使用centhaquin的新治療法
【專利摘要】本發(fā)明公開了使用腎上腺素能劑如centhaquin，治療高血壓，疼痛，和復(fù)蘇出血性休克的方法。所述方法治療哺乳動物，包括人。
【專利說明】使用centhaquin的新治療法
[0001]本申請是以下申請的分案申請:申請日:2010年04月29日； 優(yōu)先權(quán)日::2009年04月 30 日，申請?zhí)?2010800296725 (PCT/US2010/032942);發(fā)明名稱:“使用 centhaquin 的新
治療法”。
[0002]相關(guān)申請的交叉引用
本申請要求申請日為2009年4月30日的美國臨時專利申請61/174，257的申請日的權(quán)益，其全盤引入本文作為參考。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及使用centhaquin的新治療法。在一種實施方案中，在高血壓的治療中centhaquin和內(nèi)皮素拮抗劑一起使用。在第二實施方案中，在疼痛的治療中centhaquin用作止痛藥。在第三實施方案中，centhaquin用于治療復(fù)蘇出血性休克(resuscitativehemorrhagic shock)。
【背景技術(shù)】
[0004]在全世界，高血壓是折磨許多人的嚴(yán)重疾病。據(jù)統(tǒng)計三個美國人中的一個患有高血壓，它們中差不多三分之一不知道該問題。除生活方式變化如鍛煉、減肥和降低鹽攝入，大部分抗高血壓療法包括使用一種或多種抗高血壓藥。除利尿劑、Ca++-通道阻斷劑、腎上腺素能阻斷劑、ACE抑制劑、和血管緊張素-1I受體阻斷劑外，中樞作用降血壓藥可用于治療中度至嚴(yán)重高血壓。
[0005]可樂定，N-(2，6- 二氯苯基)-4，5- 二氫-1H-咪唑_2_胺,是廣泛使用的抗高血壓藥，其通過刺激中樞α 2-腎上腺素能受體介導(dǎo)其降血壓效果(Kobinger, 1978; Guyenet和Cabot, 1981)。相比于α 1-腎上腺素受體，它具有約10倍的對α 2_腎上腺素能受體的結(jié)合親合性(U’ Prichard et al.，1977)。中樞作用抗高血壓藥用于治療非受控的或難治療的高血壓。然而，由于雙重作用，使用受限。當(dāng)給予時，首先它們刺激周圍α 1-腎上腺素能受體，導(dǎo)致血管收縮和血壓升高，和其次它們作用于中樞α 2-腎上腺素能受體而抑制交感神經(jīng)激動(sympathetic drive),導(dǎo)致血管舒張和血壓降低。相比于周圍作用，中樞作用占優(yōu)，因此可樂定的總效果是血壓降低。
[0006]centhaquin(2_[2_(4_(3_甲基(methy)苯基)_1_喊嚷基)乙基-喧琳)是中樞作用抗高血壓藥。centhaquin的結(jié)構(gòu)被確定(Bajpai et al., 2000)和centhaquin的構(gòu)形由X射線衍射證實(Carpy和 Saxena, 1991)。盡管結(jié)構(gòu)上不同于可樂定,但在麻醉的貓和大鼠中centhaquin產(chǎn)生類似于由可樂定看出的平均動脈壓(MAP)和心率(HR)的下降(Srimal等，1990)。在小鼠中，它具有600mg/kg腹膜內(nèi)的LD5tl并且在不同的物種中產(chǎn)生了MAP的劑量依賴性降低。在烏拉坦麻醉的大鼠中在MAP和HR中centhaquin (0.05至0.2mg/kg, iv)產(chǎn)生了劑量依賴性降低。然而，在頸部切開的大鼠中，靜脈內(nèi)給予的centhaquin沒有產(chǎn)生對MAP或HR的任何效果(Gulati等，1991a)。鞘內(nèi)給予centhaquin沒有產(chǎn)生對MAP或HR的任何效果(Gulati等，1991a)。十二指腸內(nèi)給予centhaquin (1.0至2.5mg/kg)產(chǎn)生MAP的40至50mmHg降低,其沒有受到用抗組胺藥和阿托品預(yù)處理的影響(Murthi等，1976 ；Srimal等，1990)。在自發(fā)性高血壓大鼠中，centhaquin (0.5至1.0mg/kg)有效地降低MAP達(dá)50至60mmHg。一天一次重復(fù)給予centhaquin達(dá)15天沒有產(chǎn)生任何增強作用或耐受性(Murthi 等，1976)。
[0007]發(fā)現(xiàn)centhaquin (0.1, 1.0和10.0 μ g/mL)產(chǎn)生了去甲腎上腺素(NE)的自發(fā)性釋放和由氯化鉀和二甲基苯基哌嗪鎗氯化物引起的抑制的去甲腎上腺素釋放的初始增加、隨后降低，這表明centhaquin抑制去甲腎上腺素釋放(Bhatnagar等，1985)。在大鼠中長期給藥后，centhaquin和可樂定都產(chǎn)生了與在下丘腦和髓質(zhì)中α -腎上腺素能受體的向上調(diào)節(jié)有關(guān)的低血壓和心動過緩(Gulati等，1991a ;Gulati等，1991b)。有可能的是去甲腎上腺素在突觸中的釋放的降低導(dǎo)致α-腎上腺素能受體的密度增加。
