專(zhuān)利名稱：：有adhd，憂郁癥，治療抵抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀治療用血清素和去甲腎上腺...的制作方法有ADHD，憂郁癥，治療抵抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀治療用血清素和去甲腎上腺素再攝取綜合抑制作用的4-[2-(4-甲基苯石?；?苯基]旅咬?；衔?-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶公開(kāi)于國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO03/029232。據(jù)稱該化合物是5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的抑制劑，對(duì)5-羥色胺受體2C(5-HT2C)具有親和性，因此可用于治療心境障礙，例如重性抑郁癥和焦慮。然而，如實(shí)施例中所示，該化合物具有較寬的藥理特性，這使得該化合物也可用于其它疾病的治療一有希望的治療方法。在WO07/144006中也y〉開(kāi)了這一藥理特征以及該化合物在其它疾病的治療中的應(yīng)用。發(fā)明概要在一項(xiàng)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種治療ADHD、憂郁癥、治療4氐抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的方法，該方法包括向需要治療的患者施用治療有效量的4-[2-(4-甲基苯疏基)苯基]哌啶及其酸加成鹽(化合物I)。在一項(xiàng)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶及其酸加成鹽(化合物I)在制造用于治療ADHD、憂郁癥、治療抵抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的藥物的應(yīng)用。在一項(xiàng)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療ADHD、憂郁癥、治療抑抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶及其酸加成鹽(化合物I)。附圖圖1:化合物I的HBr加成鹽的X射線衍射圖圖2:化合物I的HBr加成鹽溶劑合物的X射線衍射圖圖3:化合物I的棕櫚酸加成鹽的X射線衍射圖圖4:化合物I的DL-乳酸加成鹽的X射線衍射圖圖5:化合物I(ot+(3形式)的己二酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖6:化合物I的己二酸加成鹽(2:1)的X射線衍射7:化合物I的富馬酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖8:化合物I的戊二酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖9:化合物I(a形式)的丙二酸加成鹽的X射線衍射圖圖10:化合物I(P形式)的丙二酸加成鹽的X射線衍射圖圖11:化合物I的草酸加成鹽(1.1)的X射線衍射圖圖12:化合物I的癸二酸加成鹽(2:1)的X射線衍射圖圖13:化合物I的琥珀酸加成鹽(2:1)的X射線衍射圖圖14:化合物I(a形式)的L-蘋(píng)果酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖15:化合物I(P形式)的L-蘋(píng)果酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖16:化合物I的D-酒石酸加成鹽(1:1)的X射線衍射17:與L-天冬氨酸混合的化合物I的L-天冬氨酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖18:與L-天冬氨酸混合的化合物I的L-天冬氨酸加成鹽水合物(1:1)的X射線衍射圖圖19:與谷氨酸一水合物混合的化合物I的谷氨酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖20:化合物I的檸酸酸加成鹽(2:1)的X射線衍射圖圖21:化合物I的HC1加成鹽的X射線衍射圖圖22:化合物I的磷酸加成鹽(1:1)的X射線衍射圖圖23:化合物I給藥時(shí)前額腦皮層中多巴胺水平圖24:化合物I給藥時(shí)前額腦皮層中乙酰膽堿水平圖25a+b:化合物I癥會(huì)藥時(shí)前額腦皮層和腹海馬中乙酰月旦石咸水平。圖26:在注意力缺乏和沖動(dòng)ISHR鼠上化合物I的效果。本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明涉及化合物I的應(yīng)用，即4-[2-(4-曱基苯硫基)苯基]哌啶及其醫(yī)藥上可接受鹽。4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶的結(jié)構(gòu)是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>化合物I的藥理學(xué)性能是在實(shí)施例中闡述的，但可以概述如下。該化合物抑制血清素和去甲腎上腺素再攝??；它抑制血清素受體2A、2C和3;而且它抑制a-l腎上腺素能受體。在一種實(shí)施方案中，所述酸加成鹽是無(wú)毒酸的酸加成鹽。所述鹽包括從下列有機(jī)酸制成的鹽例如馬來(lái)酸、富馬酸、苯曱酸、抗壞血酸、琥珀酸、草酸、聯(lián)亞甲基水楊酸、甲磺酸、乙二磺酸、乙酸、丙酸、酒石酸、水楊酸、檸檬酸、葡糖酸、乳酸、蘋(píng)果酸、丙二酸、扁桃酸、肉桂酸、檸康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、衣康酸、乙醇酸、對(duì)氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、茶堿乙酸、以及8-卣代茶堿例如8-溴茶堿。所述鹽也可以從無(wú)機(jī)酸例如氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸制成。在一種實(shí)施方案中，化合物I是HBr加成鹽。在一種實(shí)施方案中，化合物I是DL-乳酸加成鹽、尤其1:1鹽。在一種實(shí)施方案中，化合物I是L-天冬氨酸加成鹽、尤其1:1鹽。在一種實(shí)施方案中，化合物I是谷氨酸加成鹽、尤其1:1鹽。在一種實(shí)施方案中，化合物I是戊二酸加成鹽、尤其1:1鹽。在一種實(shí)施方案中，化合物I是丙二酸加成鹽、尤其1:1鹽，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)后者以兩種多晶變型a和P存在，其中P-形式因溶解度較低而據(jù)信是最穩(wěn)定的。在一種實(shí)施方案中，化合物I呈精制形式。"精制形式"這一術(shù)語(yǔ)意圖指出該化合物基本上不含其它化合物或其它形式，即所述化合物的多晶型，如該情況可能有的多晶型。經(jīng)口劑型、尤其片劑和膠嚢劑，由于給藥容易、因而更好的順應(yīng)性，往往是患者和醫(yī)師所偏愛(ài)的。對(duì)于片劑和膠嚢劑來(lái)說(shuō)，較好的是該有效成分是結(jié)晶的。在一種實(shí)施方案中，化合物I是結(jié)晶的。在本發(fā)明中使用的結(jié)晶可以作為溶劑合物存在，即溶劑分子構(gòu)成其晶體結(jié)構(gòu)的一部分的晶體。該溶劑合物可以從水生成，在這種情況下該溶劑合物往往稱為水合物。替而代之，該溶劑合物可以從其它溶劑例如乙醇、丙酮、或乙酸乙酯生成。溶劑合物的確切數(shù)量往往因條件而異。例如，水合物典型地會(huì)隨溫度上升或隨濕度降低而失水。當(dāng)條件例如濕度改變時(shí)不改變或只有少許改變的化合物，一般一見(jiàn)為更適合于藥物制劑。要說(shuō)明的是，HBr酸加成鹽當(dāng)從水中析出沉淀時(shí)不生成水合物，而像琥珀酸鹽、蘋(píng)果酸鹽和酒石酸鹽酸加成鹽這樣的化合物則然。一些化合物是吸濕的，即它們當(dāng)暴露于濕度時(shí)吸水。吸濕性對(duì)于要以藥物制劑、尤其以干制劑例如片劑或膠嚢劑提供的化合物一般視為一種所不希望的性能。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供吸濕性低的結(jié)晶。對(duì)于使用結(jié)晶性有效成分的經(jīng)口劑型來(lái)說(shuō)，若所述結(jié)晶是明確界定的，則也是有益的。