專利名稱：芝麻素/異芝麻素組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有芝麻素及異芝麻素的組合物(芝麻素/異芝麻素組合物)，其 由于含有規(guī)定比例的芝麻素和為其差向異構(gòu)體(異構(gòu)體)的異芝麻素，所以可提高芝麻素 類所具有的生理活性。本發(fā)明還涉及添加或含有該芝麻素/異芝麻素組合物的飲食品、液體飲料及醫(yī)藥 組合物、動(dòng)物飼料或?qū)櫸锸称贰?br> 背景技術(shù)：
在本發(fā)明中，芝麻素類是芝麻素和異芝麻素的總稱。且在本發(fā)明中，將芝麻素及異 芝麻素的混合物表示為芝麻素/異芝麻素組合物。異芝麻素及芝麻素是立體異構(gòu)體的關(guān)系。即芝麻素(sesamin)是具有化學(xué)結(jié)構(gòu)式 I 〔化合物1〕
化學(xué)結(jié)構(gòu)式I :芝麻素所示結(jié)構(gòu)的光學(xué)活性化合物，并且，其異構(gòu)體異芝麻素(episesamin)是具有化學(xué) 結(jié)構(gòu)式II 〔化合物2〕化學(xué)結(jié)構(gòu)式II:異芝麻素 所示結(jié)構(gòu)的光學(xué)活性化合物。如上化學(xué)結(jié)構(gòu)式所示，芝麻素具有平面對(duì)稱結(jié)構(gòu)，而 異芝麻素具有非對(duì)稱結(jié)構(gòu)。芝麻素是芝麻中主要的木脂素化合物之一，在芝麻籽中含有0. 0.5%。與此 相對(duì)，異芝麻素在原本的芝麻籽中并不存在，是在從芝麻油到色拉油等的精煉處理(脫色、 脫臭)過程中，芝麻素差向異構(gòu)化而生成的次要產(chǎn)物(非專利文獻(xiàn)1)，并已知此由芝麻油精 煉的芝麻素類含有基本上為1 1(重量比)的芝麻素類和異芝麻素(非專利文獻(xiàn)2)。在以往的技術(shù)文獻(xiàn)中，揭示了有關(guān)芝麻類的以下的生理活性。例如，從使用經(jīng)精煉 的芝麻素的實(shí)驗(yàn)中，證實(shí)了抑制腸內(nèi)膽固醇或膽汁酸代謝的作用(專利文獻(xiàn)1)、緩和酒精 中毒或戒斷癥狀的作用(專利文獻(xiàn)2)、改善肝功能的作用(專利文獻(xiàn)3)、多不飽和脂肪酸 在體內(nèi)的穩(wěn)定化作用(專利文獻(xiàn)4)、△ 5-去飽和酶抑制作用(非專利文獻(xiàn)3 4、專利文 獻(xiàn)5)、抑制偏頭疼的作用(專利文獻(xiàn)6)、對(duì)人體白血病細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)作用(專利文獻(xiàn)7)、褐 黑激素的氧化分解抑制作用(專利文獻(xiàn)8)等。并且，上述專利文獻(xiàn)5中的A5-去飽和酶 抑制作用、上述專利文獻(xiàn)7中的對(duì)人體白血病細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)作用，不僅從精煉后的芝麻素 中得到了確認(rèn)，從異芝麻素中也得到了確認(rèn)。另外，從使用含有芝麻素的芝麻油的實(shí)驗(yàn)中，明示了炎癥性疾病(肌肉萎縮性側(cè) 索硬化癥)的改善作用(專利文獻(xiàn)9)、抗炎癥及感染防護(hù)作用(專利文獻(xiàn)10)、與含有 a -亞麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸中至少一種的油脂并用可預(yù)防和改善過敏的作 用(專利文獻(xiàn)11)等。并且，有關(guān)芝麻素/異芝麻素組合物還有以下的報(bào)告。例如，從使用以木脂素類化 合物為主要成分的芝麻油提取物(芝麻素19. 6%、異芝麻素30. 6%、芝麻素酚及異芝麻素 酚10. 2%、木脂素類化合物含量為60. 4% )的實(shí)驗(yàn)中，證實(shí)了降低血液中膽固醇的作用及 降低血液中中性脂肪的作用(專利文獻(xiàn)12)、改善肝功能作用(專利文獻(xiàn)3)等。另外，從 使用經(jīng)精練的芝麻素/異芝麻素組合物的試驗(yàn)，例如，使用芝麻素異芝麻素約等于6 4 的實(shí)驗(yàn)中，證實(shí)了改善肝功能作用(芝麻素61. 5%、異芝麻素38. 0% )(專利文獻(xiàn)3)、去 除活性氧作用(芝麻素異芝麻素約等于6 4)(專利文獻(xiàn)13)、防止惡醉作用(芝麻素 55. 2%、異芝麻素44. 4%、純度為99. 6% )(專利文獻(xiàn)14)、過敏癥狀的預(yù)防及改善作用 (芝麻素55. 2%、異芝麻素44. 4%、純度為99. 6% )(專利文獻(xiàn)15)等，從使用芝麻素異芝麻素約等于1 1的試驗(yàn)中，也證實(shí)了《6系列 《3系列不飽和脂肪酸的平衡調(diào)節(jié) 作用(芝麻素51. 3%、異芝麻素47. 8% )(專利文獻(xiàn)16)、抑制過氧化脂質(zhì)的生成(芝麻 素51. 3%、異芝麻素47. 8% )(專利文獻(xiàn)17)、抑制乳腺癌的作用(芝麻素51. 3%、異芝 麻素47. 8% )(專利文獻(xiàn)18)、抗高血壓作用(芝麻素51. 5%、異芝麻素47. 