診斷和治療血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的方法
【專利摘要】本文公開了用于對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷和治療的方法和組合物。本文公開了用于對(duì)受試者的與所公開的血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀進(jìn)行診斷和治療的方法和組合物。本文公開了用于對(duì)受試者的嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病進(jìn)行診斷和治療的方法和組合物。本文公開了用于對(duì)受試者的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉進(jìn)行診斷和治療以使受試者的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法和組合物。
【專利說明】診斷和治療血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的方法
[0001]鳴謝
[0002]本發(fā)明是在政府支持下根據(jù)由NIH授予的授權(quán)號(hào)EY017404完成的。政府擁有本發(fā)明的某些權(quán)利。
[0003]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0004]本申請(qǐng)要求2011年3月15日提交的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/452，944、2011年3月15日提交的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/452，964以及2011年3月15日提交的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/452，950的權(quán)益。這些申請(qǐng)的全部內(nèi)容以引用的方式并入本文。
發(fā)明領(lǐng)域
[0005]本發(fā)明整體涉及對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的診斷和治療。具體而言，本發(fā)明涉及a)診斷受試者的血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的方法；b)鑒定受試者產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的易感性的方法；c)治療受試者的血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的方法；以及d)篩選有效治療受試者的血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的藥劑的方法。
[0006]發(fā)明背景
[0007]血管相關(guān)黃斑病(VAM)表示可能與多種血管癥狀相關(guān)聯(lián)的一種先前未得到確診的疾病。目前，患有血管相關(guān)黃斑病的患者經(jīng)常被誤診。此外，由于人可能表現(xiàn)出多種多樣的癥狀，所以可能難以對(duì)血管相關(guān)黃斑病以及其癥狀作出診斷。因此，需要的是更有效診斷受試者的血管相關(guān)黃斑病和它的相關(guān)癥狀的方法。此外，需要的是治療受試者的血管相關(guān)黃斑病和它的相關(guān)癥狀的方法。
[0008]概述
[0009]本文描述了診斷受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的方法，所述方法包括檢測受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉和/或重構(gòu)脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的眼部病變的存在，其中在所述受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉和/或重構(gòu)脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的眼部病變指示所述受試者存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。
[0010]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:確定所述受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是⑴HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH基因中的 rsl061170 或 CFH基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP中的一個(gè)或多個(gè)的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。
[0011]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。
[0012]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。
[0013]本文還描述了用于對(duì)患有血管相關(guān)黃斑病的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:在從所述受試者獲得的樣品中，確定HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是⑴HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的rsl04933U HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH 基因中的 rsl061170 或 CFH 基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，從而基于(i)或(ii)中的SNP的一種或多種變體的存在對(duì)所述受試者進(jìn)行診斷。
[0014]本文還描述了對(duì)患有血管相關(guān)黃斑病的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，在所述受試者眼睛的圖像中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在使得可以診斷出血管相關(guān)黃斑病。
[0015]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:確定所述受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或Cm基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH 基因中的 rsl061170 或 CFH 基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP中的一個(gè)或多個(gè)的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。
[0016]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。
[0017]本文還描述了用于對(duì)患有嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:在從所述受試者獲得的樣品中，確定HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH基因中的 rsl061170 或 CFH基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，從而基于(i)或(ii)中的一個(gè)或多個(gè)SNP的存在對(duì)所述受試者進(jìn)行診斷。
[0018]本文還描述了用于對(duì)患有嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，從而基于所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在對(duì)所述受試者進(jìn)行診斷。
[0019]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者具有或產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:確定所述受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或Cm基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH基因中的 rsl061170 或 CFH基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP中的一個(gè)或多個(gè)的存在預(yù)示所述受試者有具有或產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。
[0020]本文還描述了確定受試者產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括確定受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或PLEKHA1基因中一個(gè)或多個(gè)單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(single nucleotide polymorphism, SNP)的身份,其中某些SNP指示產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)增加或降低。
[0021]本文還描述了在受試者中確定受試者產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括確定受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或PLEKHA1基因中一個(gè)或多個(gè)單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)的身份，其中某些SNP指示產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)降低。
[0022]本文還描述了在受試者中確定受試者產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括確定受試者體內(nèi)CFH、C3、C2、CFB或APOE基因中一個(gè)或多個(gè)單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)的身份，其中某些SNP指示產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)增加或降低。
[0023]本文還描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定受試者體內(nèi)HTRAl、ARMS2、PLEKHAI中的一個(gè)或多個(gè)單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)、CFH,C3、C2、CFB或APOE基因中的單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)的身份，其中某些SNP指示血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的存在。
[0024]本文還描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定受試者體內(nèi)HTRAl、 ARMS2、PLEKHA1、CFH、C3、C2、CFB或APOE基因中一個(gè)或多個(gè)單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)的身份，其中某些SNP指示缺少防止產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的保護(hù)。
[0025]本文還描述了鑒定受試者產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的易感性的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，其中在受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉指示在所述受試者的組織或器官中易產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。
[0026]本文還描述了鑒定受試者產(chǎn)生嚴(yán)重或晚期黃斑病的易感性的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，其中在所述受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉指示所述受試者易產(chǎn)生嚴(yán)重或晚期黃斑病。
[0027]本文還描述了鑒定受試者產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的易感性的方法，所述方法包括檢測受試者體內(nèi)HTRAl或ARMS2基因中的特定SNP，其中檢測出HTRAl或ARMS2基因中的特定SNP指示所述受試者易產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0028]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的方法，其中在受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的一種或多種抑制脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉和/或脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的血管結(jié)構(gòu)上游更大的小動(dòng)脈和動(dòng)脈阻塞或封堵的活性劑或治療劑。
[0029]本文還描述了增強(qiáng)臨床試驗(yàn)的方法，所述方法包括選擇適當(dāng)?shù)幕颊呷后w進(jìn)行那些臨床試驗(yàn)。在一個(gè)方面，可以使用所述方法來確?；诨颊呤欠裼锌赡軐?duì)正在研究的一種或多種實(shí)驗(yàn)治療劑起反應(yīng)而鑒定出參與臨床試驗(yàn)的患者。[0030]本文還描述了如下的試劑盒，所述試劑盒包含用于在受試者的核酸樣品中檢測一個(gè)或多個(gè)SNP的測定，其中所述SNP是(i)HTRAl基因中的rsll200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH 基因中的 rsl061170 或 CFH 基因中的 rs800292 ； (ii) (i)中的 SNP 的組合；或(iii)與(i)中的SNP存在連鎖不平衡的SNP。
[0031]本文還描述了血管相關(guān)黃斑病的非人類動(dòng)物模型，其中所述動(dòng)物的一種或多種細(xì)胞表達(dá)重組HTRAl多肽。
[0032]本文還描述了用于鑒定異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括
[0033]用于對(duì)眼睛進(jìn)行成像的裝置，所述裝置被配置成提供異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的可識(shí)別圖像，以及
[0034]用于鑒定異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的說明書。
