一種利格列汀的純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種二肽基肽酶-4 (DPP- IV )抑制劑的純化方法，尤其涉及一種利格 列汀的純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 利拉列?。↙inagliptin)為德國(guó)勃林格殷格翰制藥公司開(kāi)發(fā)的口服降糖藥物。 化學(xué)命名 ：8-[(3幻-3-氨基-1-哌啶基]-7-(2-丁炔基）-3,7-二氫-3-甲基-1-[(4-甲 基-2-喹唑啉基）甲基]-1H-嘌呤-2, 6-二酮，分子結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]

[0004] 利拉列汀于2011年5月2日經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，商品名為T(mén)radjenta。主要通 過(guò)抑制DPP- IV而控制患者的血糖水平，進(jìn)而用于結(jié)合飲食和運(yùn)動(dòng)來(lái)控制2型糖尿病人的血 糖水平。
[0005] PCT申請(qǐng)W02004018468公開(kāi)了利格列汀的制備方法，反應(yīng)式如下：
[0006]

[0007] 專(zhuān)利申請(qǐng)CN101048409對(duì)上述路線(xiàn)中Boc保護(hù)胺基哌啶進(jìn)行改進(jìn)，采取了其他氨 基保護(hù)基，但是均采用了保護(hù)伯胺的方法，以避免位置異構(gòu)體式II雜質(zhì)的產(chǎn)生，但是在反應(yīng) 過(guò)程中，由于原料氨基保護(hù)不完全或者反應(yīng)過(guò)程中少量脫保護(hù)，仍然產(chǎn)生了部分異構(gòu)體式 II雜質(zhì)，該雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與pKa等其他性質(zhì)同利格列汀極其相似，很難通過(guò)普通結(jié)晶或成鹽方 式從利格列汀粗品中被除去。同時(shí)原料保護(hù)和脫保護(hù)基給工藝帶來(lái)較高的成本，也容易引 起其他副反應(yīng)雜質(zhì)。
[0008]
[0009] W02013098775簡(jiǎn)化了工藝步驟，采用不保護(hù)的氨基哌啶制備利格列汀，大大縮短 了反應(yīng)路線(xiàn)，減少了其他副反應(yīng)，但同時(shí)不可避免的產(chǎn)生了更多的異構(gòu)體式II雜質(zhì)，給純化 工作帶來(lái)了更大挑戰(zhàn)。

[0011] 因此，異構(gòu)體式II雜質(zhì)在利格列汀合成工藝中不可避免的產(chǎn)生，根據(jù)ICH指導(dǎo) 要求（ICH指人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)），藥品一般單個(gè)雜質(zhì)需要嚴(yán)格控制在 0. 1 %以下，而現(xiàn)有技術(shù)中無(wú)有效方法除去利格列汀工藝產(chǎn)生的異構(gòu)體式II雜質(zhì)，特別 采用簡(jiǎn)化了的不保護(hù)氨基哌啶原料路線(xiàn)，產(chǎn)生了更多的異構(gòu)體式II雜質(zhì)除去難度更大， W02013098775最后只能控制在小于0. 15%，這對(duì)藥品雜質(zhì)含量控制還遠(yuǎn)未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。
[0012] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中雜質(zhì)含量過(guò)高的問(wèn)題，本發(fā)明對(duì)利格列汀粗品進(jìn)行后處理純 化方法，達(dá)到ICH要求，異構(gòu)體式II雜質(zhì)均能有效的控制在小于0. 1 %。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 本發(fā)明的目的是提供一種利格列?。ㄊ絀)工藝粗品的純化制備方法，可以有效的 除去異構(gòu)體式II雜質(zhì)，使其符合藥用標(biāo)準(zhǔn)，含量低于〇. 1 %。
[0014] -種利格列汀純化工藝步驟如下：
[0015] 第一步：利格列汀粗品與有機(jī)二酸在有機(jī)溶液中成鹽。
[0016]

[0017] 其中，有機(jī)二酸（式III)中&、1?2相同或者不同的任選自氫、保護(hù)或者不保護(hù)的氨 基；n為0到4,優(yōu)選為0到2 ;所述的有機(jī)二酸包括其立體對(duì)映異構(gòu)體；有機(jī)二酸（式III) 還可以是L-蘋(píng)果酸。
[0018] 所述保護(hù)的氨基為酰胺類(lèi)保護(hù)的氨基；優(yōu)選為Boc保護(hù)的氨基、Cbz保護(hù)的氨基、 乙酰保護(hù)的氨基。有機(jī)二酸還包括L-蘋(píng)果酸、酒石酸、二苯酰基酒石酸。
[0019] 其中所述的有機(jī)二酸（式III)更優(yōu)選為天門(mén)冬氨酸、N-乙酰-L谷氨酸、N-乙 酰-天門(mén)冬氨酸，L-蘋(píng)果酸。
[0020] 其中所述的有機(jī)溶劑選自醇類(lèi)、醚類(lèi)、酯類(lèi)、酮類(lèi)中一種或者幾種；優(yōu)選甲醇、乙 醇、乙酸異丙酯與四氫呋喃中的一種或者幾種。
[0021] 第二步：在有機(jī)溶劑中結(jié)晶分離出利格列汀相應(yīng)的鹽。
[0022] 第三步：將分離出來(lái)的鹽經(jīng)過(guò)堿中和，萃取濃縮得到純的利格列汀，異構(gòu)體式II雜 質(zhì)HPLC小于0? 1%