在本文范疇內(nèi)，"明確界定"這一術(shù)語(yǔ)尤其指化學(xué)計(jì)量是明確界定的，即指成鹽離子之間的比值是小整數(shù)之間的比值，例如l:l、1:2、2:1、1:1:1等。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物是明確界定的結(jié)晶。有效成分的溶解度對(duì)于劑型的選擇也是有意義的，因?yàn)樗鼘?duì)生物有效度可能有直接影響。對(duì)于經(jīng)口劑型來(lái)說(shuō)，一般相信，有效成分的溶解度越高越有益，因?yàn)樗岣吡松镉行Ф?。一些患者例如老年患者吞咽片劑可能有困難，口滴溶液劑可能是避免需要吞咽片劑的一種適用替代。為了限制口滴溶液劑的體積，達(dá)到該溶液劑中有效成分的高濃度是必要的，這又要求該化合物的高溶解度。如表3中所示，DL-乳酸、L-天冬氨酸、谷氨酸、戊二酸和丙二酸加成鹽有格外高的溶解度。結(jié)晶形式影響化合物的過(guò)濾和加工性能。針狀結(jié)晶在生產(chǎn)環(huán)境下傾向于更難以操作，因?yàn)檫^(guò)濾變得更困難和費(fèi)時(shí)。某一給定鹽的確切結(jié)晶形式可能取決于例如該鹽析出沉淀的條件?；衔颕的該HBr酸加成鹽當(dāng)從乙醇、乙酸和丙醇中析出沉淀時(shí)生長(zhǎng)針狀溶劑合物晶體，但當(dāng)HBr加成鹽從水中析出沉淀時(shí)生長(zhǎng)非針狀的非水合形式的晶體，提供了優(yōu)異的過(guò)濾性能。表3也闡述了結(jié)晶pH,即該鹽飽和溶液中的pH。這種性能之所以重要，是因?yàn)橘A存期間水分永遠(yuǎn)無(wú)法完全避免，且水分的積累會(huì)引起包含低結(jié)晶pH鹽的片劑中或上的pH降低這可能縮短貨架壽命。進(jìn)而，當(dāng)片劑用濕造粒法制造時(shí)，結(jié)晶pH低的鹽可能引起工藝設(shè)備腐蝕。表3中的數(shù)據(jù)表明，HBr、HC1和己二酸加成鹽在這一方面可能是優(yōu)異的。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的HBr加成鹽。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述HBr鹽在X射線4分末衍射圖(XRPD)中的峰位于大約6.08°、14.81。、19.26。、和25.38°26,具體地說(shuō)，所述HBr鹽有圖1中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的DL-乳酸加成鹽(l:l)。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述DL-乳酸加成鹽的XRPD峰位于大約5.30°、8.81°、9.44。、和17.24°2e,具體地說(shuō)，所述DL-乳酸加成鹽有圖4中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的L-天冬氨酸加成鹽(1:1)。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述L-天冬氨酸加成鹽是非溶劑合物的，其XRPD峰位于大約11.05。、20.16。、20.60。、25.00。2e,具體地說(shuō)，所述L-天冬氨酸加成鹽當(dāng)與L-天冬氨酸混合時(shí)有圖17中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，所述L-天冬氨酸加成鹽是一種水合物、尤其呈精制形式。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述L-天冬氨酸加成鹽水合物的XRPD峰位于大約7.80°、13.80°、14.10°、19.63°29,具體地說(shuō)，所述L-天冬氨酸加成鹽水合物當(dāng)與L-天冬氨酸混合時(shí)有圖18中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的谷氨酸加成鹽(1:1)。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述谷氨酸加成鹽的XRPD峰位于大約7.71°、14.01°、19.26。、22.57°2e,具體地說(shuō)，所述谷氨酸鹽當(dāng)與谷氨酸一水合物混合時(shí)有圖19中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的丙二酸加成鹽(1:1)。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述丙二酸加成鹽是oc形式，其XRPD峰位于大約10.77。、16.70。、19.93。、24.01。20,或所述丙二酸加成鹽是p-形式，其XRPD峰位于大約6.08。、10.11。、18.25°、20.26°2e,具體地說(shuō)，所述丙二酸加成鹽有圖9或10中所示XRPD。在一種實(shí)施方案中，化合物I是呈結(jié)晶形式、尤其呈精制形式的戊二酸加成鹽(1:1)。在一種進(jìn)一步實(shí)施方案中，所述戊二酸加成鹽的XRPD峰位于大約9.39°、11.70。、14.05。、和14.58。26,具體地說(shuō)，所述戊二酸加成鹽有圖8中所示XRPD。化合物I的獨(dú)特藥理學(xué)性能使其適用于治療超出那些公開(kāi)在WO03/029232中的疾病。5-HT2C受體位于諸如多巴胺能神經(jīng)元上，在此，活化對(duì)多巴胺釋放產(chǎn)生強(qiáng)化的抑制影響，而且5-HT2c拮抗藥將影響多巴胺水平的提高。實(shí)施例2E中提供的數(shù)據(jù)顯示，化合物I的確會(huì)在前額腦皮層中帶來(lái)胞外多巴胺水平的劑量依賴型提高。在這種背景下，可以假設(shè)，5-HT2C拮抗藥特別適用于治療難以用選擇性血清素再攝取抑制劑治療的抑郁癥[Psychopharmacol.Bull.,39,147-166,2006]。這個(gè)假設(shè)在若干臨床研究中得到支持，這些研究顯示，米氮平與SSRI的組合優(yōu)于SSRI單獨(dú)用于治療沒(méi)有足夠臨床反應(yīng)的抑郁癥患者(抗治療抑郁癥、TRD、或頑固性抑郁癥)[Psychother.Psychosom.,75,139-153,2006]。米氮平也是一種5-HT2和5-HT3拮抗藥，這表明，兼?zhèn)溲逅卦贁z取抑制使用以及5-HT2和5-HT3拮抗作用的化合物，例如化合物I,可用于治療TRD，即會(huì)提高患有抗治療抑郁癥的患者的緩解速率。實(shí)施例2F和2G中提供的數(shù)據(jù)顯示，化合物I能提高前額腦皮層和腹海馬中乙酰膽堿的胞外水平。長(zhǎng)期存在的臨床癥據(jù)表明，提高大腦中乙酰膽堿水平是治療阿爾茨海默病和一般認(rèn)識(shí)缺損的一種途徑，參照乙酰膽堿酯酶在阿爾茨海默病治療中的用途。在這種背景下，相信本發(fā)明化合物可用于治療阿爾茨海默病和認(rèn)識(shí)缺損以及情緒異常，例如與阿爾茨海默病和認(rèn)識(shí)缺損相聯(lián)系的抑郁癥。部分抑郁癥患者在如下意義上會(huì)對(duì)用抗抑郁劑諸如SSRI的治療作出反應(yīng)它們會(huì)在臨床相關(guān)抑郁尺度例如MADRD和HAMD上有所改善，但在這種情況下其它癥狀例如睡眠紊亂和iUK缺損依然如故。在本發(fā)明范疇內(nèi)，這些患者稱為部分反應(yīng)者。由于以上討論的對(duì)乙酰膽堿水平的影響，本發(fā)明化合物，除抑郁癥外，還可望可用于治療認(rèn)識(shí)缺損。臨床研究已經(jīng)顯示，哌唑嗪化合物一即一種a-l腎上腺素能受體拮抗藥一減少了睡眠紊亂[Biol.Psychiatry,61,928-934，2007]。進(jìn)而,本發(fā)明化合物的5-HT2A和5-HT2C拮抗作用相信也有鎮(zhèn)靜、睡眠改善效果[Neuropharmacol.33,467-471,1994],因此，化合物I可用于治療部分反應(yīng)者，或換言之，用化合物I對(duì)抑郁癥患者的治療將使部分反應(yīng)者的部分減少。注意力缺乏機(jī)能亢進(jìn)異常(ADHD)是最常見(jiàn)的神經(jīng)行為異常之一。ADHD的特征在于如下三征的存在社會(huì)缺損，溝通缺損，以及受限制、重復(fù)或刻板癥行為。ADHD通常始于童年或青少年，但癥狀可能延續(xù)到成年。Atomoxetine是目前(美國(guó))FDA批準(zhǔn)用于ADHD治療的唯一非興奮劑[Drugs,64,205-222,2004]。Atomoxetine是一種去曱腎上腺素再攝取抑制劑，其也帶有關(guān)于在額葉前部的皮層中提高多巴胺水平。