一種抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)醫(yī)藥領(lǐng)域，本發(fā)明更具體涉及了一種抗菌止癢消炎消腫去疤 痕的短肽及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 各類皮膚紅腫、發(fā)炎、瘙癢是常見多發(fā)性的皮膚病，嚴(yán)重影響人們的健康，通常分 為神經(jīng)性皮炎、接觸性皮炎、急慢性濕瘆、蟲咬性皮炎及瘙癢性皮膚病等。目前市場上有各 種膏體藥物治療皮膚病，但這些膏類藥物有的療效不佳有的有副作用而不能治愈皮膚病， 有的雖然能夠治愈皮膚病，但卻會讓患者落下疤痕，主要原因是這些藥物大都是無機(jī)化合 物，化學(xué)合成所得的產(chǎn)品。而用生物活性肽一一來自于蛋白質(zhì)的片段的氨基酸序列所形成 的短肽，做為皮膚抗菌止癢消炎消腫去疤痕的藥物，迄今尚未見文獻(xiàn)報道。因此，研制抗菌 止癢消炎消腫去疤痕的生物活性短肽及其應(yīng)用具有十分重要的意義與價值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明目的是針對上述問題，提供一種抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽及其應(yīng) 用。
[0004] 本發(fā)明所述的一種抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽， 〈1>組成短肽的氨基酸序列如下所示： Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg 或者 Tyr/T-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg 或者 Leu-Tyr-Glu-Val 或者 Tyr-Glu-Val-Ala-Arg ； 〈2>所述短肽的核苷酸序列是指短肽的每個氨基酸序列所對應(yīng)的3個密碼子構(gòu)成的基 因序列。
[0005] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，短肽片段的 氨基酸序列具有與所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，或多90%的相似性，所述片段為把 所述的6個或7個氨基酸的序列從任意位置截取成3個或4個或5個或6個氨基酸組成的 與所述短肽具有同樣生物活性的短肽。
[0006] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，其短肽氨基 酸序列所對應(yīng)的核苷酸的制備方法及其應(yīng)用，短肽的核苷酸片段的堿基序列具有與所述短 肽的堿基序列多70%的相同性，多90%的相似性，所述片段為把所述的6個或7個氨基酸的 對應(yīng)的核苷酸序列從任意位置截取成3個或4個或5個或6個氨基酸對應(yīng)的堿基序列所組 成的與所述短肽的核苷酸序列具有同樣生物活性的短肽。
[0007] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，其短肽類似 物，所述短肽類似物具有與所述短肽相同的生物活性，所述類似物是指在用所述短肽和另 一種化合物融合或者用所述短肽的氨基酸序列融合另外的多肽或者蛋白質(zhì)而形成具有生 物活性的多肽序列或蛋白質(zhì)。
[0008] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，其短肽衍生 物，所述短肽衍生物的氨基酸序列具有與所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，多90%的相 似性，所述衍生物是指把所述短肽的氨基酸的序列中的氨基酸的一個或者幾個氨基酸的某 個基團(tuán)用另外的基團(tuán)取代后與所述短肽具有同樣生物活性的短肽。
[0009] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，其短肽變 體，所述短肽變體的氨基酸序列具有與所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，多90%的相似 性，所述變體是指一種具有一個或幾個氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的核苷 酸序列，所述改變包括在氨基酸序列或核苷酸序列中，在序列中間的任一位置缺失、插入或 替換氨基酸或核苷酸，或在序列兩端添加氨基酸或核苷酸。
[0010] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，所述的短肽 采用化學(xué)合成方法制備。
