專利名稱：鮮鹿茸活性細(xì)胞提取液凍干粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細(xì)胞提取液凍千粉的制備方法，特別指鮮鹿茸活 性細(xì)胞提取液凍干粉的制備方法。
背景技術(shù)：
鹿茸是珍貴的中藥材，同時(shí)，又作為一種營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)品被廣泛應(yīng)用 于保健品、食品、化妝品行業(yè)中。鹿茸中已知的營(yíng)養(yǎng)成分主要有多肽 類物質(zhì)、核苷酸類物質(zhì)、脂肪酸類物質(zhì)及一些具有活性作用的酶和激 素類物質(zhì)。目前，國(guó)內(nèi)外傳統(tǒng)的鹿茸炮制方法是鮮茸收采后，以沸水
煮，然后，經(jīng)紅外線烤箱7(TC烘烤，再風(fēng)干。在這個(gè)過程中，茸血 損失較多。同時(shí)，因高溫的作用，鹿茸中的活性成分損失也很大。而 在炮制后的茸中，超氧化物歧化酶(S0D)和堿性磷酸酶(AKP)的活 性大幅度下降。另外，按傳統(tǒng)提取工藝，鹿茸切片后用酒浸泡或有機(jī) 溶劑提取，由于鹿茸的多微孔的結(jié)構(gòu)，浸提所需時(shí)間很長(zhǎng)，同時(shí)，也 會(huì)因有機(jī)溶劑的殘留而造成污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種鮮鹿茸活性細(xì)胞提取液凍 干粉的制備方法，這種制備方法以新鮮鹿茸為原料，低溫、高溫方法 相結(jié)合，采用超聲波技術(shù)提取鹿茸活性細(xì)胞中的有效成分。產(chǎn)品適合 應(yīng)用于食品、保健品的生產(chǎn)。在低溫下經(jīng)超聲提取后，雖然活性物保 留的多，但是，鹿茸中的脂溶性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和多肽類物質(zhì)的提取偏低， 單純低溫提取對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的提取是不充分的，突出表現(xiàn)為多肽物質(zhì)提 取率低，而多肽物質(zhì)目前被認(rèn)為是鹿茸的重要成分之一。針對(duì)這種情 況，本方法采用了不同溫度階段提取。即低溫階段提取的剩余物再經(jīng) 過高溫提取，有效提高了多肽類的含量，然后將不同溫度的提取物合并。這樣，既保證了活性物質(zhì)的存在，又使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)提取充分，兼顧 了酶類物質(zhì)與多肽的提取。
本發(fā)明的技術(shù)問題是由如下方案解決的鮮鹿茸活性細(xì)胞提取液
凍千粉的制備方法，其特征是取鮮凍鹿茸切成1.5 2.5mm厚茸片， 用膠體磨研磨15 25分鐘，加入5倍重量濃度為50%的乙醇，攪拌均 勻，經(jīng)超聲波破碎儀破碎處理15~25分鐘，然后以5000rpm離心30 分鐘得上清液和沉淀兩部分，將上清液部分減壓濃縮，溫度小于30 °C，濃縮至體積為原來的1/5(鮮凍鹿茸加5倍重量乙醇體積的1/5)， 冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；將沉淀部分加入5倍重量濃度為50% 的乙醇，加熱至6(TC，超聲波破碎處理15 25分鐘，以5000rpm離 心30分鐘，又得上清液和沉淀兩部分，再將這上清液部分減壓濃縮， 溫度小于3CTC，濃縮至原體積的1/5 (沉淀部分加5倍重量乙醇體積 的1/5)，冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；而這沉淀部分再加入5倍 重量的蒸餾水，煮沸回流30分鐘，以5000rpm離心30分鐘，將沉淀 棄去，將上清液部分減壓濃縮，溫度為6(TC，濃縮至原體積的1/2 (沉淀部分加5倍重量蒸餾水體積的1/2)，經(jīng)減壓干燥箱以溫度60 。