一種生物膜及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及組織工程技術(shù)領域，尤其涉及一種生物膜及其制備方法。該方法工藝簡單，成本較低，對膜組織的膠原纖維損害較小，且脫細胞效果好，所獲得的生物膜保留了動物膜組織的天然雙層結(jié)構(gòu)，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。本發(fā)明實施例提供一種生物膜的制備方法，包括：步驟1)剔除哺乳動物膜組織表面的脂肪組織，獲得初步去脂后的膜組織；步驟2)將初步去脂后的膜組織用堿溶液浸泡進行脫細胞處理，獲得脫細胞后的膜組織；步驟3)將脫細胞后的膜組織用有機溶劑浸泡，并在振蕩下進行脫脂處理，獲得脫脂后的膜組織；步驟4)將脫脂后的膜組織平鋪，干燥、滅菌獲得生物膜。
【專利說明】
_種生物膜及其制備方法
技術(shù)領域
[0001]本發(fā)明涉及引導組織再生技術(shù)領域，尤其涉及一種生物膜及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]引導組織再生術(shù)是一種理想的促進牙周新附著的技術(shù);該技術(shù)是將引導組織再生膜覆蓋于牙周組織缺損上方，以阻擋生長較快的上皮細胞和成纖維細胞長入缺損區(qū)，從而為牙周膜細胞和骨細胞的生長提供一定的空間，促進牙周組織再生。因此，理想的引導組織再生膜應為具有致密層和疏松層的雙層結(jié)構(gòu)，所述致密層可以阻擋軟組織的侵入，而疏松層的多孔結(jié)構(gòu)更有利于骨細胞的貼附和生長。
[0003]現(xiàn)有的引導組織再生膜主要通過兩種方法獲取，一種方法為人工合成法，通過引入外來可降解材料(如脂肪族聚酯)與從動物體內(nèi)提取的膠原和絲素蛋白制備致密層和疏松層，或者，在外來可降解材料上復合透明質(zhì)酸、鈣鹽等，通過交聯(lián)或者靜電紡絲技術(shù)整合成具有雙層或者三層結(jié)構(gòu)的引導組織再生膜，這種人工合成法所獲得的引導組織再生膜需要引入外來可降解材料，可降解材料在降解后產(chǎn)物呈酸性，會引發(fā)炎癥反應，因此，該引導組織再生膜的生物相容性和安全性較差;使得該引導組織再生膜的機械強度變差，容易發(fā)生塌陷，從而影響新生組織生長；另一種方法是通過將動物膜組織進行脫細胞、脫脂處理，獲得僅包含細胞外基質(zhì)的生物膜，該生物膜具有天然雙層結(jié)構(gòu)，該生物膜在作為引導組織再生膜用于牙周組織缺損時，不引入外來可降解材料，生物相容性、安全性、機械強度均較為優(yōu)異;但是，現(xiàn)有技術(shù)中，對所述動物膜組織進行脫細胞時主要選用胰酶、EDTA、聚乙二醇辛基苯基醚，這些試劑脫細胞效果不明顯，效率低，聚乙二醇辛基苯基醚毒性較大，胰酶對材料的膠原纖維結(jié)構(gòu)損害較大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的主要目的在于，提供一種生物膜及其制備方法。該方法工藝簡單，成本較低，脫細胞效果好，對膜組織的膠原纖維損害較小，所獲得的生物膜保留了動物膜組織的天然雙層結(jié)構(gòu)，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0005]為達到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
[0006]—方面，本發(fā)明實施例提供一種生物膜的制備方法，包括:
[0007]步驟I)剔除哺乳動物膜組織表面的脂肪組織，獲得初步去脂后的膜組織；
[0008]步驟2)將初步去脂后的膜組織用堿溶液浸泡進行脫細胞處理，獲得脫細胞后的膜組織；
[0009]步驟3)將脫細胞后的膜組織用有機溶劑浸泡，并在振蕩下進行脫脂處理，獲得脫脂后的膜組織；
