專利名稱：米非司酮的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及米非司酮的新用途。
背景技術(shù)：
米非司酮，英文名為mifepristone，化學(xué)名稱為11β-[4-(N，N-二甲胺基)苯基]-Δ4，9-雌甾二烯-17α-(1-丙炔基)-17β-羥基-3-酮，分子式為C29H35NO2，分子量為429.61。結(jié)構(gòu)式如下 米非司酮是一種受體水平抗孕激素拮抗劑，具有終止早孕、抗著床，誘導(dǎo)月經(jīng)周期，促宮頸成熟的作用。在臨床上已被廣泛用于抗早孕緊急避孕，并且具有良好的效果。
乳腺增生癥是臨床中常見病和多發(fā)病。近年來(lái)，由于人們生活水平的提高，工作及生活節(jié)律的加快，社會(huì)及心理壓力的加大，飲食及水源的污染，化肥與農(nóng)藥的殘留等使現(xiàn)代婦女的乳疾越來(lái)越多。乳腺增生多見于30-50歲的中年婦女，被認(rèn)為是乳腺癌的前期疾病。目前乳腺增生的治療中醫(yī)多采用乳癖消，乳核散結(jié)片等，西醫(yī)主要采用枸櫞酸他莫昔芬治療，但是效果不佳。也有用口服碘化鉀、雄性激素治療，但是存在停藥后復(fù)發(fā)，副作用較大等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供米非司酮的新用途，特別是在制備治療乳腺增生藥物中的應(yīng)用，為抗乳腺增生增加一種新藥。
米非司酮按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法可以有各種劑型，從經(jīng)胃腸道給藥劑型而言，可以考慮的有片劑、膠囊、丸劑、乳劑、散劑、顆粒劑、混懸劑或溶液劑等。非經(jīng)胃腸道用藥的劑型包括注射給藥、呼吸道給藥、皮膚給藥、粘膜給藥、腔道給藥，尤其可考慮是注射給藥和腔道給藥。
采用苯甲酸雌二醇和黃體酮肌內(nèi)注射制備大鼠乳腺增生癥模型。米非司酮可以顯著下降模型雌鼠的血清雌激素水平和孕激素水平，雌/孕激素比值也有顯著下降；大鼠乳頭直徑有所下降，增生乳腺的重量也有明顯下降；并可使增生模型大鼠的乳腺組織充血有不同程度下降，乳腺組織色澤基本一致，無(wú)明顯的充血狀態(tài)，與周圍結(jié)締組織分界也不清楚，局部無(wú)增厚現(xiàn)象；米非司酮可使大鼠乳腺組織小葉增生、腺泡及導(dǎo)管增生有不同程度的下降，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)分泌物也有不同程度減少，導(dǎo)管無(wú)擴(kuò)張。
本發(fā)明的有益效果在于1.本發(fā)明對(duì)已知的米非司酮發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，其具有非常好的抗乳腺增生的效果，開拓了新的應(yīng)用領(lǐng)域。
2.米非司酮可制成各種常規(guī)劑型供臨床使用，療效好。


圖1是米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳腺的形態(tài)學(xué)影響(×2倍)照片；其中A為正常對(duì)照組大鼠乳腺；B為模型對(duì)照組大鼠乳腺；C為三苯氧胺10.0mg/kg組大鼠乳腺；D為米非司酮2.5mg/kg組大鼠乳腺；E為米非司酮5.0mg/kg組大鼠乳腺；F為米非司酮10.0mg/kg組大鼠乳腺。→表示乳腺組織邊界。
圖2是米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳腺組織病理變化的影響(×10倍)照片；其中A為正常對(duì)照組大鼠乳腺；B為模型對(duì)照組大鼠乳腺；C為三苯氧胺10.0mg/kg組大鼠乳腺；D為米非司酮2.5mg/kg組大鼠乳腺；E為米非司酮5.0mg/kg組大鼠乳腺；F為米非司酮10.0mg/kg組大鼠乳腺。
具體實(shí)施例方式
為了更好地說(shuō)明本發(fā)明，下面利用動(dòng)物藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)明米非司酮在治療乳腺增生藥物中的應(yīng)用效果。
