用于聯(lián)合治療的藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含特索芬辛和美托洛爾的治療有效組合的藥物組合物用于防止特索芬辛的心血管副作用、同時(shí)維持對(duì)食物攝取的強(qiáng)烈的抑制效力和未受影響的體重減輕的應(yīng)用。
【專利說明】用于聯(lián)合治療的藥物組合物

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及包含特索芬辛(Tesofensine)和美托洛爾(Metoprolol)的治療有效組合的藥物組合物用于防止特索芬辛的心血管副作用、同時(shí)維持對(duì)食物攝取的強(qiáng)烈的抑制效力和不受影響的體重減輕的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]在過去的幾十年中，在幾乎所有民族、種族和社會(huì)經(jīng)濟(jì)群體中，在兩種性別和所有年齡組中肥胖的發(fā)病率已經(jīng)上升。肥胖與關(guān)于2型糖尿病、冠心病、高血壓以及多種其他主要疾病和來自所有起因的全部致命性的顯著升高的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。因此，減重對(duì)于肥胖患者至關(guān)重要。因此，存在對(duì)于創(chuàng)造新的和改進(jìn)的用于管理肥胖的治療的動(dòng)力。
[0003]在TO 97/30997 中首次描述的特索芬辛，SP (lR，2R，3S，5S)-3-(3，4-二氯苯基)-2-(乙氧基甲基)-8-甲基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷](IR, 2R, 3S, 5S) -3- (3，4-dichlorophenyl)-2-(ethoxymethyl)-8-methyl-8_azabicyclo[3.2.1]octane)是研發(fā)中的用于治療肥胖的三單胺攝取抑制劑。
[0004]WO 2005/070427描述了使用某種單胺神經(jīng)遞質(zhì)再攝取抑制劑用于獲得體重的持續(xù)降低。WO 2009/065845描述了使用某種單胺神經(jīng)遞質(zhì)再攝取抑制劑用于治療過食癥。WO2009/080691描述了以與另外的抗肥胖劑聯(lián)合使用某種單胺神經(jīng)遞質(zhì)再攝取抑制劑，用于治療肥胖。
[0005]特索芬辛有效地產(chǎn)生用目前市售的抗肥胖藥物所見的約兩倍的肥胖個(gè)體中的重量減輕。來自用特索芬辛的臨床研究的結(jié)果還示出化合物具有良好的安全性曲線并且具有很好的耐受性。然而，盡管沒有看見臨床相關(guān)心血管不良事件或血壓或脈搏的變化，測量到一些心血管影響，其中心率和血壓中趨向輕微增加。盡管這種小影響對(duì)于患者不具有即時(shí)風(fēng)險(xiǎn)，根據(jù)觀察研究，已經(jīng)提出了一些醫(yī)療和監(jiān)管關(guān)注，即使心血管參數(shù)中的小變化也可以對(duì)患者利益/風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估具有長期暗示。
[0006]臨床前和臨床數(shù)據(jù)提示食欲抑制劑是特索芬辛通過其發(fā)揮它的強(qiáng)的體重減少效應(yīng)的重要機(jī)制。值得注意的是，對(duì)于特索芬辛治療的強(qiáng)烈降低食欲反應(yīng)(hypophagicresponse)(即，較低的食欲，減少的進(jìn)食)證明與去甲腎上腺素能和多巴胺能神經(jīng)傳遞的中樞性刺激相關(guān)。然而，特索芬辛的擬交感的作用方式還可以與臨床環(huán)境中觀察到的升高的心率和血壓有關(guān)。
[0007]WO 2009/080693描述了包含某種單胺神經(jīng)遞質(zhì)再攝取抑制劑與某種β阻滯劑組合的藥物組合物，并且WO 2011/100659描述了通過給予抗高血壓藥用于改善藥物誘導(dǎo)的血壓升高或心跳增加的方法。
[0008]由于這種聯(lián)合治療似乎吸引人，已經(jīng)研究特索芬辛與代表不同作用機(jī)理的抗高血壓劑的藥物組合?；谶@些實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)一些抗高血壓劑實(shí)際上恰好干擾特索芬辛的抗肥胖效應(yīng)，并且因此不適合用于這種聯(lián)合治療。此外，其他抗高血壓劑實(shí)際上不適合逆轉(zhuǎn)由特索芬辛誘導(dǎo)的收縮壓和心率的增加。
[0009]在不同商標(biāo)名稱下標(biāo)記的美托洛爾，即1_(異丙基氨基)-3-[4-(2_甲氧基乙基)-苯氧基]-丙-2-醇，是通常用于治療心血管系統(tǒng)的各種病癥，并且尤其是高血壓中的選擇性的β !(腎上腺素能)受體阻滯劑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]目前已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn):在與特索芬辛的特定的聯(lián)合治療中使用美托洛爾用于治療肥胖，在預(yù)防特索芬辛誘導(dǎo)的心血管影響方面示出了滿意結(jié)果，同時(shí)維持特索芬辛對(duì)食物攝取的強(qiáng)烈的抑制效力和不受影響的體重減輕。
[0011]因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了在包括人的活的動(dòng)物中治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用的方法，所述方法包括將治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽在與美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的聯(lián)合治療中給予至需要其的這些活的動(dòng)物體的步驟。
[0012]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
[0013]在第三個(gè)方面，本發(fā)明提供了特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，用于用作藥物。
[0014]在第四個(gè)方面，本發(fā)明提供了特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合；在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
[0015]在第五個(gè)方面，本發(fā)明涉及特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合在制備在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕的肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用的藥物中的應(yīng)用。