[0023] 所述的堿為有機(jī)堿或者無(wú)機(jī)堿，有機(jī)堿選自三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶；優(yōu)選三 乙胺；無(wú)機(jī)堿選自碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀；優(yōu)選碳酸鉀、 碳酸鈉。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 下述實(shí)施例用于闡述本發(fā)明，但本發(fā)明不限于所述實(shí)施例。本發(fā)明所用試劑如未 特別說(shuō)明，均為市售購(gòu)得直接使用。本發(fā)明所用術(shù)語(yǔ)中，Boc保護(hù)基表示叔丁氧羰基；Cbz保 護(hù)基表示芐氧羰基
[0025] HPLC 分析條件，色譜柱：Phenomenex luna C18 (2) 100A 4. 6mmX 250mm, 5 y m，流 速：1. OmL/min，波長(zhǎng)：225nm，柱溫：30°C，流動(dòng)相A :0. 02mol/L KH2P04溶液，磷酸調(diào)節(jié)pH至 3. 5,該溶液與甲醇900:100 (V/V)混合，流動(dòng)相B :乙腈：水：甲醇=700:150:150 (V/V)。
[0026] 梯度程序如下表：

[0028] 以初始流動(dòng)相溶解樣品。
[0029] 實(shí)施例1 :
[0030] 利格列汀粗品的制備：
[0031] 在500ml反應(yīng)瓶中，加入10克中間體IV (溶于100ml N，N-二甲基甲酰胺中），加 入碳酸鉀9. 4克和氨基哌啶二鹽酸鹽5. 72克，反應(yīng)加熱到90°C反應(yīng)6小時(shí)，TLC監(jiān)控反應(yīng) 結(jié)束，自然冷卻到室溫，加入l〇〇ml二氯甲烷，過(guò)濾除去碳酸鉀，濾液用100ml水萃取分液， 二氯甲烷l〇〇ml再萃取兩次，合并有機(jī)相，濃縮，得利格列汀粗品8. 2克，HPCL = 98. 7%， 異構(gòu)體雜質(zhì)式II雜質(zhì)HPLC = 0. 72%。
[0032] 實(shí)施例2 :
[0033] 利格列汀粗品的制備：

[0035] 在500ml反應(yīng)瓶中，加入4. 53克中間體IV (溶于50ml N，N-二甲基甲酰胺中）， 加入碳酸鉀2. 76克和Boc保護(hù)的氨基哌啶2. 0克，反應(yīng)加熱到80°C反應(yīng)10小時(shí)，TLC監(jiān)控 反應(yīng)結(jié)束，自然冷卻到室溫，加入l〇〇ml二氯甲烷，過(guò)濾除去碳酸鉀，濾液用100ml水萃取分 液，二氯甲烷1001再萃取兩次，合并有機(jī)相，濃縮，粗品溶于l〇〇ml二氯甲烷中，加入三氟乙 酸3. 52克，室溫?cái)嚢柘旅摫Ｗo(hù)，5小時(shí)，常溫濃縮過(guò)量的三氟乙酸和溶劑，粗品溶于50ml二 氯甲烷，分別用10%碳酸氫鈉水50ml萃取分液三次，有機(jī)相濃縮得利格列汀粗品9. 44克， HPCL = 99. 1，異構(gòu)體雜質(zhì)式II雜質(zhì)HPLC = 0. 35%。
[0036] 實(shí)施例3
[0037] 利格列汀的純化
[0038] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升95%乙醇中，回流狀態(tài)下加入 2. 0克N-乙酰-L谷氨酸溶于20毫升95%乙醇溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小時(shí)后 過(guò)濾，10ml乙醇洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的N-乙酰-L-谷氨酸鹽6. 35克，HPLC = 99. 83 %，異構(gòu)體雜質(zhì)式 II HPLC = 0.06 %。
[0039] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸鉀水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 86%，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 06%。
[0040] 實(shí)施例4
[0041] 利格列汀的純化
[0042] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加入 1. 90克N-乙酰-L-天門(mén)冬胺酸溶于20毫升甲醇溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小時(shí) 后過(guò)濾，l〇ml甲醇洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的N-乙酰-L-天門(mén)冬氨酸鹽6. 35 克。冊(cè)1^： = 99.79%，異構(gòu)體雜質(zhì)式11冊(cè)1^： = 0.06%。
[0043] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸氫鉀水溶液50毫升，室溫?cái)嚢? 小時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 83%，異構(gòu)體雜 質(zhì)式II HPLC = 0? 06%。
[0044] 實(shí)施例5
[0045] 利格列汀的純化
[0046] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升甲醇中，回流狀態(tài)下加入1. 41 克L-蘋(píng)果酸溶于20乙酸叔丁酯溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌1小時(shí)后過(guò)濾，10ml甲醇 洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的L-蘋(píng)果酸鹽4. 85克。HPLC = 99. 71 %，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 04%。
