專利名稱：二咖啡酰氧基奎寧酸在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸(可單獨(dú)用3，4-位或3，5-位二咖啡酰氧基--奎寧酸化合物，也可用3，4-、3-5-二咖啡酰氧基--奎寧酸二個(gè)化合物組成的混合物)的用途，尤其涉及在制藥領(lǐng)域中的用途。
腎炎、腎衰竭、脈管炎、靜脈栓塞、老年性癡呆、心腦血管疾病均為危害人類生命和健康的疑難病癥，而治療或預(yù)防此類疾病需要有下述藥理作用的藥物，也就是具有改善血液流變學(xué)，降低血管阻力，增加心腦血流供應(yīng)，提高機(jī)體巨噬細(xì)胞免疫功能及對(duì)抗腦垂體后葉素所致缺血、缺氧和對(duì)抗由二磷酸腺甙(ADP)引起的血小板凝聚功能，具有對(duì)抗心肌再給氧性損傷作用以及調(diào)控脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)等作用；具有較強(qiáng)的抑制內(nèi)凝血，促進(jìn)纖溶活性及顯著增加外周和冠脈流量等功能。本發(fā)明基于此，應(yīng)用已知化合物發(fā)掘具有新醫(yī)藥用途的藥物，造福于人類。
本發(fā)明具有新醫(yī)藥用途的化合物名稱為二咖啡酰氧基--奎寧酸，結(jié)構(gòu)式為 3，4-Dicafferoylquinic acid3，5-Dicafferoylquinic acid
(3，4-二咖啡酰氧基奎寧酸)(3，5-二咖啡酰氧基奎寧酸) 分子式為C25H24O12，黃色粉末狀，分子量為516，易溶于水和乙醇。
該化合物或混合物可由茜草科咖啡屬植物咖啡豆或菊科飛蓬屬植物燈盞花植物中提取制得。
本發(fā)明的目的在于提供二咖啡酰氧基--奎寧酸的新用途，即在制藥中的應(yīng)用。
實(shí)際上，本發(fā)明涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防腎炎疾病的藥中的應(yīng)用。
涉及二咖啡酰氧基-奎寧酸作為制備治療或預(yù)防脈管炎疾病的藥中的應(yīng)用。
涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防靜脈栓塞疾病的藥中的應(yīng)用。
還涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防腎衰竭藥中的應(yīng)用。
還涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防老年性癡呆藥中的應(yīng)用。
還涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防肺心病的藥中的應(yīng)用。
同時(shí)，本發(fā)明還涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防心、腦血管疾病藥中的應(yīng)用，具體地涉及二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防高血脂疾病的藥中的應(yīng)用；作為制備抑制血小板凝聚藥中的應(yīng)用；作為制備治療或預(yù)防冠心病藥中的應(yīng)用；作為制備抑制腦血栓形成藥中的應(yīng)用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸兩個(gè)化合物的混合物的藥理試驗(yàn)及結(jié)果來(lái)說(shuō)明其在制藥領(lǐng)域中新用途。同樣地，單獨(dú)用3，5-或3，4-或4，5-二咖啡酰氧基--奎寧酸化合物均可達(dá)同樣的藥理效果，區(qū)別僅在使用的量上的不同。
采用茜草科咖啡屬植物咖啡豆2.5kg，用95％的乙醇提取，提取物溶于水后分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得石油醚部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析和MCI柱層析分別得3，5-、3，4-二咖啡酰氧基查寧酸(兩者可用高壓液相色譜進(jìn)一步分開(kāi)，在混合物中，兩者的比例以高壓液相色譜分析，按峰面積計(jì)算約為2比1)4000mg和奎寧酸2000mg。然后把3，5-，3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸250mg，溶于1000ml水中制成0.25％濃度的水溶液加熱溶解，混合均勻后，裝入藥瓶中密封，消毒制成口服液產(chǎn)品備用。
采用菊科飛蓬屬植物短葶飛蓬燈盞花(Erigeron breviscapus(Vant)Hand-Mazz)全植物20kg，用95％的乙醇提取，提取物溶于水后分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得石油醚部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析和MCI柱層析分別得3，5-，3，4-二咖啡酰氧基奎寧酸8000mg和奎寧酸4000mg。然后把前者2500mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成5mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品備用。
1、小白鼠的急性毒性試驗(yàn)A.口服給藥健康雄性小鼠10只，體重17-24g，用20％3，4-、3，5-二咖啡酰氧基-奎寧酸水溶液灌胃0.4ml/10g(相當(dāng)于生物80g/kg)，觀察三天無(wú)一只死亡。
B.注射給藥雄性小白鼠17-24g，用5％3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸提取液注射給藥，按簡(jiǎn)化機(jī)率單位法計(jì)算，測(cè)得LD50(ip)＝13.14+5.42g/kg，LD50(iv)＝10.02+1.55g/kg。