[0010]步驟4)將脫脂后的膜組織平鋪，干燥、滅菌獲得生物膜。
[0011]優(yōu)選的，所述哺乳動物膜組織選自小腸粘膜、腹膜、心包膜、羊膜或者隔膜中的任意一種。
[0012]進一步優(yōu)選的，所述堿溶液為氫氧化鈉溶液。
[0013]進一步優(yōu)選的，所述有機溶劑為異丙醇、丙酮或者乙醇中的一種或者幾種。
[0014]可選的，所述步驟4)中將脫脂后的膜組織平鋪具體為:將所述脫脂后的膜組織的致密層貼附不銹鋼板或者聚乙烯板平鋪。
[0015]優(yōu)選的，所述步驟4)中干燥溫度為40-50°C，干燥時間為2.5_4.5h。
[0016]另一方面，本發(fā)明實施例提供一種生物膜，采用上述所述的方法制備獲得。
[0017]可選的，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度小于等于100ng/mg。
[0018]優(yōu)選的，所述生物膜的脂肪含量小于等于2%。
[0019]可選的，所述生物膜的水分含量為5-20%。
[0020]本發(fā)明實施例提供的一種生物膜及其制備方法。該方法工藝簡單，成本較小，通過將哺乳動物的膜組織用堿溶液代替胰酶、EDTA或/和聚乙二醇辛基苯基醚進行脫細胞，與胰酶相比堿溶液對膜組織的膠原纖維損害較小，且脫細胞效果好，與聚乙二醇辛基苯基醚相比所述堿溶液無毒，能夠提高脫細胞效果與脫細胞效率，采用有機溶劑對所述動物膜組織進行脫脂，脫脂效果較好，從而能夠提高成品質(zhì)量;所獲得的生物膜保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，脫細胞和脫脂效果好，在用于臨床中時能夠減少成品的免疫原性，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
【附圖說明】
[0021]為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖。
[0022]圖1為本發(fā)明實施例提供的一種生物膜的制備方法的流程示意圖。
【具體實施方式】
[0023]現(xiàn)將詳細地提供本發(fā)明實施方式的參考，其一個或多個實例描述于下文。提供每一實例作為解釋而非限制本發(fā)明。實際上，對本領域技術(shù)人員而言，顯而易見的是，可以對本發(fā)明進行多種修改和變化而不背離本發(fā)明的范圍或精神。例如，作為一個實施方式的部分而說明或描述的特征可以用于另一實施方式中，來產(chǎn)生更進一步的實施方式。因此，基于本發(fā)明中的實施例，本領域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0024]本發(fā)明實施例所涉及的材料均可以通過商業(yè)途徑或通過
【申請人】獲取。
[0025]—方面，本發(fā)明實施例提供一種生物膜的制備方法，參見圖1，包括:
[0026]步驟I)剔除哺乳動物膜組織表面的脂肪組織，獲得初步去脂后的膜組織；
[0027]步驟2)將初步去脂后的膜組織用堿溶液浸泡進行脫細胞處理，獲得脫細胞后的膜組織；
[0028]步驟3)將脫細胞后的膜組織用有機溶劑浸泡，并在振蕩下進行再次脫脂處理，獲得脫脂后的膜組織；
[0029]步驟4)將脫脂后的膜組織平鋪，干燥、滅菌獲得生物膜。
[0030]其中，需要說明的是，由于動物膜組織本身就具有致密層和疏松層，所述致密層由較細小的膠原纖維束緊密排列而成，可以防止軟組織長入骨缺損區(qū)域，為新骨的生長預留空間;所述疏松層由較粗大的膠原纖維束稀疏排列而成，形成具有多孔結(jié)構(gòu)的粗糙表面，能夠提供更大的接觸面積，有利于細胞因子吸附及成骨類細胞的貼附生長，加快新骨形成。
