專利名稱：：水飛薊賓的水溶性氨基酸酯衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的水飛薊賓的氨基酸酯的衍生物，及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，這些衍生物具有較好的水溶性和較高的口服生物利用度。水飛薊賓(si1ybin)從菊科植物水飛薊中分離提:又的黃酮類化合物。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該藥具有抗肝損傷、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、清除自由基、保護(hù)及穩(wěn)定肝細(xì)胞膜的作用，對(duì)多種毒物引起的肝損傷具有保護(hù)和治療作用，臨床上用于各種急慢性肝炎的治療。OHO水飛薊賓但是，由于水飛薊賓難溶于水，口服吸收差，生物利用度低，從而影響了其臨床療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供式I所代表的水飛薊賓的氨基酸酯的衍生物
背景技術(shù)：
：<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，R為氫、甲基、異丙基、異丁基、2-甲基丙基或苯甲基等L-氨基酸的側(cè)鏈。本發(fā)明還提供式I所示的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物的非毒性藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還提供含有式I所示的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還提供式I所示的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，以及包含式I所示的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物作為肝炎治療藥物的用途。具體實(shí)施例方式水飛薊賓的氨基酸酯衍生物可以按照如下合成路線制備:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>水飛薊賓與N-千氧羰基氨基酸在二環(huán)己基碳二亞胺作用下縮合，得到23-0-(N-芐氧羰基氨基酰)-葛根素，催化氫化脫保護(hù)，得到目標(biāo)化合物。結(jié)構(gòu)式中R為氫、曱基、異丙基、異丁基、2-甲基丙基或苯甲基等氨基酸側(cè)鏈。下面的實(shí)施例可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述，然而，這些實(shí)施例不應(yīng)作為對(duì)本發(fā)明的范圍的限制。實(shí)施例123-0-甘氨酰水飛薊賓U,)的制備將4.8g水飛薊賓、2.1gN-千氧羰基甘氨酸用30ml二曱基甲酰胺溶解，然后加入O.lml二甲氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基碳二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯甲烷丙酮甲酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得23-0-(N-芐氧羰基甘氨酰)-水飛薊賓2.6克。將23-0-(N-千氧羰基-甘氨酰)-水飛薊賓2.6克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入O.3克5%的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷甲醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得L1.2克。核磁共振氫語(yǔ)5(卯m，DMSO-dJ:12.41(s，1H);9.64(s，1H);9.11(s，1H);8.17(brs，2H);7.13(m，1H);7.09(d，1H);7.05(d,1H);7.03(dd，1H);6.90(dd,1H);6.89(d，1H);6.82(d,1H);6.42(d,lH);5.13(d,1H);4.97(d,1H);4.67(d，1H);4.28(m，1H);4.18(m，1H);3.84(m，2H);3.79(s,3H);3,78(m，1H)。實(shí)施例223-0-L-丙氨酰水飛薊賓(12)的制備將4.8g水飛薊賓、2.24gN-節(jié)氧羰基-L-丙氨酸用30ml二曱基曱酰胺溶解，然后加入O.lml二曱氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基碳二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯甲烷丙酮甲酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得23-0-(N-芐氧羰基-L-丙氨酰)-水飛薊賓3.1克。將23-0-(N-千氧羰基-L-丙氨?！?水飛薊賓3.1克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入0.3克5%的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷甲醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸千，得121.9克。