[0035]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病、治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀、治療嚴(yán)重黃斑病、治療晚期黃斑病或使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法。
[0036]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病、治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀、治療嚴(yán)重黃斑病、治療晚期黃斑病或使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法，所述方法包括向 所述受試者施用有效量的一種或多種所公開的組合物、治療劑、活性劑或功能性核酸。
[0037]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的方法，其中在受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的一種或多種增加所述受試者的眼睛中脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中的灌注的活性劑或治療劑。
[0038]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的方法，其中在受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的一種或多種模擬HTRAl或ARMS2核酸或肽的活性、與HTRAl或ARMS2核酸或肽雜交或以其它方式調(diào)節(jié)HTRAl或ARMS2核酸或肽的活性的活性劑或治療劑。
[0039]本文還描述了治療受試者的血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病或者使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的彈性蛋白酶抑制劑。
[0040]本文還描述了治療受試者的與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的彈性蛋白酶抑制劑。
[0041]本文還描述了選擇用于所公開的方法的受試者的方法，所述所公開的方法用于(i)治療血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
[0042]本文還描述了對(duì)如下的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述受試者患有(i)血管相關(guān)黃斑病；(ii)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或具有(iv)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0043]本文還描述了篩選如下的藥劑或藥劑的組合的方法，所述藥劑或藥劑的組合有效用于Q)治療血管相關(guān)黃斑病；Qi)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；
(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。[0044]本文還描述了確定對(duì)被診斷患有血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行治療的功效的方法。
[0045]附圖簡述
[0046]并入本說明書中并且構(gòu)成本說明書的一部分的附圖圖解了若干個(gè)方面并且連同說明書一起用來闡釋本發(fā)明的原理。
[0047]圖1示出了在近紅外(IR)、眼底自發(fā)熒光(AF)以及無赤光(RF)圖像以及相應(yīng)的熒光素血管造影照片(FA)和吲哚菁綠血管造影照片(ICG)上的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0048]圖2示出了經(jīng)過紅外成像(IR)的相對(duì)于具有適度高反射率的背景呈具有低反射率的獨(dú)特單元(均具有以及不具有獨(dú)特的高反射性中心‘斑點(diǎn)’)形式的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0049]圖3示出了隨時(shí)間推移的表型的發(fā)展。
[0050]圖4示出了隨時(shí)間推移的表型的發(fā)展。
[0051]圖5示出了如由SD-OCT所觀測到的視網(wǎng)膜下腔中的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0052]圖6示出了脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注不良和/或?qū)晒庑盘?hào)的掩蔽。
[0053]圖7示出了在眼底中所觀測到的總體圖案重構(gòu)了黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管解剖結(jié)構(gòu)的總體圖案。
[0054]圖8示出了獲自具有黃斑異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的患者的高分辨率OCT ‘C’掃描圖。
[0055]圖9示出了以中央凹為中心的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的‘扇形’分布。
[0056]圖10示出了在2011年3月所拍攝并且描繪了異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在的彩色圖像、FA圖像以及IR圖像。
[0057]圖11示出了在死亡時(shí)間之后3小時(shí)又45分鐘取自捐獻(xiàn)者并且被打開以暴露內(nèi)層的眼睛。
[0058]圖12示出了標(biāo)準(zhǔn)的組織切片(用馬氏三色法(Mallory trichrome)染色)。
[0059]圖13示出了在更高的放大倍數(shù)下所觀測到的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的獨(dú)特形態(tài)特征。
[0060]圖14示出了黃斑視網(wǎng)膜功能降低的實(shí)例(右側(cè)畫面中的暗區(qū))。
[0061]圖15示出了 HtrAl蛋白酶結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)的比對(duì)。
[0062]圖16示出了 HTRAl的結(jié)構(gòu)比對(duì)的三個(gè)視圖。
[0063]圖17示出了在黃斑外和黃斑區(qū)域中HTRAl的表達(dá)數(shù)據(jù)。
[0064]圖18示出了在黃斑外和黃斑區(qū)域中HTRAl的表達(dá)數(shù)據(jù)。
[0065]圖19示出了 HTRAl和ARMS2表達(dá)的蛋白質(zhì)印跡。
[0066]圖20示出了對(duì)血清中的HTRAl和ARMS2進(jìn)行的抗體檢測。
[0067]圖21示出了通過蛋白質(zhì)印跡法使用以下抗體對(duì)來自具有不同基因型的患者的血清樣品進(jìn)行分析:A-SC-15465 (左側(cè))、SC-50335 (右側(cè));B_NEP_1688 (左側(cè))、NEP_1693 (右偵D ;C-NEP-1694 (左側(cè))、NEP-1695 (右側(cè));D-NEP_2414。
[0068]圖22示出了使用抗-HtrAl抗體進(jìn)行探測的蛋白質(zhì)印跡。
[0069]圖23示出了使用抗-HtrAl抗體進(jìn)行探測的蛋白質(zhì)印跡。
[0070]圖24示出了在視網(wǎng)膜/RPE蛋白質(zhì)提取和蛋白質(zhì)印跡中對(duì)HtrAI和ARMS2蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測。[0071]圖25示出了彈性蛋白的HTRAl降解。
[0072]圖26示出了 HTRAl的彈性蛋白酶活性。
[0073]圖27示出了 HTRAl彈性蛋白酶活性的抑制。
[0074]圖28示出了被用于產(chǎn)生小鼠品系的HTRAl轉(zhuǎn)基因構(gòu)建體。
[0075]圖29示出了展現(xiàn)出PCV的重要特征的hHTRAl+小鼠。
[0076]圖30示出了展現(xiàn)出PCV的重要特征的hHTRAl+小鼠。[0077]圖31示出了 hHTRAl+小鼠體內(nèi)布魯赫膜(Bruch’s membrane)的彈性膜的降解。
[0078]圖32示出了 hHTRAl+小鼠體內(nèi)脈絡(luò)膜血管的彈性膜的降解。
[0079]圖33示出了注射了 NP的眼睛具有正常的視網(wǎng)膜構(gòu)造而與對(duì)照相比未出現(xiàn)毒性體征。
[0080]圖34示出了使用HTRAl抑制劑對(duì)hHTRAl+小鼠進(jìn)行治療逆轉(zhuǎn)了 PCV表型。
[0081]圖35示出了被亞克隆到AAV穿梭載體pAAV_CAG_ShuttIe-WPRE中處于CAG啟動(dòng)子下的含有全長編碼區(qū)和C-端Hiyc-His6標(biāo)簽2的人類HTRAl cDNA。
[0082]圖36示出了在受到AAV2-HTRA1感染的小鼠體內(nèi)觀測到的PCV病變。
[0083]圖37示出了彈性蛋白原(彈性蛋白的可溶性前體)的水平在hHTRAl+小鼠與WT小鼠體內(nèi)是相似的。
[0084]圖38示出了 ACL的最大風(fēng)險(xiǎn)是染色體10上的具有純合風(fēng)險(xiǎn)性的任何雙倍型(diplotype)o
[0085]圖39示出了在DNA樣品中針對(duì)于處于補(bǔ)體區(qū)(CFH-至-F13B )以及HTRA1、ARMS2、C3、CFB、C2以及APOE基因的控制之下的SNP進(jìn)行篩選的結(jié)果。
[0086]圖40示出了各種SNP的等位基因頻率，在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉組群中加以表征并且與具有416名沒有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的個(gè)體的組群相比較。
[0087]圖41示出了各種SNP的等位基因頻率，在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉組群中加以表征并且與具有416名沒有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的個(gè)體的組群相比較。
[0088]圖42示出了各種SNP的等位基因頻率，在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉組群中加以表征并且與具有416名沒有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的個(gè)體的組群相比較。
[0089]本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)將在某種程度上闡述于隨后的描述中，并且根據(jù)描述將在某種程度上變得顯而易見，或可以通過實(shí)踐本發(fā)明而獲悉。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)將借助于在所附權(quán)利要求書中所具體指出的要素和組合來了解和實(shí)現(xiàn)。應(yīng)了解，以上概述和以下詳述僅具示例性和說明性而不限制如所要求保護(hù)的本發(fā)明。
[0090]描述
[0091]通過參考以下發(fā)明詳述以及其中所包括的實(shí)施例可使本發(fā)明更易理解。
[0092]除非另外明確地說明，否則本文所闡述的任何方法或方面決不是意圖被視為必需按照特定的次序進(jìn)行它的步驟。因此，在權(quán)利要求書或發(fā)明詳述中方法權(quán)項(xiàng)沒有確切地說明所述步驟將限于特定次序的情況下，決不是意圖在任何方面推斷次序。這適用于任何可能的非明確的解釋基礎(chǔ)，包括關(guān)于步驟或操作流程的安排的邏輯事宜；從語法組織或標(biāo)點(diǎn)符號(hào)得到的顯明意義；或在本說明書中所述的方面的數(shù)目或類型。
[0093]定義
[0094]除非上下文另外明確地規(guī)定，否則如在本說明書以及所附的權(quán)利要求書中所用的單數(shù)形式“一個(gè)(種)”和“所述”包括多個(gè)指示物。因此，例如，提及“一種藥物載體”包括了兩種或更多種這類載體的混合物，諸如此類。
[0095]范圍在本文中可以被表示為從“約” 一個(gè)具體值和/或至“約”另一個(gè)具體值。當(dāng)表示這種范圍時(shí)，另一個(gè)實(shí)施方案包括了從一個(gè)具體值和/或至另一個(gè)具體值。類似地，當(dāng)通過在之前使用“約”將值表示為近似值時(shí)，應(yīng)了解所述具體值形成了另一個(gè)實(shí)施方案。將進(jìn)一步了解的是，每個(gè)范圍的終點(diǎn)相對(duì)于另一個(gè)終點(diǎn)都是有意義的并且獨(dú)立于另一個(gè)終點(diǎn)。還應(yīng)了解，存在本文所述的多個(gè)值，并且每個(gè)值在本文中除了所述值本身之外還被公開為“約”所述具體值。例如，如果公開了值“10”，那么也就公開了“約10”。還應(yīng)了解的是，如由熟練的技術(shù)人員所適當(dāng)?shù)乩斫猓谥当还_時(shí)，也就公開了“小于或等于”所述值、“大于或等于所述值”以及值之間可能的范圍。例如，如果公開了值“10”，那么也就公開了“小于或等于10”以及“大于或等于10”。還應(yīng)了解的是，在整個(gè)申請(qǐng)中，以多種不同的形式提供數(shù)據(jù)，并且這些數(shù)據(jù)表示終點(diǎn)、起點(diǎn)以及所述數(shù)據(jù)點(diǎn)的任何組合的范圍。例如,如果公開了具體的數(shù)據(jù)點(diǎn)“10”和具體的數(shù)據(jù)點(diǎn)15，那么應(yīng)了解，認(rèn)為公開了大于、大于或等于、小于、小于或等于以及等于10和15以及10與15之間。還應(yīng)了解，還公開了兩個(gè)具體單位之間的每個(gè)單位。例如，如果公開了 10和15，那么也就公開了 11、12、13以及14。
[0096]“任選的”或“任選地”意思是隨后描述的事件或情形可能存在或可能不存在并且所述描述包括了所述事件或情形存在的情況以及所述事件或情形不存在的情況。
[0097]本文所用的詞語“或”意指具體清單中的任何一個(gè)成員并且還包括了所述清單中成員的任何組合。
[0098]本文所用的 “嚴(yán)重黃斑病”或“晚期黃斑病”意指任何地圖狀萎縮(4A級(jí))、新生血管性AMD (RPE脫離、[周邊]視網(wǎng)膜出血和/或在不存在其它視網(wǎng)膜[血管]病癥的情況下的瘢痕；4B級(jí)；包括CNV的所有表型，包括隱匿性、典型性、息肉樣脈絡(luò)膜病[PPCV]，以及視網(wǎng)膜血管瘤增殖[1^])，或兩者(4(:級(jí)；包括GA的所有表型)。
[0099]本文所用的“HTRA1 ”意思是高溫需求絲氨酸肽酶I (High TemperatureRequirement Serine Peptidasel,HTRAl)基因。HTRAl 還可以意指由 HTRAl 基因編碼的任何HTRAl蛋白。HTRAl的NCBI基因識(shí)別號(hào)是5654。
[0100]本文所用的“ARMS2”意指年齡相關(guān)性黃斑病易感因子2 (ARMS2)基因。ARMS2還可以意指由ARMS2基因編碼的任何ARMS2蛋白。ARMS2的NCBI基因識(shí)別號(hào)是387715。
[0101].診斷血管相關(guān)黃斑病及其癥狀的方法
