的療法本發(fā)明還提供含有至少一種IDO抑制劑的藥物組合物，其中至少一種IDO抑制劑含有至少一種按照本發(fā)明發(fā)現(xiàn)的具有具有IDO抑制活性、但其抗腫瘤作用此前未被證實(shí)的化合物，該IDO抑制劑選自但不限于苯基-TH-DL-色氨酸(3-(N-苯基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、丙烯基-TH-DL-色氨酸(3-(N-烯-丙基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)以及甲基-TH-DL-色氨酸(3-(N-甲基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)，這些抑制劑可經(jīng)藥學(xué)可接受載體介質(zhì)給藥。所述藥物組合物可以以治療有效量對(duì)需要其的患者給藥。
此外，本發(fā)明提供一種癌癥治療的方法，該方法通過(guò)給予需要其的患者治療有效量的至少一種上述IDO抑制劑。
本發(fā)明可以治療的癌癥包括，但不限于前列腺、結(jié)直腸、胰腺、子宮頸、胃、子宮內(nèi)膜、腦、肝臟、膀脫、卵巢、睪丸、頭部、頸部、皮膚(包括黑素瘤和基底細(xì)胞癌)、間皮層、白細(xì)胞(包括淋巴瘤和白血病)、食道、乳腺、肌肉、結(jié)締組織、肺(包括小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞癌)、腎上腺、甲狀腺、腎臟、或骨；亦包括如下腫瘤成神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、間皮瘤、腎細(xì)胞癌、胃癌、肉瘤、絨毛膜癌、皮下基底細(xì)胞癌、以及睪丸精原細(xì)胞瘤。
III.癌癥治療的聯(lián)合療法本發(fā)明提供治療抑制的其他方法。按照本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，IDO抑制劑和STI的組合對(duì)于抑制腫瘤生長(zhǎng)具有協(xié)同作用。因而，本發(fā)明提供一種在患者中治療癌癥的藥物組合物，該組合物在藥學(xué)可接受載體中含有至少一種IDO抑制劑與至少一種STI。還提供一種在患者中治療癌癥的方法，該方法通過(guò)施用有效量的至少一種IDO抑制劑和至少一種STI。適合的IDO抑制劑包括任何任何具有IDO抑制活性的化合物。如上所述，適合的STIs包括，但不限于(i)bcr/abl激酶抑制劑，如STI 571(格列衛(wèi)，Gleevec)及其衍生物；(ii)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體抑制，如激酶抑制劑(lressa，SSI-774)以及抗體(ImcloneC225[Goldstein等.(1995)，Clin Cancer Res..11311-1318]，和AbgenixABX-EGF)；(iii)her-2/neu受體抑制劑如赫賽汀TM(曲妥珠單抗)、以及法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)如L-744,832(Kohl等(1995)，Nat Med.1(8)792-797)；(iv)Akt激酶抑制劑或Akt通路阻滯劑，如雷怕霉素(參見(jiàn)Sekulic等(2000)CancerRes.603504-3513)；(v)細(xì)胞周期激酶抑制劑，如flavpiridol和UCN-01(參見(jiàn)Sausville(2003)Curr.Med.Chem.抗癌藥物347-56)；(vi)磷脂酰肌醇肌酶抑制劑，如LY294002(參見(jiàn)Vlahos等.(1994)J.Biol.Chem.2695241-5248)。
至少一種IDO抑制劑可選自下列的化合物i)以往證實(shí)具有IDO抑制活性的化合物，包括，但不限于1-甲基-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)、表沒(méi)食子兒茶酚沒(méi)食子酸(LKT實(shí)驗(yàn)室)、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙氧甲酰-β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉；ii)已發(fā)現(xiàn)具有IDO抑制活性且適用于本申請(qǐng)的化合物，但其抗腫瘤作用尚未確定，如苯基-TH-DL-trp(3-(N-苯基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、丙烯基-TH-DL-trp(3-(N-烯丙基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)以及甲基-TH-DL-trp(3-(N-甲基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)。在某些實(shí)施方式中，一組IDO抑制劑可以另外包括那些已發(fā)現(xiàn)具有IDO抑制活性、適用于本申請(qǐng)且已被用作抗腫瘤劑的化合物，其包括，但不限于brassinin、5-甲基-brassinin、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)以及吲哚-3-甲醇(I3C)。
依照本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
，可同時(shí)或順序給予患者IDO抑制劑和至少一種STI。換言之，首先施用至少一種IDO抑制劑，或者至少一種IDO抑制劑和至少一種STI可以同時(shí)給藥。此外，當(dāng)施用不止一種的IDO抑制劑和/或STI時(shí)，則化合物可以以任何順序給藥。
適合本發(fā)明聯(lián)合方案治療的癌癥包括，但不限于上文所述腫瘤類(lèi)型。
除IDO之外，已知其他分子物質(zhì)亦參與免疫調(diào)節(jié)機(jī)制。這些其他分子也可能成為抑制癌癥患者中腫瘤生長(zhǎng)的靶分子。據(jù)此，本發(fā)明提供了癌癥治療的聯(lián)合方法，該方法通過(guò)施用至少一種除IDO抑制劑之外的免疫調(diào)節(jié)劑，并聯(lián)用至少一種化療藥物。本發(fā)明中可以采用的免疫調(diào)節(jié)劑包括，但不限于共刺激分子，如CD40L、B7以及B7RP1；與共刺激受體結(jié)合的活性單克隆抗體(mAbs)，如抗-CD40、抗-CD38、抗-ICOS以及4-IBB配體；樹(shù)突狀細(xì)胞抗原載荷(體外或體內(nèi))樹(shù)突細(xì)胞癌疫苗；細(xì)胞因子/化學(xué)因子，如IL1、IL2、IL12、IL18、ELC/CCL19、SLC/CCL21、MCP-1、IL-4、IL-18、TNF、IL-15、MDC、IFNa/b、M-CSF、IL-3、GM-CSF、IL-13、以及抗IL-10；細(xì)菌脂多糖(LPS)；免疫刺激性寡核苷酸，如多聚CpG DNA(參見(jiàn)Verthelyi和Zeuner(2003)Tr.Immunol.24519-522)。適宜的化療藥物包括但不限于下述化療藥物，而信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)則如上所述。