[0016]在第六個(gè)方面，本發(fā)明提供了包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，用于在與包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物一起的聯(lián)合治療中使用，用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
[0017]在第八個(gè)方面，本發(fā)明提供了包含治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和治療有效量的美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽，連同一種或多種佐劑、賦形劑、載體和/或稀釋劑的藥物組合物。
[0018]在第九個(gè)方面，本發(fā)明提供了包含至少兩個(gè)單獨(dú)的單位劑量形式(A)和(B)的試劑盒(kit of parts),其中，(A)包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且(B)包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且可選的(C)用于同時(shí)地、連續(xù)地(順序地)或分開地將
(A)的特索芬辛和(B)的美托洛爾給予至需要其的患者的說明書。
[0019]從以下【具體實(shí)施方式】和實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，本發(fā)明的其他目的將是明顯的。

【具體實(shí)施方式】
[0020]特索芬辛是具有對(duì)去甲腎上腺素、血清素和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白功能的固有抑制活性的中樞性作用的三單胺再攝取抑制劑(MRI)。當(dāng)對(duì)于安慰劑效應(yīng)和飲食效應(yīng)校正時(shí)，長期的特索芬辛治療在肥胖患者中產(chǎn)生約10%的體重減輕，這是由目前市售的抗肥胖藥所達(dá)到的兩倍。
[0021]特索芬辛的抗肥胖效果很可能通過歸因于刺激飽腹感的劑量依賴性食欲降低(hypophagia)來解釋，提示特索芬辛作為食欲抑制劑以產(chǎn)生負(fù)能量平衡。此外，還證明特索芬辛增加人類受試者的夜間能量消耗。近來，這些發(fā)現(xiàn)已經(jīng)被證實(shí)并擴(kuò)展在臨床前設(shè)置中，表明特索芬辛在飲食誘導(dǎo)的肥胖(D1)的大鼠模型中誘導(dǎo)了強(qiáng)烈并持久的體重減輕，在該模型中體重的長效下降是由伴隨能量消耗的逐漸增加的食欲抑制引起的。值得注意的是，特索芬辛在D1大鼠中的降低食欲效應(yīng)關(guān)鍵取決于受刺激的α !腎上腺素受體活性并且較少擴(kuò)展至多巴胺Dl受體功能，表明增強(qiáng)的中樞去甲腎上腺素能和多巴胺能神經(jīng)傳遞構(gòu)成特索芬辛的強(qiáng)烈的抑制食欲效果下的重要機(jī)制。
[0022]總體而言，慢性特索芬辛治療與輕微不良事件相關(guān)，并且與最小心血管影響相關(guān)，提示特索芬辛可以是用于肥胖的耐受良好的長期治療。然而，在這方面，已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了在肥胖個(gè)體中在測試的最高劑量下，心率的劑量依賴性升高和血壓的顯著增加。因此，我們推測特索芬辛的擬交感神經(jīng)藥效應(yīng)是否還可以與所報(bào)導(dǎo)的對(duì)心血管功能的影響相關(guān)。
[0023]為了解決該假設(shè)，在給予單獨(dú)的特索芬辛，或給予特索芬辛與代表不同作用機(jī)制的抗高血壓劑藥物即美托洛爾(即，β i受體拮抗劑)和替米沙坦(即，血管緊張素ATl受體拮抗劑)的藥物組合之后，我們同時(shí)監(jiān)測在遙測的(telemetrized) ( S卩，自發(fā)性高血壓，spontaneously hypertensive)大鼠中對(duì)于食物攝取和體重調(diào)節(jié)連同心血管參數(shù)的影響。
[0024]目前已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn):在與特索芬辛的具體的聯(lián)合治療中，使用美托洛爾用于治療肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥，在預(yù)防特索芬辛誘導(dǎo)的心血管影響方面示出了滿意結(jié)果，同時(shí)維持特索芬辛對(duì)食物攝取的強(qiáng)烈的抑制效力和不受影響的體重減輕。
[0025]因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及使用特索芬辛和美托洛爾用于治療、預(yù)防或減輕患有肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥的受試者的這些病癥的聯(lián)合治療。
[0026]在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合在制備在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用的藥物中的應(yīng)用。
[0027]肥胖和與肥胖相關(guān)的病癥
[0028]肥胖是其中過多的體脂已經(jīng)累積到一定程度以致對(duì)健康可能具有不良影響，導(dǎo)致降低的預(yù)期壽命和/或增加的健康問題的醫(yī)療病況。體重指數(shù)(BMI)是將體重和身高相比較的測量，如果人的BMI在25kg/m2和30kg/m2之間則將其定義為超重(肥胖前期)，而如果BMI值大于30kg/m2時(shí)則將其定義為肥胖。
[0029]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的聯(lián)合治療預(yù)期可用于肥胖前期受試者，即具有25kg/m2和30kg/m2之間的BMI的肥胖前期受試者的治療。
[0030]在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的聯(lián)合治療預(yù)期可用于肥胖受試者，SP具有超過30kg/m2的BMI的肥胖受試者的治療。
[0031]在第三個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的聯(lián)合治療預(yù)期可用于病態(tài)肥胖受試者，即具有超過35kg/m2的BMI的病態(tài)肥胖受試者的治療。
[0032]在本發(fā)明的背景中，與肥胖相關(guān)的病癥是選自由以下組成的組的病癥或病況:過食癥(over-eating disorder)、神經(jīng)性貪食、暴食癥(binge eating disorder)、強(qiáng)迫性過食、受損的食欲調(diào)節(jié)、代謝綜合征、2型糖尿病、血脂異常、動(dòng)脈粥樣硬化以及藥物誘導(dǎo)的肥胖，例如用抗抑郁或抗精神病藥物治療后的肥胖。
[0033]藥學(xué)上可接受的鹽
[0034]可以以適合用于預(yù)期給予的任何形式提供根據(jù)本發(fā)明使用的化合物。適合的形式包括本發(fā)明化合物的藥學(xué)上(即，生理學(xué)上)可接受的鹽以及前藥(predrug)或前體藥物(prodrug)形式。
