專利名稱：：一種歸脾湯制劑的制備方法一種歸脾湯制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種歸脾湯制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：歸脾湯益氣補血，健脾養(yǎng)心，其主治包括心脾氣血兩虛證。心悸怔忡，健忘失眠，盜汗，體倦食少，面色萎黃，舌淡，苔薄白，脈細弱。脾不統(tǒng)血證。便血，皮下紫癜，婦女崩漏，月經(jīng)超前，量多色淡，或淋漓不止，舌淡，脈細弱。(本方常用于胃及十二指腸潰瘍出血、功能性子宮出血、再生障礙性貧血、血小板減少性紫癜、神經(jīng)衰弱、心臟病等屬心脾氣血兩虛及脾不統(tǒng)血者。)歸脾湯證因思慮過度，勞傷心脾，氣血虧虛所致。心藏神而主血，脾主思而統(tǒng)血，思慮過度，心脾氣血暗耗，脾氣虧虛則體倦、食少；心血不足則見驚悸、怔忡、健忘、不寐、盜汗；面色萎黃，舌質(zhì)淡，苔薄白，脈細緩均屬氣血不足之象。上述諸癥雖屬心脾兩虛，卻是以脾虛為核心，氣血虧虛為基礎(chǔ)。脾為營衛(wèi)氣血生化之源，《靈樞*決氣》曰"中焦受氣取汁，變化而赤是為血"，故方中以參、芪、術(shù)、草大隊甘溫之品補脾益氣以生血，使氣旺而血生；當歸、龍眼肉甘溫補血養(yǎng)心；茯苓(多用茯神)、酸棗仁、遠志寧心安神；木香辛香而散，理氣醒脾，與大量益氣健脾藥配伍，復(fù)中焦運化之功，又能防大量益氣補血藥滋膩礙胃，使補而不滯，滋而不膩；用法中姜、棗調(diào)和脾胃，以資化源。全方共奏益氣補血，健脾養(yǎng)心之功，為治療思慮過度，勞傷心脾，氣血兩虛之良方。歸脾湯的配伍特點是一是心脾同治，重點在脾，使脾旺則氣血生化有源，方名歸脾，意在于此；二是氣血并補，但重在補氣，意即氣為血之帥，氣旺血自生，血足則心有所養(yǎng)；三是補氣養(yǎng)血藥中佐以木香理氣醒脾，補而不滯。故張璐說"此方滋養(yǎng)心脾，鼓動少火，妙以木香調(diào)暢諸氣。世以木香性燥不用，服之多致痞悶，或泄瀉，減食者，以其純陰無陽，不能輸化藥力故耳。"(《古今名醫(yī)方論》)歸脾湯原載宋*嚴用和《濟生方》，但方中無當歸、遠志，至明《薛己補此二味，使養(yǎng)血寧神之效尤彰。本方的適應(yīng)范圍，隨著后世醫(yī)家的臨床實踐，不斷有所擴充，原治思慮過度、勞傷心脾之健忘、怔忡。元，危亦林在《世醫(yī)得效方》中增加治療脾不統(tǒng)血之吐血、下血。明*薛己《內(nèi)科摘要》增補了治療驚悸、盜汗、嗜臥少食、月經(jīng)不調(diào)、赤白帶下等癥。歸脾湯與補中益氣湯同用參、芪、術(shù)、草以益氣補脾。前者以補氣藥配伍養(yǎng)心安神藥，意在心脾雙補，復(fù)二臟生血、統(tǒng)血之職，主治心脾氣血兩虛之心悸怔忡、健忘失眠、體倦食少，以及脾不統(tǒng)血之便血、崩漏等。后者是補氣藥配伍升陽舉陷藥，意在補氣升提，復(fù)脾胃升清降濁之能，主治脾胃氣虛、氣陷之少氣懶言、發(fā)熱及臟器下垂等。歸脾湯的化裁包括崩漏下血偏寒者，可加艾葉炭、炮姜炭，以溫經(jīng)止血；偏熱者，加生地炭、阿膠珠、棕櫚炭，以清熱止血。本方是治療心脾氣血兩虛證的常用方。臨床應(yīng)用以心悸失眠，體倦食少，便血或崩漏，舌淡，脈細弱為辨證要點。汪昂《醫(yī)方集解，補養(yǎng)之劑》"此手少陰、足太陰藥也。血不歸脾則妄行，參、術(shù)、黃芪、甘草之甘溫，所以補脾；茯神、遠志、棗仁、龍眼之甘溫酸苦，所以補心，心者，脾之母也。當歸滋陰而養(yǎng)血，木香行氣而舒脾，既以行血中之滯，又以助參、芪而補氣。氣壯則能攝血，血自歸經(jīng)，而諸癥悉除矣。"《正體類要》巻下"跌仆等癥，氣血損傷；或思慮傷脾，血虛火動，寤而不寐；或心脾作痛，怠情嗜臥，怔忡驚悸，自汗，大便不調(diào)；或血上下妄行。"近幾十年來，中草藥的生產(chǎn)實現(xiàn)了一定程度的機械化和半機械化。傳統(tǒng)中藥往往被認為有效成分含量低、雜質(zhì)多、質(zhì)量不穩(wěn)定，因此用藥多建立在經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，不能與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)接軌。為解決這個問題，中藥必須走提取和純化的道路。中藥的提取包括浸出、澄清、過濾和蒸發(fā)等許多的單元操作。作為甘草中最重要的活性成分，甘草甜素具有解毒、抗齲齒、抗炎癥等功能。甘草甜素無溶血作用，因為它可以通過紅細胞表面吸收溶血素從而阻止溶血素向紅細胞靠近。甘草次酸則有溶血作用，同時也具有抗炎癥、抗過敏、抗消化道潰瘍等功能。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種新的歸脾湯制劑的制備方法。本發(fā)明的歸脾湯制劑，其處方組成為人參、白術(shù)、茯苓、黃芪、當歸各2重量份，遠志、甘草、生姜、大棗、木香各l重量份，其制備方法為將人參、白術(shù)、茯苓、黃芪、當歸、遠志、甘草、生姜、大棗和木香加水煎煮2-4次，每次0.5-3小時，合并水煎液，過濾后濃縮得流浸膏，加入輔料后用流化床制粒后，制備藥物制劑。