[0008]血壓的中樞性調(diào)節(jié)已經(jīng)與內(nèi)源性的21-殘基肽，內(nèi)皮素(ET)有關(guān)。ET在20年前在豬動脈上皮細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，并且此后被認(rèn)為是最有效的血管收縮劑之一(Hickey等，1985 ；Yanagisawa等，1988)。存在有三個結(jié)構(gòu)和功能上不同的異構(gòu)肽(ET_1，ET_2和ET-3)，其又結(jié)合到三個不同的受體(ETA，ETbi和ETb2)。ETa和ETb2受體位于血管平滑肌上，在此通過增加胞內(nèi)Ca++，它們產(chǎn)生血管收縮。另一方面，ETm受體存在于血管內(nèi)皮，其中通過一氧化氮和前列腺環(huán)素的合成和釋放，它們介導(dǎo)血管舒張(Sakamoto等，1993 ；Shetty等，1993)。靜脈內(nèi)給予ET-1產(chǎn)生血壓的劑量依賴的、兩相性改變，特征為短暫的低血壓階段，隨后持續(xù)的高血壓以及HR增加(Ouchi等，1989 ；kuwaki等，1990)。ET存在于腦，并且中樞性ET已經(jīng)顯示出調(diào)節(jié)交感神經(jīng)系統(tǒng)(Gulati等，1997a ；Gulati等，1997b)。
[0009]先前發(fā)現(xiàn)ET可改變可樂定的心血管效應(yīng)。在大鼠中用ET預(yù)處理產(chǎn)生對由可樂定誘發(fā)的低血壓和心動過緩的拮抗效應(yīng)。假定的機理是ET增加周圍性α-腎上腺素能受體的敏感性，導(dǎo)致可樂定的周圍性高血壓效果的增強作用(Gulati,1992 ；Gulati和Srimal,1993)。研究已經(jīng)表明 在大鼠腸系膜動脈和豚鼠股動脈的刺激期間ET減弱加壓響應(yīng)和[3H]去甲腎上腺素釋放，由此導(dǎo)致突觸前抑制和交感神經(jīng)緊張的隨后增加(Wiklund等，1988 ；Tabuchi等，1989)。因此可能的是由于突觸前神經(jīng)元傳遞的ET-介導(dǎo)的抑制，可樂定的中樞性低血壓和心動過緩效果可以被ET拮抗。
[0010]已知的是存在著由ET造成的可樂定-誘發(fā)的心血管參數(shù)的顯著改變并且少數(shù)ET拮抗劑已經(jīng)在銷售用于治療肺動脈高血壓并且一些在(銷售)管道(pipeline)中。因此研究了 ET和它們的拮抗劑對心血管參數(shù)的腎上腺素能抗高血壓藥-誘發(fā)的變化的影響。結(jié)構(gòu)不同的化合物可樂定和centhaquin已經(jīng)顯示出通過作用于中樞性和周圍性α -腎上腺素能受體具有對血壓的類似的影響。本發(fā)明人因此探究了 ET在調(diào)節(jié)可樂定和centhaquin的周圍性腎上腺素能影響中的參與。在大鼠中使用ET激動劑(ET-1)和拮抗劑(BMS-182874 (ETa-特異性拮抗劑)和TAK-044 (ETA/B非特異性拮抗劑))進(jìn)行研究來探查它們對MAP，脈壓(PP)和HR的可樂定和centhaquin誘發(fā)的變化的影響。
[0011]止痛藥是通過中樞性作用來提高疼痛閾值(優(yōu)選地在沒有干擾意識或改變其它感覺功能的情況下)而減輕疼痛的藥劑。已經(jīng)闡述了止痛藥緩和疼痛(即，提高疼痛閾值)的機理。
[0012]National Center for Health Statistics (2006)估計大于四分之一的美國人(26%)超過20歲，和大于76.5百萬美國人，報道他們已經(jīng)具有在持續(xù)時間方面持續(xù)大于24小時的任何類型的疼痛的問題并且超過191百萬急性疼痛事件在美國發(fā)生。阿片樣物質(zhì)是最常使用的止痛藥用于臨床管理急性和慢性疼痛。存在著各種與長期使用阿片樣物質(zhì)有關(guān)的副作用，包括耐受性的形成，這導(dǎo)致不適當(dāng)?shù)奶弁礈p輕。存在著若干被設(shè)計用于增強止痛和有效地管理疼痛的現(xiàn)有方案，包括非留類抗炎藥(NSAID)，另外的阿片樣物質(zhì)，和非阿片樣物質(zhì)以及阿片樣物質(zhì)療法。盡管這些方法提供了癥狀的減輕，但它們對有助于耐受性的形成和造成毒性、依賴性和上癮的顯著風(fēng)險的基礎(chǔ)機理具有很小的影響。
[0013]因而在本領(lǐng)域中存在著這樣的需要，識別藥劑或藥劑的組合，其降低對阿片樣物質(zhì)止痛藥的耐受性和減低疼痛癥狀，并且可作為有效的非阿片樣物質(zhì)止痛藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]本發(fā)明涉及給予需要其的個體內(nèi)皮素拮抗劑以及centhaquin或其它腎上腺素能劑。更具體地說，給予centhaquin或其它腎上腺素能劑以及內(nèi)皮素拮抗劑增強了centhaquin的抗高血壓效應(yīng)。
[0015]根據(jù)本發(fā)明有用的腎上腺素能劑包括但不局限于centhaquin，可樂定，胍法辛，胍那節(jié)，guanoxbenz,甲基多巴,哌唑嗪,坦洛新,多沙唑嗪，特拉唑嗪，酹妥拉明，酹節(jié)明，米氮平，和其混合物。在高血壓的治療中，腎上腺素能劑和內(nèi)皮素拮抗劑一起給予。腎上腺素能劑可以單獨地或以任何組合，連同一種或多種內(nèi)皮素拮抗劑，給予來治療高血壓。