8%、其他的 二氧雜二環(huán)(dioxabicyclo) [3,3,0]辛烷衍生物為1. )(專利文獻(xiàn)19)、減少體脂肪的 作用(芝麻素異芝麻素約等于1 1、純度為99. 5%)(專利文獻(xiàn)20)、與鋸棕櫚油并用抑 制前列腺肥大的效果(芝麻素異芝麻素約等于1 1)(專利文獻(xiàn)21)等。并且近年來還證實(shí)了芝麻素與異芝麻素生理活性的不同之處。例如，有文獻(xiàn)報(bào)道， 從把芝麻素和異芝麻素的混合物(約為1 1)向大鼠經(jīng)口投藥后在體內(nèi)的分布上，可看出 異芝麻素向內(nèi)臟器官的移行量高于芝麻素的2倍以上(非專利文獻(xiàn)5)。同時(shí)還有文獻(xiàn)報(bào)道 了從把芝麻素和異芝麻素分別向大鼠經(jīng)口投藥的試驗(yàn)中，與芝麻素相比，異芝麻素可使肝 臟的3氧化酶的基因表達(dá)以及酶活性顯著上升，而在抑制脂肪酸合成酶的活性上，芝麻素 與異芝麻素則無差異(非專利文獻(xiàn)6)。[專利文獻(xiàn)1]日本專利第3183664號(hào)[專利文獻(xiàn)2]美國專利第4427694號(hào)[專利文獻(xiàn)3]日本專利第3075358號(hào)[專利文獻(xiàn)4]日本特開平11-269456號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)5]日本專利第3070611號(hào)[專利文獻(xiàn)6]日本特開2003-183172號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)7]日本特開2001-151676號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)8]日本特開2000-143546號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)9]日本特表2005-533042號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)10]日本特表平10-500937號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)11]日本特開平5-58902號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)12]日本專利第3001589號(hào)[專利文獻(xiàn)13]日本特開平6-227977號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)14]日本專利第3124062號(hào)[專利文獻(xiàn)15]日本專利第3512196號(hào)[專利文獻(xiàn)16]日本專利第3512196號(hào)[專利文獻(xiàn)17]日本特開平5-051388號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)18]日本特開平5-43458號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)19]日本特開平8-268887號(hào)公報(bào)[專利文獻(xiàn)20]日本專利第3205315號(hào)[專利文獻(xiàn)21]日本特開2000-256204號(hào)公報(bào)[非專利文獻(xiàn)1]《芝麻的科學(xué)和功能性》、并木等、丸善PLANET株式會(huì)社(1998)[非專利文獻(xiàn) 2]Fukuda，Y.，et al. , J.Am. Oil. Chem. Soc.，63，1027-1031 (1986)[非專利文獻(xiàn) 3]S. Shimizu，et al, J.Am. Oil Chem. Soc.，66，237-241 (1989)[非專利文獻(xiàn) 4] S. Shimizu，et al.，Lipid, 26，512 (1991)[非專利文獻(xiàn) 5] Sawada R.，et al.，Lipids, 34，633 (1999)
[非專利文獻(xiàn) 6]Kushiro M.，et al. J. Nutr. Biochem.，13，289-295 (2002)

發(fā)明內(nèi)容
如上所述，芝麻素類雖具有各種生理活性，但在天然芝麻籽中只含有0. 1 % 0. 5%左右，是一種珍貴的化合物。因此，本申請(qǐng)人為使芝麻素類所具有的生理活性得到更 有效地發(fā)揮，而研究增強(qiáng)芝麻素類作用的方法，發(fā)現(xiàn)了 a -維生素E可增強(qiáng)芝麻素類等的二 氧雜二環(huán)(dioxabicyclo) [3,3,0]辛烷衍生物的作用(專利第3283274號(hào))。但是，使芝麻 素類自身的生理活性增強(qiáng)的方法還完全不得而知?；谌缦驴紤]，如能使芝麻類自身的生理活性增強(qiáng)，即可使芝麻素類所具有的有 用的生理活性更高效且有效地得到發(fā)揮，所以本發(fā)明者等針對(duì)使芝麻素類自身的生理活性 增強(qiáng)的方法進(jìn)行了銳意研究。