用于預(yù)防和治療高脂血癥及其心血管并發(fā)癥的3-羥基氨基苯甲酸（3-haa）療法
【專利摘要】本發(fā)明涉及色氨酸代謝物3-羥基氨基苯甲酸(3-HAA)或其功能類似物在預(yù)防和/或治療哺乳動物、尤其是人的高脂血癥及其心血管并發(fā)癥即粥樣斑形成、心肌梗死和心力衰竭、缺血性中風(fēng)和短暫缺血發(fā)作、腎損傷、主動脈瘤和動脈粥樣硬化導(dǎo)致的臨界性肢體缺血中的用途。
【專利說明】用于預(yù)防和治療高脂血癥及其心血管并發(fā)癥的3-羥基氨基苯甲酸(3-HAA)療法發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及色氨酸代謝物3-羥基氨基苯甲酸(3-HAA)或其功能類似物在治療高脂血癥中的用途。特別地，本發(fā)明包括:3-HAA或其功能類似物照此或與適合的載體一起作為預(yù)防和/或治療高脂血癥和與高脂血癥相關(guān)的心血管并發(fā)癥的降脂療法的用途，所述的與高脂血癥相關(guān)的心血管并發(fā)癥特別是粥樣斑形成、心肌梗死、缺血性中風(fēng)和短暫缺血發(fā)作、腎損傷、主動脈瘤和動脈粥樣硬化導(dǎo)致的臨界性肢體缺血。
[0002]發(fā)明背景[0003]心血管疾病(CVD)主要因動脈中形成動脈粥樣硬化粥樣斑導(dǎo)致，其為西方世界中的主要死亡原因并且在發(fā)展中國家也逐漸遞增^然而，使用降脂藥例如他汀類藥物預(yù)防高脂血癥中的進(jìn)展對一級預(yù)防(即在無CVD臨床證據(jù)的個(gè)體中)和二級預(yù)防(即在具有確立的CVD的患者中)都具有經(jīng)證實(shí)的存活有益性2_4。另外，已經(jīng)證實(shí)升高HDL水平的其他類型的藥物例如貝特類在臨床試驗(yàn)中減緩了冠心病進(jìn)展5’6并且在結(jié)果研究中降低了心血管事件的發(fā)生率7’8。
[0004]動脈粥樣硬化是動脈壁中包含脂蛋白、特別是低密度脂蛋白(LDL)的載脂蛋白BlOO (Ap0BlOO)保留和蓄積引起的慢性炎癥性病癥，從而導(dǎo)致一組不適合的巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞應(yīng)答并且在動脈中形成粥樣斑9’1(1。因此，減少循環(huán)Ap0BlOO脂蛋白除降低脂質(zhì)蓄積在動脈壁中的可能性外，還可能具有另外的有益作用。
[0005]高水平的LDL及其前體顆粒極低密度脂蛋白(VLDL)與心肌梗死、中風(fēng)和其他粥樣斑并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。升高的LDL和VLDL水平在血清或血漿樣品中的高膽固醇和甘油三酯水平中反映出來。這種升高的血脂水平構(gòu)成了高脂血癥情況，它如舉出的與心肌梗死、中風(fēng)和其他動脈粥樣硬化并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。
[0006]高脂血水平在歐洲心臟病學(xué)會(European Society of Cardiology) SCORE標(biāo)準(zhǔn)中有定義，它也鑒定了應(yīng)通過降脂療法達(dá)到的目標(biāo)水平n。受高LDL膽固醇或總膽固醇影響的心血管風(fēng)險(xiǎn)在HDL膽固醇水平高時(shí)降低，正如同一公開文獻(xiàn)中概述的。反之亦然，低HDL水平增加升高的總膽固醇或LDL膽固醇的心血管風(fēng)險(xiǎn)。目前由瑞典醫(yī)療產(chǎn)品管理部門(Swedish Medical Products Agency) (LSkemede〗SVei*ket)定義的高脂血水平為:總膽固醇 >Smmol /T,, LDL-膽固醇 >3mmol/L 和 HDL-膽固醇〈lmmol/L12。
[0007]HDL顆粒通過介導(dǎo)從細(xì)胞中除去膽固醇而發(fā)揮其對動脈的保護(hù)效應(yīng)。在摻入HDL后，膽固醇分子被輸送至肝，轉(zhuǎn)化成膽汁酸并且通過腸消除。
[0008]目前用于高脂血癥的療法以一組稱作他汀類的藥物為主。這些化合物對大部分個(gè)體中的LDL膽固醇具有良好作用，而對HDL具有較小的作用13。此外，一些個(gè)體不耐受他汀類藥物或其他降脂藥。由于這些原因，所以對研發(fā)新降脂藥存在需求。
[0009]修飾的LDL磷脂類例如溶血卵磷脂和1-棕櫚酰基-2- (5'-氧代戊?；?-sn_甘油-3-磷酸膽堿(POVPC)可以刺激內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞14’15。目前已知這種致動脈粥樣化脂質(zhì)通過活化Toll-樣受體啟動先天免疫應(yīng)答16_18。此外，蓄積在已經(jīng)攝如LDL顆粒的巨噬細(xì)胞中的膽固醇可以形成直接活化炎性體的微晶體，從而導(dǎo)致產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1 β 18O這些數(shù)據(jù)共同啟示修飾LDL生成內(nèi)源性配體，其觸發(fā)可以促進(jìn)粥樣斑形成的先天免疫應(yīng)答活化。
[0010]獲得性免疫性在動脈粥樣硬化粥樣斑出現(xiàn)中起關(guān)鍵作用?？乖蔬f細(xì)胞遇到抗原并且將其攝入內(nèi)膜，包括通過清除劑受體攝入的LDL顆粒19。在蛋白水解后，LD蛋白質(zhì)Ap0BlOO片段在胞內(nèi)與MHC II類蛋白質(zhì)結(jié)合，輸送至細(xì)胞表面并且呈遞給T細(xì)胞。后面的事件導(dǎo)致T細(xì)胞活化并且產(chǎn)生觸發(fā)和維持局部炎癥的細(xì)胞因子2°。
