專利名稱：用于治療神經(jīng)疾病的模型系統(tǒng)和治療方案的制作方法
用于治療神經(jīng)疾病的模型系統(tǒng)和治療方案相關申請的交叉引用本申請為正式申請，要求美國臨時申請?zhí)?1/185，989 (2009年6月10日遞交)的權(quán)利。
背景技術(shù)：
關于興奮性神經(jīng)毒性的早期工作表明，可以使用阻斷谷氨酸受體的藥物來治療中風和神經(jīng)創(chuàng)傷(Albers，Archives in Neurology 49:418-420(1992) ；Albers Ann Neurol 25:398-403(1989))。盡管早期在體外和在動物模型中的測試看上去很有希望， 但不幸的是，迄今，所有谷氨酸拮抗物的中風臨床試驗都沒顯示出益處，甚至表現(xiàn)出毒性副作用(Davis 等，Lancet349 32(1997) ；Morris 等，J Neurosurg 91 :737_743 (1999)； Davis 等，Stroke31 347-354(2000) ；Ikonomidou 等，Proc Natl Acad Sci U S A 97 12885-12890(2000) ；Lees 等，Lancet 355 1949-1954 (2000))?？赡艿慕忉屖鞘┯靡种?CNS 中興奮性神經(jīng)傳遞的化學劑后的負面影響超過了它們作為神經(jīng)保護劑的效用(Ikonomidou 和Turski，Lancet Neurology383_386 (2002)。谷氨酸能信號傳遞為CNS行使功能所需， 因此，阻斷必需的興奮性神經(jīng)傳遞具有負面后果(Ikonomidou，Biochem. Pharmacol. 62 401-405(2001))。因此，需要更為完善的治療神經(jīng)元死亡的方法，以規(guī)避阻斷谷氨酸受體的負面后果。本發(fā)明的發(fā)明人之一報道了突觸后密度蛋白95 (PSD-95)將NMDARs偶聯(lián)到介導興奮性神經(jīng)毒性和缺血性腦損傷的途徑上(Aarts等，Science298，846-850 (2002))。這種偶聯(lián)通過向神經(jīng)元轉(zhuǎn)導多肽而被破壞，所述多肽結(jié)合到PSD-95/NMDAR相互作用復合體一側(cè)的模塊結(jié)構(gòu)域上。這種處理減弱了下游NMDAR信號傳導而不阻斷NMDAR活性，保護了培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元不受到興奮性毒性的損傷，減少了遭受短暫性局灶性腦缺血大鼠的腦梗死體積。發(fā)明概述本發(fā)明提供了治療或預防由興奮性神經(jīng)毒性介導的疾病的方法，包括對患有該病或具有罹患該病風險的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2B結(jié)合和/或PSD-95 與nNOS結(jié)合的藥劑(pharmacological agent)，其中當該化學劑為具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ IDNO 6)的肽時，劑量為2_3mg/kg，如果該化學劑不是具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV的肽時，劑量遞送與2_3mg/kg具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV的肽等價有效濃度的該化學劑。在一些方法中，該化學劑為具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV的肽，劑量為2. 6mg/kg。在一些方法中，每疾病發(fā)作期，施用一次劑量。在一些方法中，施用劑量，不共施用抗炎藥。