上述流浸膏的比重為1.15-1.35，優(yōu)選1.20-1.30。上述水煎液可以先進行離心沉淀，得澄清的水煎液，離心的轉(zhuǎn)速為1500-20000轉(zhuǎn)/分鐘，優(yōu)選1500-10000轉(zhuǎn)/分鐘，更優(yōu)選2000-8000轉(zhuǎn)/分鐘，最優(yōu)選3000-5000轉(zhuǎn)/分鐘。上述水煎液可以采用膜過濾的方法過濾。上述膜過濾包括采用超濾和納濾的過濾方法之一或?qū)⒊瑸V和納濾結(jié)合使用。上述超濾膜選自二醋酸纖維素膜、三醋酸纖維素膜、氰乙基醋酸纖維素膜、聚砜膜、磺化聚砜膜、聚醚砜膜、磺化聚醚砜膜、聚砜酰胺膜、酚酞側(cè)基聚芳砜膜、聚偏氟乙烯膜、聚丙烯腈膜、聚酰亞胺膜、纖維素膜、甲基丙烯酸甲酯-丙烯腈共聚物膜、聚丙烯腈-二醋酸纖維素共混膜，動態(tài)形成的超濾膜，以及上述膜的改性膜之一，其分子截留量為6000-10000以下。上述超濾的濾膜孔徑為0.22-0.45微米。上述超濾所采用的膜超濾器可以是商用的中空纖維或平板型超濾膜分離器。上述納濾膜分子截留量為500-2000，優(yōu)選500-1000，更優(yōu)選700-1000。上述膜過濾的過程優(yōu)選將水煎液先經(jīng)過超濾，再進行納濾。上述輔料選自微晶纖維素、粉末狀纖維素、甘露糖醇、淀粉、乳糖、明膠、甲基纖維素、糊精、預(yù)膠化淀粉、微粉硅膠、羥丙甲基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、聚乙二醇、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、酒石酸，二氧化硅，硬脂酸鈣和硬脂酸鎂中的一種或多種。上述藥物制劑包括顆粒劑、片劑、膠囊、散劑、滴丸劑。目前所用的中藥提取工藝多采用一定濃度的乙醇提取中藥的復(fù)方，這樣有利于回收溶劑和減少雜質(zhì)，但是采用醇提的方法背離了中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)3000年以來的治療疾病的經(jīng)驗積累，在"中藥現(xiàn)代化"的指導(dǎo)思想下為了能夠較為簡單地到達"質(zhì)量可控"的目的而忽略了"有效性"甚至"安全性"。綜上所述，中藥提取分離工藝發(fā)展的滯后成為傳統(tǒng)中醫(yī)藥發(fā)展和生存的瓶頸，必須對原有工藝進行優(yōu)化、革新和強化?；し蛛x和傳質(zhì)的強化技術(shù)將為此提供有力的保證，實現(xiàn)中醫(yī)藥學(xué)科與化學(xué)工程的交叉，將有利于實現(xiàn)中藥生產(chǎn)裝備的現(xiàn)代化。將化學(xué)工程的概念、理論引人中藥提取分離過程。利用己有的研究成果，結(jié)合中藥生產(chǎn)的具體情況，從基本影響因素的研究人手，對工藝流程、生產(chǎn)設(shè)備、操作條件作全面改造和細致摸索，給出了可行的方案。為了回歸傳統(tǒng)醫(yī)藥治療疾病的精髓，本發(fā)明提出了將歸脾湯制劑經(jīng)典方按照"遵古"的指導(dǎo)思想，用水提取藥物，結(jié)合現(xiàn)代的濃縮、制粒工藝，總結(jié)出了與歸脾湯制劑最為匹配的制劑工藝參數(shù)和適用輔料。最大限度地保留了傳統(tǒng)醫(yī)藥的經(jīng)驗積累，而又能適應(yīng)現(xiàn)代社會快節(jié)奏的如片劑、膠囊、顆粒劑、散劑、滴丸劑等制劑形式。本發(fā)明中確保了甘草甜素的含量穩(wěn)定，為制劑的規(guī)范化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。通過本發(fā)明的實現(xiàn)，可以在將歸脾湯制劑中的有效成分最大限度地提取的前提下，降低提取物中雜質(zhì)如鞣質(zhì)、多酚、樹脂、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)等大分子物質(zhì)和固體微粒有效去除，保留本發(fā)明歸脾湯制劑中的藥效成分，為口服藥物制劑的制備提供了便利。具體實施方式下面實施例進一步描述本發(fā)明，但所述實施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。以下實施例中處方為人參、白術(shù)、茯苓、黃芪、當歸各200克，遠志、甘草、生姜、大棗、木香各100克。實施例1稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2小時，加水量為藥材的12倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為l.13-1.18)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，即得本發(fā)明的顆粒制劑。實施例2稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次2小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.15-1.29)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，裝膠囊，即得到本發(fā)明的膠囊制劑。