在本發(fā)明中，也已發(fā)現(xiàn)IDO抑制劑和化療藥物的聯(lián)合可協(xié)同抑制腫瘤生長(zhǎng)。因而，本發(fā)明提供一種在需要其的患者中治療癌癥的藥物組合物，其中在藥學(xué)可接受載體中包含至少一種IDO抑制劑與至少一種化療藥物。本發(fā)明還提供一種在患者中治療癌癥的方法，該方法通過(guò)施用有效量的至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。適合的IDO抑制劑包括任何具IDO抑制活性的任何化合物。適當(dāng)?shù)幕熕幬锇?，但不限于紫杉?泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酸胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
至少一種IDO抑制劑可選自i)前述的已知IDO抑制劑；ii)前述的已發(fā)現(xiàn)具IDO抑制活性并適用于本申請(qǐng)的化合物。在某些實(shí)施方式中，一組IDO抑制劑可以另外包括發(fā)現(xiàn)具IDO抑制活性、適用于本申請(qǐng)且其已被用作抗腫瘤劑的化合物，包括，但不限于brassinin、5-甲基-brassinin、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)以及吲哚-3-甲醇(I3C)。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，可同時(shí)或順序?qū)⒅辽僖环NIDO抑制劑與至少一種STI施用給患者。換言之，首先施用至少一種IDO抑制劑，或者至少一種IDO抑制劑和至少一種STI可以同時(shí)給藥。此外，當(dāng)不止一種的IDO抑制劑和/或STI給藥時(shí)，則化合物可以以任何順序給藥。
適合本發(fā)明聯(lián)合方案治療的癌癥包括，但不限于上文所述腫瘤類(lèi)型。
IV.慢性病毒性感染治療的聯(lián)合療法本發(fā)明還提供一種治療慢性病毒性感染的方法，該方法通過(guò)施用IDO抑制劑與化療藥物。另外，該方法還包括聯(lián)合施用抗病毒劑(即用于治療病毒性傳染病的藥物)和IDO抑制劑和化療藥物。
因而，本發(fā)明提供治療患者中的慢性病毒感染的藥物組合物，其中在藥學(xué)可接受載體中包括至少一種IDO抑制劑、至少一種癌癥治療藥物，并且選擇性地含有至少一種抗病毒劑。還提供一種治療慢性病毒性感染的方法，該方法通過(guò)施用有效量的至少一種IDO抑制劑，并聯(lián)用至少一種化療藥物，同時(shí)選擇性地施用至少一種抗病毒劑。
至少一種IDO抑制劑可以選自i)前述的已知I DO抑制劑；ii)前述的已發(fā)現(xiàn)具IDO抑制活性并適用于本申請(qǐng)的化合物。在某些實(shí)施方式中，一組IDO抑制劑可以另外包括已發(fā)現(xiàn)具IDO抑制活性、適用于本申請(qǐng)且其已被用作抗腫瘤劑的化合物，包括，但不限于brassinin、5-甲基-brassinin、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)及吲哚-3-甲醇(I3C)。
適宜的化療藥物為所有具有抗癌活性的化合物，包括但不限于烷化劑(氮芥類(lèi)，如苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、isofamide、二氯甲基二乙胺、左旋苯丙氨酸氮芥、以及尿嘧啶氮芥；氮丙啶類(lèi)，如三胺硫磷；甲磺酸酯類(lèi)，如白消安；亞硝基尿素類(lèi)，如卡氮芥、環(huán)己亞硝脲、以及鏈脲霉素；鉑復(fù)合劑，如順鉑和卡鉑；生物還原性烷化劑，如絲裂霉素、甲芐肼、甲氮咪胺、以及六甲基密胺)；DNA解鏈劑(如博來(lái)霉素)；II型拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(如安吖啶、更盛霉素、紅比霉素、伊達(dá)比星、二羥基蒽酮、阿霉素、足葉乙甙、以及替尼泊甙)；DNA小溝結(jié)合劑(如普卡霉素)；抗代謝物(葉酸拮抗劑，如氨甲蝶呤和三甲曲沙；嘧啶拮抗劑，如氟尿嘧啶、氟脫氧尿嘧啶核苷、CB3717、阿扎胞苷、阿糖胞苷、以及氟尿苷；嘌呤拮抗劑，如巰基嘌呤、6-硫鳥(niǎo)嘌呤、氟達(dá)拉濱、噴司他丁；天門(mén)冬酰胺酶；核苷酸還原酶抑制劑，如羥基脲)；微管蛋白反應(yīng)劑(如長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、以及紫杉醇(泰素))；激素類(lèi)(如雌激素；妊馬雌酮；動(dòng)情素；己烯雌酚；chlortrianisen；idenestrol；孕酮類(lèi)，如羥孕酮己酸酯、安宮黃體酮、以及甲地孕酮；男性激素類(lèi)，如辜丸素、丙酸辜丸素、氟甲辜酮、以及甲基辜丸素)；腎上腺皮質(zhì)激素(如強(qiáng)的松、地塞米松、甲基強(qiáng)的松龍、以及氫化潑尼松)；黃體化激素釋放劑、或促性腺激素釋放因子拮抗劑(如亮丙瑞林醋酸鹽和戈舍瑞林醋酸鹽)；抗激素抗原(三苯氧胺、抗雄激素藥如氟他胺；抗腎上腺素藥，如米托坦和氨魯米特)。優(yōu)選地，該化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
適宜的抗病毒劑包括，但不限于阿昔洛韋；gangcyclovir；膦甲酸；病毒唑；抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥，如核苷類(lèi)似物逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(如疊氮胸腺嘧啶(AZT)、地丹諾辛、扎西他賓、拉米夫定、司他呋啶)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(如希寧、奈韋拉平)、核苷類(lèi)似物逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、以及蛋白酶抑制劑。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，可同時(shí)或順序給患者施用至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。換言之，可以首先施用至少一種IDO抑制劑，或首先施用至少一種化療藥物，或者同時(shí)施用至少一種IDO抑制劑和至少一種STI。此外，若施用一種以上的IDO抑制劑和/或化療藥物時(shí)，化合物可以以任意雌性給藥。同樣地，可隨時(shí)加用抗病毒劑。
這種聯(lián)合治療中的化合物還可以用于局部感染。特別是，至少一種IDO抑制劑、至少一種化療藥物、并可選用至少一種抗病毒劑，可以施用來(lái)治療皮膚感染，如帶狀皰疹和疣。這類(lèi)化合物可通過(guò)藥學(xué)可接受的局部載體給藥，包括但不限于凝膠、乳劑、洗劑、油膏、粉劑、氣溶劑、以及其他輔助皮膚給藥的常規(guī)劑型。
本發(fā)明的聯(lián)合療法可以治療的慢性病毒性感染包括，但不限于因下列因素而導(dǎo)致的疾病乙性肝炎病毒(HCV)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒(HSV)、非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒、柯薩奇病毒、以及人體免疫缺陷病毒(HIV)。
值得注意的是，上述方法亦適用于治療寄生蟲(chóng)感染(如瘧疾)，其中已知用于治療寄生蟲(chóng)病的化合物以任選地替代抗病毒劑。