本發(fā)明也提供了治療或預防由興奮性神經(jīng)毒性介導的疾病的方法，包括對患有該病或具有罹患該病風險的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2B結(jié)合和/或PSD-95與 nNOS結(jié)合的藥劑，其中藥劑被連接到內(nèi)化肽(internalization ρ印tide)，藥劑通過靜脈輸注5-15分鐘的時間來施用。在一些方法中，連接到內(nèi)化肽的藥劑為具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV (SEQ ID NO 6)的肽，施用時間為5分鐘。在一些方法中，藥劑的劑量大于lmg/kg。在一些方法中，藥劑的劑量為2-3mg/kg。在一些方法中，藥劑的劑量為 2. 6mg/kg。在一些方法中，劑量不超過50mg/kg，前提是如果劑量大于3mg/kg，則該劑量與抗炎藥共施用。在一些方法中，施用劑量，不共施用抗炎藥。在一些方法中，受試者患有中風。在一些方法中，受試者正在經(jīng)歷手術(shù)，可選地，治療動脈瘤的血管內(nèi)手術(shù)。本發(fā)明還提供了抑制神經(jīng)手術(shù)或血管內(nèi)手術(shù)(無論其是否發(fā)生在CNS中)中的缺血性損傷的方法，包括對經(jīng)歷神經(jīng)手術(shù)的患者施用有效給藥方案的抑制PSD-95與NMDAR 2B結(jié)合的化學劑。在一些方法中，神經(jīng)手術(shù)為診斷性腦血管造影術(shù)。在一些方法中，神經(jīng)手術(shù)為治療動脈瘤的血管內(nèi)手術(shù)。在一些方法中，在血管內(nèi)手術(shù)之前施用化學劑。在一些方法中，在完成血管內(nèi)手術(shù)后1小時內(nèi)施用化學劑。在一些方法中，血管內(nèi)手術(shù)包括向動脈瘤中置入線圈(coil)。在一些方法中，血管內(nèi)手術(shù)包括將支架(stent)置入有動脈瘤的血管中。在一些方法中，血管內(nèi)手術(shù)包括置入微導管(microcatheter)。本發(fā)明提供了對藥劑進行臨床試驗的方法，包括對經(jīng)歷腦動脈瘤血管內(nèi)手術(shù)的患者群體施用藥劑，并將這些患者中手術(shù)損傷效應的頻率與經(jīng)歷血管內(nèi)手術(shù)而沒有施用藥劑的對照患者進行比較，以確定藥劑是否降低了損傷效應。在一些方法中，通過腦梗死的數(shù)量和/或大小來評估損傷效應。一些方法還包括在中風的動物模型中測試藥劑。一些方法還包括在患有中風的人類患者中測試藥劑。一些方法還包括標記藥劑用于治療中風。在一些方法中，藥劑抑制PSD95與NMDAR 2B和/或PSD-95與nNOS的結(jié)合。本發(fā)明還提供了測試藥劑的方法。這些方法包括(a)將微粒(particles)置入到靈長類動物的腦血管中；(b)給靈長類動物施用藥劑；以及(c)將此靈長類動物的損傷效應與沒有用化合物處理的對照靈長類動物進行比較。在一些方法中，通過梗死的數(shù)量和/ 或大小來評估損傷效應。在一些方法中，通過MRI或CAT掃描來確定梗死。在一些方法中， 通過與對照靈長類動物比較靈長類動物的行為癥狀來評估損傷效應。一些方法還包括在恢復期后對同樣的靈長類動物重復步驟(a)-(c)，條件是在重復步驟(a)-(c)中測試的藥劑可以與在之前進行步驟(a)-(c)時的相同或可以不同。一些方法還包括重復步驟(a)-(c)， 但是其中對照靈長類動物接受藥劑且將之前接受了藥劑的動物作為對照動物。在一些方法中，藥劑抑制PSD-95與NMDAR 2B和/或PSD-95與nNOS的結(jié)合。一些方法還包括對人中風受試者施用藥劑。一些方法還包括對經(jīng)歷動脈瘤血管內(nèi)手術(shù)的人受試者施用藥劑。在一些方法中，在將微粒置入到腦血管中之后施用藥劑。在一些方法中，在將微粒置入到腦血管中之前施用藥劑。在一些方法中，微粒為100微米的聚苯乙烯球體。