實施例3稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次2小時，加水量為藥材的IO倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.15-1.31)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入輔料壓片，即得到本發(fā)明的片劑。實施例4稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次3小時，加水量為藥材的IO倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.20-1.26)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入植物油基質(zhì)，制丸，即得到本發(fā)明的滴丸劑。實施例5稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2.5小時，加水量為藥材的10倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.19-1.25)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入800克植物油，混合均勻，用膠體磨研磨后壓制成軟膠囊即得到本發(fā)明的軟膠囊。實施例6稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次1.5小時，加水量為藥材的10倍，合并水提液，濾過，減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.20-1.24)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，粉碎，即得到本發(fā)明的散劑。實施例7稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2小時，加水量為藥材的6倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為8000的三醋酸纖維素膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為0.1兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為500的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.85倍左右，得流浸膏(比重為1.18-1.25)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，即得本發(fā)明的顆粒制劑。實施例8稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次2小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為6000的氰乙基醋酸纖維素膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為500的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.8倍左右，得流浸膏(比重為1.25-1.34)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，裝膠囊，即得到本發(fā)明的膠囊制劑。實施例9稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次2小時，加水量為藥材的6倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為10000的聚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為0.1兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為500的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.75倍左右，得流浸膏(比重為1.28-1.35)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入輔料壓片，即得到本發(fā)明的片劑。