專利名稱：一種全天然解香煙毒保健品及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有消除香煙毒素的保健品，具體地說是以藥膳同源的天然食用植物為原料制備的天然保健品，本發(fā)明還涉及該保健飲品的制備方法。
通過流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)吸煙不僅可以引起肺癌、口腔癌和食道癌，甚至還可以導(dǎo)致胃癌、膀胱癌、子宮癌和腎癌。吸煙是怎樣引起這些癌癥的呢？過去人們一直認(rèn)為吸煙的毒性來自尼古丁，尼古丁確實(shí)是一種有毒的物質(zhì)。食入少量即可引起腹瀉、嘔心和痙攣，甚至導(dǎo)致神志不清。但是，到目前為止，還沒有人報(bào)道過尼古丁和幾種癌有什么直接關(guān)系。而最近研究表明，分布在吸煙的焦油和氣相煙霧中的大量自由基是非?；顫姷?，它們可以直接或間接地攻擊細(xì)胞成分、殺傷細(xì)胞，導(dǎo)致疾病和癌癥的發(fā)生。所謂直接(毒性)作用就是吸煙中的某些自由基可以直接損傷細(xì)胞成分，導(dǎo)致疾病的產(chǎn)生和癌的形成，焦油相中的多環(huán)芳香烴自由基就是一類直接致癌物，它可以引起多種癌的發(fā)生。焦油相中的Q./QH.自由基與氧氣可以引起細(xì)胞損傷，導(dǎo)致一系列嚴(yán)重疾病和癌的發(fā)生。同時(shí)Q./QH.還可以直接與細(xì)胞的DNA結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化。吸煙氣相中的烷基和烷氧基自由基反應(yīng)性極強(qiáng)，它可以引起細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，損傷細(xì)胞膜，導(dǎo)致多種疾病和癌的發(fā)生。所謂間接(毒性)作用是指吸煙焦油相和氣相中的自由基可以引起嗜中性細(xì)胞在肺和氣囊中聚積，并能激活它們產(chǎn)生大量活性氧自由基，這些高反應(yīng)活性的氧自由基再損傷細(xì)胞，導(dǎo)致癌和疾病的發(fā)生。另外，吸煙中的自由基可以使肺細(xì)胞中的蛋白酶抑制劑去活性，這樣就等于活化了肺細(xì)胞中的蛋白酶(主要是膠原蛋白酶)，蛋白酶的活化進(jìn)而水解肺細(xì)胞的膠原蛋白和其它蛋白，使細(xì)胞損傷，導(dǎo)致疾病的產(chǎn)生。因此，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對(duì)吸煙中自由基的研究，并我出有效的方法來清除吸煙中的自由基對(duì)人類健康的危害性。
我國學(xué)者忻文娟長期從事香煙對(duì)人體健康危害的探索。她認(rèn)為，既然至今世界上還未找到戒煙的有效辦法，何不從解煙毒的思路找新的途徑。這一課題目前世界上也只有少數(shù)先進(jìn)國家在進(jìn)行研究。但應(yīng)用藥物防治吸煙所致機(jī)體損傷，目前尚未見報(bào)道。
本發(fā)明的目的在于提供一種保健品，該保健品為吸煙人服用后能增加機(jī)體對(duì)香煙煙霧及其有害物質(zhì)損傷的防御機(jī)能，保護(hù)和修復(fù)機(jī)體細(xì)胞，防治吸煙過多導(dǎo)致的呼吸道粘膜損傷，肺心腦血管病理改變，脂質(zhì)過氧化物升高，SOD活性及免疫功能下降。同時(shí)，該保健品對(duì)自由基有相當(dāng)良好的清除作用，提高機(jī)體對(duì)缺氧的耐受性，使致癌物苯并(α)芘滅活?？傊?，該保健品應(yīng)能有效清除因吸煙產(chǎn)生的自由基對(duì)人類健康帶來的危害性。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該保健品的制備方法。
本發(fā)明的解決方案是基于本發(fā)明人通過長期觀察，發(fā)現(xiàn)在自然界中存在的動(dòng)物自救現(xiàn)象，從中得到啟迪；吸煙對(duì)人體所帶來的危害不是局部的，而是廣泛性、多組織多器官的損害；我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的中醫(yī)整體觀念等方面原則，我國有著豐富的藥膳同源的天然食用植物資源，從中篩選出具有清熱解毒、活血化瘀、扶正固本、培補(bǔ)元?dú)獾茸饔玫奶烊皇秤弥参?，根?jù)中醫(yī)理論組方，提取精華，使其達(dá)到調(diào)節(jié)機(jī)體全身生理活動(dòng)的機(jī)能。能增加機(jī)體對(duì)香煙煙霧及其有害物質(zhì)損傷的防御機(jī)能，保護(hù)和修復(fù)機(jī)體細(xì)胞，防治吸煙過多導(dǎo)致的呼吸道粘膜損傷，肺心腦血管病理改變，脂質(zhì)過氧化物升高，SOD活性及免疫功能下降。同時(shí)，該保健品對(duì)自由基有相當(dāng)良好的清除作用，提高機(jī)體對(duì)缺氧的耐受性，使制癌物苯并(α)芘滅活。
本發(fā)明保健品是由下列組分制成的(用量為重量份)①苦苣8-25份①薏苡仁10-30份 ①枸杞子10-25份①山楂13-26份①何首烏5-18份 ①黃精4.5-15份①松子2-8份①白芍5-13份①靈芝2-6份 ①豬毛菜6-25份①菟絲子3-10份 ①老鸛草4-8份①桔梗菜10-25份 ①丹參8-24份 ①麥冬7-24份 ②淫羊藿8-24份①黨參7-21份①金銀花10-25份 ①百合8-28份 ①生姜10-20份①瓜萎8-26份②當(dāng)歸3-10份 ②抱莖苦荬菜8-28份 ②五味子5-16份②陳皮8-26份制備本發(fā)明保健品的配方優(yōu)選重量配比范圍是①苦苣12.5-18份 ①薏苡仁13-20份 ①枸杞子10-18份①山楂8-21份①何首烏8-12份 ①黃精7.5-11份①松子2.5-3.5份①白芍7.5-10份①靈芝3-4份 ①豬毛菜10-20份 ①菟絲子4-8份 ①老鸛草5-7.5份①桔梗菜13-19份 ①丹參10-20份 ①麥冬12-17份 ②淫羊藿12-18份①黨參12.5-18份 ①金銀花12,5-20份 ①百合10-20份 ①生姜10-20份①瓜蔞12-20份 ②當(dāng)歸5-8份 ②抱莖苦荬菜12-18份 ②五味子8-11份②陳皮12-18份本發(fā)明保健品的最佳重量配比是①苦苣5份 ①薏苡仁5份①枸杞子5份 ①山楂5份①何首烏3份①黃精3份 ①松子1份 ①白芍3份①靈芝1份 ①豬毛菜5份①菟絲子2份 ①老鸛草2份①桔梗菜5份①丹參5份 ①麥冬5份 ②淫羊藿5份①黨參5份 ①金銀花5份①百合5份 ①生姜5份①瓜蔞5份 ②當(dāng)歸2份 ②抱莖苦荬菜5份 ②五味子3份②陳皮5份將上述各組份制成本發(fā)明保健品的生產(chǎn)方法是按以下生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)考慮到成品的口感，所以將配方中的成分分為兩部份，其一部份(配方中標(biāo)①，即原料1)加工成液體劑型，另一部份(配方中標(biāo)②，即原料2)制成固體劑型。
1， 原料1↓清洗凈料↓加水，100℃蒸煮兩次，第一次加水8倍，第二次加水6倍。
↓每次蒸煮1.5-2小時(shí)，后4層紗布過濾↓將以上兩次所得濾液混合濾液↓將濾液濃縮至原量的二分之一。
↓(加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)，去沉淀)上清液↓(蒸發(fā)，回收乙醇)母液↓按0.02％的量加入高蛋白糖后溶解后過濾營養(yǎng)液↓灌裝，經(jīng)105蒸汽滅菌30分鐘、冷卻、↓清洗外瓶、涼干、貼簽、包裝成品
2，原料2↓清洗凈料↓加水，100℃蒸煮兩次，第一次加水8倍，第二次加水6倍。
↓每次蒸煮1.5-2小時(shí)，后4層紗布過濾↓將以上兩次所得濾液混合濾液↓將濾液濃縮至原量的二分之一。
↓(加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)，去沉淀)上清液↓(蒸發(fā)，回收乙醇)濃縮液 濃縮液相對(duì)密度為1.30-1.33↓加淀粉拌勻，烘干并粉碎至通過120目篩粉料↓裝膠囊或制成糖衣片劑、壓板成品3，將以上液體成品及膠囊或片劑成品裝C式拖盤盒內(nèi)而成本發(fā)明之產(chǎn)品。
4，每次服用一支營養(yǎng)液(10ml)和兩粒膠囊或片劑，一日兩至三次。
本發(fā)明的保健品經(jīng)測(cè)定(全配方測(cè)定)，蛋白質(zhì)、維生素及微量元素含量如下表1 JYD營養(yǎng)液蛋白質(zhì)及維生素含量的測(cè)定結(jié)果mg/100g mg/100g g/100g維生素A -維生素B1 0.02水份 75.5維生素B2 0.09維生素B6 0.07蛋白質(zhì)1.7維生素C 811.0維生素E 0.32尼克酸1.36葫蘿卜素 6.66表2 JYD營養(yǎng)液微量元素含量的測(cè)定結(jié)果μg/ml μg/mlμg/mlFe 43.10 Zn3.80Ca1501.0Cu 0.46 Mn9.97Mg 549.0K 428.7 Na 1636.5 P 492.5Se 0.020μg/g本發(fā)明各項(xiàng)檢驗(yàn)、檢測(cè)結(jié)果表明，有下述優(yōu)點(diǎn)1，JYD毒理學(xué)試驗(yàn)JYD對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，JYD對(duì)兩種小鼠的急性毒性試驗(yàn)的LD50均大于10g/kg體重，根據(jù)急性毒性分級(jí)，JYD屬于實(shí)際無毒物。
致畸變?cè)囼?yàn)結(jié)果表明，JYD對(duì)動(dòng)物骨髓細(xì)胞不產(chǎn)生畸變作用。
小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)結(jié)果表明JYD對(duì)動(dòng)物精子不產(chǎn)生畸變作用。
Ames氏試驗(yàn)結(jié)果表明JYD對(duì)TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗(yàn)菌株，無論是直接作用還是代謝活化作用，均未呈現(xiàn)致突變性。
