專利名稱：一種四元嫁接物及制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬化合物及其合成方法，涉及聚乙二醇-殼寡糖
基乙酸)嫁接物及其合成方法，以及聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸 嫁接物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤一直是直接威脅人類健康的重大疾病，腫瘤化療由于藥物本身缺乏分子靶向 性，因而出現(xiàn)治愈率低、毒副作用巨大等重大治療問題。通過合適的載體技術(shù)，將藥物直接 靶向病變組織(器官)、細(xì)胞是解決癌癥化療治愈率低和毒副作用的重要手段之一。目前 國內(nèi)外的科學(xué)家通過載體技術(shù)在腫瘤藥物的組織(器官)和細(xì)胞靶向上取得了一定的進(jìn) 展，但并沒有取得突破性的療效，其本質(zhì)在于絕大多數(shù)抗腫瘤藥物的分子作用靶點(diǎn)位于細(xì) 胞內(nèi)，因此腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物分子作用靶點(diǎn)(亞細(xì)胞器)靶向性載體材料技術(shù)的研究開發(fā)是 突破癌癥化療瓶頸的關(guān)鍵。 靶向載體的設(shè)計(jì)主要包括載體的病灶臟器靶向性，以及在此基礎(chǔ)上穿越病灶臟 器內(nèi)的病灶細(xì)胞靶向，從而完成針對藥物分子靶標(biāo)的亞細(xì)胞器靶向。早期的組織器官靶 向，利用微粒的小粒徑被動靶向到肝等組織，通過"增強(qiáng)的透過及滯留效應(yīng)"(enhanced permeability and retention effect)聚集到腫瘤組織等。當(dāng)前，研究者利用腫瘤細(xì)胞表 面某些受體(如葉酸受體)過度表達(dá)的特性，將配體修飾載體材料成功應(yīng)用于腫瘤的靶向 治療。從而達(dá)到腫瘤細(xì)胞的靶向，提高細(xì)胞內(nèi)的抗腫瘤藥物濃度，增強(qiáng)抗腫瘤藥物本身的療 效。 近年來，聚合物膠團(tuán)在藥物制劑學(xué)、生物醫(yī)學(xué)及高分子領(lǐng)域已經(jīng)引起了人們廣泛 的重視。聚合物膠團(tuán)是由兩親性的嵌段或接枝共聚物在水性介質(zhì)中自聚形成，具有核-殼 結(jié)構(gòu)。其疏水性鏈段構(gòu)成膠團(tuán)的內(nèi)核，親水性鏈段形成膠團(tuán)的外殼。疏水核可為難溶性藥 物提供儲庫的作用；親水性外膜保持膠團(tuán)在水性環(huán)境中的穩(wěn)定性，并可進(jìn)行理化性質(zhì)修飾 以達(dá)到特定的目的，如膠團(tuán)的主動靶向等。 聚合物膠團(tuán)作為一種藥物傳輸系統(tǒng)，有許多優(yōu)勢通過調(diào)整材料的溶解性、pH值、 Zeta電位等可以控制藥物在生物體內(nèi)的釋放；由于膠團(tuán)粒徑很小，故可穿過血腦屏障、網(wǎng) 狀內(nèi)皮組織系統(tǒng)，也可促進(jìn)腸胃黏膜等的良好吸收，到達(dá)大尺寸粒子無法通過的部位，達(dá)到 被動靶向的目的；聚合物膠團(tuán)骨架對藥物的保護(hù)和屏蔽作用，可在一定程度上避免藥物的 分解，保持藥物的穩(wěn)定性，降低藥物的毒性；與脂質(zhì)體相比，聚合物膠團(tuán)的載藥量較高；聚 合物材料的多樣性，使得以聚合物為載體的藥物制劑亦多樣化，能滿足各種使用需求。
有報(bào)道指出，在藥物載體中進(jìn)行親水性的聚乙二醇修飾，可以減少血漿蛋白對載 體的吸附作用，同時可減少巨噬細(xì)胞對藥物載體的吞噬作用，使載體在循環(huán)系統(tǒng)中的半衰 期延長?；诖嗽诰酆衔锬z團(tuán)的親水外殼上進(jìn)行聚乙二醇修飾，可以減少血漿蛋白對聚合 物膠團(tuán)的調(diào)理作用，從而減少巨噬細(xì)胞對聚合物膠團(tuán)的攝取，延緩聚合物膠團(tuán)從血漿中被 清除的過程。通過"增強(qiáng)的透過及滯留效應(yīng)"，可進(jìn)一步提高聚合物膠團(tuán)在腫瘤組織的被動
_脂肪酸_聚(乳酸_羥 一聚(乳酸-羥基乙酸)耙向功能。 殼聚糖是大量存在于甲殼動物殼中的多糖類甲殼素的脫乙酰產(chǎn)物，是一種具有低 毒、高生物相容性、可體內(nèi)降解的聚陽離子型天然高分子載體材料。由于殼聚糖分子結(jié)構(gòu)嚴(yán) 密，且分子量多在數(shù)十萬至上百萬，難溶于生理pH條件下的水性環(huán)境，從而限制了殼聚糖 作為藥物載體的應(yīng)用，但是殼聚糖的分子量越小，脫乙酰度越大，溶解度越大，這就為它的 應(yīng)用提出了解決思路。殼聚糖的酶降解產(chǎn)物——?dú)す烟?，保持了陽離子，低毒和生物相容性 等優(yōu)點(diǎn)，并具有良好的水溶性。但其分子鏈中親脂性的不足，影響了其作為藥物載體的細(xì)胞 轉(zhuǎn)運(yùn)功能。本發(fā)明人的前期實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖上嫁接硬脂酸后，所得殼寡糖硬脂酸嫁接 物在水性介質(zhì)中可自聚集形成膠團(tuán)，具有疏水性藥物的負(fù)載功能和腫瘤細(xì)胞快速攝取的功 能(中國發(fā)明專利ZL200710069117. 5);殼寡糖硬脂酸嫁接物經(jīng)聚乙二醇修飾(中國發(fā)明 專利申請?zhí)?00810062568. 0)后，在體內(nèi)具有長循環(huán)的功能；但殼寡糖硬脂酸嫁接物和聚 乙二醇修飾殼寡糖硬脂酸嫁接物均存在著載藥能力不足的問題，特別是正對紫杉醇、喜樹 堿等抗腫瘤藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四 元嫁接物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為殼寡糖分子中含有下式(1)、 (II)和(III)所表示的結(jié)構(gòu)單元
o
GH3CH20~fCH2CH20t(p H