[0102]本公開內(nèi)容揭示了如下意外的發(fā)現(xiàn):異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉不是視網(wǎng)膜下類玻璃膜疣狀沉積物，而是代表了一種新的疾病，即血管相關(guān)黃斑病以及黃斑變性的體征。異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉表示人眼中視網(wǎng)膜光感受器的外段、視網(wǎng)膜色素上皮以及布魯赫膜中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中的毛細(xì)血管以及脈絡(luò)膜中的小動(dòng)脈封堵或阻塞區(qū)域的缺血性損傷和損害區(qū)域，而并非像典型的玻璃膜疣一樣由細(xì)胞碎片、補(bǔ)體蛋白或脂質(zhì)構(gòu)成。人眼中脈絡(luò)膜毛細(xì)血管和/或脈絡(luò)膜中的脈絡(luò)膜小動(dòng)脈封堵或阻塞與血管相關(guān)黃斑病的發(fā)病率增加有關(guān)，所述血管相關(guān)黃斑病可以表現(xiàn)為脈絡(luò)膜新血管生成(CNV)、視網(wǎng)膜下出血以及中央視覺喪失。對(duì)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉進(jìn)行檢測代表了對(duì)受試者的眼睛疾病以及侵害體內(nèi)其它組織和器官的血管疾病進(jìn)行診斷的一種先前未被認(rèn)識(shí)到的方式。
[0103]目前，患有血管相關(guān)黃斑病的患者經(jīng)常被誤診。此外，由于人可能表現(xiàn)出多種多樣的癥狀，所以可能難以對(duì)血管相關(guān)黃斑病以及其癥狀作出診斷。因此，需要的是更有效診斷受試者的血管相關(guān)黃斑病和它的相關(guān)癥狀的方法。此外，需要的是治療受試者的血管相關(guān)黃斑病和它的相關(guān)癥狀的方法。
[0104]1.異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉
[0105]本文描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉指示所述受試者存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀或后果。
[0106]本文還描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉預(yù)測所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。本文所用的血管相關(guān)黃斑病可以進(jìn)一步包含與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀，其中血管相關(guān)黃斑病的一種或多種癥狀是黃斑變性、年齡相關(guān)性黃斑變性、心臟微血管疾病、斯特格氏病(Stargardt’ S)、彈性假黃瘤(PXE)、Alagille綜合征、皮層下腦白質(zhì)病、子癇前期、高血壓、糖尿病、心肌缺血、動(dòng)脈瘤、因自身免疫性疾病或感染因子所致的血管炎、深靜脈血栓形成、淋巴水腫、靜脈曲張、外周動(dòng)脈疾病、腎動(dòng)脈疾病、雷諾氏病(Raynaud’s disease)、伯格氏病(Buerger’s disease)、外周靜脈疾病、靜脈血凝塊、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、充血性心力衰竭、動(dòng)脈硬化、血栓性或栓塞性中風(fēng)或心肌梗塞。 [0107]在一個(gè)方面，本文所述的方法可以進(jìn)一步包括確定所述受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或CFH基因中的一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的 rsl 1200638、HTRAl 基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的rsl0490924、ARMS2基因中的rs3750848、CFH基因中的rsl061170或CFH基因中的rs800292，或(ii)與(i)中的SNP存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP的一種或多種變體的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。在一個(gè)方面，確定rsll200638SNP處的A、rsl049331SNP處的T、rs2672587SNP 處的 G、rsl0490924SNP 處的 T、rs3750848SNP 處的 G、rsl061170SNP 處的 C，或rs800292SNP處的G的身份可預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)或者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)增加。
[0108]在一個(gè)方面，確定rsll200638SNP 處的 G、rsl049331SNP 處的 C、rs2672587SNP 處的 C、rsl0490924SNP 處的 G、rs3750848SNP 處的 T、rsl061170SNP 處的 T，或 rs800292SNP處的A的身份可預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)或者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)降低。
[0109]本文還描述了鑒定受試者的組織或器官中產(chǎn)生與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的癥狀的易感性的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在指示所述受試者的組織或器官中易產(chǎn)生與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的癥狀。所述組織或器官可以包括但不限于心臟、血管、腦、脊髓、肌肉、骨骼、眼睛、耳朵、腎臟、子宮、胎盤、皮膚、粘膜、胃、肝臟、肺、膽囊、脾臟、闌尾、小腸、大腸、胰腺、前列腺或膀胱。
[0110]術(shù)語“受試者”的意思是個(gè)體。在一個(gè)方面，受試者是哺乳動(dòng)物，如靈長類動(dòng)物，并且更優(yōu)選地是人類。非人類靈長類動(dòng)物包括狨猴、猴子、黑猩猩、大猩猩、猩猩以及長臂猿等等。術(shù)語“受試者”還包括馴養(yǎng)的動(dòng)物，如貓、狗等；家畜(例如牛(母牛)、馬、豬、綿羊、山羊等)；實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(例如雪貂、南美栗鼠、小鼠、家兔、大鼠、沙鼠、豚鼠等)；以及鳥類物種(例如雞、火雞、鴨、野雞、家鴿、野鴿、鸚鵡、美冠鸚鵡、鵝等)。受試者還可以包括但不限于魚(例如斑馬魚、金魚、羅非魚、鮭魚以及鱒魚)、兩棲動(dòng)物以及爬行動(dòng)物。本文所用的“受試者”與“患者”相同，并且所述術(shù)語可以可互換地使用。
[0111]本文所用的“異?！币馑际桥c正常或預(yù)期的類型不同。異常的可以與“不正?！被颉胺闯！毕嗤?，并且所述術(shù)語可以可互換地使用。在一個(gè)方面，異常的還可以意指重構(gòu)。
[0112]本文所用的“脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉”是眼睛的黃斑中所獨(dú)有的圓形毛細(xì)血管床，SP脈絡(luò)膜中的毛細(xì)血管。充氧的血液進(jìn)入每個(gè)脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的中心，而缺氧的血液經(jīng)由圍繞每個(gè)小葉的大部分外周的靜脈回流區(qū)域離開?；亓鲄^(qū)域的直徑可能與脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的直徑相同。
[0113]“異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉”可為看起來不正常和/或不正常起作用的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉還可以是重構(gòu)黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的病變，包括但不限于視網(wǎng)膜色素上皮死亡(RPE)、布魯赫膜或RPE下腔發(fā)生改變、光感受器間隔或視網(wǎng)膜下腔發(fā)生改變、與異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉產(chǎn)生(如脈絡(luò)膜基質(zhì)發(fā)生改變、上游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變、下游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或缺血)有關(guān)的其它視網(wǎng)膜異?；虿∽?、光感受器死亡或眼周的鵝卵石樣萎縮?？梢越?jīng)由本領(lǐng)域中已知的多種儀器對(duì)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉進(jìn)行成像，所述儀器包括但不限于Heidelberg Spectralis、Zeiss Cirrus、Topcon3D0CT2000,Optivue RTVue SD-OCT,Opko OCT SLO,NIDEK F-10或Optopol SOCT CopernicusHR?？梢允褂美?而不限于)血管造影術(shù)、ERG、血流量或彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(CDOCT)來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的功能后果。在一個(gè)方面，不能正常地起作用可能由小葉阻塞所致。因而，“異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉”可能是被阻塞、部分阻塞或功能性阻塞的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。小葉“阻塞”的意思與小葉完全或部分“封堵”相同。例如，脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉可能被部分或完全封堵或阻塞?！白枞边€可以意指功能性阻塞。本文所用的功能性阻塞可以意指上游血管結(jié)構(gòu)的阻塞，所述上游血管結(jié)構(gòu)例如(而不限于)向脈絡(luò)膜毛細(xì)血管供血的小動(dòng)脈。脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉阻塞可能是因?yàn)槭挂徊糠只蛉抗芮婚]塞的血管壁不正常變厚；與脈絡(luò)膜血管相關(guān)聯(lián)的支撐基質(zhì)降解，例如彈性蛋白和/或細(xì)胞外基質(zhì)降解；脂質(zhì)、鈣、纖維組織、血小板、纖維蛋白或血栓在血管內(nèi)表面上積聚；或部分或完全阻礙、抑制或減少血管腔中的血流的栓子。在正常情況下，例如，當(dāng)受試者并未患有血管相關(guān)黃斑病或其癥狀時(shí)，在受試者眼睛的黃斑中不存在或可能不會(huì)看到異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在另一個(gè)方面，當(dāng)受試者患有視力障礙，但并未患有血管相關(guān)黃斑病或其癥狀時(shí)，在受試者的眼睛中可能存在或可能看到異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，從而充當(dāng)血管相關(guān)黃斑病和它的相關(guān)癥狀的早期預(yù)測物。本文所用的“視力障礙”意思是引起視力發(fā)生改變而偏離正常的任何病狀，例如(而不限于)視力模糊、虹視、盲點(diǎn)、飛蚊癥以及其它癥狀。
[0114]在受試者眼睛的黃斑中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在指示對(duì)血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的一種先前未被認(rèn)識(shí)到的方法，在一個(gè)方面，所述血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的特征在于受試者的眼睛中脈絡(luò)膜中的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注減少或不存在灌注。本文所用的“灌注減少”意思是在全部或一部分黃斑區(qū)中，脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中的血流減少至正常水平以下或不存在血流。“灌注減少”還可以意指脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中的血流不足以向目標(biāo)組織提供必要的氧和營養(yǎng)物，所述目標(biāo)組織包括但不限于例如脈絡(luò)膜、鞏膜、布魯赫膜、視網(wǎng)膜色素上皮或視網(wǎng)膜光感受器的外段。[0115]脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中灌注減少或不存在灌注可能與脈絡(luò)膜毛細(xì)血管、脈絡(luò)膜小動(dòng)脈或甚至對(duì)脈絡(luò)膜進(jìn)行供給的更大動(dòng)脈部分或完全封堵或阻塞有關(guān)，所述更大的動(dòng)脈包括但不限于例如睫狀動(dòng)脈、眼動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈以及頸總動(dòng)脈。當(dāng)通向眼睛或離開眼睛的血管在多個(gè)位置處發(fā)生部分或完全阻塞時(shí)，可以檢測出脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注減少或不存在灌注，所述位置包括但不限于受試者的眼眶或視神經(jīng)區(qū)域。我們還想說的是關(guān)于“沿著血管樹向下”或在靜脈側(cè)上。
[0116]在一個(gè)方面，本文所述的對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷，或鑒定產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的易感性的方法可以進(jìn)一步包括使用眼科程序?qū)κ茉囌哌M(jìn)行檢查。
[0117]可以進(jìn)行本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的不同的眼科程序來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，所述程序包括但不限于自發(fā)熒光成像技術(shù)、紅外成像技術(shù)、光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(OCT)、Stratus光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Stratus OCT)、傅里葉域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Fourier-domain optical coherence tomography, Fd-OCT)、雙光子激發(fā)突光(TPEF)成像、自適應(yīng)光學(xué)掃描激光檢眼鏡檢查法(A0SL0)、掃描激光檢眼鏡檢查法、近紅外成像聯(lián)合譜域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(SD-0CT)、彩色眼底攝影術(shù)、眼底自發(fā)熒光成像、無赤光成像、熒光素血管造影術(shù)、吲哚菁綠血管造影術(shù)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ERG)記錄、微視野檢查、彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(⑶0CT)以及視野評(píng)估。另外，可以通過使用HeidelbergSpectralis、Zeiss Cirrus、Topcon3D 0CT2000、Optivue RTVue SD-OCT> Opko OCT SLO、NIDEK F-1O或Optopol SOCT Copernicus HR來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在。
