專利名稱：蠶蛾公補膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥新藥，具體是指一種補腎壯陽中藥蠶蛾公補膠囊的制備方法及其質(zhì)量控制技術(shù)。
背景技術(shù)：
蠶蛾公補片是國家藥品監(jiān)督管理局局頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(原衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊)收載品種，考慮到原工藝存在缺陷以及膠囊劑更易于崩解，更有利于活性成分快速吸收，美觀，容易吞服，而且增加了患者的選擇性與依從性。故我們對該品種進行了二次研發(fā)，以新工藝、新劑型制成蠶蛾公補膠囊。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供中藥新藥蠶蛾公補膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制技術(shù)。本發(fā)明研究的蠶蛾公補膠囊能補腎壯陽，養(yǎng)血，填精。用于腎陽虛損，陽痿早泄，性機能衰退。本發(fā)明的技術(shù)方案在具體實施方式
中說明。
本發(fā)明“倍量”定義重量體積比，單位為g/ml。
具體實施例方式
(1)處方雄蠶蛾(制)156.25g 人參15.625g 熟地黃75g白術(shù)(炒)75g 當(dāng)歸56.25g 枸杞子56.25g補骨脂(鹽炙)56.25g菟絲子(鹽炙)37.5g淫羊藿37.5g蛇床子37.5g 仙茅37.5g肉蓯蓉37.5g以上制成1000粒。
(2)制法一以上十二味，人參、白術(shù)粉碎成細生藥粉，其余雄蠶蛾等十味用50％乙醇(第一次8倍量，第二次、第三次6倍量)回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成稠膏(相對密度1.30～1.40，80℃)，加入上述細粉和微晶纖維素40g，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
制法二以上十二味，將枸杞子、肉蓯蓉加8倍量水提取2次，第一次2小時，第二次1小時，濾過，合并濾液，濃縮成相對密度1.15～1.20(60℃)清膏，其余人參等十味用50％乙醇(第一次8倍量，第二次、第三次6倍量)回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成相對密度1.15～1.20(60℃)清膏，與上述清膏合并，繼續(xù)濃縮成稠膏(相對密度1.30～1.40，60℃)加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得。
(3)制劑成型配方的篩選根據(jù)膠囊的成型要求，我們以成型難易、內(nèi)容物的流動性、膠囊崩解時限作為考察指標(biāo)對成型配方進行篩選，其配方及結(jié)果見表1。
表1 配方篩選試驗結(jié)果

結(jié)果表明配方5的各項指標(biāo)均優(yōu)于其它配方，故選擇配方5作為膠囊的成型配方。(4)提取溶媒(50％乙醇)用量及提取時間考察①藥材吸水(醇)率考察稱取雄蠶蛾(制)15.625g、熟地黃7.5g、當(dāng)歸5.625g、枸杞子5.625g、補骨脂(鹽炙)5.625g、菟絲子(鹽炙)3.75g、蛇床子3.75g、仙茅3.75g、肉蓯蓉3.75g、淫羊藿3.75g3份，各加50％乙醇200ml密閉浸泡30分鐘，將剩余的50％乙醇倒出，并量取體積，計算吸水(醇)率，結(jié)果見表2。
表2 藥材吸水(醇)者察結(jié)果

考察結(jié)果表明上述十味藥材的吸水(醇)率為203％，故在第一次提取時應(yīng)考慮多加2倍量的50％乙醇。
②評價指標(biāo)——出膏率、補骨脂素和異補骨脂素總量●出膏率測定方法稱取雄蠶蛾(制)15.625g、熟地黃7.5g、當(dāng)歸5.625g、枸杞子5.625g、補骨脂(鹽炙)5.625g、菟絲子(鹽炙)3.75g、蛇床子3.75g、仙茅3.75g、肉蓯蓉3.75g、淫羊藿3.75g用50％乙醇回流提取三次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成稠膏，轉(zhuǎn)移至干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，置水浴上蒸干，再于80℃減壓干燥3小時，移入干燥器中冷卻30分鐘，稱定重量，計算出膏率(干膏備用)。
●補骨脂素和異補骨脂素含量測定方法含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(24∶76)為流動相；檢測波長245nm。理論板數(shù)按補骨脂素峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 取在105℃干燥至恒重的補骨脂素對照品和異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含補骨脂素和異補骨脂素各20μg的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備 取②項下備用干膏，研細，取約0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，容器及濾渣加甲醇10ml洗滌，洗液并入濾液，置水浴上蒸干，殘渣加水25ml分次(10，10，5ml)加熱使溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合并乙醚提取液，低溫揮干，殘渣加甲醇10ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
③驗因素水平的選擇由于原片劑工藝已經(jīng)明確了提取次數(shù)，故我們選擇3個水平，對其未明確的醇提溶媒用量及提取時間進行考察，以測定出膏率、補骨脂素和異補骨脂素含量作為評價指標(biāo)，優(yōu)選最佳工藝，因素水平安排見表3。
表3 因素水平表