在治療ADHD中提高所說(shuō)的神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)解Atomoxetine治療效果水平已#皮建議[Eur.Neuropsychopharmacol.,12,Suppl.3,418,2002]。支持概念是化合物I可以用于治療ADHD。此外，本發(fā)明化合物由于以上討i侖的oc-l腎上腺素能受體和5-HT2拮抗作用而可能有鎮(zhèn)靜效果，這有益于ADHD的治療。如在實(shí)施例3中研究所示，用鼠表示化合物I降低活動(dòng)強(qiáng)度，沖動(dòng)，注意力擊夾乏。憂郁癥是抑郁癥的一種特定亞型，往往與嚴(yán)重抑郁癥相聯(lián)系；抑郁癥的這種類(lèi)型也稱為憂郁型抑郁癥。憂郁癥是與焦慮、未來(lái)畏懼、失眠、食欲不振相聯(lián)系的。抑制血清素如去甲腎上腺素兩者再攝取的化合物例如文拉法辛，已經(jīng)有人顯示在有嚴(yán)重抑郁癥和憂郁癥的患者的治療中是特別有效的[Depres.Anxiety,12,50-54,2000]。如以上所討論的,產(chǎn)生5-HT2c拮抗作用的化合物能提高多巴胺，因而這樣的化合物可望有效地用于治療憂郁癥[Psych-pharm.Bul1.,39,147-166,2006]。此外，本發(fā)明化合物的a-l腎上腺素能受體和5-HT2拮抗作用有助于使睡眠正常化，因而所述^ft合物可用于治療憂郁癥。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種用于治療ADHD,憂郁癥，治療4氐抗的抑郁癥或在抑郁癥中殘留的癥狀的方法，該方法包含對(duì)所需患者給藥治療有效果的4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶和其酸加成鹽(化合物I)。在一種實(shí)施方案中，因以上所列任何一種疾病而治療的所述患者是先診斷有所述疾病者。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物的給藥量是約0.001約100mg/kg體重/日。典型口服劑量范圍是約0.001約100mg/kg體重/日、較好約0.01約50mg/kg體重/日、以1個(gè)或多個(gè)劑量例如13個(gè)劑量給藥。確切劑量取決于給藥頻率和方式，治療對(duì)象的性別、年齡、體重和總體狀況，治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性，任何要治療的伴行疾病以及業(yè)內(nèi)技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的其它因素。成人的典型口服劑量范圍是1100mg/日的本發(fā)明化合物，例如130mg/日、525mg/日或5-60mg/日。典型地，一日一次或兩次給藥0.160mg、例J;口0.1-50mg,125mg、l畫(huà)35mg汷口l、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或60mg化合物I，就可以做到這一點(diǎn)。本文中使用的化合物的"治療有效量"系指在一種包含所述化合物給藥的治療干預(yù)中足以治愈、緩解或部分終止某一給定疾病及其并發(fā)癥的臨床表現(xiàn)的數(shù)量。足以實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)的數(shù)量就定義為"治療有效量"。這一術(shù)語(yǔ)也包括在一種包含所述化合物給藥的治療中足以治愈、緩解或部分終止某一給定疾病及其并發(fā)癥的臨床表現(xiàn)的數(shù)量。每一個(gè)目的的有效量都取決于該疾病或受傷的嚴(yán)重性、以及該對(duì)象的體重和總體狀態(tài)。要理解的是，適當(dāng)劑量的確定可以實(shí)現(xiàn)如下利用常規(guī)實(shí)^r,構(gòu)建數(shù)值點(diǎn)陣，和測(cè)試該點(diǎn)陣中不同的點(diǎn)，這些都在訓(xùn)練有素的醫(yī)生的普通技能范圍內(nèi)。本文中使用的"治療"這一術(shù)語(yǔ)系指患者的管理和護(hù)理，以達(dá)到克服某一病癥例如疾病或異常之目的。這一術(shù)語(yǔ)意圖包括該患者所患的某一給定病癥的全治療譜，例如該活性化合物給藥以緩解癥狀或并發(fā)癥、以延纟爰該疾病、異?；虿“Y的進(jìn)展、以纟爰解或減輕癥狀和并發(fā)癥、和/或以治愈或消除該疾病、異?；虿“Y以及以預(yù)防該病癥，其中預(yù)防要理解為患者的管理和護(hù)理以達(dá)到克服該疾病、病癥、或異常之目的，而且包括活性化合物給藥以預(yù)防該癥狀或并發(fā)癥發(fā)作。不過(guò)，預(yù)防性(預(yù)防)和治療性(治愈)治療是本發(fā)明的兩個(gè)獨(dú)立方面。要治療的患者較好是哺乳動(dòng)物、尤其人類(lèi)。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶和其酸加成鹽(化合物l)在藥物的制備中用于治療對(duì)治療ADHD,憂郁癥，治療^t氐抗的抑郁癥或在抑郁癥中殘留的癥狀的用途。。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及4-[2-(4-甲基苯硫基)-苯基]哌啶和其酸加成鹽nt合物I)在治療ADHD,憂郁癥，治療4氏抗的抑郁癥或在抑郁癥中殘留的癥狀的用途。本發(fā)明化合物可以作為純化合物單獨(dú)、或以與醫(yī)藥上可接受載體或賦形劑的組合、以要么單一劑量要么多劑量給藥。按照本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以用醫(yī)藥上可接受載體或稀釋劑以及任何其它已知佐藥和賦形劑^安月褒'貫常^支術(shù)i"列^口Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,19Edition,Gennaro,Ed.,MackPublishingCo.,Easton,PA,1995中開(kāi)的那些配制。例如經(jīng)口、經(jīng)直腸、經(jīng)鼻、經(jīng)肺、經(jīng)局部(包括經(jīng)頰和經(jīng)舌下)、透皮、經(jīng)腦池內(nèi)、經(jīng)腹膜內(nèi)、經(jīng)陰道、和非經(jīng)腸(包括經(jīng)皮下、經(jīng)肌內(nèi)、經(jīng)腱鞘內(nèi)、經(jīng)靜脈內(nèi)、和經(jīng)皮內(nèi))途徑，經(jīng)口途徑是較好的。要知道的是，較好的途徑取決于要治療的對(duì)象的總體狀況和年齡、要治療的病癥的性質(zhì)、和所選擇的有效成分。經(jīng)口給藥用醫(yī)藥組合物包括固體劑型例如膠嚢劑、片劑、糖錠劑、丸劑、錠劑、散劑、和顆粒度。適當(dāng)時(shí)，它們可以制備得有包衣。經(jīng)口給藥用液體劑型包括溶液劑、乳狀液劑、懸浮液劑、糖漿劑和酏劑。非經(jīng)常給藥用醫(yī)藥組合物包括無(wú)菌水性和非水性可注射溶液劑、分散液劑、懸浮液劑或乳狀液劑以及使用前要用無(wú)菌可注射溶液或分散液重建的無(wú)菌粉末劑。其它適用給藥形式包括栓劑、噴霧劑、軟膏劑、乳油劑、凝膠劑、吸入劑、皮膚貼劑、植入物等。方便地，化合物I是以含有所述化合物的單元?jiǎng)┬徒o藥的，其數(shù)量為約0.150mg、例如1mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg或35mg本發(fā)明化合物。對(duì)于非經(jīng)腸途徑例如經(jīng)靜月永內(nèi)、經(jīng)腱鞘內(nèi)、經(jīng)月幾內(nèi)和類(lèi)似的給藥來(lái)說(shuō)，劑量典型地是經(jīng)口給藥所采用劑量的約一半左右。對(duì)于非經(jīng)腸給藥來(lái)說(shuō)，可以采用本發(fā)明化合物在無(wú)菌水溶液、水性丙二醇、水性維生素E或者芝麻油或花生油中的溶液。必要時(shí)這樣的水溶液應(yīng)當(dāng)是適當(dāng)緩沖的，而且液體稀釋劑先用足夠的食鹽水或葡萄糖進(jìn)行等滲化。水溶液特別適用于經(jīng)靜脈內(nèi)、經(jīng)肌內(nèi)、經(jīng)皮下和經(jīng)腹膜內(nèi)給藥。所采用的無(wú)菌水性介質(zhì)都是容易用業(yè)內(nèi)技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)得到的。適用的醫(yī)藥載體包括惰性固體稀釋劑或填料、無(wú)菌水溶液、和各種有機(jī)溶劑。