)。
[0031] 根據(jù)上述公式，得到側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)提取率為12. 1%，提取物中黃酮類物質(zhì)含 量為82. 0% ;
[0032] 采用常規(guī)提取方法（未經(jīng)冰凍-融化處理、沒(méi)有超聲波輔助、其它條件一樣）所得 結(jié)果為：黃酮類物質(zhì)提取率為3. 6%，提取物中黃酮類物質(zhì)含量為29. 3% ;可見(jiàn)，本發(fā)明采 用凍融與超聲波聯(lián)合技術(shù)提取側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)，可以獲得提取率高、質(zhì)量?jī)?yōu)且無(wú)污染的 廣品。
[0033] 實(shí)施例2
[0034] 準(zhǔn)確稱量20g側(cè)柏葉粉，加入100mL水，制成側(cè)柏葉混合液；將側(cè)柏葉混合液 在-40°C下進(jìn)行冰凍，10h后取出室溫融化，如此反復(fù)三次；加入無(wú)水乙醇100mL，充分混勻， 浸泡2h后，進(jìn)行超聲波提取：超聲功率80W;超聲時(shí)間40min;超聲溫度60°C;離心分離，取 上清液。將上清液放置于凍干機(jī)中進(jìn)行凍干處理，得到粗品；將粗品準(zhǔn)確配制濃度為2mg/ mL的溶液，滴加到D-101大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，最大上樣量為1. 5倍柱體積，先用5 倍柱體積的水洗脫除去雜質(zhì)，再用5倍柱體積的70%乙醇洗脫，收集洗脫液、濃縮、凍干，即 得側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)樣品2. 74g。
[0035] 測(cè)定方法同實(shí)施例1 :測(cè)定側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)提取率為13. 7%，提取物中黃酮類 物質(zhì)含量為83. 7%。
[0036] 采用常規(guī)提取方法（未經(jīng)冰凍-融化處理、沒(méi)有超聲波輔助、其它條件一樣）所得 結(jié)果為：黃酮類物質(zhì)提取率為3. 8%，提取物中黃酮類物質(zhì)含量為28. 1% ;
[0037] 實(shí)施例3
[0038] 準(zhǔn)確稱量20g側(cè)柏葉粉，加入100mL水，制成側(cè)柏葉混合液；將側(cè)柏葉混合液 在-20°C下進(jìn)行冰凍，24h后取出室溫融化，如此反復(fù)三次；加入無(wú)水乙醇100mL，充分混勻， 浸泡3h后，進(jìn)行超聲波提取：超聲功率100W;超聲時(shí)間60min;超聲溫度80°C;離心分離，取 上清液。將上清液放置于凍干機(jī)中進(jìn)行凍干處理，得到粗品；將粗品準(zhǔn)確配制濃度為3mg/ mL的溶液，滴加到D-130大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，最大上樣量為1. 5倍柱體積，先用5 倍柱體積的水洗脫除去雜質(zhì)，再用5倍柱體積的80%乙醇洗脫，收集洗脫液、濃縮、凍干，即 得側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)樣品2. 88g。
[0039] 測(cè)定方法同實(shí)施例1 :測(cè)定側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)提取率為14. 4%，提取物中黃酮類 物質(zhì)含量為80. 5% ;
[0040] 采用常規(guī)提取方法（未經(jīng)冰凍-融化處理、沒(méi)有超聲波輔助、其它條件一樣）所得 結(jié)果為：黃酮類物質(zhì)提取率為3. 9%，提取物中黃酮類物質(zhì)含量為26. 5%。
[0041] 實(shí)施例4
[0042] 準(zhǔn)確稱量20g側(cè)柏葉粉，加入100mL水，制成側(cè)柏葉混合液；將側(cè)柏葉混合液 在-20°C下進(jìn)行冰凍，24h后取出室溫融化，如此反復(fù)三次；加入無(wú)水乙醇100mL，充分混勻， 浸泡2h后，進(jìn)行超聲波提取：超聲功率100W;超聲時(shí)間40min;超聲溫度70°C;離心分離，取 上清液。將上清液放置于凍干機(jī)中進(jìn)行凍干處理，得到粗品；將粗品準(zhǔn)確配制濃度為3mg/ mL的溶液，滴加到D-101大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，最大上樣量為1. 5倍柱體積，先用5 倍柱體積的水洗脫除去雜質(zhì)，再用5倍柱體積的80%乙醇洗脫，收集洗脫液、濃縮、凍干，即 得側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)樣品2. 96g。
[0043] 測(cè)定方法同實(shí)施例1:測(cè)定側(cè)柏葉黃酮類物質(zhì)提取率為14. 8%，提取物中黃酮類 物質(zhì)含量為84. 7% ;