CH2OH
CH2OH
-o
(II)
(III) 殼寡糖鏈上的部分自由氨基被脂肪酸、聚乙二醇和分子量為1500 5000分子量 的聚(乳酸-羥基乙酸)取代，其中n是所述聚乙二醇的聚合度，R是具有11 21個碳 原子的烷基，&是分子量為1500 5000的聚(乳酸-羥基乙酸)；殼寡糖分子中結(jié)構(gòu)單元 式(III)的數(shù)目可為1 5個；四元嫁接物中的聚乙二醇_殼寡糖_脂肪酸嫁接物已為中 國發(fā)明專利所保護(hù)(專利申請?zhí)?00810062568. O)，具體為所用殼寡糖的分子量為1 100kDa，殼寡糖鏈上的部分自由氨基被烷基取代，其取代度為1 50%， R是具有11 21 個碳原子的烷基，聚乙二醇的接枝率為0. 05 50%、分子量為1000 10000Da。
本發(fā)明的第二個目的是提供聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)
四元嫁接物的制備方法，具體通過以下方案實(shí)現(xiàn) 1.首先利用殼寡糖上氨基與端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)和脂肪酸上羧基進(jìn)行 羧氨反應(yīng)形成酰胺鍵，合成殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物(l)精密 稱取1. 0g殼寡糖溶解于160ml去離子水中；(2)另稱取殼寡糖2-10倍摩爾比的端羧基化
4聚(乳酸-羥基乙酸)、殼寡糖2-80倍摩爾比的脂肪酸、脂肪酸和端羧基化聚(乳酸-羥基 乙酸)摩爾數(shù)2-5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子水的混合溶劑中；將上 述兩溶液混合，于50°C 、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去離子水透析24h (麗CO : 3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及未反應(yīng)的碳二亞胺 (EDC)，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸，凍干濾 液，得殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物； 2.分別稱取殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化聚乙 二醇(端醛基化聚乙二醇和殼寡糖脂肪酸的摩爾比分別為l : 5-20 : 1，加入50ml蒸餾水 后探頭超聲20次使溶解(400w，工作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將 反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇-殼 寡糖_脂肪酸_聚(乳酸_羥基乙酸)四元嫁接物固體粉末。 本發(fā)明的第三個目的是提供聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸) 四元嫁接物膠團(tuán)作為載體材料在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。 本發(fā)明所制備得到的聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁 接物，具有在水性介質(zhì)中通過自聚集形成膠團(tuán)的特性，聚乙二醇修飾殼寡糖脂肪酸嫁接物 的臨界膠團(tuán)濃度在10-100 g/ml，明顯低于一般表面活性劑的臨界膠團(tuán)濃度，對羥基喜樹 堿的藥物負(fù)載能力可達(dá)15 % ，并具有腫瘤細(xì)胞的攝取能力。 本發(fā)明是在申請人前期的實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)上，在聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸嫁接物 的基礎(chǔ)上進(jìn)一步進(jìn)行聚(乳酸-羥基乙酸)的化學(xué)嫁接，制備聚乙二醇-殼寡糖-脂肪 酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物，并應(yīng)用于抗腫瘤藥物的制備，以提高藥物的負(fù)載能 力，實(shí)現(xiàn)藥物的安全高效治療。


圖l是FITC標(biāo)記聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接
物與MCF-7， H印G-2， A549三種細(xì)胞系共孵育6小時后的熒光顯微鏡照片。 圖2是載藥量分別為4. 71%、8. 74%和14. 76%的載藥膠團(tuán)的體外釋放曲線
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明結(jié)合附圖和實(shí)施例作進(jìn)一步的說明。(— )聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的制備 實(shí)施例一 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0.5 : 100(w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間24小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r'min—'離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為lOOODa。