[0016]本發(fā)明的另一方面是將作為止痛藥的centhaquin給予需要其的個體來治療疼痛。在本發(fā)明的另一方面中，在疼痛的治療中，將centhaquin與阿片止痛藥聯(lián)合給予(coadministered)需要其的個體。 [0017]本發(fā)明的又一方面是將centhaquin給予需要其的個體來治療復(fù)蘇出血性休克(resuscitative hemorrhagic shock)。
[0018]本發(fā)明的又一個方面是提供人藥用使用的制品，其包括(a)包裝插頁(packageinsert), (b)容器,和或者(cl)包括centhaquin的包裝的組合物或者(c2)包括內(nèi)皮素拮抗劑的包裝的組合物和包括centhaquin的包裝的組合物。包裝插頁(package insert)包括或者用于治療疼痛或復(fù)蘇出血性休克(resuscitative hemorrhagic shock) (cl)或者用于治療高血壓(c2)的說明書。
[0019]本發(fā)明的這些及其他方面將從本發(fā)明的以下【具體實施方式】變得顯見。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]圖1包含了將10，30，和90ug/kg的可樂定給予大鼠的平均血壓(mmHz)vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖2包含了單獨地和與100，300，或900 μ g/kg的ET-1 —起給予可樂定(10 μ g/kg)的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖3包含了給予可樂定(10 μ g/kg)和與TAK-044或BMS-182874 —起給予的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖4包含了單獨地和與ET-1,哌唑嗪,和centhaquin或clonodine —起給予可樂定(10 μ g/kg)的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖5包含了給予0.05,0.15,和0.45mg/kg的centhaquin的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖 6 包含了單獨地和與 100, 300,和 900mg/kg 的 ET-1 —起給予 centhaquin (0.15mg/kg)的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖7包含了單獨地和與了八1(-044或81^182874—起給予061^1^911丨11(0.15mg/kg)的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖8包含了單獨地或與ET-1 (300mg/kg)和哌唑嗪(0.lmg/kg) 一起給予centhaquin (0.15mg/kg)的平均血壓(mmHz) vs.時間(min),脈壓(mmHz) vs.時間(min),和心率(心跳次數(shù)/min)的曲線圖；
圖9包含了賦形劑和centhaquin (0.1, 0.3,或0.9mg/kg)的甩尾潛伏期(秒)vs.時間(min)的曲線圖；
圖10包含了用賦形劑，centhaquin,嗎啡，或centhaquin和嗎啡處理的大鼠的溫度(°C ) vs.時間(min)的曲線圖；
圖11-13包含了用賦形劑,centhaquin,嗎啡,或centhaquin和嗎啡處理的大鼠的甩尾潛伏期(秒)vs.時間(min)的曲線圖；
圖14A包含了顯示在centhaquin處理的I小時后大鼠腦中的ETa受體表達(dá)的免疫印
跡；
圖14B包含了如通過密度測定法評價的歸一化至β -肌動蛋白的ETa受體的表達(dá)的倍數(shù)變化的柱狀圖；
圖15包含了在出血性休克模型中單獨地或與centhaquin —起用林格(氏)乳酸鹽復(fù)蘇的大鼠中的血乳酸鹽(mmol/L)vs.時間(min)的曲線圖；
圖16包含了在出血性休克模型中單獨地或與centhaquin —起用林格(氏)乳酸鹽復(fù)蘇的大鼠中的標(biāo)準(zhǔn)堿缺失(standard basis deficit) (mEq/L) vs.時間(min)的曲線圖；
圖17包含了顯示在出血性休克模型中單獨地或與centhaquin —起用林格(氏)乳酸鹽復(fù)蘇的大鼠中的存活時間(min)的柱狀圖；
圖18和19包含了用林格(氏)乳酸鹽復(fù)蘇的大鼠的壓力一容積環(huán)；和 圖20包含了用林格(氏)乳酸鹽和centhaquin復(fù)蘇的大鼠的壓力一容積環(huán)。
【具體實施方式】
[0021]本發(fā)明涉及給予centhaquin或其它腎上腺素能劑和內(nèi)皮素拮抗劑來治療高血壓。本發(fā)明還涉及給予centhaquin來治療疼痛或復(fù)蘇出血性休克(resuscitativehemorrhagic shock)。