2，JYD解除香煙毒的作用通過自由基、微核、Amest和SCE實(shí)驗(yàn)，將其檢測(cè)數(shù)據(jù)列表并作相應(yīng)分析組別 陰性對(duì)照組 試驗(yàn)組 陽性對(duì)照組 治療組(正常) (JYD) (香煙凝集物) (JYD＋香煙疑集物體外肝組織中MDA含量32.8±3.24.2±0.855.7±3.53.6±1.8(nmol/克組織)體內(nèi)肝組織中MDA含量3.05±0.51.35±0.4 3.78±0.81.68±0.4(nmol/gw)體內(nèi)腦組織中MDA含量3.86±0.72.02±0.4 4.51±0.92.47±0.3(nmol/gw)體內(nèi)肝組織中SOD相對(duì)活性 19.8±1.731.7±1.8 15.4±1.225.1±2.2體內(nèi)腦組織SOD相對(duì)活性 5.35±0.711.46±1.1 4.19±0.7 7.23±0.6骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核數(shù)(1000個(gè)細(xì)胞) 4.21.69.5 3.5Ames回變 TA98 22 17 數(shù)目太多無法計(jì)數(shù) 14菌落數(shù) TA100 90 64 數(shù)目太多無法計(jì)數(shù) 64人外周血淋巴細(xì)胞組妹染色 4.96±2.175.12±1.76 16.44±5.26 9.28±6.26單體交換(SCE)頻率1)香煙凝集物(煙毒)中的自由基等有害成份，能使小鼠體外和體內(nèi)肝，腦組織中脂質(zhì)過氧化物(LPO)的代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量顯著增加。加入一定劑量的JYD后，相對(duì)陰性對(duì)照組來說，除能全部清除煙毒產(chǎn)生的MDA外，尚可大幅度降低動(dòng)物肝、腦組織本身的MDA含量(最大清除率為80.8％)。JYD對(duì)正常動(dòng)物組織本身的MDA含量清除力也極強(qiáng)，最大清除力可達(dá)87.4％。
2)煙毒對(duì)超氧化物歧化酶(SOD)有明顯降低作用，加入JYD后活力大幅度上升，明顯高于陰性對(duì)照組，腦組織中SOD活性增強(qiáng)率達(dá)135.1％。上述結(jié)果提示JYD有解煙毒，增強(qiáng)智力和抗衰老等作用。
3)煙毒可使小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率上升，使人外周血淋巴細(xì)胞的姐妹染色單體互換(SCE)頻率升高，使鼠傷寒沙門氏桿菌TA98、TA100回復(fù)突變菌落數(shù)增加，說明煙毒有明顯的遺傳學(xué)毒性。同時(shí)加入JYD后，上述各項(xiàng)指標(biāo)均降至正常范圍內(nèi)，提示JYD有很強(qiáng)的抗香煙誘變作用。
3，JYD對(duì)血流動(dòng)力學(xué)、血管反應(yīng)性和心、肺功能的作用，由實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)1)JYD可明顯降低由吸煙和缺氧引起的肺動(dòng)脈高壓，持續(xù)兩小時(shí)以上。吸煙引起肺動(dòng)脈高壓是肺心病的主要原因，此結(jié)果說明可用于肺心病的防治。
2)JYD可抑制由缺氧引起的腦血管擴(kuò)張。腦血管擴(kuò)張導(dǎo)致顱內(nèi)壓增高是肺性腦病的重要原因。此結(jié)果說明JYD可用于肺性腦病的防治。
3)JYD可增強(qiáng)心肌的收縮功能和舒張功能，可能對(duì)心臟病患者有益。
4)JYD可降低動(dòng)脈血二氧化碳分壓，說明有增強(qiáng)腦通氣的作用，對(duì)治療某些呼吸衰竭病人有利。
JYD對(duì)其他指稱如肺分流量、心輸出量、體動(dòng)脈壓、體血管阻力等無明顯影響。
4，JYD對(duì)腦功能的影響，由小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)JYD對(duì)小鼠條件反射的建立、學(xué)習(xí)能力和記憶功能無明顯影響，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)JYD對(duì)中樞神經(jīng)有抑制作用，故增加實(shí)驗(yàn)，研究其止驚和鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)JYD具明顯抑制由士的寧引起的驚厥和由冰醋酸引起的疼痛作用。
5，JYD對(duì)缺氧耐受性的影響，由小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)三種類型的急性缺氧(低張性缺氧、血液性缺氧、組織性缺氧，部份明顯提高機(jī)體的耐受性的作用。由于缺氧是許多疾病引起組織損傷和死亡的重要原因，故JDY增強(qiáng)對(duì)缺氧的耐受性的作用對(duì)許多病人有好處。
6，JYD對(duì)免疫功能的影響，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)
由香煙及環(huán)磷酰胺引起的四項(xiàng)免疫指標(biāo)(NK活性、IL-2活性、Ig、TNF)下降，用JYD可使這四項(xiàng)指標(biāo)升高，即可增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，說明JYD可能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)傳染病和腫瘤的抵抗力。
7，JYD對(duì)呼吸道炎癥的影響，由大鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)JYD可明顯減輕由吸煙引起的呼吸道損傷(纖毛紊亂和脫落)，說明JYD有防治由吸煙引起的慢性支氣管炎的作用。
8，JYD對(duì)肺癌的作用，由大鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)JYD能抑制肺腺癌細(xì)胞的增殖及移植性實(shí)體瘤生長，但對(duì)肺癌生長轉(zhuǎn)移無明顯影響。說明JYD具有一定的抗癌作用。
以上可見JYD在不同程度上減輕吸煙對(duì)肺、心血管、免疫功能的損傷，抑制腫瘤的生長，增強(qiáng)對(duì)缺氧的耐受性，并有止驚和鎮(zhèn)痛作用。實(shí)施例按下述配比稱取原料①苦苣4.5千克①薏苡仁5.0千克 ①枸杞子4.2千克①山楂4.2千克①何首烏2.5千克 ①黃精2.5千克①松子0.8千克 ①白芍2.4千克①靈芝1.0千克①豬毛菜4.2千克 ①菟絲子1.5千克①老鸛草1.8千克①桔梗菜4.0千克 ①丹參4.3千克①麥冬4.0千克 ①淫羊藿4.5千克①黨參4.0千克①金銀花3.8千克 ①百合4.3千克 ①生姜4.0千克①瓜萎4.2千克②當(dāng)歸1.5千克②抱莖苦荬菜4.0千克①五味子2.5千克②陳皮4.3千克將上述各組份制成本發(fā)明保健品的生產(chǎn)方法是按以下生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)考慮到成品的口感，所以將配方中的成分分為兩部份，其一部份(配方中標(biāo)1，即原料1)加工成液體劑型，另一部份(配方中標(biāo)2，即原料2)制成固體劑型。
1，原料1中的成分經(jīng)清洗成凈料，加水后100℃蒸煮兩次，第一次加水10倍，第二次加水8倍，每次1.5-2小時(shí)后4層紗布過濾，兩次所得濾液混合。濾液中加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)去沉淀，對(duì)上清液蒸發(fā)，回收乙醇后得到母液。濾液被濃縮至原量的1/2。按0.02％的量加入高蛋白糖后溶解后過濾而成營養(yǎng)液，經(jīng)灌裝，105℃蒸汽滅菌30分鐘、冷卻、清洗外瓶、涼干、貼簽、包裝。
2，原料2中的成分經(jīng)清洗成凈料，加水后100℃蒸煮兩次，第一次加水10倍，第二次加水8倍，每次1.5-2小時(shí)后4層紗布過濾，兩次所得濾液混合。濾液中加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)去沉淀，對(duì)上清液蒸發(fā)，回收乙醇后得到濃縮液。濾液被濃縮至原量的1/2，相對(duì)密度為1.30-1.33。加淀粉拌勻，烘干并粉碎至通過120目篩，粉料可裝裝膠囊或加輔料制片、壓板。
3，將以上液體成品及膠囊或片劑成品裝C式拖盤盒內(nèi)而成本發(fā)明之產(chǎn)品。試驗(yàn)1JYD對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)選用健康昆明種小鼠20只，雌雄各半，進(jìn)性試驗(yàn)。小鼠體重為18-22g克。以10g/kg體重的劑量進(jìn)行灌胃，用蒸餾水稀釋樣品至所需濃度，小鼠灌胃量按20g體重0.4ml計(jì)算，連續(xù)觀察兩周，未見小鼠出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，也無死亡。該受試物對(duì)兩種小鼠的急性毒性試驗(yàn)的LD50均大于10g/kg體重，根據(jù)急性毒性分級(jí)，JYD屬于實(shí)際無毒物。試驗(yàn)2JYD致突變?cè)囼?yàn)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)采用間隔24小時(shí)兩次經(jīng)口灌胃法進(jìn)性試驗(yàn)。用體重25-30克小白鼠50只，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。以40mg/kg體重劑量的環(huán)磷酰胺為陽性對(duì)照，蒸餾水為陰性對(duì)照，受試物劑量為2.5、5.0、10.0g/kg體重，用蒸餾水配至所需濃度，每天灌胃一次，連續(xù)5天，末次給受試物后6小時(shí)脫頸處死動(dòng)物，取胸骨骨髓用小牛血清稀釋涂片，經(jīng)甲醇固定，Giemsa染色。在光學(xué)顯微鏡下，每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞(PRC)，微核發(fā)生率以含微核的PRC千分率計(jì)，按Poisson分布求95％可信限，最后進(jìn)行u檢驗(yàn)。
表 JYD對(duì)小鼠骨髓微核發(fā)生率的影響性別劑量(g/kg體重) 動(dòng)物數(shù) 檢查細(xì)胞數(shù) 微核數(shù) 微核千分率0(JYD) 55000 10 2.02.5(JYD) 55000 6 1.2雄 5.0(JYD) 55000 7 1.4