[0011]除對局部病理學(xué)過程的作用外，免疫細(xì)胞和介體還在全身水平上調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝。因此，促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子(TNF)抑制脂蛋白脂肪酶，即在甘油三酯代謝中的關(guān)鍵酶，從而導(dǎo)致高甘油三酯血癥21。另一種TNF-樣蛋白LIGHT通過在肝中其作用抑制另一種脂肪酶肝脂肪酶22’23。這導(dǎo)致甘油三酯分解代謝減少并且以包含甘油三酯類和膽固醇的大脂蛋白蓄積在血液中。作為第三種實(shí)例，他汀類降膽固醇藥通過減少T細(xì)胞活化并且抑制幾種自身免疫疾病發(fā)揮顯著的免疫調(diào)節(jié)作用24’25。
[0012]所有這些數(shù)據(jù)顯示了免疫與代謝系統(tǒng)之間的復(fù)雜的交叉干擾并且啟示可以通過使用免疫細(xì)胞-依賴性途經(jīng)治療高脂血癥和預(yù)防粥樣斑形成。
[0013]近期數(shù)據(jù)顯示IDO (吲哚胺2，3-雙加氧酶)和IDO-催化的色氨酸代謝在誘導(dǎo)免疫抑制和耐受方面起關(guān)鍵作用(綜述在26中)。IDO由IDOl基因編碼(由人類染色體8、8pl2-pll中的10個(gè)外顯子編碼)。該酶將L-色氨酸(L-Trp)代謝成N-甲酰犬尿氨酸，即快速地被甲酰胺酶轉(zhuǎn)化成L-犬尿氨酸(KYN)的產(chǎn)物，由此可以進(jìn)入血流或進(jìn)一步被代謝成下游犬尿氨酸(Kyns)。這些Kyns包括3-羥基犬尿氨酸(3-HK)、3_羥基氨基苯甲酸(3-HAA)和喹啉酸(QUIN)270
[0014]已經(jīng)證實(shí)下游色氨酸代謝物例如3-羥基氨基苯甲酸(3-HAA，圖1)可以抑制Thl和Th2細(xì)胞功能并且增加調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Tregs)百分比。此外，已經(jīng)證實(shí)施用3-HAA可減少Thl7細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥并且防止小鼠發(fā)生自身免疫性腦炎28，29。實(shí)際上，數(shù)據(jù)啟示3-HAA可以通過直接對T細(xì)胞起作用或通過樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上改變的抗原呈遞的間接作用控制自身免疫性3°
[0015]發(fā)明概述
[0016]高脂血癥是異常升高的血脂水平，特別是在血漿脂蛋白LDL和VLDL中輸送的膽固醇和甘油三酯類。高脂質(zhì)水平隨后發(fā)生動脈壁中LDL的內(nèi)皮下保留和蓄積；這導(dǎo)致巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞的慢性不適合炎癥性應(yīng)答和粥樣斑形成。在本文的上下文中，使用降脂藥例如他汀類藥物和貝特類預(yù)防高脂血癥已經(jīng)證實(shí)減少了心血管事件發(fā)生的數(shù)量并且增加了處于確立的CVD風(fēng)險(xiǎn)中或具有CVD的患者的存活率2_4’7’8。
[0017]本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，免疫調(diào)節(jié)化合物3-HAA對高脂血癥顯示令人意外的有效作用并且在一系列實(shí)驗(yàn)中顯著地降低了總血漿膽固醇和甘油三酯水平。除此之外，3-HAA還顯著地升高了 HDL水平并且降低了 VLDL/HDL和LDL/HDL之比。因此，血漿脂質(zhì)有益改變伴隨動脈粥樣硬化斑塊出現(xiàn)顯著減少。因此，3-HAA及其功能類似物可以被視為一類新的降脂藥，其用于預(yù)防和治療高脂血癥及其心血管并發(fā)癥，即粥樣斑形成、心肌梗死、缺血性中風(fēng)和短暫缺血發(fā)作、腎損傷、主動脈瘤和動脈粥樣硬化導(dǎo)致的臨界性肢體缺血。
[0018]因此，本發(fā)明涉及3-HAA或其功能類似物在治療高脂血癥或預(yù)防高脂血癥的心血管并發(fā)癥中的用途。
[0019]由于使用了 3-HAA的功能類似物，所以關(guān)注3-HAA產(chǎn)品和取代的3-HAA變體的氧化和還原，它們對脂質(zhì)代謝具有與3-HAA相同或基本上相同的作用。
[0020]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，聞脂血癥選自聞膽固醇血癥、聞甘油二酷血癥和合并的聞脂血癥(形式)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，高脂血癥與血漿中高密度脂蛋白(HDL)的低水平相關(guān)。
[0021]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，高脂血癥的心血管并發(fā)癥是粥樣斑形成。
[0022]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，高脂血癥的心血管并發(fā)癥是粥樣斑形成的臨床表現(xiàn)。