2、用常規(guī)藥理試驗(yàn)觀察了3，5-，3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸口服液和混合物液對(duì)小鼠常壓耐缺氧、離體豚鼠心臟灌流、體外家兔血小板聚集及家兔腦血流等的影響。試驗(yàn)結(jié)果證明口服液毒性較小，一次口服相當(dāng)于生藥80g/kg時(shí)，三天內(nèi)末見(jiàn)小鼠死亡，口服60g/kg 1--2hr內(nèi)，具有保護(hù)小鼠常壓耐缺氧作用。在家兔耳靜脈注射1g/kg時(shí)，具有增加家兔腦血流量及外周血流量的作用，持續(xù)時(shí)間為17min。在家兔體外血漿藥物濃度為23mg/ml時(shí)，該藥能抑制家兔血小板聚集。當(dāng)5％3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸混合物提取液進(jìn)行豚鼠離體心臟灌流時(shí)濃度為0.25mg/ml，0.5mg/ml，均能增加冠脈流量。
上述結(jié)果說(shuō)明3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸有擴(kuò)張腦血管、冠脈血管和外周血管的作用，使血流量增加，改善局部供血，使外周阻力下降，減輕心臟負(fù)擔(dān)，減輕心肌耗氧量，同時(shí)也能增加機(jī)體耐缺氧能力，抑制血小板聚集等作用，這些作用都有利預(yù)防和治療腦血栓形成、腦血管意外及引起的后遺癥和冠心病等。
3、通過(guò)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支造成25條犬實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞模型并采用血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)，NBT染色法，電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察、血清CPK測(cè)定、冠狀血管樹(shù)鑄型等方法觀察3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射對(duì)正常麻醉犬血流動(dòng)力學(xué)和心肌塞犬心梗范圍的影響，結(jié)果表明，3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射液有一定抗心肌缺血作用。
4、3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射液逆轉(zhuǎn)急性初期腎功能衰竭的臨床研究對(duì)病因、病情基本相似的46例急性初期腎功能衰竭病人隨機(jī)分為該注射液治療組22例，對(duì)照組24例進(jìn)行治療，觀察到治療組的病人尿量、血肌酐、血機(jī)酐清除率、尿鈉及腎衰指數(shù)在用藥前后均有顯著差異，兩組病人在縮短少尿期、透析率及治愈率等方面治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明本發(fā)明注射液對(duì)逆轉(zhuǎn)急性初期腎功能衰竭有顯著功效。
治療方法采用在常規(guī)治療基礎(chǔ)上(包括治療原發(fā)病、糾酸、透析治療等)，應(yīng)用本發(fā)明的3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射液(2ml含3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸6mg)，每次20ml加入5％或10％葡萄糖250ml稀釋靜脈滴注，一日一次或二次(糖尿病患者改用生理鹽水)。療程由診斷腎衰開(kāi)始至腎衰痊愈(7-32天)；對(duì)照組在上述常規(guī)治療基礎(chǔ)上不使用3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射液而只用5％-10％的葡萄糖250ml靜脈點(diǎn)滴，療程同前。
治療組除一例因原發(fā)病腦梗塞合并肺感染加重死亡外，其它21例急腎衰均得到逆轉(zhuǎn)，急腎衰前后各項(xiàng)化驗(yàn)結(jié)果前后變化見(jiàn)表一，兩組治療結(jié)果比較見(jiàn)表二。
表一急腎衰前后各項(xiàng)化驗(yàn)檢查對(duì)比
<p>表二治療組與對(duì)照組治療結(jié)果比較
5、3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸注射液預(yù)防血栓病(椎基底動(dòng)脈供血不全的試驗(yàn)方法采用選擇隨機(jī)患者，以主訴、查體、實(shí)驗(yàn)室所見(jiàn)，確診為椎--基底動(dòng)脈供血不全者共60例，進(jìn)行給藥觀察。給藥前停用一切干擾藥物1周，并做全面檢查后給于該注射液18ml加入5％葡萄糖液250-500ml靜滴1次/d，第7-14天再做全面復(fù)查，以給藥前后對(duì)比確定有無(wú)效果。判斷效果標(biāo)準(zhǔn)以主、查體、實(shí)驗(yàn)檢查3項(xiàng)中有2項(xiàng)以上好轉(zhuǎn)者為有效，否則為無(wú)效。實(shí)驗(yàn)室檢查主要有血液流變學(xué)、血小板聚集率。血液流變學(xué)指標(biāo)包括全血粘度、紅細(xì)胞壓積全血還原粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞變形性、紅細(xì)胞聚集系數(shù)。部分做頸椎X線攝片檢查。
60例椎基底動(dòng)脈供血不全者，經(jīng)給藥后復(fù)查，結(jié)果51例好轉(zhuǎn)，有效率為85％(見(jiàn)表三，用藥前后臨床主訴所見(jiàn)及用藥前后臨床查體改變所見(jiàn)略去)表三51例有效者用藥前后實(shí)驗(yàn)室所見(jiàn)(X+SD)