在一些方法，對靈長類動物施用20個球體。在一些方法中，靈長類動物為獼猴。本發(fā)明還提供了凍干的組合物，所述組合物包含具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV (SEQ ID NO 6)的肽，其從在GMP條件下制備的于生理鹽水中的肽溶液凍干而來。本發(fā)明還提供了儲存藥物組合物的方法，所述方法包括將包含具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV (SEQ ID NO 6)的肽的藥物組合物，于生理鹽水中，以10_30mg/ml 的濃度，在GMP條件下于低于0°C儲存至少2年的時間?？蛇x地，濃度為18-20mg/ml。一些方法還包括對患者施用藥物組合物。附圖簡述

圖1顯示，在對照動物中注射球體后24小時，梗死的彌散加權(quán)MRI掃描，與接受了血管內(nèi)手術(shù)以置入線圈來修復動脈瘤的人進行比較。上部顯示在44歲的女性中于動脈瘤線圈置入后48小時的擴散缺陷。下部顯示在雄性食蟹猴(Cynomolgus macaque)中注射 20x IOOum聚苯乙烯微球后24小時的擴散缺陷。圖2比較經(jīng)治療的動物和對照動物中MRI可見梗死的數(shù)量和體積。圖3顯示有關皮層中梗死的與圖2類似的數(shù)據(jù)。圖4顯示按50mg/kg以及輸注時間3分鐘或60分鐘施用Tat_NR2B9c后的血壓變化。圖5顯示，對于7. 6mg/kg Tat_NR2B9c的5分鐘輸注而非1小時輸注(最右欄)， 與鹽水安慰劑相比，治療后24小時所測定的梗死的大小顯著降低。定義“嵌合肽”是指天然不彼此連接的兩個肽組分作為融合蛋白或通過化學鍵互相連接而成的肽?！叭诤稀钡鞍谆蚨嚯氖侵笍秃系亩嚯?，即單一的連續(xù)氨基酸序列，其由通常不以單一多肽序列的形式融合在一起的兩個(或更多個)不同的、異源的多肽組成。術(shù)語“PDZ結(jié)構(gòu)域”是指約90個氨基酸的模塊蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域，其特征在于與腦突觸蛋白PSD-95、果蠅的分隔連接蛋白Discs-Large(DLG)、和上皮緊密連接蛋白ZOl (ZOl)具有顯著的序列同一性(例如，至少60% )。PDZ結(jié)構(gòu)域也被稱作Discs-Large同源重復序列 (“DHRs”)和GLGF重復序列。通常，PDZ結(jié)構(gòu)域表現(xiàn)出維持核心共有序列(Doyle, D. Α.， 1996，Cell 85 1067-76)。示例性的包含PDZ結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)和PDZ結(jié)構(gòu)域序列公開于美國申請?zhí)?0/714，537，在此就其全部內(nèi)容通過參考引用并入本文。術(shù)語“PL蛋白”或“PDZ配體蛋白”是指與PDZ-結(jié)構(gòu)域形成分子復合物的天然蛋白質(zhì)，或是指其羧基端，當與全長蛋白質(zhì)分開來表達時(例如，作為3-25個殘基的肽片段， 例如3，4，5，8，9，10，12，14或16個殘基)，形成這樣的分子復合物的蛋白質(zhì)?？梢詫Ψ肿訌秃衔镞M行體內(nèi)觀察，或者使用描述于例如美國申請?zhí)?0/714，537中的“A分析法”或“G分析法”進行體外觀察。術(shù)語“NMDA受體”或“NMDAR”是指已知與NMDA相互作用的膜相關蛋白(包括以下所描述的各種亞基形式)。該受體可以是人的或非人的(例如，小鼠、大鼠、兔、猴)?！癙L基序”是指PL蛋白的C末端氨基酸序列(例如C末端3，4，5，6，7，8，9，10， 12，14，16，20或25個連續(xù)的殘基)(“C末端PL序列)或已知結(jié)合PDZ結(jié)構(gòu)域的內(nèi)部序列 (“內(nèi)部PL序列”)。"