固體載體的實(shí)例是乳糖、白土、蔗糖、環(huán)糊精、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸和纖維素低級(jí)烷基醚。液體載體的實(shí)例是糖漿、花生油、橄欖油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧乙烯和水。然后，通過(guò)合并本發(fā)明化合物和醫(yī)藥上可接受載體而形成的醫(yī)藥組合物容易地以適用于所公開(kāi)給藥途徑的各種各樣劑型給藥。適用于經(jīng)口給藥的本發(fā)明制劑可以作為分立單元例如膠嚢劑或片劑提供，每個(gè)單元含有預(yù)定量的有效成分，而且可以包括適用賦形劑。進(jìn)而，口服配方可以呈散劑或顆粒劑、水性或非水性液體中的溶液劑或懸浮液劑、或者水包油型或油包水型液體乳狀液劑的形式。如果將固體載體用于經(jīng)口給藥，則該制劑可以是片劑、置于硬明膠膠嚢中、呈粉末或小丸形式、呈錠劑或糖錠形式等。固體載體的數(shù)量可以各異，但通常是約25mg約1g。如果使用液體載體，則該制劑可以呈糖漿劑、乳狀液劑、軟膠嚢劑、或無(wú)菌可注射液體例如水性或非水性液體懸浮液劑或溶液劑的形式。片劑可以制備如下將有效成分與普通佐藥和/或稀釋劑混合，隨后用慣常壓片機(jī)壓縮該混合物。佐藥或稀釋劑的實(shí)例包含玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、滑石、硬脂酸鎂、明膠、乳糖、樹(shù)膠等。常用于此類(lèi)目的的任何其它佐藥或添加劑例如著色劑、矯臭矯味劑、防腐劑等也可以使用，只要它們是與該有效成分可兼容的即可。包含本發(fā)明化合物的膠嚢劑可以制備如下將一種包含所述化合物的粉末與微晶纖維素和硬脂酸鎂混合，并將所述粉末裝入一種硬膠嚢中。任選地，所述膠嚢可以用適當(dāng)顏料著色。典型地，膠嚢將包含0.25~20%本發(fā)明化合物,例如0.51.0%、3.0~4.0%、14.016.0%本發(fā)明化合物。這些強(qiáng)度可以以單元?jiǎng)┬头奖愕剌斔?、5、10、15、20和25mg本發(fā)明化合物。注射用溶液劑可以制備如下將有效成分和可能添加劑溶解于部分注射用溶劑、較好無(wú)菌水中，將該溶液調(diào)整到所希望體積，使該溶液滅菌，并將其灌裝到適用安瓿或管形瓶中。業(yè)內(nèi)慣常使用的任何適用添加劑例如等滲劑、防腐劑、抗氧化劑等。化合物I可單獨(dú)或與另一治療活性化合物結(jié)合給藥,其中兩種化合物可同時(shí)或順序給藥。可有利地與化合物I結(jié)合的治療活性化合物的例子包括鎮(zhèn)靜劑或安眠劑，如苯并地西泮;抗驚厥劑，如拉莫三嗪,丙戊酸,托吡酯,力口巴噴丁,卡馬西平；心情穩(wěn)定劑如鋰;多巴胺能藥物，如多巴胺激動(dòng)劑和L-多巴;用于治療ADHD的藥物,如托莫西汀;精神刺激劑，如莫達(dá)非尼,氯胺酮,哌曱酯和苯丙胺;其他抗抑郁藥，如米氮平,米安色林和安非他酮;荷爾蒙,如T3,雌激素,DHEA和睪酮;非典型抗精神病,如奧氮平和阿立派唑;典型抗精神病，如氟哌啶醇；用于治療阿耳茨海默氏疾病的藥物,如膽堿脂酶抑制劑和美金剛，葉酸;S-腺苷基-蛋氨酸;免疫調(diào)節(jié)劑，如干擾素；鴉片劑,如丁丙諾非;血管緊張素II受體1拮抗劑(ATI拮抗劑);ACE抑制劑;抑胃酶氨酸;和al腎上腺能拮抗劑,如哌唑嗪?；衔颕可以<象WO2003/029232或WO2007/144006中所述那樣制備。不同的鹽可以通過(guò)添加適當(dāng)酸至游離石咸、隨后析出沉淀來(lái)制備。沉淀可以通過(guò)諸如冷卻、脫除溶劑、添加另一種溶劑或其混合物進(jìn)行。本文中引用的所有參考文獻(xiàn)、包括出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、和專(zhuān)利都以其全文列為本文參考文獻(xiàn)，并達(dá)到這樣的程度個(gè)別、具體地指出要列為參考文獻(xiàn)和全文列入本文中(在法律允許的最大程度上)的每篇參考文獻(xiàn)，無(wú)論本文中其它地方所做的、任何單獨(dú)提供的特定文件引用如何。在描述本發(fā)明的范疇內(nèi)，"一個(gè)"、"一種"和"該"這些術(shù)語(yǔ)和類(lèi)似參照物的使用，要理解為同時(shí)涵蓋單數(shù)和復(fù)數(shù)，除非本文中另有指出或上下文明顯相矛盾。例如，"化合物，，這一短語(yǔ)要理解為系指本發(fā)明的各種"化合物"或具體描述的方面，除非另有指出。除非另有指出，否則本文中提供的所有確切數(shù)值都是相應(yīng)近似值的代表(例如，所提供的、關(guān)于某一特定因子或測(cè)定的所有確切例示性數(shù)值，都可以理解為也提供適當(dāng)時(shí)用"約，，修飾的相應(yīng)近似測(cè)定)。本文中參照一種或多種要素使用"包含"、"有"、"包括'，、或"含有"這樣的術(shù)語(yǔ)對(duì)本發(fā)明任何一個(gè)或多個(gè)方面的描述，意圖提供對(duì)"組成為"、"基本組成為"、或"實(shí)質(zhì)上包含"該一種或多種要素的本發(fā)明一個(gè)或多個(gè)類(lèi)似方面的支持，除非上下文另有說(shuō)明或明顯矛盾(例如，本文中描述為包含某一特定要素的組合物應(yīng)當(dāng)理解為也描述一種由該要素組成的組合物，除非上下文另有說(shuō)明或明顯矛盾)。實(shí)施例分析方法X射線粉末衍射(XRPD)是在一臺(tái)PANaly-ticalX，PertPROX射線衍射儀上使用CuKal輻射測(cè)定的。樣品是以2e范圍為5~40°的反射方式使用X，celerator檢測(cè)器測(cè)定的。元素組成(CHN)是用Elementar公司的一臺(tái)ElementarVarioEL儀器上測(cè)定的。每次測(cè)定使用約4mg樣品，結(jié)果是作為2次測(cè)定的平均值給出的。實(shí)施例la4b合物I的HBr鹽向442g攪拌和稍微加熱(約45°C)的油狀4-(2-對(duì)甲苯硫基苯基)哌啶畫(huà)l誦羧酸乙酯中添加545mL33wt%HBr/AcOH(5.7M,2.5eqv.)。這種混合給出l(TC力文熱。最終添加之后，將反應(yīng)混合物加熱到80°C、并保持18小時(shí)。取樣，用HPLC分析，且若未完成則必須再添加33wt%HBr/AcOH。否則，將該混合物冷卻到25°C，使產(chǎn)物4-(2-對(duì)曱苯硫基苯基)哌啶氫溴酸鹽析出沉淀。在25°C1小時(shí)后，向稠懸浮液中添加800mL二乙醚。再繼續(xù)攪拌l小時(shí)，然后該產(chǎn)物過(guò)濾分離、用400mL二乙醚洗滌、在40。C真空干燥過(guò)夜?；衔颕的氫溴酸鹽作為白色固體分離出來(lái)。實(shí)施例lb4匕合物I的HBr鹽2_(4_甲苯硫基)苯基溴在一個(gè)攪拌的、有氮?dú)飧采w的反應(yīng)器中，N-甲基吡咯烷酮(NMP,4.5L)用氮?dú)獯祾?0mm。添加4-曱基苯硫酚(900g,7.25mol),然后添加1,2-二溴苯(1709g,7.25mol)。最后，添加^又丁醇鉀(813g,7.25mol)作為最后反應(yīng)物。反應(yīng)是放熱的，使反應(yīng)混合物的溫度上升到70。C。然后在23小時(shí)內(nèi)將反應(yīng)混合物加熱到12CTC。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫。添加乙酸乙酯(4L)和氯化鈉水溶液(15%,2.5L)。該混合物攪拌20min。將水相分離、用另一份乙酸乙酯(2L)萃取。將水相分離，有機(jī)相合并、用氯化鈉溶液(15%，2.5L)洗滌。將有才幾相分離、用石危酸鈉干燥、減壓蒸發(fā)，給出一種含有2030%NMP的紅色油狀物。該油狀物用曱醇稀釋到2倍體積，將混合物回流。再添加曱醇，直至得到一種清澈紅色溶液。該溶液邊接種邊徐徐冷卻到室溫。產(chǎn)物結(jié)晶成灰白色晶體，將其過(guò)濾分離、用曱醇洗滌、在真空烘箱中于4(TC干燥直至恒重。4_羥基_4-(2-(4-曱苯硫基)苯基)哌啶-l-羧酸乙酯在一個(gè)有氮?dú)飧采w的攪拌反應(yīng)器中，將2-(4-甲苯硫基)苯基溴(600g,2.15mol)懸浮在庚烷(4.5L)中。在室溫下，用10mm時(shí)間添加10MBuLi/己烷(235mL,2.36mol)。注意到只有微小放熱。該懸浮液在環(huán)境溫度下攪拌l小時(shí)，然后冷卻到-40。C。以不快于使反應(yīng)溫度保持在-40。C以下的速率添加溶解在THF(1.5L)中的l-乙酯基-4-哌啶酮(368g,2.15mol)。當(dāng)反應(yīng)已經(jīng)達(dá)到完成時(shí)，使其回升到0。C、添加1MHC1(1L),并保持在l(TC以下的溫度。