10.0(JYD) 5500071.440mg/kg體重(CP)55000 13527.0*0 (JYD) 5500071.42.5(JYD) 5500071.4雌 5.0(JYD) 5500091.810.0(JYD) 5500061.240mg/kg體重(CP) 55000119 23.8**與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.001)由表可見，JYD試驗(yàn)組與陰性對(duì)照組比較無顯著性差異，而環(huán)磷酰胺為陽性對(duì)照組與陰性對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.001)。結(jié)果表明JYD對(duì)動(dòng)物骨髓細(xì)胞不產(chǎn)生畸變作用。
試驗(yàn)3小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)用體重25-30克小白鼠50只，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。以40mg/kg體重劑量的環(huán)磷酰胺為陽性對(duì)照，蒸餾水為陰性對(duì)照，受試物劑量為2.5、5.0、10.0g/kg體重，用蒸餾水配至所需濃度，每日灌胃一次，連續(xù)5天，末次給受試物后30天處死動(dòng)物，取附睪制片，伊紅染色。每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)結(jié)構(gòu)完整的精子，計(jì)算畸變精子發(fā)生率，用Wilcoson法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。
表 JYD對(duì)小鼠精子畸形發(fā)生率的影響劑量(g/kg體重) 動(dòng)物數(shù) 檢查精子數(shù) 精子畸形數(shù) 畸變率0(JYD)5 5000 821.642.5(JYD) 5 5000 871.745.0(JYD) 5 5000 841.6810.0(JYD) 5 5000 851.7040mg/kg體重(CP) 5 5000 257 5.14**與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.001)結(jié)果表明，JYD對(duì)小鼠精子畸形發(fā)生率未產(chǎn)生明顯改變，受試物各劑量組小鼠精子畸形率與陰性對(duì)照組比較無顯著差異，而陽性對(duì)照組與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.001)。JYD對(duì)動(dòng)物精子不產(chǎn)生畸變作用。試驗(yàn)4
JYD抗動(dòng)物脂質(zhì)過氧化作用和增強(qiáng)超氧化物歧化酶活性的研究1.體外實(shí)驗(yàn)按文獻(xiàn)1.2的方法加以改進(jìn)，取小鼠肝勻漿，測(cè)定JYD抗氧化能力及有效劑量。
2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)把小鼠隨機(jī)分組，每組10只，具體分組如下表1動(dòng)物分組及用藥劑量分組代號(hào) 藥物 劑量陽性組 A煙毒 5.6ug/gw空白組 B蒸餾水 ------大劑量組 EJYD 5mg/gw大劑量治療組 G煙毒＋JYD 5.6ug/gw＋5mg/gw陰性組 H維生素E 25ug/gw注喂藥5天。gw表示每克動(dòng)物體重。
動(dòng)物按表1分組及劑量，每天灌胃一次，連續(xù)5天，第二批動(dòng)物連續(xù)16然后處死動(dòng)物，然后按句海松等人的方法測(cè)其肝，腦組織中的LPO含量(即對(duì)LPO產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物MDA的抑制率)及按向淼鑫等人的方法檢測(cè)SOD活性。
1.體外結(jié)果小鼠肝組織勻漿體外經(jīng)JYD及煙毒處理后，其JYD本身的抗氧化能力及清除煙毒的能力見表2和表3。
表2JYD對(duì)小鼠體外肝組織的抗氧化作用組別劑量(ug/ml)LP0(nmol/ml)抑制率(％)對(duì)照 --- 32.8±3.2---JYD 3000 4.2±0.8**87.4±1.5JYD 1000 12.9±1.5*60.8±2.1JYD300 28.2±2.1*14.3±1.1JYD100 29.4±2.5*10.6±0.9VitE30 4.4±0.5 86.6±1.8*與對(duì)照P＜0.01**與Vite P＞0.05表3JYD對(duì)小鼠體外肝組織中煙毒引起LPO的清除作用組別 劑量(ug/ml)LPO(nmol/ml)清除率(％)煙毒組 758 55.7±3.5*---空白組 --- 32.8±3.2 ---煙毒組＋JYD758＋30006.3±1.2*100*與空白組P＜0.012.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果JYD對(duì)小鼠體內(nèi)肝，腦組織中的LPO清除能力和對(duì)煙毒引起的LPO抑制效果以及對(duì)肝，腦組織中SOD活性的影響見表4-表7。
表4JYD對(duì)小鼠體內(nèi)腦組織中LPO清除及解煙毒作用LPO(nmol/ml) 清除率(％) 解煙毒(％)組別Sd 16d Sd 16d Sd16dA 4.5±0.9 8.6±1.5 --- ------ ---B 2.9±0.7 4.5±1.1 --- ------ ---E 2.1±0.4 1.5±0.4 46.2±1.8 66.7±5.7 --- ---G 2.5±0.3 3.5±1.1 --- ---100** 100***與B P＜0.01；**與A P＜0.01表5JYD對(duì)小鼠體內(nèi)肝組織中LPO的清除及解煙毒作用LPO(nmol/ml) 清除率(％) 解煙毒(％)組別Sd 16d Sd16d Sd 16dA 3.9±0.8 6.7±1.2 --- --- --- ---B 3.1±0.5 3.8±0.9 --- --- --- ---E 1.4±0.4 0.9±0.2 54.8±2.5 76.3±4.2--- ---G 1.7±0.4 1.8±0.9 --- --- 100**100***與B P＜0.01；**與A P＜0.01表6JYD對(duì)小鼠體內(nèi)腦組織中SOD活性影響及解煙毒作用SOD相對(duì)活性 SOD活性增強(qiáng)率(％)解煙毒(％)組別5d 16d 5d 16d 5d 16dA 4.2±0.7 3.9±0.5 --- --- --- ---B 5.4±0.7 0.1±0.6 --- --- --- ---E 11.5±1.1 10.5±1.2 113.0±10.2* 100.9±7.2* --- ---G 7.2±0.6 8.7±0.7 --- ---100** 100***與B P＜0.01；**與A P＜0.01
表6JYD對(duì)小鼠體內(nèi)肝組織中SOD活性影響及解煙毒作用SOD相對(duì)活性SOD活性增強(qiáng)率(％) 解煙毒(％)組別5d16d 5d 16d 5d 16dA 15.4±1.2 14.5±1.5 --- --- --- ---B 19.8±1.1 21.2±1.4 --- --- --- ---E 31.7±1.8 35.1±3.0 60.3±2.4* 65.6±3.2* --- ---G 25.1±2.2 28.2±1.6 --- --- 100**100***與B P＜0.01； **與A P＜0.01一.本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行體內(nèi)LPO和SOD測(cè)定，結(jié)果表明JYD對(duì)小鼠肝，腦組織體外和體內(nèi)LPO都有明顯的清除能力(P＜0.01)，并呈劑量效應(yīng)關(guān)系。體外實(shí)驗(yàn)有效劑量范圍在100-3000ug/ml在此劑量范圍內(nèi)對(duì)LPO清除率達(dá)87.4％。
二.JYD對(duì)體外組織由香煙凝集物引起的LPO的增多有極為明顯的清除作用。在本實(shí)驗(yàn)的劑量范圍內(nèi)除可全部清除由香煙凝集物引起的LPO含量外，還可大幅度降低組織內(nèi)的LPO的濃度。
三.JYD對(duì)小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明不同劑量組對(duì)其肝，腦組織中LPO都有明顯的清除作用(P＜0.01)，且具量效關(guān)系。劑量越大清除率越高。實(shí)驗(yàn)證明，JYD有全部清除煙毒引起的LPO的含量，也可大幅度降低機(jī)體內(nèi)LPO的濃度，這與體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。
四.實(shí)驗(yàn)表明，三個(gè)不同JYD含量中SOD相對(duì)活性與對(duì)照相比有明顯升高(P＜0.01)，特別對(duì)腦中SOD活性升高更明顯，達(dá)113.8％。而在煙毒作用后再補(bǔ)JYD，其SOD活性能增加到正常水平以上。說明JYD能對(duì)抗煙毒對(duì)SOD的損害和用，提示JYD有解煙毒，增強(qiáng)腦細(xì)胞功能以及抗衰老等功能。參考文獻(xiàn)1，句海松等，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1989，24(11)807-812.2，向淼鑫等，中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1990，13(1)19-21.3，董偉等，生物化學(xué)與生物物理學(xué)進(jìn)展，1986，635.4，謝京兒等，第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1989，10(5)113-116.試驗(yàn)5JYD對(duì)小鼠骨髓嗜多紅細(xì)胞微核的影響及降低香煙凝集物誘發(fā)微核率的研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用健康成熟的昆明小鼠，體重18--25g，雌雄各半，由同濟(jì)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，經(jīng)檢疫一周后隨機(jī)分為七組，每組10只(雌、雄各半)，給藥設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組分別為5mg/gw、1mg/gw、0.2mg/gw設(shè)陽性對(duì)照組劑量為5.6ug/gw(香煙凝集物)，陰性對(duì)照組(雙蒸水)；另設(shè)高、低劑量組加香煙凝集物(5.6ug/gw)給藥方法灌胃，各劑量組連續(xù)五天給藥，24小時(shí)后取材制片然后用1ml胎牛血清沖洗骨髓至離心管內(nèi)1000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，棄上清液，取管底骨髓涂片，甲醇固定染色鏡檢。