一種用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑及其制備方法。所述組合物包括的各成分及其在凍干原液中的初始濃度為：蔗糖90~300g/L、甘露醇300~600g/L和甘油100～400ml/L。本發(fā)明還提供了使用本凍干保護(hù)劑用于提高rPoIFNα1產(chǎn)品的穩(wěn)定性用途。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明主要涉及一種用作重組豬干擾素α I的凍干保護(hù)劑及其制備方法，尤屬于治療性獸用生物制品生產(chǎn)工藝【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]冷凍干燥是目前保持微生物、動(dòng)物組織、細(xì)胞及蛋白質(zhì)等物質(zhì)生物活性的一個(gè)有效的、方法。制品經(jīng)完全凍結(jié)并在一定的真空條件下使冰晶升華，從而達(dá)到低溫脫水的目的，此過(guò)程即稱(chēng)為冷凍干燥，簡(jiǎn)稱(chēng)凍干，是冷凍和干燥的結(jié)合。
[0003]冷凍干燥技術(shù)具有與其他干燥方法無(wú)可比擬的優(yōu)點(diǎn)，在低溫下干燥，各種成分、酶的活性喪失少，復(fù)水性好，保存期長(zhǎng)，儲(chǔ)存運(yùn)輸方便。但是，在真空冷凍干燥過(guò)程中，冷凍和干燥不可避免地會(huì)影響蛋白質(zhì)的生物學(xué)活性。為防止在凍干過(guò)程中蛋白質(zhì)的損失，人們?cè)趦龈蛇^(guò)程中常添加糖、蛋白質(zhì)、氨基酸等物質(zhì)來(lái)起保護(hù)作用，保護(hù)劑可以改變生物樣品冷凍干燥時(shí)的物理、化學(xué)環(huán)境，減輕或防止冷凍干燥或復(fù)水對(duì)蛋白質(zhì)的損失，盡可能保持原有的各種生理生化特性和生物活性，凍干保護(hù)劑還影響到保藏期間蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。目前干擾素產(chǎn)品的保護(hù)劑產(chǎn)品通常用的是白蛋白，而白蛋白價(jià)格昂貴導(dǎo)致干擾素產(chǎn)品生產(chǎn)成本提高。本發(fā)明通過(guò)多次試驗(yàn)探索到一種能既能保護(hù)重組豬干擾素α I活性免受冷凍干燥過(guò)程多種因素的影響，又能降低成本的保護(hù)劑配方，非常適合重組豬干擾素α I凍干規(guī)?；a(chǎn)需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的就是提供一種用作重組豬干擾素α I凍干保護(hù)劑及其制備方法。
[0005]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0006]一種用作重組豬干擾素α I凍干保護(hù)劑，包括以下組分及其在配伍時(shí)的初始濃度為:蔗糖90~300g/L、甘露醇300~600g/L和甘油100~400ml/L，溶劑為注射用水。
[0007]所述的蔗糖在凍干原液中的初始濃度為90~300g/L。
[0008]所述的甘露醇在凍干原液中的初始濃度為300~600g/L。
[0009]所述的甘油在凍干原液中的初始濃度為100~400mL/L。
[0010]一種用作重組豬干擾素α I的凍干保護(hù)劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟:
[0011](1)將上述重量份的各原料混合配制為凍干原液；
[0012](2)高壓滅菌，充分混勻，即得所述用作重組豬干擾素α I凍干保護(hù)劑。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
[0014]第一:降低了生產(chǎn)成本。本發(fā)明凍干保護(hù)劑使用的蔗糖、甘露醇以及甘油等原材料價(jià)格均非常低廉。
[0015]第二:安全。本發(fā)明采用的蔗糖、甘露醇以及甘油等原材料均可通過(guò)高壓蒸汽滅菌。[0016]第三:保存期長(zhǎng)，易于儲(chǔ)存。
【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1
[0018](I)取 rPoIFNa I 原液若干。
[0019](2)按照蔗糖90~300g/L、甘露醇300~600g/L和甘油100~400ml/L配制為凍干原液。
[0020](3)將配方原液配制好后，高壓滅菌，充分混勻。