[0031]本發(fā)明實施例提供的一種生物膜的制備方法。該方法工藝簡單，成本較小，通過將哺乳動物的膜組織用堿溶液代替胰酶、EDTA或/和聚乙二醇辛基苯基醚進行脫細胞，與胰酶相比堿溶液對膜組織的膠原纖維損害較小，且脫細胞效果好，與聚乙二醇辛基苯基醚相比所述堿溶液無毒，能夠提高脫細胞效果與脫細胞效率，采用有機溶劑對所述動物膜組織進行脫脂，根據(jù)相似相溶原理脫脂效果較好，從而能夠提高成品質(zhì)量;所獲得的生物膜保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，脫細胞和脫脂效果好，在用于臨床中時能夠降低成品的免疫原性，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0032]其中，對所述哺乳動物膜組織的來源不做限定。
[0033]所述哺乳動物膜組織選自小腸粘膜、腹膜、心包膜、羊膜或者隔膜中的任意一種。
[0034]其中，對所述步驟I)中剔除哺乳動物膜組織表面的脂肪組織的具體操作不做限定，可以用醫(yī)用鑷子將大量脂肪組織剔除，也可以用流動水洗法剔除脂肪組織。
[0035]其中，對所述堿溶液不做限定，所述堿溶液可以為氫氧化鈉、氫氧化鉀或者氫氧化I丐等。
[0036]優(yōu)選的，所述堿溶液為氫氧化鈉溶液。在所述步驟2)中通過氫氧化鈉溶液對初步去脂后的膜組織進行脫細胞處理，不僅能夠破壞細胞結(jié)構(gòu)去除核酸等免疫原性物質(zhì)，還可以有效殺滅病毒、細菌等所有病原體。
[0037]其中，對所述氫氧化鈉溶液的濃度不做限定，對所述步驟2)中的浸泡時間不做限定。
[0038]本發(fā)明的一實施例中，氫氧化鈉溶液的濃度為0.25-1M，所述步驟2)中浸泡時間為
0.5_3h。由于氫氧化鈉的濃度越大，腐蝕性越強，因此，針對不同種類的哺乳動物膜組織所選用的氫氧化鈉的濃度不同，當選用牛源性的膜組織時，氫氧化鈉的濃度相對高一些，這樣能夠提高氫氧化鈉溶液的脫細胞效果;但是，若氫氧化鈉溶液的濃度過大，腐蝕性過強，容易對膜組織的膠原纖維造成損害，若氫氧化鈉的濃度過小，會影響脫細胞效果，從而延長脫細胞時間，效率較低。同樣的，當氫氧化鈉溶液的濃度一定，若浸泡時間過短，會影響動物膜組織的脫細胞效果，若浸泡時間過長，使得動物膜組織處于強堿性環(huán)境下，容易造成膜組織的膠原纖維破損，影響成品質(zhì)量;針對不同的膜組織，選用不同濃度的氫氧化鈉浸泡不同的時間，可以在有效去除病原體，保證產(chǎn)品安全性的同時提高脫細胞效果，例如，采用IM的氫氧化鈉對所述牛心包膜浸泡Ih能夠去除瘋牛病原體，保證產(chǎn)品的安全。
[0039]本發(fā)明的一實施例中，在所述步驟2)之后還包括:用磷酸鹽緩沖液或水對所述脫細胞后的膜組織進行清洗，使得所述脫細胞后的膜組織的PH值為6.0-8.0。
[0040]通過將所述膜組織的內(nèi)部環(huán)境保持在中性，能夠減少氫氧化鈉殘留，從而減少對所述膜組織的膠原纖維的損害。
[0041]本發(fā)明的又一實施例中，用磷酸鹽緩沖液或水對所述脫細胞后的動物膜組織進行清洗具體為:用3份質(zhì)量為所述脫細胞后的膜組織15倍的磷酸鹽緩沖液或水分別對所述脫細胞后的膜組織清洗10_15min。
[0042]其中，對所述步驟3)中有機溶劑不做限定。
[0043]本發(fā)明的一實施例中，所述有機溶劑為異丙醇、丙酮或者乙醇中的一種或者幾種。
[0044]優(yōu)選的，所述有機溶劑為異丙醇。通過試驗發(fā)現(xiàn):在有機溶劑中異丙醇脫脂效果優(yōu)于丙酮和乙醇，且所述異丙醇比丙酮的毒性小。
[0045]其中，對所述步驟3)中的振蕩時間不做限定。由于隨著振蕩時間的不同，脫脂量也不同，在實際操作中，通常脫脂后的膜組織的脂肪含量越小越好。
[0046]本發(fā)明的一實施例中，所述振蕩時間為1.5-4hο在本發(fā)明實施例中，通過異丙醇在振蕩下浸泡膜組織脫脂I.5_4h，所獲得的膜組織的脂肪含量小于等于2%，能夠滿足生物膜在臨床中的安全性要求。