在骨髓涂片中，選擇細(xì)胞分布良好的區(qū)域，觀察和統(tǒng)計(jì)嗜多染紅細(xì)胞中帶有微核細(xì)胞的出現(xiàn)率稱為微核率。每個(gè)小鼠各觀察1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，結(jié)果以千分率(‰)表示。各劑量組誘發(fā)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率見表表1 連續(xù)5天給藥小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率組劑量 動(dòng)物數(shù)受檢細(xì)胞數(shù) 微核 微核/細(xì)胞mg/gw 數(shù) P值別-ug/gw (只) (個(gè))(個(gè)) 均值 標(biāo)準(zhǔn)誤JYD 5 10 10,000 161.6 0.45 ＞0.05(a)JYD 1 10 10,000 242.4 0.63 ＞0.05(a)JYD0.2 10 10,000 272.7 0.3 ＞0.05(a)陽性對(duì)照組 5.6ug/gw 10 10,000 959.5 0.68 ＜0.01(b)陰性對(duì)照組 雙蒸水 10 10,000 424.2 1.06 ＞0.05(c)JYD 5 10 10,000 353.5 0.56 ＞0.05(d)陽性對(duì)照組 5.6JYD 0.2 10 10,000 444.4 0.58 ＞0.05(d)陽性對(duì)照組 5.6a JYD三個(gè)劑量組比核b陽性對(duì)照組與JYD三個(gè)劑量組比較C陰性對(duì)照組與JYD三個(gè)劑量組比較d JYD(高、低＋香煙凝集物)二個(gè)劑量組分別與陽性，陰性對(duì)照組比較。結(jié)果連續(xù)五天給藥，結(jié)果(見表)表明，各劑量組5mg/gw，1mg/gw，0.2mg/gw微核率分別為1.6±0.45，2.4±0.63，2.7±0.3三者相互比較無顯著差異(P＞0.05)未發(fā)現(xiàn)JYD隨著劑量增高或給藥次數(shù)增加，微核率有隨之增高趨勢(shì)，且各實(shí)驗(yàn)組分別與陽性對(duì)照組9.5±0.68之間比較有顯著差異(P＜0.01)且各實(shí)驗(yàn)組分別與陰性對(duì)照組4.2±1.06之同無顯著差異(P＞0.05)，提示，JYD高氏添加劑無明顯誘變作用，為陰性結(jié)果；高低劑量組(分別加香煙凝集物)與陽性對(duì)照組有顯著差異(P＜0.01)，與陰性對(duì)照組比較無顯著差異(P＞0.05)。提示JYD既無明顯誘變作用，又有降低香煙凝集物誘發(fā)微核率的作用。試驗(yàn)6JYD濾液對(duì)人體外周血淋巴細(xì)胞姐妹染色單體交換(SCE)頻率的形響，以及降低香煙凝聚物(CSC)誘發(fā)的SCE頻率的研究取IN NaOH加入JYD溶液中，調(diào)節(jié)其PH值至7.0，置于離心管中，3000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘。取上清液經(jīng)0.22in微孔濾膜慢正壓過濾，所得濾液即為待測(cè)物。
香煙凝聚物(CSC)購自武漢卷煙廠，每件玻璃纖維濾膜上吸附有5支《紅雙喜》牌香煙的凝聚物。重113.75mg。加二甲基亞砜10ml溶解二小時(shí)，取部分浸出液作陽性對(duì)照物。
淋巴細(xì)胞培養(yǎng)與色體制備每毫升培養(yǎng)物含RMP 1640培養(yǎng)基0.9ml(小牛血清占20％，青霉素100單位，鏈霉素100ug)健康獻(xiàn)血員外周靜脈血(肝素抗凝)0.1ml，植物凝素(PHA)，37℃恒溫培養(yǎng)24小時(shí)后加入BrdV 10ug，再分別按表1、表2中劑量加入各種藥物，每培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)物的部體積為4ml，繼續(xù)培養(yǎng)44小時(shí)，加秋水仙素，4小時(shí)后終止培養(yǎng)。離心后去上清液，加0.07MKc17ml低摻15分鐘，加1ml固定液(甲醇∶冰醋酸＝3∶1)預(yù)固定，離心后上清液，再用固定液固定兩次，將細(xì)胞懸液滴在潔凈的冰濕載片上，經(jīng)火焰烘干制成染色體標(biāo)本。將標(biāo)本于37℃放置24小時(shí)，用紫外線加Giemse染色(UPG法)。每份標(biāo)本觀察25個(gè)分散適中，色差分明的第二周期中期分裂相，計(jì)數(shù)SCE頻率，在末端和著絲點(diǎn)交換計(jì)數(shù)一次。中間交換者計(jì)數(shù)二次，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
表1 JYDL對(duì)SCE頻率的影響組別JYDL終濃度SCE/細(xì)胞P值ul/ml陰性對(duì)照(生理鹽水10ul)0 4.92±2.27
試驗(yàn)7JYD)Ames試驗(yàn)及對(duì)抗香煙凝集物和苯并[α]芘致突變性的研究短期生物學(xué)致突變?cè)囼?yàn)一沙門氏菌/微粒體法(簡稱Ames試驗(yàn))，系由美國加利福尼亞大學(xué)的Ames教授所創(chuàng)建。我們利用AⅢes試驗(yàn)．對(duì)高佛存的JYD進(jìn)行了遺傳學(xué)毒理及對(duì)抗香煙凝集物和苯并[α]芘突變性的研究．一、實(shí)驗(yàn)菌株采用鼠傷寒沙門氏組氨酸營養(yǎng)缺型突變菌株即TA98和TAl00標(biāo)準(zhǔn)菌株,經(jīng)鑒定符合其生理性狀。
二、樣品
1.JYD5ul＋苯并[α]ul 10ml/皿2.JYD原液(lg/ml) 0.1ml/皿3.稀釋1倍JYD 0.1ml/皿4.稀釋5倍JYD 0.1ml/皿5.JYD原液＋香煙凝集物(4∶1) 0.1ml/皿6.稀釋1倍JYD＋香煙凝集物(4∶1) 0.1ml/皿7.稀釋5倍JYD＋香煙凝集物(4∶1) 0.1ml/皿8.苯并[α]芘(1mg/ml) 10ul/皿9.香煙凝集物(武漢卷煙廠提供22.75mg/ml) 0.1ml/皿10.二甲亞砜陰性對(duì)照(原液)0.1ml/皿11.正常菌落數(shù)對(duì)照(菌液) 0.1ml/皿(以上樣品除JYD及其稀釋液溶劑為水外，香煙凝集物和苯并[α]芘溶劑為二甲亞砜。三、主要試劑還原型輔酶II(NADP)，6-磷酸葡萄糖，D-生物素等(由美國Sig公司生產(chǎn))四、標(biāo)準(zhǔn)平皿摻入法樣品每個(gè)深度同時(shí)設(shè)三個(gè)平行皿，用加與不加S9活化系統(tǒng)檢驗(yàn)得復(fù)試驗(yàn)兩次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表。
TA98 TA100試驗(yàn)菌株+S9菌落數(shù) MR -S9菌落數(shù) MR +S9菌落數(shù) MR -S9菌落數(shù) MR正?；刈償?shù)52 22 90 87樣品 1 77 1.48 180.82 76 0.84 86 0.992 64 1.23 170.77 84 0.93 64 0.743 47 0.90 210.95 74 0.82 85 0.984 70 1.35 160.73 55 0.61 74 0.685 59 1.13 140.64 40 0.44 64 0.746 68 1.30 190.86 125 1.39 69 0.797 26 0.50 261.18 110 1.22 71 0.828 158 3.04 160.72 376 4.18 82 0.949 79 1.52 150.68 184 2.04 177 2.0310 -- -- -- -- MR＞2為Ames試驗(yàn)陽性五、結(jié)果分析
1.JYD樣品各濃度組加與不加S9活化系統(tǒng)其平皿內(nèi)加變菌落數(shù)均在正常范圍，MR值＜2說明JYD樣品Ames試驗(yàn)為陰性，無致突變性。
2.JY)樣品和各濃度組加入香煙凝集物，用Ames試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)摻入法，加與不加S9活化系統(tǒng)，各濃度平皿內(nèi)回變菌落數(shù)均在正常回變菌落數(shù)范圍說明JYD樣品加入香煙凝集物后，Ames試驗(yàn)結(jié)果為陰性。而香煙凝集物陽性組對(duì)TA100有致突變作用，MR＞2，說明JYD有抑制香煙凝集物致突變的顯著作用。
3.JYD樣品加苯并[α]芘陽性物后，加與不加S9活化系統(tǒng)，其平皿內(nèi)回變菌落數(shù)均在正常范圍，而陽性對(duì)照組苯并[α]芘加S9活化系統(tǒng)后，平皿內(nèi)回變菌落數(shù)大于正?；刈兙鋽?shù)兩倍以上，MR值＞2，說明JYD對(duì)苯并[α]芘有相當(dāng)強(qiáng)的抑制作用(TA100＋S9＝95.0％)。試驗(yàn)8JYD對(duì)吸煙及缺氧所致狗心、腦、肺循環(huán)血液動(dòng)力學(xué)改變作用的研究1.狗急性實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭苽潆s種狗21只，♀♂不拘，3％戊巴比妥靜脈麻醉(30mg/kg)后固定于手術(shù)臺(tái)上，經(jīng)口腔插入胃管用于JYD灌胃，四肢安置電極監(jiān)測(cè)心率(BR)。行氣管插管術(shù)，任動(dòng)物自主呼吸，分離右側(cè)股動(dòng)脈，插入導(dǎo)管至胸主動(dòng)脈上段測(cè)平均動(dòng)脈壓(Psa)，并將導(dǎo)管聯(lián)接心輸量儀，以熱稀釋法測(cè)心輸出量(CO)。