[0022]本文中所述的方法受益于在高血壓的治療中使用腎上腺素能劑，如centhaquin，和內(nèi)皮素拮抗劑?？梢酝瑫r地或順序地給予腎上腺素能劑和內(nèi)皮素拮抗劑來實現(xiàn)期望的效
果O
[0023]對本文中公開的本發(fā)明的目的而言，術(shù)語〃治療〃包括降低、改善或消除疼痛、高血壓或復(fù)蘇出血性休克(resuscitative hemorrhagic shock)和各個狀況的相關(guān)癥狀。因而，術(shù)語〃治療〃包括醫(yī)學(xué)治療性給藥和，在疼痛的治療中，預(yù)防性給藥。
[0024]術(shù)語〃容器(container) 〃是指因此適用于儲存、運輸、分配和/或處理藥物產(chǎn)品的任何接受器(receptacle)和封閉體(closure)。
[0025]術(shù)語"插頁"是指伴隨產(chǎn)品的信息，其提供了如何給予產(chǎn)物的說明書以及使得醫(yī)生、藥劑師和患者做出關(guān)于產(chǎn)品使用的理性決斷所需要的安全和效力數(shù)據(jù)。包裝插頁(package insert)通常被認(rèn)為是藥物產(chǎn)品的〃標(biāo)簽(label)"。
[0026]術(shù)語〃腎上腺素能劑〃是指這樣的化合物，其刺激了交感神經(jīng)系統(tǒng)，例如，模擬去甲腎上腺素和腎上腺素的效果。如本文中使用的，術(shù)語"腎上腺素能劑"是單數(shù)的或復(fù)數(shù)的。
[0027]ET是極有效的內(nèi)皮源血管收縮因子(Hickey等，1985)，其被分離、序列化和克隆(Yanagisawa等，1988)。內(nèi)皮素是21氨基酸，非常有效的血管收縮肽，具有兩個二硫醚鍵。通過由內(nèi)皮素-轉(zhuǎn)化酶將前內(nèi)皮素原酶促裂解為內(nèi)皮素原(proendothelin),然后為內(nèi)皮素，生物學(xué)產(chǎn)生內(nèi)皮素。通過結(jié)合到細(xì)胞表面受體，其是偶聯(lián)至G-蛋白的7-跨膜受體，ET施加了生物效果。存在兩種不同類型的內(nèi)皮素受體:(a)ET-1選擇性的ETa受體，主要存在于血管平滑肌上和負(fù)責(zé)血管收縮，和(b)非選擇性ETb受體，主要存在于血管內(nèi)皮中和負(fù)責(zé)血管舒張。
[0028]ET-1的血管收縮效果主要由G蛋白偶聯(lián)的ETa受體介導(dǎo)。由前列腺、轉(zhuǎn)移癌和CNS，還以高濃度產(chǎn)生ET-1。 CNS中的ET由內(nèi)皮細(xì)胞和非內(nèi)皮細(xì)胞，如神經(jīng)元，星形細(xì)胞，和膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。
[0029]腦中的ET和它的結(jié)合部位的總體分布表明，除是血管收縮劑外，其可以作為CNS中的重要的神經(jīng)肽(Gulati等，1992)。內(nèi)皮素(Et)受體拮抗體，特別地選擇性ETa或平衡拮抗劑ETA/ETB，代表了用于如充血性心力衰竭(CHF)和肺動脈高血壓的疾病的治療領(lǐng)域。BQ-123和BMS-182874是ETa受體的特異性拮抗劑(Stein等，1994)。內(nèi)皮素拮抗劑對肺血管系統(tǒng)和右心具有深刻的影響，然而ACE抑制劑主要地影響周圍血管和左心。
[0030]若干研究表明中樞性ET受體主要地是ETb亞型的。大鼠大腦星形細(xì)胞已經(jīng)顯示出主要地表達(dá)ETb類型的受體并且還發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞強烈地表達(dá)ETb受體mRNA。然而，中樞性給予高選擇性的ETb受體激動劑，IRL-1620，沒有對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生任何影響，并且已經(jīng)顯示出中樞性給予的ET-1的全身性和區(qū)域性循環(huán)影響通過ETA受體介導(dǎo)(Gulati等，1995 ；Rebello 等，1995)。
[0031]腦室內(nèi)給予ET-1在平均動脈血壓(BP)中產(chǎn)生短暫的上升、隨后持續(xù)的降低。加壓效應(yīng)伴隨有腎交感神經(jīng)活性和兒茶酚胺和精氨酸-加壓素的血漿水平的增加。
[0032]還已經(jīng)顯示出中樞性給予ET-1的影響通過活化交感神經(jīng)系統(tǒng)來介導(dǎo)，因為這些影響通過神經(jīng)節(jié)阻斷劑減弱。腦池內(nèi)給予ET-1引起B(yǎng)P，腎交感神經(jīng)活性，和膈神經(jīng)活性的短暫增加。BP的隨后的降低伴隨有腎交感神經(jīng)活性和膈神經(jīng)活性的降低。觀察到用酚芐明預(yù)處理抑制了加壓響應(yīng)的中樞性ET-1誘發(fā)的增加(Ouchi等，1989),進(jìn)一步暗示了交感神經(jīng)系統(tǒng)在初始加壓階段中的積極參與。