1.方法雌性SD大鼠60只，按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為正常對(duì)照組和模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、試驗(yàn)藥物高、中、低3個(gè)劑量組，每組10只動(dòng)物。除正常對(duì)照組，其余各實(shí)驗(yàn)組均肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，每天1次，連續(xù)25天(左右腿交叉進(jìn)行注射)。繼而改用肌注黃體酮5.0mg/kg，每天1次，連續(xù)5天。對(duì)照組肌注生理鹽水0.2ml/只，連續(xù)注射30天。造模30天后開始給藥，用藥周期為2周。
2.分組及給藥劑量試驗(yàn)大鼠分成6組，每組10只，分別為
(1)正常對(duì)照組不造模(僅肌肉注射茶油)，30天后隔天灌胃給予生理鹽水1.0ml/kg/次。
(2)模型對(duì)照組同前造模，造模后隔天灌胃茶油1.0ml/kg/次。
(3)陽(yáng)性對(duì)照組同前造模，造模后每天灌胃三苯氧胺5.0mg/kg/天。
(4)試驗(yàn)藥物低劑量組同前造模，造模后隔天灌胃試驗(yàn)藥物2.5mg/kg次。
(5)試驗(yàn)藥物中劑量組同前造模，造模后隔天灌胃試驗(yàn)藥物5.0mg/kg/次。
(6)試驗(yàn)藥物高劑量組同前造模，造模后隔天灌胃試驗(yàn)藥物10.0mg/kg/次。
3.觀測(cè)指標(biāo)(1)將大鼠采用戊巴比妥鈉40mg/kg ip麻醉后，取下腔靜脈血并分離血清，采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清雌激素、孕激素的含量；(2)脫頸椎方法處死大鼠，測(cè)量第3對(duì)乳頭直徑；(3)取腦垂體、胸腺、脾臟、卵巢、子宮等臟器稱重，并計(jì)算臟器系數(shù)；(4)觀察并分離第2對(duì)完整的乳腺，用10％福爾馬林液固定，石蠟包埋切片，染色，在光鏡下觀察，按病理程度不同分為4級(jí)乳腺小葉不增生，腺體數(shù)量極小，腺泡不擴(kuò)張為(-)；乳腺小葉無(wú)明顯增生，個(gè)別腺泡有輕度增生，但無(wú)擴(kuò)張為(+)；乳腺小葉大部分增生，部分腺泡明顯擴(kuò)張為(++)；乳腺小葉明顯增生，腺泡處于極度擴(kuò)張狀態(tài)，腺上皮細(xì)胞呈扁平狀，腺泡內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)有大量的分泌物為(+++)4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示，并用SPSS 10.0for Window統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各組均數(shù)先行方差齊性檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較采用方差分析。應(yīng)用Kruskal-Walls Test等級(jí)序值法評(píng)定乳腺組織增生程度，計(jì)算乳腺增生率，單因素方差分析作顯著性檢驗(yàn)。
5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠血清激素水平的影響各組大鼠給藥2周后麻醉，取下腔靜脈血并分離血清，采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清雌激素、孕激素的含量。結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組雌性大鼠血清雌激素水平顯著增加(P＜0.001)，血清孕激素水平顯著下降(P＜0.01)，雌/孕激素比值顯著增高(P＜0.001)，這一變化與人乳腺增生時(shí)雌孕激素分泌失調(diào)、雌/孕激素比值顯著增高的發(fā)病機(jī)制一致；與模型對(duì)照組比較，米非司酮2.5、5.0、10.0mg/kg的劑量隔天給藥2周均可以顯著下降模型雌鼠的血清雌激素水平(P＜0.01-0.001)，并呈劑量依賴關(guān)系，對(duì)孕激素水平影響不大，僅米非司酮10.0mg/kg組孕激素的下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，而米非司酮各劑量組雌鼠的雌/孕激素比值均有顯著下降(P＜0.01-0.001)，并呈劑量依賴關(guān)系。見表1。