[0047] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入25%氫氧化鈉水溶液50毫升，室溫?cái)嚢? 小時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 79%，異構(gòu)體雜 質(zhì)（式II )HPLC = 0? 04%。
[0048] 實(shí)施例6
[0049] 利格列汀的純化
[0050] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升丁酮中，回流狀態(tài)下加入1. 18 克丁二酸溶于20毫升丁酮溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌1小時(shí)后過(guò)濾，10ml 丁酮洗滌， 50°C減壓烘干得白色利格列汀的丁二酸鹽4. 85克。HPLC = 99. 62%，異構(gòu)體雜質(zhì)式II HPLC =0. 10% 〇
[0051] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入三乙胺10毫升和水50毫升，室溫?cái)嚢? 小時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 71 %，異構(gòu)體雜 質(zhì)（式II )HPLC = 0? 10%。
[0052] 實(shí)施例7
[0053] 利格列汀的純化
[0054] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加入 1. 33克L-天門(mén)冬胺酸溶于20毫升四氫呋喃溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌1. 5小時(shí)后 過(guò)濾，l〇ml四氫呋喃洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的L-天門(mén)冬氨酸鹽5. 82克。HPLC = 99. 69 %，異構(gòu)體雜質(zhì)式 II HPLC = 0.08 %。
[0055] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸鉀水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 79%，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 08%。
[0056] 實(shí)施例8
[0057] 利格列汀的純化
[0058] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加入 1. 50克2, 3-二胺丁二酸，溶于20毫升四氫呋喃溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌1. 5小時(shí) 后過(guò)濾，l〇ml四氫呋喃洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的2, 3-二胺丁二酸鹽5. 66克。 HPLC = 99. 59%，異構(gòu)體雜質(zhì)式 II HPLC = 0? 09%。
[0059] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入10毫升吡啶和水50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 69%，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 09%。
[0060] 實(shí)施例9
[0061] 利格列汀的純化
[0062] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加入 2. 33克N-boc-L-天門(mén)冬胺酸溶于20毫升四氫呋喃溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小 時(shí)后過(guò)濾，l〇ml四氫呋喃洗滌，60°C減壓烘干得白色利格列汀的N-boc-L-天門(mén)冬氨酸鹽 6.13克。冊(cè)1^： = 99.81%，異構(gòu)體雜質(zhì)式11冊(cè)1^： = 0.06%。
[0063] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸鉀水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 88%，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 06%。
[0064] 實(shí)施例10
[0065] 利格列汀的純化
[0066] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加入 2. 7克N-CBz-L-天門(mén)冬胺酸溶于20毫升四氫呋喃溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌3小時(shí) 后過(guò)濾，l〇ml四氫呋喃洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的N-CBz-L-天門(mén)冬氨酸鹽6. 08 克。冊(cè)1^： = 99.69%，異構(gòu)體雜質(zhì)式11冊(cè)1^： = 0.07%。