[0035]藥學(xué)上可接受的加成鹽的實(shí)例包括但不限于，無毒性無機(jī)和有機(jī)酸加成鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、高氯酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、阿康酸鹽、抗壞血酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、肉桂酸鹽、檸檬酸鹽、恩波酸鹽(embonate)、庚酸鹽、富馬酸鹽、谷氨酸鹽、羥乙酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、水楊酸鹽、山梨酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽等。這類鹽可以通過本領(lǐng)域眾所周知和描述的方法形成。
[0036]本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的陽離子鹽的實(shí)例包括但不限于，包含陰離子基團(tuán)的本發(fā)明化合物的鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、鋁、鋰、膽堿、賴氨酸鎗(Iysinium)和銨鹽等。這類陽離子鹽可以通過本領(lǐng)域眾所周知和描述的方法形成。
[0037]在該發(fā)明的背景中，含N化合物的“鎗鹽”也被認(rèn)為是藥學(xué)上可接受的鹽。優(yōu)選的“鐵鹽”包括燒基_鐵鹽、環(huán)燒基_鐵鹽、以及環(huán)燒基燒基鐵鹽。
[0038]根據(jù)本發(fā)明使用的化合物的前藥或前體藥物形式的實(shí)例包括根據(jù)本發(fā)明使用的物質(zhì)的合適的前體藥物的實(shí)例，包括在母體化合物的一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性或可衍生基團(tuán)上被修飾的化合物。特別關(guān)注的是在羧基、羥基或氨基上被修飾的化合物。合適的衍生物的實(shí)例是酯或酰胺。
[0039]可以以可溶性或不可溶性形式連同藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等一起提供用于根據(jù)本發(fā)明使用的化合物?？扇苄孕问竭€可以包括水合形式，如一水合物、二水合物、半水合物、三水合物、四水合物等。一般而言，對(duì)于本發(fā)明的目的，可溶性形式被視為與不可溶性形式等效。
[0040]藥物纟目合物
[0041]在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，用于用作藥物。
[0042]在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物用于在與包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物一起的聯(lián)合治療中，用于治療、預(yù)防或減輕肥胖、或與肥胖相關(guān)的病癥，以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
[0043]在又進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了包含治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和治療有效量的美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽，連同一種或多種佐劑、賦形劑、載體和/或稀釋劑的藥物組合物。
[0044]盡管根據(jù)本發(fā)明使用的化合物可以以原料化合物的形式給予，但優(yōu)選的是將活性成分、可選地以生理學(xué)上可接受的鹽的形式，連同一種或多種佐劑、賦形劑、載體、緩沖劑、稀釋劑、和/或其他常規(guī)藥物助劑一起引入藥物組合物中。
[0045]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了包含活性化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或衍生物、連同一種或多種其藥學(xué)上可接受的載體，以及可選地，本領(lǐng)域中已知并使用的其他治療性和/或預(yù)防性成分的藥物組合物。從與制劑中的其他成分相容并且對(duì)其接受者沒有害處的意義上說，一種或多種載體必須是“可接受的”。
[0046]可以通過適合期望療效的任何方便的途徑給予本發(fā)明的藥物組合物。給予的優(yōu)選途徑包括口服給予，尤其是以片劑、膠囊、糖衣丸、粉末、或液體形式；以及腸胃外給予，尤其是皮膚、皮下、肌肉或靜脈內(nèi)注射。通過使用標(biāo)準(zhǔn)方法和適合于期望制劑的常規(guī)技術(shù)，技術(shù)人員可以制備本發(fā)明的藥物組合物。當(dāng)期望時(shí)，可以采用用適合產(chǎn)生活性成分的緩釋的成分。
[0047]可以在最新版 Remington? s Pharmaceutical Sciences (Maack PublishingC0.，Easton, PA)中找到關(guān)于用于制劑和給予技術(shù)的進(jìn)一步的細(xì)節(jié)。
[0048]將式I的化合物的用量確定為API (活性藥物成分)，即，計(jì)算作為游離堿。每種活性成分的實(shí)際用量取決于所治療的疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、給予的確切方式、給予形式并且在醫(yī)師的判斷之內(nèi)，并且可以根據(jù)本發(fā)明具體情況通過滴定用量而改變以產(chǎn)生期望的治療效果。
[0049]目前認(rèn)為約0.1mg至約Img活性成分,優(yōu)選地,約0.1mg至約0.5mg活性成分的范圍內(nèi)的特索芬辛的日劑量適合用于治療性治療。可以以一種或幾種劑量，如兩次/天給予特索芬辛的日劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，以一次劑量給予日劑量。
[0050]目前認(rèn)為美托洛爾的日劑量在約25mg至約200mg的活性成分，優(yōu)選地，約25mg至約10mg的活性成分的范圍內(nèi)?？梢砸砸环N或幾種劑量，如兩次/天給予美托洛爾的日劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，以一次劑量給予日劑量。
[0051]藥物試劑盒
[0052]根據(jù)本發(fā)明，還提供了包含至少兩個(gè)單獨(dú)的單位劑型(A)和(B)的試劑盒，其中:
[0053](A)包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且
[0054](B)包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且可選的，
[0055](C)用于同時(shí)地、連續(xù)地或分開地將(A)的特索芬辛和(B)的美托洛爾給予至需要其的患者的說明書。