[0023]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，3-HAA或其功能類似物用于預(yù)防心肌梗死和/或心力衰竭。[0024]在一個(gè)實(shí)施方案中，3-HAA或其功能類似物用于預(yù)防心絞痛。
[0025]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，3-HAA用于預(yù)防缺血性中風(fēng)和/或短暫缺血發(fā)作。
[0026]在另一個(gè)實(shí)施方案中，3-HAA或其功能類似物用于預(yù)防外周局部缺血、壞疽、腎損傷、主動脈瘤和/或臨界性肢體缺血。
[0027]根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，高脂血癥的并發(fā)癥是高脂血癥的皮膚病并發(fā)癥。
[0028]根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，高脂血癥的皮膚病并發(fā)癥是黃瘤。
[0029]附圖簡述
[0030]圖1.3-羥基氨基苯甲酸(3-HAA)的分子表征
[0031]分子式:C7H7N03。分子量153.14g/mol。LIUPAC名稱:2_氨基-3-羥基苯甲酸。
[0032]圖2.通過腹膜巨噬細(xì)胞的FITC-oxLDL攝取
[0033]在37°C將來自注射了 3-HAA(200mg/Kg)或PBS (8周治療)的Ldlr-/-小鼠的腹膜巨噬細(xì)胞與20 μ g蛋白質(zhì)/ml濃度的FITC-oxLDL —起溫育2h。通過流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)對攝取量進(jìn)行定量。(A)給出的值為FITC-oxLDL的MFI，對每只小鼠是一式三份孔的平均值土 SE (n=5和6，分別3-HAA或PBS)。(B)示意圖顯示來自3-HAA或PBS治療小鼠的腹膜巨噬細(xì)胞的有代表性的直方圖。* * )P〈0.01。
[0034]圖3.血漿脂質(zhì)分析
[0035]評價(jià)來自3-HAA或PBS治療小鼠(8周治療)的血漿中㈧總膽固醇和⑶甘油三酯類水平。(C)來自3-HAA或PBS治療小鼠的血漿的脂蛋白譜大小分析。將每種級分中的膽固醇濃度(y軸)對保留級分?jǐn)?shù)量(X軸)繪圖；曲線顯示3-HAA和PBS治療小鼠的平均值土 SEM。將值表示為平均值土 SEM(n=5和6，分別為3-HAA或PBS)。* * )P〈0.01。
[0036]圖4.3-HAA減少粥樣斑發(fā)生
[0037]用3-HAA或作為對照的PBS治療12周齡Ldlr-/-小鼠。在使用西方膳食8周后處死小鼠。用蘇丹IV完全染色剖離的主動脈弓并且使用Image J圖像分析軟件(NIH，Bethesda7MD)計(jì)算總血管面積的損害面積％。將指定的主動脈弓中的所有斑塊的累加面積計(jì)算為該主動脈弓總表面積的百分比。(n=7和10，分別為3-HAA或PBS)。* * *)P〈0.001。
[0038]實(shí)驗(yàn)
[0039]方法
[0040]推定可以通過每周3次腹膜內(nèi)注射3-HAA(200mg/kg)持續(xù)8周誘導(dǎo)保護(hù)性免疫，其中對代謝和炎癥有效果。用3-HAA或PBS治療12周齡Ldlr-/-小鼠作為對照組。在首次注射后2天開始給小鼠飼喂高脂肪膳食，直到8周后用CO2處死為止。
[0041]使用酶比色試劑盒、根據(jù)制造商的方案測定血漿膽固醇和甘油三酯類。用蘇丹IV完全染色剖離的主動脈弓并且計(jì)算總血管面積的損害面積％。另外，評價(jià)來自3-HAA或PBS治療小鼠的腹膜巨噬細(xì)胞培養(yǎng)物中3-HAA對攝取的oxLDL的作用。
[0042]材料和方法
[0043]動物和動物處理
[0044]使Ldlr-/-小鼠繁殖，并且寄居在Karolinska大學(xué)醫(yī)院(Karolinska UniversityHospital)的分子醫(yī)學(xué)中心(Center for Molecular Medicine)的動物實(shí)驗(yàn)單位(AnimalExperimentation Unit)中。小鼠(n=7_10只/組)每周接受3次腹膜內(nèi)注射PBS (200 μ I)或3-HAA(200mg/Kg的PBS溶液)，持續(xù)6周，并且在接下來的2周中每周接受I次注射(總計(jì)注射24次)，用CO2處死小鼠。在治療開始后2天開始給小鼠飼喂高脂肪膳食(玉米淀粉、可可脂、酪蛋白、葡萄糖、蔗糖、纖維素粉、礦物質(zhì)和維生素；17.2%蛋白質(zhì)、21%脂肪(62.9%飽和、33.9不飽和以及3.4%多不飽和)、0.15%膽固醇、43%碳水化合物、10% H2O和 3.9%纖維素纖維；R638 Lantmannen, Sweden) O
[0045]低密度脂蛋白(LDL)分離 [0046]如31所述的通過超離心從健康供體的采集血漿中分離LDL(d=l.019-1.063g/mL)。在制備血漿后即刻加入2mM芐脒、0.5mMlU/ml抑肽酶并且在分離后對PBS廣泛透析LDL。向LDL等分部分中加入I毫摩爾EDTA以防止LDL顆粒改變。
[0047]FITC (異硫氰酸熒光素)標(biāo)記的氧化LDL (FITC-oxLDL)的制備