將酸水相分離、用乙酸乙酯(1L)萃取。有機(jī)相合并、用氯化鈉溶液(15%,1L)萃取。有機(jī)相用硫酸鈉干燥、蒸發(fā)到一種半結(jié)晶物料。用乙醚(250mL)使其淤漿化、濾出。在真空烘箱中于40。C干燥直至恒重。4-(2-(4-曱苯硫基)苯基)哌啶-l-羧酸乙酯將三氟乙酸(2.8kg,24.9mol)和三乙基甲硅烷(362g,3.1mol)加入一個(gè)有高效率攪拌器的反應(yīng)器中。將4-羥基-4-(2-(4-甲苯硫基)苯基)哌啶-l-羧酸乙酯(462g,1.24mol)分批經(jīng)由粉末漏斗添加。反應(yīng)是稍微放熱的。溫度上升到50。C。添加結(jié)束后，在18小時(shí)內(nèi)讓反應(yīng)混合物上升到60。C。讓反應(yīng)混合物冷卻到室溫。添加甲苯(750mL)和水(750mL)。水相用另一份甲苯(750mL)萃取，將有機(jī)相和水相分離。有才幾相合并、用氯化鈉溶液(15%,500mL)洗滌，用碌u酸鈉干燥。將碌u酸鈉濾出、濾液減壓蒸發(fā)，得到一種紅色油狀物，后者在下一步驟進(jìn)一步加工。4-(2_(4-甲苯硫基)苯基)哌啶氫溴酸鹽在一個(gè)攪拌反應(yīng)器中，讓來(lái)自實(shí)施例3的紅色油狀粗4-(2-(4-甲苯硫基)苯基)哌咬-1-羧酸乙酯與氬溴酸/乙酸(40%,545mL,3.11mol)混合。該混合物在80。C加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫。在該冷卻期間，產(chǎn)物結(jié)晶出來(lái)。在室溫下l小時(shí)后，將乙醚(800mL)添加到該反應(yīng)混合物中，混合物再攪拌1h。將產(chǎn)物濾出、用乙醚洗滌、在真空烘箱中于5(TC干燥直至恒重。實(shí)施例lc化合物I的HBr鹽的重結(jié)晶將10.0g諸如以上制備的化合物1的HBr鹽在100mLH20中加熱回流。該混合物在8090。C變得清澈和充分溶解。向該清澈溶液中添加1g木炭、繼續(xù)回流15min、然后過(guò)濾、使之自發(fā)冷卻到室溫。在該冷卻期間，白色固體的沉淀發(fā)生，懸浮液在室溫?cái)嚢鑜小時(shí)。過(guò)濾、在40。C真空干燥過(guò)夜，發(fā)生6.9g(69%)化合物I的HBr酸加成鹽。見(jiàn)圖1的XRPD。元素分析3.92%N,59.36%C,6.16%H(理論值3.85%N,59.34%C,6.09%H)。實(shí)施例Id游離堿儲(chǔ)備溶液的制備將500mL乙酸乙酯和200mLH20的混合物添加到50g化合物I的HBr鹽中，產(chǎn)生一種兩相淤漿。向這種淤漿中添加約25mL濃NaOH,這導(dǎo)致生成一種清澈的兩相溶液(實(shí)測(cè)pH為1314)。該溶液劇烈攪拌15min，將有機(jī)相分離。有機(jī)相用200mLH2O洗滌、用Na2S04干燥、過(guò)濾、在60。C真空蒸發(fā)，產(chǎn)生38g產(chǎn)率(99。/。)幾乎無(wú)色油狀的游離堿。使用乙酸乙酯溶解10g該油狀物并將體積調(diào)整到150mL,產(chǎn)生一種乙酸乙酯中0.235M儲(chǔ)備溶液，使用其中1.5mL等分樣品(100mg)游離堿。使用96vol。/。EtOH溶解10g該油狀物并將體積調(diào)整到100mL,產(chǎn)生一種EtOH中0.353M儲(chǔ)備溶液，使用其中1.0mL等分樣品(100mg游離堿)。實(shí)施例le使用游離磁/f諸備溶液的鹽生成將給定等分樣品置于試管中，且邊攪拌邊添加表l中所指出的適量酸。如果該酸是一種液體，則添加其凈相，否則將其溶解于給定溶劑中然后添加。在混合和沉淀后繼續(xù)攪拌過(guò)夜，過(guò)濾收集沉淀物。在于30。C真空干燥前，取出一份小參考樣，在室溫下干燥而不抽空。之所以包括這個(gè)程序，是為了測(cè)試溶劑合物。一些結(jié)果列于表1中。XRPD衍射圖顯示于圖122中，而所選擇的峰位置列于表2中。表3顯示本發(fā)明化合物在水中的溶解度以及所得到飽和溶液中的pH。"沉淀物"欄顯示該溶解度測(cè)定后分離的沉淀物是否與所溶解的化合物相同，這一點(diǎn)是生成水合物的指示。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表2所選擇的X射線峰位置(°2e),2:1系指2堿/1酸，所有值都±0.1°<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)施例2A血清素(5-HT)和去曱腎上腺素(NE)再攝取抑制試驗(yàn)化合物和大鼠皮質(zhì)突觸體制劑的等分樣品在37。C培養(yǎng)10min,然后添加卩H]NE或卩H]5-HT(最終濃度10nM)。非專(zhuān)性攝取是在10|uM它舒普侖或西酞普蘭的存在下測(cè)定的，而總攝取量是在緩沖劑的存在下測(cè)定的。各等分樣品培養(yǎng)15min/37。C。培養(yǎng)后，突觸體吸收的pH]NE或^H]5-HT是使用一種Tomtec細(xì)胞收集器程序、通過(guò)經(jīng)由預(yù)先在0.1%PEI中浸漬30min的UnifilterGF/C過(guò)濾分離的。過(guò)濾器洗滌、在一臺(tái)WallacMicroBeta計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)。對(duì)NET,化合物I顯示出IC5o值為23nM。對(duì)SERT,化合物I顯示出IC5o值為8nM。實(shí)施例2B5-HT!拮抗作用測(cè)試化合物I對(duì)血清素受體的親和性，并發(fā)現(xiàn)其顯示出在5-HT2A受體上有親和性(IQ54nM)的拮抗性能。該親和性是從Y=100/(1+10(》—、c)計(jì)算的，式中Y表示。/。結(jié)合，而X表示化合物濃度。使用5個(gè)化合物濃度(l,10,30,100,1000nM)來(lái)計(jì)算IC5o值。Ki是從ChengPrusoff方程Ki《CW(l+([L]/Kd))計(jì)算的。親和性是以MDLPharmaservices分類(lèi)號(hào)271650確定的。在表達(dá)人5-HT2A受體的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，化合物I顯示出竟?fàn)幮赞卓剐阅堋Ｔ摶衔锱c5-H丁2A受體結(jié)合的KKl00nM,而在功能試-驗(yàn)中，該化合物拮抗5-HT誘發(fā)的、胞內(nèi)l&藏的Ca"的釋放，Kb為67nM。Schild分析揭示了Kb為100nM的竟?fàn)幮赞卓棺饔谩?shí)驗(yàn)進(jìn)行如下實(shí)'驗(yàn)前2或3天，將表達(dá)250fmol/mg人5-HT2A受體的CHO細(xì)胞以足以在實(shí)驗(yàn)當(dāng)日產(chǎn)生單融合層的密度涂在平皿上。該細(xì)胞在一臺(tái)5%C02、95%濕度、37。C恒溫箱中加染料(Ca2+試劑盒，MolecularDevices公司)60min?；A(chǔ)熒光是用一臺(tái)熒光影像板讀出器或MolecularDevices7>司(美國(guó)力口州Sunnyvale)的FLIPR384、以488nm的激發(fā)波長(zhǎng)和500560nm的發(fā)射范圍監(jiān)測(cè)的。激光強(qiáng)度設(shè)定到適當(dāng)水平，以得到大約800010000熒光單位的基礎(chǔ)值?；A(chǔ)熒光的變異應(yīng)當(dāng)<10%EC5Q值是使用涵蓋至少3個(gè)數(shù)量級(jí)的試驗(yàn)化合物遞增濃度評(píng)價(jià)的。評(píng)價(jià)了pA2值，以用4個(gè)不同化合物濃度(150、400、1500和4000nM)挑戰(zhàn)5-HT的全劑量-響應(yīng)曲線。也評(píng)價(jià)了Kb值，以用5-HT的EC85挑戰(zhàn)試驗(yàn)物質(zhì)的2個(gè)數(shù)量級(jí)濃度。試-瞼物質(zhì)在5-HT之前5min添加到該細(xì)胞中。Ki值是用Cheng-Pmsoff方程計(jì)算的。實(shí)施例2C5-HT;a受體拮抗作用在表達(dá)了人同數(shù)5-HT3A受體的卵母細(xì)胞中，5-HT以ECso為2600nM激活了流。這種流可以用經(jīng)典5-HT3拮抗藥例如昂丹司瓊拮抗。昂丹司瓊在這個(gè)系統(tǒng)中顯示出lnM以下的Ki值。本發(fā)明化合物在低濃度(O.lnM100nM)時(shí)顯示出強(qiáng)拮抗作用(IC50~10nm/Kb2nM),而當(dāng)以更高濃度(100100000nM)施用時(shí)顯示出興奮性能(EC5o~2600nM)，達(dá)到5-HT本身i秀發(fā)的最大流的大約7080%的最大流。