V.藥物組合物和化合物的給藥本發(fā)明的藥物組合物可以通過(guò)任何適合的途徑給藥，例如通過(guò)注射、口服、經(jīng)肺、鼻給藥或其他給藥方式。通常，本發(fā)明的藥物組合物含有藥學(xué)可接受的稀釋劑、防腐劑、增溶劑、乳化劑、佐劑和/或載體介質(zhì)。所述的組合物包括不同緩沖物(如三羥甲基氨基甲烷-鹽酸(Tris-HCL)、醋酸鹽、磷酸鹽)、Ph及離子濃度的稀釋劑；添加劑，如洗滌劑和增溶劑(如Tween 80、聚山梨醇酯80)、抗氧化劑(如抗壞血酸、偏亞硫酸氫鈉)、防腐劑(如汞、苯甲醇)以及膨脹劑(如乳糖、甘露醇)。該藥物組合物可摻雜到多聚化合物如聚乳酸、聚羥基乙酸等的微粒制劑或脂質(zhì)體中。此類(lèi)組合物藥物組合物可以影響本發(fā)明藥物組合物的成分的物理狀態(tài)、穩(wěn)定性、體內(nèi)釋放率以及體內(nèi)清除率。可參見(jiàn)，Remington’s Pharmaceutical Sciences第18版(1990，Mack出版公司，Easton，PA 18042)第1435～1712頁(yè)部分。本發(fā)明的藥物組合物可制備成液體或干粉劑型(如凍干粉)。藥物組合物給藥的具體途徑如上所述。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物組合物可以通過(guò)控釋系統(tǒng)給藥，例如采用靜脈內(nèi)灌輸、可植入滲透泵、透皮貼劑、脂質(zhì)體，或其他給藥方式。在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，可以采用泵式給藥方式(參見(jiàn)Langer，如上；Sefton，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.(1987)14201；Buchwald等，Surgery(1980)88507；Saudek等，N.Engl.J.Med.(1989)321574)。在另一實(shí)施方式中，可使用多聚材料給藥(參見(jiàn)Medical Applications of Controlled Releas，Langer和Wise(eds.)，CRC出版社Boca Raton，佛羅里達(dá)(1974)；控釋藥物的生物利用度，藥品的發(fā)明與效用，Smolen和Ball(eds.)，Wiley紐約(1984)；Ranger和Peppas，J.Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.，(1983)2361；亦可參見(jiàn)Levy等，Sciencs(1985)228190；During等，Ann.Neurol.(1989)25351；Howard等，J.Neurosurg.(1989)71105)。在另一具體實(shí)施方式
中，可將藥物控釋系統(tǒng)置于動(dòng)物的靶組織近端；這樣使給藥劑量?jī)H是系統(tǒng)給藥的一部分(參見(jiàn)Goodson，受控釋放技術(shù)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用，如上，(1984)vol.2，pp.115-138)。特別是，可以將控釋裝置引入到動(dòng)物體內(nèi)的適當(dāng)激活或腫瘤的近端處。有關(guān)其他控釋系統(tǒng)的論述參見(jiàn)Langer的綜述(Scienc(1990)2491527-1533)。
提供下列實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的多種實(shí)施方式。這些實(shí)施例不以任何方式限定本發(fā)明。
實(shí)施例1新型IDO抑制劑的評(píng)價(jià)1.新型IDO抑制劑生化特性的評(píng)價(jià)概述IDO的生物化學(xué)目前已清楚，此酶類(lèi)已于1963年被首次分離。(Higuchi，K.等(1963)Federation proc.22243(摘要)；Shimizu，T.等.(1978)J.Biol.Chem.2534700-6)。IDO為一種單體型、含血紅素的氧化還原酶，其分子量約為41kDa。為保持體外催化過(guò)程中的活性亞鐵形式，需要使用亞甲藍(lán)與過(guò)氧化物或還原劑(如抗壞血酸)。在體內(nèi)，建議黃素或四氫生物蝶呤可替代亞甲藍(lán)進(jìn)行染色，并且可能存在非競(jìng)爭(zhēng)性IDO抑制劑的特異性位點(diǎn)。哺乳動(dòng)物基因經(jīng)克隆化及組氨酸標(biāo)記可在細(xì)菌內(nèi)表達(dá)，可產(chǎn)生活性酶類(lèi)(Littlejohn，T.K.等(2000)Prot.Exp.Purif.1922-29)。這為酶的生物化學(xué)分析提供了方便的來(lái)源。在采用光度法的常規(guī)IDO活性生化分析中對(duì)由色氨酸轉(zhuǎn)化生成的犬尿氨酸(N-甲酸基-犬尿氨酸的水解產(chǎn)物)進(jìn)行測(cè)定，該生化分析可在酶水平及細(xì)胞水平進(jìn)行。該酶水平分析為鑒定具有IDO抑制活性的化合物提供了靈活、高通量的方法。該分析方法亦可用于測(cè)定特殊化合物的Ki值，其對(duì)于不同化合物系列的SAR的開(kāi)發(fā)具有重要意義。細(xì)胞水平分析可用于測(cè)定已知化合物的IDO抑制活性，并且達(dá)到對(duì)生物利用度-即化合物對(duì)細(xì)胞內(nèi)IDO的抑制能力的初始遴選。在細(xì)胞水平分析中，可通過(guò)色氨酸雙氧酶(TDO，亦有文獻(xiàn)稱(chēng)TDO2)與其他已知色氨酸異化酶的對(duì)比，進(jìn)行IDO抑制作用的測(cè)定。
方法目前已分離出人類(lèi)及小鼠IDO的cDNA克隆物并通過(guò)測(cè)序檢驗(yàn)。為了制備生物化學(xué)研究中的酶，使用IPTG誘導(dǎo)pET5a載體系統(tǒng)在大腸桿菌內(nèi)合成C末端His-標(biāo)記的IDO蛋白質(zhì)，并通過(guò)鎳柱進(jìn)行分離。采用凝膠電泳法對(duì)部分純化蛋白的產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定，而且可通過(guò)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比測(cè)算出其濃度。為檢測(cè)IDO的酶活性，按照已公開(kāi)的檢測(cè)方法(Littlejohn，T.K.等(2000)Prot.Exp.Purif.1922-29；Takikawa，O.等.(1988)J.Biol.Chem.2632041-8)，采用96孔板光度法測(cè)定生成的犬尿氨酸，從而可檢測(cè)IDO酶活性。為篩選IDO抑制活性的證據(jù)，可將單一濃度如200μM的化合物與50ng的IDO酶混合達(dá)到100μl反應(yīng)體積，并且加入濃度遞增(0、2、20和200Mm)的色氨酸。1小時(shí)后可以對(duì)生成的犬尿氨酸進(jìn)行檢測(cè)。可收集更多酶動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)，以便選取感興趣的化合物。有關(guān)1MT的最適Ki值(34.6μM)及MTH-色氨酸的最適Ki值(11.4μM)的測(cè)定，如圖1A與1B所示。這些數(shù)據(jù)表明，硫代乙內(nèi)酰脲可直接抑制DOI酶活性，與1MT相比，該抑制作用強(qiáng)3倍左右。