[0047]本發(fā)明的又一實施例中，在所述步驟3)之后還包括:用水對所述脫脂后的動物膜組織進行清洗，使得有機溶劑的殘留量的質(zhì)量濃度小于等于lOOyg/g。
[0048]通過在制備過程中將有機溶劑清洗干凈，能夠保證成品用于臨床時的安全性。
[0049]本發(fā)明的又一實施例中，用水對所述脫脂后的膜組織進行清洗具體為:在振蕩下，用5份質(zhì)量為所述脫脂后的膜組織15倍的水分別對所述脫脂后的膜組織清洗10-15min。
[0050]其中，對所述步驟4)中干燥的具體操作不做限定。所述干燥可以為自然風干，也可以為烘干，也可以為冷凍干燥。
[0051]需要說明的是，由于冷凍干燥過程中材料內(nèi)部水分直接由固態(tài)升華，因此，所獲得的生物膜疏松多孔，從而會影響所述生物膜的力學性能;而在自然風干或烘干條件下干燥，水分從液態(tài)變?yōu)闅鈶B(tài)揮發(fā)，所獲得的生物膜表面發(fā)生收縮，使得生物膜的結(jié)構(gòu)更加致密，從而能夠提高所獲得的生物膜的力學性能，且在體內(nèi)降解速度較慢。
[0052]其中，對所述干燥溫度與干燥時間不做限定。
[0053]本發(fā)明的一實施例中，所述步驟4)中干燥溫度為40_50°C，干燥時間為2.5_4.5h。
[0054]其中，對所述步驟4)中滅菌的具體操作也不做限定。
[0055]本發(fā)明的又一實施例中，滅菌具體為:在25KGy鈷60輻照滅菌。
[0056]另一方面，本發(fā)明實施例提供一種生物膜，采用上述所述的方法制備獲得。
[0057]本發(fā)明實施例提供一種生物膜，該生物膜的脫細胞和脫脂效果較好，膠原纖維的損害較小，保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，應用于臨床中時具有較低的免疫原性，具有較長的體內(nèi)降解時間，且降解產(chǎn)物對人體無害，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0058]其中，對所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度不做限定。
[0059]本發(fā)明的一實施例中，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度小于等于100ng/mg。該生物膜的遺傳物質(zhì)殘留量較小，能夠減小所述生物膜在應用時的排異反應，保證產(chǎn)品臨床應用時的安全性。
[0060]其中，對所述生物膜中的脂肪含量也不做限定，本發(fā)明的一實施例中，所述生物膜的脂肪含量小于等于2%。該生物膜的免疫原性物質(zhì)的含量較低，能夠減少所述生物膜在應用中產(chǎn)生的排異反應。
[0061 ]其中，對所述生物膜的水分含量不做限定。
[0062]本發(fā)明的一實施例中，所述生物膜的水分含量為5-20%。該生物膜具有一定的柔韌性，便于取用;若水分含量過低，則使得生物膜較脆，容易折損，若水分含量過高，則會縮短所述生物膜的保存時間。
[0063]實施例
[0064]下面的實施例用來說明本發(fā)明，并不是想限制本發(fā)明的范圍。以下實施例僅以具體實施過程中各組分的實際添加濃度為例進行說明，實際使用時，各組分的濃度并不對本發(fā)明目的的實現(xiàn)構(gòu)成影響。
[0065]實施例1
[0066]S101、將牛心包表面的脂肪組織剔除，清洗表面異物，獲得初步去脂后的牛心包；
[0067]S102、將初步去脂后的牛心包用5倍量的IM的氫氧化鈉浸泡1.0h，獲得脫細胞后的牛心包；
[0068]S103、用3份質(zhì)量為所述脫細胞后的膜組織15倍的磷酸鹽緩沖液分別對所述脫細胞后的牛心包清洗15min，使得所述牛心包的pH值為6.0 ；
[0069]S104、將步驟S103所獲得的牛心包用5倍量的異丙醇振蕩脫脂3h，獲得脫脂后的牛心包，所述脫脂后的牛心包的脂肪含量為1.5% ;