在表達(dá)了大鼠同數(shù)5-HT3A受體的卵母細(xì)胞中，5-HT激活了EC5o為3.3|LiM的流。這些實(shí)-驗(yàn)進(jìn)4亍如下。卵母細(xì)月包是用外科手術(shù)法/人以0.4。/。MS-222麻醉10~15min的成熟雌性Xenepuslaevis中取出的。然后，這些卵母細(xì)月包在OR2緩沖劑(82.5mNNaCl，2.0mMKCl，1.0mMMgCl2和5.0mMHEPES，pH7.6)中以0.5mg/mL膠原酶(1A型，Sigma-Aldrich公司)在室溫下消解23h。選擇去掉濾泡層的卵母細(xì)胞，在改進(jìn)的Barth，s食鹽水緩沖劑[88mMNaCl，lmMKCl,15mMHEPES，2.4mMNaHC03，0.41mMCaCl2,0.82mMMgSO4,0.3mMCa(N03)2]中培養(yǎng)24小時(shí)，該纟爰沖劑補(bǔ)充了2mM丙酮酸鈉、0.1U/L青霉素和0.1pg/L鏈霉素。選擇階段IV-IV卵母細(xì)胞，注射1248nL含有1450pg有人5-HT3A受體編碼的cRNA的無(wú)水核酸酶，在18。C培養(yǎng)直至它們用于電生理記錄(注射后1~7日)。將有人5-HT3受體表達(dá)的卵母細(xì)胞置1mL浴中，用林4各氏緩沖劑(115mMNaCl,2.5mMKCl，lOmMHEPES,1.8mMCaCl2,0.1mMMgCl2,pH7.5)灌注。細(xì)月包用含有3MKC1的塞瓊脂0.5~1MQ電才及和由GeneClamp500B放大器加-90mV電壓進(jìn)行移植。該卵母細(xì)胞不斷地用林才各氏緩沖劑灌注，并將藥物施用于該灌注液中。將5-HT興奮劑溶液施用10~30秒。5-HT3受體拮抗藥的藥效是通過(guò)測(cè)定對(duì)10(LiM5-HT刺激的濃度-響應(yīng)考察的。實(shí)施例2Da1A受體拮抗作用對(duì)化合物I進(jìn)行對(duì)OdA受體的親和性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其顯示出拮抗性能，對(duì)a!A受體有中等親和性(K尸34nM)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日(關(guān)于膜制備的描述見(jiàn)以下)將膜解凍，在緩沖劑中用一臺(tái)UltraTurrax均化，并稀釋到所希望濃度(5嗎/孔~5|ug/900|uL，貯藏于水上直至使用)。實(shí)驗(yàn)始于50|uL試驗(yàn)化合物、50luL卩H]-哌唑。秦和900fiL膜的混合，該混合物在25。C培養(yǎng)20min。非專(zhuān)性結(jié)合是在10fiMWB-4101的存在下確定的，而總結(jié)合是在緩沖劑的存在下確定的。培養(yǎng)之后，使用Tomtec細(xì)月包收集程序(D4.2.4)，通過(guò)經(jīng)由預(yù)先在0.1%PEI中浸漬30min的UnifilterGF/B過(guò)濾，使結(jié)合的配體與未結(jié)合的配體分離。96孔過(guò)濾器用1mL冰冷緩沖劑洗滌3次、在50。C干燥、向該過(guò)濾器中添加35|uL閃爍液/孔。結(jié)合的放射性是在一臺(tái)WallacOY1450MicroBeta上計(jì)數(shù)的。親和性是從Y^00/(1+10^。"C5()計(jì)算的，式中Y表示Q/。結(jié)合，X表示化合物濃度。使用涵蓋2個(gè)數(shù)量級(jí)的化合物濃度計(jì)算IC5o值。Ki是從Cheng-Prusoff方程Ki二IC5。/(l+([L]/Kd))計(jì)算的。在功能試驗(yàn)中，化合物I拮抗了腎上腺素誘發(fā)的、胞內(nèi)貯藏的Ca"的釋放，功能試驗(yàn)揭示化合物是拮抗藥。這些實(shí)-瞼基本上像以下所述那樣進(jìn)行。所有細(xì)胞都是在補(bǔ)加了10%BCS、4mML-谷氨酰胺(或在COS-7的情況下2mM)、和100單位/mL青霉素+100)ug/mL鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中、在37"C和5。/。C02培養(yǎng)的。在試驗(yàn)前24小時(shí)，將表達(dá)了人0dA-7受體的CHO細(xì)胞接種到涂有聚-D-賴氨酸的384孔黑壁微升平亞中。將培養(yǎng)基吸入、各細(xì)胞在試驗(yàn)緩沖劑(50pL/孑L)中在5。/oC02中、在37。C用1.5pMFluo畫(huà)4加染料1小時(shí)，該試'瞼緩沖劑的組成為Hank's均tf鹽溶液(138mMNaCl、5mMKC1、1,3mMCaCl2、0.5mMMgCl2、0.4mMMgS04、0.3mMKH2P04、0.3mMNa2HP04、5.6mM葡萄糖)力口20mMHEPESpH7.4、0.05%BSA和2.5mM羥苯磺丙胺。棄去過(guò)剩染料之后，細(xì)胞用試驗(yàn)緩沖劑洗滌、分層，最終體積等于45pL/孔(對(duì)拮抗藥試^r而言30jaL/孔)。在拮抗藥評(píng)估的情況下，此時(shí)添加拮抗藥或載劑，作為4倍于最終濃度(最終DMSC^10/0)的含4。/。DMSO緩沖劑中的15jaL等分樣品，隨后培養(yǎng)20min?；A(chǔ)熒光是用一臺(tái)熒光成丫象斗反讀出器或MolecularDevices^>司(Sunnyvale,CA)的FLIPRTM以激發(fā)波長(zhǎng)為488nm、發(fā)射范圍為500560nm監(jiān)測(cè)的。調(diào)整激光激發(fā)能量，使得基礎(chǔ)熒光讀數(shù)為大約8000相對(duì)熒光單位(RFU)。然后，在室溫下以用試驗(yàn)緩沖劑(15|uL)稀釋的興奮劑激發(fā)細(xì)胞，在為期2.5min內(nèi)以1.5秒間隔測(cè)量RFU。計(jì)算每一孔的熒光最大變化。用非線性回歸法(Hill方程)分析從最大熒光變化^f汙生的濃度響應(yīng)曲線。為了確定拮抗作用，在(如上所述)化合物培養(yǎng)20min后添加固定濃度的標(biāo)準(zhǔn)興奮劑血清素。實(shí)施例2E多巴胺提高化合物I的單一注射劑量依賴地提高了大鼠前額皮層中的胞外DA水平。8.9mg/kg和18mg/kg皮下注射的本發(fā)明化合物，相對(duì)于圖23中所示基線而言，使DA水平分別提高了約100%和150%。數(shù)量是作為游離堿計(jì)算的。方法使用初始重量275300g的雄性Sprague-Dawley大鼠。這些動(dòng)物在規(guī)定室內(nèi)溫度(21±2°C)和濕度(55±5%)的受控條件下以12小時(shí)亮/暗周期隔離，辨料和自來(lái)水可任意取用。三天治療實(shí)驗(yàn)使用的是滲透小型泵(Alzet,2ML1)。這些泵在無(wú)菌條件下灌裝，并在七氟烷麻醉下植入皮下。實(shí)驗(yàn)是用植入的小型泵進(jìn)行的。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)采集血樣，用于測(cè)定3天治療后試-驗(yàn)化合物的血漿水平。外科手術(shù)和微滲析實(shí)馬全試馬全動(dòng)物用hypnorm/dormicum(2mL/kg)麻醉，腦內(nèi)導(dǎo)管(CMA/12)用立體定位法植入海馬中，將滲析探針尖定位于腹海馬中(坐標(biāo)前囟前5.6mm,側(cè)向-5.0mm,腹部到硬膜7.0mm);或定位于前額皮層中(坐標(biāo)前自前3.2mm,側(cè)向3.0mm,腹部到硬膜4.0mm)。使用錨固螺釘和丙烯酸類(lèi)粘固粉固定該導(dǎo)管。動(dòng)物體溫。動(dòng)物體溫用直腸探針監(jiān)測(cè)并保持在37。C。讓動(dòng)物用2天時(shí)間從外科手術(shù)中康復(fù)，單獨(dú)關(guān)在籠中。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，將微滲析探針(CMA/12,0.5mm直徑，3mm長(zhǎng))經(jīng)由導(dǎo)管插入。這些探針經(jīng)由一種雙通道旋轉(zhuǎn)接頭連接到一臺(tái)微注射泵上。過(guò)濾的林才各氏溶液(145mMNaCl、3mMKC1、1mMMgCl2、1.2mMCaCl2)對(duì)微滲析探針的灌注始于該探針臨插入大腦中之前，而且以1(1.3)|uL/min的恒定流量率繼續(xù)于整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間。