下列方法是細(xì)胞水平分析的實(shí)例。采用廠商推薦的Lipofectamine 2000(lnvitrogen)用表達(dá)IDO cDNA的CMV啟動(dòng)子誘導(dǎo)質(zhì)粒使COS-1細(xì)胞發(fā)生暫時(shí)性轉(zhuǎn)染。用TDO表達(dá)質(zhì)粒暫時(shí)性轉(zhuǎn)染伴隨(campanion)系列的細(xì)胞。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后將該細(xì)胞分配至96孔板格，每孔含6×104個(gè)細(xì)胞。次日，沖洗孔板并加入含20μg/ml色氨酸的新培養(yǎng)基(無(wú)酚紅)和抑制劑。5小時(shí)后中止該反應(yīng)，棄去上清液，采用與酶檢測(cè)相同的光度法檢測(cè)犬尿氨酸水。(Littejohn，T.K.等.(2000)Prot.Exp.Purif.1922-29；Takikawa，O.等.(1988)生物化學(xué)雜志.2632041-8)。為獲得對(duì)IDO活性的初始證實(shí)，可對(duì)單一濃度例如100Mm的化合物進(jìn)行評(píng)估。收集所選化合物的更多劑量增高的性能。有關(guān)1MT的EC50值(EC50＝267μM)及MTH-色氨酸的EC50值(EC50＝12.9μM)的測(cè)定如圖2所示。這些數(shù)據(jù)表明，與1MT相比，MTH-色氨酸對(duì)細(xì)胞內(nèi)IDO的抑制作用更強(qiáng)，約為前者20倍。
2.本申請(qǐng)中發(fā)現(xiàn)具有IDO抑制活性的化合物的藥效學(xué)/藥動(dòng)學(xué)的評(píng)價(jià)概況細(xì)菌脂多糖(LPS)的腹膜內(nèi)給藥誘發(fā)多種組織中的IDO活化，從而生成犬尿氨酸并釋放入血液中(圖3)。給予LPS1天后犬尿氨酸水平可達(dá)峰值(Takikawa，O.等.(1986)H.Biol.Chemm.2613648-53；Yoshida，H等(1998)Cell 94739-750)?；跈z測(cè)犬尿氨酸和色氨酸的血清水平，進(jìn)行藥效學(xué)分析。計(jì)算犬尿氨酸/色氨酸的比值以評(píng)價(jià)IDO活性，該活性與基線色氨酸水平無(wú)關(guān)(Fuchs.D.等(1991)Immunol.Lett.28207-11；Gasse，T等(1994)Eur.J.Clin.Chem.Clin Biochem.32685-9)，并且這種IDO活性的檢測(cè)方法常用于人體。與組織中IDO酶活性的直接檢測(cè)相比，這種方法的主要優(yōu)點(diǎn)在于它是非侵入過(guò)程，能夠從同一動(dòng)物采集多個(gè)樣本。通過(guò)這種方法可確保在多時(shí)間點(diǎn)對(duì)單個(gè)小鼠進(jìn)行IDO活性檢測(cè)。采用HPLC分析法可以檢測(cè)色氨酸和犬尿氨酸的血清水平?；衔锏难鍧舛纫部梢栽诓捎孟嗤琀PLC方法測(cè)定，由此在單次試驗(yàn)中同步采集藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)。
方法由于其遺傳背景與在乳腺腫瘤模型中用于評(píng)價(jià)化合物效價(jià)的MMTV-neu雌性小鼠相同，F(xiàn)VB MMTV-neu雄性小鼠(8～10周齡)可被利用進(jìn)行藥效學(xué)分析。對(duì)來(lái)自不同菌株的LPS制劑進(jìn)行比較分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，沙門(mén)氏菌屬明尼蘇達(dá)突變株R-595(S.mimesotaR)誘發(fā)的LPS可導(dǎo)致高度持續(xù)水平的犬尿氨酸誘導(dǎo)作用(Yoshida，R.等.(1981)Arch.Biochem.Biophys.212629-37)。由于它為評(píng)估IDO抑制劑的效果提供了最寬的視窗，因此該LPS制劑可用于藥效學(xué)分析。有報(bào)道，誘發(fā)最大IDO活性的S.minnesota R LPS的最小靜脈內(nèi)注射劑量為～1mg/kg，并且在采用LPS治療～24小時(shí)后，IDO活性可達(dá)到最大(Yoshida，R.等.(1981)Arch.Biochem.Biophys..212629-37)。
通過(guò)HPLC分析法可對(duì)犬尿氨酸和色氨酸的血清水平進(jìn)行定量檢測(cè)(Hwu.P.等(2000)J Immunol 1643596-9；Widner，B等(1997)Clin.Chem.432424-6；圖4A-4D)。通過(guò)這種方法，測(cè)得犬尿氨酸的血清濃度至少為1.25μM，色氨酸至少為3μM。對(duì)于未受刺激的FVB雄性小鼠，其體內(nèi)犬尿氨酸血清水平處于或低于檢測(cè)限，而色氨酸的水平很容易測(cè)出，為50μM(圖4B)。LPS刺激后24小時(shí)，誘使血清犬尿氨酸水平達(dá)到～6μM(圖4C)。1MT在血清中的濃度至少為5μM時(shí)也可有效檢測(cè)出。當(dāng)所使用1MT的生物有效劑量達(dá)2×140mg 1MT藥丸時(shí)其血清水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于～100μM(圖4D)。
對(duì)化合物進(jìn)行評(píng)估首先需施加LPS刺激，隨后當(dāng)犬尿氨酸血清水平處于平臺(tái)期時(shí)給予快速濃注劑量的化合物。由于犬尿氨酸在血清中的半衰期少于10分鐘，故其水平會(huì)迅速下降(Bender和McCreanor(1982)Biochim.Biophys.Acta.71756-60；Takikawa，O.等(1986)J.Biol.Chem.2613648-53)，因此預(yù)存在的犬尿氨酸不被認(rèn)為會(huì)過(guò)度掩蓋抑制IDO對(duì)犬尿氨酸生成的影響效果。對(duì)給藥載體的選擇主要取決于化合物的物理特性。優(yōu)選的載體為等滲鹽水，但要求化合物可溶于水溶液。若預(yù)知某些化合物無(wú)法充分溶解，在這種情況下可使用Methocel或Tween的懸浮液(0.5％甲基纖維素或1％Tween80)。
各試驗(yàn)中可以選用非LPS暴露的小鼠進(jìn)行試驗(yàn)(以測(cè)定犬尿氨酸的基線水平，從而與其他小鼠相對(duì)比)和僅給予載體的LPS暴露的小鼠(為IDO活性提供陽(yáng)性對(duì)照)。給予小鼠LPS后對(duì)其進(jìn)行監(jiān)測(cè)，若出現(xiàn)明顯的內(nèi)毒素血癥的跡象(如毛皮皺褶、呆滯)應(yīng)立即對(duì)其施行安樂(lè)死。各化合物可以首先在小鼠中以至少100mg/kg的單次i.p.高給藥劑量進(jìn)行評(píng)估。在規(guī)定時(shí)間間隔(例如，施用化合物后5、15、30分鐘、1、2、4、6、8、24小時(shí))內(nèi)采集血樣(每份50μl)，通過(guò)HPLC檢測(cè)犬尿氨酸和色氨酸水平(藥效學(xué)分析)，并且檢測(cè)化合物的水平(藥動(dòng)學(xué)分析)。根據(jù)藥動(dòng)學(xué)資料，可測(cè)定化合物的峰血清濃度，并可計(jì)算清除率。通過(guò)比較不同時(shí)間點(diǎn)的化合物血清水平與犬尿氨酸/色氨酸的比值，可粗算出IDO體內(nèi)抑制時(shí)的有效IC50值。