稱取以上得到的殼寡糖1. 0g，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙猓涣矸Q取殼寡2倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為1500Da)、殼寡糖2倍摩爾比的硬脂酸、和端羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子 水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去 離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及 未反應(yīng)的EDC，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸， 凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。 分別稱取1. 0g殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為2000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為1 : 5，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲lOmin分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為45. 2nm，表面電位為28. 6mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界 膠團(tuán)濃度(CMC)為89yg/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為l個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為0. 05%和接枝率12%。
實(shí)施例二 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0.5 : 100(w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間18小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r *min—'離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為5000Da。
稱取以上得到的殼寡糖1. Og，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙?；另稱取殼寡2倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為1500Da)、殼寡糖3倍摩爾比的硬脂酸、和端 羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子 水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去 離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及 未反應(yīng)的EDC，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸， 凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。 分別稱取1. Og殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為1500Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為3 : l，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量 14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲10min分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為28. 3nm，表面電位為36. 5mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界膠 團(tuán)濃度(CMC)為46. 7 g/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為l個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為7. 0%和接枝率6. 4%。
實(shí)施例三 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0.5 : 100(w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間18小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r *min—'離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為5000Da。
稱取以上得到的殼寡糖1. Og，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙?；另稱取殼寡10倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為5000Da)、殼寡糖3倍摩爾比的硬脂酸、和端 羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子 水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去 離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及 未反應(yīng)的EDC，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸， 凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。 