[0044] 采用常規(guī)提取方法（未經(jīng)冰凍-融化處理、沒(méi)有超聲波輔助、其它條件一樣）所得 結(jié)果為：黃酮類物質(zhì)提取率為4. 1%，提取物中黃酮類物質(zhì)含量為30. 2% ;
[0045] 利用本發(fā)明所述的方法提取側(cè)柏葉中黃酮類物質(zhì)與常規(guī)提取方法相比較，試驗(yàn)結(jié) 果見(jiàn)下表：
[0046]表1
[0047]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提取側(cè)柏葉中黃酮類物質(zhì)的方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行： (1) 將側(cè)柏葉洗凈、烘干后粉碎，得到側(cè)柏葉粉，然后加入水，均勻混合得到混合液； (2) 將混合液在-40?-20°C的溫度下冰凍10?24小時(shí)，室溫下放置直至其融化；重 復(fù)冰凍-室溫融化步驟2?3次； (3) 向步驟（2)所得混合液中加入乙醇充分混勻，浸泡1?3h后，進(jìn)行超聲波提取，離 心分離，取上清液，凍干，得到粗品； (4) 將粗品配制成濃度為1?3mg/mL的溶液，滴加到大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，吸 附后用水洗脫除去雜質(zhì)，再用60?80%乙醇作為洗脫劑，對(duì)洗脫劑進(jìn)行回收溶劑和濃縮處 理，最后進(jìn)行凍干，即得到黃酮類物質(zhì)。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于水與側(cè)柏葉的質(zhì)量比為5 :1。
3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于乙醇與混合液的體積比1 :1。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在于將步驟（2)中所得的混合液 在-40?-20°C的溫度下冰凍10?24小時(shí)后，置于超聲波中融化，再進(jìn)行步驟（3)。
5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于超聲提取過(guò)程中，超聲功率為60?100W ;超 聲時(shí)間為20?60min ;超聲溫度為40?80°C。
6. 如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于超聲提取過(guò)程中，超聲功率為60?100W ;超 聲時(shí)間為69?90min。
7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的大孔樹(shù)脂為D-101、AB-8或DM-130。
8. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述溶液的滴加量為柱體積的1. 5倍；水及 乙醇的用量為柱體積的5倍。
9. 一種提取側(cè)柏葉中黃酮類物質(zhì)的方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行： 將側(cè)柏葉洗凈、烘干后粉碎，得到側(cè)柏葉粉，然后加入水，均勻混合得到混合液；將混合 液在-40?-20°C的溫度下冰凍10?24小時(shí)，室溫下放置直至其融化；重復(fù)冰凍-室溫 融化步驟二次；再次冰凍，置于超聲波中融化，融化后，凍干，得到粗品；將粗品配制成濃度 為1?3mg/mL的溶液，滴加到大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，吸附后用水洗脫除去雜質(zhì)，再用 60?80%乙醇作為洗脫劑，對(duì)洗脫劑進(jìn)行回收溶劑和濃縮處理，最后進(jìn)行凍干，即得到黃 酮類物質(zhì)。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種提取側(cè)柏葉中黃酮類物質(zhì)的方法，將側(cè)柏葉洗凈、烘干后粉碎，得到側(cè)柏葉粉，然后加入水，均勻混合得到混合液；將混合液在-40～-20℃的溫度下冰凍10～24小時(shí)，室溫下放置直至其融化；重復(fù)冰凍-室溫融化步驟2～3次；加入乙醇充分混勻，浸泡1～3h后進(jìn)行超聲波提取，離心分離，取上清液，凍干，得到粗品；將粗品配制成濃度為1～3mg/mL的溶液，滴加到大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，吸附后用水洗脫除去雜質(zhì)，再用60～80％乙醇作為洗脫劑，對(duì)洗脫劑進(jìn)行回收溶劑和濃縮處理，最后進(jìn)行凍干，即得到黃酮類物質(zhì)。本方法提取率高、無(wú)污染、成本低。
【IPC分類】A61K135-00, A61K127-00, A61K36-14
【公開(kāi)號(hào)】CN104523767
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410785394
【發(fā)明人】都宏霞, 周玉青, 許寧, 胡瑾
【申請(qǐng)人】南京化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年12月16日