[0118]在一個(gè)方面，可以通過觀測覆蓋并且對(duì)應(yīng)于脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)的改變來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在?？梢允褂美?而不限于)本領(lǐng)域中已知的自發(fā)熒光成像技術(shù)來實(shí)現(xiàn)對(duì)RPE進(jìn)行觀測。當(dāng)存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉時(shí)，覆蓋并且對(duì)應(yīng)于異常小葉的RPE細(xì)胞可能死亡。因此，可以通過觀測覆蓋并且對(duì)應(yīng)于脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞死亡來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在?？梢岳帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的不同程序來檢測死亡的RPE細(xì)胞，所述程序包括但不限于自發(fā)熒光成像技術(shù)、紅外成像技術(shù)、光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(OCT)、Stratus光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Stratus0CT)、傅里葉域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Fd-OCT)、雙光子激發(fā)熒光(TPEF)成像、自適應(yīng)光學(xué)掃描激光檢眼鏡檢查法(A0SL0)、掃描激光檢眼鏡檢查法、近紅外成像聯(lián)合譜域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(SD-0CT)、彩色眼底攝影術(shù)、眼底自發(fā)熒光成像、無赤光成像、熒光素血管造影術(shù)、吲哚菁綠血管造影術(shù)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ERG)記錄、微視野檢查、彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(⑶0CT)以及視野評(píng)估。另外,可以通過使用Heidelberg Spectralis、ZeissCirrus,Topcon3D 0CT2000,Optivue RTVue SD-OCT,Opko OCT SLO,NIDEK F-10或OptopolSOCT Copernicus HR 來觀測 RPE。[0119]在另一個(gè)方面，可以通過觀測重構(gòu)黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的其它病變來檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，所述其它病變包括但不限于布魯赫膜或RPE下腔發(fā)生改變、光感受器間隔或視網(wǎng)膜下腔發(fā)生改變、與異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉產(chǎn)生(如脈絡(luò)膜基質(zhì)發(fā)生改變、上游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變、下游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或缺血)有關(guān)的其它視網(wǎng)膜異常或病變、光感受器死亡或眼周的鵝卵石樣萎縮?？梢岳帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知并且在本文中描述的不同程序來檢測重構(gòu)黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的病變。
[0120]在一個(gè)方面，本文所述的方法可以包括對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷，包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉則指示可以診斷出所述受試者存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀，并且其中血管相關(guān)黃斑病的癥狀是黃斑變性、年齡相關(guān)性黃斑變性、心臟微血管疾病、斯特格氏病、彈性假黃瘤(PXE)、Alagille綜合征、皮層下腦白質(zhì)病、子癇前期、高血壓、糖尿病、心肌缺血、動(dòng)脈瘤、因自身免疫性疾病或感染因子所致的血管炎、深靜脈血栓形成、淋巴水腫、靜脈曲張、外周動(dòng)脈疾病、腎動(dòng)脈疾病、雷諾氏病、伯格氏病、外周靜脈疾病、靜脈血凝塊、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、充血性心力衰竭、動(dòng)脈硬化、血栓性或栓塞性中風(fēng)或心肌梗塞。在另一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病的癥狀可以是重構(gòu)黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的病變，包括但不限于視網(wǎng)膜色素上皮死亡(RPE)、布魯赫膜或RPE下腔發(fā)生改變、光感受器間隔或視網(wǎng)膜下腔發(fā)生改變、與異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉產(chǎn)生(如脈絡(luò)膜基質(zhì)發(fā)生改變、上游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變、下游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或缺血)有關(guān)的其它視網(wǎng)膜異?；虿∽儭⒐飧惺芷魉劳龌蜓壑艿涅Z卵石樣萎縮。
[0121]在另一個(gè)方面，本文所述的方法可以包括鑒定受試者的組織或器官中產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的癥狀的易感性，包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者眼睛的黃斑中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉指示所述受試者的組織或器官中易產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的癥狀，并且其中所述癥狀是年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)、心臟微血管疾病、皮層下腦白質(zhì)病或子癇前期。
[0122]本文所用的“血管相關(guān)黃斑病的癥狀”意思是侵害受試者的循環(huán)系統(tǒng)的任何病狀。例如(而不限于)，血管相關(guān)黃斑病的癥狀可以是黃斑變性、年齡相關(guān)性黃斑變性、心臟微血管疾病、斯特格氏病、彈性假黃瘤(PXE)、Alagille綜合征、皮層下腦白質(zhì)病、子癇前期、高血壓、糖尿病、心肌缺血、動(dòng)脈瘤、因自身免疫性疾病或感染因子所致的血管炎、深靜脈血栓形成、淋巴水腫、靜脈曲張、外周動(dòng)脈疾病、腎動(dòng)脈疾病、雷諾氏病、伯格氏病、外周靜脈疾病、靜脈血凝塊、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、充血性心力衰竭、動(dòng)脈硬化、血栓性或栓塞性中風(fēng)或心肌梗塞?！把芟嚓P(guān)黃斑病的癥狀”還可以是重構(gòu)黃斑脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的小葉狀性質(zhì)的病變，包括但不限于視網(wǎng)膜色素上皮死亡(RPE)、布魯赫膜或RPE下腔發(fā)生改變、光感受器間隔或視網(wǎng)膜下腔發(fā)生改變、與異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉產(chǎn)生(如脈絡(luò)膜基質(zhì)發(fā)生改變、上游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變、下游血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或缺血)有關(guān)的其它視網(wǎng)膜異常或病變、光感受器死亡或眼周的鵝卵石樣萎縮?！把芟嚓P(guān)黃斑病的癥狀”還可以是引起視力發(fā)生改變而偏離正常的任何視力病狀，例如(而不限于)視力模糊、虹視、盲點(diǎn)、飛蚊癥以及其它癥狀。
[0123]血管相關(guān)黃斑病的癥狀通常與心臟相關(guān)聯(lián)；然而，所述病狀還可以侵害多種其它組織或器官，如腦、脊髓、肌肉、骨骼、眼睛、耳朵、腎臟、子宮、胎盤、皮膚、粘膜、胃、肝臟、肺、膽囊、脾臟、闌尾、小腸、大腸、胰腺、前列腺或膀胱。
[0124]在心臟中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的癥狀(如冠狀動(dòng)脈微血管疾病)即使在人類受試者的冠狀動(dòng)脈中不存在顯著疾病的情況下也可能會(huì)導(dǎo)致所述受試者發(fā)生心肌梗塞。此外，患有血管相關(guān)黃斑病的人類受試者可能會(huì)產(chǎn)生例如皮層下腦白質(zhì)病，所述皮層下腦白質(zhì)病可能以癡呆的形式存在。另外，在腦中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能是癲癇發(fā)作、記憶力喪失、步態(tài)不穩(wěn)、神經(jīng)肌肉萎縮、癱瘓、中風(fēng)以及失明。在人類受試者的胎盤中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能表現(xiàn)為子癇前期，伴有高血壓和蛋白尿的體征和癥狀。
[0125]可能受到血管相關(guān)黃斑病的癥狀侵害的組織或器官的實(shí)例包括但不限于心臟、血管、腦、脊髓、肌肉、骨骼、眼睛、耳朵、腎臟、子宮、胎盤、皮膚、粘膜、胃、肝臟、肺、膽囊、脾臟、闌尾、小腸、大腸、胰腺、前列腺或膀胱。
[0126]在一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能是小血管疾病。本文所用的“小血管疾病”或“SVD”是指造成向器官或組織提供血流或從器官或組織提供血流的較小血管變得狹窄的病狀。SVD的實(shí)例包括但不限于伴有皮層下梗死和腦白質(zhì)病的常染色體隱性腦動(dòng)脈病(CARASIL)、伴有腦白質(zhì)營養(yǎng)不良的視網(wǎng)膜血管病變(RVCL)以及IV型膠原蛋白α?(C0L4A1)相關(guān)病癥。伴有皮層下梗死和腦白質(zhì)病的常染色體顯性腦動(dòng)脈病(CADASIL)仍然是由編碼細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體的N0TCH3基因中發(fā)生>190處不同的突變所引起的最常見的遺傳性小血管疾病(SVD)。
[0127]因此，在受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在可以為醫(yī)師鑒定出侵害所述受試者體內(nèi)其它組織或器官的小血管疾病的可能性，所述其它組織或器官包括但不限于心臟、血管、腦、脊髓、肌肉、骨骼、眼睛、耳朵、腎臟、子宮、胎盤、皮膚、粘膜、胃、肝臟、肺、膽囊、脾臟、闌尾、小腸、大腸、胰腺、前列腺或膀胱。
[0128]例如，在心臟中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的癥狀可以包括冠狀動(dòng)脈微血管疾病，所述冠狀動(dòng)脈微血管疾病即使在人類受試者的冠狀動(dòng)脈中不存在顯著疾病的情況下也可能會(huì)導(dǎo)致所述受試者發(fā)生心肌梗塞。冠狀動(dòng)脈微血管疾病是心臟中的小動(dòng)脈變得狹窄并且會(huì)引起心臟病的體征和癥狀(如胸痛(心絞痛))的一種病狀。通常在醫(yī)師對(duì)心臟中引起冠狀動(dòng)脈疾病的大動(dòng)脈堵塞進(jìn)行檢查并且發(fā)現(xiàn)幾乎沒有或沒有變狹窄之后對(duì)小血管疾病作出診斷。因此，在眼睛的黃斑中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉可以提醒醫(yī)師受試者可能患有血管相關(guān)黃斑病的癥狀，如引起受試者的體征和癥狀的心臟小血管疾病。
[0129]此外，患有血管相關(guān)黃斑病的受試者可能會(huì)產(chǎn)生例如皮層下腦白質(zhì)病，所述皮層下腦白質(zhì)病可能以癡呆的形式存在。在腦中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的其它神經(jīng)癥狀的非限制性實(shí)例包括但不限于失語癥、癲癇發(fā)作、記憶力喪失、步態(tài)不穩(wěn)、神經(jīng)肌肉萎縮、癱瘓、喪失平衡、聽力損失、中風(fēng)以及失明。
[0130]在受試者的胎盤中出現(xiàn)的血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能表現(xiàn)為子癇前期，伴有高血壓和蛋白尿的體征和癥狀。
[0131]在一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能以黃斑變性形式存在。例如(而不限于)，黃斑變性可能是年齡相關(guān)性黃斑病癥(AMD)、北卡羅來納黃斑營養(yǎng)不良、索斯比氏眼底營養(yǎng)不良(Sorsby’s fundus dystrophy)、斯特格氏病、圖形樣營養(yǎng)不良、貝斯特氏病(Best’sdisease)、顯性玻璃膜撫、遺傳性黃斑變性疾病(malattia leventinese)、衆(zhòng)液性視網(wǎng)膜脫離、脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜變性、視網(wǎng)膜變性、光感受器變性、視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)變性、粘多糖貯積癥、視桿-視錐細(xì)胞營養(yǎng)不良、視錐-視桿細(xì)胞營養(yǎng)不良或視錐細(xì)胞變性。
[0132]在一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病可能會(huì)引起眼睛黃斑中的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉中的灌注減少。在另一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病可能會(huì)引起眼睛黃斑中的脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉部分或完全封堵。可能會(huì)引起脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉、脈絡(luò)膜小動(dòng)脈、睫狀動(dòng)脈、眼動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈以及頸總動(dòng)脈部分或完全封堵或阻塞的血管相關(guān)黃斑病的癥狀的實(shí)例包括但不限于動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、血管炎、真性紅細(xì)胞增多癥、白血病、高粘稠度綜合征、血栓栓塞性疾病、糖尿病、感染性疾病、膿毒性栓子、霉菌性栓子、過敏性疾病、贅生物、自身免疫性疾病等。