首先，從與芝麻素相比，異芝麻素可使肝臟中的0氧化酶的基因表達(dá)以及酶活性 顯著上升(非專利文獻(xiàn)6)中，設(shè)想至少在改善肝功能的作用上異芝麻素應(yīng)與芝麻素具有同 等以上的活性，并通過使異芝麻素在體內(nèi)得到更有效地吸收，探討使芝麻素類所具有的生 理活性增強(qiáng)的方法。具體地說，在配制的芝麻素/異芝麻素組合物(油溶試劑)中，使其含 有的芝麻素和異芝麻素具各種重量比，并探討其在經(jīng)口投藥時(shí)異芝麻素的經(jīng)口吸收 血中 移行性。根據(jù)上述非專利文獻(xiàn)5及6所述，曾設(shè)想在異芝麻素單獨(dú)投藥時(shí)血中移行性應(yīng)最 高，但令人驚訝的是，與此設(shè)想相反，在使用有一定量芝麻素共存的芝麻素/異芝麻素組合 物時(shí)，比起異芝麻素的單獨(dú)投藥，其異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或血中移行性更高。并且， 在研究芝麻素類所具有的生理活性即抗高血壓作用、肝臟的0氧化酶的基因表達(dá)時(shí)，令人 驚訝的是，發(fā)現(xiàn)按規(guī)定比例(50 50 1 99)配合芝麻素和異芝麻素的芝麻素/異芝麻 素組合物，具有比芝麻素單獨(dú)投藥及異芝麻素單獨(dú)投藥更高的活性，使本發(fā)明得以完成。


圖1是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(4 6、5 5、3 7、2 8、1 9、 0 10)的混合物在經(jīng)口投藥時(shí)異芝麻素的經(jīng)口吸收率的棒狀圖。圖2是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(1 9,0.5 9.5,0 10)的混合 物在經(jīng)口投藥時(shí)異芝麻素的經(jīng)口吸收率的棒狀圖。圖3是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(10 0、5 5、0 10)的混合物單 次投藥時(shí)D0CA-鹽高血壓大鼠的24小時(shí)的血壓變化圖。圖4是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(10 0、5 5、0 10)的混合物投 藥后，第8小時(shí)的D0CA-鹽高血壓大鼠的血壓變化圖。圖5是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(5 5、3 7、1 9)的混合物投藥 后，第8小時(shí)的D0CA-鹽高血壓大鼠的血壓變化圖。圖6是表示將種種芝麻素異芝麻素組成比(10 0、5 5、3 7、1 9、0 10)
的混合物投藥時(shí)對(duì)0氧化基因表達(dá)的影響圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明涉及一種使芝麻素類的生理活性能更高效且有效地發(fā)揮的芝麻素/異芝
6麻素組合物，及通過使用此組合物，而使芝麻素類的生理活性增強(qiáng)的方法。具體地說，1. 一種芝麻素/異芝麻素組合物，其特征為含有重量比為50 50 1 99的芝 麻素和異芝麻素。2.上述1所述的芝麻素/異芝麻素組合物，其特征為含有重量比為39 61 1 99的芝麻素和異芝麻素。3.上述1所述的芝麻素/異芝麻素組合物，其特征為含有重量比為30 70 5 95的芝麻素和異芝麻素。4.上述1 3中任一項(xiàng)所述的芝麻素/異芝麻素組合物，其特征為芝麻素及異芝 麻素的總量為等于或大于組合物的重量百分比的51%。5.飲食品，其含有上述1 4中所述的芝麻素/異芝麻素組合物。6.醫(yī)藥組合物，其含有上述1 4中所述的芝麻素/異芝麻素組合物。7.動(dòng)物飼料或?qū)櫸锸称?，其含有上? 4中所述的芝麻素/異芝麻素組合物。8.通過上述1 4中所述的芝麻素/異芝麻素組合物，使芝麻素類的生理活性增 強(qiáng)的方法。9.根據(jù)上述8中所述的方法，上述芝麻素類的生理活性為降低血液中膽固醇的作 用、降低中性脂肪的作用、抗高血壓作用、不飽和脂肪酸的抗氧化作用、改善肝功能的作用、 去除活性氧的作用、△ 5去飽和酶抑制作用及多不飽和脂肪酸在體內(nèi)的穩(wěn)定化作用。本發(fā)明中的芝麻素/異芝麻素組合物，其特征為含有規(guī)定比例的芝麻素和異芝麻 素。芝麻素和異芝麻素的優(yōu)選比例為50 50 1 99 (重量比)、更優(yōu)選為39 61 1 99，最優(yōu)選為30 70 5 95。含有上述規(guī)定比例的芝麻素和異芝麻素的本發(fā)明的 芝麻素/異芝麻素組合物，與異芝麻素單獨(dú)投藥相比，具有異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或 血中移行性更高的性質(zhì)。并且，含有上述規(guī)定比例的芝麻素和異芝麻素的本發(fā)明的芝麻素 /異芝麻素組合物，與芝麻素的單獨(dú)投藥及異芝麻素的單獨(dú)投藥相比，芝麻素類所具有的 生理特性，即抗高血壓作用、改善肝功能作用及改善脂類代謝作用得到增強(qiáng)，因其具有此特 征，所以能更高效且有效地發(fā)揮芝麻素類所具有的生理活性。