分離右側(cè)股靜脈插管入上腔靜脈近右心房處，用于注入生理鹽水。分離右側(cè)頸靜脈插入二根導(dǎo)管，一根的尖端置右心室測(cè)右心室壓(RVP)及±dp/dtmax，另一導(dǎo)管尖端置肺動(dòng)脈測(cè)平均肺動(dòng)脈壓(Ppa)。分離右側(cè)頸總動(dòng)脈并套入開環(huán)式血流傳感器測(cè)一側(cè)頸總動(dòng)脈血流量(CBG)。經(jīng)計(jì)算得出肺循環(huán)阻力(PVR)、體循環(huán)阻力(SVR)、一側(cè)腦循環(huán)阻力(CVR)及阻力變化率(ΔPVR％、ΔSVR％、ΔCVR％)，如PVR(kPa.S.L-)＝Ppa(kPa)×60s.min-/CO(L，min-)ΔPVR＝吸煙或缺氧時(shí)PVR-吸煙前或缺氧前PVRΔPVR％＝ΔPVR×100％/吸煙前或缺氧前PVRΔSVR、ΔSVR％、ΔCVR、ΔCVR％或ΔCO、ΔCO％、ΔHR、ΔHR％計(jì)算方法類似。
2.動(dòng)物吸煙及缺氧方法
吸煙氣管插管外口聯(lián)接具控制氣流方向活瓣的Y型管。利用蠕動(dòng)泵的抽吸作用吸煙，并將煙霧經(jīng)硅膠管導(dǎo)入Y型氣管插管的進(jìn)氣口，隨動(dòng)物的自主呼吸將煙霧吸入肺內(nèi)。調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵流率(約320～350ml/min)使動(dòng)物在10分鐘內(nèi)吸市售紅雙喜牌香煙2支。每支香煙尼古丁含量約1.00mg，焦油27.5mg。
缺氧配制含10％氧-90％氮?dú)怏w于多氏氣袋。缺氧時(shí)將氣袋外口聯(lián)接Y型管進(jìn)氣口，動(dòng)物自主呼吸吸入低氧氣體10分鐘。
3.實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)制備完成后動(dòng)物靜息1h，待各血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)穩(wěn)定。然后間隔30分鐘吸入低氧氣體3次，待缺氧反應(yīng)恒定后開始正式實(shí)驗(yàn)。程序如下測(cè)定正常時(shí)各血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)→缺氧10分鐘，并于5分鐘、10分鐘時(shí)測(cè)定指標(biāo)→動(dòng)物休息30分鐘→吸煙2支，測(cè)定指標(biāo)，休息3分鐘→吸煙后缺氧、于缺氧5、10分鐘的測(cè)定指標(biāo)→神通JYD灌胃(0.7ml/kg，內(nèi)含2％添加劑)，并于灌胃后60分鐘、150分鐘、240分鐘重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟。
4.血?dú)饧胺畏至?Qs/Qt)測(cè)定在缺氧前、后，吸煙前、后抽取動(dòng)、靜脈血測(cè)定血pll、血氧分壓(PO2)、血二氧化碳分壓(PCO2)。肺分流測(cè)定的方法為在吸入純氧后20分鐘抽取動(dòng)、靜脈血測(cè)血?dú)?，并根?jù)下列公式計(jì)算肺內(nèi)分流肺分流＝(PAO2－PaO2)×0.0031/(PAO2－PaO2)×0.0031＋(CaO2－CvO2)式中 PAO2為肺泡氧分壓＝大氣壓－47－PaCO2；CaO2為動(dòng)脈血氧含量； CvO2為靜脈血氧含量。
5.統(tǒng)計(jì)方法采用自身對(duì)照t檢驗(yàn)及兩組均數(shù)t檢驗(yàn)，顯著性界線為P＜0.05。
結(jié)果一、肺循環(huán)(表1)缺氧使Ppa、PVR較基礎(chǔ)值升高，吸煙雖使Ppa、PVR分別降低9.95±2.16％及8.33±2.67％，卻顯著增強(qiáng)肺血管缺氧性收縮，使缺氧時(shí)Ppa、PVR分別升高64.18±5.53％及60.71±4.97％，較吸煙前缺氧效應(yīng)有極顯著差異(P＜0.01)。
用JYD后1h，Ppa、PVR較基礎(chǔ)值有輕度升高，其后各指標(biāo)恢復(fù)至對(duì)照水平。肺血管的缺氧性收縮及吸煙后肺血管收縮反應(yīng)的增強(qiáng)在用JYD后均被抑制吸煙所致肺循環(huán)阻力的降低在用藥后無明顯變化。吸煙可加強(qiáng)缺氧性血管收縮(HPV)。JYD能顯著地抑制缺氧性肺血管收縮，并能有效地緩接由吸煙所引起的HPV的增強(qiáng)。
二.體循環(huán)(表1)吸煙后缺氧時(shí)為出現(xiàn)單純?nèi)毖跛鸬腜sa、SVR上升。用JYD150分鐘內(nèi)體循環(huán)壓力、阻力與對(duì)照無差異，240分鐘后SVR下降約8％，2只狗胃灌生理鹽水時(shí)在相應(yīng)時(shí)間SVR也有相應(yīng)幅度下降，可能與實(shí)驗(yàn)時(shí)程過長(約12h)有關(guān)。用JYD后60分鐘，150分鐘缺氧仍出現(xiàn)Psa的輕度升高(6.48％及3.10％，P＜0.01)。
三、腦循環(huán)(表1)1.吸煙對(duì)急性缺氧反應(yīng)的影響缺氧使CBF增加10.65±1.68％，CVR下降4.85±0.94％(均P＜0.05)。
2.JYD對(duì)缺氧及吸煙的影響用藥后各時(shí)程基礎(chǔ)CBF無顯著變化，CVR較用藥前稍下降(約5％)，其中60分鐘時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。用藥后60分鐘時(shí)，缺氧、吸煙及吸煙后缺氧所致CVR、CBF的變化仍相似于用藥前。但吸煙后缺氧所致CBF增多的幅度小于用藥前(P＜0.05)。150、240分鐘時(shí)，缺氧所致CVR、CBF的變化仍相似于用藥前，但吸煙后缺氧未引起CBF的增加，即JYD抑制了吸煙后缺氧所致腦血管的擴(kuò)張。
四.心功能(表1)±dp/dtmax 單純?nèi)毖跏埂纃p/dt max分別增加23.86±4.36％及22.40±4.71％；吸煙時(shí)±dp/dt max了也增加9.32±5.73％。吸煙后缺氧時(shí)±dp/dt max也增加，增強(qiáng)與吸煙前缺氧相近。用藥后基礎(chǔ)值±dp/dt max在不同時(shí)間內(nèi)均有所增加，其中60分鐘、150分鐘時(shí)與對(duì)照值比較有差異，但吸煙未引起±dp/dt max的進(jìn)一步增加。用藥后單純?nèi)毖跫拔鼰熀笕砸稹纃p/dt max的增加，除240分鐘時(shí)吸煙后缺氧的增幅與用藥前比較稍下降外，余與用藥前增幅相當(dāng)。
五、肺分流(表2)如表2所示，吸煙不對(duì)肺分流量產(chǎn)生影響，用JYD后肺分流稍有增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用藥后吸煙肺分流稍有減少，也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果表明吸煙與用JYD均對(duì)肺分流量無明顯影響。
六、血?dú)庾兓?表3)
缺氧使PaO2由對(duì)照的94.34±10.74％降至44.80±7.26％，PaCO2由38.26±7.80％降至30.09±6.8％(均P＜0.01)。吸煙使PaO2稍有上升，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但顯著降低了PaCO2，表明吸煙時(shí)肺通氣量增加。用JYD后，除缺氧時(shí)PaCO2明顯低于用藥前水平外，余效值與用藥前無異。表明在用JYD后可使缺氧時(shí)肺通氣量進(jìn)一步增加。
根據(jù)本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕Y(jié)果，JYD在有效地抑制缺氧性肺血管收縮及由吸煙引起的肺血管收縮反應(yīng)增強(qiáng)的同時(shí)，具輕度抑制吸煙后缺氧時(shí)腦血流量的增加、增強(qiáng)心肌舒縮功能的作用；但未明顯影響缺氧及吸煙引起的體循環(huán)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示JYD可望作為效果良好的保健飲品用于緩解及預(yù)防缺氧及吸煙引起的肺、腦循環(huán)的病理改變。表1.急性缺氧和吸煙對(duì)狗腦、肺、體循環(huán)及心功能的影響及JYD的作用。(n-21，X±SE)PpaPVr Psa SVR CBF CVR CO HR+dp/dt Max -dp/dt Max(kPa) (kPa.s/L) (Kpa)(kPa.s/L) (ml/min) (kPa.s/L) (L/min) (Bs/min) (kPa/s) (kPa/s)對(duì)照2.46 71.79 15.85 471.24 148.74 7445.52.15 192.33 1570.53 1343.50用±0.17 ±5.80±0.37±26.59±14.89±158.5 ±0.12 ±7.54 ±103.22 ±98.41缺氧3.40** 96.88*16.78*497.27*161.62*7152.5** 2.19 191.15 1891.50**1551.50**藥±0.19 ±7.32±0.40±30.28±15.96±140.1 ±0.12 ±7.68 ±123.73 ±123.94吸煙2.22** 65.69** 15.82 475.88 146.47 7696.32.15 193.55 1701.20* 1477.90前±0.14 ±4.80±0.39±28.20±13.39±205.1 ±0.12 ±7.39 ±115.43 ±128.85吸煙后 3.60**# 102.70**# 16.17 474.82 160.44** 7483.5# 2.16 198.95 2083.95**1834.50**缺氧 ±0.21&& ±6.01&& ±0.43±27.60±14.5&& ±170.7&& ±0.12 ±8.07 ±171.08#& ±215.80#&
對(duì)照2.7++86.24++ 15.53 457.50 146.50 7193.2& 2.02*199.00 1799.00+ 1569.5++用±0.13 ±5.53±0.33±31.67±14.87±129.5 ±0.10 ±6.32 ±132.24 ±120.67藥 缺氧3.53** 102.88** 16.14* 463.00162.40** 6824.2* 2.16** 203.00 2222.00**1887.00**±0.17+±6.48±0.48±31.09±14.08±143.2 ±0.11 ±6.43 ±203.16++ ±189.41+后吸煙 2.47** 76.50** 15.00 442.25 142.56 7284.62.00 200.05 1755.30 1457.6060±0.12 ±3.72±0.39±26.63±13.15±120.5 ±0.09 ±6.78 ±108.25 ±95.79分 吸煙后 3.28**#93.56**# 15.30 433.57 151.50** 6667.5** 2.17** 201.50 2100.50**1815.0**缺氧 ±0.16&&+ ±5.48&& ±0.42±22.13±12.49# ±120.0& ±0.11& ±6.36 ±160.17&±159.29&