分別稱取1. Og殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為2000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為5 : l，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, LagunaHills, CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲lOmin分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為24. 6nm，表面電位為47. 2mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界 膠團(tuán)濃度(CMC)為9.8yg/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為5個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別
7為10. 3%和接枝率5. 8%。
實(shí)施例四 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0.5 : 100(w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間18小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r *min—'離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為5000Da。
稱取以上得到的殼寡糖1. Og，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙?；另稱取殼寡5倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為2000Da)、殼寡糖5倍摩爾比的硬脂酸、和端 羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子 水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去 離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及 未反應(yīng)的EDC，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸， 凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。 分別稱取1. Og殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為1000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為20 : 1，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲lOmin分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為36. 6nm，表面電位為39. 8mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界膠 團(tuán)濃度(CMC)為27. 6 g/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為3個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為50. 2%和接枝率8. 5%。
實(shí)施例五 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0. 5 : 100 (w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間8小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r min—1離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為18600Da。
稱取以上得到的殼寡糖1. 0g，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙猓涣矸Q取殼寡2倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為1500Da)、殼寡糖80倍摩爾比的硬脂酸、和 端羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離
8子水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用 去離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物 及未反應(yīng)的EDC，并用0.8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸-羥基乙酸)和硬脂 酸，凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。
分別稱取1. 0g殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為1000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為10 : 1，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲lOmin分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為65. 2nm，表面電位為31. 2mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界膠 團(tuán)濃度(CMC)為89. 2 g/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為l個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為5. 4%和接枝率50. 6%。