[0011] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，所述核苷酸 采用人工合成方法制備。
[0012] 本發(fā)明所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的制備方法及其應(yīng)用，所述短肽、 核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有抗菌止癢消炎消腫的 各類皮膚消毒或治療皮膚病的藥物。其對皮膚病恢復(fù)過程中，對皮膚細(xì)胞具有修復(fù)作用，從 而使得皮膚不留疤痕，其適用于神經(jīng)性皮炎、接觸性皮炎、急慢性濕瘆、蟲咬性皮炎及瘙癢 性皮膚病的局部治療。
[0013] 所述的皮膚病為接觸性皮炎、急慢性濕瘆或蟲咬性皮炎癥。
[0014] 所述的菌為金黃色葡萄球菌。
[0015] 本發(fā)明的顯著優(yōu)點是：本發(fā)明的短肽來自于運用生物信息學(xué)的方法把國際蛋白質(zhì) 數(shù)據(jù)庫的蛋白進(jìn)行序列比對，篩選出來的一種新型的具有活性功能的生物活性肽，運用本 發(fā)明的短肽對皮膚病的治療擁有卓越的顯著功效，最大的優(yōu)點是治愈后皮膚不留疤痕。
【附圖說明】
[0016] 圖1是本發(fā)明涉及的短肽殺菌效果實驗圖。其中（a)實驗組24小時培養(yǎng)的結(jié)果， 無金黃色葡萄球菌長出來；（b)對照組在24小時后長出金黃色葡萄球菌；（c)實驗組48小 時培養(yǎng)的結(jié)果，無金黃色葡萄球菌長出來；（d)對照組在48小時后長出的金黃色葡萄球菌 的數(shù)量增多，顆粒明顯變大。
[0017] 圖2是患者被蚊子叮咬后，使用本發(fā)明的皮膚抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽噴 劑，使用前后對比效果圖。其中（a)臨床患者的胳膊，被蚊子叮后，出現(xiàn)紅腫與瘙癢；（b)噴 涂本發(fā)明的短肽噴劑，患者立刻感到不癢了；（c)噴涂本發(fā)明的短肽噴劑10分鐘后，紅腫完 全消失，痊愈。
[0018] 圖3是本發(fā)明涉及的短肽衍生物殺菌效果實驗圖。其中（a)實驗組24小時培養(yǎng) 的結(jié)果，金黃色葡萄球菌的數(shù)量明顯少于對照組；（b)對照組在24小時后長出金黃色葡萄 球菌； 圖4是本發(fā)明涉及的短肽截取的短肽片段殺菌效果實驗圖。其中（a)實驗組48小時 培養(yǎng)的結(jié)果，金黃色葡萄球菌的數(shù)量明顯少于對照組；（b)對照組在48小時后長出金黃色 葡萄球菌。
【具體實施方式】
[0019] 短肽的制備方法采用化學(xué)合成的方法，即本領(lǐng)域熟知的已經(jīng)非常成熟的固相肽合 成方法，既可以采用Boc方法也可以采用Fmoc方法。具體做法就是將被保護(hù)的氨基酸逐個 偶聯(lián)到惰性固相載體上去，然后利用強(qiáng)酸將肽鏈從載體上裂解下來，同時去除側(cè)鏈保護(hù)。
[0020] 短肽的氨基酸序列，Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg為主要序列，從任意位置截 取成3個或4個或5個或6個氨基酸組成的與所述短肽具有同樣生物活性的短肽片段，短 肽類似物，短肽衍生物，短肽變體等都具有本發(fā)明所述的功效作用。
[0021] 核苷酸采用人工合成方法制備；編碼短肽的核苷酸包含下組中的一種： (a) 編碼具有所述氨基酸序列的短肽或其片段、類似物、衍生物或其變體的核苷酸； (b) 與（a)所述核苷酸互補(bǔ)的核苷酸； (c) 與（a)或（b)中所述核苷酸有彡75%相同性的核苷酸； 該核苷酸基本由編碼具有〈1>所述的氨基酸序列短肽的核苷酸組成，本發(fā)明的核苷酸 序列，其形式為DNA形式包括cDNA或人工合成的DNA。DNA可以是單鏈的也可以是雙鏈的。 編碼短肽的編碼區(qū)序列可以和〈2>中的核苷酸相同，也可以不同，稱為變異體，其中變異體 是指具有編碼權(quán)利要求1中的氨基酸序列的編碼，但可以和〈2>中的核苷酸不同。變異體 可以是一個或幾個核苷酸取代、插入、缺失的核苷酸序列，但不會改變編碼〈1>中氨基酸序 列的短肽的活性功能。