PL肽”是包含特異地與PDZ結(jié)構(gòu)域結(jié)合的PL基序、或由PL基序組成、或基于PL 基序的肽。術(shù)語“分離的”或“純化的”意思是指，目標物(例如，肽)已經(jīng)從存在于樣品中的污染物中純化出來，所述樣品例如從天然來源獲得的包含目標物的樣品。如果目標物被分離或純化，則其是于樣品中存在的主要大分子(例如，多肽)(即，基于摩爾計，其在組合物中比任何一種其它物更加豐富)，以及優(yōu)選地，目標物占存在的所有大分子物的至少約50% (基于摩爾計算)。通常，分離的、純化的或基本上純的組合物占存在于組合物中的所有大分子物的80%以上至90%。最優(yōu)選地，目標物被純化至基本同質(zhì)(即，以常規(guī)檢測方法在組合物中不能檢測到污染物)，其中組合物基本上由單一一種大分子組成。術(shù)語分離的或純化的不必排除旨在與分離物聯(lián)合起作用的其它組分的存在。例如，內(nèi)化肽可以被描述為分離的，盡管其與活性肽連接?！半哪M物”是指合成的化學化合物，所述化合物具有與天然氨基酸組成的肽基本相同的結(jié)構(gòu)和/或功能特征。肽模擬物可以完全包含氨基酸的合成的非天然類似物，或可以為部分天然肽氨基酸和部分非天然氨基酸類似物的嵌合分子。肽模擬物也可以包含任何數(shù)量的天然氨基酸保守性替換，只要這樣的替換不實質(zhì)性改變模擬物的結(jié)構(gòu)和/或抑制或結(jié)合活性。多肽模擬組合物可以包含任何組合的非天然結(jié)構(gòu)組分，所述非天然結(jié)構(gòu)組分典型來自3類結(jié)構(gòu)基團a)非天然酰胺鍵(“肽鍵“)連接的殘基連接基團；b)代替天然存在的氨基酸殘基的非天然殘基；或c)誘導二級結(jié)構(gòu)模擬(即誘導或穩(wěn)定二級結(jié)構(gòu))的殘基， 所述二級結(jié)構(gòu)例如，β轉(zhuǎn)角、Y轉(zhuǎn)角、β折疊、α螺旋構(gòu)象等。在包含活性肽和內(nèi)化肽的嵌合肽的肽模擬物中，活性部分或內(nèi)化部分或兩者均可以為肽模擬物。術(shù)語“特異性結(jié)合”是指兩個分子例如配體和受體間的結(jié)合，其特征在于即使在許多其它不同分子存在的條件下，一個分子(配體)也具有與另一個特定的分子(受體)結(jié)合的能力，即在非均質(zhì)的分子混合物中，一種分子表現(xiàn)出和另一種分子的優(yōu)先結(jié)合。配體和受體的特異性結(jié)合也可以通過在存在過量未標記配體時可檢測標記的配體與受體的結(jié)合減少(即結(jié)合競爭試驗)，而證明。興奮性神經(jīng)毒性是神經(jīng)元由于興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸的受體(例如NMDA受體 (例如，NMDAR 2Β))的過度激活而被損傷或殺死的病理學過程。術(shù)語“受試者”或“患者”包括人和獸醫(yī)動物，例如哺乳動物。術(shù)語“劑/化學劑”(agent)包括任何化合物，包括具有或不具有藥物活性的化合物、天然化合物、合成的化合物、小分子、肽和肽模擬物。術(shù)語“藥劑”是指具有藥理學活性的化學劑。藥劑包括為已知藥物的化合物、藥理學活性已經(jīng)被鑒定但正在動物模型或臨床試驗中進行進一步治療性評估的化合物。嵌合劑包括與內(nèi)化肽連接的藥劑。如果一種化學劑在篩選系統(tǒng)中表現(xiàn)出活性，表明該活性劑在疾病的預防或治療中有用或可能有用，則該化學劑可以被描述為具有藥理學活性。篩選系統(tǒng)可以是體外的、細胞的、動物或人?；瘜W劑可以被描述為具有藥理學活性，盡管可能需要進一步的測試來確立其在疾病治療中實際的預防或治療效用。Tat肽是指包含GRKKRRQRRR(SEQ ID NO :1)或由其組成的肽，其中在該序列中不超過5個殘基被缺失、替換或插入，保留了其促進所連接的肽或其它化學劑吸收到細胞中的能力。