對(duì)本發(fā)明中芝麻素/異芝麻素組合物的制造方法無特別限制，例如，本發(fā)明的組 合物可將芝麻素及異芝麻素的精制品按所需比率配合制造。此時(shí)，芝麻素及異芝麻素的精 制品例如可使用非專利文獻(xiàn)2中所述的方法制成，其詳細(xì)內(nèi)容將在后述實(shí)施例1中闡述。但 是，精制品亦可由其他適當(dāng)?shù)姆椒ǐ@得。本發(fā)明的其他的形態(tài)為，可求出含有芝麻素及異芝麻素的原料混合物中兩成分的 重量比，在該混合物中，添加芝麻素或異芝麻素的精制品、(或者含有的芝麻素或異芝麻素 的一方比另一方多的混合物)，以達(dá)到本發(fā)明所規(guī)定的芝麻素_異芝麻素的組成比。本發(fā)明還有其他的形態(tài)，可將芝麻素從芝麻素和異芝麻素的混合物(例如、組成 比為1 1)中去除而成。去除芝麻素可通過將再結(jié)晶、色譜分離法、蒸餾等方法單獨(dú)或適 當(dāng)組合進(jìn)行。特別是在其他的形態(tài)中，本發(fā)明可通過對(duì)芝麻素、芝麻素-異芝麻素混合物或異 芝麻素施以異構(gòu)化反應(yīng)，以調(diào)節(jié)芝麻素_異芝麻素的組成比。并且還可使用本發(fā)明者等為提高芝麻素_異芝麻素混合物中異芝麻素的濃度，而 在近年開發(fā)的如下方法。艮口，
在酒精或酒精水溶液中溶解芝麻素-異芝麻素混合物，之后，用再結(jié)晶的方法將 異芝麻素選擇性地結(jié)晶析出，以得到提高了異芝麻素濃度的芝麻素/異芝麻素混合物的方 法。另外，作為其他方法，可通過將芝麻素_異芝麻素混合物加熱溶解于特定的油脂 中，之后用再結(jié)晶法使異芝麻素有選擇地結(jié)晶析出，以得到提高了異芝麻素濃度的芝麻素/ 異芝麻素混合物。特別是還可利用將芝麻素-異芝麻素混合物溶解于水、水溶性溶劑或其混合物 中，根據(jù)需要加入堿后，析出芝麻素類，以得到提高了異芝麻素濃度的芝麻素/異芝麻素混 合物的方法。在本發(fā)明實(shí)施時(shí)，原料混合物及本發(fā)明的組合物中芝麻素-異芝麻素的組成，可 通過高速液體色譜法(HPLC)等公知的分析方法得到。含有上述芝麻素及異芝麻素的原料混合物，例如，可例舉為從芝麻籽、芝麻粕及 芝麻油中精制的芝麻木脂素組合物。芝麻木脂素組合物可為購入的市場(chǎng)銷售品(例如、 竹本油脂制)，也可從芝麻油中獲得，其方法如上述非專利文獻(xiàn)2所述，或用水蒸汽蒸餾芝 麻油得到餾出物，在堿的存在下從餾出物中析出分離芝麻素類的方法(參照日本特開平 10-7676號(hào))等，已知的方法有很多。而且作為含有芝麻素及異芝麻素的原料混合物，不局 限于從上述的芝麻籽、芝麻粕及芝麻油中精制的芝麻木脂素組合物，實(shí)質(zhì)上含有其成分的， 如五加皮、桐木、白果樹皮等均可使用。本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物具有異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或血中移行性 高的性質(zhì)。異芝麻素的經(jīng)口吸收性及血中移行性，例如，可通過后述的實(shí)施例2中所述的方 法(通過LC-MS/MS定量)進(jìn)行確認(rèn)，但使用其他適當(dāng)?shù)姆椒ㄒ部?。因本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物具有異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或血中移行 性更高的性質(zhì)，所以可使異芝麻素所具有的各種作用更高效且有效地發(fā)揮。異芝麻素的作 用可例舉為提高芝麻素類向內(nèi)臟器官的移行性及改善肝功能的作用等。另外，本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物與芝麻素單獨(dú)投藥及異芝麻素的單獨(dú)投 藥相比，雖其詳細(xì)機(jī)理還尚不明確，但因具有芝麻素類所具有的生理活性更高的性質(zhì)，所以 可使芝麻素類所具有的各種生理活性得到更高效且有效地發(fā)揮。芝麻素類的生理活性可例 舉為降低血液中膽固醇及中性脂肪的作用、抗高血壓的作用、不飽和脂肪酸的抗氧化作用、 改善肝功能的作用、去除活性氧的作用、A5去飽和酶抑制作用及多不飽和脂肪酸在體內(nèi)的 穩(wěn)定化作用等。本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物也適宜以飲食品或醫(yī)藥品組合物的形態(tài)使用。 只要具有其功能，對(duì)于添加于飲食品或醫(yī)藥品組合物中的本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合 物的比例，無特別限制，通?？蓮?.01% 100% (重量百分比)的范圍內(nèi)選擇。且對(duì)于該 飲食品或醫(yī)藥品組合物中含有的異芝麻素的含量，其一次的經(jīng)口攝取量應(yīng)為0. 5 lOOmg， 優(yōu)選為1 60mg，更優(yōu)選為3 60mg。