專利名稱:一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽化合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù):
人類應(yīng)用解熱鎮(zhèn)痛藥已有150余年歷史,現(xiàn)在,解熱鎮(zhèn)痛藥已成為人們?nèi)粘I钪胁豢扇鄙俚闹匾幤?,是全球?yīng)用面最廣,應(yīng)用量最大的醫(yī)藥品種之一。全球解熱鎮(zhèn)痛藥年產(chǎn)量已達(dá)20余萬噸,制劑幾千億片。撲熱息痛、阿司匹林、布洛芬、萘普生、雙氯芬酸為五大支柱產(chǎn)品,合計(jì)年銷售額達(dá)50多億美元。
聯(lián)苯乙酸作為消炎鎮(zhèn)痛藥物1993年在日本、意大利等國上市,用于治療變形性關(guān)節(jié)炎,肩周炎,腱鞘炎,腱周炎,肌肉痛,外傷后腫脹疼痛,軟組織損傷等的鎮(zhèn)痛消炎。該產(chǎn)品1995年為日本銷售額領(lǐng)先的100種藥物之一,已在世界十幾個(gè)國家上市,1996年在英國被批準(zhǔn)作為非處方藥(OTC)治療軟組織損傷,1997年、1998年均為世界暢銷藥物,日本武田藥廠1998年銷售額為7630萬美元。但是聯(lián)苯乙酸不溶于水,只能作為外用藥,嚴(yán)重影響了該藥物的推廣使用,我們通過大量的試驗(yàn)篩選,篩選結(jié)果認(rèn)為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的鹽為最佳形式,故將聯(lián)苯乙酸做成氨丁三醇鹽的形式,很好地解決了聯(lián)苯乙酸存在的問題,這不是普通技術(shù)人員不經(jīng)過創(chuàng)造性的勞動(dòng)就能解決的,也不是顯而易見的。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇可以用于制備解熱鎮(zhèn)痛類藥物,毒副作用小。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備方法,所述的合成方法簡單、收率高、產(chǎn)品純度高,可以直接得到藥用的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用了如下的技術(shù)方案一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,化學(xué)式為 分子量為C18H23NO5=333.14。
本發(fā)明聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備方法為將聯(lián)苯乙酸和氨丁三醇溶解于有機(jī)溶劑中,加熱攪拌至全溶,攪拌反應(yīng)完全(TLC方法確定是否反應(yīng)完全),揮去溶劑或0℃以下冷卻結(jié)晶,得固體即為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽。
反應(yīng)中有機(jī)溶劑一般用醇類或苯類溶劑。
有機(jī)溶劑優(yōu)選甲醇、無水乙醇、丙酮、正丁醇、苯或甲苯。
具體的步驟可以是將聯(lián)苯乙酸溶于有機(jī)溶劑,在0-80℃攪拌溶解,加入等摩爾數(shù)的氨丁三醇混合至澄清,攪拌0.5-2h反應(yīng)完全,除去溶劑得到成品,除去溶劑可以采取濃縮至干得白色粉末的方式,也可以采取0℃以下冷卻結(jié)晶的方式。
反應(yīng)完全后優(yōu)選0℃以下冷卻結(jié)晶的方式,晶體真空干燥,這樣得到的化合物純度好,晶形好。
優(yōu)選的反應(yīng)過程是將聯(lián)苯乙酸溶于有機(jī)溶劑,60℃攪拌溶解,加入等摩爾數(shù)的氨丁三醇混合至澄清,攪拌2h反應(yīng)完全,-5℃冷卻結(jié)晶,晶體真空干燥得聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽。
反應(yīng)過程表示如下 上述制備方法的產(chǎn)率為95%,純度為99.5%,溶于水,熔點(diǎn)162-163℃。
我們還提供了聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽在制備解熱鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的合成路線設(shè)計(jì)合理,合成工藝簡單可行,原料易得,反應(yīng)條件穩(wěn)定,反應(yīng)產(chǎn)率高,產(chǎn)品純度好,反應(yīng)沒有嚴(yán)重的“三廢”污染。藥理實(shí)驗(yàn)證明聯(lián)苯乙酸氨丁三醇注射液具有鎮(zhèn)痛作用,對豚鼠無致敏作用。體外試驗(yàn)條件下,聯(lián)苯乙酸氨丁三醇注射液對日本大耳白兔紅細(xì)胞無溶血作用,多次給藥對家兔靜脈血管及單次給藥對家兔肌肉均無明顯刺激作用,提示可以適用于肌肉或靜脈注射。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明最大耐受量應(yīng)該大于470mg/kg。有可能進(jìn)一步開發(fā)為鎮(zhèn)痛的新藥。