[0070]S105、用5份質(zhì)量為所述脫脂后的牛心包15倍的水分別對所述脫脂后的牛心包清洗15min，使得所述異丙醇殘留量的質(zhì)量濃度為55yg/g;
[0071]S106、將脫脂后的牛心包的致密層貼附于不銹鋼板平鋪，放入干燥箱中50°C干燥3.5h，得到生物膜，所述生物膜的水分含量為5% ;
[0072]S107、裁切、包裝、采用25KGy的鈷對所述生物膜進行輻照滅菌，獲得成品，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度為40ng/mg。
[0073]結(jié)論:本發(fā)明實施例提供的生物膜的制備方法工藝簡單，成本較小，用堿溶液對牛心包進行脫細胞處理，所述堿溶液毒性較小，脫細胞效果好，對牛心包的膠原纖維損害較小，通過將牛心包的致密層貼附不銹鋼板平鋪，能夠提高致密層的致密程度，并且，在50°C干燥3.5h，能夠進一步提高所述生物膜的機械強度，延長所述生物膜在體內(nèi)的降解時間，所獲得的生物膜保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0074]實施例2
[0075]S101、將豬小腸粘膜表面的脂肪組織剔除，清洗表面異物，獲得初步去脂后的豬小腸粘月吳；
[0076]S102、將初步去脂后的豬小腸粘膜用5倍量的0.25M的氫氧化鈉浸泡0.5h，獲得脫細胞后的豬小腸粘膜；
[0077]S103、用3份質(zhì)量為所述脫細胞后的膜組織15倍的磷酸鹽緩沖液分別對所述脫細胞后的豬小腸粘膜清洗1min，使得豬小腸粘膜的pH值為8.0;
[0078]S104、將步驟S103所獲得的豬小腸粘膜用5倍量的異丙醇振蕩脫脂1.5h，獲得脫脂后的豬小腸粘膜，所述脫脂后的豬小腸粘膜的脂肪含量為1.2%；
[0079]S105、用5份質(zhì)量為所述脫脂后的豬小腸粘膜15倍的水分別對所述脫脂后的豬小腸粘膜清洗lOmin，使得所述異丙醇殘留量的質(zhì)量濃度為80yg/g;
[0080]S106、將脫脂后的豬小腸粘膜的致密層貼附不銹鋼板平鋪，放入干燥箱中40°C干燥2.5h，得到生物膜，所述生物膜的水分含量為20 % ;
[0081]S107、裁切、包裝、采用25KGy的鈷對所述生物膜進行輻照滅菌，獲得成品，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度為80ng/mg。
[0082]結(jié)論:本發(fā)明實施例提供的生物膜的制備方法工藝簡單，成本較小，用堿溶液對豬小腸粘膜進行脫細胞處理，所述堿溶液毒性較小，脫細胞效果好，對豬小腸粘膜的膠原纖維損害較小，采用異丙醇對所述豬小腸粘膜進行脫脂，脫脂效果較好，從而能夠提高成品質(zhì)量;通過將豬小腸粘膜的致密層貼附不銹鋼板平鋪，能夠提高致密層的致密程度，并且，在40°C干燥2.5h，能夠進一步提高所述生物膜的機械強度，延長所述生物膜在體內(nèi)的降解時間，所獲得的生物膜保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0083]實施例3
[0084]S101、將豬腹膜表面的脂肪組織剔除，清洗表面異物，獲得初步去脂后的豬腹膜；
[0085]S102、將初步去脂后的豬腹膜用5倍量的0.5M的氫氧化鈉浸泡3h，獲得脫細胞后的豬腹膜；
[0086]S103、用3份質(zhì)量為所述脫細胞后的豬腹膜15倍的磷酸鹽緩沖液分別對所述脫細胞后的豬腹膜清洗12min，使得豬腹膜的pH值為7.0;
[0087]S104、將步驟S103所獲得的豬腹膜用5倍量的異丙醇振蕩脫脂4h，獲得脫脂后的豬腹膜，所述脫脂后的豬腹膜的脂肪含量為2% ;
[0088]S105、用5份質(zhì)量為所述脫脂后的豬腹膜15倍的水分別對所述脫脂后的豬腹膜清洗12min，使得所述異丙醇殘留量的質(zhì)量濃度為lOOyg/g;