核磁共振氫譜5(ppm，DMSO-dJ:12.43(s,1H);9.65(s,1H);9.14(s,1H);8.20(brs，2H);7.12(m，1H);7.11(d，1H);7.07(d,1H);7.04(dd，1H);6.92(dd，1H);6.88(d，1H);6.83(d，lH);6,41(d，lH);5.12(d，1H);4.99(d,1H);4,64(d,1H);4.27(m，1H);4,19(m，lH);4.02(m，1H);3.82(s,3H);3.76(m,1H)，1.19(d，3H)。實(shí)施例323-O-L-纈氨酰水飛薊賓(13)的制備將4.8g水飛薊賓、2.52gN-卡氧羰基-L-纈氨酸用30ml二甲基甲酰胺溶解，然后加入O.lml二甲氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基碳二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯曱烷丙酮曱酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得23-0-(N-芐氧羰基-L-纈氨酰)-水飛薊賓2.7克。將23-0-(N-卡氧羰基-L-纈氨酰)-水飛薊賓2.7克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入0.3克5°/。的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷甲醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸千，得131.5克。核磁共振氫譜5(卯m,薦0-dJ:12.39(s,1H);9.65(s，1H);9.14(s，1H);8.20(brs，2H);7.10(m，1H);7.06(d'1H);7.04(d，1H);7.01(dd，1H);6.92(dd,1H);6.89(d，1H);6.83(d，1H);6.40(d，lH);5.13(d,1H);4.97(d,1H);4.67(d，1H);4.28(m,1H);4.18(m,1H);4.01(m，1H);3,78(s,3H);3.76(m，1H);2.03(m，1H);0.90-0.94(m，6H)。實(shí)施例423-0-L-異亮氨酰水飛薊賓(14)的制備將4.8g水飛薊賓、2.66gN-節(jié)氧羰基-L-異亮氨酸用30ml二曱基甲酰胺溶解，然后加入O.lml二曱氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基碳二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯曱烷丙酮甲酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸千，得23-0-(N-芐氧羰基-L-異亮氨酰)-水飛薊賓2.1克。將23-0-(N-芐氧羰基-L-異亮氨酰)-水飛薊賓2.1克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入0.3克5%的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷曱醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得141.3克。核^磁共振氫譜5(卯m，DMS0-d6):12.40(s，1H);9.63",1H);9.08(s，1H);8.27(brs，2H);7.12(m，1H);7.10(d,1H);7.04(d，1H);7卿d，1H);6.92(dd，1H);6.87(d，1H);6.82(d，lH);6.40(d，lH);5.12(d，1H);4.95(d,1H);4.64(d，1H);4.28(m,1H);4.18(m,1H);4.12(m，1H);3.80(s，3H);3.81(m，1H);1.59(m，1H);1.20(m，2H);0.79-0.90(m,6H)。實(shí)施例523-0-L-苯丙氨酰水飛薊賓(15)的制備將4.8g水飛薊賓、2.99gN-芐氧羰基-L-苯丙氨酸用30ml二甲基曱酰胺溶解，然后加入O.lml二甲氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基^f灰二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯甲烷丙酮甲酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸千，得23-0-(N-千氧羰基-L-苯丙氨酰)-水飛薊賓2.8克。將23-0-(N-千氧羰基-L-苯丙氨酰)-水飛薊賓2.8克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入0.3克5%的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷甲醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得151.4克。核磁共振氬譜5(ppm,DMSO-d6):12.38(s，1H);9,62(s,1H);9.15O1H);8.34(brs,2H);7.20-7.25(m，5H);7.15(m，1H);7.10(d，1H);7.08(d,1H);7.04(dd，1H);6.92(dd,1H);6.90(d，1H);6.82(d，1H);6.42(d，lH);5.13(d，1H);4.97(d,1H);4.67(d,1H);4.28(m,1H);4.18(m,1H);4.05(m，1H);3.76(s,3H);3.74(m,1H);3.09(d，2H)。