實(shí)施例六 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0. 5 : 100 (w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間8小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r min—1離心 10分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干 燥，得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為18600Da。
稱取以上得到的殼寡糖1. 0g，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙?；另稱取殼寡5倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為2000Da)、殼寡糖2倍摩爾比的硬脂酸、和端 羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子 水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用去 離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物及 未反應(yīng)的EDC，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥基乙酸)和硬脂酸， 凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。 分別稱取1. 0g殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為2000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為10 : 1，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲10min分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為56. 3nm，表面電位為35. 7mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界膠 團(tuán)濃度(CMC)為48. 5 g/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為3個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為6. 8%和接枝率1. 2%。
實(shí)施例七 將殼聚糖(平均分子量450， 000) 6g加入到200mL 1. 25 (v/v)的鹽酸水溶液中， 在55 6(TC條件下攪拌溶解，并稀氨水或稀鹽酸調(diào)pH至5. 0。以纖維素酶與殼聚糖比例 0.5 : 100 (w/w)加入纖維素酶?？刂品磻?yīng)時間2小時后，將反應(yīng)產(chǎn)物以4000r *min—'離心10 分鐘。上清液用0. 45 m微孔濾膜預(yù)處理，以不同分子量的超濾膜分級，超濾液冷凍干燥， 得到一定分子量的殼寡糖。通過凝膠滲透色譜法，測定殼寡糖的平均分子量為lOOOOODa。
稱取以上得到的殼寡糖1. Og，加入160mL雙蒸水?dāng)嚢枞芙?；另稱取殼寡5倍摩爾 比的端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)(分子量為2000Da)、殼寡糖10倍摩爾比的硬脂酸、和 端羧基化聚(乳酸_羥基乙酸)摩爾數(shù)5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離 子水的混合溶劑中，將上述兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24h后，終反應(yīng)液用 去離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除副產(chǎn)物 及未反應(yīng)的EDC，并用0.8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸-羥基乙酸)和硬脂 酸，凍干濾液，得殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物。
分別稱取1. Og殼寡糖-硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化 聚乙二醇(端醛基化聚乙二醇(分子量為5000Da)和殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙 酸)三元嫁接物的摩爾比例為10 : 1，加入50ml蒸餾水后探頭超聲20次使溶解(400w，工 作2s，間歇3s)，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中(截留分子 量為14000Da， Spectrum Laboratories, Laguna Hills，CA)透析48h，以除去未反應(yīng)的端醛 基化聚乙二醇，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_硬脂酸_聚(乳酸_羥基乙 酸)四元嫁接物固體粉末。 