基于單劑量研究的結(jié)果，可以對(duì)各有效化合物進(jìn)行第二次的劑量增加研究。例如，該研究的目標(biāo)可以是，在一組小鼠試驗(yàn)中給藥濃度達(dá)峰值(若可能)并產(chǎn)生100％IDO抑制，從而達(dá)到最大給藥劑量，在另一組試驗(yàn)中，給藥濃度以3倍量減小，從而覆蓋了最大劑量與最小劑量之間的2log10范圍。通過(guò)上述數(shù)據(jù)可精確測(cè)定IC50。該方法同樣可以用來(lái)測(cè)試生物活性化合物的口服生物利用度，首先測(cè)試各化合物p.o.給藥劑量的單次最大濃度，然后進(jìn)一步評(píng)估化合物在劑量增加研究中表現(xiàn)的顯著口服功效。為確保藥物體內(nèi)反應(yīng)性與兩性性別無(wú)關(guān)，可對(duì)雌性小鼠進(jìn)行單劑量i.p.給藥試驗(yàn)，各活性化合物的給藥劑量為IC50。
實(shí)施例2IDO抑制劑與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑的聯(lián)合應(yīng)用治療腫瘤使用乳腺癌的MMTVneu轉(zhuǎn)基因“乳癌小鼠(oncomouse)”模型來(lái)檢測(cè)IDO抑制劑與STI對(duì)腫瘤病理生理的影響。使MMTVneu轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)展為侵襲性乳腺腫瘤，它與分化不良的人導(dǎo)管癌相類(lèi)似。在該MMTVneu小鼠模型中，通過(guò)HER-2/Neu基因突變體的組織特異性表達(dá)來(lái)誘發(fā)乳腺癌，患侵襲性人乳腺導(dǎo)管癌時(shí)該基因常處于激活狀態(tài)。HER-2屬于細(xì)胞表面生長(zhǎng)因子受體EGF-R家族的一員。Myc為HER-2Neu的下游效應(yīng)物，可誘發(fā)癌癥。使雌性MMTVneu“乳癌小鼠”交配兩次，以誘發(fā)小鼠乳腺腫瘤病毒(MMTV)啟動(dòng)子的表達(dá)；該啟動(dòng)子可誘發(fā)乳腺組織中Neu/HER2致癌基因的轉(zhuǎn)錄。在該模型系統(tǒng)中5月齡的小鼠乳腺腫瘤的出現(xiàn)率超過(guò)90％。將帶有～150mm3瘤大小的MMTVneu“乳癌小鼠”隨機(jī)分組為對(duì)照組和試驗(yàn)處理組。為對(duì)照組小鼠植入安慰劑型定時(shí)釋放藥丸(Innovative Research，Inc.，Sarasota，F(xiàn)L)。試驗(yàn)組的小鼠是(1)植入含1MT的定時(shí)釋放藥丸，(2)用L-744，832處理，或(3)植入含1MT定時(shí)釋放的藥丸，并用L-744，832處理。L-744，832為一種強(qiáng)效、選擇性法呢基轉(zhuǎn)移酶(FTI)抑制劑，其模擬增加了法呢基的CaaX基序(Kohl等，(1995)Nat Med.1(8)747-748)。
該定時(shí)釋放藥丸含一種可逐漸溶解、分解成無(wú)毒物質(zhì)的惰性共聚物，該無(wú)毒物質(zhì)在試驗(yàn)過(guò)程中主要呈局部分布。該含有1MT的緩釋藥丸釋放劑量為10mg/天(據(jù)藥品銷(xiāo)售方稱(chēng))，可持續(xù)釋放14天(Innovative Research，Inc.，Sarasota，F(xiàn)L)。給每只小鼠植入2粒藥丸，從而釋放20mg/天的總劑量。因而，對(duì)于一只25g小鼠來(lái)說(shuō)總劑量為800mg/kg/天或280mg持續(xù)14天。依照廠商的說(shuō)明書(shū)，在12～24小時(shí)內(nèi)達(dá)到達(dá)到穩(wěn)態(tài)水平，并維持于整個(gè)試驗(yàn)期間。該給藥劑量有效誘導(dǎo)同種異體孕體排斥(A.Muller，J.B.DuHadaway.G.C.Prendergast，試驗(yàn)結(jié)果未發(fā)表)，亦如Munn等所述(Science2811199-1193，1998)。
將小鼠肌肉注射氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉后在其背部皮下植入該定時(shí)釋放藥丸。使用止血鉗進(jìn)行鈍性解剖，將皮膚與下層肌肉分離，形成皮下袋狀間隙。將1或2個(gè)可生物降解的定時(shí)釋放藥丸植入該間隙內(nèi)，而非直接置于切口下方，以防止產(chǎn)生機(jī)械壓力以及傷口裂開(kāi)。用縫合夾將切口封閉?；谳d有安慰劑型定時(shí)釋放藥片的雌性小鼠仍具有懷孕能力，因而試驗(yàn)干預(yù)所產(chǎn)生的不利影響可忽略不計(jì)。
有關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑，如FTI L-744，832的制備及給藥方式，如Kohl等所述(Nature Med.(1995)1792-797)。
圖5表示測(cè)試1MT與FTI L-744，832的協(xié)同作用的試驗(yàn)中的發(fā)現(xiàn)，這在MMTVneu“乳癌小鼠”模型中導(dǎo)致已確立腫瘤的退化。在2周的試驗(yàn)期間發(fā)現(xiàn)，模擬處理的對(duì)照組小鼠的腫瘤體積增大200％。通過(guò)皮下定時(shí)釋放藥丸釋放的20mg/天1MT處理小鼠，可減緩但無(wú)法阻止腫瘤生長(zhǎng)。同樣地，用FTI L-744，832處理荷瘤小鼠也減緩但無(wú)法阻止腫瘤生長(zhǎng)。相反，1MT與L-744，832的聯(lián)合可使模型中的腫瘤退化。
實(shí)施例3新型IDO抑制劑按照作為IDO抑制劑的功效篩選多種化合物。采用下面的生物化學(xué)分析法對(duì)某些化合物進(jìn)行篩選。IDO cDNAs可在細(xì)菌內(nèi)表達(dá)，合成組氨酸標(biāo)記蛋白并且經(jīng)純化處理，方法同前(Littlejohn等.(2000)Prot.Exp.Purif.1922-29)。簡(jiǎn)言之，經(jīng)純化IDO與底物以及不同量的IDO抑制劑候選物一起培養(yǎng)。由于反應(yīng)產(chǎn)物犬尿氨酸具有熒光性，故可通過(guò)測(cè)定反應(yīng)混合物的熒光度，確定后續(xù)抑制劑的功效。有關(guān)采用體外生化法進(jìn)行篩選的結(jié)果，如圖6所示。
亦可通過(guò)細(xì)胞水平分析對(duì)候選化合物進(jìn)行篩選(有關(guān)類(lèi)似分析法可參見(jiàn)Munn等.(1999)J.Exp.Med..1891363-1372)。簡(jiǎn)言之，用人IDO或TDO Cdna表達(dá)載體暫時(shí)轉(zhuǎn)染人293/Phoenix細(xì)胞。將不同濃度的候選化合物加入到該轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。使用熒光法對(duì)組織培養(yǎng)基中的犬尿氨酸進(jìn)行定量測(cè)定。這些試驗(yàn)的結(jié)果參見(jiàn)圖7～9。
如圖所示，經(jīng)確認(rèn)的最有效抑制劑為吲哚胺的硫代乙內(nèi)酰脲衍生物。圖8顯示采用這類(lèi)特定抑制劑的試驗(yàn)結(jié)果。其中這些抑制劑中效力最強(qiáng)的為甲基-TH-DL-色氨酸，其IDO活性的抑制作用為1MT(濃度為250Mm)的2.7倍(圖9)。