具體實(shí)施例實(shí)施例1聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備在一個(gè)干燥潔凈的250ml三口圓底燒瓶中,加入聯(lián)苯乙酸21.2g(0.1mol)與210ml甲醇加熱至60℃攪拌至全溶,在60℃加入氨丁三醇12.1g(0.1mol),混合溶液至澄清透明,在此條件下攪拌反應(yīng)1小時(shí),TLC檢測反應(yīng)完全。于0℃以下冷卻5小時(shí)析出大量白色結(jié)晶,抽濾,于80℃真空干燥得到30.5g白色結(jié)晶性聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽。測得mp162-163℃,收率91.6%。產(chǎn)品經(jīng)元素分析(理論值C 64.9% H 6.9% N 4.2% O 24%;實(shí)測值C 64.1% H 7.3% N 3.6% O 25%),NMR,MS,UV,IR和HPLC分析,產(chǎn)品為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,純度為99.5%。
實(shí)施例2聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備在一個(gè)干燥潔凈的250ml單口圓底燒瓶中,加入21.2g(0.1mol)聯(lián)苯乙酸與12.1g(0.1mol)氨丁三醇,向其中加入150ml無水乙醇,振搖加熱使完全溶解至澄清,保持溫度(50℃)30min,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干,得白色粉末。真空80℃干燥,得聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽32.0g。mp163-164℃,收率96.0%,產(chǎn)品經(jīng)元素分析,NMR,MS,IR,UV與高效液相色譜分析,產(chǎn)品為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,純度為99.2%。
實(shí)施例3聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備在一個(gè)干燥潔凈的250ml三口圓底燒瓶中,加入21.2g(0.1mol)聯(lián)苯乙酸與200ml苯,加熱攪拌至溶解,然后向其中加入12.1g(0.1mol)氨丁三醇,混合至澄清,在70℃攪拌反應(yīng)2小時(shí),TLC鑒別反應(yīng)終點(diǎn),反應(yīng)完畢后充分冷卻析出大量結(jié)晶性固體,抽濾,用少量無水乙醚洗滌白色固體,于80℃真空干燥箱中真空干燥,得28.5g聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽。mp163-164℃,收率85.6%,產(chǎn)品經(jīng)元素分析,NMR,MS,IR,UV與HPLC分析,產(chǎn)品為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,純度為99.8%。
實(shí)施例4Zonk018對小鼠熱板法致痛的影響選用體重20-22g雌性昆明種小鼠。首先進(jìn)行痛覺敏感性篩選,將小鼠置于55.0℃±0.5℃的熱板上,以小鼠舔后足所經(jīng)歷的時(shí)間作為疼痛反應(yīng)的閾值,剔出喜跳者及30秒中內(nèi)無反應(yīng)者,篩選出60只痛覺反應(yīng)敏感的小鼠,按體重隨機(jī)分成五組,每組12只。Zonk018低、中、高劑量組(4、12、36mg/kg,按等效劑量折算分別相當(dāng)于臨床擬用劑量的1/3、1、3倍)和陽性對照組(賴氨匹林)。測定給藥前痛閾值后,各試驗(yàn)組小鼠尾靜脈注射給予相應(yīng)的藥物,給藥容積0.1ml/10g,空白對照組給予等容積的生理鹽水。用脫毛劑將小鼠雙后足踝關(guān)節(jié)以下脫毛,擦干。每只小鼠以同樣的方法測定給藥前疼痛反應(yīng)閾值,然后各受試組給藥1h后,測定每鼠給藥后的疼痛反應(yīng)閾值,小鼠舔后足后,立即移離熱板,于給藥后的2h、3h再測定一次疼痛反應(yīng)的閾值,對各組間疼痛反應(yīng)的閾值進(jìn)行t檢驗(yàn),以評價(jià)的鎮(zhèn)痛作用。
試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明各試驗(yàn)組小鼠給藥前對熱板法疼痛反應(yīng)的閾值相近,經(jīng)給藥后,Zonk018各劑量組小鼠在1h、2h、3h舔后足的時(shí)間均較空白對照組顯著延長,提高了疼痛反應(yīng)的閾值,表明Zonk018能明顯延長小鼠熱板痛閾時(shí)間,具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
表1Zonk018對小鼠熱板法的鎮(zhèn)痛作用(X±s)