[0033]在本發(fā)明中使用的內(nèi)皮素拮抗劑可以是本領(lǐng)域已知的任何內(nèi)皮素受體拮抗體。如本文中使用的，術(shù)語〃內(nèi)皮素受體拮抗體〃和〃內(nèi)皮素拮抗劑〃是同義的并且可互換地使用，并且是指給予一種或多種拮抗劑。內(nèi)皮素是有效的血管收縮劑。內(nèi)皮素拮抗劑用于治療急性循環(huán)功能不全，充血性/慢性心力衰竭，肺動脈高壓，肺水腫，蛛網(wǎng)膜下出血，慢性阻塞性肺病，心肌梗塞，急性腦缺血，急性冠狀動脈綜合征，急性腎衰竭，肝手術(shù)中的術(shù)后療法，和前列腺癌。當(dāng)給予患者內(nèi)皮素拮抗劑時，預(yù)期沒有副作用。
[0034]優(yōu)選的ET拮抗劑是對內(nèi)皮素A(ETa)受體選擇性的拮抗劑或者是平衡ETa/內(nèi)皮素B(ETb)拮抗劑。這樣的ET拮抗劑在本文中在附錄A和B中闡述。然而，內(nèi)皮素B拮抗劑和雜類內(nèi)皮素拮抗劑，如在本文中在附錄C和D中闡述，還可被用于本發(fā)明的組合物或方法。另外的有用的內(nèi)皮素拮抗劑可見于美國專利申請公開Nos.US 2002/0082285和US2003/0232787，和 Wu, Exp.0pin.Ther.Patents (2000)，10(11)，第 1653-1668 頁，每一個全盤作為參考結(jié)合在本文中。
[0035]可用于本發(fā)明的內(nèi)皮素拮抗劑的特定的實例包括但不局限于阿曲生坦，替唑生坦，波生坦，sitaxsentan,恩拉生坦,BMS-207940 (Bristol-Myers Squibb), BMS-193884,BMS-182874, J-104132 (Banyu Pharmaceutical), VML 588/Ro 61-1790 (Vanguard Medica),T-0115(Tanabe Seiyaku), TAK-044(Takeda), BQ-788, BQ123, YM-598， LU 135252， PD145065，A-127722, ABT-627，A-192621，A-182086，TBC3711, BSF208075, S-0139, TBC2576,TBC3214，PD156707，PD180988，ABT-546，ABT-627，Z1611，RPR118031A，SB247083，SB217242，S-Lu302872, TPC10950, SB209670，和其混合物。
[0036]BQ123是特異性內(nèi)皮素A拮抗劑，并且是環(huán)(-D-Trp-D-Asp-Pro-D-Val-Leu-)的鈉鹽。BQ-788是特異性內(nèi)皮素B拮抗劑，并且是N-順-2，6- 二甲基哌啶子基羰基-L- Y -甲基亮氨酰-D-1-甲氧基羰基色氨酰基(triptophanyl)-DNIe的鈉鹽(參見Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 91，第 4892-4896 頁(1994))。
[0037]除常規(guī)的內(nèi)皮素拮抗劑外，抑制內(nèi)源性內(nèi)皮素的形成的化合物還可在本發(fā)明中被用作內(nèi)皮素拮抗劑。這樣的化合物是有用的，因為它們防止內(nèi)皮素形成，并且因此降低內(nèi)皮素受體的活性。一類這樣的化合物是內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)抑制劑。
[0038]有用的ECE抑制劑包括但不局限于CGS34225(即，N-((1-((2 (S)-(乙酰基硫基)-1-氧代戊基)-氨基)-1-環(huán)戊基)-羰基-S-4-苯基苯基-丙氨酸甲酯)和磷酸阿米酮(phosphoramidon)(即，N- (a-吡喃鼠李糖基氧基羥基氧膦基)_Leu_Trp)。
[0039]進(jìn)行測試以便舉例說明內(nèi)皮素拮抗劑對給予哺乳動物(包括人)的腎上腺素能劑如可樂定和centhaquin的影響。還進(jìn)行測試以便舉例說明centhaquin對止痛和復(fù)蘇出血性休克(resuscitative hemorrhagic shock)的影響。
[0040]測試和數(shù)據(jù)顯示出腎上腺素能劑如centhaquin或可樂定，和內(nèi)皮素拮抗劑的組合可以在治療高血壓的方法中被給予哺乳動物。測試和數(shù)據(jù)還顯示在治療疼痛的方法中，以及在治療復(fù)蘇出血性休克(resuscitative hemorrhagic shock)的方法中，單獨地或與阿片止痛藥一起，可以將centhaquin給予哺乳動物。腎上腺素能劑和內(nèi)皮素拮抗劑，或centhaquin單獨地,可以被配制在合適的賦形劑中以便口服,或腸胃外給藥。這樣的賦形劑是本領(lǐng)域眾所周知的?；钚詣?例如centhaquin和，在一些實施方案中，內(nèi)皮素拮抗劑和腎上腺素能劑)典型地以如下的數(shù)量單獨地或組合地存在于這樣的組合物中:約0.1%至約75wt%0
[0041]對于本文中公開的實施方案的每一個來說，含本發(fā)明的活性劑的藥物組合物適于給予人或其它哺乳動物。典型地，藥物組合物是無菌的，并且不包含有毒的、致癌的、或致突變的化合物，當(dāng)給予時其會引起不良反應(yīng)。