[0133]另外，脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉、脈絡(luò)膜小動(dòng)脈、睫狀動(dòng)脈、眼動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈或頸總動(dòng)脈部分或完全阻塞可能會(huì)引起與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的多種癥狀，包括但不限于動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、血管炎、真性紅細(xì)胞增多癥、白血病、高粘稠度綜合征、血栓栓塞性疾病、糖尿病、感染性疾病、膿毒性栓子、霉菌性栓子、過敏性疾病、贅生物、自身免疫性疾病等。脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉、脈絡(luò)膜小動(dòng)脈、睫狀動(dòng)脈、眼動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈以及頸總動(dòng)脈部分或完全封堵或阻塞的其它成因包括但不限于創(chuàng)傷、物理因素、輻射、毒素以及藥物。
[0134]在一個(gè)方面，血管相關(guān)黃斑病的癥狀可能出現(xiàn)在除眼睛以外的組織或器官中。因此，本文還描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病的癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括在所述受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉則指示可以診斷出所述受試者存在血管相關(guān)黃斑病的癥狀，并且其中血管相關(guān)黃斑病的癥狀并不表現(xiàn)為眼睛的疾病或血管疾病。
[0135]另外，本文描述了鑒定受試者的組織或器官中產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的癥狀的易感性的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，其中在所述受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉指示所述受試者的組織或器官中易產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的癥狀，并且其中血管相關(guān)黃斑病的癥狀并不表現(xiàn)為眼睛的疾病或血管疾病。
[0136]在一個(gè)方面，本文所述的方法可以進(jìn)一步包括確定視網(wǎng)膜動(dòng)脈(A)或靜脈(V)直徑的比率，其中直徑比率(A:V)是約0.60至約1.48則進(jìn)一步指示可以診斷出血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。在另一個(gè)方面，直徑的比率(A:V)是約0.60至約1.48還可以指示受試者有可能具有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在另一個(gè)方面，直徑的比率(A:V)是約0.8可以進(jìn)一步指示可以診斷出血管相關(guān)黃斑病或其癥狀，或可以指示受試者有可能具有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在又另一個(gè)方面，確定動(dòng)脈和靜脈的單獨(dú)的測量結(jié)果不正常可以指示可以診斷出血管相關(guān)黃斑病或其癥狀，或可以指示受試者有可能具有異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在再另一個(gè)方面，可以通過測量例如眼眶血管、頸動(dòng)脈、眼動(dòng)脈或睫狀后動(dòng)脈的血流量來對(duì)血管相關(guān)黃斑病或其癥狀作出診斷，或?qū)Ξ惓Ｃ}絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉作出診斷。可以使用多普勒或本領(lǐng)域中已知的其它技術(shù)來測量血流量。在又另一個(gè)方面，可以通過使用例如3T MRI或本領(lǐng)域中已知的其它技術(shù)評(píng)估眼眶中的血管構(gòu)造來對(duì)血管相關(guān)黃斑病或其癥狀作出診斷或?qū)Ξ惓Ｃ}絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉作出診斷。
[0137]本文還描述了鑒定受試者的嚴(yán)重或晚期黃斑病的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，其中在所述受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉則指示所述受試者 易產(chǎn)生嚴(yán)重或晚期黃斑病。這種方法可以進(jìn)一步包括在受試者的眼睛中檢測地圖狀萎縮的面積。地圖狀萎縮可能由大面積脈絡(luò)膜毛細(xì)血管喪失導(dǎo)致。因此，在一個(gè)方面，可以使用本文所述的方法來預(yù)測受試者的黃斑疾病發(fā)展的速率。這種方法可以更進(jìn)一步包括在受試者的眼睛中檢測脈絡(luò)膜新血管生成(CNV)。CNV可能由視網(wǎng)膜或脈絡(luò)膜中由異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉所驅(qū)動(dòng)的缺血所引起。
[0138]本文還描述了鑒定受試者的血管相關(guān)黃斑病的癥狀的方法，所述方法包括在受試者的眼睛中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉，其中在所述受試者的眼睛中檢測出異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉則指示所述受試者易產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的癥狀。這種方法可以進(jìn)一步包括在受試者的眼睛中檢測地圖狀萎縮的面積。地圖狀萎縮可能由大面積脈絡(luò)膜毛細(xì)血管喪失導(dǎo)致。因此，在一個(gè)方面，可以使用本文所述的方法來預(yù)測受試者的血管相關(guān)黃斑病或黃斑疾病的癥狀發(fā)展的速率。
[0139]本文還描述了用于對(duì)患有血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:生成所述受試者眼睛的圖像，在所述受試者眼睛的圖像中檢測異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在使得可以診斷出血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在一個(gè)方面，在所述受試者的眼睛中不存在異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉則可以使得作出以下診斷:所述受試者未患有血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0140]在一個(gè)方面，所述方法可以進(jìn)一步包括在從受試者獲得的樣品中，確定HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的 rsl 1200638、HTRAl 基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的rsl0490924、ARMS2基因中的rs3750848、CFH基因中的rsl061170或CFH基因中的rs800292，或(ii)與(i)中的SNP存在連鎖不平衡的SNP，從而基于(i)或(ii)中的一個(gè)或多個(gè)SNP的存在對(duì)所述受試者進(jìn)行診斷。
[0141]本文還描述了用于鑒定異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于對(duì)眼睛進(jìn)行成像的裝置，所述裝置 被配置成提供異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的可識(shí)別圖像；以及用于鑒定異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的說明書。本文所述或本領(lǐng)域中已知的用于對(duì)眼睛進(jìn)行成像的任何裝置可以與所述系統(tǒng)一起使用。例如(而不限于)，所述裝置可以是近紅外反射和SD-OCT裝置或多普勒成像裝置。
[0142]2.HTRAl和ARMS2單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象
[0143]本文描述了包含HTRAl和ARMS2基因中的多種變異的一組多態(tài)現(xiàn)象和單倍型。這些多態(tài)現(xiàn)象和單倍型中的一個(gè)或多個(gè)與血管相關(guān)黃斑病或其癥狀相關(guān)聯(lián)。對(duì)這些和其它多態(tài)現(xiàn)象以及多態(tài)現(xiàn)象的集合(例如單倍型)進(jìn)行檢測可用于設(shè)計(jì)和進(jìn)行針對(duì)血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的診斷測定。可以通過分析核酸、通過分析由HTRAl或ARMS2編碼序列編碼的多肽(包括由剪接變體編碼的多肽)、通過分析HTRAl或ARMS2非編碼序列，或通過本領(lǐng)域中已知的其它方式來檢測多態(tài)現(xiàn)象以及多態(tài)現(xiàn)象的集合。對(duì)這類多態(tài)現(xiàn)象和單倍型進(jìn)行分析還可以用于設(shè)計(jì)針對(duì)血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的防治方案和治療方案。
[0144]術(shù)語“多態(tài)現(xiàn)象”是指群體中存在一個(gè)或多個(gè)由遺傳決定的替代性序列或等位基因?！岸鄳B(tài)位點(diǎn)”是存在序列趨異的基因座。多態(tài)位點(diǎn)具有至少一個(gè)等位基因。雙等位基因多態(tài)現(xiàn)象具有兩個(gè)等位基因。二等位基因多態(tài)現(xiàn)象具有二個(gè)等位基因。二倍體有機(jī)體的等位基因形式可能是純合的或雜合的。多態(tài)位點(diǎn)可以小到一個(gè)堿基對(duì)。多態(tài)位點(diǎn)的實(shí)例包括:限制性片段長度多態(tài)現(xiàn)象(RFLP)、數(shù)目可變的串聯(lián)重復(fù)序列(VNTR)、高變區(qū)、小衛(wèi)星(minisatellite)、二核苷酸重復(fù)序列、三核苷酸重復(fù)序列、四核苷酸重復(fù)序列以及簡單重復(fù)序列。如本文所用，對(duì)“多態(tài)現(xiàn)象”的提及可以涵蓋一組多態(tài)現(xiàn)象(即單倍型)。
[0145]“單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)”可以存在于由單個(gè)核苷酸所占據(jù)的多態(tài)位點(diǎn)處，所述多態(tài)位點(diǎn)是等位基因序列之間的變異位點(diǎn)。在所述位點(diǎn)之前以及之后可以是等位基因的高度保守序列。SNP通常因多態(tài)位點(diǎn)上一個(gè)核苷酸取代另一個(gè)核苷酸而引起。一個(gè)嘌呤被另一個(gè)嘌呤所置換或一個(gè)嘧啶被另一個(gè)嘧啶所置換被稱作轉(zhuǎn)換。嘌呤被嘧啶所置換或反之被稱作顛換。同義SNP是指在編碼區(qū)中不會(huì)改變所編碼的多肽的氨基酸序列的核苷酸之間的取代。非同義SNP是指編碼區(qū)中使得所編碼多肽的氨基酸序列發(fā)生改變的核苷酸之間的取代。SNP還可能由相對(duì)于參考等位基因一個(gè)或多個(gè)核苷酸缺失或插入而引起。
[0146]一“組”多態(tài)現(xiàn)象的意思是一個(gè)或多個(gè)多態(tài)現(xiàn)象，例如至少I個(gè)、至少2個(gè)、至少3個(gè)、至少4個(gè)、至少5個(gè)、至少6個(gè)或多于6個(gè)例如在HTRAl或ARMS2基因中已知的多態(tài)現(xiàn)象。
[0147]本文所用的“單倍型”的意思是包含在個(gè)體的單個(gè)染色體的亞區(qū)上所含有的一個(gè)或多個(gè)相關(guān)的多態(tài)現(xiàn)象的DNA序列。單倍型可以指的是單個(gè)基因、基因間序列或包括基因和基因間序列兩者的更大的序列(例如一組基因或一組基因和基因間序列)中的一組多態(tài)現(xiàn)象。例如，單倍型可以指的是染色體10q26基因座中的一組多態(tài)現(xiàn)象，所述染色體10q26基因座包括了 ARMS2、HTRAl的基因序列以及基因間序列(即與基因區(qū)中的多態(tài)現(xiàn)象存在連鎖不平衡的間插基因間序列、上游序列以及下游序列)。術(shù)語“單倍型”可以指的是單個(gè)染色體上被認(rèn)為彼此具有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)性的一組單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)。單倍型還可以指的是單個(gè)染色體上被認(rèn)為彼此具有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)性的多態(tài)現(xiàn)象(例如SNP)和其它遺傳標(biāo)記(例如插入或缺失)的組合?！半p倍型”是一對(duì)單倍型。例如，雙倍型可以包含一個(gè)保護(hù)性單倍型和一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)性單 倍型、兩個(gè)保護(hù)性單倍型、兩個(gè)風(fēng)險(xiǎn)性單倍型、一個(gè)中性單倍型和一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)性單倍型、一個(gè)中性單倍型和一個(gè)保護(hù)性單倍型或兩個(gè)中性單倍型。在一些情況下，一個(gè)單倍型可能是顯性的或一個(gè)單倍型可能是隱性的。
[0148]HTRAl 也被稱為 HtrA 絲氨酸肽酶 1、L56、HtrA, ARMD7、0RF480 或 PRSS11，是編碼HTRAl蛋白的基因，所述蛋白質(zhì)是絲氨酸蛋白酶的胰蛋白酶家族的成員。HTRAl的NCBI基因識(shí)別號(hào)是5654,并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過訪問http://www.ncb1.nlm.nih.gov/gene/并且針對(duì)HTRAl進(jìn)行搜索而容易地獲得關(guān)于HTRAl的另外的信息。例如(而不限于)，通過訪問關(guān)于HTRAl的NCBI基因網(wǎng)頁，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地獲得如下的信息，如HTRAl的基因組位置、HTRAl蛋白特性的概述、關(guān)于HTRAl的細(xì)胞定位的信息、關(guān)于HTRAl的同源物和變體(例如剪接變體)的信息，以及多個(gè)HTRAl參考序列，如HTRAl的基因組序列、HTRAl的mRNA序列以及HTRAl的蛋白質(zhì)序列。本文所闡述的可以容易地從HTRA1NCBI基因條目和NCBI基因編號(hào)獲得的所有信息在此以引用的方式整體并入本文。
[0149]ARMS2也被稱為年齡相關(guān)性黃斑病易感因子2或ARMD8，是編碼ARMS2蛋白的基因。ARMS2的NCBI基因識(shí)別號(hào)是387715，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過訪問http://WWW.ncb1.nlm.nih.gov/gene/并且針對(duì)ARMS2進(jìn)行搜索而容易地獲得關(guān)于ARMS2的另外的信息。通過訪問關(guān)于ARMS2的NCBI基因網(wǎng)頁，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地獲得如下的信息，如ARMS2的基因組位置、ARMS2蛋白特性的概述、關(guān)于ARMS2的細(xì)胞定位的信息、關(guān)于ARMS2的同源物和變體(例如剪接變體)的信息，以及多個(gè)ARMS2參考序列，如ARMS2的基因組序列、ARMS2的mRNA序列以及ARMS2的蛋白質(zhì)序列。本文所闡述的可以容易地從ARMS2NCBI基因條目和NCBI基因編號(hào)獲得的所有信息在此以引用的方式整體并入本文。