[0056]用于根據(jù)本發(fā)明使用的特索芬辛和用于根據(jù)本發(fā)明使用的美托洛爾可以優(yōu)選以適合與其他一起給予的形式提供。這就意在包括其中一種或另外兩種制劑可以在用其他組分給予之前、之后、和/或與其他組分給予的同時(shí)給予(可選重復(fù)地)的實(shí)例。
[0057]同樣，可以以組合形式、或分別、或分別且順序給予用于根據(jù)本發(fā)明使用的特索芬辛和根據(jù)本發(fā)明使用的美托洛爾，其中，順序給予在時(shí)間上接近或在時(shí)間上遠(yuǎn)離。特別地，這可以包括:在治療相關(guān)狀況過程中將兩種制劑時(shí)間上充分接近地給予(任選重復(fù)地)對(duì)患者存在有益效果，該效果與在相同的治療過程中如果在不存在其他制劑的情況下給予(可選重復(fù)地)兩種制劑中的任一種時(shí)相比更好。確定關(guān)于并且在特定狀況的治療過程中組合是否提供了較好的有益效果，將取決于待治療或預(yù)防的病況，但是可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)地實(shí)現(xiàn)。
[0058]當(dāng)用在該背景中時(shí)，術(shù)語“同時(shí)給予”和“與...在同一時(shí)間給予”包括單獨(dú)劑量的特索芬辛并且在彼此的48小時(shí)內(nèi)，例如24小時(shí)給予。
[0059]使兩種組分彼此相關(guān)包括:可以以單獨(dú)制劑(即，彼此獨(dú)立地)提供組分㈧和
(B)，其隨后被帶到一起，用于在聯(lián)合治療中彼此結(jié)合使用；或以“組合包”的單獨(dú)組分一起包裝和出現(xiàn)，用于在聯(lián)合治療中彼此結(jié)合使用。
[0060]治療方法
[0061 ] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療、預(yù)防或減輕包括人的活的動(dòng)物體的肥胖或與肥胖相關(guān)的疾病的方法，所述方法包括將治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合給予給需要其的這種活的動(dòng)物體的步驟。
[0062]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，與肥胖相關(guān)的病癥是選自由以下組成的組的病癥或病況:過食癥、神經(jīng)性貪食、暴食癥、強(qiáng)迫性過食、受損的食欲調(diào)節(jié)、代謝綜合征、2型糖尿病、血脂異常、動(dòng)脈粥樣硬化、以及藥物誘導(dǎo)的肥胖。
[0063]目前認(rèn)為約0.1mg至約Img活性成分,優(yōu)選地,約0.1mg至約0.5mg活性成分的范圍內(nèi)的特索芬辛的日劑量適合用于治療性治療。可以以一種或幾種劑量，如兩次/天給予特索芬辛的日劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，以一次劑量給予日劑量。
[0064]目前認(rèn)為美托洛爾的日劑量在約25mg至約200mg的活性成分，優(yōu)選地，約25mg至約10mg的活性成分的范圍內(nèi)?？梢砸砸环N或幾種劑量，如兩次/天給予美托洛爾的日劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，以一次劑量給予日劑量。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0065]通過參考附圖進(jìn)一步說明本發(fā)明，其中:
[0066]圖1示出在遙測的大鼠中特索芬辛(1.0-5.0mg/kg給予，p.ο.)劑量依賴性地抑制食物攝取、減少體重和刺激自發(fā)活動(dòng)(運(yùn)動(dòng)行為，locomotor activity)[圖片A:急性給藥(acute dosing)特索芬辛或鹽水載體之后48小時(shí)內(nèi)測量的平均累計(jì)食物攝取(2小時(shí)間隔)。圖片B:在48小時(shí)內(nèi)測量的、分別在12小時(shí)黑暗和光照階段間隔內(nèi)平均的平均食物攝取。圖片C和D:與在第O天給藥之前測量的體重相比，分別以相對(duì)值(％)和絕對(duì)值(g)給出的凈體重增長。圖片E:在48小時(shí)內(nèi)測量的、分別在相應(yīng)的12小時(shí)黑暗和光照階段間隔平均的平均自發(fā)活動(dòng)。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段?？s寫:VEH，載體；TES0，特索芬辛。*ρ〈0.05，**ρ〈0.01，***p〈0.001(與 VHl 相比)]；
[0067]圖2示出在遙測的大鼠中特索芬辛(1.0-5.0mg/kg給予，p.ο.)劑量依賴性升高心率和血壓[圖片A:在12小時(shí)間隔中平均的平均心率土S.E.M0圖片B:在12小時(shí)間隔中平均的平均舒張壓。圖片C:在12小時(shí)間隔中平均的平均收縮壓。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段。縮寫:VEH，載體；TES0，特索芬辛；bpm，每分鐘心跳次數(shù)。*Ρ〈0.05，**ρ〈0.01，_ρ〈0.001 (與爾相比)。
[0068]圖3 示出美托洛爾(10mg/kg、20mg/kg 給予，p.ο.)與特索芬辛(3.0mg/kg, p.ο.)組合的劑量響應(yīng)效應(yīng)，并且示出美托洛爾不影響特索芬辛的降低食欲和體重降低效果，但阻滯在遙測大鼠中的特索芬辛誘導(dǎo)的自發(fā)活動(dòng)[圖片A:在急性給予美托洛爾+特索芬辛組合物或鹽水載體之后，在48小時(shí)內(nèi)測量的平均累計(jì)食物攝取(2小時(shí)間隔)。圖片B:在分別12小時(shí)黑暗和光照階段間隔平均的48小時(shí)內(nèi)測量的平均食物攝取。圖片C和D:與在第O天給藥之前測量的體重相比，以相對(duì)值)和絕對(duì)值(g)給出凈體重增長。圖片E:在48小時(shí)內(nèi)測量的分別在12小時(shí)黑暗和光照階段間隔內(nèi)平均的平均自發(fā)活動(dòng)。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段?？s寫:VEH，載體，TESO，特索芬辛；MET,美托洛爾。**ρ〈0.01，_ρ〈0.0Ol (與 VEH+VH1 相比);#ρ〈0.05 ；##p<0.01 (與 VEH+TESO3.0相比)]；
[0069]圖4示出在遙測的大鼠中，美托洛爾劑量依賴性地阻滯特索芬辛誘導(dǎo)的心率和血壓上升[圖片A:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均心率土S.E.M。圖片B:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均舒張壓。圖片C:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均收縮壓。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段。縮寫:VEH，載體；TES0，特索芬辛；MET，美托洛爾。**ρ〈0.0I，_ρ〈0.001 (與 VEH+VEH 相比)；#ρ〈0.05，##ρ〈0.0I，.ρ〈0.001 (與 VEH+TESO 3.0相比)];