[0042]使用如上所述的活性劑，或者以其生理學(xué)可接受的鹽或溶劑化物的形式，可以實現(xiàn)本發(fā)明的方法。活性劑、鹽、或溶劑化物可以以純的化合物的形式，或者以含任一(either)或兩種(both)實體的藥物組合物的形式給予。
[0043]通過任何合適的途徑，例如通過口服，含劑，吸入，舌下，直腸，陰道，腦池內(nèi)通過腰椎穿刺，經(jīng)尿道，鼻內(nèi)，經(jīng)皮(percutaneous),即，經(jīng)皮(transdermal),或腸胃外(包括靜脈內(nèi)，肌內(nèi)，皮下，和冠狀動脈內(nèi))給予，可以給予活性劑。使用針和注射器，或使用高壓技術(shù)，如P0WDERJECT?，可以實現(xiàn)腸胃外給藥。在疼痛的發(fā)作前，在疼痛的發(fā)作期間，或在疼痛的發(fā)作后可以進(jìn)行活性劑的給予。
[0044]藥物組合物包括以下的那些，其中活性成分以有效量給予以便實現(xiàn)其意欲目的。更具體地說，"治療有效量"是指有效消除或減輕疼痛或高血壓的數(shù)量。確定治療有效量完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員能力范圍之內(nèi)，特別地根據(jù)本文中提供的詳細(xì)公開內(nèi)容。
[0045]〃治療有效的劑量〃是指導(dǎo)致實現(xiàn)期望的效果的活性劑的數(shù)量。通過在細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒瀯游镏械臉?biāo)準(zhǔn)藥物程序，例如確定LD5tl (使群體的50%致死的劑量)和ED5tl (在群體的50%中治療有效的劑量)，可以確定這樣的活性劑的毒性和治療效能。毒性與治療效果之間的劑量比是治療指數(shù)，其表示為LD5tl與ED5tl之間的比例。高治療指數(shù)是優(yōu)選的。獲自這樣的數(shù)據(jù)的數(shù)據(jù)可被用于制定用于人的劑量的范圍。活性劑的劑量優(yōu)選地位于在包括ED5(1、毒性小或無毒性的循環(huán)濃度的范圍內(nèi)。取決于所使用的劑型，和采用的給藥途徑，劑量可在該范圍內(nèi)變化。 [0046]確切的制劑、給藥途徑，和劑量由個體醫(yī)師根據(jù)患者的狀況來確定。劑量數(shù)量和間隔可以個體地被調(diào)節(jié)而提供足以保持治療效果的活性劑的水平。
[0047]所給予的活性劑的量取決于被治療的受試者，受試者的體重，痛苦的嚴(yán)重程度，給藥方式，和主治醫(yī)師的判斷。
[0048]特別地，對于在高血壓的治療性療法中給予人來說，對于一般的成年患者(70kg)，腎上腺素能劑和內(nèi)皮素拮抗劑的口服劑量，各個地通常為每日約0.01至約200mg，典型地分為每日兩至三次。因而，對于典型的成年患者來說，單個片劑或膠囊包含在合適的藥用可接受的賦形劑或載體中的約0.1至約200mg centhaquin和約0.1至約50mg內(nèi)皮素拮抗劑，以便以單或多劑量的形式，每天給予一次或若干次。根據(jù)需要，用于靜脈內(nèi)，含劑，或舌下給予的劑量典型地為每一單劑量約0.1至約10mg/kg。實際上，醫(yī)生確定最適于個體患者的實際的劑量給藥方案，并且劑量隨特定患者的年齡、重量和響應(yīng)而變化。上述劑量示范了平均情況，但是可以存在個體情況，其中更高或更低的劑量是有益的，并且這在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0049]本發(fā)明的活性劑可以單獨地或者以與就意欲的給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥物實踐選擇的藥物載體混合地給予。因此，根據(jù)本發(fā)明使用的藥物組合物可以按照常規(guī)方式使用一種或多種生理學(xué)可接受的載體配制，所述載體包括有助于將活性劑加工成可以藥用的制劑的賦形劑和助劑。
[0050]這些藥物組合物可以以常規(guī)方式制造，例如通過常規(guī)的混合，溶解，?；?，制備糖錠，乳化，封裝，包埋，或凍干方法。合適的制劑取決于選擇的給藥途徑。當(dāng)口服給予治療有效量的活性劑時，組合物典型地是片劑，膠囊，粉末，溶液，或酏劑的形式。當(dāng)以片劑形式給予時，組合物可另外包含固體載體，如明膠或輔料。片劑，膠囊，和粉末包含約5%至約95%的本發(fā)明的活性劑，和優(yōu)選地約25%至約90%的本發(fā)明的活性劑。當(dāng)以液體形式給予時，可以添加液體載體，如水，石油，或動物或植物源的油。液體形式的組合物可進(jìn)一步包含生理鹽水溶液，葡萄糖或其它糖溶液，或二醇。當(dāng)以液體形式給予時，組合物包含約0.5%至約90wt%的活性劑，和優(yōu)選地約1%至約50%的活性劑。