實(shí)施例623-0-L-脯氨酰水飛薊賓(16)的制備將4.8g水飛薊賓、2.50gN-千氧羰基-L-脯氨酸用30ml二甲基曱酰胺溶解，然后加入O.lml二曱氨基吡啶，2.06g二環(huán)己基》灰二亞胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過(guò)夜，過(guò)濾，將濾液減壓蒸干。將殘留物用硅膠柱層析分離，用三氯甲烷丙酮甲酸(9:1:0.1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得23-O-(N-爺氧羰基-L-脯氨酰)-水飛薊賓1.8克。將23-0-(N-芐氧羰基-L-脯氨酰)-水飛薊賓1.8克用20ml毫升二氧六環(huán)溶解，加入0.3克5%的鈀炭，在1個(gè)大氣壓的氫氣下攪拌4小時(shí)后，濾去催化劑。將濾液減壓濃縮，然后以硅膠柱層析分離，用三氯甲烷曱醇(9:1)混合溶劑洗脫，收集所需組分，減壓蒸干，得160.9克。核f茲共振氬鐠5(卯m,DMS0-cU:12.40(s,1H);9.68(s,1H);9.15(s，1H);8.21(brs,1H);7.12(m，1H);7.08(d,1H);7.04(d，1H);7.01(dd,1H);6.93(dd，1H);6.90(d，1H);6.81(d，1H);6.44(d，lH);5.15(d,1H);4.96(d，1H);4.65(d,1H);4.27(m，1H);4.18(m,1H);楊(m,1H);3.79(s，3H);3.78(m,1H);2.30-2.52(m，2H);1.89-1.90(m,2H);1.01-1.12(m，2H)。實(shí)施例7抗CC1,中毒所致小鼠肝損傷的藥效學(xué)評(píng)價(jià)取質(zhì)量大約20-25g的Baclb/c小鼠，隨機(jī)分組，每組10只小鼠。將待測(cè)樣品懸浮或溶解于0，5%羧甲基纖維素鈉溶液中，通過(guò)灌胃給予不同劑量的待測(cè)化合物；lh后，按照10mL/kg的劑量，皮下注射0.1%的CCl4的大豆色拉油溶液，制備肝損傷模型；皮下注射生理鹽水作為正常對(duì)照組。造模后12小時(shí)后，再次口服給予不同劑量的待測(cè)化合物。第二次給藥后24小時(shí)，處死動(dòng)物，留取血清標(biāo)本，統(tǒng)一用全自動(dòng)生化儀對(duì)于血清中的ALT，AST水平進(jìn)行檢測(cè)。評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表l。實(shí)施例8抗對(duì)乙酰氨基酚所致小鼠肝損傷的藥效學(xué)評(píng)價(jià)取質(zhì)量大約20-25g的Baclb/c小鼠，隨機(jī)分組，每組10只小鼠。將待測(cè)樣品懸浮或溶解于O.5%羧甲基纖維素鈉溶液中，通過(guò)灌胃給予不同劑量的待測(cè)化合物；2h后，按10mL/kg的劑量灌胃給予異硫氰酸a-萘酯(ANIT)的花生油溶液(500mg異硫氰酸ot-萘酯溶于50tnl花生油)制備肝損傷模型，灌胃花生油為正常對(duì)照組。造模2h后，通過(guò)口服再次給予不同劑量的待測(cè)化合物。第二次給藥后16小時(shí)，處死動(dòng)物，留取血清標(biāo)本，統(tǒng)一用全自動(dòng)生化儀對(duì)于血清中的ALT。評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表2。表1、抗GCI,中毒所致小鼠肝損傷的治療作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表2、抗ANIT中毒所致小鼠肝損傷的治療作用<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>權(quán)利要求1、式I所代表的水飛薊賓的氨基酸酯的衍生物:其中，R為氫、甲基、異丙基、異丁基、2-甲基丙基或苯甲基等L-氨基酸的側(cè)鏈。2、權(quán)利要求1所述的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物的非毒性藥學(xué)上可接受的鹽。3、權(quán)利要求1所述的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物的非毒性藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物。4、權(quán)利要求l、2和3所述的水飛薊賓的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，以及包含式I所示的穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯的氨基酸酯衍生物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物作為消炎解熱鎮(zhèn)痛藥物的用途。全文摘要本發(fā)明的目的是提供式I所代表的水飛薊賓的氨基酸酯的衍生物，其中，R為氫、甲基、異丙基、異丁基、2-甲基丙基或苯甲基等L-氨基酸的側(cè)鏈。文檔編號(hào)A61K31/357GK101376654SQ20071014757公開(kāi)日2009年3月4日申請(qǐng)日期2007年8月28日優(yōu)先權(quán)日2007年8月28日發(fā)明者李小明,楊美英申請(qǐng)人:北京美倍他藥物研究有限公司