除吲哚胺的硫代乙內(nèi)酰脲衍生物之外，亦可對(duì)天然物質(zhì)進(jìn)行篩選。有趣的是，其中篩選出的有效抑制劑使來(lái)自具有抗癌特性食物(如十字花科蔬菜)的化合物。Brassinin是一種發(fā)現(xiàn)于大白菜的化合物，在測(cè)定IDO抑制劑的天然產(chǎn)物中，其效力最強(qiáng)(圖7A)。
另外應(yīng)對(duì)某些經(jīng)篩選的化合物進(jìn)行毒性檢測(cè)。如圖10所示，大多數(shù)IDO抑制性化合物本身對(duì)于經(jīng)致癌轉(zhuǎn)化的乳腺癌或前列腺癌細(xì)胞并無(wú)生長(zhǎng)抑制或毒性作用(圖10)。
實(shí)施例4IDO抑制劑與細(xì)胞毒化療藥物聯(lián)合應(yīng)用治療腫瘤采用MMTVneu轉(zhuǎn)基因“乳癌小鼠”模型來(lái)檢測(cè)IDO抑制劑與細(xì)胞毒化療藥物在腫瘤病理生理的影響。
將帶有150mm3大小的腫瘤的MMTVnet“乳癌小鼠”隨機(jī)分組為對(duì)照組和試驗(yàn)治療組。對(duì)照小鼠植入安慰劑型定時(shí)釋放藥丸(InnovativeResearch，Inc.，Sarasota，F(xiàn)L)。試驗(yàn)組的小鼠為(1)植入含1MT的定時(shí)釋放藥丸，如實(shí)施例2所述，(2)用紫杉醇(泰素)或其他細(xì)胞毒藥物處理，或(3)植入含1MT的定時(shí)釋放藥丸，并給予紫杉醇或其他細(xì)胞毒藥物。
給小鼠背部皮下植入定時(shí)釋放藥丸，方法如實(shí)施例2所述。
細(xì)胞毒化療藥物的制備及給藥過(guò)程，如下所述。將紫杉醇溶解于同體積的無(wú)水乙醇和臨床用作增溶劑的CremophorEL。該溶液經(jīng)超聲處理30分鐘，然后將此20mg/ml貯存液在4℃下放置1周。使用之前，用無(wú)菌生理鹽水將溶液稀釋成1∶5。給小鼠靜脈內(nèi)(經(jīng)尾靜脈)單劑量注射如上方式配制的紫杉醇?？深A(yù)先對(duì)小鼠尾部進(jìn)行溫?zé)崽幚碛兄诒孀R(shí)靜脈并進(jìn)行靜脈內(nèi)注射。在2周試驗(yàn)中，紫杉醇最大耐受劑量(MTD)為13.3mg/kg，可分5次給藥，每周給藥3次(即周五植入藥丸；周一/周三/周五，周一/周三注射紫杉醇；周五處死動(dòng)物，進(jìn)行腫瘤分析)。順鉑的MTD(1mg/kg)是在臨床中經(jīng)鹽水制備獲得，并且其靜脈內(nèi)注射給藥方式相同。對(duì)照處理的小鼠僅接受不含紫杉醇的CremophorEL載體制劑。
在圖11與表1中對(duì)1MT試驗(yàn)的發(fā)現(xiàn)進(jìn)行了概括，該試驗(yàn)對(duì)1MT與兩種細(xì)胞毒藥物在MMTVneu“乳癌小鼠”模型中協(xié)同作用導(dǎo)致已有腫瘤的退化(有關(guān)其他化療藥物可參見(jiàn)圖5)。在2周的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，模擬處理的對(duì)照小鼠的腫瘤體積增加200％。通過(guò)皮下定時(shí)釋放藥丸給予的20mg/天1MT處理小鼠，可減緩但無(wú)法阻止腫瘤生長(zhǎng)。同樣地，給帶有腫瘤的小鼠靜脈內(nèi)注射紫杉醇或順鉑處理達(dá)最大耐受劑量也可減緩但無(wú)法阻止腫瘤生長(zhǎng)。相反，1MT與紫杉醇或順鉑的組合使模型中的腫瘤退化。當(dāng)紫杉醇減少至MTD的～25％時(shí)亦可獲得類(lèi)似結(jié)果(未顯示相關(guān)資料)。研究中所用的細(xì)胞毒藥物對(duì)T細(xì)胞具有毒性作用，而IDO抑制劑可使T細(xì)胞恢復(fù)和活化，這些結(jié)果在現(xiàn)有技術(shù)中是無(wú)法預(yù)料的

表1對(duì)小鼠進(jìn)行處理后對(duì)MMTVneu小鼠的腫瘤進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。比較治療后與治療前的腫瘤體積得出百分比值。低于95％CL和高于95％CL代表小于和大于95％可信區(qū)間。
對(duì)取自對(duì)照組和試驗(yàn)組小鼠的腫瘤切片進(jìn)行組織學(xué)和免疫組織化學(xué)分析，結(jié)果顯示僅在給予聯(lián)合治療的小鼠試驗(yàn)組腫瘤組織出現(xiàn)明顯變化。最引入矚目的是，明顯出血、細(xì)胞調(diào)亡、以及CD3陽(yáng)性T細(xì)胞的浸潤(rùn)的證據(jù)可在接受聯(lián)合方案的小鼠中發(fā)現(xiàn)(資料未顯示)。總之，MMTVneu“乳癌小鼠”模型系統(tǒng)中1MT與細(xì)胞毒藥物的聯(lián)合應(yīng)用可有效誘導(dǎo)已有乳腺腫瘤的退化。
雖然上文已述本申請(qǐng)的某些優(yōu)選實(shí)施方式和具體實(shí)例，但其本申請(qǐng)不局限在這些實(shí)施方式。亦允許在本申請(qǐng)范圍內(nèi)對(duì)有關(guān)內(nèi)容進(jìn)行改進(jìn)，詳情參見(jiàn)如下權(quán)利要求書(shū)。
本申請(qǐng)書(shū)中引用若干出版物及專(zhuān)利文獻(xiàn)，旨在全面說(shuō)明本申請(qǐng)所屬的現(xiàn)有技術(shù)的狀況。這些引用文獻(xiàn)各自的內(nèi)容在此引入作為參考。
權(quán)利要求
1.一種在需要其的患者中治療癌癥的方法，該方法包括給該患者同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種STI選自bcr/abl激酶抑制劑、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體抑制劑、her-2/neu受體抑制劑、法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)、AKt家族激酶抑制劑或Akt通路阻滯劑以及細(xì)胞周期激酶抑制劑。
3.權(quán)利要求2的方法，其中至少一種STI亦可選自STI 571、SSI-774、C225、ABX-EGF、曲妥珠單抗、L-744，832、雷怕霉素、LY294002、flavopiridal、以及UNC-01。
4.權(quán)利要求3的方法，其中至少一種STI是L-744，832。
5.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種IDO抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷、brassinin、5-甲基-brassinin、沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶酚酯、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-trp、丙烯基-TH-DL-trp、甲基-TH-DL-trp、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙酯基-β-咔啉，以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
6.權(quán)利要求5的方法，其中至少一種I DO抑制劑是1-甲基-色氨酸(1MT)。
7.權(quán)利要求1的方法，其中同時(shí)施用至少一種IDO抑制劑和至少一種STI。
8.權(quán)利要求1的方法，其中順序施用至少一種IDO抑制劑和至少一種STI。
9.權(quán)利要求8的方法，其中至少一種IDO抑制劑是在至少一種STI之前施用。