[0051]當(dāng)通過靜脈內(nèi)，經(jīng)皮(cutaneous),或皮下(subcutaneous)注射給予治療有效量的活性劑時，組合物的形式是無熱原的、腸道外可接受的含水溶液。適當(dāng)考慮pH、等滲性、穩(wěn)定性等的情況下，制備這樣的腸道外可接受的溶液，在本領(lǐng)域技術(shù)的范圍之內(nèi)。用于靜脈內(nèi)，經(jīng)皮(cutaneous),或皮下(subcutaneous)注射的優(yōu)選的組合物典型地，除本發(fā)明的化合物外，包含等滲賦形劑。
[0052]合適的活性劑可以容易地與本領(lǐng)域眾所周知的藥用可接受的載體組合。這樣的載體能夠使活性劑配制成片劑、丸劑、糖錠、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、懸浮液等，以便受治療的患者口服攝取。通過將活性劑與固體賦形劑混合，任選研磨所得混合物，如果期望的話，加入適當(dāng)助劑后，加工顆?；旌衔?，得到片劑或糖錠芯，從而可以獲得口服用的藥物制劑。合適的賦形劑包括，例如，填料和纖維素制劑。如果期望的話，可以添加崩解劑。
[0053]可以配制活性劑以便通過注射(例如彈丸注射或連續(xù)輸注)胃腸外給藥。注射制劑可以以單位劑型例如在安瓿或以多劑量容器的形式提供，并且加有防腐劑。組合物的呈現(xiàn)形式可以是諸如在油性或水性賦形劑中的懸浮液、溶液或乳液形式，并且可包含諸如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑的配方試劑。
[0054]胃腸外給藥的藥物組合物包括水溶性形式的活性劑的含水溶液。另外，活性劑的懸浮液可以制成合適的油性注射懸浮液。合適的親脂溶劑或賦形劑包括脂肪族油或合成脂肪酸酯。水性注射懸浮液可以含有增加懸浮液粘度的物質(zhì)。任選地，懸浮液還可以含有適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑或提高化合物的溶解性并且允許制備高濃度溶液的試劑。備選地，本發(fā)明組合物可以是粉末形式，臨用前使用合適賦形劑如無菌無熱原的水配制。
[0055]活性劑也可在直腸組合物中配制，如栓劑或保留灌腸，例如包含常規(guī)的栓劑底物(bases)。除如前所述的制劑外，活性劑還可以配制成長效型制劑(depot preparation)。這樣的長效的制劑可以通過植入(例如，皮下或肌內(nèi)植入)或通過肌內(nèi)注射給予。因此，例如，活性劑可以用合適的聚合物或疏水性材料(例如配制成在可接受油中的乳液)或離子交換樹脂一起配制，或配制成微溶性衍生物，例如微溶性鹽。
[0056]特別地，活性劑可以以含賦形劑如淀粉或乳糖的片劑的形式，或以膠囊或胚珠(ovules)，單獨地或以與賦形劑混合的形式，或以含芳香劑或著色劑的酏劑或懸浮液的形式口服、面頰、或舌下給予。這樣的液體制劑可以用藥用可接受的添加劑，如懸浮劑制備。活性劑還可以腸道外，例如，靜脈內(nèi)，肌內(nèi)，皮下，鞘內(nèi)，腦池內(nèi)，或冠狀動脈內(nèi)注射。對于腸胃外給藥來說，活性劑最好以無菌的含水溶液的形式使用，無菌的含水溶液可以包含其它物質(zhì)，例如，鹽，或單糖，如甘露醇或葡萄糖，從而引起溶液與血液等滲。
[0057]對于獸醫(yī)使用來說，根據(jù)正常的獸醫(yī)實踐，以適當(dāng)可接受的制劑的形式給予活性劑。獸醫(yī)可以容易地確定最適合于特定動物的定量給藥方案和給藥途徑。 [0058]作為中樞作用抗高血壓藥的腎上腺素能劑可樂定是一種抗高血壓藥，其通過中樞α2-腎上腺素能受體起作用來降低平均動脈壓(MAP)，但它還作用于周圍性α-腎上腺素能受體(α-ARs)來產(chǎn)生血管收縮。內(nèi)皮素(ET)已經(jīng)顯示出調(diào)節(jié)周圍腎上腺素能受體的作用。本測試顯示了 ET參與可樂定和centhaquin的心血管效應(yīng)?？蓸范?10, 30,和90 μ g/kg, 1.v.)產(chǎn)生平均動脈壓(MAP),脈壓(PP)的劑量依賴性下降，和心率(HR)的降低。用ET-1處理(100，300和900叩/1^，丨1.)，顯著地以劑量依賴性方式減弱可樂定(lOyg/kg，1.V.)-誘發(fā)的MAP的降低。在用高劑量的ET-1 (900ng/kg, 1.V.)處理的大鼠中，可樂定產(chǎn)生了 MAP的42.58%增加，相比于未處理的大鼠。在用ET-1 (900ng/kg，1.V.)處理的大鼠中，可樂定(10 μ g/kg, 1.v.)產(chǎn)生了 HR的37.42%增加，相比于未處理的大鼠。相比于未處理的大鼠，ETa/b拮抗劑，TAK-044(lmg/kg, 1.ν.)，和ETa拮抗劑，BMS-182874(9mg/kg, 1.v.)分別地增強了可樂定的低血壓效應(yīng)達(dá)17.68% 和 4.81%。