按因素水平表確定的工藝條件安排試驗，以上述評價指標(biāo)分別測定出膏率及補骨脂素和異補骨脂素總量，結(jié)果見表4。
表4 提取溶媒用量及提取時間考察試驗結(jié)果(n＝2)


*注以每g干膏中補骨脂素和異補骨脂素總量計結(jié)果分析由表4可知，不同水平的提取溶媒用量和提取時間對出膏率，補骨脂素、異補骨脂素總量影響不大，故從生產(chǎn)實際考慮，選擇用50％乙醇(第一次8倍量，第二次、第三次6倍量)回流提取三次，每次1.5小時。
④放大驗證試驗稱取1/2處方量藥材，即雄蠶蛾(制)78.125g、熟地黃37.5g、當(dāng)歸28.125g、枸杞子28.125g、補骨脂(鹽炙)28.125g、菟絲子(鹽炙)18.75g、蛇床子18.75g、仙茅18.75g、肉蓯蓉18.75g、淫羊藿18.75g，3份，按上述確定的工藝進行放大驗證，驗證結(jié)果見表5。
表5 放大驗證試驗結(jié)果

*注以每g干膏中補骨脂素和異補骨脂素總量計驗證結(jié)果表明用50％乙醇(第一次8倍量，第二次、第三次6倍量)回流提取三次，每次1.5小時，該工藝穩(wěn)定可行。
質(zhì)量控制技術(shù)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃棕色至棕褐色的顆粒和粉末；氣香，味苦。
鑒別(1)取本品內(nèi)容物5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用乙醚振搖提取3次，每次15ml，棄去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次，每次20ml，再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠G高效薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。
(2)取本品內(nèi)容物5g，研細，加乙醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，低溫揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取蛇床子素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(3)取本品內(nèi)容物5g，研細，加乙醚50ml，室溫浸漬1小時，時時振搖，濾過，濾渣留存。濾液低溫揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取白術(shù)對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述新制備的溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(30∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)有一藍紫色的主斑點。
(4)取當(dāng)歸對照藥材1g，加50％乙醇30ml，加熱回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取鑒別(3)項下供試品溶液、對照藥材溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
(5)取鑒別(3)項下的濾渣，加乙醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加水10ml加熱使溶解，放冷，通過已處理好的聚酰胺柱(柱內(nèi)徑18mm，40-60目，3g，濕法裝柱)，用30％乙醇60ml洗脫，收集30％乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(6)照含量測定項下方法檢驗，供試品色譜中應(yīng)呈現(xiàn)與補骨脂素、異補骨脂素對照品保留時間相一致的色譜峰。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(中國藥典2000年版一部附錄I L)。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(24∶76)為流動相；檢測波長245nm。理論板數(shù)按補骨脂素峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 取在105℃干燥至恒重的補骨脂素對照品和異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含補骨脂素和異補骨脂素各20μg的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，研細，取約0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，容器及濾渣加甲醇10ml洗滌，洗液并入濾液，置水浴上蒸干，殘渣加水25ml分次(10，10，5ml)加熱使溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合并乙醚提取液，低溫揮干，殘渣加甲醇10ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3)和異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少于80ug。
功能與主治補腎壯陽，養(yǎng)血，填精。用于腎陽虛損，陽痿早泄，性機能衰退。
用法用量口服。一次3～6粒，一目3次。
規(guī)格每粒裝0.25g貯藏密封。
有效期暫定二年。
權(quán)利要求
1.蠶蛾公補膠囊，原料藥由雄蠶蛾(制)、人參、熟地黃、白術(shù)(炒)、當(dāng)歸、枸杞子、補骨脂(鹽炙)、菟絲子(鹽炙)、蛇床子、仙茅、肉蓯蓉、淫羊藿等藥材組成，其特征在于(1)配方重量比例為雄蠶蛾(制)156.25 人參15.625熟地黃75白術(shù)(炒)75 當(dāng)歸56.25 枸杞子56.25補骨脂(鹽炙)56.25 菟絲子(鹽炙)37.5蛇床子37.5g仙茅37.5 肉蓯蓉37.5淫羊藿37.5(2)輔料包括輔料為稀釋劑、崩解劑、助流劑等；所述的稀釋劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、硫酸鈣、磷酸氫鈣、糊精等其中一種或幾種；崩解劑包括微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉等；助流劑包括滑石粉、微粉硅膠、硬脂酸鎂等。