[0048]使用在先所述方法的改進(jìn)方法32標(biāo)記LDL。簡言之，將LDL(1.5_2mg/ml)對500mM NaHC03pH9.5透析過夜。接下來對每LDL中的蛋白質(zhì)加入溶于DMS0(lmg/ml)的50 μ gFITC (Sigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA)并且在室溫溫育2小時(shí)。溫育后，通過凝膠過濾，使用F1DlO柱(GE Healthcare, Uppsala, Sweden)從游離突光染料中分離綴合物，并且使用PBS洗脫。通過在495nm對FITC標(biāo)準(zhǔn)曲線的吸收光譜法評價(jià)FITC綴合。通過Bradford測定法(Biorad，CA，USA)測定蛋白質(zhì)濃度。通過在20 μ M CuSO4的存在下在37°C將 Iml FITC-LDL (lmg/ml)溫育 18h 得到氧化的 FITC-LDL (FITC-oxLDL)。如 33 所述的，通過TBARS測定法評價(jià)氧化程度。
[0049]腹膜巨噬細(xì)胞的OxLDL攝取
[0050]在最終注射3-HAA或PBS后24小時(shí)，通過用PBS腹膜灌洗從Ldlr-/-小鼠中分離腹膜巨噬細(xì)胞。在PBS中2-3小時(shí)后，將巨噬細(xì)胞以IxlO5細(xì)胞的密度在每孔具有20 μ g/ml FITC-oxLDL的包含I % FCS的RPMI1640的培養(yǎng)基的96-孔培養(yǎng)板中鋪板。在37°C溫育2h后，用PBS將細(xì)胞洗滌2次，用4%低聚甲醛的PBS溶液固定。用CyAn? ADP流式細(xì)胞測定儀(Dako, Glostrup, Denmark)分析細(xì)胞。
[0051]血漿脂質(zhì)分析
[0052]使用酶比色試劑盒(Randox Lab.Ltd.Crumin,UK),根據(jù)制造商的說明測定血衆(zhòng)膽固醇和甘油三酯類。
[0053]脂蛋白譜
[0054]使用Okazaki等人的方法的改進(jìn)方法34測定血漿膽固醇脂蛋白譜。簡言之，使用 HR10/30 瓊脂糖 6 柱(GE Healthcare, Uppsala, Sweden)和 Discovery BIO GFC-500 作為前置柱(5cm χ7.81.d.； SupelCO?, Sigma-Aldrich, PA，USA)對來自用 3-HAA 或 PBS
治療的小鼠的血漿樣品(50μ1)進(jìn)行分級分離，所述的前置柱偶聯(lián)Prominence UFLC系統(tǒng)
(Shimadzu, Kyoto, Japan)并且用Tris-緩沖鹽水ρΗ7.4平衡。使用Foxy Jr?級分采集
器(Teledyne Isco Inc,NE,USA)采集200 μ I級分,并且使用酶比色試劑盒(Randox Lab.Ltd.Crumin, UK)測定每種級分中的總膽固醇。
[0055]損害分析
[0056]使用蘇丹IV染色測定來自3-HAA和PBS治療小鼠的主動脈弓中的總脂質(zhì)蓄積。簡言之，用4%中性緩沖福爾馬林固定剖離的主動脈弓。然后縱切樣品，展開，針刺，進(jìn)行蘇丹IV染色(紅色)。使用連接Leica MZ6立體顯微鏡(Leica,ffetzlar, Germany)的LeicaDC480照相機(jī)俘獲影像。將指定主動脈弓中的所有斑塊的累加面積計(jì)算為主動脈的總表面積的百分比(不包括分枝血管)。使用Image J軟件(NIH，Bethesda, USA)對斑塊進(jìn)行定量。
[0057]統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
[0058]除非另有指示，否則將數(shù)值表示為平均值土平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)。非參數(shù)曼-惠特尼u檢驗(yàn)用于在兩組之間比較。將低于0.05的P值視為顯著性差異。
[0059]結(jié)果
[0060]3-羥基氨基苯甲酸抑制oxLDL攝取
[0061]如方法部分中所述通過流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)對熒光FITC-oxLDL攝取進(jìn)行定量。如圖2中所示，來自用3-HAA治療的小鼠的腹膜巨噬細(xì)胞展示出約79%的FITC-oxLDL攝取減少。因此，3-HAA抑制修飾的LDL顆粒攝取，即泡沫細(xì)胞形成中的關(guān)鍵事件。
[0062]3-羥基氨基苯甲酸具有強(qiáng)效的降脂作用
[0063]對免疫調(diào)節(jié)化合物令人意外的是將3-HAA給Ldlr-/-小鼠施用與血漿總膽固醇(約50%)和甘油三酯類(約72%)顯著性地具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的降低相關(guān)(圖3)。另外，3-HAA有效地升高HDL水平并且降低VLDL/HDL(4.0±(λ 55和L 4±0.31，分別是PBS和3-ΗΑΑ治療的小鼠的平均值土SEM ;Ρ〈0.01)和LDL/HDL比(2.3±0.24和1.4±0.16，分別為PBS和3-ΗΑΑ治療的小鼠的平均值土SEM ；Ρ<0.05)。這些數(shù)據(jù)將3-ΗΑΑ鑒定為一類新的降脂藥。3-ΗΑΑ施用對體重?zé)o影響(數(shù)據(jù)未顯示)。
[0064]3-羥基氨基苯甲酸誘導(dǎo)的血漿脂質(zhì)減少導(dǎo)致粥樣斑形成減少