[0021](4)將高壓滅菌后的配方原液和rPoIFN a I原液按照3:1的比例混勻，分裝，加好橡膠塞蓋子，放入凍干機(jī)凍干。
[0022](5)凍干結(jié)束后，壓蓋，關(guān)掉凍干機(jī)。
[0023](6) rPoIFN a I凍干品質(zhì)量檢驗(yàn)
[0024]隨機(jī)抽取不同批次rPoIFNa I凍干品分別按照以下方案檢測(cè)，結(jié)果表明采用本凍干保護(hù)劑配方凍干后的rPoIFNa I成品質(zhì)量均合格(如表1所示)。
[0025]無(wú)菌檢驗(yàn):按《中國(guó)生物制品規(guī)程》通則《生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程》A項(xiàng)進(jìn)行；
[0026]安全性實(shí)驗(yàn):用體重18~20g小白鼠5只，每只腹腔注射0.5ml (rPoIFN a I凍干品溶于2ml生理鹽水)，觀察7天，動(dòng)物應(yīng)健存，每只體重增加判為合格；
[0027]外觀檢測(cè):觀察rP·oIFNa I凍干品是否有塌縮、凹陷、缺損等現(xiàn)象，如無(wú)則判為合格；
[0028]復(fù)溶效果監(jiān)測(cè):取rPoIFN a I凍干品加生理鹽水2ml，lmin后觀察是否完全溶解以及有無(wú)無(wú)肉眼可見(jiàn)顆粒，如無(wú)則判為合格；
[0029]含水量檢測(cè)，是利用費(fèi)休氏法測(cè)定，低于3%判為合格。
[0030](7) rPoIFN a I凍干品37°C保存穩(wěn)定性試驗(yàn)
[0031]如表2所示:隨機(jī)抽取各批次干擾素，放置于37°C溫箱中，各時(shí)間點(diǎn)取樣，采用WISH細(xì)胞VSV檢測(cè)系統(tǒng)，以微量細(xì)胞病變抑制法測(cè)定樣品的效價(jià)，計(jì)算效價(jià)降低百分率，低于5%判為合格。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果表明采用本凍干保護(hù)劑配方凍干后的rPoIFNa I成品37°C可穩(wěn)定保存I個(gè)月以上。
[0032](8) rPoIFN a I凍干品4°C保存穩(wěn)定性試驗(yàn)
[0033]如表3所示:隨機(jī)抽取各批次干擾素，放置于4°C冰箱中，各時(shí)間點(diǎn)取樣，采用WISH細(xì)胞VSV檢測(cè)系統(tǒng)，以微量細(xì)胞病變抑制法測(cè)定樣品的效價(jià)，計(jì)算效價(jià)降低百分率，低于5%判為合格。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果表明采用本凍干保護(hù)劑配方凍干后的rPoIFNa I成品4°C可穩(wěn)定保存24個(gè)月以上。
[0034]表1rPoIFNa I凍干品質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種用作重組豬干擾素α I的凍干保護(hù)劑，其特征在于包括以下組分及其在配伍時(shí)的初始濃度為:蔗糖9(T300g/L、甘露醇30(T600g/L和甘油10(T400ml/L，溶劑為注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的蔗糖在凍干原液中的初始濃度為9(T300g/L。
3.據(jù)權(quán)利要求1所述的用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的甘露醇在凍干原液中的初始濃度為30(T600g/L。
4.據(jù)權(quán)利要求1所述的用作重組豬干擾素α1的凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的甘油在凍干原液中的初始濃度為10(T400mL/L。
5.一種如權(quán)利要求1所述的用作重組豬干擾素α 1的凍干保護(hù)劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將上述重量份的各原料混合配制為凍干原液； (2)高壓滅菌，充分混勻，即得所述用作重組豬干擾素αI凍干保護(hù)劑。
【文檔編號(hào)】A61K38/21GK103585633SQ201310526190
【公開(kāi)日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月29日
【發(fā)明者】王明麗, 趙俊, 王彩玲, 關(guān)鑫 申請(qǐng)人:王明麗, 趙俊