本發(fā)明屬于藥物中間體合成，具體涉及一種3’-甲氧基核苷類似物的制備方法。

背景技術(shù)：

1、面對新型冠狀病毒流行，疫苗開發(fā)的速度決定了救生的速度。因此，具有快速生產(chǎn)過程的mrna疫苗在冠狀病毒疫苗的開發(fā)中將發(fā)揮重要作用。mrna疫苗具有高效、低副反應和獲取成本低等顯著優(yōu)勢，使其在各種傳染病和癌癥臨床前和臨床試驗中廣泛應用。3′-甲氧基鳥苷被廣泛應用于合成鏈終止二核苷酸mrna帽類似物，也有報導其被用作為抗-反向帽類似物(anti-reverse?cap?analog,arca)，有效促進轉(zhuǎn)錄物翻譯成蛋白質(zhì)。

2、本發(fā)明涉及的是3’-甲氧基核苷類似物的相關(guān)合成，根據(jù)現(xiàn)有的文獻及專利報道，如haixin?ding,zhizhong?ruan,peihao?kou等人在“total?synthesis?of?mycalisine?b”中提供的合成方法，以四乙酰核糖為原料，經(jīng)過三步反應以及柱層析得到中間體3和中間體4，將中間體3回收水解循環(huán)利用，由中間體4通過甲基化、脫保護、乙?；皩铀夥磻?，并通過一系列的柱層析工藝，最終得到目標產(chǎn)物化合物8。

3、

4、該方法一方面甲基化用到貴金屬氧化銀，比較昂貴，文獻中僅為小試反應，氧化銀易沉積不利于工業(yè)化放大生產(chǎn)，另一方面需要通過回收中間體3來提高收率，再者上述步驟中需要經(jīng)過多次柱層析工藝來進行純化，增加了生產(chǎn)成本。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種新型3’-甲氧基核糖核苷的制備方法。該方法通過高選擇性的離去化合物v的3’-位保護基團，然后原位上甲基從而較簡便的獲得了關(guān)鍵的甲基化中間體iv，之后中間體iv經(jīng)由脫保護、乙?；皩铀獾确磻咝实墨@得3’-甲氧基核糖核苷類似物i。

2、本發(fā)明提供一種結(jié)構(gòu)如式(i)所示的3’-甲氧基核糖核苷類似物的制備方法；

3、

4、所述的式i中的b為腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶或2-氨基腺嘌呤。

5、根據(jù)本發(fā)明，具體制備方法包括以下步驟：

6、

7、1、化合物v與甲基化試劑在無機堿的作用下反應生成化合物iv；

8、2、化合物iv經(jīng)脫保護及乙?；磻诲伔ㄉ苫衔飅ii

9、3、化合物iii與核苷的堿基對接，生成化合物ii

10、4、化合物ii經(jīng)水解反應生成化合物i

11、作為一種具體的實施方式，步驟1的反應溶劑選自dmf、dmso、nmp、thf、dcm的一種或兩種以上，優(yōu)選dmf；

12、作為一種具體的實施方式，步驟1的甲基化試劑選自硫酸二甲酯、碘甲烷、磷酸三甲酯、碳酸二甲酯中的一種或多種，優(yōu)選硫酸二甲酯；

13、作為一種具體的實施方式，步驟1的無機堿選自鈉氫、氫氧化鉀、氫氧化鈉中的一種或多種，優(yōu)選氫氧化鈉；

14、作為一種具體的實施方式，步驟1)中的反應溫度為-78～50℃，優(yōu)選-30～25℃；

15、作為一種具體的實施方式，步驟1)中化合物v：無機堿：甲基化試劑的摩爾比為1：1：1～1：5：10，優(yōu)選1：2：2～1:5:10；

16、作為一種具體的實施方式，步驟1)的后處理方式為：反應結(jié)束后加入乙酸乙酯和純化水洗滌，收集有機相。有機相減壓濃縮至干，得到淡黃色油狀中間體d00粗品，d00經(jīng)乙酸乙酯和正己烷混合溶劑精制得純品。

17、作為一種具體的實施方式，步驟2)的反應溶劑為乙酸，脫保護試劑選自硫酸、鹽酸、磷酸中的一種，優(yōu)選硫酸；所述乙酰化試劑選自乙酸酐、乙酰氯中的一種，優(yōu)選乙酸酐；

18、作為一種具體的實施方式，步驟2)的反應溫度為-20℃～40℃，優(yōu)選0-25℃；

19、作為一種具體的實施方式，步驟2)的后處理方式為：反應結(jié)束后用飽和氯化鈉溶液淬滅反應液，用乙酸乙酯萃取。有機相依次用純化水、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液洗滌。有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾餅用乙酸乙酯淋洗。濾液減壓濃縮至干，得到油狀中間體iii，直接投入下一步。

20、作為一種具體的實施方式，步驟3)的堿基b選自腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶、2-氨基腺嘌呤中的一種；

21、作為一種具體的實施方式，步驟3)的加料順序為：堿基先與bsa反應，然后加入化合物iii及路易斯酸；

22、作為一種具體的實施方式，步驟3)的反應溶劑選自dcm、acn、ea、thf、甲苯、dmf中的一種或兩種以上，優(yōu)選dcm、acn、thf、甲苯中的一種；

23、作為一種具體的實施方式，步驟3)的路易斯酸選自tmsotf、sncl4、liotf中的一種，優(yōu)選tmsotf；

24、作為一種具體的實施方式，步驟3)的堿基與bsa的反應溫度為25℃-160℃，優(yōu)選50-130℃；所述加入路易斯酸后的反應溫度為-20～160℃，優(yōu)選0-130℃；