[0059]還研究了 ET與centhaquin的相互作用，其產(chǎn)生了類似于可樂定的MAP的降低。centhaquin (0.05,0.15，和0.45mg/kg, 1.v.)產(chǎn)生MAP的劑量依賴性下降，和HR的降低。它沒有影響動脈血pH，p02和pC02。沒有改變血漿ET-1水平。用ET-1處理(100，300，和900ng/kg)顯著地以劑量依賴性方式減弱centhaquin (0.15mg/kg, 1.v.)_誘發(fā)的MAP的降低。在用900ng/kg劑量的ET-1處理的大鼠中，centhaquin產(chǎn)生了 MAP的33.48%增加，相比于未處理的大鼠。在用ET-1處理的大鼠中，centhaquin產(chǎn)生了 HR的21.44%增加，相比于未處理的大鼠。centhaquin的低血壓效應(yīng)顯著地增強,在用TAK-044 (lmg/kg)處理的大鼠中達(dá)16.48%，或者在用BMS-182874(9mg/kg)處理的大鼠中達(dá)30.67%，相比于未處理的大鼠。centhaquin-誘發(fā)的心動過緩顯著地增強，在用TAK-044處理的大鼠中達(dá)12.74%，或者在用BMS-182874處理的大鼠中達(dá)29.00%，相比于未處理的大鼠。 [0060]哌唑嗪，α -腎上腺素能受體拮抗劑，預(yù)處理(0.lmg/kg, 1.V.)完全阻斷可樂定，以及centhaquin的心血管效應(yīng)的ET-1誘發(fā)的變化。因此推斷出ET調(diào)節(jié)血管效應(yīng)腎上腺素能受體，導(dǎo)致可樂定和centhaquin的心血管效應(yīng)的改變。這是首次表明ET拮抗劑可以通過增加血管腎上腺素能受體對centhaquin的縮肌效應(yīng)的響應(yīng),增強可樂定和centhaquin,即腎上腺素能劑，的抗高血壓效應(yīng)。ET拮抗劑與可樂定或centhaquin，或其它腎上腺素能劑的組合因此是治療高血壓的有用的選擇。
[0061]材料和方法 動物
將重 250 至 300g 的雄性 Sprague-Dawley 大鼠(Harlan, Indianapolis, IN)放置至少4天，然后用于具有如下條件的房間中:受控溫度(23±1°C)，濕度(50±10%)和照明(上午6:00至下午6:00)。使食物和水連續(xù)可得。由機構(gòu)動物護(hù)理和使用委員會(InstitutionalAnimal Care and Use Committee)批準(zhǔn)實驗程序的動物護(hù)理和使用。全部麻醉和手術(shù)程序遵循由動物護(hù)理委員會(Animal Care Committee)制定的指南。
[0062]藥物和化學(xué)品
centhaquin:2_ [2-(4-(3-甲基(methy)苯基)-1-哌嗪基)乙基-喹啉(Central DrugResearch Institute, Lucknow, India),可樂定，哌唑嗪，烏拉坦(Sigma-AldrichSt Louis,MO, USA)，BMS-182874鹽酸鹽:(5-二甲基氨基)-N-(3，4-二甲基-5-異噁唑基)-1-萘磺酰胺鹽酸鹽)，ETa-特異性拮抗劑(Tocris Bioscience, Ellisville, MO, USA) ;TAK_044:環(huán)[D- α -天冬氨酰-3- [ (4-苯基哌嗪-1-基)羰基]-L-丙氨酰-L- α -天冬氨酰_D_2_ (2_噻吩基)甘氨酰-L-Leu-Cyl-D-色氨酰]二鈉(tryptophyl jdisodium)鹽)，ETA/B 非特異性措抗劑(Takeda Chemical Industries, Osaka,日本)，內(nèi)皮素-1 (Research BiochemicalsInternational, Natick, MA,美國)，內(nèi)皮素-1酶免疫測定分析(EIA)試劑盒(Catalog N0.900-020A, Assay Designs, Inc., Ann Arbor, MI,美國)。所使用的其它試劑是最高等級的市售可得品。
【權(quán)利要求】
1.2-[2-(4-(3-甲基苯基)-1-哌嗪基)乙基]-喹啉在制備用于治療疼痛的藥物中的用途。
2.權(quán)利要求1的用途，其中疼痛是慢性疼痛。
3.權(quán)利要求1的用途，其中疼痛是急性疼痛。
4.權(quán)利要求1的用途，其中疼痛是手術(shù)后疼痛。
5.權(quán)利要求1的用途，其中疼痛是神經(jīng)性疼痛。
6.2-[2-(4-(3-甲基苯基)-1-哌嗪基)乙基]-喹啉和阿片止痛藥在制備用于治療疼痛的藥物中的用途。
7.權(quán)利要求6的用途，其中阿片止痛藥選自阿片，嗎啡，硫酸嗎啡，可待因，磷酸可待因，硫酸可待因，二乙酰嗎啡，鹽酸嗎啡，酒石酸嗎啡，鹽酸二乙酰嗎啡，氫溴酸右美沙芬，重酒石酸二氫可待因酮，氫嗎啡酮，鹽酸氫嗎啡酮，酒石酸羥甲左嗎南，鹽酸羥嗎啡酮，鹽酸氧可酮，芬太尼，哌替啶，methodone,丙氧芬，右美沙芬，二氫可待因酮，氫嗎啡酮，左啡諾，羥嗎啡酮，羥考酮，左洛啡烷，其鹽，和其混合物。
8.權(quán)利要求6的用途，其中疼痛是手術(shù)后疼痛。
9.權(quán)利要求6的用途， 其中疼痛是神經(jīng)性疼痛。
【文檔編號】A61K31/496GK103989682SQ201410085543
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2010年4月29日 優(yōu)先權(quán)日:2009年4月30日
【發(fā)明者】A.古拉蒂 申請人:美國中西部大學(xué)