優(yōu)選地，任何氨基酸改變?yōu)楸Ｊ靥鎿Q。優(yōu)選地，任何替換、缺失或內(nèi)部插入合計起來使肽保留凈的陽離子電荷，優(yōu)選地與以上序列的電荷相似。Tat肽的氨基酸可以用生物素或類似的分子衍生化以減輕炎癥反應。將連接到內(nèi)化肽的藥劑與抗炎藥進行共施用的意思是，這兩種化學劑的用藥時間足夠接近，從而抗炎藥可以抑制由內(nèi)化肽誘導的炎癥反應。統(tǒng)計上顯著是指ρ值小于0. 05，優(yōu)選地小于0. 01，以及最優(yōu)選地小于0. 001。疾病的發(fā)作期是指存在疾病的病征和/或癥狀的時期，該時期穿插在沒有病征和 /或癥狀、或病征和/或癥狀表現(xiàn)較輕的更長時期之中。發(fā)明詳述I.概要
本發(fā)明提供了動物模型和臨床試驗，用于評估化學劑在治療或預防中風和其它神經(jīng)疾病中的潛在用途。本發(fā)明也提供了該化學劑臨床應用的優(yōu)選劑量、輸注方案和藥物組合物。11·用于治療疾病的化學劑盡管在以下所描述的動物模型或臨床試驗中可以對任何化學劑(包括在以前的中風臨床試驗中失敗了的化學劑)進行功效篩選，但優(yōu)選類型的化學劑抑制PSD-95和一種或多種NMDARs之間的相互作用。這樣的化學劑可以用于減輕至少部分由NMDAR興奮性神經(jīng)毒性介導的中風和其它神經(jīng)病學狀況的損傷效應。這樣的化學劑包括肽，所述肽具有包含或基于NMDA受體的PL基序或PSD95的PDZ結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列。這樣的肽也可以抑制 PSD-95和nNOS以及其它谷氨酸受體(例如，鉀鹽鎂礬(kainite)受體或AMPA受體)，例如 KV1-4和GluR6，之間的相互作用。優(yōu)選的肽抑制突觸后密度蛋白95(PSD-95)的PDZ結(jié)構(gòu)域1和2(人氨基酸序列由Stathakism提供，Genomics 44(1) :71_82 (1997))與一或多種 NMDA受體2亞基的C末端PL序列之間的相互作用，所述NMDA受體2亞基包括神經(jīng)元N-甲基-D-天冬氨酸受體的 NR2B 亞基(Mandich 等，Genomics 22，216-8 (1994))。NMDAR2B 的 GenBank 識別號為 4099612、其具有 C 末端 20 個氨基酸 FNGSSNGHVYEKLSSIESDV (SEQ IDNO 11)和PL基序ESDV(SEQ ID N0:12)。優(yōu)選的肽抑制人PSD-95和人NMDAR受體。然而，對于這些蛋白質(zhì)的物種變體，也能夠顯示出抑制作用。可以使用的NMDA和谷氨酸受體的列表顯示如下表1 具有PL序列的NMDA受體
名稱 “IGI或Acc# |C末端20mer序列|C末端4mer |PL |內(nèi)部PL ,
I序列備ID
NMDARl 307302 HPTDITGPLNLSDPSVST STVV』X AA216^
VV (SEP ID NO: 13) (SEQ ID
____NO:27)
NMDARW 292282 HPTDITGPLNLSDPSVST STVV_X AA216^
VV rSE(3IDNOil3) (SEP ID ι_lNO:27)
權(quán)利要求
1.治療或預防由興奮性神經(jīng)毒性介導的疾病的方法，所述方法包括給患病或具有患病風險的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR 2B的結(jié)合和/或PSD-95與nNOS的結(jié)合的藥劑，其中當藥劑為具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO 6)的肽時，劑量為2_;3mg/ kg,如果藥劑不是具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV的肽，則劑量遞送與2_;3mg/kg 具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV的肽等效的有效濃度的該藥劑。