[0065]最后，我們檢驗(yàn)了 3-ΗΑΑ是否具有影響粥樣斑形成。用3-ΗΑΑ將用高脂肪膳食處理時(shí)發(fā)生動脈粥樣硬化損害的Ldlr-/-小鼠治療8周。總血漿膽固醇和甘油三酯水平顯著降低導(dǎo)致總主動脈弓制品中的動脈粥樣硬化損害區(qū)域減少約90% (圖4)。
[0066]參考文獻(xiàn)
[0067]1.Rosamond ff, Flegal K, Friday G, Furie K, Go A, Greenlund K, Haase N,Ho M, Howard V, Kissela B, Kittner S, Lloyd-Jones D, McDermott M, Meigs J, Moy C,Nichol G, 0' Donnell CJ, Roger V, Rumsfeld J, Sorlie P, Steinberger J, Thom T,Wasserthiel-Smoller S, Hong Y.Heart disease and stroke statistics—2007update:A report from the american heart association statistics committee and strokestatistics subcommittee.Circulation.2007 ；115:e69_171[0068]2.Baigent CiKeech AiKearney PM,BlackwelI L，Buck G,Pollicino CiKirby A，Sourjina T，Peto R，Collins R，Simes R.Efficacy and safety of cholesterol-loweringtreatment !Prospective meta-analysis of data from 90，056participantsinl4randomised trials of statins.Lancet.2005 ；366:1267-1278
[0069]3.Cannon CP, Steinberg BA，Murphy SA, Mega JL, Braunwald E.Meta-analysisof cardiovascular outcomes trials comparing intensive versus moderate statintherapy.J Am Coll Cardiol.2006 ；48:438-445
[0070]4.Leeper NJiArdehali R,deGoma EM，Heidenreich PA.Statin use in patientswith extremely low low-density lipoprotein levels is associated with improvedsurvival.Circulation.2007 ；116:613-618
[0071]5.Ruotolo G，Ericsson CG, Tettamanti C，Karpe F，Grip L，Svane B，NilssonJ， de Faire U， Hamsten A.Treatment effects on serum lipoprotein lipids，apolipoproteins and low density lipoprotein particle size and relationshipsof lipoprotein variables to progression of coronary artery disease in thebezafibrate coronary atherosclerosis intervention trial (becait).J Am CollCardiol.1998 ；32:1648-1656
[0072]6.Ericsson CG, Nilsson J，Grip L，Svane B，Hamsten A.Effect ofbezafibrate treatment over five years on coronary plaques causing20% to50%diameter narrowing (the bezafibrate coronary atherosclerosis interventiontrial [becait]).Am J Cardiol.1997 ；80:1125-1129
[0073]7.Boden WE.High-density lipoprotein cholesterol as an independentrisk factor in cardiovascular disease !Assessing the data from framinghamto the veterahs affairs high—density lipoprotein intervention trial.Am JCardiol.2000 ；86:19L-22L
[0074]8.Rubins HB, Robins SJ, Collins D，F(xiàn)ye CL，Anderson JW, Elam MB，F(xiàn)aasFH, Linares E，Schaefer EJ, Schectman G，Wilt TJ, Wittes J.Gemfibrozil for thesecondary prevention of coronary heart disease in men with low levels ofhigh-density lipoprotein cholesterol.Veterans affairs high-density lipoproteincholesterol intervention trial study group.N Engl J Med.1999 ；341:410-418