10.權(quán)利要求8的方法，其中至少一種STI是在至少一種IDO抑制劑之前施用。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述的癌癥選自下列的癌癥前列腺、結(jié)直腸、胰腺、子宮頸、胃、子宮內(nèi)膜、腦、肝臟、膀脫、卵巢、睪丸、頭部、頸部、皮膚(包括黑素瘤和基底細(xì)胞癌)、間皮層、白細(xì)胞(包括淋巴瘤和白血病)、食道、乳腺、肌肉、結(jié)締組織、肺(包括小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞癌)、腎上腺、甲狀腺、腎臟、或骨；亦包括成神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、間皮瘤、腎細(xì)胞癌、胃癌、肉瘤、絨毛膜癌、皮下基底細(xì)胞癌、以及睪丸精原細(xì)胞瘤。
12.一種治療癌癥的藥物組合物，其中在藥學(xué)可接受載體介質(zhì)中含有治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(STI)。
13.權(quán)利要求12的藥物組合物，其中至少一種STI選自bcr/abl激酶抑制劑、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體抑制劑、hef-2/neu受體抑制劑、法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(FTI)、Akt家族激酶抑制劑或Akt通路阻滯劑、以及細(xì)胞周期激酶抑制劑。
14.權(quán)利要求13的藥物組合物，其中至少一種STI選自STI 571、SSI-774、C225、ABX-EGF、曲妥珠單抗、L-744，832、雷怕霉素、LY294002、flavopiridal、以及UNC-01。
15.權(quán)利要求13的藥物組合物，其中至少一種STI是L-744，832。
16.權(quán)利要求12的藥物組合物，其中至少一種IDO抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷、brassinin、5-甲基-brassinin、沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶酚酯、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酶、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-色氨酸、丙烯基-TH-DL-色氨酸、甲基-TH-DL-色氨酸、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β咔啉、6-異硫氨酸-3-甲酯基-β-咔琳、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙氧甲?；?β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
17.權(quán)利要求12的藥物組合物，其中至少一種I DO抑制劑為1-甲基-DL-色氨酸(1MT)。
18.一種在需要其的患者中治療癌癥的方法，該方法包括給該患者同時(shí)或順序施用治療有效量的除IDO抑制劑之外的免疫調(diào)節(jié)劑，和治療有效量的至少一種細(xì)胞毒藥物或至少一種STI。
19.權(quán)利要求18的方法，其中至少一種免疫調(diào)節(jié)劑選自CD40L，B7，B7RP1，抗CD40、抗CD38、抗ICOS、4-IBB配體、樹(shù)突狀細(xì)胞癌疫苗、IL2、IL12、ELC/CCL19、SLC/CCL21、MCP-1)、IL-4、IL-18、TNF、IL-15、MDC、IFN a/b、M-CSF、IL-3、GM-CSF、IL-13、抗IL-10、LPS、以及多聚CpG DNA。
20.權(quán)利要求18的方法，其中至少一種細(xì)胞毒化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
21.權(quán)利要求18的方法，其中至少一種STI選自STI 571、SSI-774、C225、ABX-EGF、曲妥珠單抗、L-744，832、雷怕霉素、LY294002、flavpiridal、以及UNC-01。
22.一種在需要其的患者中腫瘤慢性病毒感染的方法，該方法包括給該患者同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種化療藥物。
23.權(quán)利要求22的方法，其中該至少一種IDO抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)、brassinin、5-甲基-brassinin、沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶酚酯、5-溴-4-氯吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-色-氨酸、丙烯基-TH-DL-色氨酸、甲基-TH-DL-色氨酸、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙氧甲?；?β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
24.權(quán)利要求22的方法，其中至少一種IDO抑制劑為1-甲基-DL-色氨酸(1MT)。
25.權(quán)利要求22的方法，其中至少一種化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
26.權(quán)利要求22的方法，其中同時(shí)施用至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。
27.權(quán)利要求22的方法，其中順序施用至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中至少一種IDO抑制劑是在至少一種化療藥物之前施用。
29.權(quán)利要求27的方法，其中至少一種化療藥物是在至少一種IDO抑制劑之前施用。
30.權(quán)利要求22的方法，其中所述的慢性病毒性感染選自乙性肝炎病毒(HCV)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒、柯薩奇病毒、以及人體免疫缺陷病毒(HIV)。
31.一種治療慢性病毒性感染的藥物組合物，該組合物在藥學(xué)可接受載體介質(zhì)中含有治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種化療藥物。
32.權(quán)利要求31的藥物組合物，其中至少一種IDO的抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)、brassinin、5-甲基-brassinin、沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶酚酯、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-色氨酸、丙烯基-TH-DL-色氨酸、甲基-TH-DL-色氨酸、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙氧甲?；?β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