[0150]除非另外指出，否則本文所用的“HTRA1”或“ARMS2”包括了來自保留了 HTRAl或ARMS2的至少一種活性的任何有機(jī)體的任何HTRAl或ARMS2基因、核酸(DNA或RNA)或蛋白質(zhì)。另外，本文所用的“HTRA1”或“ARMS2”包括了 HTRAl或ARMS2基因的基因組DNA或RNA中存在的任何非編碼序列或之間存在的基因間序列。當(dāng)提及HTRAl或ARMS2時(shí)，這還包括了來自任何有機(jī)體并且可能充當(dāng)與血管相關(guān)黃斑病或其癥狀相關(guān)聯(lián)的HTRAl或ARMS2核酸或蛋白質(zhì)的任何HTRAl或ARMS2基因、核酸(DNA或RNA)或蛋白質(zhì)。例如，核酸或蛋白質(zhì)序列可以來自于或處于受試者的細(xì)胞中。
[0151]本文所用的“核酸”、“多核苷酸”或“寡核苷酸”是具有任何長度的核苷酸聚合形式，可能是DNA或RNA，并且可能是單鏈或雙鏈的。核酸可能包括啟動(dòng)子或其它調(diào)控序列。寡核苷酸通常是通過合成方式來制備的。核酸包括了跨越或側(cè)接HTRAl或ARMS2基因中已知的多態(tài)位點(diǎn)中的任何一個(gè)的DNA片段或它們的互補(bǔ)序列。所述片段通常在5個(gè)與100個(gè)連續(xù)堿基之間并且經(jīng)常在5個(gè)、10個(gè)、15個(gè)、20個(gè)或25個(gè)核苷酸的下限至10個(gè)、15個(gè)、20個(gè)、25個(gè)、30個(gè)、50個(gè)或100個(gè)核苷酸的上限范圍內(nèi)(其中上限大于下限)。具有5個(gè)與10個(gè)、5個(gè)與20個(gè)、10個(gè)與20個(gè)、12個(gè)與30個(gè)、15個(gè)與30個(gè)、10個(gè)與50個(gè)、20個(gè)與50個(gè)或20個(gè)與100個(gè)之間的堿基的核酸是常見的。多態(tài)位點(diǎn)可以存在于片段的任何位置內(nèi)。對(duì)雙鏈核酸的一條鏈的序列的提及定義了互補(bǔ)序列，并且除非在根據(jù)上下文另外清晰明了的情況下，否則對(duì)核酸的一條鏈的提及還指它的互補(bǔ)序列。 [0152]對(duì)于某些應(yīng)用，可以對(duì)核酸(例如RNA)分子進(jìn)行修飾以增加細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定性并且延長半衰期?？赡艿男揎棸ǖ幌抻谠诜肿拥墓羌軆?nèi)使用硫代磷酸酯或2’-O-甲基而非磷酸二酯鍵。經(jīng)過修飾的核酸包括如下的肽核酸(PNA)和核酸，所述肽核酸和核酸具有不容易被內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶所識(shí)別的非傳統(tǒng)的堿基，如次黃嘌呤核苷、Q核苷(queosine)以及懷丁苷，以及腺嘌呤、胞嘧啶核苷、鳥嘌呤、胸腺嘧啶以及尿嘧啶核苷的乙?；鵢、甲基_、硫代-以及以類似方式修飾的形式。
[0153]本文所用的“雜交探針”是能夠以堿基特異性方式與核酸的互補(bǔ)鏈結(jié)合的核酸。這類探針包括核酸和肽核酸(Nielsen等，1991)?？梢栽诒绢I(lǐng)域中已知的嚴(yán)格條件下進(jìn)行雜交。例如，參見 Berger 和 Kimmel (1987)Methods In Enzymology,第 152 卷:GuideTo Molecular Cloning Techniques, San Diego:Academic Press, Inc.；Sambrook 等(1989)Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第 2 版，第 1-3 卷，Cold SpringHarbor Laboratory ；Sambook(2001)第 3 版；Rychlik，W.和 Rhoads, R.Ε.，1989，Nucl.Acids Res.17,8543 ；Mueller, P.R.等(1993)Current Protocols in MolecularBiologyl5.5,Greene Publishing Associates, Inc.和 John Wiley and Sons,NewYork ;以及 Anderson 和 Young, Quantitative Filter Hybridization in Nucleic AcidHybridization(1985))。本文所用的術(shù)語“探針”包括引物。探針和引物有時(shí)被稱為“寡核苷酸”。
[0154]術(shù)語“引物”是指能夠在適當(dāng)?shù)臈l件下，在適當(dāng)?shù)木彌_液中并且在適合的溫度下充當(dāng)模板引導(dǎo)的DNA合成的起始點(diǎn)的單鏈寡核苷酸。引物的適當(dāng)長度取決于引物的預(yù)期用途，但典型地在15個(gè)至30個(gè)核苷酸的范圍內(nèi)。引物序列不需要與模板完全互補(bǔ)，但是必須具有足夠的互補(bǔ)性以與模板雜交。術(shù)語“引物位點(diǎn)”是指目標(biāo)DNA中與引物雜交的區(qū)域。術(shù)語“引物對(duì)”的意思是一組引物，包括5’端上游引物，所述5’端上游引物與待擴(kuò)增的DNA序列的5’端雜交；和3’端下游引物，所述3’端下游引物與待擴(kuò)增的序列的3’端的互補(bǔ)序列雜父。
[0155]用于短探針和引物的示例性雜交條件是比所計(jì)算的Tm低約5°C至12°C。用于計(jì)算Tm的公式是已知的并且對(duì)于具有〈14個(gè)堿基的寡核苷酸來說并且假定在50mM單價(jià)陽離子存在下進(jìn)行反應(yīng)的情況下，包括:Tm=4°C父(引物中6’和C’的數(shù)目)+2°C X (引物中A’和T’的數(shù)目)。對(duì)于更長的寡核苷酸，可以使用以下公式:Tm=64.9°C +41°C X (引物中G’和C’的數(shù)目-16.4)/N，其中N是引物的長度。另一個(gè)常用的公式考慮到了反應(yīng)物的鹽濃度(Rychlik (同上)；Sambrook (同上);Mueller (同上)):Tm=81.5°C+16.6°C X (loglO[Na+] +[K+])+0.41°C X (%GC)-675/N，其中N是寡核苷酸中核苷酸的數(shù)目。上述公式為某些應(yīng)用提供了起始點(diǎn)；然而，具體的探針和引物的設(shè)計(jì)可能考慮到另外或不同的因素。用于設(shè)計(jì)用于本發(fā)明方法中的探針和引物的方法在本領(lǐng)域中是熟知的。
[0156]本文所用的術(shù)語“風(fēng)險(xiǎn)性”、“保護(hù)性”以及“中性”被用于描述群體中的變異、SNP、單倍型、雙倍型以及由特征在于這類變異模式的基因所編碼的蛋白質(zhì)。風(fēng)險(xiǎn)性SNP是包含至少一個(gè)變體多態(tài)現(xiàn)象的基因(例如HTRAl或ARMS2基因)的與產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)聯(lián)的等位基因形式。術(shù)語“變體”在被用于提及HTRAl或ARMS2基因時(shí)是指序列不同于群體中最普遍的序列的核苷酸序列。變體多態(tài)現(xiàn)象可以在基因的編碼部分或非編碼部分中。風(fēng)險(xiǎn)性HTRA1SNP的實(shí)例是HTRAl基因中的rsll200638SNP的A等位基因。風(fēng)險(xiǎn)性SNP可以是天然存在的或者可以通過重組技術(shù)加以合成。保護(hù)性SNP是包含至少一個(gè)變體多態(tài)現(xiàn)象的基因(在本文是HTRAl或ARMS2基因)的與產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病或其癥狀的風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)聯(lián)的等位基因形式。例如，一個(gè)保護(hù)性HTRAlSNP是HTRAl基因中的rsll200638SNP的G等位基因。保護(hù)性SNP可以是天然存在的或者可以通過重組技術(shù)加以合成。因此，HTRAl或ARMS2的“保護(hù)性”形式在向例如患有血管相關(guān)黃斑病或有產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的受試者施用時(shí)可以提供治療益處，并且因此可以“保護(hù)”所述受試者免患疾病。
[0157]術(shù)語“變體”在本文所述的SNP的情況下還可以指的是序列與群體中最普遍的序列例如有一個(gè)核苷酸不同的核苷酸序列。例如，HTRAl或ARMS2基因的核苷酸序列中發(fā)生一些變異或取代會(huì)改變密碼子，因此編碼出不同的氨基酸，從而產(chǎn)生變體多肽。術(shù)語“變體”還可以指的是序列在不會(huì)改變所編碼多肽的氨基酸序列(即保守改變)的位置上不同于群體中最普遍的序列的多肽。變體多肽可以由風(fēng)險(xiǎn)性單倍型編碼、由保護(hù)性單倍型編碼，或可以由中性單倍型編碼。變體HTRAl或ARMS2多肽可能與風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)、與保護(hù)作用相關(guān)聯(lián)，或可能是中性的。
[0158]“分離的核酸”或“經(jīng)過純化的核酸”的意思是如下的DNA，所述DNA不含在產(chǎn)生本發(fā)明DNA的有機(jī)體的天然存在的基因組中側(cè)接所述基因的基因。所述術(shù)語因此包括例如如下的重組DNA，所述重組DNA被并入到如自主復(fù)制的質(zhì)?；虿《镜妮d體中；或被并入到原核生物或真核生物的基因組DNA中(例如轉(zhuǎn)基因)；或以單獨(dú)的分子形式存在(例如由PCRJg制性核酸內(nèi)切酶消化或者化學(xué)合成或體外合成所產(chǎn)生的cDNA或基因組或cDNA片段)。它還包括作為編碼另外的多肽序列的雜合基因的一部分的重組DNA。術(shù)語“分離的核酸”還指的是由分離的DNA分子編碼，或者以化學(xué)方式合成，或者與至少一些細(xì)胞組分(例如其它類型的RNA分子或多肽分子)分離或大致上不含至少一些細(xì)胞組分的RNA，例如mRNA分子。
[0159]“分離的多肽”或“經(jīng)過純化的多肽”的意思是如下的多肽(或其片段)，所述多肽大致上不含在自然界中通常與所述多肽相締合的物質(zhì)。本發(fā)明的多肽或其片段可以例如通過從天然來源(例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中提取、通過使編碼所述多肽的重組核酸表達(dá)(例如在細(xì)胞或無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中)，或通過對(duì)所述多肽進(jìn)行化學(xué)合成而獲得。另外，可以通過這些方法中的任一種或通過使全長多肽裂解來獲得多肽片段。
[0160]兩個(gè)氨基酸序列在它們至少約80%同一、至少約90%同一、至少約95%同一、至少約98%同一，或至少約99%同一時(shí)被認(rèn)為具有“相當(dāng)大的同一性”。序列同一性百分比典型地通過確定兩個(gè)序列之間的最優(yōu)比對(duì)并且對(duì)這兩個(gè)序列進(jìn)行比較來計(jì)算?？梢酝ㄟ^目測；或使用Smith和Waterman, 1981, Adv.App1.Math.2:482的局部同源性算法；使用 Needleman 和 Wunsch, 1970, J.Mol.Biol.48:443 的同源性比對(duì)算法；使用 Pearson 和Lipman, 1988, Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.85:2444的相似性搜索方法；通過使用用于氨基酸比較的缺省參 數(shù)(例如用于空隙評(píng)分等)計(jì)算機(jī)化實(shí)現(xiàn)這些算法(例如在威斯康星遺傳學(xué)軟件包(Wisconsin Genetics Software Package),遺傳學(xué)計(jì)算機(jī)小組(GeneticsComputer Group) , 575Science Dr.，Madison, Wis.中)來對(duì)序列進(jìn)行最優(yōu)比對(duì)。有時(shí)希望描述兩個(gè)序列之間與特定的長度或區(qū)域有關(guān)的序列同一性(例如兩個(gè)序列可能被描述為在至少500個(gè)堿基對(duì)的長度上具有至少95%同一性)。通常，所述長度將是至少約50個(gè)、100個(gè)、200個(gè)、300個(gè)、400個(gè)、500個(gè)、600個(gè)、700個(gè)、800個(gè)、900個(gè)或1000個(gè)氨基酸，或參考蛋白的全長。兩個(gè)氨基酸序列在它們有I個(gè)、2個(gè)或3個(gè)殘基不同，或有2個(gè)至20個(gè)殘基、2個(gè)至10個(gè)殘基、3個(gè)至20個(gè)殘基或3個(gè)至10個(gè)殘基不同的情況下也可以被認(rèn)為具有相當(dāng)大的同一'I"生。
[0161]應(yīng)了解，HTRAl或ARMS2基因中的多態(tài)位點(diǎn)可能與血管相關(guān)黃斑病或其癥狀相關(guān)聯(lián)，其中血管相關(guān)黃斑病的癥狀可以是黃斑變性、年齡相關(guān)性黃斑變性、心臟微血管疾病、斯特格氏病、彈性假黃瘤(PXE)、Alagille綜合征、皮層下腦白質(zhì)病、子癇前期、高血壓、糖尿病、心肌缺血、動(dòng)脈瘤、因自身免疫性疾病或感染因子所致的血管炎、深靜脈血栓形成、淋巴水腫、靜脈曲張、外周動(dòng)脈疾病、腎動(dòng)脈疾病、雷諾氏病、伯格氏病、外周靜脈疾病、靜脈血凝塊、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、充血性心力衰竭、動(dòng)脈硬化、血栓性或栓塞性中風(fēng)、心肌梗塞、伴有皮層下梗死和腦白質(zhì)病的常染色體隱性腦動(dòng)脈病(CARASIL)、伴有腦白質(zhì)營養(yǎng)不良的視網(wǎng)膜血管病變(RVCL)以及IV型膠原蛋白α?(C0L4A1)相關(guān)病癥或伴有皮層下梗死或腦白質(zhì)病的常染色體顯性腦動(dòng)脈病(CADASIL)。
[0162]HTRAl或ARMS2基因中的示例性多態(tài)位點(diǎn)作為實(shí)例描述于本文中并且不意圖具限制性。還可以使用這些多態(tài)位點(diǎn)或SNP來進(jìn)行本發(fā)明的方法。此外，應(yīng)了解的是，這些HTRAl或ARMS2多態(tài)現(xiàn)象可用于連鎖和關(guān)聯(lián)性研究、對(duì)臨床群體進(jìn)行基因分型、基因型信息與表型信息的相關(guān)性、雜合性丟失分析、鑒定細(xì)胞樣品的來源并且還可以用于使?jié)撛诘闹委焺┌邢蚣?xì)胞。
[0163]應(yīng)了解的是，在本文的表中沒有明確描述的HTRAl或ARMS2基因中另外的多態(tài)位點(diǎn)可以進(jìn)一步改進(jìn)這一分析。使用HTRAl或ARMS2基因中的非同義多態(tài)現(xiàn)象進(jìn)行的SNP分析可以用于鑒定變體HTRAl或ARMS2多肽。與風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)的其它SNP可以編碼序列與由中性或保護(hù)性SNP所編碼的蛋白質(zhì)相同的蛋白質(zhì)，但是在啟動(dòng)子或內(nèi)含子中含有例如使HTRAl或ARMS2表達(dá)的水平或部位發(fā)生改變的等位基因。還應(yīng)了解的是，HTRAl或ARMS2基因中的多態(tài)現(xiàn)象可能與相鄰基因中的變異具有連鎖性。相鄰基因中的變異可能會(huì)使得所編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)或形式發(fā)生改變并且在攜帶者體內(nèi)具有有害作用或保護(hù)作用。
[0164]本文所提供的方法和物質(zhì)可以被用于確定受試者(例如人類)的HTRAl或ARMS2核酸是否含有多態(tài)現(xiàn)象，如單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)。例如，本文所提供的方法和物質(zhì)可以被用于確定受試者是否具有變體SNP。可以使用任何方法來檢測HTRAl或ARMS2核酸中的多態(tài)現(xiàn)象。例如，可以通過對(duì)外顯子、內(nèi)含子或非翻譯序列進(jìn)行測序、變性高效液相色譜法(DHPLC )、等位基因特異性雜交、等位基因特異性限制性消化、突變特異性聚合酶鏈反應(yīng)、單鏈構(gòu)象多態(tài)現(xiàn)象檢測以及這些方法的組合來檢測多態(tài)現(xiàn)象。
