替普瑞酮在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種替普瑞酮的醫(yī)藥用途，具體為替普瑞酮在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]藥物復(fù)吸是國際性公害，是長期的世界性問題，它已經(jīng)成為21世紀(jì)人類的主要敵人之一，且引起了各國研宄人員的廣泛重視。復(fù)吸是指藥物依賴者在戒藥一段時(shí)間后，由于某些因素的激發(fā)，重現(xiàn)覓藥和用藥的行為，是藥物成癮的重要特征。藥物復(fù)吸的影響涉及社會(huì)文化、政治、行為等多個(gè)領(lǐng)域，可引起一系列的社會(huì)和公共衛(wèi)生問題，如人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)、乙型肝炎病毒的感染的主要原因之一。成癮藥物濫用者一旦成癮，脫毒戒毒十分困難，戒毒后的復(fù)吸率仍高達(dá)95%。阿片類毒品是成癮藥物中的一種，常見的阿片類毒品包括嗎啡、海洛因和鴉片等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)可用于阿片類復(fù)吸的藥物，有阿片受體拮抗劑和阿片受體激動(dòng)劑和部分激動(dòng)劑，但多存在著副作用大、療效不肯定、成本高等局限性，但到目前為止，現(xiàn)有的防復(fù)吸藥物仍不能滿足預(yù)防或治療需要。
[0003]替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA),即 6，10，H，I8-四甲基-δ，9，13，17-十九烷四烯-2-酮的單順式和全反式異構(gòu)體的混合物，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于消化道潰瘍的治療中。近年研宄發(fā)現(xiàn)，GGA可以通過誘導(dǎo)熱休克蛋白70和硫氧還蛋白減輕化學(xué)物質(zhì)引起的細(xì)胞毒害(Bai J, Nakamura H, Hattori I, Tanito M, Yodoi J.Th1redoxin suppresses l-methyl-4-phenylpyridinium-1nduced neurotoxicity inrat PC12 cells, Neurosci Lett 2002; 321，81-4; Takumida M，Anniko M.Heatshock protein 70 delays gentamicin-1nduced vestibular hair cell death.ActaOtolaiyngol.2005; 125:23-8)。同時(shí)，GGA對(duì)光損傷、缺血性腎衰竭、癲癇和腦梗塞等具有保護(hù)作用(Tanito Mj Kwon Y.Wj Kondo N，Bai Jj Masutani H，Nakamura H，F(xiàn)ujii Jj Ohira A, Yodoi J.Cytoprotective effects of geranylgeranylacetoneagainst retinal photooxidative damage, J Neurosci 2005; 25， 2396-404; SuzukiSj Maruyama S，Sato Wj Morita Y，Sato F，Miki Y，Kato S，Katsuno M，Sobue G，Yuzawa Y， Matsuo S.geranylgeranylacetone amel1rates ischemic acute renalfailure via induct1n of Hsp70.Kidney Int 2005;67:2210-20; Fujiki M， KobayashiHj Inoue R， Tatsuya R， Ishii K.Single oral dose of geranylgeranylacetone forprotect1n against delayed neuronal death induced by transient ischemia.BrainRes 2004;1020:210-213; Yasuda H， Shichinohe H， Kuroda S， Ishikawa T， Iwasaki Y.Neuroprotective effect of a heat shock protein inducer, geranylgeranylacetonein permanent focal cerebral ischemia.Brain Res 2005; 1032:176-182) 0 替普瑞酮是否可以用于阿片類毒品復(fù)吸的預(yù)防或治療尚未見報(bào)道。