[0070]圖5 示出替米沙坦(1.0mg/kg、3.0mg/kg, p.ο.)與特索芬辛(3.0mg/kg, p.ο.)組合的劑量響應(yīng)效應(yīng)，并且示出替米沙坦不影響特索芬辛的降低食欲和體重降低效果，并且對(duì)遙測大鼠中特索芬辛誘導(dǎo)的自發(fā)活動(dòng)不具有影響[圖片A:在急性給予替米沙坦+特索芬辛組合或鹽水載體之后，在48小時(shí)內(nèi)測量的平均累計(jì)食物攝取(2小時(shí)間隔)。圖片B:在48小時(shí)內(nèi)測量的、分別在12小時(shí)黑暗和光照階段間隔內(nèi)平均的平均食物攝取。圖片C和D:與在第O天給藥之前測量的體重相比，以相對(duì)值)和絕對(duì)值(g)給出的凈體重增長。圖片E:在48小時(shí)內(nèi)測量的、分別在12小時(shí)黑暗和光照階段間隔內(nèi)平均的平均自發(fā)活動(dòng)。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段。縮寫:VEH，載體；TES0，特索芬辛；TEL，替米沙坦。*ρ〈0.05，**ρ〈0.01，_ρ〈0.001(與 VEH+VH1 相比)];以及
[0071]圖6示出在遙測的大鼠中，組合的特索芬辛+替米沙坦藥物治療對(duì)心率和血壓的影響[圖片A:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均心率土 S.E.M。圖片B:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均舒張壓。圖片C:在12小時(shí)間隔內(nèi)平均的平均收縮壓。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段。X軸以下的黑色和白色水平條分別指示12小時(shí)黑暗和光照階段?？s寫:VEH，載體;TES0，特索芬辛;TEL，替米沙坦。*ρ〈0.05，**ρ〈0.01，***ρ〈0.001(與VEH+VEH 相比);#ρ〈0.05 (與 VEH+TESO 3.0 相比)]。
[0072]實(shí)施例
[0073]參考以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，以下實(shí)施例并不意在以任何方式限制所要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍。
[0074]云力物護(hù)理和件處(供養(yǎng),housing)
[0075]將5月齡的雄性血壓正常的Sprague-Dawley大鼠(508± 18g，荷蘭，霍斯特，哈倫(Harlan, Horst, The Netherlands))安置在具有無塵木屑和硬紙管的固體底樹脂玻璃籠中。將存貯室維持在12-h光/黑暗周期(關(guān)燈:1500h)下。室溫為18.(TC至22.(TC，并且相對(duì)空氣濕度為40%至60%?；璋档募t光是黑暗時(shí)期期間的照明的唯一來源。大鼠具有任意(ad libitum)標(biāo)準(zhǔn)食物(Altromin 1324,10 % kcal來自脂肪，能量密度:
2.85kcal/g, Altromin GmbH, Lage, Germany)和水。根據(jù)丹麥司法部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢查員的指導(dǎo)方針(guidelines of the Animal Experimentat1n Inspectorate, Ministry ofJustice, Denmark)批準(zhǔn)(許可號(hào):2007/561-1343)并進(jìn)行所有實(shí)驗(yàn)。
[0076]在遙測大鼠中同時(shí)實(shí)時(shí)喂養(yǎng)和心血管監(jiān)測
[0077]遙測裝置
[0078]在荷蘭，霍斯特，哈倫實(shí)驗(yàn)室(Harlanlaboratories, Horst, the Netherlands),根據(jù)制造商的描述，將 Data Science Internat1nal (DSI, St.Paul, USA) Phys1telPA-C40發(fā)射器植入大鼠。簡而言之，將大鼠用異氟烷麻醉、通氣，并且在無菌條件下進(jìn)行剖腹手術(shù)。用Vetbond(3M，St.Paul，USA)將壓力導(dǎo)管插入并密封在分離的腹主動(dòng)脈中的位置處。最后，將發(fā)射器置于腸的頂部，平行于身體長軸，并且在用可溶縫線閉合腹肌層和皮膚之后固定至腹壁。在裝運(yùn)之前，允許動(dòng)物進(jìn)行充分的手術(shù)后恢復(fù)。使用DataquestA.R.T (V.4.3)和Ponemah軟件(V.5.0) (DSI, St.Paul, USA)，使用工廠提供的針對(duì)個(gè)體發(fā)射器的校準(zhǔn)值和以確保精確的血壓測量的環(huán)境壓力參考監(jiān)測(DSI，St.Paul, USA)，以500Hz的采樣速率采集血壓(心臟收縮和心臟舒張動(dòng)脈血壓)和心率(脈率)數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)連續(xù)采集48h并且以5s的間隔存儲(chǔ)(bin)。
[0079]在遙測的大鼠中實(shí)時(shí)喂養(yǎng)監(jiān)測
[0080]在手術(shù)后恢復(fù)2-3周之后，將大鼠轉(zhuǎn)移到經(jīng)改良以同時(shí)測定個(gè)體化的食物攝取(通過微芯片，參見以下)和心血管狀況(通過遙測)的完全自動(dòng)化的食物攝取監(jiān)測籠(HM-2, MBRose, Faaborg, Denmark)。對(duì)于組合的遙測分析,將兩個(gè)接收器(RPC-1, DataSciences Internat1nal, St.Paul, MN)放置在各個(gè)HM-2食物攝取監(jiān)測籠的底部，從而完全覆蓋籠表面區(qū)域。將改良的HM-2食物攝取監(jiān)測籠放置在改良的具有類似于存貯室中的那些的用于光照-黑暗周期的箱類(cabinet-based)控制的不透光的門和燈的成套裝備(kit) (Scanbur BK, Karslunde, Denmark)的通氣箱中。箱溫為 24.0°C至 26.0°C,并且相對(duì)空氣濕度為40%至60%。在藥物治療過程開始之前，使動(dòng)物習(xí)慣于HM-2食物攝取監(jiān)測系統(tǒng)至少5天。在重新居住至完全自動(dòng)化的食物攝取監(jiān)測籠之前，用微芯片(#402575, eVet, Haderslev, Denmark)皮下注射大鼠以同時(shí)識(shí)別，并且貫穿整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程以實(shí)時(shí)方式跟蹤的各個(gè)單獨(dú)的動(dòng)物的攝食行為。通過放置在籠之上的集成紅外傳感器檢測自發(fā)活動(dòng)。先前進(jìn)一步詳細(xì)報(bào)導(dǎo)了標(biāo)準(zhǔn)HM-2控制單元設(shè)置7。在黑暗開始之前30min，給予所有藥物和鹽水載體。在每個(gè)單獨(dú)實(shí)驗(yàn)中所有大鼠接受相同處理，即，使用平行研究設(shè)計(jì)，并且在處理間使用至少5天的間歇期以確保重建食物攝取、自發(fā)活動(dòng)、心率和血壓的基線。在藥物給予過程中將居住籠從HM-2食物攝取監(jiān)測系統(tǒng)移開，并且在完成藥物給予之后立即返回，隨后繼續(xù)每個(gè)單獨(dú)動(dòng)物的攝食行為和心血管參數(shù)的自動(dòng)監(jiān)測。每天測量體重。使用數(shù)據(jù)報(bào)告軟件(HMView, MBRose, Faaborg, Denmark)進(jìn)行體重和微結(jié)構(gòu)食物攝取分析。