對(duì)照 2.55 80.00 15.20 469.28 143.50 6983.51.98 198.50 1646.00++1466.30+用 ±0.11 ±4.58±0.20±19.53±16.69±210.14 ±0.09 ±7.96 ±122.20 ±98.63藥 缺氧 3.27** 98.57** 15.87*452.86*155.00** 6643.3* 2.06 197.00 1943.00* 1625.004±0.14 ±6.43±0.39±20.40±17.02±185.1 ±0.10 ±6.43 ±162.35 ±142.49+后吸煙 2.42** 71.47** 15.10 453.60 141.93 7106.42.00 198.62 1661.60* 1344.0050 ±0.10 ±3.72±0.40±17.35±16.28±216.5 ±0.07 ±8.08 ±115.75 ±85.97分 吸煙后 3.07**&& 92.10** 15.31 450.24 148.00+ 6641.3*2.03199.801956.50*1648.50*缺氧 ±0.13++ ±4.80&& ±0.49±19.71±15.71 ±198.5& ±0.09 ±7.11±204.90& ±183.95&對(duì)照 2.63 74.3615.10 433.50 152.007088.92.15 195.501688.50 1508.00用 ±0.08±2.45 ±0.28±17.34±15.70 ±144.4 ±0.08 ±6.24±154.49±127.87藥 缺氧 3.44**97.86** 15.22 438.50+164.50** 6452.52.17 194.502023.00** 1789.50*±0.14±3.75 ±0.17±20.51±15.72 ±141.2 ±0.09 ±6.33±200.10±184.39后吸煙2.47* 72.1315.17 441.78 152.897127.62.11 198.731701.80 1436.8040 ±0.08±3.02 ±0.40±26.18±15.21 ±152.1 ±0.10 ±5.73±124.60±94.92分 吸煙后 3.38**&& 95.30** 15.33 435.50+158.506706.7& 2.16 195.001915.50*1734.50*缺氧 ±0.16++ ±3.49&& ±0.33±23.35±16.21 ±136.2 ±0.08 ±6.10±159.51& ±154.93&*或**與對(duì)照值比較 P＜0.05或P＜0.01#或##與單獨(dú)缺氧比較 P＜0.05或P＜0.01+或++與用藥前比較 P＜0.05或P＜0.01&或&&與吸煙值比較 P＜0.05或P＜0.01表2JYD對(duì)吸煙前、后肺分流量(％)的影響(n＝15，x±SD)用藥前 用藥后對(duì)照吸煙對(duì)照 吸煙6.556.507.54 7.11±2.42 ±2.03 ±2.54±2.14表3用JYD前、后的血?dú)庾兓?n＝15，x±SD)用藥前 用藥后PH PCO2 PO2PH PCO2 PO2對(duì)照 7.34638.26 94.347.36036.25 93.63±0.080±7.80±10.74 ±0.080 ±8.06±11.08缺氧 7.39930.09** 44.80** 7.45019.53**# 40.10**±0.101±6.89±7.26 ±0.110 ±9.10 ±3.53吸煙 7.37430.80** 97.707.366 29.35* 94.63±0.060±6.12±13.06 ±0.060 ±3.52±10.26*或**與對(duì)照值比較 P＜0.05或P＜0.01#或##與用藥前比較 P＜0.05試驗(yàn)9JYD對(duì)缺氧耐受性及神經(jīng)中樞作用研究一、對(duì)小鼠低張性缺氧的影響給小鼠分別灌胃(ig)、腹腔注射(ip)JYD原液、腹腔注射3倍、6倍稀釋的JYD或等容積生理鹽水(0.1ml/10g)ip給藥15分鐘、ig給藥1小時(shí)后，將四只小鼠放入裝有鈉石灰的500ml容積的磨口玻璃瓶內(nèi)加蓋密閉，記錄小鼠團(tuán)瓶后至最后一次呼吸時(shí)間(即生存時(shí)間)，以此衡量小鼠缺氧耐力的大小。各組小鼠存活時(shí)間進(jìn)行t值檢驗(yàn)，結(jié)果見表1。表1 JYD對(duì)小鼠缺氧耐力的影響給藥 存活時(shí)間組別n體重(g) 方式 x±SD(min) P1P2生理鹽水組 12 18.0±1.3 ip 13.78±0.81JYD原液組 12 17.4±1.7 ip 29.46±4.32 ＜0.001JYD原液組 12 18.2±2.3 ig 29.66±5.21 ＜0.001＞0.051/3 JYD組 12 18.1±1.9 ip 31.79±3.70 ＜0.001＞0.051/6 JYD組 12 17.8±1.5 ip 29.96±4.28 ＜0.001＞0.05P1與對(duì)照組小鼠成活時(shí)間比較，P2與JYD原液ig組小鼠成活時(shí)間比較。
表中可以看出，JYD無論ig組或ip組鈞能延長急性缺氧環(huán)境下小鼠的存活時(shí)間(P＜0.001)，且腹腔注射三種不同劑量JYD組之間無明顯差異(P＞0.05)。二、JYD對(duì)異丙基腺上素負(fù)荷小鼠對(duì)低張性缺氧耐受性的影響小鼠分三組，第一組注射生理鹽水后15分鐘再次注射生理鹽水后再注Iso，第三組注JYD，15分鐘后再注Iso。然后按上述方法缺氧測(cè)定各組對(duì)低張性缺氧的耐受性，結(jié)果見下表2。與生理鹽水組相比Iso可明顯降低小鼠耐缺氧能力(P＜0.01)，而JYD對(duì)Iso負(fù)荷小鼠的缺氧的耐受性有明顯提高作用(P＜0.001)。表2對(duì)負(fù)荷小鼠在常壓缺氧下存活時(shí)間的影響存活時(shí)間組別 n x±SD(min)P1 P2NS+NS組 1213.92±0.91NS+Iso組 1211.43±0.52 ＜0.001JYD+Iso組 1216.84±1.26 ＜0.001＞0.001P1與NS＋NS組比較，P2與NS＋I(xiàn)so組比較。三、JYD對(duì)血液性缺氧耐受性的影響小鼠兩組(n＝12)分別ip JYD和等容積生理鹽水(0.01ml/10g)，15分鐘后，均ip5％NaNO2(0.1ml/10g)。記錄小鼠死亡時(shí)間，JYD組死亡時(shí)間為12.52±2.25min，生理鹽水組為8.16±0.49min，結(jié)果表明JYD能明顯提高NaNO2所致血液性缺氧小鼠存活時(shí)間(P＜0.01)。四、對(duì)士的寧致驚作用的影響小鼠兩組(η＝12)分別ip JYD和等容積生理鹽水(0.01ml/10g)，15分鐘后，均腹腔注射士的寧1.5mg/kg，觀察給藥小鼠出現(xiàn)驚厥程度及死亡率。結(jié)果30分鐘內(nèi)兩組均百分之百出現(xiàn)驚厥，但與對(duì)照組比較JYD組小鼠驚厥明顯延緩，驚厥程度輕，且JYD組小鼠無一只死亡，對(duì)照組死亡率為80％。結(jié)果表明JYD能顯著減輕士的寧引起的小鼠驚厥的程度和降低死亡率(P＜0.001)。五、JYD的鎮(zhèn)痛作用小鼠兩組(n＝12)，ipJYD或生理鹽水，15分鐘后，ip1％的冰醋酸，立即觀察15分鐘內(nèi)出現(xiàn)的扭體反應(yīng)次數(shù)和出現(xiàn)扭體反應(yīng)小鼠的百分率。結(jié)果對(duì)照組小鼠扭體次數(shù)為182次，67.5％的小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)而JYD組小鼠未出現(xiàn)扭體反應(yīng)。表明JYD對(duì)冰醋酸所致疼痛導(dǎo)致小鼠扭體反應(yīng)有明顯抑制作用(P＜0.01)。
以上小鼠(昆明種，雌雄各半，18-22g)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明JYD能明顯增強(qiáng)小鼠對(duì)低張性缺氧或給予異丙基腎上腺素增加心肌耗氧負(fù)荷情況下低張性缺氧的耐受性，也能增強(qiáng)對(duì)血液性缺氧的耐受性。JYD并具有鎮(zhèn)痛和抗驚厥作用。JYD提高對(duì)缺氧耐受性的作用可能與其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用有關(guān)。試驗(yàn)10JYD對(duì)免疫功能的影響NIH小鼠，雄性，體重202g，隨機(jī)分成A，B，C，D，E，F(xiàn)，G，H，I九組，每組12只，按各組分別飲用自來水(A，F(xiàn)組)，JYD(B，C，D，E，H，I)，連續(xù)30天，并同時(shí)腹腔注射環(huán)磷酰胺(C，E，F(xiàn)組)劑量25mg/鼠，每隔一天一次，共三次；或吸煙(G，H，I)，每天兩次，每次1小時(shí)，于第30天眼球取血分離血清，并無菌取小鼠脾臟，分離單個(gè)核細(xì)胞，采用乳酸脫氫酶試驗(yàn)，MTT比色法，雙抗體夾心法和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)分別測(cè)定小鼠脾細(xì)胞自然殺傷(NK)細(xì)胞活性、白細(xì)胞介素2(IL-2)的誘生能力和血清免疫球蛋白及腫瘤壞死因子(TNF)水平。
1，JYD對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞NK活性的影響由表1可見，環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠NK活性有明顯的抑制作用(F組)，吸煙對(duì)小鼠NK活性有輕度抑制作用(G組)，E組NK活性高于F組，I組NK活性顯著高于G組(P＜0.001)，與對(duì)照(A組)無差異(P＞0.05)，由此表明JYD能明顯促進(jìn)機(jī)體NK活性。