[0089]S106、將脫脂后的豬腹膜的致密層貼附聚乙烯板平鋪，放入干燥箱中45°C干燥4.5h，得到生物膜，所述生物膜的水分含量為8% ;
[0090]S107、裁切、包裝、采用25KGy的鈷對所述生物膜進行輻照滅菌，獲得成品，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度為100ng/mg。
[0091]結(jié)論:本發(fā)明實施例提供的生物膜的制備方法工藝簡單，成本較小，用堿溶液對豬腹膜進行脫細胞處理，所述堿溶液毒性較小，脫細胞效果好，對豬腹膜的膠原纖維損害較小，采用異丙醇對所述豬腹膜進行脫脂，脫脂效果較好，從而能夠提高成品質(zhì)量;通過將豬腹膜的致密層貼附聚乙烯板平鋪，能夠提高致密層的致密程度，并且，在45°C干燥4.5h，能夠進一步提高所述生物膜的機械強度，在引導組織再生過程中，能夠延長所述生物膜在體內(nèi)的降解時間，所獲得的生物膜保留了天然的疏松層和致密層雙層結(jié)構(gòu)，能夠引導組織再生，為引導組織再生膜在臨床上的應用創(chuàng)造了條件。
[0092]以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到變化或替換，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護范圍應以所述權(quán)利要求的保護范圍為準。
【主權(quán)項】
1.一種生物膜的制備方法，其特征在于，包括: 步驟I)剔除哺乳動物膜組織表面的脂肪組織，獲得初步去脂后的膜組織； 步驟2)將初步去脂后的膜組織用堿溶液浸泡進行脫細胞處理，獲得脫細胞后的膜組織； 步驟3)將脫細胞后的膜組織用有機溶劑浸泡，并在振蕩下進行脫脂處理，獲得脫脂后的膜組織； 步驟4)將脫脂后的膜組織平鋪，干燥、滅菌獲得生物膜。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述哺乳動物膜組織選自小腸粘膜、腹膜、心包膜、羊膜或者隔膜中的任意一種。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述堿溶液為氫氧化鈉溶液。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述有機溶劑為異丙醇、丙酮或者乙醇中的一種或者幾種。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中將脫脂后的膜組織平鋪具體為:將所述脫脂后的膜組織的致密層貼附不銹鋼板或者聚乙烯板平鋪。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中干燥溫度為40-50°C，干燥時間為2.5-4.5h。7.—種生物膜，其特征在于，采用權(quán)利要求1-6任一項所述的制備方法制備獲得。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生物膜，其特征在于，所述生物膜的DNA殘留量的質(zhì)量濃度小于等于100ng/mg。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生物膜，其特征在于，所述生物膜的脂肪含量小于等于2%。10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生物膜，其特征在于，所述生物膜的水分含量為5-20%。
【文檔編號】A61L27/50GK105963782SQ201610279677
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年4月28日
【發(fā)明人】劉芮廷, 汪亞柱, 馬波, 郜香黎
【申請人】陜西瑞盛生物科技有限公司