[0081]統(tǒng)計(jì)
[0082]將數(shù)據(jù)送入標(biāo)準(zhǔn)圖形和統(tǒng)計(jì)分析程序(GraphPad Prism V.4.03)。將體重?cái)?shù)據(jù)計(jì)算作為絕對(duì)值(g)或相對(duì)與(對(duì)照水平=100% )藥物給予的第一天(第O天)的每天體重增加。將體重增加和食物攝取表示為η個(gè)單獨(dú)的動(dòng)物的平均土S.E.M。在獲取遙測數(shù)據(jù)之后，使用Microsoft Excel 2007計(jì)算12小時(shí)平均。最后，使用GraphPad Prism V.4.03進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和數(shù)據(jù)呈現(xiàn)(平均土S.Ε.Μ)。使用具有應(yīng)用Tukey事后測試以進(jìn)行治療組之間的統(tǒng)計(jì)比較的重復(fù)測試單向ANOVA評(píng)價(jià)所有數(shù)據(jù)。小于0.05的P值被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的。
[0083]藥物
[0084]特索芬羊(8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]羊燒，3_ [3，4_ 二氯苯基)~2~ (乙氧基甲基)-8-甲基-[IR-(2-內(nèi)，3-外)]-2_ 羥基-1,2，3-丙烷三羧酸酯，8-Azabicyclo [3.2.1]octane, 3_[3，4-di chi orophenyl) ~2~ (ethoxymethyl) -8-methyl - [IR- (2~endo, 3_exo)]-2-hydroxy-l, 2，3-propanetricarboxylate)是氮雜二環(huán)辛燒朽1檬酸酯的衍生物，在NeuroSearch A/S的藥物化學(xué)部合成。
[0085]美托洛爾和替米沙坦購自Sigma (St.Louis, MO)。將特索芬辛和美托洛爾溶解在
0.9%的鹽水溶液中，而將替米沙坦溶解在IN NaOH中并且隨后用IN HCl滴定至pH 7.4。
[0086]將所有藥物p.0.給予(1.0ml/kg)。在藥物組合實(shí)驗(yàn)中，將特索芬辛和抗高血壓藥物以單獨(dú)的藥物溶液同時(shí)給予(相隔〈lmin)。
[0087]益果
[0088]對(duì)于食物攝取和體重的影響
[0089]急性特索芬辛給予強(qiáng)烈地引發(fā)遙測大鼠中的食物攝取的減少(圖1A和圖1B)。特索芬辛治療的大鼠的食物攝取以劑量依賴和時(shí)間依賴的方式下降，其中給藥后12小時(shí)最高口服劑量(5.0mg/kg)，食物攝取降低至對(duì)照水平的約50% (p〈0.001)。在給予之后，特索芬辛的降低食欲效應(yīng)分別持續(xù)高達(dá)12小時(shí)(所有劑量)、24小時(shí)(3.0-5.0mg/kg)以及48小時(shí)(5.0mg/kg)，此后，食物攝取恢復(fù)至基線水平(圖1B)。特索芬辛的降低食欲效應(yīng)平行于體重的相應(yīng)劑量依賴性降低(負(fù)體重增加)，其中，在藥物給予之后的至少48小時(shí)，明顯的是最高劑量(3.0-5.0mg/kg)產(chǎn)生1.0-1.5% (相當(dāng)于8_llg，與載體治療的大鼠的體重相比)的顯著的凈體重?fù)p失(圖1C和圖1D)。特索芬辛還以3.0-5.0mg/kg的劑量范圍，劑量依賴性地誘導(dǎo)顯著的、盡管持續(xù)短的自發(fā)活動(dòng)的增加(圖1E)。
[0090]選擇特索芬辛的中間劑量(3.0mg/kg)用于在分別與抗高血壓劑美托洛爾(圖3)和替米沙坦(圖5)的急性藥物組合研究中進(jìn)一步表征。這些藥物相互作用研究表明抗高血壓藥本身既不表現(xiàn)出對(duì)食物攝取或體重調(diào)節(jié)的效果，并且也不影響特索芬辛誘導(dǎo)的食物攝取(圖3A、圖3B、圖5A、圖5B)和體重(圖3C、圖3D、圖5C、圖5D)的減少。相反，美托洛爾(圖3E，與單獨(dú)的特索芬辛相比，p〈0.05)而不是替米沙坦(圖5E，與單獨(dú)的特索芬辛相t匕，P = 0.98)完全阻止特索芬辛的自發(fā)活動(dòng)誘導(dǎo)效應(yīng)。
[0091]對(duì)于心血管參數(shù)的影響
[0092]如所期望的，血壓和心率的遙測監(jiān)測示出清晰的晝夜變化(圖2)，其中在活動(dòng)(夜間)期間觀察到較高的血壓和心率。
[0093]在所有測試的劑量下，用特索芬辛的急性治療引起心率的劑量依賴性增加，持續(xù)最高至治療之后48小時(shí)(圖2A)。類似地,在藥物給予(3.0mg/kg和5.0mg/kg)之后最高達(dá)48小時(shí)，觀察到收縮壓的劑量依賴性適度增加(圖2C)。3.0mg/kg特索芬辛對(duì)于心率和收縮壓的影響從而比3.0mg/kg的特索芬辛的降低食欲效應(yīng)更耐久。盡管最高劑量沒有獲得統(tǒng)計(jì)顯著性，也觀察到了舒張壓中劑量依賴性上升的趨向(P = 0.204，圖2B)。
[0094]進(jìn)行兩種組合藥物研究以調(diào)查抗高血壓治療是否可以阻止或降低由特索芬辛引起的繼發(fā)性高血壓以及升高的心率。用特索芬辛(3.0mg/kg)和P1腎上腺素受體拮抗劑美托洛爾(10mg/kg和20mg/kg)的共治療完全逆轉(zhuǎn)特索芬辛誘導(dǎo)的心動(dòng)過速(圖4A)。然而，僅在給予之后的第一個(gè)24小時(shí)的過程中觀察到美托洛爾的心率降低效應(yīng)，而在美托洛爾+特索芬辛的組合組中，心率被標(biāo)準(zhǔn)化至對(duì)照水平(圖4A)。美托洛爾的短持續(xù)效應(yīng)反映大鼠的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。在用美托洛爾(20mg/kg)共治療高達(dá)24小時(shí)之后，還觀察到標(biāo)準(zhǔn)化的收縮壓(圖4C)。類似地，第一光照階段(治療后12-24小時(shí))過程中特索芬辛誘發(fā)的舒張壓的增加通過用美托洛爾的共治療逆轉(zhuǎn)(20mg/kg，圖4B)。當(dāng)單獨(dú)給予時(shí)，在第一個(gè)24小時(shí)中美托洛爾(20mg/kg)對(duì)舒張壓不會(huì)產(chǎn)生任何顯著影響(圖4)。