[0067] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸鈉水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 75%，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 07%。
[0068] 實(shí)施例11
[0069] 利格列汀的純化
[0070] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升乙醇中，回流狀態(tài)下加入2. 1克 葵二酸溶于20毫升乙醇溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小時(shí)后過(guò)濾，10ml乙醇洗滌， 50°C減壓烘干得白色利格列汀的葵二酸鹽5. 9克。HPLC = 99. 48%，異構(gòu)體雜質(zhì)式II HPLC =0. 10%。將上述鹽置于60毫升二氯甲烷中，加入25%鉀酸鈉水溶液60毫升，室溫?cái)嚢?2小時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 60%，異構(gòu)體 雜質(zhì)式II HPLC = 0? 10%。
[0071] 實(shí)施例11
[0072] 利格列汀的純化
[0073] 利格列汀粗品（實(shí)施一制備）4. 72克溶于50毫升四氫呋喃中，回流狀態(tài)下加 入1. 5克DL-谷氨酸溶于25毫升四氫呋喃溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小時(shí)后過(guò) 濾，l〇ml四氫呋喃洗滌，55°C減壓烘干得白色利格列汀的DL-谷氨酸鹽5. 45克。HPLC = 99. 79 %，異構(gòu)體雜質(zhì)式 II HPLC = 0.07 %。
[0074] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%鉀酸鈉水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?. 5 小時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 86%，異構(gòu)體雜 質(zhì)式II HPLC = 0? 07%。
[0075] 實(shí)施例12
[0076] 利格列汀的純化
[0077] 利格列汀粗品（實(shí)施二制備）2. 36克溶于25毫升甲醇中，回流狀態(tài)下加入1. 0克 N-乙酰-L谷氨酸溶于10毫升甲醇溶液，加畢，自然降溫至室溫，攪拌2小時(shí)后過(guò)濾，10ml甲 醇洗滌，50°C減壓烘干得白色利格列汀的N-乙酰-L-谷氨酸鹽3. 07克。HPLC = 99. 79%， 異構(gòu)體雜質(zhì)式II HPLC = 0. 03%。
[0078] 將上述鹽置于50毫升二氯甲烷中，加入30%碳酸鉀水溶液50毫升，室溫?cái)嚢?小 時(shí)，游離澄清，分液萃取，有機(jī)相濃縮得純的利格列汀游離堿。HPLC = 99. 81 %，異構(gòu)體雜質(zhì) 式II HPLC = 0? 03%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種利格列?。ㄊ絀 )的純化方法，其特征在于，將利格列?。ㄊ絀 )的粗產(chǎn)物與有 機(jī)二酸（式III)在有機(jī)溶劑中成鹽，結(jié)晶分離產(chǎn)生的鹽，所述的鹽經(jīng)過(guò)堿中和，萃取后濃縮 得到純化的利格列汀（式I )，其雜質(zhì)（式II )低于〇· 1% ;其中，有機(jī)二酸（式III)中&、1?2可以相同或者不同的任選自氫、保護(hù)或者不保護(hù)的氨 基；η為0到4 ;所述的有機(jī)二酸包括其立體對(duì)映異構(gòu)體；有機(jī)二酸（式III)還可以是L-蘋(píng) 果酉支。2. 如權(quán)利要求1所述的純化方法，保護(hù)的氨基為酰胺類(lèi)保護(hù)的氨基，優(yōu)選為Boc保護(hù)的 氨基、Cbz保護(hù)的氨基、乙酰保護(hù)的氨基。3. 如權(quán)利要求1所述的純化方法，其中有機(jī)二酸（式III )n為0到2。4. 如權(quán)利要求1或者3所述的純化方法，有機(jī)二酸（式III)為天門(mén)冬氨酸、N-乙酰-L 谷氨酸、N-乙酰-天門(mén)冬氨酸，L-蘋(píng)果酸。5. 如權(quán)利要求1中所述的純化方法，所述的有機(jī)溶劑選自醇類(lèi)、醚類(lèi)、酯類(lèi)、酮類(lèi)中一 種或者幾種；優(yōu)選甲醇、乙醇、乙酸異丙酯與四氫呋喃中的一種或者幾種。6. 如權(quán)利要求1中所述的純化方法，所述的堿為有機(jī)堿或者無(wú)機(jī)堿，所述的有機(jī)堿為 三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶，更優(yōu)選為三乙胺，所述的無(wú)機(jī)堿為碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、 碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀，更為優(yōu)選的為碳酸鉀、碳酸鈉。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供一種利格列汀的純化方法。其步驟包括將利格列汀粗品與有機(jī)二酸在溶劑中成鹽，分離結(jié)晶產(chǎn)生的鹽，經(jīng)堿游離萃取濃縮得到純化的利格列汀，其單雜HPLC小于0.1%。
【IPC分類(lèi)】C07D473/04
【公開(kāi)號(hào)】CN105712995
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410735724
【發(fā)明人】徐苗煥, 黃悅
【申請(qǐng)人】浙江京新藥業(yè)股份有限公司, 上海京新生物醫(yī)藥有限公司, 上虞京新藥業(yè)有限公司