大鼠海洛因復(fù)吸時(shí)可以觀察到PFC投射到NAc區(qū)有長時(shí)程增強(qiáng)樣突觸增強(qiáng)，在海洛因藥物尋求恢復(fù)前阻斷NR2B表達(dá)，可以阻斷長時(shí)程增強(qiáng)樣變化且抑制了復(fù)吸(Shen H，Moussawi K，Zhou W，Toda S，KalivasPW.Heroin relapse requires long-term potentiat1n-like plasticity mediatedby NMDA2b-containing receptors [J].Proc Natl Acad Sci USA，2011，108(48):19407-19412)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供替普瑞酮(geranylgeranylacetone，GGA)的新用途，即在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明所述的應(yīng)用是以GGA為活性成分在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明所述應(yīng)用中還可以加入一種或多種藥物上可接受的輔料，所述輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的填充劑、稀釋劑、粘合劑、賦形劑、吸收促進(jìn)劑、填充劑、表面活性劑和穩(wěn)定劑等，必要時(shí)還可加入香味劑、色素和甜味劑等。
[0007]本發(fā)明所述應(yīng)用除制成膠囊外，還可以制成丸劑、粉劑、片劑、粒劑、口服液和注射液等多種形式。
[0008]本發(fā)明公開了 GGA的一種新用途，即在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果:口服替普瑞酮7天后，對(duì)嗎啡成癮消退后復(fù)吸點(diǎn)燃小鼠進(jìn)行條件性位置偏愛測(cè)試。發(fā)現(xiàn)預(yù)先口服GGA，能夠顯著抑制嗎啡復(fù)吸引起的小鼠條件性位置偏愛，且在分子水平上GGA顯著抑制了嗎啡復(fù)吸點(diǎn)燃誘導(dǎo)的NAc區(qū)NR2B的表達(dá)升高。因此，替普瑞酮可用于制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸的藥物。
[0009]由于替普瑞酮在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用是發(fā)明人的首次發(fā)現(xiàn)，因此，無論是GGA單獨(dú)使用為活性成分制成的藥劑，還是利用GGA預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸的作用與其他活性成分配合使用制成的藥劑，均在本申請(qǐng)的保護(hù)范圍之內(nèi)。與目前臨床上常用的預(yù)防藥物成癮及復(fù)吸的藥物相比，本發(fā)明的藥物具有以下優(yōu)點(diǎn):
(I)療效顯著；(2)安全性高，無成癮性；(3)價(jià)格低廉，可以減輕病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
【附圖說明】
[0010]圖1是替普瑞酮抑制嗎啡成癮戒斷后復(fù)吸點(diǎn)燃小鼠的條件性位置偏愛結(jié)果。
[0011]圖2是替普瑞酮抑制嗎啡復(fù)吸引起的NAc區(qū)NR2B表達(dá)升高的實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面通過附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于所述內(nèi)容，所用方法如無特別說明均為常規(guī)方法。
[0013]1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:SPF級(jí)C57BL/6小鼠:雄性，體重19_22g，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。小鼠飼喂專用飼料，自由飲食和飲水。
[0014]2、藥品:替普瑞酮(日本衛(wèi)材公司生產(chǎn)，分子量330.55);鹽酸嗎啡注射液(東北制藥集團(tuán)公司沈陽第一制藥廠)。
[0015]實(shí)施例1:替普瑞酮拮抗嗎啡誘發(fā)的條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)采用小動(dòng)物自主活動(dòng)檢測(cè)裝置測(cè)定，小鼠分成4組，每組10只小鼠。對(duì)照組(C)連續(xù)7天灌胃給予生理鹽水；嗎啡組(Mor)連續(xù)7天生理鹽水灌胃；GGA和嗎啡GGA組(GGA+Mor)連續(xù)7天灌胃給予GGA (800 mg/kg)。第8天測(cè)條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)初始時(shí)間15 min。之后分別在第9、11、13、15天，C組，腹腔注射生理鹽水，GGA和GGA+Mor組灌胃給予GGA (800mg/kg) ,Mor組和GGA+Mor組腹腔注射嗎啡20 mg/kg,在第10、12、14、16天各組分別灌胃及腹腔注射生理鹽水。