[0095]在隨后的藥物組合研究中，研究了特索芬辛和ATl-受體拮抗劑替米沙坦。對(duì)于美托洛爾研究，發(fā)現(xiàn)特索芬辛的類似(3.0mg/kg)劑量顯著增加心率。在特索芬辛給予之后，用替米沙坦(1.0和3.0)的共治療不會(huì)逆轉(zhuǎn)心率的上升，并且與特索芬辛單獨(dú)給予相比，在與特索芬辛組合的替米沙坦的最高劑量下，我們觀察到心率的顯著增加(圖6A)。盡管發(fā)現(xiàn)用替米沙坦的共治療減小了由特索芬辛產(chǎn)生的舒張壓和收縮壓的增加，但其不會(huì)使得顯著防止特索芬辛誘導(dǎo)的高血壓(與單獨(dú)的特索芬辛相比，P>0.05，圖6B、圖6C)。單獨(dú)的替米沙坦(3.0mg/kg)對(duì)心率和血壓不具有影響(圖6)。
[0096]討論
[0097]體重減輕通常伴隨著感知饑餓和食欲感覺的增加，其已經(jīng)被確定為體重回復(fù)的重要預(yù)測因子，并且因此，認(rèn)為抑制食欲功能對(duì)于維持體重減輕非常重要。
[0098]最近的臨床和臨床前報(bào)告已經(jīng)表明:特索芬辛通過引發(fā)飽腹感和充滿感，起強(qiáng)烈食欲抑制劑的作用，這被認(rèn)為是特索芬辛的強(qiáng)烈的抗肥胖效應(yīng)下的關(guān)鍵機(jī)制。因此，遙測大鼠中的關(guān)于特索芬辛誘導(dǎo)的食欲減退的本數(shù)據(jù)進(jìn)一步支持該觀點(diǎn)。取決于所給予的劑量，特索芬辛劑量依賴性地引發(fā)持續(xù)最高達(dá)12-48小時(shí)的快速降低食欲反應(yīng)。特索芬辛的長效食欲衰退效果提示:特索芬辛的生物活性初級(jí)Ml代謝物(也是三重MRI)有助于大鼠的降低食欲和體重下降效應(yīng)，由于Ml代謝物表現(xiàn)出在嚙齒類中顯著較高的穩(wěn)態(tài)濃度和較長的Tl/2。
[0099]相反，與特索芬辛的那些相比，Ml的人類穩(wěn)態(tài)血漿濃度約低60%，暗示Ml對(duì)于所有活性的貢獻(xiàn)可能在人類中較低。此外，建議的是增加的能量代謝可以潛在地有助于由特索芬辛誘導(dǎo)的強(qiáng)烈的體重減輕。因此，近來的呼吸測熱量測定(calorimetry)研究表明在超重或適度肥胖的人中，經(jīng)短期特索芬辛治療之后，脂肪氧化和夜間產(chǎn)熱的適度上升。同樣，盡管在慢性特索芬辛治療方案中D1大鼠示出體重的長期持續(xù)降低，食欲不振在治療的第一周期間最為顯著，隨后是逐漸發(fā)展的對(duì)特索芬辛的抑制食欲效應(yīng)的耐性，由此間接符合臨床發(fā)現(xiàn)。
[0100]在本研究中，在第一個(gè)12小時(shí)黑暗階段過程中特索芬辛劑量依賴性地增加自發(fā)活動(dòng)，并且其可以由此推測增強(qiáng)的自發(fā)活動(dòng)可以有助于遙測的大鼠的體重減輕，例如，通過引起覓食行為或能量消耗方面的變化。然而，與特索芬辛誘導(dǎo)自發(fā)活動(dòng)的能力(高達(dá)12小時(shí))相比，特索芬辛的降低食欲效果更有效且更持久(最高達(dá)48小時(shí))。在該方面，可能的是對(duì)于食物攝取和自發(fā)活動(dòng)的不同的短時(shí)間的藥效(pharmacodynamics)與特索芬辛的藥物代謝動(dòng)力學(xué)有關(guān)。
[0101]與特索芬辛相比，Ml代謝物具有較長的T1/2 (參見以上)，具有對(duì)多巴胺攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制的4倍或5倍較低的體內(nèi)潛能，這支持該代謝物不會(huì)顯著有助于特索芬辛誘導(dǎo)的自發(fā)活動(dòng)。同樣，美托洛爾完全阻止特索芬辛的運(yùn)動(dòng)刺激效應(yīng)而沒有影響特索芬辛對(duì)于食欲不振和體重減少的效力的證據(jù)表明:適度增加自發(fā)活動(dòng)不會(huì)促進(jìn)能量代謝的上升。從這些數(shù)據(jù)，我們推斷自發(fā)活動(dòng)效應(yīng)對(duì)于特索芬辛的食欲抑制和體重減輕效果不具有影響。此夕卜，可以推測美托洛爾通過對(duì)于紋狀體(striatal)多巴胺能神經(jīng)傳遞間接作用拮抗特索芬辛誘導(dǎo)的自發(fā)活動(dòng)，因?yàn)閳?bào)導(dǎo)不同的P1阻滯劑抑制大鼠紋狀體多巴胺釋放。
[0102]在清醒并且自由移動(dòng)的大鼠中，特索芬辛的心血管影響的臨床前發(fā)現(xiàn)與臨床發(fā)現(xiàn)一致，也示出在比升高舒張壓和收縮壓所需的較低劑量水平下的心率的顯著劑量依賴性升高。值得注意的是，急性給予特索芬辛之后，心血管影響比降低食欲效應(yīng)耐久。由于特索芬辛和Ml代謝物示出體外去甲腎上腺素重?cái)z取的等效抑制，可能的是Ml代謝物有助于特索芬辛的心血管影響。
[0103]由于通過美托洛爾共給予阻滯β !腎上腺素受體完全防止特索芬辛的心血管影響，這強(qiáng)烈表明特索芬辛的去甲腎上腺素能重?cái)z取抑制組分是針對(duì)特索芬辛的心血管不良影響的最重要的標(biāo)準(zhǔn)。
[0104]在本報(bào)告中沒有解決特索芬辛是否將差別地影響肥胖大鼠中的血壓和心率，并且必須等待進(jìn)一步的研究。還應(yīng)當(dāng)注意的是，本觀察限于特索芬辛的急性效應(yīng)，并且不排除慢性特索芬辛治療之后遙測大鼠中的心血管參數(shù)方面的變化可能更接近模擬臨床發(fā)現(xiàn)。同樣良好的符合臨床和臨床前報(bào)告，在遙測的大鼠中，特索芬辛產(chǎn)生強(qiáng)烈的降低食欲響應(yīng)伴隨著相應(yīng)的體重減輕。使用用食物喂養(yǎng)的正常體重的大鼠，本研究中觀察到的特索芬辛誘導(dǎo)的食欲不振和體重降低的效力和時(shí)間模式是根據(jù)D1大鼠中的類似的發(fā)現(xiàn)，表明特索芬辛的急性抗肥胖效應(yīng)還可以在遙測的非肥胖大鼠中研究。
[0105]總體而言，用于本研究中的體內(nèi)試驗(yàn)設(shè)置允許以實(shí)時(shí)模式先進(jìn)地同步監(jiān)測心血管和食物攝取參數(shù)，代表針對(duì)同時(shí)研究抗肥胖藥物的臨床相關(guān)抗肥胖和生命體征效應(yīng)的合理且有效的方法學(xué)。
[0106]有趣地是，目前的結(jié)果提示特索芬辛+P1阻滯劑組合治療與西布曲明(5-羥色胺和去甲腎上腺素重?cái)z取雙重抑制劑)相比的不同的藥效曲線。西布曲明表現(xiàn)出肥胖患者中的相當(dāng)溫和的體重減輕，并且顯著升高肥胖患者的心率和血壓，這構(gòu)成了西布曲明的臨床應(yīng)用中的主要關(guān)注。
[0107]肥胖高血壓患者的臨床研究表明，西布曲明治療分別與組合的Ca2+通道拮抗劑+ACE抑制劑或美托洛爾+氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)治療,顯著減弱了西布曲明的抗肥胖效果。后者組合最負(fù)面地影響了西布曲明的體重降低效力，這可以通過β_阻滯劑可以誘導(dǎo)本身體重增加的常見觀察解釋。