含有有關(guān)本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物的飲食品或醫(yī)藥品組合物的制造，可 通過將本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物添加于飲食品中進(jìn)行，也可將芝麻素、異芝麻素 及/或芝麻素_異芝麻素混合物同時(shí)或分別添加，以使含有的芝麻素和異芝麻素具本發(fā)明 的重量比。兩化合物重量比的調(diào)節(jié)，可使用與芝麻素/異芝麻素組合物制造有關(guān)的、已被記載的方法。對(duì)含有本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物的飲食品或醫(yī)藥品組合物的形態(tài)，無特 別限制，例如可配制成粉狀、粒狀、片狀等的固狀，液狀、乳液狀等的溶液狀或充填了其溶液 狀組合物的膠囊，或糊狀等的半固體狀等的任意形態(tài)。此時(shí)，在本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物中，可進(jìn)一步配合稀釋劑、載體或添加 劑等成分進(jìn)行任意的制劑化處理，以配制制劑。只要不影響芝麻素類的生理活性，對(duì)此處的 稀釋劑或載體均無特別限制，可例舉為蔗糖、葡萄糖、果糖、麥芽糖、海藻糖、乳糖、低聚糖、 糊精、葡聚糖、環(huán)狀糊精、淀粉、糖稀、異構(gòu)化液糖等的糖類、乙醇、丙二醇、丙三醇等的醇類、 山梨糖醇、甘露糖醇、赤蘚醇、乳糖醇、木糖醇、麥芽糖醇、還原性帕拉金糖、還原淀粉分解物 等的糖醇類、三乙酸甘油酯等的溶劑、阿拉伯膠、角叉菜膠、黃原膠、瓜爾豆膠、結(jié)冷膠、果膠 等的多糖類或水。另外添加劑可例舉為螯合劑等的輔助劑、香料、香辛料提取物、防腐劑等。為使用方便等，使用上述稀釋劑、載體或添加劑配制上述制劑時(shí)，在100% (重量 百分比)的制劑中，最好配制成含有的芝麻素/異芝麻素組合物的比例為0.01% 100% (重量百分比)，優(yōu)選為0. 1 % 50% (重量百分比)。此時(shí)，作為原料的芝麻素/異芝麻素 組合物，例如使用芝麻素和異芝麻素的總量小于組合物51 %的組合物時(shí)，因芝麻素類含量 低，如需配合需要量的芝麻素類，所得到的含有芝麻素/異芝麻素組合物的制劑的體積就 會(huì)過大，攝取時(shí)會(huì)產(chǎn)生不便。特別是將本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物溶解于油脂中，以 生產(chǎn)用于經(jīng)口投藥的軟膠囊等的制劑時(shí)，或需加大制劑，或需一次服用大量粒數(shù)的制劑，不 僅使服用產(chǎn)生障礙，還會(huì)產(chǎn)生服用大量超出需要量的作為溶劑的油脂的問題。因此，從服用 量越少越好的觀點(diǎn)出發(fā)，最好使用芝麻素/異芝麻素組合物，使配制后芝麻素和異芝麻素 的總量等于或大于組合物的51%，且特別優(yōu)選使用純度為90%或90%以上的芝麻素/異芝 麻素組合物。作為含有芝麻素/異芝麻素組合物的飲食品，如營養(yǎng)補(bǔ)助食品，可例舉為，其是直 接以上述本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物為有效成分的飲食品，以及在一般的飲食品中 將上述本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物作為成分之一配合，并使其具有芝麻素類的生理 活性的機(jī)能性食品(包括特定保健用食品、具附加條件的特定保健食品)。且在這些飲食品 中，也包含如下飲食品，其特征為將其所具有的以降低血液中膽固醇及/或中性脂肪為主 的生理作用表示于容器或說明書上，并含有或添加具本發(fā)明所規(guī)定的重量比的芝麻素及異 芝麻素。在可表明的飲食品的其他生理作用中，還包含抗高血壓作用、不飽和脂肪酸的抗氧 化作用、改善肝功能的作用、去除活性氧的作用、△ 5去飽和酶抑制作用及多不飽和脂肪酸 在體內(nèi)的穩(wěn)定化作用等。對(duì)作為對(duì)象的飲食品無限制，可例舉為果汁飲料、清涼飲料、運(yùn)動(dòng)飲料、酒精飲料 及茶等的飲料，面包、面條類、米飯、點(diǎn)心類(餅干、蛋糕、糖果、巧克力、日式點(diǎn)心)，豆腐及 其加工品等的農(nóng)產(chǎn)食品，清酒、藥用酒、甜料酒、食醋、醬油、醬等的發(fā)酵食品，調(diào)味汁、沙拉 醬、黃油、人造奶油、起酥油、食用油脂等的油脂食品，酸奶、火腿、咸豬肉、香腸等的蓄產(chǎn)食 品，魚糕、炸魚糕、魚肉山芋餅等的水產(chǎn)食品等、另外可利用動(dòng)物飼料或?qū)櫸锸称?。?shí)施例通過以下實(shí)施例，更具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不只限于此。實(shí)施例1.芝麻素及異芝麻素的精制