25、作為一種具體的實施方式，步驟3)中的化合物iii、堿基、bsa及路易斯酸的投料摩爾比為1：1：3：0.2～1：5：12：8，優(yōu)選1：1：3：4.5～1：3：8：8；

26、作為一種具體的實施方式，步驟3)的后處理方式為：反應結(jié)束后降溫，緩慢滴加飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應。然后過濾，將濾餅加入二氯甲烷中攪拌，過濾，濾液依次用純化水、飽和碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌，收集有機相。減壓濃縮至干，得到中間體ii，直接投入下一步。

27、作為一種具體的實施方式，步驟4)的水解反應在堿性試劑中進行，所述堿性試劑選自氨的甲醇溶液、碳酸鉀、氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、濃氨水中的一種，優(yōu)選氨的甲醇溶液中的一種；

28、作為一種具體的實施方式，步驟4)的水解反應反應溶劑選自thf、甲醇、乙醇、異丙醇中的一種或兩種以上，優(yōu)選甲醇；

29、作為一種具體的實施方式，步驟4)的后處理方式為：反應結(jié)束后減壓濃縮至干，依次用15倍體積的醇和純化水各精制一次，固體于真空干燥，得化合物i；所述醇溶劑選自甲醇、乙醇和異丙醇中的一種或兩種以上。

30、本發(fā)明的有益效果為，通過選擇性的脫去3’-位保護基，進而原位上甲基，縮短反應步驟，并使得反應純度大大提高，避免了異構(gòu)體的產(chǎn)生，從而降低了純化壓力?？偟膩碚f，該方法相較于現(xiàn)有技術(shù)，其原料成本低，反應步驟短，避免使用鈉氫等危險試劑，可操作性強，且收率遠高于現(xiàn)有技術(shù)中的收率。

技術(shù)特征：

1.一種式i所示的3’-甲氧基核糖核苷類似物的制備方法，其特征在于：所述的方法包括將式v所示的化合物與甲基化試劑在無機堿的作用下反應得到式iv所示的化合物，

2.一種式i所示的3’-甲氧基核糖核苷類似物的制備方法，其特征在于：所述的方法包括將式v所示的化合物與甲基化試劑在無機堿的作用下反應得到式iv所示的化合物，所述的式i所示的化合物中的b為腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶、2-氨基腺嘌呤，

3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的甲基化試劑選自硫酸二甲酯、碘甲烷、磷酸三甲酯、碳酸二甲酯中的一種或多種。

4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的無機堿選自鈉氫、氫氧化鉀、氫氧化鈉中的一種或多種。

5.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：反應溶劑選自dmf、dmso、nmp、thf、dcm的一種或任意兩種以上。

6.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的式v所示的化合物與無機堿、甲基化試劑的摩爾比為1：1：1～1：5：10，優(yōu)選1：2：2～1:5:10。

7.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：反應溫度為-78～50℃，優(yōu)選-30～25℃。

8.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：還包括將化合物iv在脫保護試劑和乙?；噭┳饔孟路磻苫衔飅ii，

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：所述脫保護試劑選自硫酸、鹽酸、磷酸中的一種或多種，優(yōu)選硫酸。

10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：所述乙酰化試劑選自乙酸酐、乙酰氯中的一種，優(yōu)選乙酸酐；

11.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：反應溶劑為乙酸。

12.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：反應溫度為-20℃～40℃，優(yōu)選0-25℃；

13.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：還包括將化合物iii與核苷的堿基b對接，生成化合物ii，

14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的堿基b先與bsa反應，然后加入化合物iii及路易斯酸。

15.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的堿基b選自腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶、2-氨基腺嘌呤中的一種。

16.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的路易斯酸選自tmsotf、sncl4、liotf中的一種，優(yōu)選tmsotf。

17.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的反應溶劑選自dcm、acn、ea、thf、甲苯、dmf中的一種或兩種以上，優(yōu)選dcm、acn、thf、甲苯中的一種。

18.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的堿基b與bsa的反應溫度為25℃-160℃，優(yōu)選50-130℃；所述加入路易斯酸后的反應溫度為-20～160℃，優(yōu)選0-130℃。

19.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于：所述的化合物iii、堿基、bsa及路易斯酸的投料摩爾比為1：1：3：0.2～1：5：12：8，優(yōu)選1：1：3：4.5～1：3：8：8。

20.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的方法還包括

21.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于：所述的反應在堿性試劑中進行，所述堿性試劑選自氨的甲醇溶液、碳酸鉀、氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、濃氨水中的一種，優(yōu)選氨的甲醇溶液中的一種。

22.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于：所述反應的反應溶劑選自thf、甲醇、乙醇、異丙醇中的一種或兩種以上，優(yōu)選甲醇。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種3’?甲氧基核苷類似物的制備方法，所述方法通過高選擇性的離去化合物V的3’?位保護基團，然后原位上甲基從而較簡便的獲得了關(guān)鍵的甲基化中間體IV，之后中間體IV經(jīng)由脫保護、乙?；皩铀獾确磻咝实墨@得3’?甲氧基核糖核苷類似物I。通過選擇性的脫去3’?位保護基，進而原位上甲基，縮短反應步驟，并使得反應純度大大提高，避免了異構(gòu)體的產(chǎn)生，從而降低了純化壓力。且原料成本低，反應步驟短，避免使用鈉氫等危險試劑，可操作性強，且收率遠高于現(xiàn)有技術(shù)中的收率。

技術(shù)研發(fā)人員：單環(huán)宇,葉凱,宋坤濤,包建軍,章旭超
受保護的技術(shù)使用者：杭州中美華東制藥有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19