C干燥成干粉，最后，將以上三次步驟得到的干粉產(chǎn)品混合均勻包裝 后即為成品。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1、本方法改變傳統(tǒng)的以炮制茸為原料，而采 用新鮮鹿茸為原料，冷凍保存低溫提取，使提取物中SOD、 AKP等 物質(zhì)能有效地保持活性。通過實(shí)驗(yàn)研究比較，炮制后的干茸和進(jìn)口的 鹿茸素中沒有檢測(cè)出酶的活性，而本方法所生產(chǎn)的產(chǎn)品中，經(jīng)過多次 的檢驗(yàn)，SOD的活性保持穩(wěn)定，且活性較高，說明細(xì)胞內(nèi)的活性物 質(zhì)保存較好，有效成分含量高。
2、采用超聲波提取技術(shù)，提高了提取率，加快提取速度，有利 于現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)。這與傳統(tǒng)浸提方法相比，有突出優(yōu)點(diǎn)。 一般的攪 拌提取，所需要的時(shí)間長(zhǎng)。在常規(guī)的攪拌中，混合速率與質(zhì)量轉(zhuǎn)移率達(dá)到極限后變成常量，此時(shí)，加快攪拌速度也不能提高效率。而超聲 波可以起到分散、粉碎、多重效應(yīng)。分散粉碎粒子，破壞溶劑結(jié)構(gòu)， 使其線度進(jìn)一步減小，提高提取率。
3、 低溫條件下提取雖然能夠有效地保持酶等物質(zhì)的活性。但是， 考慮到鹿茸作為一種營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)品，其有效成分是很復(fù)雜的。不僅僅是 酶、谷胱甘肽等成分的作用。其中激素類和多肽類物質(zhì)的作用已經(jīng)有 了很多報(bào)道，如抗炎多肽目前已經(jīng)從鹿茸中分離出來，并以證明有很 好的抗炎作用。這類多肽物在加熱醇水條件下提取較好，基于這一點(diǎn)， 本發(fā)明采取了加熱醇水提取。為了不使鹿茸中目前了解的有效成分丟 失，同時(shí)最大限度地得到營(yíng)養(yǎng)全面的產(chǎn)品，最后結(jié)合了傳統(tǒng)的水煎方 法進(jìn)一步提取。經(jīng)過上述處理得到的鮮鹿茸提取物與單純的低溫裂解 提取物相比較，多肽的含量有顯著的提高。低溫超聲提取液中總氨基
酸含量為每公斤鮮茸提取液中含4g，而經(jīng)過高溫處理后，總氨基酸 含量約為每公斤鮮茸提取物中含56g，多肽類物質(zhì)提取率提高10倍 以上。這樣，經(jīng)過低溫與高溫的分段提取，既保證了酶等生物活性物 質(zhì)在提取過程中不致失活，同時(shí)又能保證其他有效成分提取充分。
4、 本制備方法對(duì)以前所采用的濾膜除菌的方法進(jìn)行了改進(jìn)。濾 膜除菌工藝雖然能保持低溫提取物在除菌的同時(shí)又不使酶類物質(zhì)失 活，但我們考慮到在除菌的同時(shí)，有些大分子的物質(zhì)有丟失的可能性。 同時(shí),濾膜除菌后產(chǎn)品的形式是液體,那么后續(xù)的灌裝過程對(duì)無(wú)菌條件 的要求很高，造成對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的控制很困難。本方法采用凍干工藝，在 回收乙醇后,冷凍干燥成干粉,在此過程中可避免微生物的污染。高溫 提取物經(jīng)過噴霧干燥后得到干粉,此過程本身亦是滅菌的過程。這樣， 大大簡(jiǎn)化了生產(chǎn)過程中的滅菌要求。
5、 在本方法加工過程中，采用了膠體磨破碎與超聲波提取相結(jié) 合的方法，使細(xì)胞內(nèi)的有效物質(zhì)充分釋放出來，并被高效提取。超聲 提取與單純攪拌浸提相比，活性物質(zhì)S0D、 AKP和多肽提取率高出約25%。