實施例10稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次3小時，加水量為藥材的IO倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為6000的磺化聚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為0.1兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為]000的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.7倍左右，得流浸膏(比重為1.26-1.30)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入植物油基質(zhì)，制丸，即得到本發(fā)明的滴丸劑。實施例11稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2.5小時，加水量為藥材的10倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為8000的聚醚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為0.1兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為2000的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.75倍左右，得流浸膏(比重為1.21-1.32)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入200克植物油，混合均勻，用膠體磨研磨后壓制成軟膠囊即得到本發(fā)明的軟膠囊。實施例12稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次1.5小時，加水量為藥材的10倍，合并水提液，濾過，濾液用截留分子量為6000的磺化聚醚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為0.1兆帕。超濾所得濾液經(jīng)過系統(tǒng)選用截留分子量為500的巻式納濾器中處理，其中納濾加水量可控制在原超濾液的0.65倍左右，得流浸膏(比重為1.20-1.30)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，粉碎，即得到本發(fā)明的散劑。實施例13稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為6000的三醋酸纖維素膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為O.l兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.15-1.27)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，即得本發(fā)明的顆粒制劑。實施例14稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次2小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為2500轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為8000的氰乙基醋酸纖維素膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為O.l兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.20-1.24)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，裝膠囊，即得到本發(fā)明的膠囊制劑。實施例15稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為5000轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為6000的聚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為O.l兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.10-1.25)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入輔料壓片，即得到本發(fā)明的片劑。實施例16稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次3小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為6000的磺化聚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為0.1兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，釆用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.24-1.35)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入植物油基質(zhì)，制丸，即得到本發(fā)明的滴丸劑。