在第17天進(jìn)行條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)15 min，記錄伴藥箱時(shí)間。在第18至25天對(duì)小鼠停止給藥，之后第26天，進(jìn)行條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)15 min,記錄伴藥箱時(shí)間，檢測(cè)位置偏愛是否消退。在第27天復(fù)吸點(diǎn)燃，C組和GGA組腹腔注射生理鹽水，Mor組和GGA+Mor組腹腔注射嗎啡(10 mg/kg)，2 h后進(jìn)行條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)15 min，記錄伴藥箱時(shí)間。圖1結(jié)果顯示，Mor組小鼠經(jīng)嗎啡成癮消退后給予低劑量的嗎啡，小鼠偏愛于伴藥箱(P < 0.05，與C組小鼠對(duì)比)；而GGA+Mor組小鼠經(jīng)GGA預(yù)先灌胃后，可以拮抗嗎啡成癮消退后給予低劑量的嗎啡點(diǎn)燃誘發(fā)的伴藥箱偏愛(P < 0.05，與Mor組小鼠對(duì)比)。
[0016]實(shí)施例2:替普瑞酮抑制嗎啡復(fù)吸誘導(dǎo)的NAc區(qū)NR2B的表達(dá)升高
組織取材及保存:將小鼠頸椎脫白處死后，開胸，將右心房的靜脈血管端剪開，用IXPBS緩沖液經(jīng)左心室灌流，流速為20轉(zhuǎn)/分，待各臟器失血變白后停止。然后取NAc區(qū)組織，分裝放入液氮中速凍，做好標(biāo)記，保存于-80 °0冰箱中。
[0017]腦組織中蛋白質(zhì)的提取:取出凍存于-80 °C冰箱的NAc區(qū)組織，分別用鑷子取出相同部位、相同大小的組織，放入玻璃研磨器中充分研磨成分散的細(xì)胞，加入適量的細(xì)胞裂解液，再將混合液吸出放入1.5 ml eppendorf離心管，再每隔1min冰浴進(jìn)行裂解50 min后，15000 rpm、4 °C離心15分鐘，取上清液放于另外標(biāo)記好的1.5 ml eppendorf離心管中并保存于-80°C冰箱中，以用于Western bloting檢測(cè)
蛋白免疫印跡:總蛋白加樣量為20 μ g，與補(bǔ)足反應(yīng)體系的1XPBS、起聚沉及前沿指示作用的2X loading buffer混合后，95°C熱變性5min，用15%的SDS-PAGE膠電泳分離后，將蛋白條帶用電轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，用10%脫脂牛奶4°C封閉過夜；取出PVDF膜，用含0.1%Tween-20的TPBS沖洗后，加入2000倍稀釋的一抗室溫孵育60 min ;用含0.1% Tween-20的TPBS沖洗，加入5000倍稀釋的二抗室溫孵育60 min ;用含0.1% Tween-20的TPBS沖洗，將PVDF膜浸入發(fā)光底物溶液中反應(yīng)I min，X射線膠片曝光。
[0018]數(shù)據(jù)分析:蛋白條帶灰度分析:使用掃描儀將曝光獲得的蛋白條帶掃描采集并保存至計(jì)算機(jī)，使用ImageJ、SPSS等軟件對(duì)蛋白條帶灰度值進(jìn)行顯著性差異分析。
[0019]圖2結(jié)果顯示:嗎啡復(fù)吸點(diǎn)燃小鼠NAc區(qū)的NR2B表達(dá)升高，經(jīng)過GGA預(yù)處理后顯著抑制了嗎啡成癮消退后給予低劑量的嗎啡點(diǎn)燃誘發(fā)的NR2B的表達(dá)水平。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.替普瑞酮在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了替普瑞酮的新用途，即在制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸藥物中的應(yīng)用，涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域；實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：口服替普瑞酮7天后，對(duì)嗎啡成癮消退后復(fù)吸點(diǎn)燃小鼠進(jìn)行條件性位置偏愛測(cè)試；發(fā)現(xiàn)預(yù)先口服GGA，能夠顯著抑制嗎啡復(fù)吸引起的小鼠條件性位置偏愛，且在分子水平上GGA顯著抑制了嗎啡復(fù)吸點(diǎn)燃誘導(dǎo)的NAc區(qū)NR2B的表達(dá)升高，替普瑞酮可用于制備預(yù)防和/或治療阿片類毒品復(fù)吸的藥物。
【IPC分類】A61K31/121, A61P25/36, A61P25/30
【公開號(hào)】CN104922097
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510274523
【發(fā)明人】白潔, 朱光潔, 周小爽, 賈金婧
【申請(qǐng)人】昆明理工大學(xué)
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年5月26日