6、由于最終產(chǎn)品為干粉，較之目前的口服液或其它液體產(chǎn)品有 獨(dú)到的優(yōu)點(diǎn)。首先是易于貯存運(yùn)輸，低溫濾膜除菌的產(chǎn)品由于其為了 液體形式存在，為了避免白酶或是其它酶的作用，要求在低溫條件下 保存，這樣給產(chǎn)品的貯運(yùn)帶來困難，而干粉形式的產(chǎn)品無(wú)此缺陷。另 外，干粉包裝成膠囊后，服用方便，無(wú)口服液中特有鹿鶯氣味，有利 于產(chǎn)品的推廣。


圖1是本制備方法的工藝流程圖
具體實(shí)施例方式
下面舉一實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明取鮮凍鹿茸1公斤切成
2mm厚茸片，用膠體磨研磨20分鐘，加入5公斤濃度為50%的乙醇， 攪拌均勻，經(jīng)超聲波破碎儀破碎處理20分鐘，然后以5000rpm離心 30分鐘得上清液和沉淀兩部分。將上清液部分減壓濃縮，溫度小于 3CTC，濃縮至體積為原來的1/5，冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；將 沉淀部分加入5公斤濃度為50%的乙醇，加熱至6(TC，超聲波破碎處 理20分鐘，以5000rpm離心30分鐘，又得上清液和沉淀兩部分。再 將這上清液部分減壓濃縮，溫度小于3(TC，濃縮至原體積的1/5，冷 凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；而這沉淀部分再加入5公斤蒸餾水，煮 沸回流30分鐘，以5000rpm離心30分鐘，將沉淀?xiàng)壢ィ瑢⑸锨逡翰?分減壓濃縮，溫度為6(TC，濃縮至原體積的1/2，經(jīng)減壓干燥箱以溫 度6(TC干燥成干粉。最后，將以上三次步驟得到的干粉產(chǎn)品混合均 勻包裝后即為成品。
權(quán)利要求
1、鮮鹿茸活性細(xì)胞提取液凍干粉的制備方法，其特征是取鮮凍鹿茸切成1.5～2.5mm厚茸片，用膠體磨研磨15～25分鐘，加入5倍重量濃度為50％的乙醇，攪拌均勻，經(jīng)超聲波破碎儀破碎處理15～25分鐘，然后以5000rpm離心30分鐘得上清液和沉淀兩部分，將上清液部分減壓濃縮，溫度小于30℃，濃縮至體積為原來的1/5，冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；將沉淀部分加入5倍重量濃度為50％的乙醇，加熱至60℃，超聲波破碎處理15～25分鐘，以5000rpm離心30分鐘，又得上清液和沉淀兩部分，再將這上清液部分減壓濃縮，溫度小于30℃，濃縮至原體積的1/5，冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；而這沉淀部分再加入5倍重量的蒸餾水，煮沸回流30分鐘，以5000rpm離心30分鐘，將沉淀?xiàng)壢?，將上清液部分減壓濃縮，溫度為60℃，濃縮至原體積的1/2，經(jīng)減壓干燥箱以溫度60℃干燥成干粉，最后，將以上三次步驟得到的干粉產(chǎn)品混合均勻包裝后即為成品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鮮鹿茸活性細(xì)胞提取液凍干粉的制備方法，這種制備方法取鮮凍鹿茸切片，研磨后加乙醇，攪拌均勻，經(jīng)超聲波破碎儀破碎處理，然后離心得上清液和沉淀兩部分，將上清液部分減壓濃縮再冷凍后，經(jīng)凍干機(jī)干燥成干粉；將沉淀部分加乙醇加熱，超聲波破碎處理，離心。經(jīng)上述三次步驟即得到成品。本方法以新鮮鹿茸為原料，經(jīng)過低溫與高溫的分段提取，既保證了酶等生物活性物質(zhì)在提取過程中不致失活，同時(shí)又能保證其他有效成分提取充分。經(jīng)過檢驗(yàn)，本方法所生產(chǎn)的產(chǎn)品中，SOD的活性保持穩(wěn)定，且活性較高，說明細(xì)胞內(nèi)的活性物質(zhì)保存較好，有效成分含量高。
文檔編號(hào)A61K35/32GK101411721SQ200810180138
公開日2009年4月22日 申請(qǐng)日期2008年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月1日
發(fā)明者郭凌云 申請(qǐng)人:郭凌云