一種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群的提取方法及應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群的提取方法及其應(yīng)用。大黃、丹皮、赤芍、生地、三七按一定重量配比，粉碎后加水煎煮提取，提取液用二氯甲烷萃取后，水層再用正丁醇萃取，正丁醇萃取液回收干后為中藥提取物成分群。該中藥提取物用HPLC-MS分析由芍藥苷類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)、丹皮酚苷類(lèi)、蒽醌類(lèi)、芪類(lèi)、皂苷類(lèi)及環(huán)烯醚萜苷類(lèi)33個(gè)成分組成，能顯著降低自發(fā)性高血壓雄性大鼠神經(jīng)元特異性烯醇化酶、Ｓ-100β蛋白、IL-1、TNF-α、血漿纖維蛋白原水平，可用于制備治療出血性中風(fēng)藥物的用途。
【專(zhuān)利說(shuō)明】-種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群的提取方法及應(yīng)用 一、

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)是一種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群 的提取方法及其應(yīng)用。 二、

【背景技術(shù)】
[0002] 出血性中風(fēng)（腦出血）是國(guó)內(nèi)外臨床上常見(jiàn)的疾病，該病發(fā)病急驟，進(jìn)展迅速， 病死率高，患者預(yù)后情況直接影響到病后的生存質(zhì)量。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（SNE)和 S-ΙΟΟβ蛋白是判斷腦損害嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，其中，SNE是神經(jīng)元及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的 一個(gè)標(biāo)志酶，當(dāng)腦組織發(fā)生缺血缺氧時(shí)，腦脊液中SNE水平升高。S-ΙΟΟβ蛋白是腦特異性 蛋白，血清中S-ΙΟΟβ蛋白水平越高，腦損害程度越重。當(dāng)前西醫(yī)治療腦出血的方法為手術(shù) 治療和內(nèi)科綜合治療兩大類(lèi)，有一定危險(xiǎn)性且療效不夠顯著。
[0003] 中醫(yī)認(rèn)為出血性中風(fēng)源于血分瘀熱，搏擊不解，閉阻腦竅，而令邪熱愈熾，進(jìn)而化 火生風(fēng)生痰,造成瘀熱阻竅,故治療時(shí)以涼血散瘀、通腑泄熱為主。中藥大黃清熱瀉火、丹皮 涼血散瘀、赤芍涼血活血、三七通脈化瘀、生地滋陰清熱。因此，本發(fā)明用這些中藥組合物提 取制備中藥提取物，用自發(fā)性高血壓大鼠評(píng)價(jià)其抗炎、活血及防治腦損傷作用，用于治療出 血性中風(fēng)藥物的研發(fā)。 三、


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)臨床出血性中風(fēng)患者的需求，本發(fā)明的目的是提供一種具有治療出血性中風(fēng) 中藥提取物成分群的提取方法及其應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過(guò)以下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 1、一種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群的提取方法，提取步驟如下：
[0007] (1)原料藥：大黃1-5份、丹皮1-5份、赤芍1-5份、生地1-8份、三七1-6份；
[0008] (2)將上述原料藥粉碎至20-40目，加5-15倍量水提取兩次，合并濾液，濃縮至 0. 5-1. 5g生藥/ml，用1-3倍量二氯甲烷萃取3-6次，棄二氯甲烷層，水層再用1-3倍量正 丁醇萃取3-6次，合并正丁醇萃取液回收干為中藥提取物成分群；
[0009] (3)中藥提取物成分分析：用HPLC-MS分析中藥提取物的化學(xué)成分，主要由芍藥苷 類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)、丹皮酚苷類(lèi)、蒽醌類(lèi)、芪類(lèi)、皂苷類(lèi)及環(huán)烯醚萜苷類(lèi)33個(gè)成分組成。
[0010] 2、一種中藥提取物成分群在制備治療出血性中風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
[0011] 有益效果：
[0012] 本發(fā)明的中藥提取物成分群，主要由芍藥苷類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)、丹皮酚苷類(lèi)、蒽醌類(lèi)、芪 類(lèi)、皂苷類(lèi)及環(huán)烯醚萜苷類(lèi)33個(gè)成分組成，能顯著降低自發(fā)性高血壓大鼠神經(jīng)元特異性烯 醇化酶、S-100 β蛋白、IL-UTNF-α、血漿纖維蛋白原水平，可用于制備治療出血性中風(fēng)藥 物的用途。
[0013] 四、中藥提取物成分群的藥理試驗(yàn)
[0014] 1.造模及給藥
[0015] 自發(fā)性高血壓雄性大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，以Wistar雄性大鼠為空白對(duì)照 組（生理鹽水組），高血壓大鼠分別為模型組（生理鹽水組），陽(yáng)性對(duì)照組（阿司匹林組）、 中藥提取物高、低劑量組。將各組按IOmL Af1每天灌胃給藥1次，連續(xù)15天。第15天灌 胃給藥Ih后頸動(dòng)脈取血5ml于加有0. 038g ir1枸櫞酸鈉的離心管中，以3000r ?mirT1轉(zhuǎn) 速離心lOmin，取上層血漿，Elisa試劑盒測(cè)定大鼠 S-100B蛋白、NSE、IL-l、TNF-a、血漿纖 維蛋白原。
[0016] 統(tǒng)計(jì)采用SPSS13. O統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行雙樣本t檢驗(yàn)及方差分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 '-土s表不。
[0017] 2.對(duì) S-IOOB 和 NSE 的影響
[0018] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果（表1)表明：模型組S-IOOB和NSE較空白組顯著升高（P < 0.01)， 與模型組比較，陽(yáng)性對(duì)照組及中藥提取物不同劑量組可顯著降低S-IOOB和NSE水平（P < 0· 01)。
[0019] 表1中藥提取物對(duì)S-IOOB和NSE的影響（r±s, n=8)
[0020]

【權(quán)利要求】
1. 一種治療出血性中風(fēng)中藥提取物成分群的提取方法，提取步驟如下： (1) 原料藥：大黃1-5份、丹皮1-5份、赤芍1-5份、生地1-8份、三七1-6份； (2) 將上述原料藥粉碎至20-40目，加 5-15倍量水提取兩次，合并濾液，濃縮至 0. 5-1. 5g生藥/ ml，用1-3倍量二氯甲烷萃取3-6次，棄二氯甲烷層，水層再用1-3倍量正 丁醇萃取3-6次，合并正丁醇萃取液回收干為中藥提取物成分群； (3) 中藥提取物成分分析：用HPLC-MS分析中藥提取物的化學(xué)成分，主要由芍藥苷類(lèi)、 鞣質(zhì)類(lèi)、丹皮酚苷類(lèi)、蒽醌類(lèi)、芪類(lèi)、皂苷類(lèi)及環(huán)烯醚萜苷類(lèi)33個(gè)成分組成。
2. 如權(quán)利要求1所述的中藥提取物成分群在制備治療出血性中風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P9/10GK104435318SQ201410734891
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月4日
【發(fā)明者】尹蓮, 李國(guó)春, 黃西, 吳勉華, 程海波 申請(qǐng)人:南京中醫(yī)藥大學(xué)