穩(wěn)定180min之后，啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。每20(30)min收集滲析物。實(shí)驗(yàn)之后，用斬首法宰殺大鼠，將其大腦取出、冷凍、切片，以驗(yàn)證探針?lè)胖?。滲析物分析滲析物中多巴胺的濃度是借助于HPLC以電化學(xué)檢測(cè)分析的。一胺類(lèi)是用逆相液體色譜法(ODS150x3mm,3iuM)分離的。多巴胺移動(dòng)相組成為90mMNaH2P04、50mM一寧檬酸鈉、367mg/L1-辛石黃酸鈉、50juMEDTA和8%乙腈(pH4.0)，流量率為0.5mL/min。電化學(xué)才全測(cè)是使用庫(kù)侖檢測(cè)器完成的，電位設(shè)定于250mV(保護(hù)電池i殳定于350mV)(CoulochemII,ESA)。實(shí)施例2F乙酰膽石咸提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)旨在評(píng)估化合物I對(duì)自由活動(dòng)大鼠前額皮層中乙酰膽堿的胞外水平的影響。使用雄性Wistar大鼠(280350g;Harlan，Zeist，荷蘭)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。大鼠單個(gè)地隔離于塑料籠(30x30x40cm)中，但可任意地獲取鉺料和水。大鼠使用異氟烷(2%,400mL/minN2〇，400mL/min02)麻醉。使用利多卡因(10%m/v)進(jìn)行局部麻醉。將每只動(dòng)物放進(jìn)一個(gè)立體定位框架(Kopf儀器公司，美國(guó))，并使用Paxinos和Watson(1982)的大鼠腦圖集將家庭制作的I-形探針(HospalAN69膜，4mm棵露表面)插入中央前額皮層(mPFC)中。探針尖端的坐標(biāo)是mPFC[AP二3.4mm,L=-0.8mm,V=5.0mm]。然后，該探:4十用牙一牛用水泥和螺4丁固定到顱骨上。氟尼辛(lmg/kg,皮下注射)是作為手術(shù)后鎮(zhèn)痛藥給藥的。實(shí)驗(yàn)在外科手術(shù)后2448小時(shí)進(jìn)行。在實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，各大鼠用可撓曲PEEK管材連接到孩i灌注泵(CMA102)上，該滲析探針以1.5|uL/min的流量率灌注含有147mMNaCl、3.0mMKCl、1.2mMCaCl2、和1.2mMMgCl2的林才各氏緩沖劑。以30min間隔，將樣t滲析樣品收集到含有550.02M甲酸的小型管形瓶中，用于測(cè)定乙酰膽堿。樣品由一種自動(dòng)分級(jí)收集器(CMA142)并于-8(TC貯存直至分析。實(shí)驗(yàn)完成后將大鼠宰殺。將大腦取出、固化于多聚曱醛溶液(4%m/v)中。每根探針的定位是通過(guò)制作大腦的冠狀切片而按照Paxinos和Watson(1982)圖集進(jìn)4亍組織學(xué)-瞼證的。將試驗(yàn)化合物溶解于10%2-OH丙基-p-環(huán)糊精中，以不同劑量經(jīng)由5mL/kg體積的皮下注射進(jìn)行給藥。乙酰膽堿的濃度是用HPLC和串聯(lián)質(zhì)譜法(MS/MS)檢測(cè)確定的。各等分樣品(25pL)用自動(dòng)樣品注射器(PerkinElmer儀器公司，系列200)注射到HPLC柱上。色譜分離在一根逆相150x2.00mm(4|um)分一斤柱(PhenomenexSynergyMAX-RP,Bester)上進(jìn)4亍，后者由一才艮4x2.0mm保護(hù)柱(PhenomenexSynergyMAX-RPAJO-6073,Bester)j呆護(hù)，兩柱都保持在30。C的溫度。移動(dòng)相(等度)由超純化水(UP)、乙腈(ACN)、和三氟乙酸(TFA)組成(UP:ACN:TFA二95.0:0.5:0.1v/v/v%)。移動(dòng)相是由一臺(tái)HPLC泵(PerkinElmer儀器公司，系列200微型泵)以0.300mL/min的流量率流經(jīng)該系統(tǒng)的。該LC/MS分析是使用一種API4000MS/MS系統(tǒng)進(jìn)行的，該系統(tǒng)由一個(gè)API4000MS/MS4全測(cè)器和一個(gè)TurboIonSpray界面(兩者均購(gòu)自荷蘭AppliedBiosystem公司)。數(shù)據(jù)采集以陽(yáng)離子化方式進(jìn)行，離子噴霧電壓設(shè)定于5.5kV,霧化器氣體壓力為50psig(在090的SCIEX尺度上)，探針溫度為600°C。該儀器以用于才企測(cè)乙酰膽堿(前體物146.1Da，產(chǎn)物86.8Da)的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式運(yùn)行。碰撞能量是21.0eV，碰撞氣體(氮?dú)?壓力保持在7(在0~12的SCIEX尺度上)。數(shù)據(jù)用Analyst數(shù)據(jù)系統(tǒng)(AppliedBiosystem,version1.2)才交準(zhǔn)和定量。取變異率<50%的2個(gè)相繼微滲析樣品作為基線水平并設(shè)定于100%。乙酰膽堿濃度的變化表達(dá)為同一對(duì)象體內(nèi)基線的百分率。數(shù)據(jù)顯示于圖24中。實(shí)施例2G乙酰膽石咸提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)得能評(píng)估化合物I對(duì)自由活動(dòng)大鼠的前額皮層和腹海馬中乙酰膽堿胞外水平的影響。使用初始重量275300g的雄性Sprague-Dawley大鼠。這些動(dòng)物在規(guī)定室內(nèi)溫度(21±2°C)和濕度(55±5%)的受控條件下以12小時(shí)亮/暗周期隔離，且可以任意獲取餌料和水。外科手術(shù)和微滲析實(shí)馬全大鼠用hypnorm/dormicum(2mL/kg)麻醉，并將腦內(nèi)導(dǎo)管(CMA/12)用空間定位法植入海馬中，旨在將滲析探針尖端定位于腹海馬中(坐標(biāo)前囟后5.6mm，側(cè)向-5.0mm,腹部到石更膜7.0mm)或定4立于前額皮層24中(坐標(biāo)前自前3.2mm,側(cè)向0.8mm,腹部到硬膜4.0mm)。4吏用錨固螺釘和丙烯酸類(lèi)粘固劑固定該導(dǎo)管。該動(dòng)物的體溫用直腸探針監(jiān)測(cè)并保持在37。C。讓大鼠在手術(shù)后康復(fù)2天，單獨(dú)關(guān)在籠中。實(shí)驗(yàn)當(dāng)曰，將微滲析:探針(CMA/12,0.5mm直徑，3mm長(zhǎng)度)經(jīng)由導(dǎo)管插入。這些探針經(jīng)由雙通道旋轉(zhuǎn)接頭連接到一臺(tái)微注射泵上。含有0.5iliM新斯的明的過(guò)濾林格氏溶液(145mMNaCl，3mMKCl，lmMMgCl2,1.2mMCaCl2)對(duì)微滲析探針的灌注始于該探針臨插入大腦中前，并以1luL/min的恒定流量率繼續(xù)于整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間。穩(wěn)定180min后，啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。每20min收集滲析物。實(shí)-瞼后將動(dòng)物宰殺，取出其大腦，冷凍、切片，以-瞼證探針配置。滲析物乙酰膽石咸的分析滲析物中乙酰膽堿(ACh)的濃度是借助于有電化學(xué)檢測(cè)的HPLC分析的，所使用的移動(dòng)相組成為100mM磷酸氬二鈉、2.0mM辛石黃酸、0.5mM氯化四甲4妄、和0.005%MB(ESA),pH8.0。含有包埋膽堿氧化酶的柱前酶反應(yīng)器消除了分析柱(ESAACH-250)上ACh分離前注射樣品(10|uL)中的膽堿；流量率0.35mL/min,溫度35。C。分析柱后，樣品通過(guò)了一個(gè)含有包埋乙酰膽堿酯酶和膽堿氧化酶的柱后固相反應(yīng)器(ESA)。后一個(gè)反應(yīng)器使ACh轉(zhuǎn)化成膽堿，隨后又使膽堿轉(zhuǎn)化成甜-菜堿和H202。后者是使用鉑電極進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)的(分析池ESA,model5040)。數(shù)據(jù)表述在單一注射實(shí)驗(yàn)中，用化合物臨給藥前3個(gè)相繼ACh樣品的平均值作為每個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)水平，將數(shù)據(jù)換算成基礎(chǔ)值的百分率(平均基礎(chǔ)注射前值歸一化為100%)。