芝麻素及異芝麻素混合物(含有芝麻素及異芝麻素的原料混合物)，使用 購入的竹本油脂制的混合物[芝麻素類的純度99.5%、芝麻素異芝麻素的配比為 51.8% 48.0% (重量百分比)]。芝麻素及異芝麻素的高純度精制品通過使用以下條件的反相系HPLC方法配制。 即，將溶解于DMS0中的lOOmg上述混合物注入Develosil 0DS-UG-5 (20①X 250mm、野村 化學(xué)公司制)的色譜柱中，通過20%—80%的乙腈直線梯度(洗脫時(shí)間100分鐘，流速 5ml/分鐘)洗脫，再通過在280nm吸光度的檢測(cè)分離，分離獲得芝麻素(保留時(shí)間89分 鐘)38. 9mg、異芝麻素(保留時(shí)間94分鐘)35. Omg。將反復(fù)進(jìn)行10次此操作后所得到的 各種精制樣品(所有的純度均為99%或99%以上)用于實(shí)施例2的試驗(yàn)。t施例2.芝麻素-異芝麻素6他目成比與經(jīng)口吸業(yè) 血中移行件-1從日本CHARLES RIVER公司購入SD (IGS)系雄性大鼠(6周齡)，在試驗(yàn)環(huán)境下馴 化一星期后，將發(fā)育順利的動(dòng)物供作試驗(yàn)。將經(jīng)一夜禁食后的大鼠每組5只分成6組，把實(shí) 施例1中所得到的高純度芝麻素和異芝麻素以各種組成比配合后，將所得到的芝麻素/異 芝麻素混合物[芝麻素異芝麻素(重量比)=6 4、5 5、4 6、3 7、1 9、0 10] 以10mg/kg的用量溶解于橄欖油中，用經(jīng)口注入器(sonde)經(jīng)口投藥。在投藥前、投藥后的 1、2、4、6、8、24小時(shí)后，從尾靜脈用肝素采血管采血，經(jīng)離心分離操作(8，000rpm、10min)后 得到血漿樣品。添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，用Oasis HLB固相提取，并將提取液減壓濃縮后，用甲醇懸 浮，過濾器過濾后用LC-MS/MS進(jìn)行芝麻素及異芝麻素的定量。芝麻素或異芝麻素的量，通 過芝麻素及異芝麻素各自的峰面積與作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)使用的桉脂素(FUNAK0SHI株式會(huì)社) 的峰面積的比來決定。LC-MS/MS的分析條件如下所示。(HPLC)色譜柱DevelosilC30-UG-5 (5 u m,2. 0① X 50mm、野村化學(xué)公司制)流動(dòng)相A 蒸餾水、B 甲醇、D :100mM乙酸銨水溶液流速0. 25mL/min梯度B液為55 %、D液為10 %、2分鐘，之后，3分鐘、B液從55 %到60 %、D液為 10%, 2分鐘、B液從60%到85%、D液為10%的線性梯度(MS/MS)測(cè)定模式選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)檢測(cè)異芝麻素(保留時(shí)間約5. 6分鐘)；母離子m/z = 372 ([M+NH4]+)、子離子 m/z = 233桉脂素(保留時(shí)間約2.8分鐘)；母離子m/z = 404([M+NH4]+)、子離子m/z = 249離子化法ESI法血液中異芝麻素的濃度在投藥后到約6小時(shí)上升到最高值，之后逐漸減少，24小 時(shí)之后基本上在血液中檢測(cè)不出異芝麻素。將0-24小時(shí)血液中的濃度曲線的曲線下面積 (Area under the curve ；AUC)作為吸收量的指標(biāo)。因各投藥組中異芝麻素的投藥量不同， 所以應(yīng)通過將各AUC用異芝麻素投藥量比除后補(bǔ)正算出吸收率，并與其相比較。其結(jié)果如 圖1所示。對(duì)于異芝麻素單獨(dú)投藥時(shí)吸收率為72. 5，用芝麻素異芝麻素為50 50的配 比投藥時(shí)得到了 76. 7的更高的吸收率。特別是，隨著異芝麻素重量配比的增加吸收率也隨之上升，配比為30 70時(shí)吸收率達(dá)最高值，為10 90時(shí)其也顯示了高值。換句話說，也說 明將芝麻素和異芝麻素以50 50 10 90的組成比配合時(shí)，比異芝麻素單獨(dú)(0 100 重量比)投藥，其異芝麻素的吸收率更高。因此，本實(shí)施例的結(jié)果顯示了通過用一定的重量比配合芝麻素和異芝麻素，可提 高異芝麻素的吸收率。t施例3.芝麻素-異芝麻素6他目成比與經(jīng)口吸業(yè) 血中移行件-2以規(guī)定有效的芝麻素配比為目的，根據(jù)實(shí)施例2的方法，評(píng)價(jià)其在進(jìn)一步降低芝 麻素配比時(shí)的作用。換句話說，把實(shí)施例1中得到的高純度的芝麻素和異芝麻素以各種組 成比配合，將所得到的芝麻素/異芝麻素混合物[芝麻素異芝麻素(重量比)=1:9、 0.5 9.5,0 10]以10mg/kg的用量溶解于橄欖油中，并用經(jīng)口注入器(sonde)經(jīng)口投 藥，計(jì)算出吸收率。其結(jié)果如圖2所示。對(duì)于異芝麻素單獨(dú)投藥時(shí)吸收率為59. 7，得到了用 芝麻素異芝麻素為5 95的配比投藥時(shí)吸收率為64. 7，用10 90的配比投藥時(shí)吸收率 為72. 4的更高的吸收率。同時(shí)也可說明，即使將芝麻素和異芝麻素以5 95的組成比配 合時(shí)，也比異芝麻素單獨(dú)(0 100重量比)投藥時(shí)異芝麻素的吸收率高。實(shí)施仿il 4.對(duì)于 fl兌氧■皮質(zhì)紹麗乙酸鹽(Deoxycorticosteroneacetate-salt) (D0CA-鹽salt)高血ff.lt型大鼠階血ff.降低,的作用對(duì)SD系雄性大鼠(6周齡)(日本SLC株式會(huì)社)在戊巴比妥鈉麻醉下施行右腎 摘出手術(shù)?；謴?fù)1星期后，將DOCA-salt每周2次、以15mg/kg的用量進(jìn)行皮下投藥，再將