上述結(jié)果表明，60例椎基底動(dòng)脈供血不全患者，經(jīng)用本發(fā)明的3，5-、3，4-二咖啡酰氧基一奎寧酸注射液7-14天前后對(duì)比，有效率為88.23％。眩暈、惡心、肢體麻木、頭痛、頸部體征均有明顯改善。高粘血癥全部恢復(fù)正常。全血粘度、血球壓積、紅細(xì)胞變形性、紅細(xì)胞聚集指數(shù)明顯的改善，而且降至正常值內(nèi)(p＜0.05-0.01)，血小板聚集率平均下降13.46％(p＜0.01)。證實(shí)此注射液具抗凝，促進(jìn)纖溶、降低血小板聚集率及改善血液流變學(xué)的作用。同時(shí)改變了臨床證狀和體征起到了治療椎--基底脈供血不全的作用，達(dá)到預(yù)防血栓病的目的。
從以上結(jié)果，可以得出本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1、本發(fā)明對(duì)已知化合物3，5-或3，4-或4，5-二咖啡酰氧基-奎寧酸發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開(kāi)拓了一個(gè)新的應(yīng)用領(lǐng)域。
2、本發(fā)明的3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸安全無(wú)毒，藥理作用強(qiáng)，預(yù)示著很好的藥用前景。
3、本發(fā)明的物質(zhì)原料來(lái)源豐富、價(jià)廉、未見(jiàn)毒付作用，制備工藝簡(jiǎn)單，并可作成口服劑型、注射劑型、片劑等，使用方便，注射液能作肌肉注射和穴位注射，可作靜脈注射。
4、本發(fā)明的物質(zhì)配制成的藥物具有顯著增加腦血流量，降低腦血管阻力，能提高血腦屏障的通透性，提高機(jī)體巨噬細(xì)胞免疫功能及對(duì)抗腦垂體后葉素所致缺血、缺氧和對(duì)抗由二磷酸腺甙(ADP)引起的血小板凝聚功能。還具有較強(qiáng)的抑制內(nèi)凝血，促進(jìn)纖溶活性及顯著增加外周和冠脈流量等功能。
5、本發(fā)明的物質(zhì)配制成的藥物具有改善血液流變學(xué)，降低血管阻力，增加心腦血流供應(yīng)，提高機(jī)體巨噬細(xì)胞免疫功能，而且還具有對(duì)抗心肌再給氧性損傷作用以及調(diào)控脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)等作用。這些藥理作用恰恰針對(duì)了早期急性腎功能衰竭最根本的病理變化即腎臟的缺血及再灌注損害。
6、本發(fā)明的3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸有擴(kuò)張腦血管、冠脈血管和外周血管的作用，使血流量增加，改善局部血供，使外周阻力下降，減輕心臟負(fù)擔(dān)，減輕心肌耗氧量，同時(shí)也能增加機(jī)體耐缺氧能力，抑制血小板聚集等作用，這些作用都有利預(yù)防和治療腦血栓形成、腦血管意外及引起的后遺癥和冠心病等。
7、經(jīng)臨床試驗(yàn)，表明本發(fā)明的二咖啡酰氧基-奎寧酸制成的口服液、注射液、片劑見(jiàn)效迅速，療效顯著，且無(wú)毒副反應(yīng)。同時(shí)經(jīng)過(guò)設(shè)立丹參注射液、復(fù)方丹參注射液、清開(kāi)靈注射液等為對(duì)照組進(jìn)行隨機(jī)試驗(yàn)，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩者呈顯著性或極顯著性差異，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組。證明本發(fā)明的療效顯著，藥理作用強(qiáng)。
下面將描述本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。
實(shí)施例一采用茜草科咖啡屬植物咖啡豆2.5kg，用95％的乙醇提取，提取物溶于水后分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得石油醚部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析和MCI柱層析分別得3，5-、3，4-二咖啡酰氧基奎寧酸4000mg和奎寧酸2000mg。然后把3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸250mg，溶于1000ml水中制成0.25％濃度的水溶液加熱溶解，混合均勻后，裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例二采用菊科飛蓬屬植物燈盞花(Erigeron breviscapus(Vant)Hand-Mazz)全植物10kg，用95％的乙醇提取，提取物溶于水后分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得石油醚部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析和MCI柱層析分別得3，5-、3，4-二咖啡酰氧基奎寧酸4000mg和奎寧酸2000mg。然后把3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸125mg，溶于1000ml水中制成0.125％濃度的水溶液加熱溶解，混合均勻后，裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例三采用茜草科咖啡屬植物咖啡豆5.0kg，用95％的乙醇提取，提取物溶于水后分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得石油醚部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析和MCI柱層析分別得3，5-、3，4-二咖啡酰氧基奎寧酸8000mg和奎寧酸4000mg。