數(shù)據(jù)表述于圖25a和25b中。圖24中表述的數(shù)據(jù)顯示乙酰膽堿水平的意外降低(見(jiàn)例如8mg/kg)，這是難以解釋的而且被歸因于實(shí)驗(yàn)不確定性?？偠灾?，來(lái)自實(shí)施例2F和2G的2個(gè)數(shù)據(jù)集都顯示同樣趨勢(shì)，即大腦中胞外乙酰膽堿水平的劑量依賴型提高。這個(gè)臨床前發(fā)現(xiàn)可望解讀為可用于諸如治療以認(rèn)識(shí)缺損為特征的疾病例如阿爾茨海默病患者、部分反應(yīng)者、認(rèn)識(shí)缺損的臨床安排中認(rèn)識(shí)的改善。實(shí)施例3化合物I在自發(fā)性高血壓大鼠中的作用一ADHD的一種動(dòng)物模型ADHD的核心癥狀是注意力缺乏、活動(dòng)過(guò)度和沖動(dòng)增加。使用自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)作為注意缺乏和多動(dòng)障礙(ADHD)的動(dòng)物才莫型，WistarKyoto大鼠(SHR的母系)作為對(duì)照物[BiolPsychiatry,57,1239-47，2005]。為評(píng)定這些癥狀，利用一種涉及延遲食物獎(jiǎng)賞的操作性任務(wù)測(cè)定與注意力和沖動(dòng)性有關(guān)的參量。注意力缺乏用在^"誤的一側(cè)壓杠斥干的次數(shù)的增加來(lái)量度。沖動(dòng)性則用在沒(méi)有延遲獎(jiǎng)賞的試驗(yàn)期間內(nèi)處在關(guān)閉狀態(tài)時(shí)和在有延遲獎(jiǎng)賞的試驗(yàn)期間內(nèi)處在延遲間隔期內(nèi)的壓杠桿和查看獎(jiǎng)賞室的次數(shù)來(lái)測(cè)量?；顒?dòng)過(guò)度在紅外籠內(nèi)晝夜監(jiān)測(cè)。SHR和WistarKyoto大鼠在學(xué)會(huì)該4壬務(wù)方面沒(méi)有顯著差別。另外，兩個(gè)賦形劑組的SHR和WistarKyoto大鼠顯示出相同的尋求食物的一般動(dòng)機(jī)，反映為得到的獎(jiǎng)賞次數(shù)相同。SHR大鼠與WistarKyoto大鼠相比，顯示出輕樣i的注意力缺陷。與WistarKyoto大鼠相比，SHR大鼠的沖動(dòng)性顯著增加，并且還觀察到活動(dòng)過(guò)度。試驗(yàn)組一組WistarKyoto大鼠作為對(duì)照物，一組賦形劑治療的SHR(負(fù)對(duì)照)，兩組用嗛甲酯間歇治療的SHR(2mg/kg和5mg/kg,腹膜內(nèi)，參考組)，一組用哌甲酯通過(guò)飲用水慢性治療的SHR(達(dá)到的劑量約10mg/kg/天)，和兩組用化合物I間歇治療的SHR(5mg/kg和10mg/kg游離堿)。方法操作性試驗(yàn)在20小時(shí)的期間內(nèi)進(jìn)行，每個(gè)操作性行為籠有兩個(gè)杠桿和在該杠桿盤(pán)右側(cè)和左側(cè)相鄰的獎(jiǎng)賞室。動(dòng)物只有通過(guò)壓杠桿才能接近食物，液體可自由飲用。訓(xùn)練和試^r包括以下階段學(xué)會(huì)階段(無(wú)治療)(1)兩個(gè)杠桿都連續(xù)活動(dòng)(由活號(hào)燈指示)。每次壓下杠桿都會(huì)立即在相鄰的獎(jiǎng)賞室出現(xiàn)一份獎(jiǎng)賞，這由單只家居照明燈發(fā)出信號(hào)。(2)像(1)一樣，但是在指定的時(shí)間只有一只杠桿是活動(dòng)的，左側(cè)和右側(cè)的杠桿之間以5分鐘的周期切換。信號(hào)燈指示正確的一側(cè)。(3)像(2)—樣，但是在正確的一側(cè)的杠桿被設(shè)定為每20秒停止活動(dòng)20秒。正確一側(cè)的信號(hào)燈指示該杠桿的狀態(tài)(開(kāi)或者關(guān))。試驗(yàn)階段(治療期間)U)同學(xué)會(huì)階段(3)(2)同(1),但在一只活動(dòng)的杠桿凈皮壓下后，獎(jiǎng)賞不立即出現(xiàn)，而是在5秒的延遲間隔之后。在此期間，相應(yīng)的信號(hào)燈是"關(guān)"，杠桿4皮i殳定為不活動(dòng)。(3)同(2),但延遲間隔為10秒。(4)同(3),但延遲間隔為20秒?；衔颕在兩種試驗(yàn)劑量(5和10mg/kg,腹膜內(nèi)，試驗(yàn)前30分注射)均對(duì)SHR大鼠有顯著作用。這些作用不影響學(xué)會(huì)任務(wù)或者尋求食物的一般動(dòng)機(jī)，但在晝夜活動(dòng)監(jiān)測(cè)期間注意缺乏和沖動(dòng)性減小，同時(shí)活動(dòng)過(guò)度-運(yùn)動(dòng)活動(dòng)被劑量依賴性地抑制1小時(shí)，沒(méi)有長(zhǎng)期的作用。圖26提供了一個(gè)代表性的圖表，顯示出化合物I對(duì)SHR大鼠的注意缺乏和沖動(dòng)性的作用。哌甲酯顯示出對(duì)操作性行為的影響不一致，注意力缺乏或沖動(dòng)性沒(méi)有減小。間歇性給藥哌甲酯劑量依賴性地顯著加重SHR的活動(dòng)過(guò)度。該作用持續(xù)幾個(gè)小時(shí)。慢性給藥不改變活動(dòng)的時(shí)間歷程。這一模型的結(jié)果指示，化合物I通過(guò)與哌曱酯不同的機(jī)制影響沖動(dòng)性和注意力。在這一模型中哌曱酯作用的缺乏可能是由于哌甲酯顯示出對(duì)青少年期而不是成年的大鼠有效[Psychopharmacology(Berl),193(2),215-23,2007]。權(quán)利要求1.一種治療ADHD、憂郁癥、治療抵抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的方法，該方法包括向需要治療的患者施用治療有效量的4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶及其酸的加成鹽(化合物I)。2.權(quán)利要求l的方法，其中化合物I是HBr加成鹽。3.權(quán)利要求2的方法，其中化合物I的特征是，XRPD的峰位于約6.08、14.81、19.26和25.38。29。4.權(quán)利要求3的方法，其中化合物I的特征在于如圖1中所示的XPRD。5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的方法，其中化合物I按照每天5-60mg給藥。6.4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶和其酸加成鹽(化合物I)在制造用于治療ADHD、憂郁癥、治療4氐抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的藥物方面的應(yīng)用。7.權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中化合物I是HBr加成鹽。8.權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中化合物I的特征是，XPRD的峰位于約6.08、14.81、19.26和25.38。26。9.權(quán)利要求8的應(yīng)用，其中化合物I的特征在于如圖1中所示的XRPD。10.權(quán)利要求6-9中任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物計(jì)劃以每天5-60mg》會(huì)藥。11.用于治療ADHD、憂郁癥、治療4氐抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的4-{2-(4-甲基苯硫基)苯基}哌啶及其酸加成鹽。12.權(quán)利要求ll的化合物。該化合物是HBr加成鹽。13.權(quán)利要求12的化合物，該化合物的特征是，XRPD的峰位于約6.08、14.81、19.26和25.38。26。。14.權(quán)利要求13的化合物，該化合物的特征在于如圖1中所示的XRPD。15.權(quán)利要求11-14中任一項(xiàng)的化合物，該化合物以每天5-60mg給藥。全文摘要4-[2-(4-甲基苯硫基)苯基]哌啶及其酸加成鹽用于ADHD，憂郁癥，治療抵抗的抑郁癥或抑郁癥的殘留癥狀的治療而提供的。文檔編號(hào)A61P25/28GK101674830SQ200880008561公開(kāi)日2010年3月17日申請(qǐng)日期2008年3月14日優(yōu)先權(quán)日2007年3月20日發(fā)明者S·米勒,T·B·斯坦斯博爾申請(qǐng)人:H.隆德貝克有限公司