表1.米非司酮對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性乳腺增生激素水平的影響

注t檢驗(yàn)，與正常對(duì)照組比較ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；與模型對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(2)米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳頭直徑的影響分別在造模結(jié)束、給藥1周和實(shí)驗(yàn)結(jié)束(給藥2周)采用游標(biāo)卡尺測(cè)量雌鼠第3對(duì)乳頭直徑，結(jié)果表明，造模結(jié)束后乳腺增生模型各組大鼠的乳頭直徑顯著大于正常對(duì)照組(P＜0.001)；與模型對(duì)照組比較，給藥1周后米非司酮各組大鼠乳頭直徑均有所下降(直徑減少0.03-0.07mm)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，給藥2周后乳頭直徑進(jìn)一步下降(直徑減少0.07-0.09mm)，其中10.0mg/kg組雌鼠乳頭直徑減少0.09mm，與模型對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.05)。見表2。
表2.米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳頭直徑的影響

注t檢驗(yàn)，與正常對(duì)照組比較ΔΔΔP＜0.001；與模型對(duì)照組比較*P＜0.05(3)米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠部分臟器系數(shù)的影響于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剖殺大鼠，取胸腺、脾臟、子宮、卵巢、腦垂體和乳腺稱重，并根據(jù)大鼠體重計(jì)算相應(yīng)的臟器系數(shù)。結(jié)果如表3顯示，與正常對(duì)照組比較，乳腺增生模型對(duì)照組大鼠的胸腺、脾臟和卵巢的臟器系數(shù)有顯著下降(P＜0.01-0.001)，而子宮和乳腺的臟器系數(shù)有顯著增加(P＜0.001)；與模型對(duì)照組比較，米非司酮各劑量組對(duì)胸腺和脾臟的臟器系數(shù)無(wú)明顯影響(P＞0.05)，子宮、卵巢和乳腺的臟器系數(shù)有不同程度的下降(P＞0.05-P＜0.001)，腦垂體的臟器系數(shù)有不同程度的增加(P＞0.05-P＜0.01)，均呈劑量依賴性變化。這些結(jié)果說(shuō)明米非司酮能對(duì)抗乳腺增生大鼠卵巢、子宮和乳腺的增生。
表3.米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠部分臟器系數(shù)(g/100g體重)的影響(x±SD，n＝10)

注t檢驗(yàn)，與正常對(duì)照組比較ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；與模型對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(4)米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳腺組織的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剖殺大鼠，分離皮膚展示第2對(duì)乳腺，并在解剖鏡下拍照。結(jié)果如圖1顯示正常對(duì)照組大鼠乳腺組織(A)色澤均勻，與周圍結(jié)締組織分界不清楚，局部無(wú)增厚現(xiàn)象；乳腺增生模型對(duì)照組大鼠乳腺組織(B)分界清楚，有明顯凸起，并有較大范圍充血；米非司酮各劑量組大鼠乳腺組織(D、E、F)的充血有不同程度下降，其中5.0和10.0mg/kg組大鼠乳腺組織色澤基本一致，無(wú)明顯的充血狀態(tài)，與周圍結(jié)締組織分界也不清楚，局部無(wú)增厚現(xiàn)象。