[0165]本文描述了用于在人類受試者中預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括:確定所述受試者體內(nèi)HTRAl、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)HTRAl基因中的rsll200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、(FH 基因中的 rsl061170 或 CFH 基因中的 rs800292，或(ii)與(i)中的 SNP 存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP中的一個(gè)或多個(gè)的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。在一個(gè)方面，所述方法可以預(yù)測受試者患有或產(chǎn)生嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。在另一個(gè)方面，所述方法可以預(yù)測受試者具有或產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。
[0166]在一個(gè)方面，確定rsll200638SNP 處的 A、rsl049331SNP 處的 T、rs2672587SNP 處的 G、rsl0490924SNP 處的 T、rs3750848SNP 處的 G、rsl061170SNP 處的 C，或 rs800292SNP處的G的身份可預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。
[0167]在另一個(gè)方面，確定rsll200638SNP 處的 A、rsl049331SNP 處的 T、rs2672587SNP處的 G、rsl0490924SNP 處的 T、rs3750848SNP 處的 G、rsl061170SNP 處的 C，或 rs800292SNP處的G的身份可預(yù)示所述受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)增加。
[0168]在另一個(gè)方面，確定rsll200638SNP 處的 G、rsl049331SNP 處的 C、rs2672587SNP處的 C、rsl0490924SNP 處的 G、rs3750848SNP 處的 T、rsl061170SNP 處的 T，或 rs800292SNP處的A的身份可預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。
[0169]在再另一個(gè)方面，確定rsll200638SNP 處的 G、rsl049331SNP 處的 C、rs2672587SNP處的 C、rsl0490924SNP 處的 G、rs3750848SNP 處的 T、rsl061170SNP 處的 T，或 rs800292SNP處的A的身份可預(yù)示所述受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)降低。
[0170]在一個(gè)方面，本文所述的方法可以進(jìn)一步包括:生成所述受試者眼睛的圖像，使用所述圖像檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在，其中在所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在預(yù)示所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病的風(fēng)險(xiǎn)。本文所用的血管相關(guān)黃斑病可以進(jìn)一步包含與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀，其中血管相關(guān)黃斑病的一種或多種癥狀是黃斑變性、年齡相關(guān)性黃斑變性、心臟微血管疾病、斯特格氏病、彈性假黃瘤(PXE)、Alagille綜合征、皮層下腦白質(zhì)病、子癇前期、高血壓、糖尿病、心肌缺血、動(dòng)脈瘤、因自身免疫性疾病或感染因子所致的血管炎、深靜脈血栓形成、淋巴水腫、靜脈曲張、外周動(dòng)脈疾病、腎動(dòng)脈疾病、雷諾氏病、伯格氏病、外周靜脈疾病、靜脈血凝塊、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化癥、小動(dòng)脈硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、充血性心力衰竭、動(dòng)脈硬化、血栓性或栓塞性中風(fēng)或心肌梗塞。
[0171]在另一個(gè)方面，本文所述的方法可以進(jìn)一步包括確定視網(wǎng)膜動(dòng)脈或靜脈的直徑的比率，其中視網(wǎng)膜動(dòng)脈(A)或靜脈(V)的直徑的比率是約0.60至約1.48則可以預(yù)測所述受試者有患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)。
[0172]本文還描述了用于對(duì)患有血管相關(guān)黃斑病的受試者進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括:在從所述受試者獲得的樣品中，確定HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是⑴HTRAl基因中的rsl 1200638、HTRAl基因中的rsl04933U HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH基因中的rsl061170或CFH基因中的rs800292,或(ii)與⑴中的SNP存在連鎖不平衡的SNP，從而基于(i)或(ii)中的SNP的一種或多種變體的存在對(duì)所述受試者進(jìn)行診斷，其中 rsll200638SNP 處的 A、rsl049331SNP 處的 T、rs2672587SNP 處的 G、rsl0490924SNP 處的 T、rs3750848SNP 處的 G、rsl061170SNP 處的 C 或 rs800292SNP 處的G可診斷出所述受試者患有血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。在一個(gè)方面，確定 rsll200638SNP 處的 G、rsl049331SNP 處的 C、rs2672587SNP 處的 C、rsl0490924SNP 處的 G、rs3750848SNP 處的 T、rsl061170SNP 處的 T，或 rs800292SNP 處的 A的身份可診斷出所述受試者未患有血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉。
[0173]本文描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定所述受試者體內(nèi)表1中所鑒定的一個(gè)或多個(gè)SNP的身份。
[0174]本文還描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定所述受試者體內(nèi)HTRAl或AMRS2基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份。例如，所述SNP可以包括但不限于HTRAl基因中的rsll200638和ARMS2基因中的rsl0490924，其中HTRA1SNP處的A等位基因以及ARMS2SNP處的T等位基因指示存在血管相關(guān)黃斑病。
[0175]本文還描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定所述受試者體內(nèi)HTRAl基因中的rsl 1200638和ARMS2基因中的rsl0490924的身份，其中HTRAl基因中rsl 1200638處的A等位基因以及ARMS2基因中rsl0490924處的T等位基因指示存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。
[0176]另外，本文描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定所述受試者體內(nèi)HTRAl或ARMS2基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份。例如，所述SNP可以包括但不限于 rsl049331、rs3750848 或 rs2672587，其中 rsl04933U rs3750848 或rs2672587中的一個(gè)或多個(gè)的存在指示存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。[0177]在一個(gè)方面，對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷可以包括檢測與本文所述的HTRAl或ARMS2多態(tài)現(xiàn)象存在連鎖不平衡的一個(gè)SNP或多個(gè)SNP。
[0178]此外，本文描述了對(duì)受試者的血管相關(guān)黃斑病或其癥狀進(jìn)行診斷的方法，所述方法包括確定所述受試者體內(nèi)一個(gè)或多個(gè)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉相關(guān)SNP的身份。本文所用的異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉相關(guān)SNP的意思是指示異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在或產(chǎn)生異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的可能性的SNP。例如，所述SNP可以包括但不限于HTRAl基因中rsll200638SNP的A等位基因、ARMS2基因中rsl0490924SNP的T等位基因、CFH基因中rsl061170的C等位基因或C3基因中rs2230199SNP的G等位基因，其中所述異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉相關(guān)SNP中的一個(gè)或多個(gè)的存在指示存在血管相關(guān)黃斑病或其癥狀。
[0179]在一個(gè)方面，“異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉相關(guān)SNP”還可以意指與本文所述的HTRAl、ARMS2、CFH或C3多態(tài)現(xiàn)象存在連鎖不平衡的一個(gè)SNP或多個(gè)SNP。異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉相關(guān)SN P的實(shí)例包括但不限于表1和圖39-42中所列的SNP。
[0180]本文還描述了如下的試劑盒，所述試劑盒包含用于在受試者的核酸樣品中檢測一個(gè)或多個(gè)SNP的測定，其中所述SNP是(i)HTRAl基因中的rsll200638、HTRAl基因中的 rsl049331、HTRAl 基因中的 rs2672587、ARMS2 基因中的 rsl0490924、ARMS2 基因中的rs3750848、CFH 基因中的 rsl061170 或 CFH 基因中的 rs800292 ； (ii) (i)中的 SNP 的組合；或(iii)與(i)中的SNP存在連鎖不平衡的SNP。在一個(gè)方面，所述試劑盒可以進(jìn)一步包含用于使測定結(jié)果與受試者患有或產(chǎn)生血管相關(guān)黃斑病、嚴(yán)重或晚期黃斑病或異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)的說明書。
[0181]
【權(quán)利要求】
1.一種治療受試者的血管相關(guān)黃斑病的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的彈性蛋白酶抑制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑是α-l抗胰蛋白酶、ZD0892、SPIPm2、0N0-5046、1，4-雙苯基_1，4- 二氫吡啶、2-羥基二氫吡啶和2-氨基二氫吡啶、多拉司他汀或多拉司他汀類似物，或鞘絲藻抑制素或鞘絲藻抑制素類似物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑抑制HTRAl的彈性蛋白酶活性。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑是DPMFKLboroV。
5.—種在受試者中治療(i)血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的彈性蛋白酶抑制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑是α-l抗胰蛋白酶、ZD0892、SPIPm2、0N0-5046、l, 4-雙苯基-1，4-二氫吡啶、2-羥基二氫吡啶和2-氨基二氫吡啶、多拉司他汀或多拉司他汀類似物，或鞘絲藻抑制素或鞘絲藻抑制素類似物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑抑制HTRAl的彈性蛋白酶活性。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述彈性蛋白酶抑制劑是DPMFKLboroV。
9.一種在受試者中治療(i)血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的彈性蛋白酶調(diào)節(jié)劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述彈性蛋白酶調(diào)節(jié)劑是α-l抗胰蛋白酶、ZD0892、SPIPm2、0N0-5046、1，4-雙苯基_1，4- 二氫吡啶、2-羥基二氫吡啶和2-氨基二氫吡啶、多拉司他汀或多拉司他汀類似物，或鞘絲藻抑制素或鞘絲藻抑制素類似物。
11.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述彈性蛋白酶調(diào)節(jié)劑抑制HTRAl的彈性蛋白酶活性。
12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述彈性蛋白酶調(diào)節(jié)劑是DPMFKLboroV。
13.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述彈性蛋白酶調(diào)節(jié)劑與HTRAl的蛋白酶識(shí)別袋雜交或結(jié)合
14.根據(jù)權(quán)利要求1到9中任一項(xiàng)所述的方法，其中受試者是通過檢測所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的存在來進(jìn)行選擇，其中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉鑒定出患有⑴血管相關(guān)黃斑病；(ii)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；或(iii)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病的受試者。