的食鹽水作為飲用水投喂。使用無創(chuàng)自動(dòng)血壓測(cè)定裝置(BP-98A、Softron、東京)通過 尾袖套法測(cè)定收縮期血壓[Systolic blood pressure (SBP) ]。DOCA-salt處理開始后第5 星期進(jìn)行血壓測(cè)定，并使用被確認(rèn)為血壓充分上升了的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在禁食8小時(shí)的大 鼠中，作為對(duì)照組將橄欖油使用經(jīng)口注入器(sonde)單次經(jīng)口投藥，作為試驗(yàn)組把實(shí)施例1 中得到的高純度的芝麻素和異芝麻素以各種組成比配合后，所得到的芝麻素/異芝麻素混 合物[芝麻素異芝麻素(重量比)=10 0、5 5、0 10]以100mg/kg用量懸浮于橄 欖油中，并使用經(jīng)口注入器(sonde)單次經(jīng)口投藥。在投藥前、投藥后的2、4、6、8、10、12、24 小時(shí)后測(cè)定SBP。從第12小時(shí)測(cè)定血壓后開始喂食。試驗(yàn)的實(shí)施間隔設(shè)定為1星期，對(duì)同 一個(gè)體的測(cè)定最多進(jìn)行3次。單次投藥后24小時(shí)的血壓變化(n = 5 7)如圖3所示。在芝麻素單獨(dú)、異芝麻 素單獨(dú)及橄欖油投藥組中，未看出血壓有大的變化，而在芝麻素/異芝麻素混合物(5 5) 投藥組中，則顯示了投藥8小時(shí)后具有峰值的顯著的血壓降低的作用。將投藥8小時(shí)后的 血壓變化在各組中進(jìn)行比較，芝麻素/異芝麻素混合物(5 5)投藥組在8小時(shí)后的血壓 值為-32mmHg，與芝麻素單獨(dú)組(-13mmHg)、異芝麻素單獨(dú)組(-6mmHg)相比顯著降低了(圖 4)。實(shí)施例5.對(duì)于D0CA-鹽高血壓模型大鼠的血壓降低作用_混合比的影響以下以效果最強(qiáng)的芝麻素/異芝麻素混合物(5 5)為基準(zhǔn)，根據(jù)實(shí)施例3的方 法，對(duì)因配比不同其效果的差異進(jìn)行了比較試驗(yàn)。且因投藥量為100mg/kg時(shí)效果過強(qiáng)，所 以為更容易看出差異，將量降到1/2進(jìn)行。把芝麻素 異芝麻素以各種組成比配合后的芝麻素/異芝麻素混合物[芝麻素 異芝麻素(重量比)=5 5、3 7、1 9]以50mg/kg用量溶解于橄欖油中，使用經(jīng)口注入器(sonde)單次經(jīng)口投藥，并測(cè)定血壓值。投藥8小時(shí)后的血壓變化(n = 3 4)如圖5所示。在芝麻素/異芝麻素混合物 (5 5)50mg/kg用量中，未顯示出血壓降低的作用。而與此相對(duì)，在芝麻素/異芝麻素混合 物(3 7)及(1 9)混合物中顯示出血壓降低的作用，特別是在3 7時(shí)效果最為顯著。以上結(jié)果顯示，通過將芝麻素和異芝麻素以一定的配比混合，可具有相乘地降低 血壓的效果。并且，其效果在配比為3 7時(shí)最為顯著。實(shí)施例6.對(duì)|3氧化基因表汰的影響從日本CLEAR購入Wistar系雄性大鼠(6周齡)，在試驗(yàn)環(huán)境下馴化一星期后，將 發(fā)育順利的動(dòng)物供作試驗(yàn)。將動(dòng)物每組5只分成6組，對(duì)照組中將作為溶劑的橄欖油間隔 24小時(shí)、3次經(jīng)口投藥，另外在試驗(yàn)組中把實(shí)施例1中得到的高純度的芝麻素和異芝麻素以 各種組成比配合后，將所得到的芝麻素/異芝麻素混合物[芝麻素異芝麻素(重量比) =10 0、5 5、3 7、1 9、0 10]以200mg/kg的用量懸浮于橄欖油中，間隔24小 時(shí)、3次經(jīng)口投藥。最后投藥4小時(shí)后，用戊巴比妥鈉麻醉并摘出肝臟，提取RNA后，通過使 用 TaqMan Chemistry 定量 RT-PCR 法(Heid CA, Stevens J, Livak KJ, Williams PM. Real time quantitative PCR. Genome Res. 1996 6(10) :986_94.)，探討了對(duì)旦氧化基因(10 種)表達(dá)的影響。評(píng)價(jià)后的基因如下表1所示，基因表達(dá)量如圖6(圖6A、B)所示。在本條件下的芝 麻素單獨(dú)投藥組中，3氧化基因表達(dá)雖基本上未顯示出上升，但在異芝麻素單獨(dú)投藥組中， 有很多基因顯示了上升。并且，不論在芝麻素/異芝麻素混合物投藥組的任一組中，均比異 芝麻素單獨(dú)組顯示出顯著的基因表達(dá)的上升。對(duì)配比不同引起的基因表達(dá)的不同雖由于基 因不同而有若干差異，但各組間均無太大的差異。表1評(píng)價(jià)基因一覽