稱取聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物10mg，加 適量雙蒸水水浴超聲lOmin分散，并定容至lOmL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer 3000HS分析儀，測定溶液中膠團(tuán)的平均數(shù)均粒徑為105. 6nm，表面電位為24. 6mV ;通過公知 的芘熒光法，測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物的臨界膠 團(tuán)濃度(CMC)為34.5yg/mL。通過公知的氫譜核磁共振，分別測定聚乙二醇_殼寡糖_硬 脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)數(shù)目、聚乙二醇(PEG) 接枝率和硬脂酸接枝率，經(jīng)測定聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物中的聚(乳酸-羥基乙酸)的數(shù)目為3個；聚乙二醇(PEG)和硬脂酸的接枝率分別 為1. 3%和接枝率1. 4%。
( 二 )聚乙二醇_殼寡糖_脂肪酸_聚(乳酸_羥基乙酸)四元嫁接物作為藥物
載體在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用 實(shí)施例八 (1)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞攝取 取異氰基熒光素(Fluorescein isothiocynate， FITC)適量，配制成2. Omg/ml的 乙醇溶液，取10mg的實(shí)施例2的聚乙二醇-殼寡糖-硬脂酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元 嫁接物，用去離子水配成lmg/ml溶液，加入上述FITC乙醇液，使兩者摩爾比為1 : 2，室溫 下避光、磁力攪拌(400r/min)24h，終反應(yīng)液用去離子水透析24h(麗C0 :3. 5kDa， Spectrum Laboratories, Laguna Hills， CA)，去除未反應(yīng)的FITC， 分別將A549肺癌細(xì)胞、MCF-7乳腺癌細(xì)胞和H印G-2肝癌細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板 中，細(xì)胞接種密度密度1. 0 X 1051111—1個/孔。24h后細(xì)胞貼壁生長，分別加入50ul的FITC標(biāo) 記四元嫁接物，繼續(xù)培養(yǎng)1，6，24h后，采用熒光倒置顯微鏡觀察載體材料的細(xì)胞攝取情況， 共孵育6小時候的結(jié)果見圖1。從圖1可以看到熒光標(biāo)記的四元嫁接物載體材料在MCF-7， H印G-2， A549三種細(xì)胞系中均可攝取。
(2)作為藥物載體在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用 以羥基喜樹堿為模型藥物，通過透析法制備聚乙二醇_殼寡糖_脂肪酸_聚(乳 酸_羥基乙酸)四元嫁接物載藥膠團(tuán)，稱取約三份10mg實(shí)施例3的聚乙二醇_殼寡糖_脂 肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物載體分別溶于10ml水中，取50，100，200ul濃度為 10mg/ml的羥基喜樹堿二甲基亞砜(DMSO)溶液，慢慢滴加入膠團(tuán)溶液，磁力攪拌lh，冰浴探 頭超聲90次，超聲2s，間隔3s，功率300w，然后將超聲后的溶液裝入透析袋，透析袋分子截 留量為7000Da，透析去除二甲基亞砜，透析后量取體積，4000rpm離心10min去除游離HCPT， 取上清液過0.8um膜，收集過濾液得到載藥膠團(tuán)溶液。三種不同投藥量的載藥膠團(tuán)的粒徑 分別為240. 8nm、265. 8nm和315. lnm，不同投藥量載藥膠團(tuán)的電位分別為40. 65mv、38. 6mv 和38. 5mv。 取不同投藥量嫁接物載藥膠團(tuán)溶液0. 5ml，加入4. 5ml甲醇，破壞膠團(tuán)后用HPLC
測定藥物總濃度(C)。另移取載藥膠團(tuán)溶液0.4ml，置超濾離心管(Microcon預(yù)_10，麗CO
3， 000， Millipore Co. ， USA)中，以10， OOOr min—1的速度離心20min，測定濾液中游離藥
物濃度(C0)。按(2. 1)式和(2. 2)式分別計(jì)算藥物包封率和載藥量。 V :透析后液體體積；W :載體質(zhì)量 包封率(EE) = (C-C。) XV/MdrugX100% (2. 1) 載藥量(DL) = (C-CO) XV/[W+(C-CO) XV] X 100% (2. 2) 其中，C為破壞后藥物總濃度，單位為P g/ml ;CO為濾液濃度單位為P g/ml ;V為 載藥膠團(tuán)透析后的體積，單位為ml ;Md，為總投藥量，單位為yg;W為載體質(zhì)量，單位為 y g。經(jīng)測定和計(jì)算三種載藥膠團(tuán)的藥物包封率分別為97. 5%、95. 76%和86. 65%，載藥 量分別為4. 71%、8. 74%和14. 76%。 另取適量體積載藥膠團(tuán)放入透析袋中(麗CO 3500Da， SpectrumLaboratories， Laguna Hills， CA)，釋放介質(zhì)為10ml含0. 02%吐溫80的PBS(pH = 7. 4)溶液。在37。C恒 溫、振蕩頻率為60r min—1條件下進(jìn)行體外釋放實(shí)驗(yàn)。分別在0. 5h， lh， 2h， 4h， 8h， 12h， 24h
定時取樣換液。用HPLC測定樣品中藥物的含量，計(jì)算藥物的累積釋放量和累積釋放率，與
11游離羥基喜樹堿(羥基喜樹堿的miso溶液)的釋放對比，平行做三次。三種載藥膠團(tuán)的體
外釋放曲線見圖2。由圖可知載藥膠團(tuán)的體外釋放明顯慢于游離藥物，可持續(xù)釋放24小時
