一種銅藻多酚的提取方法
【專利摘要】一種銅藻多酚的提取方法，其特征在于：A、以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、25～35目過篩得到均勻的銅藻粉末；B、準(zhǔn)確稱取一定量的銅藻粉末，按照料液比1:9～11（w/v）加入濃度為40%～90%的有機溶劑水溶液，充分混勻浸泡；C、浸泡10～15min后，用超聲波細胞粉碎機破碎5～10min進行多酚的提??；D、將提取液離心處理，處理工藝為：3500～4500rpm、4～6min；E、重復(fù)提取4～6次，合并上清液；F、將上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45度蒸發(fā)濃縮，然后真空冷凍干燥，得到銅藻多酚粗提物。本發(fā)明克服了傳統(tǒng)水提取多酚的時間長、溫度高、提取率低等不良效果影響，更為簡單、省時且成本低，提取的銅藻多酚產(chǎn)品含量高、細胞抗氧化能力較強。
【專利說明】一種銅藻多酚的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及海洋生物【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及褐藻中天然產(chǎn)物的提取，具體是一種銅藻多酚的提取方法。

【背景技術(shù)】
[0002]銅藻是一種海洋大型褐藻，屬于馬尾藻屬中的一種，褐藻多酚含量較高。褐藻多酚亦稱間苯三酹鞋質(zhì)(phlorotannin),是一類來自褐藻、以間苯三酹為結(jié)構(gòu)單元的聚合物,具有許多獨特的生物活性和醫(yī)藥價值。褐藻多酚能夠使SOD和多糖降解，特別是馬尾藻類，它們的提取液很快變成棕色至棕褐色，SOD同工酶帶也全部消失，羥基是決定褐藻多酚化學(xué)性質(zhì)和生物學(xué)活性的主要官能基團。褐藻多酚具有較強的生理活性和較強的自由基清除活性，可阻斷自由基的侵襲，降低癌癥、冠心病及其他疾病的發(fā)病風(fēng)險，被認為是一類潛在的海洋生物天然抗氧化劑。毒理試驗研究表明，褐藻多酚是食用安全的天然抗氧化活性物質(zhì)，可以進行進一步的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。銅藻作為海洋褐藻的一種，生物量巨大且抗氧化能力強，具有較大的開發(fā)潛力。
[0003]褐藻多酚一般生產(chǎn)方法是以褐藻為原料，采用水提取法，即先將褐藻粉末與沸蒸餾水混勻，移入沸水浴中浸提40-50min，浸提完畢后立即趁熱減壓過濾，如此提取2_3次，再經(jīng)干燥和粉碎而得到產(chǎn)品，該方法具有時間長、溫度高、提取率低等缺點，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。還有專利號為CN201010277902.1的中國發(fā)明《一種從生物體中提取褐藻多酚的方法》，采用以下步驟對褐藻多酚進行提取:原料預(yù)處理、浸取、冷卻洗滌、樹脂吸附、洗脫和冷凍干燥，這種方法是采用有機溶劑粗提褐藻多酚，但是需要加入抗氧化劑，浸取時間長需要I?6小時，冷卻又需要2?8小時，該方法工序多、時間較長，成本高，而且生產(chǎn)效率也較低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種工藝簡單、成本低、時間短的銅藻多酚的提取方法，且提取的銅藻多酚產(chǎn)品含量較高。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種銅藻多酚的提取方法，其特征在于包括以下步驟:
[0006]A、以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、25?35目過篩得到均勻的銅藻粉末；
[0007]B、準(zhǔn)確稱取一定量的銅藻粉末，按照料液比1:9?ll(w/v)加入體積濃度為40%?90%的有機溶劑水溶液，充分混勻浸泡；
[0008]C、浸泡10?15min后，用超聲波細胞粉碎機破碎5?1min進行多酚的提??；
[0009]D、將提取液離心處理，處理工藝為:3500?4500rpm、4?6min ；
[0010]E、重復(fù)提取4?6次，合并上清液；
[0011]F、將上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上40?50°C蒸發(fā)濃縮，然后真空冷凍干燥，得到銅藻多酚粗提物。
[0012]作為改進，還可以通過福林酚試劑比色法測定多酚含量，計算提取率。
[0013]作為優(yōu)選，所述步驟B)中的有機溶劑為乙醇或丙酮，所述料液比為1:10 (w/v)0
[0014]作為優(yōu)選，所述步驟B)中的有機溶劑為乙醇。
[0015]再優(yōu)選，所述步驟D)中的處理工藝為:4000rpm、5min。
[0016]再優(yōu)選，所述步驟E)中的重復(fù)提取為5次；
[0017]最后，所述步驟F)的蒸發(fā)濃縮溫度為45°C。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于:
[0019]1、選用乙醇為提取液，不僅有利于銅藻多酚的溶出，且乙醇對銅藻多酚有保護作用，使銅藻多酚不易被氧化，因此不必再另外加入抗氧化劑，減少了工序，節(jié)約了成本；
[0020]2.采用GB/T8313-2008《福林酚試劑比色法》測定多酚含量，用沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來換算樣品中的銅藻多酚含量，計算更為準(zhǔn)確；
[0021]3.真空冷凍干燥，既能保持銅藻多酚產(chǎn)品在干燥過程中的質(zhì)量穩(wěn)定性，又能有效的祛除殘存的有機溶劑的味道，干燥除味效果好；