[0075]9.Tabas I，Williams KJ，Boren J.Subendothelial lipoprotein retention asthe initiating process in atherosclerosis:Update and therapeutic implications.Circulation.2007 ；116:1832-1844
[0076]10.Hansson GK.1nflammation,atherosclerosis, and coronary arterydisease.The New England journal of medicine.2005 ；352:1685-1695
[0077]11.Reiner Z，Catapano AL，De Backer G，Graham I，Taskinen MR，Wiklund0，Agewall S，Alegria E，Chapman MJ, Durrington P，Erdine S，Halcox J，Hobbs R，Kjekshus J，F(xiàn)ilardi PP，Riccardi G，Storey RF，Wood D，Bax J，Vahanian A，AuricchioA，Baumgartner H，Ceconi C，Dean V，Deaton C，F(xiàn)agard R，F(xiàn)ilippatos G,Funck-BrentanoC，Hasdai D，Hoes A，Kearney P，Knuuti J，Kolh P，McDonagh T，Moulin C，PoldermansD， Popescu BA， Sechtem U， Sirnes PA， Tendera M， Torbicki A， Vardas P， WidimskyP， Windecker S， Reviewers D， Berkenboom G， De Graaf J， Descamps 0， Gotcheva N，Griffith K，Guida GF, Gulec S，Henkin Y，Huber K，Kesaniemi YA, Lekakis J，ManolisAJ，Marques-Vidal P，Masana L，McMurray J，Mendes M，Pagava Z，Pedersen T，PrescottE， Rato Q， Rosano G， Sans S， Stalenhoef A， Tokgozoglu L， Viigimaa M， WittekoekME，Zamorano JLEsc/eas guidelines for the management of dyslipidaemias:Thetask force for the management of dyslipidaemias of the european society ofcardiology(esc) and the european atherosclerosis society(eas).Eur Heart J.2011 ；
32:1769-1818
[0078]I 2Lakemedelsverket, Forebyggande a v
ateroskierotisk hjirtkarisjuMom.1nformation Mn lakemedelsverket.2006 ；
3[0079]13.Barter P，Gotto AM，LaRosa JC, Maroni J，Szarek M，Grundy SM，KasteleinJJ, Bittner V，F(xiàn)ruchart JC.Hdl cholesterol，very low levels of Idl cholesterol，and cardiovascular events.N Engl J Med.2007 ；357:1301-1310
[0080]14.Watson AD, Leitinger N，Navab M，F(xiàn)aull KF, Horkko S，Witztum 幾，Palinski W,Schwenke D，Salomon RG，Sha W,Subbanagounder G， Fogelman AM，BerlinerJA.Structural identification by mass spectrometry of oxidized phospholipids inminimally oxidized low density lipoprotein that induce monocyte/endothelialinteractions and evidence for their presence in viv0.J Biol Chem.1997 ；272:13597-13607
[0081]15.Gharavi NM，Alva JA, Mouillesseaux KP, Lai C，Yeh M，Yeung W, JohnsonJ，Szeto WL, Hong L，F(xiàn)ishbein M，Wei L，Pfeffer LM, Berliner JA.Role of the jak/stat pathway in the regulation of interleukin_8transcription by oxidizedphospholipids in vitro and in atherosclerosis in viv0.The Journal of biologicalchemistry.2007 ；282:31460-31468