實施例17稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮2次，每次2.5小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為8000轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為6000的聚醚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為O.l兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐歩升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為o.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.21-1.29)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，加入200克植物油，混合均勻，用膠體磨研磨后壓制成軟膠囊即得到本發(fā)明的軟膠囊。實施例18稱取處方量的藥材粉碎，用水提取煎煮3次，每次1.5小時，加水量為藥材的8倍，合并水提液，離心(轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘)，濾過，濾液用截留分子量為6000的磺化聚醚砜膜超濾，過濾方式采用錯流過濾。超濾工藝的操作條件為超濾的進液口壓力為O.l兆帕，超濾的出液口壓力比進液口壓力低0.5千帕，超濾時逐步升壓。在超濾過程中，采用周期性壓力波動，壓力波動差為O.l兆帕。超濾所得濾液減壓回收溶劑，得流浸膏(比重為1.15-1.30)，加入輔料在流化床內(nèi)沸騰制粒，粉碎，即得到本發(fā)明的散劑。實驗例1-本發(fā)明干浸膏的量的確定將本發(fā)明中的實施例1-18流浸膏，不加輔料，直接冷凍干燥得到干浸膏，數(shù)據(jù)如下表1:表l本發(fā)明干浸膏的量的數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>通過本發(fā)明的實現(xiàn)，可以在將本發(fā)明歸脾湯制劑中的有效成分最大限度地提取的前提下，降低提取物中雜質(zhì)如鞣質(zhì)、多酚、樹脂、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)等大分子物質(zhì)和固體微粒有效去除，保留藥物的藥效成分，為口服藥物制劑的制備提供了便利。實驗例2-以高效液相色譜儀進行歸脾湯制劑的液相分析研究一、材料與方法(一)、實驗藥品本研究使用的標準品甘草甜素購自中國藥品生物制品檢定所。(二)、儀器設(shè)備及實驗條件1.儀器設(shè)備液相泵AppliedBiosystems(ABI)400X2進樣閥RheodyneType7125(10nLloop)流動相控制器ABI自動梯度控制器檢測器ABI1000s光二極管陣列檢測器2.分析條件預(yù)柱u-BondapakTMC18(Millipore，Milford,MA，USA)色譜柱Cosmosil5C18-MS,5tim，25cmX4.6■(NacalaiTesque，Kyoto,Japan)流動相(A)0-50毫摩爾/升KH2P04，以5%H3P04調(diào)整至pH2.5-6.5(B)H20/CH3CN:30/70—10/90(V/V)流速1.0毫升/分鐘檢測波長230nm梯度洗脫程序如表l(三)、實驗方法1.不同鹽類濃度的流動相的探討以最適當?shù)纳V柱，在流動相(A)中，分別使用O、10、20、30、40及50毫摩爾/升的磷酸二氫鉀溶液，以表1的梯度洗脫程序進行分析，各組重復(fù)二次注射。表1分析歸脾湯制劑的梯度洗脫程序時間(分鐘)流速(毫升/分鐘)流動相ACr。)流動相B(o/cO起始1.0100051.0955251.08020451.07525501.05545701.04060801.03565901.035652.不同酸堿值的流動相的探討以最適化的磷酸二氫鉀濃度，在流動相(A)中加入不同量5%的磷酸或氨水，配制不同酸堿度的緩沖溶液，pH值分別為2.5、3.5、4.5、5.5及6.5，各組重復(fù)操作兩次。3.不同乙腈比例的流動相的探討由于鹽類的加入，流動相(B)必須含適量的水，以防止鹽類析出，并獲得較平整的基線，因此配制不同水/乙腈比例的流動相，分別為30/70、25/75、20/80、15/85及10/90。選擇上述最適化的緩沖溶液條件進行分析，每組重復(fù)操作兩次。4.配制標準品溶液及制作標準曲線(1)取IO.0毫克的BPB(n-butylp-hydroxybenzoate)溶于10毫升的70%甲醇水溶液，做為內(nèi)標準品(IS)溶液。分別稱取IO.O毫克的甘草甜素，以70%甲醇水溶液配成20毫升標準品母液。然后每種標準品母液再各取5、2、1、0.5、0.1及0.05毫升置于量瓶中，各自加入l毫升內(nèi)標準品溶液，最后以70%甲醇水溶液配成10毫升標準品溶液。