[0022]4.本發(fā)明的提取方法克服了傳統(tǒng)水提取多酚的時間長、溫度高、提取率低等不良效果影響，更為簡單、省時，且提取的銅藻多酚產(chǎn)品含量較高。

【具體實施方式】
[0023]以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。
[0024]實施例1
[0025]①.以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、30目過篩得到均勻的銅藻粉末；
[0026]②.準(zhǔn)確稱取一定量的銅藻粉末，按照料液比1:10(w/v)加入70%的乙醇水溶液，充分混勻浸泡；
[0027]③.浸泡1min后用超聲波細胞粉碎機進行多酚的提取5min ；
[0028]④.將提取液離心處理:4000rpm、5min ;
[0029]⑤.重復(fù)提取5次，合并上清液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45°C旋轉(zhuǎn)蒸干；
[0030]⑥.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45°C蒸發(fā)濃縮，然后真空冷凍干燥，得到銅藻多酚粗提物；
[0031]⑦.福林酚試劑比色法測定多酚含量，計算提取率為3.7%0。
[0032]實施例2
[0033]①.以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、30目過篩得到均勻的銅藻粉末；
[0034]②.準(zhǔn)確稱取一定量的銅藻粉末，按照料液比1:10(w/v)加入80%的乙醇水溶液，充分混勻浸泡；
[0035]③.浸泡1min后用超聲波細胞粉碎機進行多酚的提取5min ；
[0036]④.將提取液離心處理:4000rpm、5min ;
[0037]⑤.重復(fù)提取5次，合并上清液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45°C旋轉(zhuǎn)蒸干；
[0038]⑥.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45°C蒸發(fā)濃縮，然后真空冷凍干燥，得到銅藻多酚粗提物；
[0039]⑦.福林酚試劑比色法測定多酚含量，計算提取率為3.6%。。
[0040]實施例3
[0041]①.以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、30目過篩得到均勻的銅藻粉末；
[0042]②.準(zhǔn)確稱取1.0OOg銅藻粉末，按照料液比1:10 (w/v)加入80%的丙酮水溶液，充分混勻浸泡；
[0043]③.浸泡15min后用超聲波細胞粉碎機進行多酚的提取1min ；
[0044]④.將提取液離心處理:4000rpm、5min，取上清液再用0.22um尼龍針頭濾器過濾；
[0045]⑤.重復(fù)提取5次，合并濾液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上45°C旋轉(zhuǎn)蒸干；
[0046]⑥.1OmL離子水復(fù)溶后，真空冷凍干燥提取多酚產(chǎn)物，即為產(chǎn)品；
[0047]⑦.福林酚試劑比色法測定多酚含量，計算提取率為3.2%0。
[0048]從上面三個實施例可以看出，采用70%乙醇作為提取液，提取率更高。
[0049]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非是對本發(fā)明作其他形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以更改或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種銅藻多酚的提取方法，其特征在于包括以下步驟: A、以銅藻為原料，將銅藻進行粉碎、25?35目過篩得到均勻的銅藻粉末； B、準(zhǔn)確稱取一定量的銅藻粉末，按照料液比1:9?11(w/v)加入體積濃度為40%?90%的有機溶劑水溶液，充分混勻浸泡； C、浸泡10?15min后，用超聲波細胞粉碎機破碎5?lOmin進行多酚的提??； D、將提取液離心處理，處理工藝為:3500?4500rpm、4?6min； E、重復(fù)提取4?6次，合并上清液； F、將上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上40?50°C蒸發(fā)濃縮，然后真空冷凍干燥，得到銅藻多酚粗提物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟B)中的有機溶劑為乙醇或丙酮，所述料液比為1:10 (w/v)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于所述步驟B)中的有機溶劑為乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟D)中的處理工藝為:4000rpm、5mino
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟E)中的重復(fù)提取為5次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟F)中的蒸發(fā)濃縮溫度為45。。。
【文檔編號】A61K36/03GK104274496SQ201310287719
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月10日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月10日
【發(fā)明者】林成彬, 許艷婷, 王斌 申請人:山東潔晶集團股份有限公司