[0082]16.Seimon TA，Nadolski MJ, Liao X，Magallon J，Nguyen M，F(xiàn)eric NT，Koschinsky ML， Harkewicz R， Witztum JL, Tsimikas S， Golenbock D， Moore KJ, Tabas1.Atherogenic lipids and lipoproteins trigger cd36-tlr2_dependent apoptosis inmacrophages undergoing endoplasmic reticulum stress.Cell metabolism.2010 ； 12:467-482
[0083]17.Stewart CR,Stuart LM,Wilkinson K,van Gils JM,Deng J,Halle A,RayherKJ, Boyer L，Zhong R，F(xiàn)razier WA, Lacy-Hulbert A，El Khoury J，Golenbock DT, MooreKJ.Cd361igands promote sterile inflammation through assembly of a toll-likereceptor4and6heterodimer.Nat Immunol.2010 ；11:155-161
[0084]18.Duewell P，Kono H，Rayner KJ, Sirois CM，Vladimer G，Bauernfeind FG,Abela GS, Franchi L，Nunez G，Schnurr M，Espevik T，Lien E，F(xiàn)itzgerald KA, RockKL, Moore KJ, Wright SD, Hornung V，Latz E.Nlrp3inflammasomes are required foratherogenesis and activated by cholesterol crystals.Nature.2010 ；464:1357-1361
[0085]19.Andersson J，Libby P，Hansson GK.Adaptive immunity andatherosclerosis.Clin Immunol.2010 ；134:33-46
[0086]20.Libby P,Ridker PMiHansson GK.Progress and challenges in translatingthe biology of atherosclerosis.Nature.2011 ；473:317-325
[0087]21.Beutler B, Greenwald D，HuImesJD，Chang M，Pan YC，Mathison J, UlevitchR，Cerami A.1dentity of tumour necrosis factor and the macrophage-secretedfactor cachectin.Nature.1985 ；316:552-554
[0088]22.Lo JC, Wang Y，Tumanov AV, Bamj i M，Yao Z，Reardon CA，Getz GS,Fu YX.Lymphotoxin beta receptor-dependent control of lipid homeostasis.Science.2007；316:285-288
[0089]23.Hansson GK.Medicine.Light hits the liver.Science.2007 ；316:206-20724.Youssef S，Stuve 0，Patarroyo JC, Ruiz PJ, Radosevich JL, Hur EM, BravoM，Mitchell DJ, Sobel RA， Steinman L， Zamvil SS.The hmg—coa reductase inhibitor，atorvastatin, promotes a th2bias and reverses paralysis in central nervoussystem autoimmune disease.Nature.2002 ；420:78-84
[0090]25.McCarey DWiMcInnes IBiMadhok R,Hampson R,Scherbakov 0,Ford IiCapellHA，Sattar N.Trial of atorvastatin in rheumatoid arthritis (tara):Double_blind，randomised placebo-controlled trial.Lancet.2004 ；363:2015-2021
[0091]26.Grohmann U， Bronte V.Control ofimmune response by amino acidmetabolism.1mmunological reviews.2010 ；236:243-264
[0092]27.Stone TW， Darlington LG.Endogenous kynurenines as targets fordrugdiscovery and development.Nat Rev Drug Discov.2002 ；1:609-620