*P<0.05,**P<0.01實(shí)施例5Zonk018對醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響取20-22g昆明種小白鼠60只,雌雄各半,隨機(jī)分6組,分為空白對照組,Zonk018低、中、高劑量組(4、12、36mg/kg)和陽性對照組(賴氨匹林)。各試驗(yàn)組小鼠尾靜脈注射給予相應(yīng)的藥物,給藥容積0.1ml/10g,空白對照組給予等容積的生理鹽水,給藥1小時(shí)后,腹腔注射0.7%冰醋酸0.1ml/10g,觀察記錄注射致痛劑后15分鐘內(nèi)小鼠扭體次數(shù),計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。
試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明Zonk018可顯著抑制醋酸致小鼠扭體的次數(shù),具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
表2Zonk018對醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響(X±SD,n=12)
*p<0.05,**p<0.01,與模型組比較實(shí)施例6、Zonk018注射液溶血性試驗(yàn)取Zonk018注射液(94mg/4ml/支,以Zonk018計(jì))用生理鹽水稀釋為1.88mg/ml的溶液。取大耳白兔1只,耳緣靜脈取血10ml,用竹簽攪拌去除纖維蛋白,然后將血移入刻度離心管內(nèi),加生理鹽水注射液10ml,混勻后2000rpm離心5分鐘,去除上清液,加生理鹽水注射液10ml混勻后2000rpm再離心5分鐘,反復(fù)4次,將所得紅細(xì)胞按體積用生理鹽水稀釋成2%混懸液備用。再取試管12支,按表3加入各種溶液,其中第6、7管分別為溶血的陽性對照管和生理鹽水注射液對照管。將各管搖勻,37℃水浴內(nèi)溫育3小時(shí),按表4標(biāo)準(zhǔn)判斷各管在0.5-3小時(shí)內(nèi)是否出現(xiàn)溶血或凝集。
表3體外溶血試驗(yàn)加樣表
表4體外溶血結(jié)果判定
試驗(yàn)結(jié)果表明在1.88mg/ml(以Zonk018計(jì))的濃度時(shí),Zonk018注射液在體外對家兔紅細(xì)胞無溶血反應(yīng)。
實(shí)施例7Zonk018注射液血管刺激性試驗(yàn)取Zonk018注射液(94mg/4ml/支,以Zonk018計(jì))用生理鹽水稀釋為1.88mg/ml的溶液。取大耳白兔9只,體重2.0-2.4kg,均分成3組,每組3只。給藥組采用一次性滅菌輸液裝置將藥液經(jīng)左側(cè)耳緣靜脈以5ml/kg(給藥劑量為9.4mg/kg)滴注,滴速為2-3ml/min,對照組經(jīng)左側(cè)耳緣靜脈以5ml/kg滴注,滴速為2-3ml/min,每日一次,連續(xù)3天。給藥期間每日觀察血管注射部位及整個(gè)外耳殼有無變化。在末次給藥后48小時(shí)處死動(dòng)物,取給藥處血管及周圍組織,進(jìn)行大體解剖及病理組織學(xué)檢查,觀察有無血栓形成、內(nèi)皮損傷及其他病理變化。
試驗(yàn)結(jié)果表明給藥組動(dòng)物給藥處血管及周圍組織和血管均無充血、出血、水腫、血栓、壞死等病理改變,對照組動(dòng)物給藥處血管及周圍組織和血管也未見異常病理改變。病理檢查結(jié)果表明對照組動(dòng)物耳緣靜脈血管結(jié)構(gòu)正常,無充血,血管內(nèi)皮細(xì)胞無損傷及炎性病變,周圍組織也未見炎性病變、水腫、壞死等異常改變;給藥組動(dòng)物耳緣靜脈血管與對照組相比均無異常發(fā)現(xiàn)。表明Zonk018注射液對大耳白兔耳緣靜脈血管無明顯刺激作用。
實(shí)施例8Zonk018注射液肌肉刺激性試驗(yàn)取Zonk018注射液(94mg/4ml/支,以Zonk018計(jì))用生理鹽水稀釋為1.88mg/ml的溶液。取大耳白兔2只,分別為1號、2號,體重2.0-2.2kg。將家兔固定于固定箱內(nèi)。各例于左右后腿前側(cè)股四頭肌上下兩部位(上下間距約3cm)以無菌操作方法注入藥液或者生理鹽水注射液1ml,分別為1號兔與2號兔左下及右上Zonk018注射液,余下部位給予生理鹽水;給藥后48小時(shí)放血處死動(dòng)物,解剖后取股四頭肌,縱向切開,觀察注射部位肌肉的刺激反應(yīng)。同時(shí)對注射部位肌肉組織制作病理切片,觀察有無病理改變。
試驗(yàn)結(jié)果表明給藥后各只家兔健康如常。給藥部位和對照組部位均未見異常病理改變。病理組織學(xué)檢查結(jié)果亦提示對照部位未見異常,Zonk018注射液給藥部位肌肉組織未見炎癥細(xì)胞浸潤、變性、壞死等異常病理改變。結(jié)果提示Zonk018注射液對肌肉無明顯刺激作用。