2.權(quán)利要求1的方法，其中藥劑為具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQID NO:6)的肽，劑量為2.6mg/kg。
3.權(quán)利要求1的方法，其中每疾病發(fā)作期，該劑量施用一次。
4.權(quán)利要求1的方法，其中施用該劑量，不共施用抗炎藥。
5.治療或預防由興奮性神經(jīng)毒性介導的疾病的方法，所述方法包括給患病或具有患病風險的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR 2B的結(jié)合和/或PSD-95與nNOS的結(jié)合的藥劑， 其中藥劑與內(nèi)化肽連接，且通過靜脈內(nèi)輸注5-15分鐘來施用該藥劑。
6.權(quán)利要求5的方法，其中與內(nèi)化肽連接的藥劑為具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV (SEQ ID NO :6)的肽，且輸注時間為 5 分鐘。
7.權(quán)利要求6的方法，其中藥劑的劑量為lmg/kg以上。
8.權(quán)利要求6的方法，其中藥劑的劑量為2-;3mg/kg。
9.權(quán)利要求6的方法，其中藥劑的劑量為2.6mg/kg。
10.權(quán)利要求6的方法，其中劑量不超過50mg/kg，條件是如果劑量大于:3mg/kg，則與抗炎藥共施用該劑量。
11.權(quán)利要求5的方法，其中施用該劑量，不共施用抗炎藥。
12.權(quán)利要求5的方法，其中受試者患有中風。
13.權(quán)利要求5的方法，其中受試者正經(jīng)歷手術(shù)。
14.權(quán)利要求13的方法，其中受試者正經(jīng)歷血管內(nèi)手術(shù)以治療動脈瘤。
15.抑制缺血性損傷的方法，所述缺陷性損傷來自對連接腦和心臟或向肢體、腎臟、視網(wǎng)膜或脊髓供血的血管進行的血管內(nèi)手術(shù)或神經(jīng)手術(shù)，所述方法包括對經(jīng)歷血管的血管內(nèi)手術(shù)或神經(jīng)手術(shù)的受試者按有效方案施用抑制PSD-95與NMDAR 2B的結(jié)合的化學劑。
16.權(quán)利要求15的方法，其中缺血性損傷來自神經(jīng)手術(shù)，所述神經(jīng)手術(shù)為診斷性腦血管造影術(shù)。
17.權(quán)利要求15的方法，其中缺血性損傷來自神經(jīng)手術(shù)，所述神經(jīng)手術(shù)為治療動脈瘤的血管內(nèi)手術(shù)。
18.權(quán)利要求15的方法，其中化學劑在血管內(nèi)手術(shù)之前施用。
19.權(quán)利要求15的方法，其中化學劑在血管內(nèi)手術(shù)完成的1小時內(nèi)施用。
20.權(quán)利要求15的方法，其中血管內(nèi)手術(shù)包括將線圈置入動脈瘤中。
21.權(quán)利要求15的方法，其中血管內(nèi)手術(shù)包括將支架置入有動脈瘤的血管中。
22.權(quán)利要求15的方法，其中血管內(nèi)手術(shù)包括插入微導管。
23.對藥劑進行臨床試驗的方法，所述方法包括給在腦血管上或在連接腦和心臟或向肢體、視網(wǎng)膜、腎臟或脊髓供血的血管上接受血管內(nèi)手術(shù)的受試者的群體施用藥劑；并將這些受試者中手術(shù)的損傷效應的頻率與接受血管內(nèi)手術(shù)而沒有施用藥劑的對照受試者進行比較，以確定藥劑是否降低了損傷效應。
24.權(quán)利要求23的方法，其中受試者正經(jīng)歷腦動脈瘤的血管內(nèi)手術(shù)。
