專利名稱：：皮膚美容和瘢痕修復(fù)的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)的制劑，特別是含有水溶性堿性蛋白酶和膠原蛋白的外用制劑。
背景技術(shù)：
：人的皮膚因為體內(nèi)代謝和其它外部原因，會造成異常，如粉刺、青春痘、小疙瘩、丘疹等。此外皮膚粗糙、曬斑、癬斑、妊辰斑等也常常對人造成困擾。人的皮膚因外傷，如機械傷、外科手術(shù)，或燒燙傷、潰瘍等許多事故和疾患都會給皮膚留下瘢痕。已知有人使用以下物質(zhì)用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)，如氯化溶菌酶、血活素、獾油、尿囊素、積雪草甙、鋅等。然而，這些物質(zhì)對皮膚損傷的治療效果都不理想，不能使得損傷在短期內(nèi)完全康復(fù)。這些問題的原因歸結(jié)于它們對上皮的修復(fù)、膠原的合成、微循環(huán)的改善、粒細胞的形成和成皮化的貢獻甚少。這些發(fā)明的缺陷在于不能有效清除諸如腿部潰瘍、褥瘡潰瘍和灼傷等部位的壞死細胞和組織碎片。相關(guān)文獻見本文附錄。因此，需要有一種能夠修復(fù)上皮細胞，有效治療皮膚破損的藥物和方法，不通過外科方法就能有效清除壞死細胞或壞死組織，從而促進新皮膚的形成。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種有效進行皮膚美容和瘢痕修復(fù)的配方，不通過外科方法能夠促進新皮膚的形成。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)的制劑，其特征是含有40%(W/W)蛋白酶和/或5%-30%(W/W)膠原蛋白；所述蛋白酶的比活是2502000酶單位/克；所述膠原蛋白的分子量為30008000。優(yōu)選的蛋白酶是水溶性堿性蛋白酶；可以來源于植物，如木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶或菠蘿蛋白酶，也可以來源于動物，如糜蛋白酶、胰蛋白酶，也可以來源于細菌，如鏈霉菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶；所述比活指每克酶蛋白所含的活力單位。優(yōu)選的膠原蛋白是部分水解的低分子量水溶性膠原蛋白。所述膠原蛋白主要來源于動物，如燕窩膠原蛋白、魚皮膠原蛋白、驢皮膠原蛋白。在本發(fā)明的配方制劑中，蛋白酶主要起到用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)的作用，膠原蛋白主要起到修復(fù)皮膚作用。因此，治療初期，藥物中應(yīng)主要以蛋白酶為主。而到治療后期主要目的是修復(fù)皮膚，消除皮膚瘢痕，所以應(yīng)使用主要成分是膠原蛋白的藥物。因此，配方中可以僅有蛋白酶，或僅有膠原蛋白，也可以兩種活性成分都存在。所述蛋白酶可以使用一種，也可以使用幾種。所述膠原蛋白可以使用一種，也可以使用幾種。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的精神，可以制備出各種蛋白酶和膠原蛋白不同比例、不同含量的制劑，以滿足實踐中的多種需要。本發(fā)明制劑中可以含有抗菌劑或防腐劑，選自3-二羥甲基-5，5_二甲基乙內(nèi)酰脲、溴硝丙二醇、聚六亞甲基胍、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、對硝基苯甲酸丙酯等。本發(fā)明制劑中還可以含有止痛劑或麻醉劑，選自普魯卡因、苯佐卡因、利多卡因、達克羅寧、地卡因等。本發(fā)明制劑中還可以含有甘油、糖、可溶淀粉等成分。本發(fā)明提供的配方為外用制劑。可根據(jù)需要，按照本領(lǐng)域公知的制藥方法制成多種劑型，包括乳膏劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑等。還可以根據(jù)需要制成各種形式的皮膚美容用品，如化妝水、擦臉霜、乳液、基質(zhì)等。制劑可以直接使用在皮膚表面，產(chǎn)生濕潤和潤滑的感覺，起到保護和改善皮膚的效果。對于粗糙的皮膚，可軟化皮膚表面。根據(jù)藥物的不同劑型和要求，本發(fā)明的制劑中可加入酶制劑可接受的其他輔料，如賦形劑、穩(wěn)定劑、防腐劑以及外用藥常用的輔料等。既可用簡單的方法調(diào)制成花費少的皮膚護理和修復(fù)制劑，作為常用美容品時，還可以添加其它成分如增香劑、抗氧化劑、表面活性劑等。還可以在本發(fā)明的配方中加入不影響酶活性的麻醉或止痛藥物，可以在治療過程中緩解患者的疼痛。本發(fā)明的配方既可用于用于皮膚美容，又能用于對因如糖尿病潰瘍、痤瘡等造成的皮膚損傷和瘢痕的修復(fù)。所述皮膚損傷包括皮膚外傷、手術(shù)創(chuàng)傷，其中外傷包括機械傷、燒燙傷、凍傷；所述皮膚疾病包括皮膚龜裂，糖尿病或其他原因引起的皮膚潰瘍、肛瘺、褥瘡、粉刺、各種皮疹；所述皮膚還包括粘膜，如可用于角膜傷、牙齦膿腫的治療；所述瘢痕包括癬痕、妊娠斑、蝴蝶斑、曬斑等。