以上述的最適化條件，各濃度重復(fù)兩次注射，每次注入10微升，取其平均值制作標準曲線。(2)精密稱取1.0克的歸脾湯制劑粉末，以70%甲醇水溶液20毫升作為萃取溶劑，超音波震蕩30分鐘，離心過濾，重復(fù)三次，合并萃取液，濃縮至IO毫升。取5毫升濃縮液至IO毫升量瓶中，加入l毫升內(nèi)標準品溶液，以70%甲醇水溶液稀釋至10毫升。使用0.45pm過濾器過濾，作為定量的檢液，重復(fù)兩次注射，每次注入10微升，取平均值做為分析結(jié)果。(四)、分析條件的適宜性評估1.重現(xiàn)性取2.0毫升標準品母液至量瓶中，加入1.0毫升內(nèi)標準品溶液，以70%甲醇水溶液稀釋至10.0毫升，作為檢液。同一天內(nèi)重復(fù)六次注射，不同天總計重復(fù)六次注射，每次注入10微升。2.回收率精密稱取1.0克歸脾湯制劑粉末，以70%甲醇水溶液20毫升，作為萃取溶劑，超音波震蕩30分鐘，離心過濾，重復(fù)三次，合并萃取液，濃縮至10毫升。取5.0毫升濃縮液至IO毫升量瓶，加入l.O毫升標準品母液，再加入l.O毫升內(nèi)標準品溶液，以70°/。甲醇水溶液稀釋至10.0毫升，經(jīng)0.45nm過濾器過濾后作為定量的檢液。重復(fù)兩次注射，每次注入10微升，取兩次注射的平均結(jié)果。3.檢測限逐步稀釋標準品溶液，注入色譜柱中檢測，直到S/N比(信噪比)小于3，計算注入量及其濃度。4.制劑成分的定量分析精密稱取1.0克歸脾湯制劑顆粒劑(實施例13)，以70%甲醇水溶液20毫升作為萃取溶劑，超音波震蕩30分鐘，離心過濾，重復(fù)三次，合并萃取液，濃縮至10毫升。取5毫升濃縮液至IO毫升量瓶中，加入l毫升內(nèi)標準品溶液，以70%甲醇水溶液稀釋至10毫升，經(jīng)0.45pm過濾器過濾，作為定量的檢液。重復(fù)兩次注射，每次注入10微升，取其平均值。二、結(jié)果與討論(一)分析條件的探討為探討磷酸鹽對分辨率的影響，在流動相(A)中加入不同濃度的磷酸鹽。由于較高的鹽類濃度會降低色譜柱壽命與增加泵的損耗，故選擇30mM磷酸鹽作為流動相(A)的濃度。接下來將溶液的pH值分別調(diào)整至2.5、3.5、4.5、5.5及6.5。當pH值為2.5至4.5時，對指標成分的滯留時間并無明顯的差異。pH值為2.5時，化合物4和5的理論板數(shù)較pH3.5及pH4.5高(分別為2.5xl()4與2.82x104)。當pH高于5.5時，基線會發(fā)生漂移的現(xiàn)象。故選擇以30毫摩爾/升KH2P(X水溶液，以5XH3P04調(diào)整pH值至2.5作為流動相(A)的組成。由于流動相(A)中含有鹽類，當與完全為有機溶劑的流動相(B)混合時，很容易析出鹽類。且考慮當二流動相混合時會有溫度的變化，可能導(dǎo)致基線的不穩(wěn)，故主體為有機溶劑的流動相(B)應(yīng)包含適量的水，以防止鹽類析出并能維持平整的基線。本實驗將水/乙腈的體積比例分別設(shè)定為30/70、25/75、20/80、15/85及10/90，來探討流動相(B)的比例對滯留時間的影響。當乙腈的比例低于80%時，液相時間超過90分鐘，乙腈比例愈高，各成分的滯留時間愈短。當乙腈的比例在85%以上時，皆有不錯的分辨率，但是當比例太高時，較容易造成鹽類析出。故選擇水乙腈的體積比例為15:85作為流動相(B)的組成。分析條件的適宜性評估l.標準曲線的制作以層峰面積與內(nèi)標準品面積的比值(y)與成分濃度(x，微克/毫升)的關(guān)系，作圖可得到標準曲線(見表2)。除了化合物4以外，其余化合物的相關(guān)系數(shù)都大于0.999，顯示在此實驗范圍有非常好的線性關(guān)系，更增加對此定量法的可信度?；衔?可能是因為流動相(A)及(B)的梯度變化在該時間內(nèi)較大，導(dǎo)致基線稍微位移，僅管如此，其相關(guān)系數(shù)仍接近0.999。表2指標成分的標準曲線<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2.重現(xiàn)性以最適化分析條件對各化合物進行定量，為探討本實驗的重現(xiàn)性，同一天內(nèi)重復(fù)注射六次，不同天也重復(fù)注射總計六次，分別以層峰面積和滯留時間計算各成分的相對標準差(RSD)。結(jié)果如表3所示，同一天的層峰面積比的相對標準差在0.76-2.26%之間，滯留時間的相對標準差在0.45-1.33%之間；不同天的層峰面積比的相對標準差在O.84-2.94%之間，滯留時間的相對標準差在0.53-1.88%之間。大致上來說，不同天的實驗結(jié)果與同一天并沒有多大的差異，這表示分析的重現(xiàn)性較好。表3分析條件的重現(xiàn)性評估重現(xiàn)性(RSD，%)成分同一天不同天<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>實驗例3-本發(fā)明制劑指標物質(zhì)含量測定將實施例1-18流浸膏，不加輔料，直接冷凍干燥得到干浸膏按照以上測試條件檢測含量，所得甘草甜素含量如下表l樣品中有效成分甘草甜素考察<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結(jié)論本發(fā)明中確保了甘草甜素的含量穩(wěn)定，為制劑的規(guī)范化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。