33.權(quán)利要求32的藥物組合物，其中至少一種IDO抑制劑為1-甲基-DL-色氨酸(1MT)。
34.權(quán)利要求31的藥物組合物，其中至少一種化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
35.一種在需要其的患者中治療癌癥的方法，該方法包括給該患者施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑抑制劑，其中該IDO抑制劑選自苯基-TH-DL-Trp(3-(N-苯基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、丙烯基-TH-DL-trp(3-(N-烯丙基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、以及甲基-TH-DL-trp(3-(N-甲基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述癌癥選自下列的癌癥前列腺、結(jié)直腸、胰腺、子宮頸、胃、子宮內(nèi)膜、腦、肝臟、膀脫、卵巢、睪丸、頭部、頸部、皮膚(包括黑素瘤和基底細(xì)胞癌)、間皮層、白細(xì)胞(包括淋巴瘤和白血病)、食道、乳腺、肌肉、結(jié)締組織、肺(包括小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞癌)、腎上腺、甲狀腺、腎臟、或骨；亦包括成神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、間皮瘤、腎細(xì)胞癌、胃癌、肉瘤、絨毛膜癌、皮下基底細(xì)胞癌、以及睪丸精原細(xì)胞瘤。
37.一種治療癌癥的藥物組合物，該組合物在藥學(xué)可接受載體介質(zhì)中含有至少一種治療有效量的吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑，其中該IDO抑制劑選自苯基-TH-DL-Trp(3-(N-苯基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、丙烯基-TH-DL-trp(3-(N-烯丙基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)、以及甲基-TH-DL-trp(3-(N-甲基-硫代乙內(nèi)酰脲)-吲哚)。
38.一種在需要其的患者中治療癌癥的方法，該方法包括同時(shí)或順序施用治療有效量的至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種化療藥物。
39.權(quán)利要求38的方法，其中至少一種化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
40.權(quán)利要求39的方法，其中至少一種化療藥物為紫杉醇。
41.權(quán)利要求38的方法，其中至少一種IDO抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，3′-二吲哚甲烷(DIM)、brassinin、5-甲基-brassinin、表沒(méi)食子兒茶酚沒(méi)食子酸、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-色氨酸、丙烯基-TH-DL-色氨酸、甲基-TH-DL-色氨酸、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3羧基-β-咔啉、3-丙氧甲酰-β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
42.權(quán)利要求41的方法，其中至少一種IDO抑制劑為1-甲基-DL-色氨酸(1MT)。
43.權(quán)利要求38的方法，其中同時(shí)施用至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。
44.權(quán)利要求38的方法，其中順序施用至少一種IDO抑制劑和至少一種化療藥物。
45.權(quán)利要求44的方法，其中至少一種IDO抑制劑是在至少一種化療藥物之前施用。
46.權(quán)利要求44的方法，其中至少一種化療藥物是在至少一種IDO抑制劑之前施用。
47.權(quán)利要求38的方法，其中所述的癌癥選自下列的癌癥前列腺、結(jié)直腸、胰腺、子宮頸、胃、子宮內(nèi)膜、腦、肝臟、膀脫、卵巢、睪丸、頭部、頸部、皮膚(包括黑素瘤和基底細(xì)胞癌)、間皮層、白細(xì)胞(包括淋巴瘤和白血病)、食道、乳腺、肌肉、結(jié)締組織、肺(包括小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞癌)、腎上腺、甲狀腺、腎臟、或骨；亦包括成神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、間皮瘤、腎細(xì)胞癌、胃癌、肉瘤、絨毛膜癌、皮下基底細(xì)胞癌、以及睪丸精原細(xì)胞瘤。
48.一種治療癌癥的藥物組合物，該組合物在藥學(xué)可接受載體介質(zhì)中含有至少一種吲哚胺2，3-雙氧酶(IDO)抑制劑和至少一種化療藥物。
49.權(quán)利要求48的藥物組合物，其中至少一種化療藥物選自紫杉醇(泰素)、順鉑、西多紫衫醇、卡鉑、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、CPT-11、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱、雌莫司汀、卡氮芥、阿霉素、足葉乙甙、三氧化二砷、伊立替康、以及埃博霉素的衍生物。
50.權(quán)利要求49的藥物組合物，其中至少一種STI為紫杉醇。
51.權(quán)利要求48的藥物組合物，其中至少一種IDO的抑制劑選自1-甲基-DL-色氨酸(1MT)、β-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸、β-(3-苯并(b)噻吩基)-DL-丙氨酸、6-硝基-L-色氨酸、吲哚3-甲醇、3，2′-二吲哚甲烷(DIM)、brassinin、5-甲基-brassinin、表沒(méi)食子兒茶酚沒(méi)食子酸、5-溴-4-氯-吲哚酚1，3-雙乙酸酯、9-乙烯基咔唑、阿西美辛、5-溴-DL-色氨酸、5-溴吲哚雙乙酸酯、苯基-TH-DL-色氨酸、丙烯基-TH-DL-色氨酸、甲基-TH-DL-色氨酸、brassilexin、3-氨基-2-萘甲酸、β-咔啉、3-丁基-β-咔啉、6-氟-3-甲酯基-β-咔啉、6-異硫氰酸-3-甲酯基-β-咔啉、3-丙氧基-β-咔啉、3-羧基-β-咔啉、3-丙氧甲酰-β-咔啉、以及3-碳-叔-丁氧基-β-咔啉。
52.權(quán)利要求48的藥物組合物，其中至少一種IDO抑制劑為1-甲基-DL-色氨酸(1MT)。
全文摘要
本申請(qǐng)公開(kāi)了治療惡性腫瘤和慢性病毒性感染的組合物和方法。
文檔編號(hào)A61K31/405GK1794986SQ200480014321
公開(kāi)日2006年6月28日 申請(qǐng)日期2004年2月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月27日
發(fā)明者G·C·普瑞德?tīng)柹w斯特, A·J·馬勒, J·B·杜哈戴衛(wèi), W·邁拉仇斯基 申請(qǐng)人:蘭肯瑙醫(yī)學(xué)研究所