[0022] 該短肽或核苷酸的"變體"是指一種具有一個或幾個氨基酸或核苷酸改變的氨基 酸序列或編碼它的核苷酸序列。改變可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的 缺失、插入、添加或替換。變體可具有"保守性"改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相 類似的結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)，也可以有"非保守性"改變，其中替換的氨基酸不具有與原氨基酸 相類似的結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)。"缺失"是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個或幾個氨基酸 或核苷酸的缺失；"插入"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的中間任意位置插入一個或幾個 氨基酸；"添加"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的N端或C端添加一個或幾個氨基酸；"替 換"是指用不同的氨基酸或核苷酸替換一個或幾個氨基酸或核苷酸。
[0023] 該短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備抗菌止 癢消炎消腫包括但不限于下述疾病的藥物的用途： 1.神經(jīng)性皮炎：慢性單純性苔蘚，包括局限性神經(jīng)性皮炎和彌漫性神經(jīng)性皮炎。
[0024] 2.接觸性皮炎：包括變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎和刺激性接觸性皮炎以及速發(fā)型接 觸性反應(yīng)、光毒性及光變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎等。
[0025] 3.急慢性濕瘆：包括急性濕瘆、亞急性濕瘆和慢性濕瘆。
[0026] 4.蟲咬性皮炎：包括蚊蟲叮咬后引起的皮炎。
[0027] 5.瘙癢性皮膚?。喊ㄆ胀ㄐ秃瓦^敏性皮膚瘙癢癥。
[0028] 6.外陰瘙癢癥：包括肛門、陰唇和陰囊瘙癢癥。
[0029] 在計算短肽片段、短肽衍生物和短肽變體的氨基酸主序列具有與短肽氨基酸主序 列的相同性和相似性時，"相同性百分率"是指兩種或多種氨基酸或核酸序列比較中序列相 同的百分率。根據(jù) Cluster 法（Higging D.G. & Sharp P.M·，Gene 1988，73:234-237 )通 過檢查所有配對之間的距離將各組序列排列成簇，然后將各簇以成對或成組分配。兩個氨 基酸序列如序列A和序列B之間的相同性百分率通過下式計算：
【主權(quán)項】
1. 一種抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的應(yīng)用，其特征在于：所述短肽用于制備具有 抗菌止癢消炎消腫的皮膚消毒藥物或用于制備治療皮膚病的藥物，所述短肽的氨基酸序列 如下所示： Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg或者TyiTT-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg或者 Leu-Tyr-Glu-Val或者 Tyr-Glu-Val-Ala-Arg0
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的應(yīng)用，其特征在于：所述 的皮膚病為接觸性皮炎、急慢性濕疹或蟲咬性皮炎癥。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的應(yīng)用，其特征在于：所述 的菌為金黃色葡萄球菌。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種抗菌止癢消炎消腫去疤痕的短肽的應(yīng)用。該短肽的短肽片段、類似物、衍生物、變體的氨基酸主序列具有與該短肽氨基酸主序列≥70%的相同性，≥90%的相似性；短肽、核苷酸、短肽片段、短肽類似物、短肽衍生物和短肽變體用于制備具有抗菌止癢消炎消腫的各類皮膚消毒或治療皮膚病的藥物，制備神經(jīng)性皮炎、接觸性皮炎、慢性濕疹、蟲咬性皮炎及瘙癢性皮膚病的局部治療的藥物應(yīng)用。本發(fā)明涉及的短肽分子結(jié)構(gòu)明確，生產(chǎn)技術(shù)成熟，成品無毒無害無副作用，顯著特點是治愈后不落疤痕，是一種優(yōu)異的外用皮膚消炎消腫止癢消毒劑或皮膚病藥物。
【IPC分類】A61P29-00, A61P17-00, C07K5-103, A61P31-04, A61K38-07, C07K7-06, A61K38-08, A61P17-04, A61P17-02
【公開號】CN104840940
【申請?zhí)枴緾N201510289839
【發(fā)明人】李 昊
【申請人】李 昊
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2013年8月10日
【公告號】CN103467569A, CN103467569B