通過本發(fā)明的實現(xiàn)，可以在將歸脾湯制劑中的有效成分最大限度地提取的前提下，降低提取物中雜質(zhì)如鞣質(zhì)、多酚、樹脂、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)等大分子物質(zhì)和固體微粒有效去除，保留本發(fā)明歸脾湯制劑中的藥效成分，為口服藥物制劑的制備提供了便利。本實驗的目的擬開發(fā)歸脾湯制劑的分析方法。利用反相HPLC分析方法，液相系統(tǒng)的流動相(A)為30毫摩爾/升KH2P04及5%H3P04(pH2.5)，流動相(B)為H20/CH3CN=15/85(V/V)，流動相(A)的比率自100%至35%梯度洗脫。色譜柱為COSMOSIL5C18-MS，檢測波長為230nm。結(jié)果可在90分鐘內(nèi)，成功地分離甘草甜素指標成分，并于方劑萃取液中進行各成分的定量。目前對中藥的分析是以高效液相色譜為主，要建立完善的藥物質(zhì)控制度，做好中藥的質(zhì)量評估及把關(guān)，必須開發(fā)出穩(wěn)定的分析方法，并將其標準化及簡易化?？紤]目前業(yè)界實施中藥復(fù)方質(zhì)控的可行性，開發(fā)的簡便分析方法，同時定量了歸脾湯制劑中的甘草甜素化學(xué)指針成分。本發(fā)明在傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)的經(jīng)典理論指導(dǎo)下，運用了現(xiàn)代歸脾湯制劑工藝，最大限度地保留了傳統(tǒng)醫(yī)藥的經(jīng)驗積累，而又能適應(yīng)現(xiàn)代社會快節(jié)奏的，如散劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑和膠囊等制劑形式。權(quán)利要求1.一種歸脾湯制劑的制備方法，其處方組成為人參、白術(shù)、茯苓、黃芪、當歸各2重量份，遠志、甘草、生姜、大棗、木香各1重量份，其特征在于將人參、白術(shù)、茯苓、黃芪、當歸、遠志、甘草、生姜、大棗和木香加水煎煮2-4次，每次0.5-3小時，合并水煎液，過濾后濃縮得流浸膏，加入輔料后用流化床制粒后，制備藥物制劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述流浸膏的比重為1.15-1.35。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述流浸膏的比重為].20-1.30。4..根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述水煎液可以先進行離心沉淀，得澄清的水煎液，離心的轉(zhuǎn)速為]500-20000轉(zhuǎn)/分鐘。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的制備方法，其特征在于所述水煎液可以采用膜過濾的方法過濾。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述膜過濾包括超濾和納濾。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述膜過濾的過程為將水煎液先經(jīng)過超濾，再進行納濾。8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的制備方法，其特征在于所述輔料選自微晶纖維素、粉末狀纖維素、甘露糖醇、淀粉、乳糖、明膠、甲基纖維素、糊精、預(yù)膠化淀粉、微粉硅膠、羥丙甲基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、聚乙二醇、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、酒石酸，二氧化硅，硬脂酸鈣和硬脂酸鎂中的一種或多種。全文摘要本發(fā)明涉及一種歸脾湯制劑的制備方法。該藥物是由主要以芍藥、桂枝、生姜、大棗、黃芪和甘草的活性成分以及其他輔料制成的口服制劑。本發(fā)明在傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)的經(jīng)典理論指導(dǎo)下，運用了現(xiàn)代歸脾湯制劑工藝，最大限度地保留了傳統(tǒng)醫(yī)藥的經(jīng)驗積累，而又能適應(yīng)現(xiàn)代社會快節(jié)奏的，如散劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑和膠囊等制劑形式。文檔編號A61P25/00GK101433706SQ20071018792公開日2009年5月20日申請日期2007年11月16日優(yōu)先權(quán)日2007年11月16日發(fā)明者曾雄輝申請人:曾雄輝