表1.JYD對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞NK活性的影響組別NK活性(％)A.飲自來水 0.12ml/天/鼠40.59±8.94B.飲JYD0.12ml/天/鼠43.24±11.00C.飲JYD0.12ml/天/鼠27.52±6.74注射環(huán)磷酰胺D. 飲JYD0.24ml/天/鼠51.35±5.68E.飲JYD0.24ml/天/鼠36.51±7.41注射環(huán)磷酰胺F.飲自來水 注射環(huán)磷酰胺26.29±7.75G吸煙(紅雙喜)1hx2/天 31.64±3.70H.飲JYD 0.12ml/天/鼠 吸煙 37.68±4.56I.飲JYD 0.24ml/天/鼠 吸煙 41.67±12.282、JYD對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞IL-2誘生能力的影響表2結(jié)果可見，環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞誘生IL-2的能力有明顯的抑制作用(F組)，吸煙對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞誘生IL-2的能力有輕度抑制作用(H組)，E組IL-2誘生水平高于F組，I組IL-2誘生水平高于G組(P＜0.01)，接近對(duì)照(A組)水平；由此表明 JYD能明顯促進(jìn)機(jī)體IL-2的誘生能力。
表2.JYD對(duì)小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞IL-2誘生能力的影響組別 IL-2活性(u/ml)A.飲自來水0.12ml/天/鼠82.50±3.49B.飲JYD 0.12ml/天/鼠84.09±4.91C.飲JYD 0.12ml/天/鼠70.10±4.92注射環(huán)磷酰胺D.飲JYD 0.24ml/天/鼠85.20±3.49E. 飲JYD 0.24ml/天/鼠74.60±3.68注射環(huán)磷酰胺F. 飲自來水注射環(huán)磷酰胺67.00±4.93G吸煙(紅雙喜)1hx2/天 67.60±5.06H. 飲JYD 0.12ml/天/鼠吸煙 72.00±5.41I. 飲JYD 0.24ml/天/鼠吸煙 82.40±6.583、JYD對(duì)小鼠血清免疫球蛋白水平(Ig)的影響表3結(jié)果可見，環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠血清免疫球蛋白水平有明顯的抑制作用(F組)，E組血清免疫球蛋白水平高于F組(P＜0.01)，由此表明，JYD可提高血清免疫球蛋白水平。吸煙組血清蛋白水平略低于對(duì)照組(A組)，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無顯著性差異(P＜0.05)。
表3.JYD對(duì)小鼠血清免疫球蛋白水平(Ig)的影響組別 血清Ig水平(mg/ml)A.飲自來水 0.12ml/天/鼠6.08±2.58B.飲JYD 0.12ml/天/鼠6.83±2.50C.飲JYD 0.12ml/天/鼠3.84±0.91注射環(huán)磷酰胺D.飲JYD 0.24ml/天/鼠9.18±2.70E.飲JYD 0.24ml/天/鼠5.17±1.50注射環(huán)磷酰胺F.飲自來水 注射環(huán)磷酰胺3.45±1.60G吸煙(紅雙喜) 1hx2/天 5.85±1.39H.飲JYD 0.12ml/天/鼠吸煙 5.92±0.99I.飲JYD 0.24ml/天/鼠吸煙 6.67±2.284、JYD對(duì)小鼠血清TNF水平的影響表4結(jié)果可見，環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠血清TNF水平有明顯的抑制作用(F組)，E組血清TNF水平略高于F組(P＜0.05)，但仍低于對(duì)照組(A組)，吸煙組血清TNF水平略低于對(duì)照組(A組)，JYD＋吸煙(I組)血清TNF水平與正常組比較，無顯著性差異(P＞0.05)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明JYD可提高血清TNF水平。表4.JYD對(duì)小鼠血清TNF水平的影響組別 血清Ig水平(mg/ml)A.飲自來水0.12ml/天/鼠0.360±0.028B.飲JYD 0.12ml/天/鼠0.362±0.033C.飲JYD 0.12ml/天/鼠0.063±0.030注射環(huán)磷酰胺D.飲JYD 0.24ml/天/鼠0.386±0.001E.飲JYD 0.24ml/天/鼠0.105±0.045注射環(huán)磷酰胺F.飲自來水 注射環(huán)磷酰胺0.062±0.050G吸煙(紅雙喜) 1hx2/天 0.337±0.107H.飲JYD 0.12ml/天/鼠吸煙 0.349±0.084I.飲JYD 0.24ml/天/鼠吸煙 0.363±0.097試驗(yàn)11JYD對(duì)心腦肺免疫功能的影響及對(duì)肺癌的預(yù)防逆轉(zhuǎn)作用的研究1、JYD對(duì)吸煙小鼠呼吸道粘膜的保護(hù)作用采用主動(dòng)和被動(dòng)吸煙方法，將小鼠分為吸煙組，吸煙＋JYD組，并以未吸煙的小鼠作為對(duì)照組。吸煙組將小鼠放入煙霧吸入實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)，每次燃燒4支紅雙喜牌過濾嘴香煙，每天1次，吸煙霧60分鐘，每支香煙燃燒10分鐘后，休息5分鐘，每周6次，連續(xù)4周；吸煙＋JYD組每只小鼠在吸煙后30分鐘經(jīng)口食管灌入JYD 0.2ml(1g/ml)；對(duì)照組小鼠不吸煙霧，每只動(dòng)物灌入等容量生理鹽水。4周后對(duì)其呼吸道的組織進(jìn)行光鏡、掃描電鏡觀察，鏡下見吸煙氣管內(nèi)損害的柱狀纖毛上皮細(xì)胞纖毛倒伏、零亂、脫落，支氣管內(nèi)一些柱狀纖毛上皮消失，細(xì)胞表面有較多的脫屑；而吸煙＋JYD組氣管支氣管損害明顯減輕，纖毛柱狀上皮完整，纖毛排列大多整齊，杯狀細(xì)胞飽滿，表面微絨毛存在，纖毛未見脫落減少，僅見少許纖毛倒伏零亂。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明吸煙小鼠呼吸道粘膜損害明顯，而吸煙小鼠用JYD后呼吸道粘膜未見明顯病變，證實(shí)JYD對(duì)呼吸道粘膜有明顯保護(hù)作用。
呼吸道粘膜柱狀纖毛上皮細(xì)胞的纖毛對(duì)煙霧很敏感，煙霧中一些有害物質(zhì)如丙烯醛、氰氫酸、甲醛等纖毛毒性物質(zhì)能夠抑制呼吸道上皮細(xì)胞纖毛的運(yùn)動(dòng)，破壞上皮細(xì)胞，使纖毛脫落，細(xì)胞壞死，造成吸煙者對(duì)呼吸道傳染性疾病易感性增高，并有利于致癌物質(zhì)在呼吸道滯留，促進(jìn)癌腫的發(fā)生及發(fā)展。JYD可能對(duì)煙霧中有害物質(zhì)有明顯拮抗，抑制作用，并能通過增強(qiáng)粘液-纖毛屏障的清除功能，而對(duì)預(yù)防感染和癌腫的發(fā)生起到良好的效果。2、JYD對(duì)正常小鼠T細(xì)胞激活作用的影響采用昆明種小鼠，MTT法測(cè)小鼠脾臟T細(xì)胞增殖反應(yīng)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)配對(duì)試驗(yàn)檢驗(yàn)進(jìn)行差異比較，結(jié)果表明JYD能促進(jìn)T細(xì)胞對(duì)增殖反應(yīng)(P＜0.05或P＜0.01)，作用強(qiáng)弱與JYD含量存在依賴關(guān)系，隨著濃度的增加對(duì)T細(xì)胞激活的促進(jìn)作用越強(qiáng)。結(jié)果見表表對(duì)正常小鼠細(xì)胞激活作用的影響JYD稀釋倍數(shù)ODX±SD200 0.460±0.017*100 0.515±0.047**75 0.562±0.032**50 0.593±0.037**對(duì)照 0. ±0.059均與對(duì)照組比較*P＞0.05 **P＜0.013、JYD對(duì)人肺腺癌GLC直接殺傷作用JYD對(duì)人肺腺癌GLC細(xì)胞體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明，JYD對(duì)人肺腺癌細(xì)胞50％殺抑率、稀釋倍數(shù)為1∶80和1∶100，其24h持續(xù)至48h時(shí)殺抑效果為佳，而JYD為澄清可溶性部分，經(jīng)JYD作用后人肺細(xì)胞(GLC)增殖受到明顯抑制，結(jié)果見表表.JYD對(duì)人肺腺癌細(xì)胞GLC直接殺/抑作用JYD作用時(shí)間JYD稀釋倍數(shù) 20h 24h 48hOD值 殺抑率OD值 殺抑率OD值 殺抑率1∶80 0.220±0.004 46.99 0.165±0.018 60.24 0.129±0.004 51.141∶100 0.222±0.018 46.51 0.183±0.005 55.90 0.117±0.003 55.681∶200 0.377±0.007 9.16 0.225±0.030 45.73 0.145±0.007 45.081∶400 0.400±0.011 3.61 0.287±0.009 30.84 0.167±0.030 36.341∶800 0.401±0.014 3.37 0.335±0.016 19.27 0.218±0.007 17.421∶1000 0.404±0.016 2.45 0.356±0.015 14.22 0.228±0.027 13.64對(duì)照0.415±0.013 00.415±0.012 0 0.264±0.032 04、JYD對(duì)小鼠Lewis肺癌生長轉(zhuǎn)移的影響以C57BL/6肺癌移植瘸為模型，進(jìn)行JYD預(yù)防給藥和治療性給藥，觀察對(duì)小鼠實(shí)體瘤及肺轉(zhuǎn)移的影響，結(jié)果表明JYD有效預(yù)防性給藥對(duì)腫瘤的抑制率＞30％(31.85％，P＜0.01)，說明JYD有預(yù)防移植性肺癌發(fā)生和抑制其生長作用。JYD治療性給藥對(duì)腫瘤的抑制率＜30％(15.47％P＞0.05)說明JYD治療性給藥對(duì)小鼠實(shí)體瘤無明顯抑制作用，對(duì)其肺癌肺轉(zhuǎn)移灶也無明顯抑制作用(P＞0.05)，結(jié)果見以下各表。