實(shí)施例9Zonk018注射液主動(dòng)全身超敏試驗(yàn)取健康豚鼠24只,體重280-310g,隨機(jī)均分成4組。取Zonk018注射液(94mg/4ml/支,以Zonk018計(jì))用生理鹽水稀釋為4.5mg/ml及13.5mg/ml的溶液。隔日腹腔注射上述4.5mg/ml及13.5mg/ml的Zonk018注射液0.5ml/只,空白對照組、陽性致敏組隔日分別腹腔注射等容量的生理鹽水、1%新鮮雞蛋清0.5ml/只,共5次。于首次注射后的第14日,每組分別取3只豚鼠,由前肢靜脈注射相應(yīng)藥物各1.5ml/只進(jìn)行第一次攻擊,2h內(nèi)觀察有無抓鼻、豎毛、咳嗽、呼吸困難、痙攣、休克、大小便失禁、死亡等過敏癥狀并評分。每組余下3只動(dòng)物于首次注射后的第21日按以上方法進(jìn)行第二次攻擊,2h內(nèi)觀察有無抓鼻、豎毛、咳嗽、呼吸困難、痙攣、休克、大小便失禁、死亡等過敏癥狀并評分,按表5進(jìn)行過敏反應(yīng)癥狀分級,表6進(jìn)行全身致敏性評價(jià)。
表5豚鼠過敏反應(yīng)癥狀
表6全身致敏性評價(jià)
試驗(yàn)結(jié)果表明1%雞蛋清組動(dòng)物兩次攻擊后均在2小時(shí)內(nèi)死亡,均評20分,而給藥組動(dòng)物在兩次攻擊后動(dòng)物活動(dòng)正常,均評0分。結(jié)果提示Zonk018注射液未引起受試動(dòng)物出現(xiàn)明顯過敏反應(yīng)。
實(shí)施例10Zonk018注射液尾靜脈注射急性毒性試驗(yàn)研究NIH小鼠40只,19-21g,雌雄各半,隨機(jī)均衡分為兩組,給藥組對NIH小鼠尾靜脈注射一次性給予最大濃度的Zonk018注射液(94mg/4ml,以Zonk018計(jì)),給藥容積0.2ml/10g體重,給藥劑量為470mg/kg,對照組給予等量的空白輔料,觀察記錄給藥后小鼠急性毒性反應(yīng)及累積死亡數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果表明給藥后14天內(nèi),給藥組及輔料對照組動(dòng)物均未見死亡例,體重增長良好,觀察結(jié)束進(jìn)行尸體解剖,肉眼未見異常變化,研究結(jié)果提示Zonk018注射液最大耐受量應(yīng)該大于470mg/kg。
權(quán)利要求
1.一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,化學(xué)式為
2.如權(quán)力要求1所述聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備方法,其特征是包括以下步驟將聯(lián)苯乙酸和氨丁三醇溶解于有機(jī)溶劑中,攪拌反應(yīng)完全,揮去溶劑或0℃以下冷卻結(jié)晶,得固體即為聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽。
3.如權(quán)力要求2所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽的制備方法,其特征是投料的聯(lián)苯乙酸和氨丁三醇的摩爾比為1∶1。
4.如權(quán)力要求3所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備方法,其特征是有機(jī)溶劑是醇類或苯類溶劑。
5.如權(quán)力要求4所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備方法,其特征是溶劑是甲醇、無水乙醇、丙酮、正丁醇、苯或甲苯。
6.如權(quán)力要求3或5所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備方法,其特征是先將聯(lián)苯乙酸溶于有機(jī)溶劑,0-80℃攪拌溶解,加入等摩爾數(shù)的氨丁三醇,攪拌0.5-2h反應(yīng)完全,濃縮蒸干溶劑得白色粉末,真空干燥即得。
7.如權(quán)力要求3或5所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備方法,其特征是將聯(lián)苯乙酸溶于有機(jī)溶劑,0-80℃攪拌溶解,加入等摩爾數(shù)的氨丁三醇混合至澄清,攪拌0.5-2h反應(yīng)完全,0℃以下冷卻結(jié)晶,晶體真空干燥即得。
8.如權(quán)力要求7所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇的制備方法,其特征是將聯(lián)苯乙酸溶于有機(jī)溶劑,60℃攪拌溶解,加入等摩爾數(shù)的氨丁三醇混合至澄清,攪拌2h反應(yīng)完全,-5℃冷卻結(jié)晶,晶體真空干燥即得。
9.如權(quán)力要求1所述的聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種聯(lián)苯乙酸氨丁三醇鹽,化學(xué)式為C
文檔編號A61K31/133GK1944378SQ20061012291
公開日2007年4月11日 申請日期2006年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月23日
發(fā)明者陳文展, 王偉 申請人:廣東中科藥物研究有限公司