本發(fā)明的原理是利用水溶性酶類清除掉壞死細胞或組織的殘留物，以及傷處充滿死亡白細胞和細菌的粘稠狀的物質(zhì)，創(chuàng)造出一個消毒的環(huán)境，然后用促進新皮組織形成的多肽生長因子加速損傷的康復(fù)。蛋白成分敷施在損傷表面，像一把微型的手術(shù)刀，會割除大多數(shù)受損傷的細胞，而保留健康細胞。酶通過受損傷的細胞膜進入受損細胞，并且消化內(nèi)部的蛋白質(zhì)。但它沒法通過健康細胞的雙層膜。蛋白質(zhì)被降解為可溶于水的多肽，因此受損部位的壞死組織就會被清除。本發(fā)明人應(yīng)用上述配進行了所涉及的外傷治療，在實際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)對剛造成的損傷使用我們的配方，會使得康復(fù)速度增加一倍，而且也不會在痊愈的地方留下疤痕。在本發(fā)明中，重要的成分包括水溶性蛋白酶或膠原蛋白。本發(fā)明應(yīng)用膠原蛋白，或者部分水解的膠原蛋白，處理損傷部位或異常皮膚。部分水解的膠原蛋白會失去其抗原性，因此能夠參與到損傷部位或異常皮膚的保護層重建工作，從而最大限度地發(fā)揮美容的效果而不遺留疤痕。添加的膠原蛋白也可能活化膠原蛋白的受體，使其開始調(diào)動機體內(nèi)部重建膠原蛋白層，從而完成創(chuàng)建新鮮的皮膚內(nèi)層。本發(fā)明制劑的使用量和使用方法取決于不同的制劑和患者的具體情況，包括劑型、活性成分的量、年齡、受試者的情況，如是否患有糖尿病等、損傷的程度或部位等。通常的使用方法，如治療外傷時，可以將配方直接涂覆于傷口上，每日用藥一次至數(shù)次。經(jīng)臨床試驗證明，本發(fā)明的配方制劑對皮膚疾患效果好，可清除壞死組織和細胞，并且加速康復(fù)步驟，同時不留疤痕。圖1是在考察蛋白酶活性對糖尿病患者皮膚潰瘍治愈率的影響試驗中，給出的酶活性和治愈的速度的關(guān)系。圖中縱座標是傷口邊緣長度(mm)，橫座標是用藥時間(周)。從上到下五條線依次為對照組(蒸餾水)、以及酶活性為250、500、1000、1500U/g的本發(fā)明制劑。圖中可看出，酶的活性與治愈的速度呈正比。圖2圖5是燙傷皮膚的治療前后照片。其中圖2是未處理的燙傷皮膚；圖3是處理2天后的情況。圖4是第5天的皮膚；圖5是第7天的皮膚。下面的實施例僅對本發(fā)明的配方做進一步說明，實施例中舉出的具體配方并不限制本發(fā)明的范圍。具體實施例方式說明1、實施例中使用的原料來源如下1)水溶性堿性蛋白酶胰蛋白酶(購自上海錦程生化科技有限公司)、木瓜蛋白酶(購自南寧龐博生物工程有限公司)、糜蛋白酶(購自濟寧和美生物工程有限公司)、鏈霉菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶(購自武漢遠程科技發(fā)展有限公司)、無花果蛋白酶(購自國藥集團化學試劑北京有限公司)、以及菠蘿蛋白酶(購自廣西科學院生物研究所)。以下實施例中，凡未注出的，蛋白酶的比活度是250u/g。在實際操作中，可根據(jù)所用酶的活度不同，對酶的用量按比例進行增減。2)抗菌劑或防腐劑3-二羥甲基-5，5_二甲基乙內(nèi)酰脲(購自洛陽科恩精細化學品有限公司)、溴硝丙二醇(購自廣州偉伯化工有限公司)、聚六亞甲基胍(購自上海黛龍生物工程科技有限公司)、2_甲基-4-異噻唑啉-3-酮(購自洛陽科恩精細化學品有限公司)、對硝基苯甲酸丙酯(購自無錫江大百泰科技有限公司)。3)止痛劑或麻醉劑普魯卡因(購自上海銳聰實驗室設(shè)備有限公司)、苯佐卡因(購自常州市陽光醫(yī)藥原料有限公司)、利多卡因(購自徐州萊恩藥業(yè)有限公司)、達克羅寧(購自武漢市合中化工制造有限公司)、地卡因(購自廣州偉伯化工有限公司)。4)膠原蛋白膠原蛋白(江西可生生化有限公司、武漢市合中醫(yī)藥制造有限公司)、小分子膠原蛋白(上海中邦斯瑞生物藥業(yè)技術(shù)有限公司、珠海市遠城醫(yī)藥化工有限公司)。2、下列制劑的制備方法，按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備。實施例1含一種蛋白酶乳膏制劑配方(一)配方鏈霉菌蛋白酶20g甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，溴硝丙二醇0.2g，碳酸氫鈉0.3g，利多卡因0.lg，蒸餾水加至100g。