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蠶蛾公補膠囊的制備方法，其制備方法包括制備方法①人參、白術(shù)粉碎成細粉，備用；雄蠶蛾等其余十味藥材用乙醇回流提取2-3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成稠膏；稠膏加入上述細粉和微晶纖維素，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②將枸杞子、肉蓯蓉加水提取2次，濾過，合并濾液，濃縮成清膏，其余人參等十味用30～70％乙醇回流提取三次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成清膏，與上述清膏合并，繼續(xù)濃縮成稠膏，加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于其具體步驟分別為制備方法①具體步驟為人參、白術(shù)粉碎得細生藥粉，備用；其余雄蠶蛾等十味藥材用50％乙醇回流提取3次，第一次8倍量，第二次、第三次6倍量，每次1.5小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成稠膏至相對密度1.30～1.40，(80℃)；稠膏加入上述生藥粉和微晶纖維素，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得；制備方法②具體步驟為以上十二味，將枸杞子、肉蓯蓉加8倍量水提取2次，第一次2小時，第二次1小時，濾過，合并濾液，濃縮成相對密度1.15～1.20(60℃)清膏，其余人參等十味用50％乙醇(第一次8倍量，第二次、第三次6倍量)回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成相對密度1.15～1.20(60℃)清膏，與上述清膏合并，繼續(xù)濃縮成稠膏(相對密度1.30～1.40，60℃)加入淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得。
4.蠶蛾公補膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于通過以下步驟進行鑒別與測定(1)定性鑒別a、取蠶蛾公補膠囊內(nèi)容物5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用乙醚振搖提取3次，每次15ml，棄去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次，每次20ml，再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠G高效薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；b、取蠶蛾公補膠囊內(nèi)容物5g，研細，加乙醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，低溫揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取蛇床子素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；c、取蠶蛾公補膠囊內(nèi)容物5g，研細，加乙醚50ml，室溫浸漬1小時，時時振搖，濾過，濾渣留存；濾液低溫揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取白術(shù)對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述新制備的溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(30∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)有一藍紫色的主斑點；d、取當(dāng)歸對照藥材1g，加50％乙醇30ml，加熱回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取鑒別(3)項下供試品溶液、對照藥材溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點；e、取鑒別(3)項下的濾渣，加乙醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，殘渣加水10ml加熱使溶解，放冷，通過已處理好的聚酰胺柱(柱內(nèi)徑18mm，40-60目，3g，濕法裝柱)，用30％乙醇60ml洗脫，收集30％乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；f、照含量測定項下方法檢驗，供試品色譜中應(yīng)呈現(xiàn)與補骨脂素、異補骨脂素對照品保留時間相一致的色譜峰；(2)定量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(24∶76)為流動相；檢測波長245nm；理論板數(shù)按補骨脂素峰計算應(yīng)不低于3000；對照品溶液的制備取在105℃干燥至恒重的補骨脂素對照品和異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含補骨脂素和異補骨脂素各20μg的混合溶液，即得；供試品溶液的制備取蠶蛾公補膠囊裝量差異項下的內(nèi)容物，研細，取約0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，容器及濾渣加甲醇10ml洗滌，洗液并入濾液，置水浴上蒸干，殘渣加水25ml分次(10，10，5ml)加熱使溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合并乙醚提取液，低溫揮干，殘渣加甲醇10ml分次(4，3，3ml)使溶解，定量移入10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；蠶蛾公補膠囊每粒含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3)和異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少于80ug。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蠶蛾公補膠囊及其制備方法、質(zhì)量控制方法，原料藥由人參、白術(shù)、雄蠶蛾等十二味藥組成。本發(fā)明研究的蠶蛾公補膠囊能補腎壯陽，養(yǎng)血，填精。用于腎陽虛損，陽痿早泄，性機能衰退。本品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均代表了同類產(chǎn)品的先進水平。
文檔編號A61K35/64GK1840042SQ20061003815
公開日2006年10月4日 申請日期2006年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月28日
發(fā)明者余世春 申請人:安徽科創(chuàng)中藥天然藥物研究所有限責(zé)任公司