25.權(quán)利要求23的方法，其中通過腦梗死的數(shù)量和/或大小來評估損傷效應。
26.權(quán)利要求23的方法，其中通過視網(wǎng)膜、腎臟、脊髓或肢體中梗死的數(shù)量和/或大小來評估損傷效應。
27.權(quán)利要求23的方法，所述方法還包括在中風的動物模型中測試藥劑。
28.權(quán)利要求23的方法，所述方法還包括在患有中風的人受試者中測試藥劑。
29.權(quán)利要求23的方法，所述方法還包括對用于治療中風的藥劑進行標記。
30.權(quán)利要求23的方法，其中藥劑抑制PSD95與NMDAR2B的結(jié)合和/或PSD-95與 nNOS的結(jié)合。
31.測試藥劑的方法，包括a.將微粒置入靈長類動物的腦血管中；b.給靈長類動物施用藥劑；c.將步驟(a)中靈長類動物的損傷效應與沒有以化合物治療的對照靈長類動物進行比較。
32.權(quán)利要求31的方法，其中通過梗死的數(shù)量和/或大小來評估損傷效應。
33.權(quán)利要求31的方法，其中通過MRI或CAT掃描來確定梗死。
34.權(quán)利要求31的方法，其中通過與對照靈長類動物比較該靈長類動物的行為癥狀來評估損傷效應。
35.權(quán)利要求31的方法，所述方法還包括在恢復期后對相同靈長類動物重復步驟 (a)-(c)，條件是在重復步驟(a)-(c)中測試的藥劑可以與在之前實施步驟(a)-(c)時的相同或不同。
36.權(quán)利要求31的方法，所述方法還包括重復步驟(a)-(c)，但對照靈長類動物接受藥齊U，以前接受藥劑的動物為對照動物。
37.權(quán)利要求31的方法，其中藥劑抑制PSD-95與NMDAR2B的結(jié)合和/或PSD-95與 nNOS的結(jié)合。
38.權(quán)利要求31的方法，所述方法還包括對人中風受試者施用藥劑。
39.權(quán)利要求31的方法，所述方法還包括對經(jīng)歷動脈瘤的血管內(nèi)手術(shù)的人受試者施用藥劑。
40.權(quán)利要求31的方法，其中在向腦血管中置入微粒之后施用藥劑。
41.權(quán)利要求31的方法，其中在向腦血管中置入微粒之前施用藥劑。
42.權(quán)利要求31的方法，其中微粒為100微米的聚苯乙烯球體。
43.權(quán)利要求42的方法，其中對靈長類動物施用20個球體。
44.權(quán)利要求31的方法，其中靈長類動物為獼猴。
45.凍干的組合物，所述組合物包含具有氨基酸序列YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQID NO 6)的肽，其從在GMP條件下制備的肽于生理鹽水中的溶液凍干而來。
46.儲存藥物組合物的方法，所述方法包括將包含具有氨基酸序列 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO 6)的肽的藥物組合物，以于生理鹽水中10_30mg/ml的濃度，在GMP條件下于低于0°C儲存至少2年的時間。
47.權(quán)利要求46的方法，其中濃度為18-20mg/ml。
48.權(quán)利要求46或47的方法，所述方法還包括對受試者施用藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供用于評估化學劑在治療和預防中風以及其它神經(jīng)疾病，特別是至少部分地由興奮性神經(jīng)毒性介導的疾病，中的潛在用途的動物模型和臨床試驗。本發(fā)明也提供此化學劑臨床應用的優(yōu)選劑量、輸注方案和藥物組合物。
文檔編號A61K38/16GK102458441SQ201080035246
公開日2012年5月16日 申請日期2010年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月10日
發(fā)明者J·D·加曼, M·蒂米安斯基 申請人:諾諾公司