實施例2含一種蛋白酶乳膏制劑配方(二)配方枯草桿菌蛋白酶20g甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，聚六亞甲基胍0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例3含一種蛋白酶乳膏制劑配方(三)配方糜蛋白酶20g甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，2_甲基_4_異噻唑啉-3-酮0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例4含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(一)配方木瓜蛋白酶(250U/g)10g，枯草桿菌蛋白酶(250U/g)10g，甘油10g，可溶淀粉10g,葡萄糖20g,溴硝丙二醇0.2g，碳酸氫鈉0.3g，普魯卡因0.lg,蒸餾水加至100g。實施例5含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(二)配方無花果蛋白酶(250U/g)5g，枯草桿菌蛋白酶(250U/g)5g，甘油60g，可溶淀粉8g,葡萄糖15g，新科-990.15g，碳酸氫鈉0.5g，苯佐卡因0.lg,蒸餾水加至100g。實施例6含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(三)配方菠蘿蛋白酶(500U/g)10g，鏈霉菌蛋白酶(500U/g)10g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，3-二羥甲基_5，5-二甲基乙內(nèi)酰脲0.2g，碳酸氫鈉0.3g，利多卡因0.lg,蒸餾水加至100g。實施例7含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(四)配方木瓜蛋白酶(1000U/g)10g，糜蛋白酶(1000U/g)10g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，溴硝丙二醇0.2g，碳酸氫鈉0.3g，地卡因0.15g，蒸餾水加至100g。實施例8含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(五)配方兩種糜蛋白酶(1500U/g)10g，鏈霉菌蛋白酶(1500U/g)10g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，達克羅寧0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g,蒸餾水加至100g。實施例9含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(六)配方糜蛋白酶10g，枯草桿菌蛋白酶10g，甘油10g，可溶淀粉20g，葡萄糖20g，聚六亞甲基胍0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例10含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(七)配方鏈霉菌蛋白酶10g，胰蛋白酶10g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，溴硝丙二醇0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例11含兩種蛋白酶乳膏制劑配方(八)配方糜蛋白酶10g，枯草桿菌蛋白酶10g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖20g，溴硝丙二醇o.2g，碳酸氫鈉0.3g，普魯卡因0.02g，蒸餾水加至100g。實施例12含蛋白酶與膠原的乳膏制劑配方(一)配方枯草桿菌蛋白酶10g，水溶性膠原蛋白30g，PEG40045g，己二醇8g，吐溫802g，聚六亞甲基胍0.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例13含蛋白酶與膠原的乳膏制劑配方(二)配方糜蛋白酶10g，水解低分子膠原蛋白30g，新科-990.2g，碳酸氫鈉0.3g，對硝基苯甲酸丙酯0.0625g，蒸餾水加至100g。實施例14含蛋白酶與膠原的乳膏制劑配方(三)配方胰蛋白酶10g，水解低分子膠原蛋白30g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖10g，達克羅寧0.2g，蒸餾水加至100g。實施例15僅含膠原的乳膏制劑配方配方水解低分子膠原蛋白30g，甘油10g，可溶淀粉10g，葡萄糖10g，溴硝丙二醇0.2g，碳酸氫鈉0.3g，蒸餾水加至100g。實驗1痤瘡(青春痘)的治療與瘢痕修復(fù)患有嚴重青春痘的年輕男性(30人)用本發(fā)明中實例6所使用的配方。在面部敷用涂了大約2毫米厚的乳膏的軟紗布，24小時后，用香皂洗臉，并且用熱水反復(fù)洗臉。上述過程重復(fù)4-5次。青春痘病情大大緩解。將該成功治療的病人，采用配方12涂抹，獲得了光潔的面部皮膚，未留疤痕。實驗2皮膚曬傷的治療與瘢痕修復(fù)用實驗1的方法，先后用本發(fā)明含兩種蛋白酶制劑涂抹，對太陽光長期強烈暴曬所造成的皮膚損傷有顯著效果，能除去已形成的痕跡。