然后把3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸用2500mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成5mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例四用實(shí)施例二的方法得到3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸4000mg。然后用高壓液相色譜分離得到3，5-二咖啡酰氧基-奎寧酸2500mg和3，4-二咖啡酰氧基1500mg，然后用3，5-或3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸化合物1500mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成3mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例五用實(shí)施例一的方法得到3，5-、3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸。然后用1500mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成3mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例六用實(shí)施例二的方法得到3，5-、3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸。然后用1500mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成3mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例七用實(shí)施例四的方法得到3，5--二咖啡酰氧基-奎寧酸化合物。然后用5000mg，溶于1000ml水中制成水溶液，加熱溶解，混合均勻后，分裝成10mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。
實(shí)施例八按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備3，5-或3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸片劑，其中所述的片劑中按實(shí)際需要能制成含有6-10％3，5-或3，4-二咖啡酰氧基-奎寧酸，也可加大或減少3，5-或3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸的含量。用上述實(shí)施例中制取化合物的方法得到化合物，取100克3，5-或3，4-二咖啡酰氧基--奎寧酸，560克微晶纖維素，無(wú)水乳糖380克，硬脂酸鎂200克，氧化硅30克，按公知的制片技術(shù)和裝備，制成片劑，即取上述配方中除硬脂酸鎂外所有成分混合25-30分鐘，再篩入硬脂酸鎂，繼續(xù)混勻，爾后用13/32英寸(約1.03cm)標(biāo)準(zhǔn)凹沖壓片。
權(quán)利要求
1.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防腎炎的藥中的應(yīng)用。
2.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防腎衰竭的藥中的應(yīng)用。
3.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防脈管炎疾病的藥中的應(yīng)用。
4.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防靜脈栓塞疾病疾病的藥中的應(yīng)用。
5.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防老年性癡呆藥中的應(yīng)用。
6.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防心、腦血管疾病藥中的應(yīng)用。
7.二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防肺心病的藥中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備抑制血小板凝聚藥中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備治療或預(yù)防冠心病藥中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是二咖啡酰氧基--奎寧酸作為制備抑制腦血栓形成藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及二咖啡酰氧基-奎寧酸在制藥領(lǐng)域中的新用途。該物質(zhì)具有改善血液流變學(xué)，降低血管阻力，增加心腦血流供應(yīng)，提高機(jī)體巨噬細(xì)胞免疫功能及對(duì)抗腦垂體后葉素所致缺血、缺氧和對(duì)抗由ADP引起的血小板凝集功能，對(duì)抗心肌再給氧性損傷作用以及調(diào)控脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)等作用；還具有較強(qiáng)的抑制內(nèi)凝血，促進(jìn)纖溶活性及顯著增加外周和冠脈流量等功能。用于治療或預(yù)防腎炎、腎衰竭、脈管炎、靜脈栓塞、心腦血管、肺心病等疑難病癥。
文檔編號(hào)A61P7/00GK1136434SQ9610114
公開(kāi)日1996年11月27日 申請(qǐng)日期1996年2月13日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月13日
發(fā)明者岳建民, 孫漢董, 浦家耀, 丁靖凱, 林中文 申請(qǐng)人:云南安泰高新技術(shù)公司, 中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所