15.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中通過以下方式來鑒定所述受試者的眼睛中存在的所述異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉:自發(fā)熒光成像技術(shù)、紅外成像技術(shù)、光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(OCT)、Stratus光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Stratus OCT)、傅里葉域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Fd-OCT)、雙光子激發(fā)熒光(TPEF)成像、自適應(yīng)光學(xué)掃描激光檢眼鏡檢查法(A0SL0)、掃描激光檢眼鏡檢查法、近紅外成像聯(lián)合譜域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(SD-0CT)、彩色眼底攝影術(shù)、眼底自發(fā)熒光成像、無赤光成像、熒光素血管造影術(shù)、吲哚菁綠血管造影術(shù)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ERG)記錄、微視野檢查、彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(CD0CT)、視野評(píng)估、Heidelberg Spectralis、Zeiss Cirrus、Topcon3D 0CT2000、Optivue RTVue SD-OCTΛOpkoOCT SLO、NIDEK F-10 或 Optopol SOCT Copernicus HR。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過以下步驟來選擇受試者:確定所述受試者體內(nèi)HTRA1、ARMS2或CFH基因中一個(gè)或多個(gè)SNP的身份，其中所述一個(gè)或多個(gè)SNP是(i)所述HTRAl基因中的rsl 1200638、所述HTRAl基因中的rsl049331、所述HTRAl基因中的rs2672587、所述ARMS2基因中的rsl0490924、所述ARMS2基因中的rs3750848、所述CFH基因中的rsl061170，或所述CFH基因中的rs800292，或(ii)與⑴中的所述SNP存在連鎖不平衡的SNP，其中所述SNP的一種或多種變體的存在鑒定出患有(i)血管相關(guān)黃斑??；(ii)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的受試者。
17.—種篩選在受試者中可有效(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的藥劑或藥劑組合的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)確定所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的數(shù)目或大小山)向所述受試者施用藥劑或藥劑的組合并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，確定步驟a)中的所述眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉后續(xù)的數(shù)目或大?。灰约癲)將步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目或大小與步驟a)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目或大小相比較；其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目或大小沒有增加則指示藥劑或藥劑的組合在所述受試者中可有效(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
18.一種確定藥劑在受試者中(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(I)血管相關(guān)黃斑病；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(4)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退之前確定所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的數(shù)目；b)開始治療(I)、(2)、(3)或⑷并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，確定步驟a)中的所述眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉后續(xù)的數(shù)目；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目與步驟a)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目有所增加則指示藥劑在所述受試者中不能有效(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
19.一種確定藥劑在受試者中(i)治療血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(I)血管相關(guān)黃斑??；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(4)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉之前確定所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的數(shù)目；b)開始治療(1)、(2)、(3)或(4)并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，確定步驟a)中的所述眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉后續(xù)的數(shù)目；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目與步驟a)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的所述數(shù)目沒有增加則指示藥劑在所述受試者中可有效(i)治療血管相關(guān)黃斑?。?ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
20.一種確定在受試者中進(jìn)行的(i)治療血管相關(guān)黃斑?。?ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑病；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的治療功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(1)血管相關(guān)黃斑病；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(4)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉之前確定所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的存在山)開始治療(1)、(2)、(3)或(4)并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，確定步驟a)中的所述眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的再生長或再生；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生與步驟a)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生沒有發(fā)生變化或有所減少則指示藥劑在所述受試者中可有效(i)治療血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
21.一種確定在受試者中進(jìn)行的(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的治療功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(1)血管相關(guān)黃斑病；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(4)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉之前確定所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的存在山)開始治療(1)、(2)、(3)或(4)并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，確定步驟a)中的所述眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的再生長或再生；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生與步驟a)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中覆蓋并且對(duì)應(yīng)于所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的RPE細(xì)胞的所述再生長或再生有所增加則指示藥劑在所述受試者中不能有效(i)治療血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
22.根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的方法，其中通過以下方式來確定RPE細(xì)胞的所述再生長或再生:自發(fā)熒光成像技術(shù)、紅外成像技術(shù)、光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(OCT)、Stratus光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Stratus OCT)、傅里葉域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Fd-OCT)、雙光子激發(fā)熒光(TPEF)成像、自適應(yīng)光學(xué)掃描激光檢眼鏡檢查法(A0SL0)、掃描激光檢眼鏡檢查法、近紅外成像聯(lián)合譜域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(SD-0CT)、彩色眼底攝影術(shù)、眼底自發(fā)熒光成像、無赤光成像、熒光素血管造影術(shù)、吲哚菁綠血管造影術(shù)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ERG)記錄、微視野檢查、彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(⑶0CT)、視野評(píng)估、Heidelberg Spectralis、ZeissCirrus,Topcon3D 0CT2000,Optivue RTVue SD_0CT、0pko OCT SLO,NIDEK F-10或OptopolSOCT Copernicus HR。
23.一種確定在受試者中進(jìn)行的(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的治療功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(I)血管相關(guān)黃斑??；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(4)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉之前測定所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注山)開始治療(I)、(2)、(3)或⑷并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，測定步驟a)中的所述眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注與步驟a)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注沒有增加則指示藥劑在所述受試者中不能有效(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
24.一種確定在受試者中進(jìn)行的(i)治療血管相關(guān)黃斑??；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀 ；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退的治療功效的方法，所述受試者被診斷據(jù)患有(i)、(ii)、(iii)或(iv)中的疾病或癥狀，所述方法包括:a)在開始治療(I)血管相關(guān)黃斑??；(2)與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(3)嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑?。换?4)異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉之前測定所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注山)開始治療(I)、(2)、(3)或⑷并保持一定的時(shí)間間隔；c)在所述時(shí)間間隔之后，測定步驟a)中的所述眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注；以及d)將步驟c)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注與步驟a)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注相比較，其中檢測出步驟c)中所述受試者的眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注有所增加則指示藥劑在所述受試者中可有效(i)治療血管相關(guān)黃斑病；(ii)治療與血管相關(guān)黃斑病相關(guān)聯(lián)的一種或多種癥狀；(iii)治療嚴(yán)重黃斑病或晚期黃斑??；或(iv)使異常脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉消退。
25.根據(jù)權(quán)利要求23或24所述的方法，其中通過以下方式來測定所述眼睛中所述脈絡(luò)膜毛細(xì)血管小葉的灌注:自發(fā)熒光成像技術(shù)、紅外成像技術(shù)、光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(0CT)、Stratus光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Stratus OCT)、傅里葉域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(Fd-OCT)、雙光子激發(fā)熒光(TPEF)成像、自適應(yīng)光學(xué)掃描激光檢眼鏡檢查法(A0SL0)、掃描激光檢眼鏡檢查法、近紅外成像聯(lián)合譜域光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(SD-OCT)、彩色眼底攝影術(shù)、眼底自發(fā)熒光成像、無赤光成像、熒光素血管造影術(shù)、吲哚菁綠血管造影術(shù)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ERG)記錄、微視野檢查、彩色多普勒光學(xué)相干斷層攝影術(shù)(⑶0CT)、視野評(píng)估、HeidelbergSpectralis、Zeiss Cirrus、Topcon3D 0CT2000、Optivue RTVue SD-OCTΛ Opko OCT SLO、NIDEK F-1O 或 Op topol SOCT Copernicus HR。
【文檔編號(hào)】A61K31/045GK103841991SQ201280023668
【公開日】2014年6月4日 申請(qǐng)日期:2012年3月15日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月15日
【發(fā)明者】G·哈格曼, Y·付 申請(qǐng)人:猶他大學(xué)研究基金會(huì)