實驗3糖尿病性皮膚潰瘍的治療糖尿病患者皮膚潰瘍的治療患有糖尿病的志愿者共15人作為被試進行試驗，隨機分為5組，每組3人。在潰瘍處切口直徑20毫米，將本發(fā)明的制劑按100微克/處/天施用于患處。所用制劑的配方成分見表1。對照組涂抹消毒蒸餾水?；颊吡粼哼^夜觀察，施用16小時后除去藥用紗布，并進行檢測。清創(chuàng)活性按藥用紗布除去后所治愈的百分比表達，在處理過程中通過鏡檢清創(chuàng)面積、組織病理學檢查、血管形成、新皮膚分化和形成、以及整個康復(fù)過程的動力學等。所以結(jié)果總結(jié)于表1，表明蛋白酶加速損傷的康復(fù)。表1清創(chuàng)程度取決于配方中蛋白酶的活性<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表1的結(jié)果表明，配方中高酶活性的效果比較好。但低酶濃度的配方對面積小的損傷好，因為不會造成疼痛。康復(fù)過程從清除壞死組織和細胞開始，到治愈傷口結(jié)束。酶活性和治愈的速度的關(guān)系如圖1。圖中可看出，酶的活性與治愈的速度呈正比。藥效學實驗2燙傷的治療附圖25的照片展示了使用實例8配方治療被滾燙的食用油燙傷手臂的過程。圖2是未處理的燙傷情景。將實例8配方在藥用紗布上涂抹2毫米厚，然后敷于創(chuàng)面，每24小時換藥一次；圖3是處理2天后的情況。從第3天開始，用實例16的配方取代實例8配方，損傷面需要重建新皮和組織。從圖4可以看出在第5天新皮組織有明顯的愈合。圖5是第7天的情況，基本已康復(fù)。如果不使用本發(fā)明所涉及的配方，上述損傷通常需要幾周或甚幾個月才能完全康復(fù)，且留有疤痕。實驗4燙傷皮肽的修復(fù)附圖25的照片展示了使用實例8配方治療被滾燙的食用油燙傷手臂的過程。圖2是未處理的燙傷情景。將實例8配方在藥用紗布上涂抹2毫米厚，然后敷于創(chuàng)面，每24小時換藥一次；圖3是處理2天后的情況。從第3天開始，用實例6的配方取代實例8配方，損傷面需要重建新皮和組織。從圖4可以看出在第5天新皮組織有明顯的愈合。圖5是第7天的情況，基本已康復(fù)。如果不使用本發(fā)明所涉及的配方，上述損傷通常需要幾周或甚幾個月才能完全康復(fù)，且留有疤痕。權(quán)利要求一種用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)的制劑，其特征是含有1％～40％(W/W)蛋白酶和/或5％--30％(W/W)膠原蛋白；所述蛋白酶的比活是250～2000酶單位/克；所述膠原蛋白的分子量為3000～8000。2.權(quán)利要求1所述的制劑，所述蛋白酶是水溶性堿性蛋白酶；所述膠原蛋白是水溶性膠原蛋白。3.權(quán)利要求1所述的制劑，所述蛋白酶選自木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、鏈霉菌蛋白酶或枯草桿菌蛋白酶；所述膠原蛋白選自燕窩膠原蛋白、魚皮膠原蛋白或驢皮膠原蛋白。4.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，所述蛋白酶是一種或一種以上；所述膠原蛋白是一種或一種以上。5.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，含有抗菌劑或防腐劑，選自3-二羥甲基-5，5-二甲基乙內(nèi)酰脲、溴硝丙二醇、聚六亞甲基胍、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮或?qū)ο趸郊姿岜サ取?.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，含有止痛劑或麻醉劑，選自普魯卡因、苯佐卡因、利多卡因、達克羅寧或地卡因。7.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，含有甘油、糖或可溶淀粉中的一種或幾種。8.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，其劑型是乳膏劑、凝膠劑、乳液或化妝水。9.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，所述皮膚美容包括瘢痕、癬痕、妊娠斑、蝴蝶斑、曬斑皮膚的美容。10.權(quán)利要求13中任一所述的制劑，所述瘢痕包括皮膚外傷、疾病或痤瘡造成的瘢痕。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于皮膚美容和瘢痕修復(fù)的制劑，特別是含有水溶性堿性蛋白酶和膠原蛋白的外用制劑。本發(fā)明的配方既可用于外科或患病皮膚的美容和瘢痕修復(fù)，又可用于痤瘡的治療。文檔編號A61K8/65GK101822827SQ20101017128公開日2010年9月8日申請日期2010年5月13日優(yōu)先權(quán)日2010年5月13日發(fā)明者仵小南申請人:仵小南