以上，并隨著載藥量的提高而減緩。 采用四唑鹽比色法(MTTAssay)測定游離藥物和載藥膠團(tuán)的不同細(xì)胞的毒性。24 孔培養(yǎng)板中的細(xì)胞貼壁生長后，加入不同濃度的空白膠團(tuán)，載藥膠團(tuán)及游離藥物溶液，設(shè)計(jì) 合理的膠團(tuán)濃度和藥物濃度梯度，并設(shè)置對照孔，每組重復(fù)3次，于37t:分別孵育48h后， 每孔加入601的MTT，繼續(xù)孵育4h。棄去上清液，每孔加入5001 DMSO。將培養(yǎng)板水平振蕩 10min，用酶聯(lián)檢測儀(Bio-Rad， Model 680， USA)在570nm處測定吸光值A(chǔ)，按下式計(jì)算細(xì) 胞存活率。 細(xì)胞抑制率(％ ) = (1_AT/AC) X100% 式中，AT為實(shí)驗(yàn)組570nm處的吸光值，Ac為空白對照組570nm處的吸光值。其結(jié) 果見表1.結(jié)果表明藥物經(jīng)嫁接物載體包封后，對細(xì)胞的半數(shù)致死率明顯減少，說明載藥膠 團(tuán)的體外抗腫瘤療效增強(qiáng)。 表l.游離藥物和載藥膠團(tuán)的細(xì)胞毒性結(jié)果
游離藥物的半數(shù)載藥膠團(tuán)的半數(shù)
細(xì)胞系
細(xì)胞致死率 細(xì)胞致死率
MCF-7 30±2ug/ml 1.7±0.7 HepG-2 2±0.3ug/ml 0.13±0.08 A54951士9ug/ml 2.3±0.權(quán)利要求
一種聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為殼寡糖分子中含有下式(I)、(II)和(III)所表示的結(jié)構(gòu)單元?dú)す烟擎溕系牟糠肿杂砂被恢舅?、聚乙二醇和分子量?500～5000分子量的聚(乳酸-羥基乙酸)取代，其中n是所述聚乙二醇的聚合度，R1是具有11～21個碳原子的烷基，R2是分子量為1500～5000的聚(乳酸-羥基乙酸)；，結(jié)構(gòu)單元式(III)的數(shù)目為1～5個；四元嫁接物中的聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸嫁接物中所用殼寡糖的分子量為1～100kDa，殼寡糖鏈上的部分自由氨基被烷基取代，其取代度為1～50％，R1是具有11～21個碳原子的烷基，聚乙二醇的接枝率為0.05～50％、分子量為1000～10000Da。FSA00000019105800011.tif
2. 權(quán)利要求l所述的聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物 的制備方法，其特征在于，通過以下方案實(shí)現(xiàn)(1) 利用殼寡糖上氨基與端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)和脂肪酸上羧基進(jìn)行羧氨反 應(yīng)形成酰胺鍵，合成殼寡糖_脂肪酸_聚(乳酸_羥基乙酸)三元嫁接物(a)精密稱取 1. Og殼寡糖溶解于160ml去離子水中；(b)另稱取殼寡糖2-10倍摩爾比的端羧基化聚(乳 酸_羥基乙酸)、殼寡糖2-80倍摩爾比的脂肪酸、脂肪酸和端羧基化聚(乳酸_羥基乙酸) 摩爾數(shù)2-5倍量的碳二亞胺溶解于120ml丙酮和12ml去離子水的混合溶劑中；(c)將上述 兩溶液混合，于50°C、250r/min條件下反應(yīng)24小時后，終反應(yīng)液用去離子水透析24小時， 去除副產(chǎn)物及未反應(yīng)的碳二亞胺，并用0. 8um微孔濾膜過濾去除未嫁接上的聚(乳酸_羥 基乙酸)和硬脂酸，凍干濾液，得殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物；(2) 分別稱取殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物和端醛基化聚乙二 醇(端醛基化聚乙二醇和殼寡糖脂肪酸的摩爾比為l : 5-20 : 1，加入50ml蒸餾水后探頭 超聲20次使溶解，室溫下400rpm攪拌過夜后停止反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物置于透析袋中，截留分 子量為14000Da，透析48小時，然后將透析液冷凍干燥，得聚乙二醇_殼寡糖_脂肪酸_聚 (乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物固體粉末。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁 接物作為載體材料在制備抗腫瘤藥物中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供聚乙二醇-殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)四元嫁接物，殼寡糖鏈上的部分自由氨基被脂肪酸、聚乙二醇和聚(乳酸-羥基乙酸)取代，利用殼寡糖上氨基與端羧基化聚(乳酸-羥基乙酸)和脂肪酸上羧基進(jìn)行羧氨反應(yīng)形成酰胺鍵，合成殼寡糖-脂肪酸-聚(乳酸-羥基乙酸)三元嫁接物，再與端醛基化聚乙二醇反應(yīng)，得四元嫁接物固體粉末。本發(fā)明提供的四元嫁接物具有在水性介質(zhì)中通過自聚集形成膠團(tuán)的特性，聚乙二醇修飾殼寡糖脂肪酸嫁接物的臨界膠團(tuán)濃度在10-100μg/ml，明顯低于一般表面活性劑的臨界膠團(tuán)濃度，明顯提高藥物的負(fù)載能力，并具有腫瘤細(xì)胞的攝取能力，可作為載體材料在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)藥物的安全高效治療。
文檔編號A61K47/36GK101775145SQ201010104158
公開日2010年7月14日 申請日期2010年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月26日
發(fā)明者杜永忠, 胡富強(qiáng), 袁弘 申請人:浙江大學(xué)