[0093]28.Platten M，Ho PP, Youssef S，F(xiàn)ontoura P，Garren H，Hur EM, Gupta R，LeeLY, Kidd BA，Robinson WH, Sobel RA，Selley ML，Steinman L Treatment of autoimmuneneuroinflammation with a synthetic tryptophan metabolite.Science.2005 ；310:850-855
[0094]29.Yan YP, Zhang GX, Gran B，F(xiàn)allarino F，Yu S，Li HM, Cullimore ML,Rostami A，Xu H.1do upregulates regulatory t cells via tryptophan cataboliteand suppresses encephalitogenic t cell responses in experimental autoimmuneencephalomyelitis.Journal of Immunology.2010 ；185:5953-5961
[0095]30.Munn DH，Mellor AL.1ndoleamine2,3-dioxygenase and tumor-1nducedtolerance.Journal of Clinical Investigation.2007 ；117:1147-1154
[0096]31.Havel RJ, Eder HA, Bragdon JH.The distribution and chemicalcomposition of ultracentrifugalIy separated lipoproteins in human serum.J ClinInvest.1955 ；34:1345-1353
[0097]32.Schmitz G, Wulf G，Bruning T，Assmann G.Flow-cytometric determinationof high-density-lipoprotein binding sites on human leukocytes.Clin Chem.1987 ；
33:2195-2203[0098]33.Puhl H，Waeg G，Esterbauer H.Methods to determine oxidation oflow-density lipoproteins.Methods Enzymol.1994 ；233:425-441
[0099]34.0kazaki M，Ohno Y，Hara 1.Rapid method for the quantitationof cholesterol in human serum lipoproteins by high performance liquidchromatography.J ournal ofbiochemistry.1981 ；89:879-887
【權(quán)利要求】
1.用于治療高脂血癥或預(yù)防高脂血癥的心血管并發(fā)癥的3-HAA或其功能類似物。
2.用于權(quán)利要求1的3-HAA或其功能類似物，其中所述高脂血癥選自高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥和合并的(形式)高脂血癥。
3.用于權(quán)利要求1或2的3-HAA或其功能類似物，其中所述高脂血癥與血漿中高密度脂蛋白(HDL)水平低相關(guān)。
4.用于上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其中所述的高脂血癥的心血管并發(fā)癥是粥樣斑形成。
5.用于權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其中所述的高脂血癥的心血管并發(fā)癥是粥樣斑形成的臨床表現(xiàn)。
6.用于權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其用于預(yù)防心肌梗死和/或心力衰竭。
7.用于權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其用于預(yù)防心絞痛。
8.用于權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其用于預(yù)防缺血性中風(fēng)和/或短暫缺血發(fā)作。
9.用于權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)的3-HAA或其功能類似物，其用于預(yù)防外周局部缺血、壞疽、腎損傷、主動脈瘤和/或動脈粥樣硬化導(dǎo)致的臨界性肢體缺血。
10.用于權(quán)利要求1或2的3-HAA或其功能類似物，其中高脂血癥的并發(fā)癥是高脂血癥的皮膚病并發(fā)癥。
11.用于權(quán)利 要求10的3-HAA或其功能類似物，其中高脂血癥的皮膚病并發(fā)癥是黃瘤。
【文檔編號】A61K31/196GK103841967SQ201280043297
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2012年7月13日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月29日
【發(fā)明者】約蘭·K·漢松, D·凱特胡斯 申請人:約蘭·K·漢松