分離各組第2對(duì)乳腺組織，固定后切片做HE染色，顯微鏡下觀察乳腺組織學(xué)改變。結(jié)果如圖2所示，正常對(duì)照組大鼠乳腺組織(A)小葉不增生，腺體數(shù)量極小，腺泡不擴(kuò)張；乳腺增生模型對(duì)照組大鼠乳腺組織(B)小葉明顯增生，腺泡處于極度擴(kuò)張狀態(tài)，腺泡內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)有大量的分泌物；陽(yáng)性對(duì)照三苯氧胺10.0mg/kg組大鼠乳腺組織(C)小葉部分增生，部分腺泡明顯擴(kuò)張，腺泡內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)有的分泌物；米非司酮低劑量組(2.5mg/kg)大鼠乳腺組織(D)小葉小部分增生，腺泡及導(dǎo)管有輕度增生，并內(nèi)有較多的分泌物，但無(wú)擴(kuò)張；米非司酮中劑量組(5.0mg/kg)大鼠乳腺組織(E)小葉小部分增生，腺泡及導(dǎo)管有輕度增生，無(wú)明顯分泌物分泌，也無(wú)擴(kuò)張；米非司酮高劑量組(10.0mg/kg)大鼠乳腺組織(F)小葉小部分增生，腺泡有輕度增生，內(nèi)無(wú)明顯分泌物，導(dǎo)管無(wú)擴(kuò)張。各組大鼠乳腺切片進(jìn)一步根據(jù)病理改變，按上述標(biāo)準(zhǔn)(方法6.3)判定分級(jí)，結(jié)果表明，乳腺增生模型對(duì)照組大鼠乳腺組織的病理學(xué)改變十分顯著(P＜0.001)，而米非司酮各劑量組均有非常顯著的改善作用，并呈劑量依賴關(guān)系。見表4。
表4.米非司酮對(duì)乳腺增生大鼠乳腺病理程度的影響

注Kruskal-Walls檢驗(yàn)，與正常對(duì)照組比較ΔΔΔP＜0.001；與模型對(duì)照組比較***P＜0.001從以上結(jié)果，可見米非司酮具有非常好的抗乳腺增生的效果，可在制備治療乳腺增生藥物中應(yīng)用，開拓了新的應(yīng)用領(lǐng)域。
以下提出了米非司酮制劑的制備實(shí)例，對(duì)米非司酮在臨床的應(yīng)用提供了方便，但本發(fā)明的制劑完全不局限于此。
實(shí)施例1將25mg米非司酮和5mg淀粉、13mg糊精、12mg硫酸鈣等混勻，用1.5mg羥丙基甲基纖維素混合漿制軟材、然后制粒、干燥、整粒，加入適量硬脂酸鎂混合，然后壓制成每片最終重量約為56.5mg的片劑。
實(shí)施例2
將10mg米非司酮和10mg淀粉、20mg糊精、15mg硫酸鈣等混勻，用1.5mg羥丙基甲基纖維素混合漿制軟材、然后制粒、干燥、整粒，加入適量硬脂酸鎂混合，然后壓制成每片最終重量約為56.5mg的片劑。
實(shí)施例3將5mg米非司酮和15mg淀粉、23mg糊精、12mg硫酸鈣等混勻，用1.5mg羥丙基甲基纖維素混合漿制軟材、然后制粒、干燥、整粒，加入適量硬脂酸鎂混合，然后壓制成每片最終重量約為56.5mg的片劑。
實(shí)施例4將200mg米非司酮和40mg淀粉、104mg糊精、96mg硫酸鈣等混勻，用12mg羥丙基甲基纖維素混合漿制軟材、然后制粒、干燥、整粒，加入適量硬脂酸鎂混合，然后壓制成每片最終重量約為452mg的片劑。
權(quán)利要求
1.米非司酮在制備治療乳腺增生藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及米非司酮的新用途，在制備治療乳腺增生藥物中的應(yīng)用。米非司酮可以顯著下降模型雌鼠的血清雌激素水平和孕激素水平，雌/孕激素比值也有顯著下降；大鼠乳頭直徑有所下降，增生乳腺的重量也有明顯下降；并可使增生模型大鼠的乳腺組織充血有不同程度下降，乳腺組織色澤基本一致，無(wú)明顯的充血狀態(tài)，與周圍結(jié)締組織分界也不清楚，局部無(wú)增厚現(xiàn)象；米非司酮可使大鼠乳腺組織小葉增生、腺泡及導(dǎo)管增生有不同程度的下降，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)分泌物也有不同程度減少，導(dǎo)管無(wú)擴(kuò)張。本發(fā)明開拓了米非司酮新的應(yīng)用領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1887287SQ20061005264
公開日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2006年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月26日
發(fā)明者周春慧, 張宇松, 金煒華, 汪衛(wèi)軍 申請(qǐng)人:浙江仙琚制藥股份有限公司