12 以上結(jié)果顯示，通過將異芝麻素和芝麻素混合，使3氧化基因的表達(dá)具有相乘的 增強(qiáng)效果。[制劑例]以下注明制劑例。其“混合物”是指芝麻素異芝麻素的組成比在本發(fā)明的范圍 內(nèi)(芝麻素異芝麻素=30 70、純度為99. 5% )的芝麻素/異芝麻素組合物。(制劑例1)黃油“混合物” 1.2g黃油脂肪100g乙酸維生素E 1. 2g在通過由黃油制造過程的攪拌操作(攪奶油)去除酪乳后的黃油脂肪100g中加 入“混合物” 1. 2g，再加入1. 2g的乙酸維生素E進(jìn)行混勻操作(working)，以得到組織均勻 的含有本發(fā)明組合物的黃油。(制劑例2)顆粒劑“混合物” 0. 25g乙酸維生素E 0. 25g二氧化硅20. 5g玉米淀粉79g將以上的粉體混合均勻后，加入10%羥丙基纖維素 乙醇溶液100ml，并用通常方 法捏合、擠出、干燥，以制成顆粒劑。(制劑例3)片劑
“混合物”3. 5g乙酸維生素E 0. 5g二氧化硅20g微結(jié)晶纖維素 10g硬脂酸鎂3g乳糖60g將上述物質(zhì)混合，用單沖壓片機(jī)壓片，以制造直徑為7mm、重量為lOOmg的片劑。(制劑例4)膠囊明膠70. 0%甘油22.9%對(duì)羥基苯甲酸甲酯0. 15%對(duì)羥基苯甲酸丙酯0.51%水適量計(jì)100%在含有上述成分的軟膠囊劑的囊皮中，用通常方法充填如下所示的組合物，制成1 粒為200mg的軟膠囊?！盎旌衔铩?0. 8mg小麥蜂蠟30mga-維生素 E20mg棕櫚油10mg小麥胚芽油適宜計(jì)100%(制劑例5)健康飲料呈味DL-酒石酸鈉 0. lg琥珀酸0. 009g甜味液糖800g酸味檸檬酸12g維生素維生素C10g“混合物”lg維生素E30g環(huán)糊精5g香料15ml氯化鉀lg硫酸鎂0.5g配合上述成分，加水制成10升。此健康飲料的1次飲用量約為100ml。通過服用本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物，可使芝麻素類所具有的各種生理活 性得到更有效地發(fā)揮。特別是，因本發(fā)明的芝麻素/異芝麻素組合物具有良好的異芝麻素 的經(jīng)口吸收性及血中移行性，所以可使異芝麻素類所具有的各種生理活性得到更有效地發(fā) 揮。并且，在異芝麻素中通過配合一定比例的芝麻素，可相乘地增強(qiáng)芝麻素類所具有的降低血壓的作用及0氧化基因的表達(dá)。再加上因芝麻素及異芝麻素來源于植物，所以具有溫和 的作用且安全性極高。因此，本發(fā)明組合物非常有效，其應(yīng)用范圍不只限于健康食品，在醫(yī) 藥品上同樣適用。
權(quán)利要求
芝麻素在制造用于提高異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或血中移行性的組合物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述組合物含有重量比為50 50 1 99的芝麻素和異芝麻素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述組合物含有重量比為39 61 1 99的芝 麻素和異芝麻素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述組合物含有重量比為30 70 5 95的芝麻素和異芝麻素。
5.芝麻素和異芝麻素在制造用于提高芝麻素的生理活性的組合物中的用途。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中所述組合物含有重量比為50 50 1 99的芝 麻素和異芝麻素。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中所述組合物含有重量比為39 61 1 99的芝麻素和異芝麻素。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中所述組合物含有重量比為30 70 5 95的芝麻素和異芝麻素。
9.根據(jù)權(quán)利要求1 8中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述組合物為飲食品。
10.根據(jù)權(quán)利要求1 8中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述組合物為醫(yī)藥組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種增強(qiáng)了芝麻素類生理活性的芝麻素/異芝麻素組合物。通過以一定的重量比含有芝麻素和異芝麻素，提供增強(qiáng)了異芝麻素的經(jīng)口吸收性及/或血中移行性的口服組合物。還通過以一定的重量比含有芝麻素和異芝麻素，提供增強(qiáng)了芝麻素類生理活性的口服組合物。
文檔編號(hào)A61K31/36GK101849935SQ20101013960
公開日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2005年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月28日
發(fā)明者富森菜美乃, 小野佳子, 德田佐紀(jì), 櫓木智裕 申請(qǐng)人:三得利控股株式會(huì)社