[0108]相反，在關(guān)于血壓正常肥胖患者的研究中美托洛爾治療不會(huì)顯著地干擾西布曲明的抗肥胖和代謝效應(yīng)，迄今為止遺留的尚未解決的是組合的P1阻滯劑治療是否可行以減少肥胖患者中的西布曲明的心血管不利影響。在該背景中，應(yīng)當(dāng)注意的是，據(jù)信西布曲明的降低食欲效應(yīng)與受刺激的α工-和β工-腎上腺素受體功能緊密相關(guān)，由于西布曲明誘導(dǎo)的食欲降低分別被哌唑嗪和美托洛爾拮抗。
[0109]來自這些研究的暗示可能是，當(dāng)與β阻滯劑組合以改善任何交感神經(jīng)的心血管影響時(shí)，具有去甲腎上腺素能活性的抗肥胖藥物將潛在地具有較小的抗肥胖效力。然而，本研究提示由于與美托洛爾的組合治療不影響特索芬辛的抗肥胖效果，這可能不適合特索芬辛的情況。因此，該觀察表明特索芬辛的兩個(gè)不同且重要的作用機(jī)理之間的清晰的藥效學(xué)分離，即與β ,腎上腺素受體刺激相關(guān)的抗肥胖效應(yīng)和與增強(qiáng)的β !腎上腺素受體功能相聯(lián)系的心血管影響。建議特索芬辛的β/腎上腺素受體效應(yīng)次要于導(dǎo)致抑制下丘腦內(nèi)食欲信號(hào)環(huán)路以喚起飽腹感反應(yīng)的下丘腦突觸性(hypothalamic synaptic)去甲腎上腺素再攝取的阻塞。
[0110]相反，最可能的是通過增加的外周去甲腎上腺素能緊張(tonus)介導(dǎo)特索芬辛的心血管影響。同樣與西布曲明相反的是，特索芬辛的抑制食欲效應(yīng)需要刺激P1腎上腺素受體和多巴胺D1受體功能以在D1大鼠中獲得完全的食欲抑制活性，因此，間接指向特索芬辛治療使得招募多巴胺能神經(jīng)傳遞的可能性。由于肥胖人類受試者具有被認(rèn)為鼓勵(lì)(instigate)過食行為以補(bǔ)償降低的快樂驅(qū)動(dòng)(hedonic drive)的受損的中樞性多巴胺能活性的參數(shù)，這是相關(guān)的。
[0111]在健康的人類志愿者中，特索芬辛以引起肥胖個(gè)體的重量減輕的劑量阻斷神經(jīng)元多巴胺攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)。該發(fā)現(xiàn)表明特索芬辛的多巴胺增強(qiáng)效應(yīng)與介導(dǎo)重量減少效應(yīng)有關(guān)(be involved in)。
[0112]總之，我們證明組合的特索芬辛和美托洛爾治療保留了大鼠中的特索芬辛的抗肥胖效力同時(shí)還防止心率和血壓的升高。這些發(fā)現(xiàn)引起這樣的可能性:與特索芬辛組合的抗聞血壓治療也將在肥胖患者中有效。
【權(quán)利要求】
1.一種在包括人的活的動(dòng)物體中治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用的方法，所述方法包括將治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽在與美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的聯(lián)合治療中給予給需要其的這種活的動(dòng)物體的步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述與肥胖相關(guān)的病癥是選自由以下組成的組的病癥或病況:過食癥、神經(jīng)性貪食、暴食癥、強(qiáng)迫性過食、受損的食欲調(diào)節(jié)、代謝綜合征、2型糖尿病、血脂異常、動(dòng)脈粥樣硬化和藥物誘導(dǎo)的肥胖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，以每天約0.1mg至約Img API的范圍給予特索芬辛。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，以每天約25mg至約200mgAPI的范圍給予美托洛爾。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活的動(dòng)物體是具有超過30kg/m2的BMI的受試者。
6.一種特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
7.一種特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，用于用作藥物。
8.一種特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合，在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
9.特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽和美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合在制備在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用的藥物中的應(yīng)用。
10.一種包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，用于在與包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物一起的聯(lián)合治療中使用，用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
11.一種藥物組合物，包含治療有效量的特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽以及治療有效量的美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽，連同一種或多種佐劑、賦形劑、載體和/或稀釋劑。
12.—種試劑盒，包含至少兩個(gè)單獨(dú)的單位劑型(A)和(B)，其中: (A)包含特索芬辛或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且 (B)包含美托洛爾或其藥學(xué)上可接受的鹽；并且可選的， (C)用于同時(shí)地、連續(xù)地或分開地將(A)的特索芬辛和(B)的美托洛爾給予至需要其的患者的說明書。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒，在包括人的哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或減輕肥胖或與肥胖相關(guān)的病癥以及用于治療、預(yù)防或減輕特索芬辛的心血管副作用。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK104244935SQ201380020405
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年2月14日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月16日
【發(fā)明者】亨里克·比約克·漢森, 莫滕·格倫內(nèi)特, 博·約爾特·本特森, 拉爾斯·伊韋萊德-尼爾森, 約爾延·布斯·拉森, 克勞斯·松德格倫 申請人:神經(jīng)研究公司