國內(nèi)規(guī)定抗腫瘤藥物，腫留抑制率≥30％且P＜0.05重復(fù)三次才有效，本實(shí)驗(yàn)在作了預(yù)實(shí)驗(yàn)以后再選擇純系小鼠作正式實(shí)驗(yàn)，故結(jié)果有一定的可靠性。有人證實(shí)肺部癌灶(即轉(zhuǎn)移灶)與皮下原位移植瘤對(duì)藥物的敏感性并不完全相同，雖然本實(shí)驗(yàn)JYD對(duì)轉(zhuǎn)移灶無明顯抑制作用，但預(yù)防性給藥對(duì)其皮下實(shí)體瘤有明顯抑制作用。說明本實(shí)驗(yàn)JYD有一定抗腫瘤作用。表1預(yù)防性給藥對(duì)實(shí)體瘤生長的影響組別動(dòng)物數(shù)平均體重(g) 腫瘤重量抑制率(％)開始 結(jié)束 M±S對(duì)照組847.7 22.84 8.125±.294預(yù)防組8.5 20.82 5.537±.312 .85與對(duì)照組相比較P＜0.0表2 治療性給藥對(duì)小鼠實(shí)體瘤的影響組別動(dòng)物數(shù) 平均體重(g) 腫瘤重量抑制率(％)開始 結(jié)束M±S對(duì)照組10 21.0 23.2 6.27±1.30預(yù)防組10 20.5 21.0 5.3 ±0.8315.47與對(duì)照組相比較P＞0.05表3 JYD對(duì)小鼠皮下移植的Lewis肺癌轉(zhuǎn)移的抑制作用組別動(dòng)物數(shù)肺表面轉(zhuǎn)移數(shù)目M±S對(duì)照組10 20.7±15.319治療組10 18.6±13.517與對(duì)照組相比較P＞0.05綜合上述一系列實(shí)驗(yàn)研究，證實(shí)JYD對(duì)煙草煙霧中有害物質(zhì)有明顯拮抗抑制作用。并能通過增強(qiáng)粘液-纖毛屏障的清除功能，提高機(jī)體免疫功能，在預(yù)防感染和腫瘸的發(fā)生、發(fā)展等方面可起到一定的良好效果。圖片說明

圖1.正常氣管內(nèi)柱狀纖毛上皮纖毛排列整齊，杯狀細(xì)胞飽滿，表面有微絨毛。
×2,000圖2.吸煙組氣管柱狀纖毛上皮纖毛脫落、消失，表面可見紅細(xì)胞附著?！?,000圖3.吸煙組氣管柱狀纖毛上皮、纖毛大多數(shù)脫落。
×2,000圖4.5.吸煙組氣管柱狀纖毛上皮，纖毛脫落的細(xì)胞表面扁平，殘留有纖毛脫落的痕跡，受損害的細(xì)胞，形成一片如“水田狀”的上皮表面結(jié)構(gòu)。圖6.7.吸煙＋JYD組氣管柱狀纖毛上皮細(xì)胞，纖毛排列絕大多數(shù)整齊，杯狀細(xì)胞飽滿；表面有微絨毛，僅有少數(shù)纖毛零亂?！?,000圖8.吸煙＋JYD組，氣管柱狀纖毛零亂。
×2,000圖9.10.正常支氣管柱狀纖毛上皮排列整齊，杯狀細(xì)胞飽滿?！?,000圖11.正常支氣管柱狀纖毛上皮、纖毛排列整齊，杯狀細(xì)胞飽滿，表面有密集的微絨毛?！?,000圖12.13.吸煙組對(duì)支氣管柱狀纖毛上皮纖毛減少、消失，細(xì)胞表面有較多的脫屑?！?2,000圖14.吸煙組對(duì)支氣管柱狀纖毛上皮部分纖毛零亂、倒伏?！?,000圖15.16。吸煙＋JYD組對(duì)支氣管柱狀纖毛排列整齊，大多數(shù)杯狀數(shù)細(xì)胞飽滿，表面有多量微絨毛?！?,000
權(quán)利要求
1，一種解香煙毒的全天然保健品，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的保健品制劑①苦苣8-25份①薏苡仁10-30份 ①枸杞子10-25份 ①山楂13-26份①何首烏5-18份 ①黃精4.5-15份①松子2-8份 ①白芍5-13份①靈芝2-6份 ①豬毛菜6-25份①菟絲子3-10份 ①老鸛草4-8份①桔梗菜10-25份 ①丹參8-24份 ①麥冬7-24份②淫羊藿8-24份①黨參7-21份①金銀花10-25份 ①百合8-28份①生姜10-20份①瓜蔞8-26份②當(dāng)歸3-10份 ②抱莖苦荬菜8-28份 ②五味子5-16份②陳皮8-26份
2，根據(jù)權(quán)利要求1所述解除香煙毒的全天然的保健品，其中各原料的重量配比是①苦苣12.5-18份 ①薏苡仁13-20份 ①枸杞子10-18份 ①山楂8-21份①何首烏8-12份 ①黃精7.5-11份①松子2.5-3.5份 ①白芍7.5-10份①靈芝3-4份 ①豬毛菜10-20份 ①菟絲子4-8份 ①老鸛草5-7.5份①桔梗菜13-19份 ①丹參10-20份 ①麥冬12-17份 ②淫羊藿12-18份①黨參12.5-18份 ①金銀花12.5-20份 ①百合10-20份 ①生姜10-20份①瓜蔞12-20份②當(dāng)歸5-8份 ②抱莖苦荬菜12-18份 ②五味子8-11份②陳皮12-18份
3，根據(jù)權(quán)利要求1所述的解除香煙毒的全天然保健品，其中各原料的重量配比是①苦苣5份 ①薏苡仁5份①枸杞子5份 ①山楂5份①何首烏3份①黃精3份 ①松子1份 ①白芍3份①靈芝1份 ①豬毛菜5份①菟絲子2份 ①老鸛草2份①桔梗菜5份①丹參5份 ①麥冬5份 ②淫羊藿5份①黨參5份 ①金銀花5份①百合5份 ①生姜5份①瓜蔞5份 ②當(dāng)歸2份 ②抱莖苦荬菜5份 ②五味子3份②陳皮5份
4，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于1)對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明屬于實(shí)際無毒物(根據(jù)急性毒性分級(jí))；2)致畸變?cè)囼?yàn)結(jié)果表明，對(duì)動(dòng)物骨髓細(xì)胞不產(chǎn)生畸變作用；3)小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)結(jié)果表明，對(duì)動(dòng)物精子不產(chǎn)生畸變作用4)Ames氏試驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)試驗(yàn)菌株，無論是直接作用還是代謝活化作用，均不呈現(xiàn)致突變性。
5，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于1)相對(duì)陰性對(duì)照組來說，除能全部清除煙毒產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物(LPO)的代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)外，尚可大幅度降低動(dòng)物肝、腦組織本身的NDA含量；2)能使超氧化物歧化酶(SOD)活性大幅度升高(香煙毒所致的該酶活性降低)。
6，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于1)能使煙毒所致小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率上升、煙毒所致人外周血淋巴細(xì)胞的姐妹染色單體互換(SCE)頻率升高、煙毒所致Ames氏試驗(yàn)的試驗(yàn)菌株鼠傷寒沙門氏桿菌TA98、TA100回復(fù)突變菌落數(shù)增加等項(xiàng)指標(biāo)均降至正常范圍內(nèi)。
7，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于1)可明顯降低由吸煙和缺氧引起的肺動(dòng)脈高壓，并可抑制由缺氧引起的腦血管擴(kuò)張；2)可增強(qiáng)心肌的收縮功能和舒張功能。
8，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于對(duì)三種類型的急性缺氧(低張性缺氧、血液性缺氧、組織性缺氧)能部份明顯提高機(jī)體的耐受性的作用。
9，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于可使香煙及環(huán)磷酰胺引起下降的四項(xiàng)免疫指標(biāo)(NK活性、IL-2活性、Ig、TNF)升高。
10，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于可明顯減輕由吸煙引起的呼吸道損傷(纖毛紊亂和脫落)。
11，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于能抑制肺腺癌細(xì)胞的增殖及移植性實(shí)體瘤生長。
12，根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于所說的制劑是任何一種保健品所采用的劑型。
13，根據(jù)權(quán)利要求12所述的解除香煙毒的全天然保健品，其特征在于將配方中的成分分為兩部份，其一部份(配方中標(biāo)①，即原料1)加工成液體劑型，另一部份(配方中標(biāo)②，即原料2)制成固體劑型。
14，根據(jù)權(quán)利要求12所述的解除香煙毒的全天然保健品的制備方法，其特征在于對(duì)原料1各成分經(jīng)清洗成凈料，加水后100℃蒸煮兩次，第一次加水10倍，第二次加水8倍，每次1.5-2小時(shí)后4層紗布過濾，兩次所得濾液混合。濾液中加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)去沉淀，對(duì)上清液蒸發(fā)，回收乙醇后得到母液。濾液被濃縮至原量的1/2。按0.02％的量加入高蛋白糖后溶解后過濾而成營養(yǎng)液，經(jīng)灌裝，105℃蒸汽滅菌30分鐘、冷卻、清洗外瓶、涼干、貼簽、包裝；對(duì)原料2中的成分經(jīng)清洗成凈料，加水后100℃蒸煮兩次，第一次加水10倍，第二次加水8倍，每次1.5-2小時(shí)后4層紗布過濾，兩次所得濾液混合，濾液中加等量乙醇混合后靜置24小時(shí)去沉淀，對(duì)上清液蒸發(fā)，回收乙醇后得到濃縮液。濾液被濃縮至原量的1/2，相對(duì)密度為1.30-1.33。加淀粉拌勻，烘干并粉碎至通過120目篩，粉料可裝裝膠囊或加輔料制片、壓板；將以上液體成品及膠囊或片劑成品裝C式拖盤盒內(nèi)而成產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種解香煙毒的全天然保健品，它是由苦苣、薏苡仁、枸杞子、山楂等全天然藥食同源的食用植物為原料，根據(jù)原料的特性組合制成兩種劑型。本發(fā)明制品安全無毒，能有效清除吸煙導(dǎo)致的體內(nèi)有害物(自由基等)、滅活致癌物，保護(hù)呼吸道粘膜和纖毛，提高體內(nèi)SOD活性，提高人體缺氧耐受力，緩解和預(yù)防吸煙和慢性缺氧對(duì)機(jī)體的不良影響，明顯減輕吸煙導(dǎo)致的肺、心、腦血管損傷。
文檔編號(hào)A61P25/34GK1122238SQ9510792
公開日1996年5月15日 申請(qǐng)日期1995年8月8日 優(yōu)先權(quán)日1995年8月8日
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